柱色谱实验操作方法
柱色谱实验报告
柱色谱实验报告柱色谱实验报告引言：柱色谱（Column Chromatography）是一种广泛应用于化学、生物化学、药学等领域的分离技术。
本次实验旨在通过柱色谱技术对混合物进行分离和纯化，以了解其原理和应用。
实验材料与方法：1. 实验材料：柱色谱柱、样品混合物、溶剂、色谱柱填料等。
2. 实验方法：a. 准备柱色谱柱：将填料均匀填充至柱内，注意保持填料层的均匀性。
b. 样品预处理：将待分离的混合物溶解于合适的溶剂中，并进行必要的前处理，如过滤、浓缩等。
c. 样品加载：将预处理好的样品溶液缓慢地加入柱中，避免产生气泡。
d. 溶剂选择：根据样品的特性选择合适的溶剂体系，以实现样品分离。
e. 溶剂梯度洗脱：通过改变溶剂体系中溶剂的组成，控制样品在柱内的停留时间，实现样品分离。
f. 分离效果评价：通过观察柱床上的色带，并进行必要的检测手段，如紫外可见光谱、质谱等，评价分离效果。
实验结果与讨论：柱色谱实验的结果主要通过观察柱床上的色带来进行评价。
色带的宽度和形状可以反映样品的分离程度，色带越窄越尖锐，说明分离效果越好。
在实验过程中，我们可以根据需要收集不同色带的组分，进一步进行纯化和分析。
柱色谱实验的成功与否受到多个因素的影响，其中包括填料的选择、溶剂体系的优化、样品的预处理等。
填料的选择应根据样品的性质和分离要求来确定，不同填料具有不同的亲疏水性和分离能力。
溶剂体系的优化是柱色谱实验中关键的一步，通过调整溶剂的极性和流动速度，可以实现对样品的有效分离。
样品的预处理也是确保柱色谱实验成功的重要环节，如样品的过滤、浓缩等，可以避免填料堵塞和背景噪音的干扰。
柱色谱实验不仅可以用于分离和纯化混合物，还可以用于定性和定量分析。
在实验中，我们可以通过收集不同色带的组分，进行进一步的检测和分析。
例如，通过紫外可见光谱检测，可以确定某个组分的最大吸收波长，从而进行定性和定量分析。
此外，柱色谱实验还可以与其他分析方法相结合，如质谱联用、核磁共振等，进一步提高分析的准确性和灵敏度。
中学生奥赛化学实验培训-柱色谱
柱色谱一、基本原理：甲基橙和亚甲基蓝均为指示剂，它们的结构式如下： N N NaO 3S N(CH 3)2甲基橙 S N(H 3C)2N N +(CH 3)2Cl -亚甲基蓝由于甲基橙和亚甲基蓝的结构不同，极性不同，吸附剂对它们的吸附能力不同，洗脱剂对它们的解析速度也不同。
极性小、吸附能力弱、解吸速度快的亚甲基蓝先被洗脱下来，而极性大、吸附能力强、解吸速度慢的甲基橙后被洗脱下来，从而使两种物质得以分离。
本实验以中性氧化铝作为吸附剂，95％乙醇作为洗脱剂，先洗出亚甲基蓝，再用氨水作洗脱剂把甲基橙洗脱下来。
二、实验步骤:取口径10mm ，长200mm 的层析柱一根，固定在铁架上，向柱中倒入95％乙醇至柱高的1/2处，通过一个干燥的玻璃漏斗慢慢地加入层析用的中性氧化铝（约8g ），待氧化铝粉末在柱内有一定沉积高度时，打开活塞，用锥形瓶作接收瓶，控制液体流速约为1滴／秒，并用木棒或带有橡皮管的玻棒轻轻敲打柱身下部，使氧化铝装填紧密，装满100mm 高度后在上面加一层石英砂（约5mm ）。
操作时要注意吸附剂始终不能露出液面。
当乙醇液面刚好流至石英砂平面相切时，立即关闭活塞，向柱内滴加10滴甲基橙和亚甲基蓝的混合物（乙醇溶液），打开活塞，待液面降至石英砂层时用少量95％乙醇洗下附在管壁的色素（少量多次），然后用95％乙醇作为洗脱剂，控制流速约为1滴／秒，当亚甲基蓝色带刚洗出时，立即更换锥形瓶收集洗脱液，直至洗脱液无色。
更换锥形瓶，并改用3%氨水继续洗脱，当甲基橙色带刚洗出时，立即更换锥形瓶收集洗脱液，待甲基橙全部被洗脱下来，即分离完全。
量出不同颜色组分的体积，记录数据。
实验报告实验台号姓名一、实验步骤、实验现象、实验记录:二、数据记录：记录监考老师签字亚甲基蓝溶液的体积/mL甲基橙溶液的体积/mL三、思考题：1．.装柱不均匀或者有气泡、裂缝，将会造成什么后果？如何避免？2．极性大的组分为什么要用极性较大的溶剂洗脱？3．在氧化铝柱子上若分离下列各组混合物，哪一个组分先被洗脱下来？NH2NO2O2N NH2和(1)N N N N N N和(2)。
柱色谱是较经典的无机物分离技巧[新版]
![柱色谱是较经典的无机物分离技巧[新版]](https://img.taocdn.com/s3/m/6cfaa615df80d4d8d15abe23482fb4daa58d1d90.png)
柱色谱是较经典的有机物分离技术，原理和薄层色谱相同，但装置有所不同，主要由一个均匀玻璃柱和填充填料组成，填料是决定柱效的主要因素，填料必须满足具有不溶于所使用流动相、不使欲分离的样品破坏或分解、惰性大、可逆性强和吸附容量大。
同时，填料颗粒直径要均匀。
最常见的柱色谱是硅胶色谱、氧化铝色谱、离子交换柱色谱、聚酰胺柱色谱和凝胶柱色谱。
分配柱色谱是利用混合物中各组分在两种不相混溶的液体之间的分配系数不同，而得到分离的方法，分为正相和反相分配色谱两种类型：正相分配色谱：以水或亲水性溶剂为固定（液）相，以水不相混溶的有机溶剂作移动相的分配色谱称为正相分配色谱。
一般而言，分离水溶性或极性较大的成分，如生物碱、苷类、糖类、有机酸等化合物，常用正相分配色谱。
反相分配色谱：以亲脂性有机溶剂作固定（液）相，以水或亲水性溶剂作移动相的分配色谱称为反相分配色谱。
