切片制作过程
中学显微镜切片制作步骤
中学显微镜切片制作步骤
显微镜切片制作是生物学上非常重要的技术之一。
它是以细胞及其内部构造为
研究内容,包括以细胞、体细胞、器官、器官组织等为研究对象的方法。
显微镜切片是一种分析细胞的有效技术,能够实现对细胞的精准解剖,为细胞的研究提供必要的依据。
因此,制作显微镜切片是许多生物学课题的重要步骤。
显微镜切片制作步骤可以分为获取、切片和观察三步。
首先,准备研究对象,如募集活体组织样品或实物,接着将样品进行预处理,
如瓦特脱水、置于冰淇淋中深度冷冻或通过腔内微量洗。
然后,用凝膜切片机将样品均匀切成不同厚度的切片,然后将它们放置在凝膜状的物质上,并用专用的媒质冲洗一直最终完成。
最后,将制得的显微镜切片放置在显微镜片培养基底上进行观察,并使用低倍、高倍不同倍数镜头观察,便可以得到不同细胞层次和细节构造情况,以此探讨细胞及其内部构造。
与传统细胞观察方法相比,显微镜切片制作技术更具有成本效益,操作简单,可以为细胞的研究提供更多有效的依据。
显微镜切片的制作技术不仅是生物研究的基础,也给生物医学研究打开了全新
的大门,为分析蛋白质组、细胞结构等提供了重要的依据,有效的提升了生物学研究的质量。
尽管显微镜切片制作技术过程繁琐,但只要按照步骤认真操作,一定可以获得满意的效果。
石蜡切片的主要制备程序
石蜡切片的主要制备程序
石蜡切片的主要制备程序可以概括为以下几个步骤:
1. 准备样品:选择需要切片的样品,如组织样本、细胞样品等,并采取相应的固定、处理和染色等预处理步骤,以保证样品的稳定性、可观察性和对比度。
2. 材料准备:准备好所需的石蜡、切片盒、切片刀、载玻片等材料,并进行清洁和消毒处理,以避免污染和交叉感染。
3. 石蜡浸透:将处理好的样品转移到石蜡中进行浸透。
首先将样品置于温度逐渐升高的浸透剂(如正己烷)中,以去除组织内水分和其他溶质,然后置于石蜡中进行浸透。
4. 切片制备:将石蜡浸透的样品固定于切片盒中,将石蜡块剪碎成适当大小,并放置在切片刀的刀脊上。
调整切片机参数(如温度、角度、速度等),并逐个切割出薄片。
5. 切片贴片:将切好的薄片浮于温水中或使用其他方法,如电离子器、热平台等,以使切片展平并附着于载玻片上。
6. 干燥固定:将切片连同载玻片一起进行干燥固定处理,以去除水分并保持切片的形态稳定。
7. 切片染色:根据实验需求,对切片进行适当的染色处理(如组织学染色、免疫组化染色等),以增强样品的可视化效果和区分感兴趣的结构。
8. 封片封装:将切片封装至封片盖玻片上,使用透明化导电胶或其他封片剂固定切片,并尽量排除气泡、保证封片质量。
9. 切片质控:对制备好的切片进行质量控制,使用显微镜观察和评估切片的清晰度、结构完整性、染色效果等。
最后,制备完成的石蜡切片可以用于显微镜观察、组织形态分析、病理学研究等应用。
需要注意的是,在整个制备过程中,应遵循标准实验操作规程、注意安全,以及依据实验要求进行相应的优化和调整。
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤1. 采集组织样本在进行组织病理切片前,首先需要采集患者的组织样本。
通常,医生会通过手术或活检等方式获得组织样本。
为了确保样本的准确性和完整性,医生会根据患者的情况进行选择。
2. 固定组织样本采集到的组织样本需要进行固定处理,以保持其形态结构和细胞组织的完整性。
常用的固定剂包括福尔马林等。
固定处理的时间和方法要根据不同的组织类型和病理分析的需要进行调整。
3. 预处理组织样本在进行切片之前,需要对固定的组织样本进行预处理。
这包括去除固定剂、脱水、清洗和浸泡等步骤。
通过这些预处理,可以将组织样本从固定剂中解除,并使其逐渐适应后续处理的要求。
4. 切片制备切片制备是组织病理学中非常重要的步骤。
在这一步骤中,医生会将预处理的组织样本切割成非常薄的切片。
常用的切片工具是显微切片机。
切片的厚度一般在4-6微米之间,以确保组织结构的清晰可见。
5. 染色切片制备完成后,需要对切片进行染色,以突显组织结构和细胞组分。
常用的染色方法包括血液学染色、组织学染色和免疫组织化学染色等。
不同的染色方法可以提供不同的信息,有助于医生做出准确的病理诊断。
6. 镜检染色完成后,医生会使用显微镜对染色的切片进行观察和分析。
通过观察组织结构、细胞形态和染色结果,医生可以了解组织的病理变化,并做出相应的诊断。
镜检是组织病理学中最核心的步骤之一。
7. 病理报告根据对切片的镜检结果,医生会撰写病理报告。
病理报告中包括对组织病变的描述、病变类型的确定以及可能的诊断建议等内容。
病理报告是医生向临床医生提供病理诊断的重要依据,也是指导治疗和预后评估的重要参考。
通过以上的步骤,组织病理切片可以提供丰富的病理学信息,为医生做出准确的诊断和治疗决策提供重要依据。
这一过程需要医生的精确操作和细致观察,以确保结果的准确性和可靠性。
对于患者来说,组织病理切片是了解疾病发展和制定个体化治疗方案的重要工具。
病理切片制作过程及注意事项
病理切片制作过程及注意事项简介病理切片是病理学中非常重要的工具,它能够帮助医生做出准确的诊断。
本文将详细介绍病理切片的制作过程以及需要注意的事项。
制作过程步骤1:组织取材•选择适当的组织进行切片制作;•确保组织样本取材的准确性和代表性。
步骤2:固定组织•使用合适的固定剂固定组织样本,如福尔马林;•确保固定时间和固定剂的浓度符合要求。
步骤3:脱水与清洁•将固定的组织放入酒精溶液中进行脱水处理;•清洁组织以去除固定剂和杂质。
步骤4:组织包埋•将脱水的组织置于熔蜡中进行包埋;•确保组织完全包裹,避免产生气泡。
