常用免疫组化
检验科免疫组化常见检测与分析方法
检验科免疫组化常见检测与分析方法免疫组化技术是一种利用免疫学原理，通过检测和定位特定蛋白质在组织或细胞中的表达水平和位置的方法。
在医学检验科中，免疫组化技术被广泛应用于疾病的诊断、治疗及预后评估。
本文将介绍一些常见的免疫组化检测与分析方法。
一、免疫组化染色法免疫组化染色法是免疫组化技术中最常用的方法之一。
它通过采用免疫荧光、酶标记、金标记或放射性标记等技术，将特定抗原与特异性抗体结合，并通过染色或荧光的方式来显示其位置和表达水平。
免疫组化染色法广泛应用于各种疾病的诊断，如肿瘤标记物的检测、感染性疾病的诊断等。
二、免疫组织化学法免疫组织化学法是一种在组织切片上进行免疫组化染色的方法。
它通过对切片进行蛋白质抗原的恢复处理和抗体的特异性结合，来检测和显示抗原在组织中的位置和表达水平。
免疫组织化学法主要应用于病理学领域，帮助医生确定疾病的类型和分级。
三、免疫荧光法免疫荧光法是利用特异性抗体与抗原结合后，在显微镜下观察抗原在组织或细胞中的分布情况和表达水平的技术。
免疫荧光法具有高灵敏度和高特异性的优点，被广泛应用于自身免疫性疾病、感染性疾病等的诊断。
四、免疫电镜法免疫电镜法是一种在电镜下观察和检测抗体与抗原结合的方法。
它通过在样品上标记抗体或抗原，然后利用电镜来观察并获得高分辨率的图像。
免疫电镜法主要用于对超微结构进行研究和观察，是研究细胞和组织的重要手段。
五、免疫组化信号放大技术免疫组化信号放大技术是一种能够放大免疫染色信号并提高染色效果的方法。
常见的免疫组化信号放大技术包括多聚酶法、银增强法、酶蛋白复合物法等。
这些技术在免疫组化检测中可以提高检测的灵敏度和准确性。
免疫组化技术因其高度敏感、高特异性和定量分析的优势，成为了疾病诊断与治疗中不可或缺的重要方法。
随着技术的发展和创新，免疫组化技术将在临床医学中发挥越来越重要的作用。
综上所述，本文介绍了免疫组化检测与分析的常见方法，包括免疫组化染色法、免疫组织化学法、免疫荧光法、免疫电镜法以及免疫组化信号放大技术。
常用免疫组化标记物精编版
常用免疫组化标记物公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]常用免疫组化指标的意义Ki-67为细胞增值的一种标记，在细胞周期G1、S、G2、M期均有表达，G0期缺如，其和许多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后密切相关。
PCNA(增埴细胞核抗原)。
多数腺癌表达CEARb (retinoblastoma视网膜母细胞瘤) 基因是肿瘤抑制基因，调节细胞周期。
P53在免疫组化中均为突变型，阳性率越高，预后约差。
野生型半衰期很短Nm23是转移抑制基因，其阳性表达和肿瘤转移呈负相关。
E-Ca，E钙粘附蛋白，介导细胞间粘连作用的跨膜糖蛋白，其功能丧失引起细胞之间连接的破坏，主要用于肿瘤侵袭和转移方面的研究。
PS2（雌激素调节蛋白），其表达和ER表达有关，可作为内分泌治疗和预后判断的指标之一。
CK18，低分子量角蛋白，主要标记各种单层上皮包括腺上皮，而复层鳞状上皮常阴性，主要用于腺癌诊断。
CK19，分布于单层上皮和间皮，常用于腺癌诊断，肝细胞不表达，而胆管为阳性反应Hep par 1,肝细胞抗原，正常肝细胞和高分化肝细胞癌阳性，低分化肝细胞癌多弱阳性或阴性。
CK20，用于胃肠道腺癌、卵巢黏液性肿瘤、皮肤Merkel细胞癌诊断。
鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜和卵巢非黏液性肿瘤常阴性。
CK7 卵巢、肺和乳腺上皮常阳性，结肠、前列腺、胃肠道上皮阴性。
Villin 绒毛蛋白，正常组织中，villin通常只表达于有刷状缘的细胞上，如胃肠道上皮细胞、胰腺和胆管上皮细胞以及肾实质的上皮细胞中（特别是近曲小管）。
Villin在胃肠道癌、胰腺癌、胆囊癌和胆管癌组织中有很高的表达率，具有明显腺样结构的肿瘤上没有villin表达，则这个肿瘤为胃肠道、胰腺、胆囊或胆管来源的可能性极低。
乳腺癌也经常成为女性患者未知原发部位转移癌要鉴别排除的一种疾病。
因为在转移癌组织上观察到明显的villin免疫组化阳性染色，则这个肿瘤就极不可能为乳腺来源。
临床常用免疫组化标记物及意义
临床常用免疫组化标记物及意义免疫组化（immunohistochemistry，IHC）是一种广泛应用于临床病理学领域的技术，用于检测组织样本中特定蛋白质的表达和定位信息。
这种技术的基本原理是使用特异性的抗体与目标蛋白质结合，然后通过化学反应或荧光染色方法来显示出蛋白质的表达情况。
在临床实践中，免疫组化常用于诊断肿瘤包括癌细胞的分类、分级以及分子靶向治疗的预测。
下面将介绍一些常用的免疫组化标记物及其意义。
1. 细胞角蛋白（Cytokeratin，CK）2.细胞膜蛋白（CD）细胞膜蛋白是细胞膜上的免疫组化标记物，常用于诊断和分类各种肿瘤。
例如，CD20和CD3是血液系统恶性肿瘤（如淋巴瘤）的诊断标记物；CD34用于判断肿瘤的血管生成和预后。
3. 平滑肌肌动蛋白（Smooth Muscle Actin，SMA）平滑肌肌动蛋白是平滑肌组织中的一个标志性蛋白，常用于诊断和分类平滑肌源性肿瘤，如平滑肌肉瘤和恶性纤维组织细胞瘤。
4. 雌激素受体和孕激素受体（Estrogen Receptor，ER和Progestrone Receptor，PR）雌激素受体和孕激素受体的阳性表达在乳腺癌诊断和治疗中具有重要的价值。