当分离脂溶性或极性较小的成分，如高级脂肪酸、油脂、游离甾体等物质时，常用反相分配色谱。
实践中有70%以上的分配色谱都采用反相色谱。
分配柱色谱往往适用于分离水溶性或极性较大的组分，如生物碱、苷类、糖类、有机酸、酚类及氨基酸的衍生物；对某些非极性化合物，如油脂、甾体等物质，可采用反相分配柱色谱法。
应用实例：狄戈辛（异羟基洋地黄毒苷）的分离支持剂：国产层析硅胶80 100目，加2/3量的水（以乙酸乙酯饱和），调匀，再以乙酸乙酯（水饱和）浸泡，调成稀糊状，湿法装柱，柱直径与长度比1:2 以上。
实验方法：取样品与1 2倍量硅胶磨匀，加入柱顶，用水饱和的乙酸乙酯（含0.5%甲醇）洗脱，分部收集，各流分均作纸色谱及薄层色谱检查，比移值相同的流分合并，减压蒸干，以甲醇结晶，得到洋地黄毒苷、羟基洋地黄毒苷、异羟基洋地黄毒苷三种单体。
吸附柱色谱是将待分离混合物样品均匀地加在装有吸附剂的柱子中，再加适当的溶剂（洗脱剂）冲洗，由于吸附剂对各组分吸附能力不同，各组分在柱中向下移动的速度不同，吸附力最弱的组分随溶剂首先流出，通过分段定量收集洗脱液而使各组分得到分离。
有机化学实验十柱色谱
实验十柱色谱一．实验目的：1. 学习柱色谱的原理及方法。
二．实验重点和难点：1.学习柱色谱的原理及方法。
实验类型：基础性实验学时：4学时三．实验装置和药品：主要实验仪器：色谱柱(或25mL碱式滴定管) 25mL锥形瓶普通漏斗玻璃棉或脱脂棉量筒试管电子天平烧杯主要化学试剂：石油醚（600C—900C）丙酮中性氧化铝(100--200目) 500g菠菜色素95%乙醇四．实验装置图：五．实验原理：图 1 柱色谱装置柱色谱法是色谱方法之一。
色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。
(一)色谱法的基本原理：是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能(即分配) 的不同，或其它亲和作用的性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。
(二)色谱法的分类：1.根据组分在固定相中的作用原理不同，可分为吸附善谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱等。
2.根据操作条件的不同，可分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱、气相色谱及高效液相色谱等类型。
(三)柱色谱原理：柱色谱是化合物在液相和固相之间的分配，属于固--液吸附层析。
图1就是一般柱色谱装置。
柱内装有”活性”固体(固定相) 如氧化铝或硅胶等。
液体样品从柱顶加入流经吸附柱时，即被吸附在柱的上端，然后从柱顶加入洗脱溶剂冲洗。
由于固定相对各组分吸附能力不同，以不同速度沿柱下移，形成若干色带。
再用溶剂洗脱，吸附能力最弱的组分随溶剂首先流出，分别收集各组分，再逐个鉴定。
1.吸附剂：常用的吸附剂有：氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等。
吸附剂一般要经过纯化和活性处理。
选择吸附剂的首要条件是与被吸附物及展开剂均无化学作用。
吸附能力与颗粒大小有关。
颗粒太粗，流速快分离效果不好。
颗粒小，表面积大，吸附能力就高，但流速慢，因此应根据实际分离需要而定。
色谱用的氧化铝可分酸性、中性和碱性三种。
2.溶质的结构与吸附能力的关系：化合物的吸附能力与分子极性有关。
中药化学实验简答题
1.简述柱色谱的基本操作方法（湿法）。
（1）吸附剂的填装。
将吸附剂与洗脱剂混合，搅拌除去空气泡，徐徐倾入色谱柱中，然后加入洗脱剂将附着在管壁的吸附剂洗下，使色谱柱面平整。
待填装吸附剂所用洗脱剂从色谱柱自然流下，至液面和柱表面相平时，即加供试品溶液。
（2）供试品的加入。
将供试品溶于开始洗脱时使用的洗脱剂中，再沿管壁缓缓加入，注意勿使吸附剂翻起。
或将供试品溶于适当的溶剂中，与少量吸附剂混匀，再使溶剂挥发去尽使呈松散状，加在已制备好的色谱柱上面。
如供试品在常用溶剂中不溶，可将供试品与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。
（3）洗脱。
通常按洗脱剂洗脱能力大小递增变换洗脱剂的品种和比例，分部收集流出液，至流出液中所含成分显著减少或不再含有时，再改变洗脱剂的品种和比例。
操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。
2.简述溶剂离心洗涤的方法以及离心的注意事。
方法：将盛有溶液和沉淀的混合物的离心瓶（瓶盖旋紧）放入离心机的套筒内，盖好离心盖，设定好离心时间与转速，起动时要慢，逐渐加快，停止离心操作时，应等待离心机完全停止工作时再打开盖。
注意事项：为了防止由于两支管套中重量不均衡所引起的振动而造成轴的磨损，必须在放入离心管的对面位置上，放一同样大小的试管，内中装有与混合物等体积的水，以保持平衡，确保离心机在工作的时候，仪器的盖子始终保持关闭状态。
3.简述索氏提取方法及注意事项。
提取方法：1)折滤纸斗。
取滤纸折成筒状，一端封口，将事先准备好的样品放入，并封另一端口。
注意纸筒高度要低于虹吸管高度。
2)安置装置。
从下到上一次安置烧瓶、索氏提取器、球形冷凝管，使烧瓶刚好被水浴锅淹没。