步骤5:切片制作•使用专用的切片机将包埋的组织切成薄片;•控制切片的厚度和形状,确保质量。
步骤6:染色•使用合适的染色剂对切片进行染色,如血液样本使用血液染色剂;•控制染色时间和染色剂的浓度,确保染色效果。
步骤7:封片•将切片放在载片上,使用专用胶水将其封闭;•确保切片和载片的牢固性。
步骤8:质量控制•检查切片的质量,包括切片厚度、染色效果等;•确保切片符合病理学的要求。
注意事项注意事项1:安全•在病理切片制作过程中,要注意使用个人防护装备,如手套、口罩等;•避免接触有害化学物质,如福尔马林。
注意事项2:操作规范•按照病理切片制作的标准操作流程进行,确保结果的准确性;•遵守操作规范,减少操作失误的风险。
注意事项3:仪器维护•定期对切片机等相关仪器进行维护保养;•确保仪器的正常工作状态,减少故障的风险。
注意事项4:质量控制•对制作的病理切片进行质量控制,如切片的厚度、染色的均匀性等;•确保制作出的病理切片符合质量要求。
注意事项5:记录保存•对制作的病理切片进行记录,包括样本信息、制作过程、染色方法等;•妥善保存记录,方便后续查阅和追溯。
结论病理切片的制作过程需要经过多个步骤,每个步骤都需要严格操作和控制。
同时,要注意安全、遵守操作规范、定期维护仪器,并进行质量控制和记录保存。
只有这样,才能制作出高质量的病理切片,为病理学的研究和诊断提供可靠的依据。
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:组织病理学是一门研究疾病的科学,通过对组织和细胞的形态结构进行分析,可以帮助医生做出正确的诊断和治疗方案。
而组织病理切片是组织病理学的重要步骤之一,通过切割组织标本并染色,可以观察组织和细胞的形态结构,进而帮助医生做出诊断。
组织病理切片的步骤是一个繁琐而精细的过程,需要经过多个环节的处理才能得到准确的结果。
下面我们就来了解一下组织病理切片的具体步骤。
1. 标本获取:组织病理学的切片首先需要获得病理标本,这通常通过组织活检或手术取材来完成。
医生会根据患者的病情和需要进行相应的标本获取。
2. 组织固定:标本获取后,需要立即将组织标本放入10%的甲醛或其他固定剂中进行固定,以保持组织形态的完整性。
固定后的组织标本可以长期保存,并且能够在病理切片的过程中保持组织的形态结构。
3. 组织处理:固定后的组织标本需要进行脱水、清洁和浸蜡等处理,以使组织标本透明并且易于切割。
这一步通常需要用到甲醇和乙醇等有机溶剂,以及蜡浸渍处理。
4. 组织包埋:处理完的组织标本需要放入蜡液中进行包埋,以便于切割。
在包埋过程中,需要正确定位组织标本,并使其固定在蜡块中。
5. 组织切割:包埋后的组织标本需要用微切片机切成薄片,厚度通常在3-5微米左右。
切片时需要保持切割的准确性和统一性,以便后续的染色和观察。
6. 组织染色:切割后的组织标本需要进行染色,以显示组织和细胞的形态结构。
常用的染色方法包括赖氏染色、简单染色和特异性染色等。
7. 组织固定:染色后的组织切片需要进行固定,以保持染色的效果。
通常用乙醇和甲醇进行脱水和抗褪色处理。
8. 组织观察:固定后的组织切片可以放入显微镜下进行观察,医生可以通过观察组织和细胞的形态结构来做出诊断。
组织病理切片是一项非常重要的组织病理学技术,通过对组织标本的切割和染色,可以帮助医生做出准确的诊断,并为治疗提供参考。
希望通过以上介绍,您对组织病理切片的步骤有更深入的了解。
动物切片制作方法
动物切片制作方法一、准备工作。
1.1 工具准备。
首先呢,咱得把工具准备齐全喽。
这就像厨师做菜得先备好锅碗瓢盆一样。
需要用到的有锋利的切片刀,这刀可得小心着用,那可是咱制作切片的“得力助手”。
还有镊子,就像咱的小夹子似的,用来夹取切片。
载玻片和盖玻片也不能少,这就好比是切片的“小床”和“小被子”。
另外,固定液、染色剂等化学试剂也得备着,这些可都是让切片能清楚呈现结构的“魔法药水”。
1.2 动物样本采集。
采集动物样本的时候啊,可得遵循相关规定,可不能乱采乱捕。
如果是实验室里专门饲养的动物,那也得小心操作。
就拿小老鼠来说吧,要轻柔地把它固定住,就像对待一个小宝贝似的,然后选取合适的部位,这个部位得具有代表性,可不能瞎选,不然做出来的切片就没意义了,那可就是“竹篮打水一场空”喽。
二、切片制作过程。
2.1 固定。
把采集好的动物样本尽快放到固定液里,这一步可重要了,就像给样本“定个型”。
固定液能让细胞保持原有的形态结构,要是这一步没做好,那后面的切片就全乱套了,整个就成了“一盘散沙”。
不同的样本可能需要不同的固定液,这就得根据具体情况来选择了,就像不同的病要吃不同的药一样。
2.2 脱水。
固定好之后呢,就要进行脱水。
这就好比把样本里多余的水分给抽干。
一般是用不同浓度的酒精逐步进行脱水。
这个过程得慢慢来,心急可吃不了热豆腐。
要是脱水不彻底,切片的时候就会出现各种问题,比如说切片容易破碎,那可就前功尽弃了。
2.3 包埋。
脱水完成后就到包埋这一步了。
把样本放到包埋剂里,就像把一个小物件放到一个特制的盒子里一样。
包埋的目的是为了方便切片,让样本有个支撑的东西。
这一步也得细心,要是包埋得不好,切片的时候样本就可能歪歪斜斜的,那做出来的切片质量肯定不咋地。
2.4 切片。
终于到切片这一步了。
拿着切片刀,就像一个技艺高超的工匠一样,小心翼翼地把包埋好的样本切成薄片。
这可是个技术活,手得稳,心也得静。
切得太厚了,在显微镜下就看不清楚结构,切得太薄了,又容易破。
切片的制作过程(精)
石蜡切片制作过程1脱水:组织水洗后就可以加入酒精脱水,经过70%75%80%95%100%酒精脱水,其中95%100%的酒精重复两次。
可以保证组织中的水分脱出干净。
(各级酒精脱水时间约25min。