ER和PR的表达程度可以预测乳腺癌对内分泌治疗的敏感性，指导治疗方案的选择。
5. 肿瘤抑制基因（Tumor Suppressor Gene，TSG）蛋白常用的TSG蛋白包括p53、PTEN、BRCA1等。
这些蛋白的突变或缺失与肿瘤的发生和进展密切相关。
免疫组化检测这些TSG蛋白的表达情况可以帮助评估肿瘤的分子异常，对于预测预后和指导治疗具有重要意义。
6.基因突变相关蛋白近年来，免疫组化也逐渐应用于检测肿瘤常见的基因突变或扩增，其中包括EGFR、HER-2、ALK、BRAF等。
这些突变和扩增与肿瘤的治疗反应和预后关系密切。
免疫组化检测这些基因突变相关蛋白的表达情况可以为肿瘤靶向治疗的选择和预后评估提供重要信息。
常用免疫组化试剂介绍
常用免疫组化试剂介绍概述免疫组化（IHC）是一门通过检测特定抗原在组织切片中的表达程度来揭示组织形态和细胞化学等方面信息的技术。
由于IHC是一种定性分析技术，所以该方法需要与定量技术（如分子生物学）结合使用，从而得到更准确的数据。
IHC涉及到多种试剂，其标记原理和表现形式各异，能够检测的抗原种类也不同。
本文将对常用的IHC试剂进行介绍，以此为指导，让大家更好地了解和应用IHC技术。
常用的免疫组化试剂抗原修复试剂抗原修复试剂（Antigen Retrieval）用于在组织样本中使细胞内蛋白与抗体亲和性和特异性增加。
这种试剂可通过热处理（如高压）或化学处理（如酶样蛋白和酸性处理）来复原被检测抗原的结构和功能。
常用的抗原修复试剂包括：EDTA、Tris、Citrate等。
原位杂交试剂原位杂交试剂（In Situ Hybridization）可检查DNA或RNA分子的特异性结合情况。
这种试剂可将RNA等分子与特定热稳定的蛋白质结合，用于检测基因突变等。
常用的原位杂交试剂包括：流式胶体金试剂、脉冲场凝胶电泳（PFGE）、双链RNA原位杂交等。
细胞计数试剂细胞计数试剂（Cell Counting）用于获得细胞数量或结构变化。
这种试剂通常用于确定某一类细胞的数量、细胞计数和分离、细胞生长和分裂的应用。
常用的细胞计数试剂包括：皮质醇、14C-labeled thymidine等。
细胞信号转导试剂细胞信号转导试剂（Cell Signaling）用于研究细胞分子级别的通讯系统，并采取措施以确定物质在细胞内的作用机理。
常用的细胞信号转导试剂包括：抗体、试剂原和阻断类似物等。
同型抑制剂同型抑制剂（Isotype Control）用于在IHC实验中作为实验设计的对照组，以检测所观察的抗原与探测剂结合的特异性表现。
常用的同型抑制剂包括：IgG1、IgG2a和IgG2b等。
情况控制试剂情况控制试剂（Condition Control）用于确定IHC试验的最佳条件，包括温度、缓冲液、酸碱程度等。
免疫组化检查指标解读
免疫组化检查指标解读
免疫组化检查是一种在病理学诊断中常用的检测方法，通过检测组织或细胞中特定蛋白的表达情况，为临床诊断和治疗提供重要的参考依据。
下面将对免疫组化检查常用的一些指标进行解读。
1. 细胞角蛋白（Cytokeratin，CK）：CK是一类细胞骨架蛋白，广泛存在于上皮组织中。
CK的免疫组织化学染色可以帮助鉴定肿瘤是否为上皮性肿瘤，例如乳腺癌、肺癌等。
2. 维克酸酮腺体分泌物3（Vimentin，VIM）：VIM是间质细胞的一种中间丝蛋白，广泛存在于成纤维细胞、肌纤维母细胞等间质细胞中。
VIM的免疫组化染色可用于鉴别间质性肿瘤与上皮性肿瘤。
3. S-100蛋白：S-100蛋白是一种神经峰蛋白，在神经组织中广泛表达。
S-100的免疫组化染色可用于诊断神经源性肿瘤，如神经胶质瘤和神经母细胞瘤等。
4. Ki-67蛋白：Ki-67蛋白是细胞周期调节蛋白，主要表达于活跃增殖细胞中。
免疫组化染色中Ki-67的阳性细胞核数目可以反映肿瘤的增殖活性，常用于评估肿瘤的恶性程度和预后。
5. CD20和CD3蛋白：CD20和CD3是免疫系统中的两种膜标志物。
CD20主要表达于B淋巴细胞，CD3则主要表达于T淋巴细胞。
免疫组化染色中CD20和CD3的表达可以帮助鉴别淋巴细胞来源的肿瘤，如淋巴瘤。
这些免疫组化指标的检测结果能够为病理学诊断提供重要的信息，但需要结合临床资料和其他检查结果综合分析和解读。
在临床实践中，医生会根据不同的病情和病理表现，选择适合的免疫组化标记物进行检测，从而辅助肿瘤的诊断和治疗方案的确定。
常用免疫组织化学染色方法
常用免疫组织化学染色方法免疫组织化学染色是通过将抗原与抗体结合来检测组织中特定蛋白质的染色方法。
它是现代生物医学中常用的一种技术，可以用于研究分子生物学、细胞生物学、病理学等领域。
以下是一些常用的免疫组织化学染色方法介绍：1. 免疫组化染色(Immunohistochemistry, IHC)：免疫组化染色是免疫组织化学中最常用的方法之一、其基本原理是使用一种与目标抗原特异性结合的抗体，将抗原与抗体结合，然后通过染色方法将表达该抗原的细胞或组织可视化。
常用的染色剂包括多聚酶、酶标、荧光素和放射性同位素。
IHC可以用于检测细胞表面抗原、细胞器中的抗原以及胞内蛋白质的定位。
2. 免疫荧光染色(Immunofluorescence, IF)：免疫荧光染色利用荧光标记的抗体来检测特定抗原。
它可以提供高度特异性和灵敏度的探测，可以用于研究蛋白质的亚细胞定位、蛋白质相互作用等。
利用该方法可以用于检测多种类型的标记（单标记、双标记、复合标记等），从而实现多重染色或共定位染色。
3. 免疫电镜染色(Immunoelectron microscopy, IEM)：免疫电镜染色是一种将金粒标记的抗体用于电子显微镜下观察并定位特定抗原的方法。