3)提取。
加入溶剂，浸没纸筒，液面高于虹吸管1CM左右。
水浴锅温度设置为溶剂的沸点。
一定时间后，比如虹吸管中的溶剂颜色已无色，移去水浴锅，移去冷凝管。
注意事项：滤纸筒包样品时应严实，防止漏出堵塞虹吸管，其高度不能超过虹吸管，否则提取时，高出虹吸管的那部分就不能浸在溶剂中，提取效果不佳。
大学柱色谱实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解柱色谱分离的基本原理和方法。
2. 掌握柱色谱实验的操作技能，包括样品的制备、色谱柱的填充、洗脱剂的选择和样品的收集。
3. 学习如何分析色谱分离的结果，并能够根据分离效果评估实验条件。
二、实验原理柱色谱是一种利用混合物中各组分在固定相和流动相之间分配系数的不同来实现分离的技术。
实验中，将含有目标组分的混合物通过填充有吸附剂的色谱柱，由于不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同，它们在色谱柱中的移动速度也会不同，从而实现分离。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 柱色谱柱（玻璃或塑料）- 漏斗- 烧杯- 滴定管- 铁架台- 秒表2. 试剂：- 吸附剂（如硅胶、氧化铝等）- 混合样品（含目标组分）- 洗脱剂（根据目标组分的极性选择）- 标准样品（用于对照和定量分析）四、实验步骤1. 准备色谱柱：将吸附剂倒入漏斗中，用滴定管缓慢倒入色谱柱中，使其填充紧密。
2. 样品制备：准确称取一定量的混合样品，用适量的溶剂溶解。
3. 样品上样：将样品溶液缓慢滴加到色谱柱顶部，注意控制流速。
4. 洗脱：将洗脱剂滴加到色谱柱顶部，控制流速，收集流出液。
5. 收集分离组分：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间。
6. 样品分析：将收集到的各组分进行进一步的分析，如薄层色谱、红外光谱等。
五、实验结果与分析1. 分离效果：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间，分析分离效果。
2. 定量分析：根据收集到的各组分量，计算其含量，并与标准样品进行对照。
3. 优化实验条件：根据分离效果，分析实验条件对分离效果的影响，如吸附剂类型、洗脱剂类型、流速等，并对实验条件进行优化。
六、问题与讨论1. 实验中遇到的问题：- 色谱柱填充不均匀，导致分离效果不佳。
- 洗脱剂选择不当，导致分离效果不佳。
- 流速控制不当，导致分离效果不佳。
2. 解决方法：- 优化色谱柱填充方法，确保填充均匀。
- 根据目标组分的极性选择合适的洗脱剂。
柱色谱实验报告
柱色谱实验报告
本实验的目的是通过柱色谱技术来分离混合物中的苯酚和甲苯，并测定两者的含量。
一、实验原理
柱色谱法是对物质进行分离和纯化的一种常用方法。
本实验中
使用的是正相柱色谱，即静相和流动相极性相似的柱子进行分离，这种柱色谱技术常用于分离具有不同极性的物质。
流动相越极性，进样物质在静相中沿着柱子下部逐渐吸附，其残留成分则向上移动，沿柱子逐渐分离。
这样，在离子交换、氢键和范德华力等作
用下，不同物质被吸附在流动相和静相界面处，并呈现分离的效果。
二、实验步骤
第一步：准备样品
取出1g苯酚甲苯混合物称到50ml瓶中，加入约10ml甲醇溶
解均匀。
第二步：制备流动相
将n-正己烷和乙酸乙酯按2:1的体积比加入到流动相瓶中，并摇匀。
第三步：进样、柱洗和分离
将制备好的样品注入柱子中，花费30分钟进行洗柱，在分离过程中，维持均匀的流速。
第四步：柱洗结束和分析
柱洗结束后，将柱子移动到荧光检测器上，即可对样品进行定量分析和浓度测定。
三、实验结果
通过实验分析得出，样品中苯酚和甲苯其峰值分别为11.23和22.45，而其相对峰度分别为0.353和0.659。
根据这些结果，我们可以得出样品中苯酚和甲苯的质量分数分别为35.3%和65.9%。
四、实验结论
通过这次柱色谱实验，我们成功地将混合物中的苯酚和甲苯分离，并测定出两者的质量分数。
此次实验使用的是正相柱色谱技术，柱子中的静相和流动相在极性上相似，达到了较为明显的分离效果。
总而言之，在实验过程中我们掌握了柱色谱法的基本原理和常用方法，对于学习化学分析方法的同学来说，具有较高的参考价值。
反向柱色谱实验流程
反向柱色谱实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!反向柱色谱是一种常用的色谱技术，用于分离和纯化化合物。
以下是反向柱色谱的实验流程：1. 样品制备将待分离的样品溶解在适当的溶剂中，通常使用极性较小的有机溶剂，如甲醇、乙腈或氯仿。
柱色谱实验操作方法
柱色谱实验操作方法柱色谱是一种分离和纯化混合物的常用方法。
在柱色谱实验中，样品溶液根据其化学性质和物理性质，经过柱填料的作用，以不同的速度在柱中通过，从而实现分离的目的。
以下是柱色谱实验的详细操作方法。
1.实验准备-柱子准备：根据样品大小和分离要求选择合适尺寸的柱子，常见的有玻璃柱和不锈钢柱。
-填料选择：选择合适的填料，常见的包括硅胶、活性炭、聚合物凝胶等。
-确定流动相：根据样品的性质，选择合适的流动相，常见的有水、甲醇、乙酸等。
-准备样品溶液：按照实验要求，将待分离的混合物溶解在合适的溶剂中。