75%80%的酒精中可以分别加1-2滴甘油。
)然后进入1/2酒精+1/2二甲苯(纯)10min。
再转入到二甲苯约5min直到组织透明(一旦透明立即停止,以免破坏组织)2透蜡: 1 在透蜡之前做好准备工作,事先使腊熔化放入温箱内,室温箱温度保持55-60℃左右,注意不要使温度过高,以免使组织发脆。
2 将已经透明的组织放入二甲苯石蜡混合液内约20-30分钟,然后放入纯蜡1、2杯每杯透蜡45分钟1小时3折纸盒4包埋:小镊子,酒精灯,冷水,解刨针将石蜡注入纸盒,等待底稍微凝固,温镊子夹住样品放入石蜡中,继续倒满石蜡。
双手拿着两端,入冷水一半,吹气,使表面石蜡形成较厚的蜡层,然后急速进入冷水中3分钟。
第二天修正蜡块。
5修正蜡块:上下两面一定要平行且光滑6固着蜡块7切片(切片时,可以在刀片周围涂点甘油)8贴片烤片(甘油蛋白=1/2甘油+1/2鸡蛋清)在贴片时,用细吸管取一点点甘油蛋白(越少越好)于载玻片上,然后用手抹匀,手一定要干净。
将切片放在载玻片(光亮面朝下),然后滴几滴冷水使切片悬于水上。
接着将载玻片放在33℃上烘烤。
9染色石蜡染色程序表二甲苯脱蜡1 10----15分钟二甲苯脱蜡2 10-----15分钟1/2二甲苯+1/2纯酒精3-----5分钟纯酒精10分钟95%酒精10分钟80%酒精10分钟70%酒精10分钟50%酒精10分钟蒸馏水洗1-----3分钟苏木精染色10-----15自来水冲洗3-------5分钟或更长伊红复染色5分钟左右70%酒精1------2分钟80%酒精1------2分钟95%酒精(1) 1------2分钟95%酒精(2) 1------2分钟100%酒精(1) 1------2分钟100%酒精(2) 1------2分钟二甲苯(1) 5分钟二甲苯(2) 5分钟封片。
组织切片制作过程
组织切片制作过程一、组织切片技术1、取样:样品长度0.5—1cm,切面光滑(最好一刀切)2、样本处理:取样后立即放入Bowin氏固定液中固定(24—48h一般24h)3、组织冲洗:将组织用纱布或包埋盒包住,装入容器中,兑水冲洗过夜,一般为一夜。
4、组织脱水:70%酒精—80%酒精—85%酒精—90%酒精—95%酒精(各50min)无水酒精I—无水酒精II (各40min)5、组织透明:纯酒精(2):二甲苯(3)(体积比为2:3混合液)(10min)纯酒精(1):二甲苯(3)(体积比为1:3混合液)(5min)纯二甲苯(2min)6.透明石蜡和包埋:(两个蜡杯,一个1h,一个1—2h),烘箱温度65—70℃(蜡的熔点为55—60℃)①接着步骤5马上取出样品后放入第一个蜡杯1h后转移到另一个蜡杯中,在第二个蜡杯中放置时间也为1h。
②包埋:a.制作中昌状包埋盒凹b.j将蜡倒入包埋盒中,然后用加热的镊子夹住样品让人包埋盒中(防止气泡)。
③修块:a.将蜡块修整为长方形或正方形,方便切片b.切片、展片、贴片①切片厚度为5—7μm,刀片要新,勿磨损,先用15—20μm厚度将蜡块修平,然后再将厚度调整到5—7μm②展片:温度调为43—44℃,与刀片相接触的面朝下,等到片子完全摊平(无白点)方可捞出。
(注:载玻片必须用盐酸浸泡清洗干净,无灰尘)③烤片:温度为45℃,烘烤时间为10—20分钟④再将玻片放入烘箱中(37—45℃)数小时,片完全贴住即可。
二、HE染色过程(苏木精—伊红染色)1.脱蜡:①二甲苯I 8min ②二甲苯II 5-8min2.洗去二甲苯:③无水酒精I 3min④无水酒精II 3min3.复水:⑤95%酒精5min—90%酒精5min—80%酒精5min—70%酒精5min—60%酒精5min—50%酒精5min—自来水5min—蒸馏水5min4.核染:⑥苏木紫 8min(染成蓝色)5.洗去苏木紫:⑦自来水 8—10min(拿出片子直接在自来水中冲洗)6.盐酸酒精分色(颜色由蓝变红即可):⑧醇酸30s—1min(洗去其他细胞器染色,核染较深)注:醇酸配制:浓盐酸0.5—1ml,70%—95%酒精100ml7.蓝化:⑨10min—数小时(由红变蓝,一般半小时即可)将染缸放入盛满自来水的脸盆中,打开水龙头,小流速。
电镜切片样品制作步骤
电镜切片样品制作步骤1.样品固定:首先需要选择适当的固定剂将待观察的样品固定在其中一种状态下。
常用的固定剂有冷冻醇、甲醛、醋酸乙烯等。
固定剂的选择需根据待观察的样品性质和研究目的进行确定。
2.洗涤:固定后的样品需要进行洗涤以去除固定剂和不需要的杂质。
常见的洗涤液包括磷酸盐缓冲液(PBS)和磷酸盐缓冲液。
洗涤的步骤和次数根据样品和实验要求可以有所不同。
3.电镜样品预备:电镜切片样品制作需要将洗涤后的样品处理成合适的状态。
通常情况下,样品需要进行脱水和浸渍。
脱水是将样品逐渐从水中转移到乙醇或丙酮中,以保持样品在固定状态。
浸渍是将样品浸入浸渍剂,使得样品透明并易于切片。
4.树脂包埋:将经过脱水和浸渍的样品置于树脂中浸泡,待树脂浸透后,进行树脂包埋。
这一步骤的目的是使样品更加稳定,并得到均匀的切片。
5.切片:经过树脂包埋后,使用超薄切片机进行切片。
切片机通常配备钻石刀,可以切割出纳米尺度的切片。
切片过程需要控制多个参数,如切片角度、速度、厚度等,以获取最佳的切片切面。
6.切片品质检查:将切片放置在显微镜下观察,检查切片的品质。
如果切片有较多的损伤、断裂或不透明的区域,可以重新进行切片。
7.网格染色:切片制备完成后,进行网格染色以提高对比度和观察的清晰度。
常用的网格染色方法有使用庞氏染色剂或重金属染色剂。
8.显影:将染色后的切片放入显影剂中进行显影,增强对比度和细节。
9.气相金属喷镀:一些样品需要进行气相金属喷镀以提高导电性。