通过将金粒结合到抗原-抗体复合物上，可以在电子显微镜下清晰地观察到抗原的位置和分布。
这种方法具有高分辨率和高特异性的优点，广泛应用于超微结构的研究。
4. 免疫酶标染色(Immunoenzyme staining, IES)：免疫酶标染色是使用酶作为标记物，通过化学反应将抗原与酶标记的抗体结合，从而显示出特定抗原的位置和分布。
常用的标记物包括辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(ALP)等。
在检测抗原时，标记物可以与染色底物产生反应生成可见色素，形成染色，以显示抗原的位置和分布。
5. 免疫组织化学原位杂交(Immunohistochemical in situ hybridization, IHC-IS)：免疫组化原位杂交技术是一种结合了原位杂交和免疫组化技术的方法。
临床常用免疫组化指标
临床常用免疫组化指标免疫组化是一种通过使用抗体来检测组织或细胞中特定蛋白质的方法。
在临床上，免疫组化常被用来帮助诊断和鉴别不同类型的肿瘤，以及评估患者的预后和指导治疗方案。
以下是一些临床常用的免疫组化指标。
1. 细胞增殖标志物：包括Ki-67、PCNA（核抗原PCNA，proliferating cell nuclear antigen）等。
这些标志物能够反映细胞增殖的活性，利用免疫组化可以定量检测细胞核中与细胞增殖有关的蛋白质表达水平，评估肿瘤的生长速率和预后。
2. 细胞凋亡标志物：包括Caspase-3、Bcl-2、Bax等。
这些标志物可以检测肿瘤细胞凋亡的活性和程度，有助于评估治疗的疗效和预后。
3.免疫细胞标志物：包括CD4、CD8、CD20等。
这些标志物可以用来鉴定和分类不同类型的免疫细胞，评估免疫系统的功能状态和对肿瘤的抗击能力。
4.转录因子：包括ER（雌激素受体）、PR（孕激素受体）等。
这些标志物用来评估激素受体在肿瘤细胞中的表达水平，指导激素治疗的选择和预后评估。
5.肿瘤抑制基因标志物：包括p53、PTEN（磷酸酯酶-蛋白激酶液体增殖自然抑制物）等。
这些标志物用来评估肿瘤细胞中肿瘤抑制基因的突变和功能异常情况，对判断肿瘤的侵袭性和预后有重要意义。
6.肿瘤相关抗原标志物：包括CEA（癌胚抗原）、AFP（α-胎蛋白）等。
这些标志物可以作为肿瘤的检测和监测指标，在临床上用于诊断和评估肿瘤的预后。
7.血管生长因子：包括VEGF（血管内皮生长因子）、FGF（成纤维细胞生长因子）等。
这些标志物可以评估肿瘤血管生成和进展，对指导抗血管生成治疗具有重要意义。
8.炎症标志物：包括NF-κB、COX-2等。
这些标志物反映了肿瘤组织中的炎症反应程度，与肿瘤的侵袭性和预后密切相关。
9. 细胞骨架和黏附分子：包括CK（细胞角蛋白）、E-cadherin等。
这些标志物用于评估肿瘤细胞的浸润和转移能力，对判断肿瘤的侵袭性和预后具有重要意义。
临床常用免疫组化指标
常用免疫组化指标的意义Ki—67为细胞增殖的一种标记，在细胞周期G1、S、G2、M期均有表达,G0期缺如，其和许多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后密切相关.PCNA(增殖细胞核抗原)。
多数腺癌表达CEA Rb (retinoblastoma视网膜母细胞瘤）基因是肿瘤抑制基因，调节细胞周期.P53在免疫组化中均为突变型，阳性率越高，预后约差.野生型半衰期很短Nm23是转移抑制基因，其阳性表达和肿瘤转移呈负相关。
E—Ca E钙粘附蛋白，介导细胞间粘连作用的跨膜糖蛋白，其功能丧失引起细胞之间连接的破坏,主要用于肿瘤侵袭和转移方面的研究。
PS2 （雌激素调节蛋白)，其表达和ER表达有关，可作为内分泌治疗和预后判断的指标之一。
CK18 低分子量角蛋白，主要标记各种单层上皮包括腺上皮，而复层鳞状上皮常阴性，主要用于腺癌诊断。
CK19 分布于单层上皮和间皮，常用于腺癌诊断，肝细胞不表达，而胆管为阳性反应Hep par 肝细胞抗原，正常肝细胞和高分化肝细胞癌阳性，低分化肝细胞癌多弱阳性或阴性。
CK20 用于胃肠道腺癌、卵巢黏液性肿瘤、皮肤Merkel细胞癌诊断。
鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜和卵巢非黏液性肿瘤常阴性。
CK7 卵巢、肺和乳腺上皮常阳性，结肠、前列腺、胃肠道上皮阴性。
Villin 绒毛蛋白，正常组织中，villin通常只表达于有刷状缘的细胞上,如胃肠道上皮细胞、胰腺和胆管上皮细胞以及肾实质的上皮细胞中(特别是近曲小管）.Villin在胃肠道癌、胰腺癌、胆囊癌和胆管癌组织中有很高的表达率，具有明显腺样结构的肿瘤上没有villin表达，则这个肿瘤为胃肠道、胰腺、胆囊或胆管来源的可能性极低.乳腺癌也经常成为女性患者未知原发部位转移癌要鉴别排除的一种疾病。
因为在转移癌组织上观察到明显的villin免疫组化阳性染色，则这个肿瘤就极不可能为乳腺来源。
其他villin 免疫组化染色通常为阴性表达的肿瘤还有：如卵巢浆液性癌、尿道移行细胞癌和前列腺癌。
病理常用免疫组化
病理常用免疫组化
病理常用免疫组化，即免疫组织化学技术，是病理科经常采用的一种检查方法。
它基于免疫学的基本原理，即抗原与抗体的特异性结合，利用已知的、带有能与显色剂结合基团的抗体，检测未知肿瘤细胞内的抗原，从而对疾病进行诊断、鉴别诊断以及进一步的病理分型。
免疫组化在病理诊断中发挥着重要作用，特别是在肿瘤的诊断和鉴别诊断方面。