2.填充柱子-取一定量的填料，通过筛网除去颗粒不均匀的填料。
-将填料装入柱子中，并用适当的压缩手段均匀填充。
填充后检查填料是否紧密。
-用柱封或塑料蓟将填料封在柱子内，注意封口的紧密度。
3.预平衡填料-以一定的流速通过柱子，添加流动相，使其贯穿整个柱子。
-预平衡填料的目的是除去填料中的杂质和对填料进行活化。
4.样品加载-将样品溶液注入柱子顶部，注意使其均匀润湿整个填料床。
-下流动相使样品在填料中通过，注意控制流速。
5.收集分离物-样品中不同组分根据其分配系数以不同速度通过柱子。
-收集分离物时，可以根据需要采用分级收集、分段收集等方式。
6.扫描和分析-可以使用紫外可见光谱仪、质谱仪等设备对所收集到的分离物进行扫描和分析。
-根据分析结果，可以确定目标化合物在样品中的含量和纯度。
7.恢复填料-实验结束后，可以将填料从柱子中取出，用适当的方法进行清洗和再生，以便下次使用。
需要注意的是，在进行柱色谱实验时，应确保仪器设备的正常运行，流速的控制，样品的稀释和质量的准确称量。
在实验过程中也需要注意安全操作，避免发生意外。
《柱色谱分离实验》课件
硫酸或氢氧化钠：用 于调节洗脱液的pH 值。
蒸馏水：用于制备洗 脱液和清洗实验器具 。
03 实验步骤与操作
实验前的准备
实验材料
硅胶、氧化铝、活性炭、 硅藻土等；玻璃色谱柱、 吸附剂、砂芯漏斗、脱脂 棉等；样品和溶剂。
实验设备
分液漏斗、烧杯、玻璃棒 、天平等。
实验试剂
不同比例的溶剂，如石油 醚、乙酸乙酯、乙醇等。
指标的合理性。
误差分析
对实验误差进行分析，找出误差产 生的原因，并提出减小误差的措施 。
结果讨论
根据实验结果，讨论柱色谱分离实 验的影响因素和优化方法，为改进 实验提供依据。
05 结论与展望
实验结论总结
柱色谱分离实验是一种有效的分离方法，能够将混合物中的各组分进行有效的分离 。
通过实验，我们观察到了各组分在柱子上的吸附和解吸过程，并成功分离出了目标 组分。
换吸附剂。
03
实验结果分析
在实验结束后，应对实验结果进行分析和总结，以便更好地了解各组分
的性质和含量。同时，应将实验数据和结果记录在实验报告中，以便后
续的查阅和分析。
04 实验结果与分析
实验结果展示
分离后的色谱图
展示实验中得到的色谱图，包括 各组分的出峰时间、峰高、峰面 积等数据。
分离效果评估
通过对比标准品和实验样品的色 谱图，评估分离效果，包括分离 度、纯度等指标。
实验操作流程
01
02
03
04
准备色谱柱
选择合适的吸附剂，填充色谱 柱，确保填充均匀。
上样
将样品溶液缓慢加入色谱柱顶 部，同时用少量溶剂冲洗砂芯
漏斗，以避免样品残留。
洗脱
选择合适的溶剂系统，按照一 定顺序进行洗脱，收集洗脱液
柱色谱实验操作方法
柱色谱实验操作方法1.准备工作-准备柱色谱仪和配套设备，如进样器、检测器等。
-准备柱涂层材料和填充物，并根据实验需要选择填充物的类型和尺寸。
-准备所需的溶剂和样品，并按照实验要求配置溶液。
2.柱的组装-将填充物装入柱体中，确保填充物均匀分布，并用细金属网或玻璃纤维滤纸封堵柱底，以防止填充物从柱底流失。
-调整柱底的封堵物高度，使其与填充物的顶部对齐，确保填充物在柱中均匀分布。
-在柱顶部安装适当的进样器，并确保与柱体连接紧密，防止泄露。
3.柱的预处理-将柱固定在色谱仪中的柱座上，并根据仪器的要求进行预处理。
-使用适当的溶剂，通过柱进行逆流洗涤，以去除填充物中的杂质和未反应的试剂。
根据需要，可以重复该步骤多次。
4.样品进样-将适量的样品注入进样器中，并确保进样器封闭，以避免样品的挥发和外部污染。
-根据实验要求，可以进行预柱处理，即预先通过柱洗脱一部分溶剂和杂质。
5.色谱条件的选择-根据样品的性质和分离要求，选择适当的流动相（溶剂组合）和梯度条件。
-选择合适的检测器，如紫外-可见光检测器、荧光检测器或电导率检测器。
6.柱色谱的进行-打开柱色谱仪，设置流动相的流速和梯度条件。
-注入进样器中的样品将通过柱流动，并在填充物上发生分配和吸附作用，不同组分随时间逐渐分离。
-根据检测器上的信号变化，可记录和监测分离的过程，并对所需组分进行定量分析。
7.柱后处理-根据实验的需要，可以选择对流出柱的色谱峰进行采集和进一步分析。
-清洗使用过的柱，将柱床中的填充物重新调整均匀，并存放在适当的条件下，防止填充物的老化和损坏。
8.数据处理-对柱色谱图进行解析和数据处理，包括峰面积和保留时间的测量，峰的定性和定量分析以及样品含量的计算。
柱色谱实验操作方法(终审稿)
柱色谱实验操作方法公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]一、液-固色谱原理液-固色谱是基于吸附和溶解性质的分离技术，柱色谱属于液-固吸附色谱。
当混合物溶液加在固定相上，固体表面借各种分子间力（包括范德华力和氢键）作用于混合物中各组分，以不同的作用强度被吸附在固体表面。
由于吸附剂对各组分的吸附能力不同，当流动相流过固体表面时，混合物各组分在液-固两相间分配。
吸附牢固的组分在流动相分配少，吸附弱的组分在流动相分配多。
流动相流过时各组分会以不同的速率向下移动，吸附弱的组分以较快的速率向下移动。
随着流动相的移动，在新接触的固定相表面上又依这种吸附-溶解过程进行新的分配，新鲜流动相流过已趋平衡的固定相表面时也重复这一过程，结果是吸附弱的组分随着流动相移动在前面，吸附强的组分移动在后面，吸附特别强的组分甚至会不随流动相移动，各种化合物在色谱柱中形成带状分布，实现混合物的分离。
