显微镜的结构及油镜的使用

实验一显微镜的结构及油镜的使用

一、实验目的

1.学习并掌握普通光学显微镜的构造和油镜的使用技术及维护的基本知识

2.初步认识细菌的形态特征

二、实验原理

显微镜的构造

1.光学部分:目镜、物镜、照明装置(聚光镜、虹彩光圈、反光镜等)。它使检视物放大,生成

物象。

2.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节

器等部件.它起着支持调节固定等作用.

显微镜的放大倍数和分辨率

1.放大倍数：物镜放大倍数×目镜放大倍数

2.显微镜的分辨率:是表示显微镜辨析两点之间距离的能力。

可用公式表示为： D=λ/2N.A=λ/2n·sin(α/2 )

式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。

λ：可见光的波长（平均0.55m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率。

α：镜口角（即入射角）。

D值越小，分辨率越高，看到的物象越清晰。

油镜使用的原理

油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的

密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其

折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。

根据公式D=λ/2n·sin(α/2 ) ，增大分母，使得D值减小，分辨率增大。

三、实验材料

金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌等示范片

四、实验步骤（油镜的使用）

1.低倍镜观察：粗调、细调。依次再进行中倍、高倍观察

2.油镜观察：高倍镜下找到清晰的物象后，提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油

镜镜头浸入香柏油中，细调至看清物象为止。

3.换片：另换新片，必须从第一条开始操作。

4.用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少

量二甲苯擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原。

注意：油镜使用完毕后一定要用二甲苯擦拭镜头

五、试验结果

金黄色葡萄球菌100X

枯草芽孢杆菌（手绘）100X

六、实验讨论

1.使用油镜时，为什么必须用香柏油？

当使用普通高倍或低倍物镜时，透镜的孔径较大，所以射入物镜的光线因为折射而损失的比率不高，对观察影响不大。但油镜由于需要放大更高的倍数，其镜孔径很小，射入的光线很少，视野不明亮，物象模糊不清。加油的目的就是让油镜与载物玻片之间加一层与玻璃折

光率相近的香柏油介质，使通过的光线不产生或少产生折射，增加进入透镜的光线，使视野

亮度增加，能更清楚的观察物象。

2.镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？

因为低倍镜下视野较大，易于发现目标和确定检查的位置，而如果直接用高倍镜观察，因其视野较小，不易找到观察的目标，浪费时间。用低倍镜方便调焦,而且物镜离样品比较远,不会碰坏物镜或者样品。。

七、显微镜保养和使用中的注意事项

1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。

2.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度

3.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。

4.拿显微镜时，一定要右手拿镜臂，左手托镜座，不可单手拿，更不可倾斜拿。

5.显微镜应存放在阴凉干燥处，以免镜片滋生霉菌而腐蚀镜片。

八、实验小结

本次实验让我受益良多，首先，清晰观察到了球菌和杆菌的不同形态以及排列方式，将书本理论知识结合实际，更好的理解；再者，这次实验使用到了油镜，觉得很新奇，使用过程中的注意事项也很重要，先在低倍镜下观察。同时，实验室的整洁与卫生更是需要好好保持，一个干净整洁的环境有利于实验标本的维护。