由于肿瘤组织形态各异，传统的HE染色技术在某些情况下难以做出明确的形态学诊断。
而免疫组化技术通过标记抗体的显色剂，可以对组织细胞内的抗原进行定位、定性和相对定量的研究，从而提高诊断的准确率。
特别是对于低分化或未分化的肿瘤，免疫组化的诊断准确率可以达到50%～75%。
除了肿瘤的诊断和鉴别诊断，免疫组化在临床应用方面还有以下作用：
确定转移性恶性肿瘤的原发部位，有助于临床治疗方案的制定。
对软组织肿瘤进行进一步的病理分型，因为软组织肿瘤种类繁多，组织形态相似，有时难以区分其组织来源。
发现微小转移灶，有助于临床治疗方案的确定和患者预后的判断。
为临床提供治疗方案的选择，例如乳腺癌激素受体（ER、PR）的检测在指导临床治疗方面已起到了重要的作用。
综上所述，免疫组化技术是病理科实验室最重要的技术之一，为病理科医师做出精准诊断提供了有力支持。
以上内容仅供参考，如需了解更多关于免疫组化的信息，建议查阅相关书籍或咨询专业医师。
临床肺癌常用免疫组化指标及其意义
临床肺癌常用免疫组化指标及其意义肺癌主要分为非小细胞肺癌（NSCLC）和小细胞肺癌（SCLC），非小细胞肺癌（NSCLC）占所有肺癌80%，可以分为不同的组织学类型，主要包括腺癌（≥40%）和鳞癌（30%），以及较为少见的大细胞癌（LCC）（10%）。
病理诊断是诊断肿瘤的“金标准”，最重要的是病理诊断部分，肿瘤的鉴别诊断常常运用免疫组化的方法来实现，那么肺癌常用的免疫组化指标有哪些？其临床意义是什么？本文带大家一起解读。
定义：免疫组化（IHC）是应用免疫学基本原理——抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。
免疫组化在肺癌中的作用1. 判断是否患有肺癌和肺癌的恶性程度；2. 对肺癌进行更深入的病理分型以帮助指导临床治疗方案；3. 在发现转移瘤的时候帮助确定原发部位。
CSCO指南推荐指标肺腺癌：TTF-1、Napsin A；肺鳞癌：P40、CK5/6，P63（P63也可表达于部分腺癌中，前二者对鳞癌的特异性相对更高）；小细胞癌：CD56、Syno、CgA、INSM1、TTF-1、CK、Ki-67。
（一）腺癌➤TTF-1（甲状腺转录因子-1）1. 75%-85%肺腺癌表达，也表达于肺神经内分泌肿瘤，鳞癌通常不表达；2. 分化越差（如浸润性粘液腺癌、胶样腺癌）则越可能表达缺失；3. 在肺的转移性腺癌中，TTF-1几乎不表达。
➤Napsin A（新天冬氨酸蛋白酶 A）1. 70%-90%的肺腺癌表达，3%肺鳞癌表达，肺神经内分泌肿瘤不表达，与TTF-1结合是检测腺癌最好的标志物组合；2. 在肺腺癌中表达也与组织学类型、分化程度具有相关性；3. 部分转移性肺癌表达，如肾细胞癌、少部分甲状腺乳头状癌、子宫内膜腺癌、卵巢腺癌、胆管细胞癌等。
➤CK7（细胞角蛋白-7）1. 敏感性高，几乎100%肺腺癌表达；2. 特异性差，30%-60%肺鳞癌表达，表达广泛见于乳腺、胃、卵巢、子宫等多个器官的腺癌，需与TTF-1、NapsinA联合应用。
常用免疫组化试剂介绍完整版
常用免疫组化试剂介绍完整版免疫组化试剂是一类用于检测细胞和组织中特定分子的试剂。
它们能够与目标分子发生特异性的结合反应，通过显色、荧光等方式实现目标分子的定位和检测。
常用的免疫组化试剂有抗体、底物、荧光染料等。
下面将详细介绍常用的免疫组化试剂。
一、抗体单克隆抗体：单克隆抗体是由单个克隆的B细胞分泌的抗体组成。
它们具有更高的特异性和一致性，适用于特定的免疫组化实验。
单克隆抗体一般通过酶联免疫吸附试验或杂交瘤技术获得。
二、底物底物是一种被特定酶催化后能够产生染色或荧光信号的化学物质。
在免疫组化实验中，常用的底物有DAB、VIP、AP、HRP等。
DAB：DAB（3,3'-二氨基联吡啶）是一种常用的免疫组化染色底物。
当DAB与过氧化物酶结合后，在特定条件下会产生棕色沉淀物，用于检测目标分子的位置。
VIP：VIP（维珍纳胶体阳离子）是一种特殊的底物，其在经过过氧化物酶催化后，形成带有阳离子电荷的胶体颗粒。
VIP用于染色后，可以形成黑色沉淀物。
AP：AP（碱性磷酸酶）是一种常用的底物，可以和特定基质反应生成可见或荧光信号。
AP基质有两种常用的类型，一种是快速红色溶液（Fast Red），另一种是紫色溶液。
HRP：HRP（过氧化物酶）是一种广泛使用的底物，在过氧化物酶的作用下可以产生明亮的荧光或染色信号。
HRP染色通常呈现为褐色或黑色。
三、荧光染料荧光染料是一种通过吸收特定波长的光线并在另一个波长下发射荧光的化合物。
免疫组化实验中常用的荧光染料有FITC、TRITC、Cy3、Cy5等。
FITC：FITC（荧光异硫氰酸酯或荧光同硫氰酸酯）是一种常用的绿色荧光染料，其在激发波长为488nm的波长下产生绿色荧光。
TRITC：TRITC（荧光异硫氰酸酯）是一种常用的红色荧光染料，其在激发波长为568nm的波长下产生红色荧光。
Cy3：Cy3是一种荧光发色团，其在激发波长为550nm的波长下产生黄绿色荧光。
Cy5：Cy5是一种荧光发色团，其在激发波长为650nm的波长下产生红色荧光。
临床常用免疫组化指标的意义
临床常用免疫组化指标的意义免疫组化（Immunohistochemistry，简称IHC）是一种通过特异性抗体与组织或细胞内的特定蛋白结合，然后利用染色剂的染色方法，来检测和显示蛋白质的存在和定位的技术。
在临床上，免疫组化已经成为肿瘤学和病理学的重要手段，常用于诊断、预后评估以及预测治疗反应等方面。
以下是常用免疫组化指标的意义。