?二、柱色谱分离条件（1）固定相选择柱色谱使用的固定相材料又称吸附剂。
吸附剂对有机物的吸附作用有多种形式。
以氧化铝作为固定相时，非极性或弱极性有机物只有范德华力与固定相作用，吸附较弱；极性有机物同固定相之间可能有偶极力或氢键作用，有时还有成盐作用。
这些作用的强度依次为：成盐作用> 配位作用> 氢键作用> 偶极作用> 范德华力作用。
有机物的极性越强，在氧化铝上的吸附越强。
常用吸附剂有氧化铝、硅胶、活性炭等（表1）。
?色谱用的氧化铝可分酸性、中性和碱性三种。
酸性氧化铝pH约为4～，用于分离羧酸、氨基酸等酸性物质；中性氧化铝pH值为，用于分离中性物质，应用最广；碱性氧化铝pH为9～10，用于分离生物碱、胺和其它碱性化合物等。
吸附剂的活性与其含水量有关。
含水量越低，活性越高。
脱水的中性氧化铝称为活性氧化铝。
硅胶是中性的吸附剂，可用于分离各种有机物，是应用最为广泛的固定相材料之一。
活性炭常用于分离极性较弱或非极性有机物。
柱色谱分离实验ColumnChromatography高级教学
•先用乙醇 后用水
•操作
•组分颜色
装柱
加样
洗脱
收集
鉴定
•1mL样品
•加样操作 •0.5mL×2乙醇洗涤
•组分颜色
高等课件
21
三、实 验 内 容
装柱 干法装柱 湿法装柱
吸附剂装填紧密，排除 气泡。最终应使吸附剂的上 端平整，无凹凸面，无断层。
高等课件
装柱
22
• 装柱时应该注意均匀，不能有气泡，裂缝， 否则样品可能顺缝隙流动而不吸附，影响 样品的分离，应用质软的物体如吸耳球等 轻轻敲击柱身，促使吸附剂装填紧密，排 除气泡。最终应使吸附剂的上端平整，无 凹凸面．
固定相、流动相的物理状态
气—固色谱法 气—液色谱法
液—液色谱法
柱色谱法（column chromatography）
色
纸色谱法（paper chromatography）
谱 法 分 类
操作形式
薄层色谱法（TLC） 气相色谱（GC） 高效液相色谱（HPLC）
吸附色谱法
分离原理
分配色谱法 离子交换色谱法
高等课件
29
小结
色谱法在有机化学中的应用:
分离混合物 精制提纯化合物 利用比移值(Rf)鉴定化合物 跟踪反应进程
高等课件
30
色谱法的特点:
小结
分离效率高 复杂混合物,同系物,异构体等。
灵敏度高 1(10-9)
可以检测出μg• g-1(10-6)级甚至ng• g-
级的物质量。
分析速度快 分析。
几分钟或几十分钟内可以完成一个试样
高等课件
31
柱色谱法分离甲基橙和甲基蓝
高等课件
32
实验原理
仪器分析实验柱色谱
仪器分析实验柱色谱柱色谱（Column Chromatography）是一种常用于分离和纯化物质的分析技术，广泛应用于化学、生物、制药和环境等领域。
它的原理基于不同物质在固定相和移动相之间的不同亲和力，使得混合物中的组分在柱状填充物上有不同的保留时间，从而被分离开来。
柱色谱实验通常包含以下几个步骤：1.准备样品：将待分离的混合物溶解在适当的溶剂中，使其能够与移动相相互作用。
此外，还需要根据混合物的性质选择合适的柱填料和分离条件。
2.准备色谱柱：选择合适的柱子和填充物，将填充物充填到柱子中。
填充物的选择应考虑样品的性质、分离效果和分析时间等因素。
3.打磨柱子：打磨柱子用于调整填充物的均匀性和密实度，以确保柱子内部的液相流动均匀。
4.装样：将溶解好的样品注入柱子中，通常使用移液管或注射器进行装样。
样品的量应适当，以避免液相在柱子中过度膨胀或过度压缩。
5.注入移动相：通过柱子中的顶部或侧面注入适量的移动相，使其通过填充物。
6.收集分离组分：根据不同组分的保留时间，在移动相逐渐通过填充物的过程中，分离出不同的组分。
通常使用收集管或直接收集移动相中的色带来收集每个组分。
7.分析分离组分：对收集的分离组分进行性质分析，常用的方法有紫外-可见吸收光谱、质谱和红外光谱等。
8.优化和改进：根据分析结果，根据需要对实验条件进行优化和改进，以获得更好的分离结果。
柱色谱实验的优点包括：简单易操作、分离效果好、适用范围广等。
同时，柱色谱也存在一些局限性，例如对样品量要求较高、分离时间较长、柱填料的选择和调整较为困难等。
总之，柱色谱是一种常用的仪器分析实验技术，通过利用不同物质在固定相和移动相之间的亲和力差异，实现对混合物中组分的分离和纯化。
在一些特定条件下，柱色谱还能实现对不同组分的定量分析和结构表征。
柱色谱法有机实验报告
柱色谱法有机实验报告柱色谱法有机实验报告一、引言柱色谱法是一种常用的分离和纯化有机化合物的方法，它基于物质在固定相和移动相之间的分配行为。
本实验旨在通过柱色谱法，对给定的有机混合物进行分离和纯化，并通过实验结果分析柱色谱法的应用。
二、实验材料与方法1. 实验材料：（1）柱色谱柱：选择合适的柱色谱柱，如硅胶柱、薄层硅胶柱等；（2）样品：有机混合物；（3）移动相：选择合适的溶剂，如乙酸乙酯、正己烷等；（4）固定相：根据实验需要选择合适的固定相。
2. 实验方法：（1）制备柱色谱柱：将固定相均匀填充至柱色谱柱中，保持柱床的均匀性；（2）样品预处理：将有机混合物溶解于适量的溶剂中，并进行必要的前处理，如过滤、浓缩等；（3）柱色谱分离：将样品溶液加入柱色谱柱上方，并使用移动相进行柱色谱分离；（4）收集分离物：根据柱上分离物的不同特性，及时收集目标化合物。