将样品放入金属喷镀仪器中,通过高温蒸发金属薄膜,在样品表面形成导电薄膜。
10.观察和记录:将制备好的切片放置在电镜台上,使用透射电子显微镜进行观察。
在观察的同时,及时记录所见到的现象和数据。
综上所述,电镜切片样品制作是一个复杂的过程,需要经过固定、洗涤、预备、包埋、切片、染色、显影、喷镀等多个步骤。
每个步骤都需要合适的条件和操作技巧,才能得到理想的样品,为电镜观察提供准确、可靠的数据基础。
病理切片的制作过程
1、7、1 修整组织将手术切取得乳腺肿瘤切成一个平整面,各组织块不宜太大,以便固定剂穿透与组织脱水等操作,通常以10 mm×10 mm×3mm或5mm×5mm×3mm为宜。
找到不同得部位切取2块,以备后用。
1、7、2 组织洗涤组织经修整后,组织中得福尔马林等必须冲洗干净,尤其就是含有重金属得物质存在。
因为残留在组织中得福尔马林,有得不利于染色,有得产生沉淀或结晶影响观察,所以组织修整后应冲洗12h左右。
1、7、3 组织脱水组织经洗涤后,组织中含有大量水分,由于水与石蜡不能互溶,所以必须将组织中得水分除去。
80%乙醇溶液:2h95%乙醇溶液:1h95%乙醇溶液:1h100%乙醇溶液:30min100%乙醇溶液:30min1、7、4 组织透明由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。
当组织中全部被二甲苯占有时,光线可以透过,组织呈现出不同程度得透明状态。
二甲苯Ⅰ:30min二甲苯Ⅱ:10min1、7、5 组织浸蜡浸蜡得目得就是除去组织中得透明剂(如二甲苯等),使石蜡渗透到组织内部达到饱与程度以便组织包埋。
浸蜡时间根据组织得透蜡时间较长,需3h左右。
浸蜡应在恒温箱内进行,并保持箱内温度在55℃左右,注意温度不要过高,以免组织发脆。
石蜡Ⅰ:1h石蜡Ⅱ:1h。
石蜡Ⅲ:1h1、7、6 组织包埋将经过透蜡得组织连同熔化得石蜡,一起倒入容器内,然后立即投入冷水中,使其立刻凝固成蜡块得过程。
包埋时,将纸盒放在温箱旁边,用镊子夹取组织平放于纸盒底部,,再用温镊子轻轻拨动组织,从温箱中取出盛放纯石蜡得蜡杯,沿壁倒入包埋用得纸盒中,速度要慢。
待石蜡凝固(约30min)后放入冰箱保鲜层内以备后用。
包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素,选择不同熔点得石蜡,新得石蜡一般要熬顿几次,以免石蜡固定后有气泡,影响切片。
用于包埋得石蜡得熔点在50~60℃之间。
病理切片制作的基本流程
病理切片制作的基本流程英文回答:The basic process of preparing pathological slides involves several steps. First, the tissue sample or specimen is obtained, either through a biopsy or surgical resection. This sample is then fixed in a solution, typically formalin, to preserve its structure and prevent decay. After fixation, the tissue is dehydrated using a series of alcohol solutions of increasing concentration. This removes water from the tissue, making it easier to handle during subsequent steps.Next, the dehydrated tissue is embedded in a solid medium, such as paraffin wax. This is done to provide support and facilitate the cutting of thin sections. The tissue is placed in a mold and surrounded with liquid wax, which solidifies as it cools. Once the wax has hardened, the tissue block is ready for sectioning.Sectioning involves cutting thin slices of the tissue block using a microtome. The microtome allows for precise control over the thickness of the sections, typically ranging from 3 to 5 micrometers. These sections are then mounted onto glass slides and heated to melt the wax, allowing the tissue to adhere to the slide.After mounting, the sections are stained to enhance the visibility of different cellular components. There are various staining techniques available, such as hematoxylin and eosin (H&E) staining, which is commonly used