1.细胞增殖标志物：免疫组化可以检测细胞增殖相关蛋白，如Ki-67和PCNA。
这些标志物可以用来评估肿瘤的增殖活性，判断肿瘤的恶性程度和预后，并指导治疗。
2.乳腺癌指标：在乳腺癌的诊断和预后评估中，免疫组化可以检测雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）等指标。
这些指标可以帮助判断肿瘤的类型、分子亚型和预后，以指导个体化治疗。
3. 乳腺癌转移指标：在乳腺癌转移的诊断中，免疫组化可以检测细胞角蛋白（CK）和上皮细胞黏附分子（E-Cadherin）等标志物，以协助鉴别转移瘤和原发瘤的关系。
4.结直肠癌指标：在结直肠癌的诊断和预后评估中，免疫组化可以检测同种异质性结合素（CDX2）、胰岛素样生长因子1受体（IGF1R）和DNA错配修复相关蛋白（MMR）等标志物。
这些指标可以帮助判断肿瘤的类型、分子亚型和预后，以指导治疗选择。
5.皮肤癌指标：在皮肤癌的诊断和预后评估中，免疫组化可以检测S100蛋白、黑色素瘤抗原（HMB45）等指标，以帮助判断黑色素瘤和非黑色素瘤皮肤癌之间的区别。
6.血液肿瘤指标：在血液肿瘤的诊断和预后评估中，免疫组化可以检测B细胞淋巴瘤2（BCL-2）、B细胞淋巴瘤6（BCL-6）和CD20等标志物。
这些指标可以帮助判断肿瘤的类型、分子亚型和预后，以指导治疗选择。
7.神经内分泌肿瘤指标：在神经内分泌肿瘤的诊断和预后评估中，免疫组化可以检测神经内分泌标志物，如类胰岛素生长因子1（IGF1）和肾上腺素甲醛化酶（PNMT）等。
这些指标可以帮助判断肿瘤的类型、分子亚型和预后，以指导治疗选择。
临床常用免疫组化标记物及意义
临床常用免疫组化标记物及意义临床常用免疫组化标记物及其意义1.引言免疫组化技术是一种常用的实验室技术，通过使用特异性抗体来检测细胞或组织中的特定蛋白质标记物。
这些标记物在临床医学研究中发挥着重要的作用，可以帮助医生进行诊断、鉴定肿瘤分子亚型、预测疾病进展和指导治疗。
本文将探讨几种临床常用的免疫组化标记物及其意义。
2.免疫组化标记物的分类免疫组化标记物可分为细胞内标记物和细胞膜标记物两大类。
细胞内标记物包括细胞核内的标记物和细胞浆内的标记物，常用的有P53、Ki-67、ER、PR等。
细胞膜标记物主要用于检测细胞表面分子的存在和分布情况，常用的有Her2、EGFR、CD20等。
3.临床常用免疫组化标记物及其意义3.1 P53P53是一个重要的细胞周期调节蛋白，广泛应用于肿瘤诊断。
其通过调节细胞周期、DNA修复和程序性细胞死亡等方面的功能来抑制肿瘤的发生和发展。
临床上，通过检测肿瘤组织中P53的表达情况，可以帮助评估肿瘤的预后，指导化疗方案的选择。
3.2 Ki-67Ki-67是一个核蛋白，与细胞增殖紧密相关。
其在体外培养条件下可以作为一种细胞增殖标志物。
在临床上，Ki-67的表达水平可以反映肿瘤的增殖活性，帮助评估肿瘤的侵袭性和预后，并指导治疗策略的选择。
高Ki-67表达的患者往往有较差的预后，可能需要更加积极的治疗。
3.3 ER和PRER和PR是雌激素和孕激素受体，对于乳腺癌的治疗和预后评价非常重要。
ER和PR的阳性表达可以指示患者对激素治疗的敏感性，并在临床上指导激素治疗的方案。
ER和PR的表达水平还与乳腺癌的预后相关，阳性表达患者的预后往往较好。
3.4 Her2Her2是一种酪氨酸激酶受体，被发现在多种肿瘤中高表达。
在乳腺癌中，Her2的高表达与肿瘤侵袭性和预后相关。
Her2阳性的乳腺癌患者可通过靶向治疗，如Trastuzumab（Herceptin）来获益。
检测Her2的表达水平对于乳腺癌的诊断、分子亚型的鉴定和治疗方案的选择具有重要意义。
常用免疫组化指标的意义
常用免疫组化指标的意义免疫组化是一种常用的实验技术，用于检测组织切片或细胞涂片中的抗原和其特异抗体之间的特异性结合。
免疫组化技术的主要原理是通过使用特异性抗体标记待检测目标抗原，然后用染色剂进行可视化，从而实现对该抗原的定位和定量分析。
常用的免疫组化指标主要有以下几种：1.细胞增殖标记物：如Ki-67和PCNA。
细胞增殖是细胞生物学中的重要过程，对于评估组织恶性肿瘤的侵袭性和预后有很大帮助。
细胞增殖标记物的表达水平可以指示细胞的增殖活性和生长速度。
2. 细胞凋亡指标：如Caspase-3和Bcl-2、细胞凋亡是细胞生物学中的一种程序性细胞死亡方式，常见于胚胎发育、组织修复和肿瘤发生等过程中。
细胞凋亡指标的变化可以指示细胞凋亡的程度，从而预测细胞存活和组织恢复的情况。
3.组织特异性标记物：如细胞角蛋白、肌球蛋白和神经元特异性烯醇化酶。
组织特异性标记物的表达水平可以帮助鉴定组织类型、识别不同组织和细胞类型，并衡量相对组织的分布和数量。
4.癌症标志物：如HER2、ER、PR和CEA。
癌症标志物是用于诊断和监测癌症的生物学标记物。
通过检测癌症标志物的表达水平，可以评估癌症的发生、发展和治疗反应，对于癌症的早期诊断和指导治疗具有重要意义。
5.炎症标记物：如CD3、CD20和CD68、炎症反应是机体对损伤、感染和异常细胞的免疫应答。
炎症标记物的表达水平可以反映炎症过程的严重程度和类型，对于炎症性疾病的诊断和治疗提供指导。
6.家族史标记物：如BRCA1、BRCA2和TP53、家族史标记物是一些与遗传性疾病相关的基因或突变位点。
通过检测家族史标记物的表达水平，可以评估个体患遗传性疾病的风险，从而采取相应的预防和治疗措施。
免疫组化指标的意义在于通过检测特定标记物的表达水平，对组织或细胞进行定性和定量分析，帮助确定诊断和预后，评估疾病的发展和治疗效果。