三、实验结果与分析在本实验中，我们选择了硅胶柱作为柱色谱柱，乙酸乙酯作为移动相，进行了柱色谱分离实验。
实验结果显示，有机混合物中的化合物A、B、C成功被分离，并得到了纯化的目标化合物。
通过对实验结果的分析，我们发现柱色谱法的分离效果与固定相的选择密切相关。
固定相的选择应根据目标化合物的性质和有机混合物的组成进行合理的考虑。
在本实验中，我们选择了硅胶作为固定相，由于硅胶对极性化合物有较好的亲和性，因此能够有效地分离出目标化合物。
此外，移动相的选择也对柱色谱分离的效果有着重要的影响。
移动相的极性应与固定相相匹配，以保证化合物在两相之间的分配行为。
在本实验中，我们选择了乙酸乙酯作为移动相，由于乙酸乙酯具有一定的极性，能够与硅胶发生相互作用，从而实现有效的分离。
四、实验总结与展望通过本次柱色谱法有机实验，我们深入了解了柱色谱法的原理和应用。
柱色谱法作为一种常用的分离和纯化方法，具有操作简便、分离效果好等优点，在有机化学领域得到了广泛的应用。
然而，柱色谱法仍然存在一些局限性，如对样品量要求较高、分离速度较慢等。
柱色谱法实验报告
柱色谱法实验报告柱色谱法实验报告引言：柱色谱法是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
本实验旨在通过柱色谱法对混合溶液中的组分进行分离和定量分析，以探究其原理及应用。
实验方法：1. 实验仪器与试剂准备：将柱色谱仪、色谱柱、进样器等仪器准备妥当，并选取适当的色谱柱填料。
准备好待测样品溶液和标准溶液。
2. 柱色谱法的原理：柱色谱法是基于样品组分在固定相（色谱柱填料）和流动相（溶液）之间的分配行为进行分离的。
不同组分在固定相和流动相之间的相互作用力不同，从而导致各组分在柱中的停留时间不同。
3. 样品进样与分离：将待测样品溶液通过进样器进入色谱柱，样品组分在色谱柱中进行分离。
通过调节流动相的流速、组成和温度等条件，可以影响样品组分的分离效果。
4. 检测与分析：通过检测器检测样品组分的信号，并通过计算机或数据采集系统进行数据处理和分析，得到各组分的峰面积或峰高等参数。
结果与讨论：在实验中，我们选取了一种常用的色谱柱填料，并通过调节流动相的组成和流速等条件，成功地将待测样品溶液中的组分进行了分离。
通过检测器检测到的信号，我们可以得到各组分的峰面积或峰高，并进一步进行定量分析。
柱色谱法具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点。
通过选择不同的色谱柱填料和优化分离条件，可以实现对不同样品的高效分离和分析。
此外，柱色谱法还可以与其他分析技术结合使用，如质谱联用、紫外可见光谱检测等，进一步提高分析的准确性和灵敏度。
然而，柱色谱法也存在一些局限性。
首先，色谱柱填料的选择和样品预处理等步骤对分离效果有较大影响，需要进行合理的优化。
其次，柱色谱法对样品的纯度要求较高，可能需要进行前处理步骤，如固相萃取、液液萃取等。
此外，柱色谱法在分离非极性化合物方面相对较弱，对极性化合物的分离效果较好。
结论：柱色谱法是一种常用的分离和分析技术，通过调节色谱柱填料和流动相等条件，可以实现对样品组分的高效分离和定量分析。
柱色谱实验报告
柱色谱实验报告一、引言柱色谱是一种常用于分离和分析复杂混合物的技术。
通过不同物质成分在柱状填料中的分配和吸附作用的差异，可以将混合物中的组分分离出来并提供定量分析。
本实验旨在通过柱色谱技术，对一种未知物质中的成分进行鉴定和分析。
二、实验设备本实验使用的设备包括柱色谱系统（包括色谱柱、柱装置和检测器）、溶剂储罐、进样器、梯度泵、梯度箱等。
三、实验步骤1. 准备样品：将未知样品溶于适量的溶剂中，得到待测溶液。
需要注意的是，待测溶液在柱色谱实验中需要具备良好的溶解性和稳定性。
2. 设置柱色谱系统：根据实验要求，选择合适的色谱柱和填料材料，并安装好柱装置。
根据待测溶液的性质，选择合适的检测器和适宜的检测波长。
3. 调整流速和温度：根据填料的要求和样品的特性，逐步调整梯度泵的流速和梯度箱的温度，以保证图谱的分离效果和分析结果的准确性。
4. 样品进样和分离：将待测溶液注入进样器，设置合适的进样体积，然后将样品进样进入色谱柱。
通过溶液在填料中的相互作用，样品中的不同成分逐渐分离。
5. 数据分析和结果判读：根据检测器传送的数据，采集和记录色谱图。
根据峰形、峰高、保留时间等数据，判定样品中的不同成分，并对其进行定量分析。
四、实验结果与讨论通过柱色谱实验，我们成功地分离出了待测样品中的不同成分，并得到了色谱图谱。
根据色谱图谱的分析，我们发现在待测样品中存在着三个主要峰。
通过与标准品的对比，我们确定了这三个峰的物质成分分别为A、B和C。
进一步分析这三个物质成分，我们发现它们的保留时间分别为tA、tB和tC。
通过与已知标准品的对比，我们得到了它们在柱色谱实验中的相对保留时间trA、trB和trC。
根据这些数据，我们可以进一步计算出它们的相对保留率kA、kB和kC，这有助于对物质成分的鉴定和分析。
除了相对保留率，我们还可以通过测定各成分的峰面积，计算出它们在混合物中的质量百分含量。
这对于了解待测样品的组成和纯度非常重要。
柱色谱分离靛红和罗丹明实验报告
柱色谱分离靛红和罗丹明实验报告
一、实验目的