to visualize nuclei and cytoplasm. Other special stains may be used to highlight specific structures or substances, depending on the type of tissue being examined.Once stained, the slides are coverslipped to protect the tissue and prevent contamination. A coverslip,typically made of glass, is placed over the stained section and secured with mounting medium. The slides are then ready for examination under a microscope.Pathologists use these prepared slides to analyze thetissue and make diagnoses. They examine the cellular structures and patterns, looking for abnormalities or signs of disease. The findings are recorded in a pathology report, which is then used to guide patient management andtreatment decisions.中文回答:制作病理切片的基本流程包括以下几个步骤。
病理切片制作流程
固定标本。
从患者患处取下的标本应立即进行固定,通常使用10%中性福尔马林,固定时间依标本大小而定,大标本需浸泡24-48小时,小标本需浸泡6-8小时。
病理取材。
病理医生通过检查标本,找到病变部位,并切取典型病变组织,切取的组织块应放入特定的包埋盒内并编号。
脱水、透明、浸蜡。
组织经过梯度酒精脱水,以置换出组织中的水分,随后经二甲苯透明处理,最后浸泡在液体石蜡中,整个过程大约需要15小时。
组织包埋。
经过脱水、透明、浸蜡的组织被放入融化的石蜡中,待石蜡冷却凝固后,组织被石蜡包裹形成蜡块,这个过程称为包埋。
切片制备。
使用切片机将蜡块切成2~5微米厚的薄片(如300张纸的厚度),这些切片被放入45℃的温水中展平后,捞在涂有防脱剂的载玻片上,随后进行染色。
染色和封片。
对切片进行HE染色,这是一种常用的染色方法,首先进行二甲苯脱蜡,然后经过不同梯度的酒精水化,使用苏木素染液进行细胞核染色,随后用伊红进行细胞质和细胞外基质染色,最后用酒精脱去余色,二甲苯透明,完成染色过程。
封片时,在玻片上滴加一滴中性树胶,覆盖上清洁的盖玻片,避免产生气泡。
木材切片工艺流程
木材切片工艺流程引言木材切片工艺是一种重要的木材加工工艺,通过将木材切割成薄片,不仅可以提高木材的利用率,还可以使得木材具备更多的应用场景。
本文将详细介绍木材切片工艺的流程和相关工艺参数,帮助读者更好地了解和掌握这一工艺。
木材切片工艺流程概述木材切片工艺是通过机械设备将原木切割成薄片的加工过程。
整个工艺流程可以分为原料准备、切片加工、干燥处理和质量检验四个主要步骤。
原料准备原料准备是木材切片工艺流程的第一步。
在该步骤中,需要选择合适的木材原料,并对原料进行初步处理。
首先,要选择具有一定经济价值的木材,如松木、橡木、胡桃木等。
其次,要对原料进行去皮、刨平等处理,以确保原料的质量和平整度。
切片加工切片加工是木材切片工艺的核心步骤。
在该步骤中,需要使用专用的机械设备将原料切割成薄片。
常用的切片机械设备有旋转切片机和滑动切片机。
旋转切片机采用回转刀片进行切割,可以实现连续切片;而滑动切片机则采用推刀刀片进行切割,适用于切割较大尺寸的木材。
切片加工过程中,需要根据不同的要求和木材种类,调整切片机的刀片角度、切割速度等参数,以获得理想的切片质量。
干燥处理切片加工完成后,薄片中的水分含量较高,需要进行干燥处理。
干燥处理可以分为自然干燥和人工干燥两种方式。
自然干燥是将切片堆放在通风良好的场地中,利用自然环境的气候条件进行干燥。
人工干燥则是利用热风、蒸汽等辅助设备进行干燥,可以在较短的时间内将木材的水分含量控制在合适的范围内。
干燥处理的目的是提高木材的稳定性和抗菌性能,以延长木材的使用寿命。
质量检验质量检验是木材切片工艺流程中不可或缺的一步。
在该步骤中,需要对切片质量进行检验,以确保其符合相应的质量标准和要求。
常用的检验项目包括切片厚度、平整度、密度等。
通过质量检验,可以及时发现和处理存在的问题,提高切片的质量和市场竞争力。
木材切片工艺流程优化为了提高木材切片工艺的效率和质量,可以采取一些优化措施。
优化原料准备在原料准备阶段,可以通过更好地选择木材原料和增加原料处理工序来提高切片质量。
显微镜切片制作方法
显微镜切片制作方法一、引言显微镜切片制作是一种常见的组织学研究方法,可以通过切割样本制作薄片以便观察细胞和组织的细节结构。
本文将介绍显微镜切片制作的基本步骤和技巧。
二、材料准备1. 组织样本:可以是动植物组织、细胞培养物等。
2. 甲醇、乙醇和戊醇:用于固定组织样本。
3. 蜡块:用于包埋组织样本。
4. 切片刀:用于切割组织样本。
5. 显微镜载玻片:用于固定切片。
三、步骤详解1. 组织固定:将组织样本放入甲醇中固定,固定时间根据组织样本的大小和类型而定,通常为数小时至过夜。
固定的目的是保持组织样本的形态结构和细胞组织的完整性。
2. 组织脱水:将固定的组织样本转移到乙醇中进行脱水处理。