临床上，免疫组化被广泛应用于病理学诊断、肿瘤分期、预后评估和辅助治疗方案选择等方面。
常用免疫组化染色要点
常用免疫组化染色要点1、取材对于活检或手术切除标本应在2小时内取材或固定，避免组织自溶及抗原变性等影响免疫组化结果。
取材时为避免挤压组织，尽量使用锋利刀片，并且避开坏死组织。
取有代表性的肿瘤组织。
2、固定标本用10%中性缓冲福马林固定液 (甲醛10ml + 0.01M ph7.4 PBS 90ml)固定12-18小时，不超过24小时。
有些单位采用先固定标本后取材的工作程序。
此时要注意，比较大的肿瘤应该切开固定，避免肿瘤中心部分固定不及时。
3、脱水．透明、浸蜡、包埋、切片等按照常规方法用自动脱水机脱水、透明、浸蜡。
注意温度不要超过60℃。
玻片处理：彻底清洗，烤干后1:10多聚赖氨酸涂抹玻片，风干。
组织切片厚度4-5微米。
烤片50-60℃，2-3小时以上。
常规脱蜡入水。
4、常用检测系统选择SP三步法：敏感度大于EnVision、EliVision约1-2倍，但不宜用于富含亲生物素物质的组织，尤其对肝、肾组织很容易造成非特异性着色。
EnVision、EliVision两步法：特异性强，可以避免生物素非特异性结合。
5、免疫组化步骤抗原修复高温高压pH6.0柠檬酸盐缓冲液修复，适用于绝大多数抗原。
需要用95℃热水浴EDTA（pH9.0）修复20分钟。
适合于：CD10、CD138、Bcl-6、MuM1、VEGF、CD31、CD117、CD30、Cyclin D1、TdT、ALK。
不需要修复的抗体：GST-π等。
需要胃蛋白酶消化的抗体：EGFR，EBV。
在此后整个染色过程中，切片不能干燥，否则会造成非特异着色。
pH7.4 0.01M PBS（或者TBS）缓冲液浸洗切片5分钟×3次（下同）。
室温下将切片浸入 3% H2O2溶液10分钟，以阻断内源性过氧化物酶作用（显色后红细胞如果着色，说明H2O2 浓度不够，不能抑制内源性酶）。
PBS洗后拭去组织周围多余的水分，离组织切片周围约2mm处以防渗笔圈定。
注意细节: 组织切面上水分不要过多；抗体液量适当；液体不能流离到组织外，玻片平置，等。
常用免疫组化指标及其意义(2)
常用免疫组化指标及其意义(2)在上一篇文章中，我们介绍了一些常见的免疫组化指标及其在临床中的意义，本文将继续介绍一些常用的免疫组化指标。
1. Ki-67Ki-67是一种核抗原，可以衡量细胞的增殖指数。
它在肿瘤组织中广泛表达，是一个非常有用的生物标志物。
Ki-67表达水平越高，说明该肿瘤细胞增殖速度越快。
因此，在肿瘤研究和诊断中，Ki-67是一个非常重要的标志物。
在乳腺癌、肺癌、胃癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤中，Ki-67的表达水平都被证明与预后密切相关。
2. CK5/6CK5/6是一种细胞角质蛋白，主要表达在基底细胞和基底细胞衍生的上皮细胞中。
在乳腺癌中，CK5/6通常表达在基底细胞型乳腺癌中，具有较好的诊断和分子分型的价值，有时还可以用于判断三阴性乳腺癌的类型和预后。
3. ERER是雌激素受体的简称，主要表达在许多组织和器官中。
ER的阳性率对于乳腺癌的分类、治疗和预后具有重要意义。
ER阳性的乳腺癌通常具有较好的激素依赖性，这种癌症的治疗主要是通过抗雌激素药物的使用来抑制肿瘤的发展。
ER的检测方法主要是通过免疫组化或基因检测来进行。
4. PRPR是孕激素受体的简称，主要表达在乳腺的上皮细胞中。
PR的阳性率也是衡量乳腺癌的重要指标之一。
与ER类似，PR阳性的乳腺癌也具有较好的激素依赖性，这种癌症的治疗也是通过抗雌激素药物的使用来抑制肿瘤的发展。
PR的检测方法同样是通过免疫组化或基因检测来进行。
5. Her-2Her-2是一种受体型酪氨酸激酶，主要参与细胞信号转导过程。
Her-2的高表达与乳腺癌的恶性程度和预后密切相关。
目前，Her-2的检测方法主要是通过免疫组化或基因检测来进行。
对于Her-2阳性的乳腺癌，可以使用单克隆抗体药物来治疗，这种药物通过靶向Her-2来抑制肿瘤的生长和扩散。
6. CD20CD20是一种B细胞特异性膜抗原，在B淋巴细胞癌的诊断和治疗中具有重要作用。
目前，CD20单克隆抗体已经成为晚期B细胞淋巴瘤的一线治疗药物之一。
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前列腺癌：CK、P63、34E12、PSA、P504S（9AMAC）、AR前列腺增生／腺瘤：CK、P63、34BE12、P504S肾癌：CK、EMA、Inhibin、Melan－A、CK7、Vimentin、PAX2、CD10肾母细胞瘤：WT－1、CK、P53、Ki－67膀胱尿路上皮癌：CK7、CK20、P53、Ki－67、P63精原细胞瘤：CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3／4胸腺肿瘤：CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV＊霍奇金淋巴瘤：CD30、CD15、ALK－1、EMA、CD3、CD20、EBV＊、PAX －5非霍奇金淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD43间变大细胞淋巴瘤：CD30、CD15、ALK－1、EMA、CD3、CD20、EBV＊弥漫性大B细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki－67小B细胞淋巴瘤：CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdTT细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA－1、Perforin套细胞淋巴瘤：CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl－2、Ki－67T／NK细胞淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA－1、Perforin、粒酶B淋巴上皮病变／癌：CK、EMA、S－100、Ki－67、P53、EBV＊、P63、CD30、CD20Burkitt淋巴瘤：CD3、CD20、CD79α、CD10、Bcl－2、Bcl－6、Ki－67、EBV ＊、TdT滤泡性淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD10、Bcl－2、Bcl－6、Ki67脂膜炎样T细胞淋巴瘤：CD2、CD3、CD7、CD20、CD43、Perforin、TiA－1、EBV＊浆细胞瘤：CD3、CD20、CD38、CD138、CD79α、EMA、κ＊、λ＊坏死性淋巴结炎：CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD68、Mac387、CD163粘膜相关淋巴瘤：CK、CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD43、CD79a、CyclinD1血管免疫母细胞性淋巴瘤：CD3、CD20、CD45RO、CD43、CD79α组织细胞肉瘤：S100、CD10、CD21、CD35、CD68、Lysozyme、MPO、CD33、CD34、CD11c、CD14、CD45RO朗格罕氏细胞增生症／肉瘤：S100、CD1α、CD68、CD35、HMB45、CK、EMA、Ki67、CD45指状突树突细胞肉瘤／肿瘤：S100、CD1α、CD68、CD21、CD35、CD3、CD20、CD30、CK、EMA、Ki67、CD45滤泡树突细胞肉瘤／肿瘤：CD21、CD35、S100、CD1α、CD68、CD3、CD23、EMA、VIM、MPO、CD34、CD79α、CK、HMB45肥大细胞肿瘤：CD117、CD45、CD33、CD68、CD15、CD3、CD20胃癌：CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki－67、CDX－2、GST－π、AB／PAS＊＊肠癌：CK7、CK20、Villin、CEA、P53、Ki－67、CDX－2、GST－π、AB／PAS＊＊肝细胞癌：AFP、CD34、CEA、CK8／18、CK19、Ki－67、P53、HbsAg、Hepatocyte肝胆管细胞癌：CK7、CK20、Villin、AFP、CD34、CEA、CK8／18、CK19、Ki－67、Hepatocyte、HbsAg食道癌：P53、Ki－67、CDX－2、GST－π、P63胰腺癌：CEA、P53、Ki－67、CDX－2、GST－π、Villin、CK7、CK20、胰岛细胞瘤：CD56、Syn、CgA、Ki－67、Insulin、CK8／18、CK19肝炎病毒：HbsAg、HbcAg、HCV涎腺粘液性囊腺癌：CK、P63、SMA、Vimentin、Myosin－heavy chain上皮肌上皮癌：CK、P63、SMA、Vimentin、S－100、Myosin－heavy chain 导管腺癌：CK、P63、SMA、AR、HER2、Myosin－heavy chain多形性腺瘤：CK、P63、SMA、S－100、GFAP、Myosin－heavy chain神经内分泌癌：CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8／18肺神经内分泌癌：CD56、CD57、Syn、CgA、CK、CK8／18、CD99、TTF－1、P63、Sp－B甲状腺乳头状癌：Tg、TTF－1、CK19、HMBE－1、Gelactin－3、Ki－67、TPO 甲状腺髓样癌：Tg、CT、CD56、CD57、Syn、CgA、CEA肾上腺皮质癌：CK、CEA、Inhibin、Melan－A、CD10、CgA、Syn、S100肾上腺嗜铬细胞瘤：Syn、CgA、S－100、CK、EMA、Inhibin、Melan－A、肾上腺外副神经节瘤：Syn、CgA、S－100、CK、EMA、Inhibin、Melan－A、GFAPMerkel细胞癌：CK7、CK20、Syn、CgA、CK、CD99促纤维增生性小圆细胞肿瘤：CK、EMA、CD99、S－100、Des、Syn、CgA、尤文／PNET／视／嗅／髓母细胞瘤：CD99、S－100、Syn、CgA、CD56、CD57、GFAP、Vimentin上皮样血管平滑肌脂肪瘤：HMB45、S－100、Melan－A、CD34、CK、SMA、Vimentin上皮样血管瘤：CK、CD34、CD31、CD68、EMA孤立性纤维性肿瘤：CD34、Bcl－2、CD99、S－100、CK、Vimentin、SMA 