本实验的目的是通过柱色谱分离靛红和罗丹明，并确定其分离效果。
二、实验原理
柱色谱是一种分离物质的技术，它使用一种吸附剂填充的柱子来分离物质。
柱色谱的原理是，在柱中，物质会在吸附剂表面上分子间的相互作用和分子与吸附剂表面的相互作用下被分离。
物质在柱中的运动受到分子间的相互作用和分子与吸附剂表面的相互作用的影响，从而形成不同的分离效果。
三、实验步骤
1.准备实验设备：柱色谱仪、柱、溶液、收集池、流动相等容器等；
2.将靛红和罗丹明溶液混合，并将混合溶液倒入柱中；
3.将收集池安装在柱色谱仪上，并调节柱色谱仪的参数；
4.启动柱色谱仪，使混合溶液在柱中流动；
5.收集池中收集分离出来的靛红和罗丹明；
6.测量分离出来的靛红和罗丹明的浓度，并记录实验数据。
四、实验结果
实验结果显示，在柱色谱分离实验中，靛红和罗丹明的浓度分别为0.2mol/L和0.3mol/L。
五、结论
本实验证明，柱色谱可以有效地分离靛红和罗丹明，并确定其分离效果。
简述柱色谱的一般步骤
简述柱色谱的一般步骤
色谱法是科学分析中的重要手段，而柱色谱作为其中的一种方式，它的一般步骤可以按照以下步骤进行描述。
首先，将经过调整和处理的待测样品通过色谱柱载入。
在这个过程中，通常会使用到注射器或者其他的载入设备植入待分析样品，并且会尽可能确保样品在载入时的体积最小，以获得最佳的分离效果。
其次，待测样品在流动相的带动下，逐渐流过固定相。
不同物质在固定相和移动相中的分布系数不同，因此在流动过程中会有一部分物质先行通过，有一部分物质滞后，这就实现了物质间的分离。
接下来，分别检测出柱色谱的出口处的物质组分。
由于各组分在色谱柱中停留的时间不同，出柱的时间也就存在差异。
依次记录这些时间的差异，就可以得到待测样品的各组分信息。
最后，对得到的数据进行处理和解析。
通过专门的色谱工作站对色谱峰进行积分计算，解析出各个组分的相对含量。
并结合已知的物质库进行匹配，从而确定各个组分的具体成分。
以上四个步骤——样品载入、样品在色谱柱中的分离、样品出柱的检测、以及对色谱数据的处理和解析，构成了柱色谱的一般步骤。
具体执行的时候，还需要配合使用各种辅助设备，如色谱柱、载气、探测器、色谱工作站等。
只有熟练掌握各个步骤的方法和注意事项，才能确保柱色谱实验的准确性和有效性。
柱色谱实验操作方法
一、液-固色谱原理液-固色谱是基于吸附和溶解性质的分离技术，柱色谱属于液-固吸附色谱。
当混合物溶液加在固定相上，固体表面借各种分子间力（包括范德华力和氢键）作用于混合物中各组分，以不同的作用强度被吸附在固体表面。
由于吸附剂对各组分的吸附能力不同，当流动相流过固体表面时，混合物各组分在液-固两相间分配。
吸附牢固的组分在流动相分配少，吸附弱的组分在流动相分配多。
流动相流过时各组分会以不同的速率向下移动，吸附弱的组分以较快的速率向下移动。
随着流动相的移动，在新接触的固定相表面上又依这种吸附-溶解过程进行新的分配，新鲜流动相流过已趋平衡的固定相表面时也重复这一过程，结果是吸附弱的组分随着流动相移动在前面，吸附强的组分移动在后面，吸附特别强的组分甚至会不随流动相移动，各种化合物在色谱柱中形成带状分布，实现混合物的分离。
二、柱色谱分离条件（1）固定相选择柱色谱使用的固定相材料又称吸附剂。
吸附剂对有机物的吸附作用有多种形式。
以氧化铝作为固定相时，非极性或弱极性有机物只有范德华力与固定相作用，吸附较弱；极性有机物同固定相之间可能有偶极力或氢键作用，有时还有成盐作用。
这些作用的强度依次为：成盐作用> 配位作用> 氢键作用> 偶极作用> 范德华力作用。
有机物的极性越强，在氧化铝上的吸附越强。
常用吸附剂有氧化铝、硅胶、活性炭等（表1）。
色谱用的氧化铝可分酸性、中性和碱性三种。
酸性氧化铝pH约为4～4.5，用于分离羧酸、氨基酸等酸性物质；中性氧化铝pH值为7.5，用于分离中性物质，应用最广；碱性氧化铝pH为9～10，用于分离生物碱、胺和其它碱性化合物等。
吸附剂的活性与其含水量有关。
含水量越低，活性越高。
脱水的中性氧化铝称为活性氧化铝。
硅胶是中性的吸附剂，可用于分离各种有机物，是应用最为广泛的固定相材料之一。
活性炭常用于分离极性较弱或非极性有机物。
吸附剂的粒度越小，比表面越大，分离效果越明显，但流动相流过越慢，有时会产生分离带的在重叠，适得其反。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
一、液-固色谱原理
液-固色谱是基于吸附和溶解性质的分离技术，柱色谱属于液-固吸附色谱。
当混合物溶液加在固定相上，固体表面借各种分子间力（包括范德华力和氢键）作用于混合物中各组分，以不同的作用强度被吸附在固体表面。
由于吸附剂对各组分的吸附能力不同，当流动相流过固体表面时，混合物各组分在液-固两相间分配。
吸附牢固的组分在流动相分配少，吸附弱的组分在流动相分配多。
流动相流过时各组分会以不同的速率向下移动，吸附弱的组分以较快的速率向下移动。
随着流动相的移动，在新接触的固定相表面上又依这种吸附-溶解过程进行新的分配，新鲜流动相流过已趋平衡的固定相表面时也重复这一过程，结果是吸附弱的组分随着流动相移动在前面，吸附强的组分移动在后面，吸附特别强的组分甚至会不随流动相移动，各种化合物在色谱柱中形成带状分布，实现混合物的分离。
二、柱色谱分离条件
（1）固定相选择
柱色谱使用的固定相材料又称吸附剂。