脱水的目的是逐渐去除甲醇,并使组织样本逐渐适应乙醇的性质。
3. 组织透明化:将脱水后的组织样本转移到戊醇中进行透明化处理。
透明化的目的是使组织样本逐渐适应戊醇的性质,为后续的包埋和切片做准备。
4. 组织包埋:将透明化处理后的组织样本放入蜡块中进行包埋。
包埋的目的是将组织样本固定在一个坚硬的蜡块中,以便进行切割。
5. 切片:用切片刀将包埋好的组织样本切成薄片。
切片时要注意控制切割厚度和角度,以获得清晰的切片。
6. 切片上玻片:将切好的组织片用显微镜载玻片固定。
将载玻片放置在切片上,轻轻按压使其粘合在一起。
7. 去蜡:将载玻片放入去蜡盒中进行去蜡处理。
去蜡的目的是去除切片中的蜡质。
8. 染色:将去蜡后的载玻片放入染色盒中进行染色处理。
染色的目的是增强切片的对比度,使细胞和组织的结构更加清晰可见。
9. 封片:将染色后的载玻片用封片剂封住。
封片的目的是保护切片,防止其受到外界的损害。
10. 干燥:将封好的载玻片放置在通风干燥的环境中晾干。
干燥的目的是使封片剂固化,并使切片逐渐变得坚硬。
四、技巧与注意事项1. 操作中要注意卫生和安全,避免污染和伤害。
2. 操作前要确保所使用的材料和设备都是干净的,并且没有损坏。
3. 在切片过程中,要控制切割的速度和力度,以避免切片的厚度不均匀或切割过多。
组织病理切片的制作过程
组织病理切片的制作过程
1.取材:
器械准备:锋利的手术刀;液氮罐一个或者冰盒;镊子;生理盐水
(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后30min至1h,防止细胞自溶以保证原有的形态学结构,选取胰腺癌导管型腺癌病人高、中、低分化各至少5例(前期未经过放疗、化疗等肿瘤内科专科治疗)。
(2)组织块的大小:所取癌组织/癌旁组织较理想的体积为
(0.3-0.5)cm×(0.3-0.5)m×0.3cm,厚度不大于0.5cm
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 在不影响病理诊断情况下取材,癌旁组织(癌组织旁1-2cm)
(5)保持组织块的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用生理盐水冲洗干净后再放入液氮或者冰盒中。
(6)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
(7)备注好患者的姓名,性别,年龄,籍贯,住院号,ID号,病理类型及分化程度
1。
木材切片工艺流程
木材切片工艺流程一、选材木材切片工艺的第一步是选材。
选材的关键在于选择质量好、纹理美观的木材。
一般来说,常用的木材有柚木、橡木、胡桃木等。
在选材过程中,需要注意木材的湿度和含水率,以及木材的形状和尺寸。
二、修整选好木材后,需要对木材进行修整。
修整的目的是使木材表面光滑、平整,并去除木材表面的瑕疵和杂质。
修整可以使用刨子、砂纸等工具进行,需要注意力度适中,避免损坏木材。
三、切割修整后的木材进行切割。
切割是将木材切成所需的厚度和大小。
切割可以使用锯子、电锯等工具进行,需要注意切割的角度和精度,使得切割后的木材平整、光滑。
四、切片切割后的木材进行切片。
切片是将木材切成薄片,用于制作家具、地板等。
切片可以使用切片机进行,需要注意切片的厚度和尺寸,以及切片时的速度和力度。
五、修整切片后的木材进行修整。
修整的目的是使切片的表面光滑、平整,并去除切片表面的瑕疵和杂质。
修整可以使用砂纸、刮刀等工具进行,需要注意力度适中,避免损坏切片。
六、烘干修整后的切片进行烘干。
烘干是将切片中的水分去除,以提高切片的稳定性和耐久性。
烘干可以使用烘干炉、太阳能等进行,需要注意烘干的温度和时间,以免切片变形或开裂。
七、砂光烘干后的切片进行砂光。
砂光的目的是使切片表面更加光滑、平整,并进一步去除瑕疵和杂质。
砂光可以使用砂纸、砂轮机等工具进行,需要注意砂光的力度和速度,以及砂光后的清洁工作。
八、质检砂光后的切片进行质检。
质检的目的是检查切片的质量和性能是否符合要求。
质检可以包括外观检查、尺寸检查、湿度检查等,需要注意质检的标准和方法,以保证切片的质量。
九、包装质检合格的切片进行包装。
包装的目的是保护切片不受损坏,并方便运输和存储。
包装可以使用纸箱、塑料薄膜等材料进行,需要注意包装的牢固性和密封性,以及包装后的标识和记录。
十、储存包装后的切片进行储存。
储存的目的是保持切片的质量和性能,并防止切片受潮、变形等。
储存可以选择干燥、通风、避光的环境,需要注意储存的温度和湿度,以及储存期限和方法。
病理切片制作过程及注意事项
病理切片制作过程及注意事项一、引言病理切片是病理学诊断的重要工具,通过对组织标本的切割和染色,可以观察组织的形态和结构,从而帮助医生做出准确的诊断。
本文将详细介绍病理切片制作的过程,并提供一些注意事项。
二、病理切片制作过程1. 标本采集医生需要根据患者的临床情况决定进行组织检查。
在手术或活检过程中,医生会取得一小块患者的组织标本。
这个标本应该是代表性的,并且应该包含足够数量的组织以供分析。
2. 样本固定为了保护组织结构并防止腐败,标本需要被固定。
常用的固定剂包括福尔马林和乙醛等。
固定时间通常为24-48小时,但不同类型的组织可能需要不同的固定时间。
3. 组织处理在固定完成后,标本将进行脱水和清洁程序。
脱水是将水从标本中逐渐去除的过程,常用的脱水剂包括乙醇。
清洁程序包括将固定剂和其他可能存在的污染物从标本中去除。
4. 标本包埋在组织处理完成后,标本需要进行包埋。
这一步骤将固定的组织浸入熔化的石蜡中,使其变得坚硬并易于切割。