间皮瘤：CK5／6、HMBE－1、Calretinin、TTF－1、D2－40、CK、WT1横纹肌（肉）瘤：MyoD1、Myogenin、Desmin、SMA、CK、S100、CD99滑膜肉瘤：EMA、CK、CD34、CD99、CD68、S－100、Bcl－2、Vimentin皮隆突／恶纤组：CD34、CD68、S－100、SMA、Vimentin血管球瘤：EMA、CK、CD34、SMA、S－100血管周肌细胞瘤：EMA、CK、CD34、SMA、S－100、Desmin梭形／多形性脂肪：CD34、SMA、S－100、HMB45、CK、CD31、CD68脊索／副脊索瘤：SMA、S－100、EMA、CK、GFAP、CD68腱鞘巨细胞瘤：SMA、MSA、Desmin、CK、Vimentin平滑肌（肉）瘤：SMA、MSA、Desmin、CK、S－100、CD34、Vimentin软骨母细胞瘤：CD99、S－100、CK、Vimentin结节性筋膜炎：CK、SMA、MSA、DES、CD68、S100、Vimentin缺血性筋膜炎：VIM、SMA、CD68、DES、S100、CD34、Vimentin肌纤维瘤／肌纤维瘤病：VIM、SMA、Actin、S100、EMA、CK、Vimentin硬化性纤维母细胞瘤：VIM、SMA、CK、DES、EMA、S100、CD34乳腺型肌纤维母细胞瘤：DES、CD34、EMA钙化性腱膜纤维瘤：VIM、SMA、MSA、CD99、S100血管肌纤维母细胞瘤：DES、SMA、Actin、ER、PR、CD34、S100、CK、fast myosin富于细胞性血管纤维瘤：VIM、CD34、DES、Actin、SMA、MSA项型纤维瘤：VIM、CD34、CD99、DES、ActinGardner纤维瘤：VIM、CD34、SMA、MSA、DES、ER、PR钙化性纤维性肿瘤：Vim、VⅢ因子、XⅢa因子、Des、Actin、S100、CD31、CD34、CK巨细胞血管纤维瘤：CD34、CD99、Bcl－2韧带样型纤维瘤：Vim、SMA、Des、S100脂肪纤维瘤病：CD34、Bcl－2、S100、Actin、EMA、CK、Des、CD99炎症性肌纤维母细胞性肿瘤：Vim、SMA、Des、CK、S100、ALK、CD117低度恶性肌纤维母细胞瘤：Actin、Des、CD34、CD99、S100、CK黏液炎症性肌纤维母细胞瘤：Vim、CD34、CD68、SMA、CK、LCA、CD30、T and B七、转移性肿瘤鉴别转移性肺／肝癌：CK7、CK20、Villin、CEA、TTF－1、CK、AFP、CD34、Hepatocyte转移性肺／胃肠癌：CK7、CK20、Villin、CEA、TTF－1、Sp－B、CDX－2转移性肺／前列腺癌：CK7、CK20、Villin、TTF－1、CK、Sp－B、PSA、PSAP 转移性肺／甲状腺癌：CK7、CK20、Villin、TTF－1、CK、Sp－B、TG转移性腺／鳞癌：CKAE1、CKAE3、CK8／18、CK5／6、EMA、CD15、P63 转移性肺／鼻咽癌：CK7、CK20、Villin、TTF－1、CK、Sp－B、EMA、EBV食道低分化癌／神经内分泌癌：Syn、P63、CgA、CD56、CD99、CKAE3、CK5／6转移性卵巢粘液／浆液性癌：CK7、CK20、Villin、CEA、TTF－1、CA125、CDX－2垂体瘤：TSH、FSH、GH、LH、ACTH、PrL、P53胶质瘤：GFAP、MBP、Vim、EMA、S－100少突胶质细胞瘤：Pax－5、GFAP、MBP、Vim、EMA、S－100、CD57胶质肉瘤：GFAP、CD68、Vim、S－100、Ki－67节细胞胶质瘤：Syn、CgA、GFAP、S－100、CD68、Vim、Ki－67神经束膜瘤：S－100、EMA、GFAP、CK、Vim恶性外周神经鞘瘤：S－100、CK、HMB45、Desmin、SMA、MyoD1、CD57、MBP脑膜瘤：GFAP、EMA、Vim、S－100神经纤维／神经鞘瘤：GFAP、EMA、Vim、S－100、CK中枢神经细胞瘤：GFAP、S－100、Syn、CD57、MBP、EMA、CgA、Calretinin室管膜瘤：EMA、CK、S－100、GFAP、Syn、CD57、MBP、脉络丛乳头状瘤：GFAP、CK、S－100、Syn、EMA、Ki－67、CgA颅咽管瘤：CKAE1、EMA、GFAP、CKAE3、Ki－67颅内血管母细胞瘤：CD34、CD31、EGFR、CK、EMA、VEGF浸润性乳腺癌：P53、Bcl－2、ER、PR、HER2、E－Cadherin、Ki－67、CK7、GCDFP－15浸润性筛状癌／腺样囊性癌：ER、PR、HER2、P63、Laminin实性神经内分泌癌：ER、PR、HER2、GCDFP－15、CK7、CK20、CgA、Syn子宫内膜样肿瘤／宫颈腺癌：Vim、CK、ER、PR、Inhibin、P16、CEA子宫内膜间质肿瘤：Vim、CD10、SMA、Inhibin移行细胞癌：CA125、CK7、CK20、P63颗粒细胞瘤：CD99、Inhibin、Vim、S100、SMA、CK、CK7、EMA卵泡膜瘤－纤维瘤：Vim、Inhibin硬化性的间质瘤：Vim、Des、SMA、InhibinSertoli－间质细胞瘤：Vim、Inhibin、EMA、Ker、ER、PR无性细胞瘤：Vim、CD117、PLAP、CK、Des、CEA、S100卵黄囊瘤：AFP、CK、CD30、ER、PR胚胎性癌：AFP、CD30、CK非妊娠绒毛膜癌：CK、hPL、－HcgP53、Bcl－2、PCNA、Ki67、P－gp、TOPOⅡα、GSTπ十一、CIN病变分级检测指标P16、P53、Ki－67、CD68、Pro－EXC。