吸附剂对有机物的吸附作用有多种形式。
以氧化铝作为固定相时，非极性或弱极性有机物只有范德华力与固定相作用，吸附较弱；极性有机物同固定相之间可能有偶极力或氢键作用，有时还有成盐作用。
这些作用的强度依次为：
成盐作用> 配位作用> 氢键作用> 偶极作用> 范德华力作用。
有机物的极性越强，在氧化铝上的吸附越强。
常用吸附剂有氧化铝、硅胶、活性炭等（表1）。
色谱用的氧化铝可分酸性、中性和碱性三种。
酸性氧化铝pH约为4～4.5，用于分离羧酸、氨基酸等酸性物质；中性氧化铝pH值为7.5，用于分离中性物质，应用最广；碱性氧化铝pH为9～10，用于分离生物碱、胺和其它碱性化合物等。
吸附剂的活性与其含水量有关。
含水量越低，活性越高。
脱水的中性氧化铝称为活性氧化铝。
硅胶是中性的吸附剂，可用于分离各种有机物，是应用最为广泛的固定相材料之一。
活性炭常用于分离极性较弱或非极性有机物。
吸附剂的粒度越小，比表面越大，分离效果越明显，但流动相流过越慢，有时会产生分离带的在重叠，适得其反。
（2）流动相选择
色谱分离使用的流动相又称展开剂。
展开剂对于选定了固定相的色谱分离有重要的影响。
在色谱分离过程中混合物中各组分在吸附剂和展开剂之间发生吸附-溶解分配，强极性展开剂对极性大的有机物溶解的多，弱极性或非极性展开剂对极性小的有机物溶解的多，随展开剂的流过不同极性的有机物以不同的次序形成分离带。
在氧化铝柱中，选择适当极性的展开剂能使各种有机物按先弱后强的极性顺序形成分离带，流出色谱柱。
当一种溶剂不能实现很好的分离时，选择使用不同极性的溶剂分级洗脱。
如一种溶剂作为展开剂只洗脱了混合物中一种化合物，对其它组分不能展开洗脱，需换一种极性更大的溶剂进行第二次洗脱。
这样分次用不同的展开剂可以将各组分分离。
三、柱色谱分离操作
（1）柱色谱装置
柱色谱装置包括色谱柱、滴液漏斗、接受瓶。
色谱柱有玻璃制的和有机玻璃制的，后者只用于水做展开剂的场合。
色谱柱下端配有旋塞，色谱柱的长径比应不小于7～8:1。
（2）分离操作
①装柱：
色谱柱的装填有干装和湿装两种方法。
干装时，先在柱底塞上少许玻璃纤维，再加入一些细粒石英砂，然后将准备好的吸附剂用漏斗慢慢加入干燥的色谱柱中，边加入边敲击柱身，务必使吸附剂装填均匀，不能有空隙。
吸附剂用量应是被分离混合物量的30～40倍，必要时可多达100倍。
加够以后，在吸附剂上覆盖少许石英砂。
湿装时，将准备好的吸附剂用适量展开剂调成可流动的糊，如干装时一样准备好色谱柱，将吸附剂糊小心地慢慢加入柱中，加入时不停敲击柱身，务必使吸附剂装填均匀，不能有气泡和裂隙，还必须使吸附剂始终被展开剂覆盖。
②洗柱：
干柱在使用前要洗柱，目的是排除吸附剂间隙中的空气，使吸附剂填充密实。
洗柱时从柱顶由滴液漏斗加入所选的展开剂，适当放开柱下端的旋塞。
加入时先快
加，再放慢滴加速度，使吸附剂始终被展开剂覆盖。
洗柱时也要轻敲柱身，排出气泡。
③装样和洗脱：
将待分离的混合物用最小量展开剂溶解，小心加入柱中。
待混合物溶液液面接近吸附剂上的石英砂时，旋开滴液漏斗旋塞，滴加展开剂。
滴加速度以1～2滴/秒为适度。
整个过程中，应使展开剂始终覆盖吸附剂。
1.吸附柱色谱
色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管，下端用棉花或玻璃纤维塞住，管内装入吸附剂。
吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀，以保证良好的分离效果。
除另有规定外，通常多采用直径为0.07～0.15mm的颗粒。
色谱柱的大小，吸附剂的品种和用量，以及洗脱时的流速，均按各品种项下的规定。
(1) 吸附剂的填装
①干法
将吸附剂一次加入色谱管，振动管壁使其均匀下沉，然后沿管壁缓缓加入洗脱剂；或在色谱管下端出口处联接活塞，加入适量的洗脱剂，旋开活塞使洗脱剂缓缓滴出，然后自管顶缓缓加入吸附剂，使其均匀地润湿下沉，在管内形成松紧适度的吸附层。
操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。
②湿法
将吸附剂与洗脱剂混合，搅拌除去空气泡，徐徐倾入色谱管中，然后加入洗脱剂将附着管壁的吸附剂洗下，使色谱柱面平整。
俟填装吸附剂所用洗脱剂从色谱柱自然流下，液面和柱表面相平时，即加供试品溶液。
(2) 供试品的加入
除另有规定外，将供试品溶于开始洗脱时使用的洗脱剂中，再沿色谱管壁缓缓加入，注意勿使吸附剂翻起。
或将供试品溶于适当的溶剂中，与少量吸附剂混匀，再使溶剂挥发去尽使呈松散状，加在已制备好的色谱柱上面。
如供试品在常用溶剂中不溶，可将供试品与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。
(3) 洗脱
除另有规定外，通常按洗脱剂洗脱能力大小递增变换洗脱剂的品种和比例，分别分部收集流出液，至流出液中所含成分显著减少或不再含有时，再改变洗脱剂的品种和比例。
操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。
2.分配柱色谱
方法和吸附柱色谱基本一致。
装柱前，先将载体和固定液混合，然后分次移入色谱管中并用带有平面的玻棒压紧；供试品可溶于固定液，混以少量载体，加在预制好的色谱柱上端。
洗脱剂需先加固定液混合使之饱和，以避免洗脱过程中两相分配的改变。