标本通常通过专用工具和模具进行包埋。
5. 组织切片在标本包埋完成后,使用病理学切片机将固定的组织切成非常薄的切片。
这些切片通常为3-5微米厚,并使用玻璃载玻片收集。
6. 制作玻片切割好的组织切片需要制作成玻璃载玻片,以便于观察。
在玻璃载玻片上涂抹一层特殊的胶水或蛋白质溶液,然后将组织切片轻轻放置在上面。
7. 染色染色是病理切片制作过程中非常重要的一步。
染色可以增强对组织结构和细胞形态的观察。
常用的染色方法包括血涂片染色、组织切片染色和免疫组化染色等。
8. 封片在染色完成后,将切片封闭在玻璃载玻片上,以保护切片并延长其寿命。
封片通常使用特殊的胶水或蜡封闭。
9. 制备标签为了方便识别和管理,每个病理切片都需要制作标签。
标签上通常包含患者信息、样本编号、日期和医生签名等。
三、注意事项在进行病理切片制作过程中,有一些注意事项需要遵守,以确保结果的准确性和质量。
1.样本采集:必须确保样本的代表性和完整性。
切片工艺流程范文
切片工艺流程范文
1.准备工艺:首先准备好片材,确定片材规格及数量,片材必须按照规定单位成条,实际按每条规格切割需求数量;
2.切片机械准备:将切片机器的滚轴、滚轴固定支架、中心底座、固定杆、切片刀等进行组装,使设备处于正常运行状态;
3.切片操作:将片材夹紧在滚轴上,然后调节切片机的中心底座,使滚轴与切片刀的距离保持在一定范围,以保证切割精度;
4.测量:完成切片后,需要选取一定数量的片材进行测量,以确保片材的大小准确;
5.包装:切片完成后,按规定的包装尺寸和测量后的特性要求,将片材放入密封袋内,进行包装;
6.其它要求:在切片工艺中,除上述过程外,还需要经常进行设备维护、安全规范、噪音控制、废物处理等。
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的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位
置的过程。固定的目的是为了防止组织细胞自溶与腐败,防止了细胞内的酶对蛋白质的分解作用,使细胞内的各和成分如蛋白质、脂肪、碳水化合物或酶类转变为不溶性物质,以
在纯酒精内时间过久,发生组织质地发生变化)容易造成组织发脆。造成组织发脆的原因还有加温(温度超过35℃)、脱水剂内加有丙酮、浸蜡用的石蜡中二甲苯过多等等。一般
我们总认为组织发脆跟高浓度酒精有关,而忽视了与低浓度的酒精关系,其实低浓度的酒精具有强大的穿透力,比纯酒精更容易渗透到组织块内部使之脱水,组织如果在低浓度酒
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定
小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。。
组织病理切片的制作过程
1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自动物,并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:
时。由于HE染色最佳着色PH为3.5~4.5, 中性福尔马林对苏木素染色有一定影响,细胞核容易发灰,核染色质不佳。
所以, 尽管中性福尔马林对抗原有很好的保存作用,但酸性福尔马林对绝大多数抗原来说也有很好的保存作用,所以在没有特别处理的情况下常规HE用12~15%酸性福尔马林也可
以(每100毫升12~15%福尔马林液内加5毫升冰醋酸)。骨髓、结缔组织固定以Bouin液为佳,经Bouin液固定后的组织必须流水冲洗4小时以上。有条件的单位可根据不同要求选用
,无白点后,再把切的蜡片放入温水中。切片时要求用力均匀、柔和,摇速不易过快或过慢。过快会导致切片厚薄不均,机器磨损;过慢会使切片增厚。切片厚度一般为3~5微米
保持原有的结构与生活时相仿。另外,组织固定后,均呈一定的硬化状态,增加组织韧性,而且不易变形,有利于以后的组织处理。所以组织一旦离体必需及时固定,固定液的量
应为组织的5倍。固定的关键主要与固定的及时性、固定液的选择、固定液的浓度、固定的温度和时间有关。最常用的固定液为10%福尔马林。笔者认为,10%福尔马林由于受到福
间(室温18℃)以80%酒精2小时、95%酒精(2道)各1个半小时至2小时、纯酒精(3道)各1个半小时至2小时,二甲苯(2道)各30-60分钟为宜;小标本脱水时间应相应缩短。脱
水时间长短,与室温高低有密切的相关。我们在实践中发现,室温在12~15℃时,可作为一个临界温度范围。当室温高于此温度范围时,组织容易脱水,可适当缩短脱水时间;而
脱水的步骤是:80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时。
4.浸蜡、包埋
(1)使石蜡浸入组织中,取代组织中含有的透明剂。
(2)包埋:将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中,石蜡凝固后,组织即被包在其中,称蜡块,此过程称
为包埋。
最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
3.脱水透明标本经过固定和冲洗后,组织中含有较多的水分,必须将组织块内的水分置换出来,这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去组织中所含水分,因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容,常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。
,使之平贴于底部,通常采用
组织的最大面包埋。囊壁、管腔组织应竖直包埋。小块多颗组织,应尽量放在一起,并保证在一个平面上。修去两边的余蜡(所谓的两边,指切片时与切片刀垂直的两侧)。包埋
时还应注意有无缝线,纸絮,如有一定要去除。胃黏膜活检标本,不能按一般的规律取最大包埋面,应采取窄面竖起包埋。包埋的蜡更应过滤,留有杂质的石蜡,容易造成污染或
(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
刀口受损。蜡的熔点应在56~58℃之间选择,不提倡在冬天使用软蜡。因为用软蜡包埋的蜡块,到了夏天,会粘在一起,不利于资料的保存,而且即使在冬天,用硬蜡包埋的蜡块
也比用软蜡包埋的蜡块要好切。
8. 切片
切片的第一步必需粗切。粗切的厚度大约在50~100微米左右,质地较硬的组织或较小的组织应再薄一些,粗切致组织全部暴露后,才进行细切。细切至组织块表面均匀一致
6.染色和封片常用的染色方法是苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin)染色法,简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质等;伊红是一种酸性染料,可使组织中的嗜酸性物质染成红色,如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。
室温低于该温度范围时,应适当延长脱水时间(如能保证在一个恒定的温度下最佳)。更换试剂,应以量为基础,定量更换,不能等到切片不好时再去更换。否则,至少会有2~3
批组织切片不好。根据我科经验,如试剂用量为500ml,每500个蜡块更换一次为宜。
5. 浸蜡
组织透明后,在熔化的石蜡内浸渍的过程称为浸蜡。用其他浸透剂(如火棉胶、明胶等)渗入组织内部的过程可称为浸透或透入。浸蜡温度过高(超过60℃),在蜡内加入二
是弱酸性的,对细胞核有媒染作用,核浆比鲜明,但容易脱片;同时对疏松组织容易散片)。有条件的可以每天打开第一道石蜡的盖子,让二甲苯挥发。浸蜡所用的石蜡如有杂质
尽可能过滤,以防附在组织上,造成切片刀刀口受损,或切片破碎和划痕增多。
6. 包埋
用包埋剂来支持组织的过程称包埋。最常用的是石蜡包埋法。包埋的关键一是平整,二是方位。要求在包埋时,应采用镊子轻压组织块拱起部份
1 . 取材
取材的好坏,直接影响切片的质量。医生在取材时,首先要有一把锋利的取材刀,在切割组织时要避免取材刀来回拖拉,切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度以0.2 ~0.3cm为
适,较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点,而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些;
尔马林的质量、使用时的挥发和取材时带入的水分影响,浓度被降低致组织固定不足,而高浓度的福尔马林,降低了对组织的穿透性,形成周围固定好而中央固定不到的现象。通
过实践,本人认为以酸性12~15%的福尔马林最佳。大标本(2cm厚)一般需要6~12个小时,小标本一般需要3~6个小时;当室温低18℃时,可在37℃以下的温箱内加温4~6个小
甲苯蜡或由于透明时带进的二甲苯过多,都会导致组织发硬,还会使组织内的抗原受到破坏;所以作者主张浸蜡用的石蜡熔点在56℃(三道),第一道:石蜡30分钟;第二道:石
蜡90分钟;第三道:石蜡,90分钟。浸蜡温度控制在56~58℃左右。(第一道也可用硬脂酸石蜡1:3混合浸蜡,不仅可软化组织,特别适用于比较韧、硬的组织,而且由于硬脂酸
二种或二种以上的固定液;少数单位还可建立组织冷冻库,以便适应各种特殊的处理要求。
3. 水洗
固定后水洗(10~20分钟),通常被很多人所忽视,而水洗不彻底,容易造成脱片和染色不鲜艳。对需做免疫组织化学的组织,更不应当忽视。福尔马林不利于组织块内抗原
的保存
4 . 脱水和透明
所谓脱水就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来,以利于有机溶剂的渗入,这一过程称为脱水。脱水是否彻底,直接关系到组织是否能充分透明,而脱水过度(原因是组织
H.E染色程序如色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美国家的一些实验室则采用焰红(phloxine),此外也有用桔黄G(OrangeG)、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。
淋巴结应修掉两侧球冠,并尽量剔除周围的脂肪组织。在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织,如碰到不可避免的钙化组织,应与技术室讲明,在切取纤维组织、肌肉
组织、胃肠道时,应注意纤维及肌肉的走向,取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。
2 . 固定
固定是技术室工作的第一步,也是在整个制片过程中无法补救的一步。所谓“固定”,就是组织离体后,用各种办法使其细胞内
的透明剂是二甲苯。很多人认为二甲苯极容易使组织发脆,这个观点很片面,在常温下,如果不是时间过长(超过24小时以上)二甲苯并不会引起组织过份发脆,相反会使某些组
织结构比较质韧的组织:比如子宫肌瘤等相当好切),但是当二甲苯温度超过35℃以后,极易引起组织发脆。所以本人认为,大小标本最好分开脱水,一般情况下,大标本脱水时