微生物培养基的类型及配制
微生物常用培养基配制方法
微生物常用培养基配制方法常用培养基的配制方法可以根据其成分的类型来进行分类。
以下是一些常见的微生物常用培养基的配制方法。
1.琼脂培养基琼脂培养基是一种含有琼脂作为凝胶剂的液体培养基。
其配制方法如下:1)称取所需的琼脂粉量,加入适量的蒸馏水并充分搅拌溶解。
2)将溶解好的琼脂液装入培养瓶中,用胶栓封口,与蒸馏水瓶一同放入高压蒸汽灭菌器中进行高压蒸汽灭菌,通常是121℃,压力为1.05kg/cm²,蒸汽灭菌时间不低于20分钟。
3)取出蒸汽灭菌后的琼脂液,冷却至温度不会杀死微生物,快速倒入培养皿中。
4)待琼脂凝固成凝胶后,可以用于菌株接种。
2.液体培养基液体培养基是由各种有机和无机物质组成的溶液,可以用于微生物的培养和增殖。
液体培养基的配制方法如下:1)称取所需的各种营养成分如氨基酸、矿质盐等,分别加入适量的蒸馏水中。
2)将搅拌棒或磁力搅拌器放入培养瓶中,加热至微生物能够生长的温度。
3)将配制好的营养液煮沸2-3分钟,以杀死其中的微生物,同时带入一些空气中的微生物。
4)冷却至微生物能够生长的温度,迅速校准pH值。
5)将培养液分装入无菌试管或瓶中,用胶帽封口。
6)将分装好的培养液放入高压蒸汽灭菌器中进行高压蒸汽灭菌,通常是121℃,压力为1.05kg/cm²,蒸汽灭菌时间不低于20分钟。
7)取出蒸汽灭菌后的液体培养基,可以用于菌株接种。
3.固体培养基固体培养基是通过在液体培养基中添加琼脂来使其凝固。
配制方法如下:1)首先按照液体培养基的配制方法制备好液体培养基。
2)在液体培养基凝固之前,将琼脂粉加入培养基中并均匀搅拌溶解。
3)将溶解好的琼脂培养基充分混合,并倒入无菌培养皿中。
4)待琼脂凝固成凝胶后,可以用于菌株接种。
这里只列举了常见的琼脂、液体和固体培养基的配制方法,实际上在微生物研究中还有许多其他类型的培养基,如选择性培养基、富集培养基和不同用途的专用培养基等。
每种培养基的配制方法都有所不同,需要根据具体的要求和目的进行调整和改进。
微生物培养基的分类
应用:实验室内,研究微生物营养、代谢、菌种选
育、菌种鉴定、生物测定等定量要求较高的研究。
2.天然培养基
又称复杂培养基,采用动植物组织或微生物细胞 或其提取物和粗消化产物制成的。 营养物质来源于天然物质。
天然物质:牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麦芽汁、玉米粉、
用途:分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏等 。
凝固剂:琼脂、明胶和硅胶三种。 凝固剂要求: ①不被微生物利用分解,生长温度范围为固体。 ②凝固点温度不能太高。琼脂:45 -55℃ ③无毒,灭菌不会破坏。 ④透明及粘着力强。 ⑤凝胶强度和韧度要适中。
2.半固体培养基
在液体培养基中加入少量凝固剂,使之呈柔软的糨糊 状或直接将营养物质配制成半流体状态的培养基。
应用:微生物生理生化特性研究、大规模的工业生 产(啤酒、葡萄酒、乳制品生产)。
液体流乙醇酸盐流体培养基
好氧菌,厌氧菌,兼性厌氧菌的检验
(三)按照培养基的功能分 (1)基础培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基
本营养物质的培养基。 用途:作为一些特殊培养基的基础成分。 细菌:牛肉膏蛋白胨培养基 霉菌:马铃薯葡萄糖琼脂培养基 酵母菌:麦芽汁琼脂培养基
紫色菌落
菌群
培养基是微生物菌种生长繁殖和发酵的重 要物质基础,也是微生物赖以生存的外界环 境。在科学实验和实际生产中,会遇到许多 问题,有些培养基即是液体培养基,又是选 择培养基也可能是天然培养基,掌握不同类 型的培养基特点,并将之灵活地应用于具体 的实际工作之中。
与选择培养基区别: 加富培养基:增加所要分离的微生物数量,成为优 势菌,逐步淘汰其他微生物。 选择培养基:抑制不需要微生物的生长,使所需要 菌成为优势菌。
微生物实验培养基配方
微生物实验培养基配方基础培养基配方:1.水:用去离子水或蒸馏水配制培养基。
2.碳源:葡萄糖是最常用的碳源,可提供微生物的能量和碳原子。
浓度通常为0.2-1%。
3.氮源:氨基酸、氨基酸类衍生物、蛋白胨、氨基酸盐等都可以作为氮源。
蛋白胨的浓度通常为0.5-1%。
4.无机盐:常用的无机盐包括NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
它们提供微量元素和维持渗透平衡。
浓度根据不同微生物的要求而变化。
5.辅助物质:维生素、生长因子、酶、抗生素等物质有时会被添加到培养基中以满足微生物特殊的生长需求。
基础培养基通常是通用的,适用于多种微生物的培养和繁殖。
然而,根据不同的微生物,配方中可能会有一些调整和特殊需求。
以下是一些常见微生物群体的基础培养基配方:1.嗜热菌培养基配方:-水:去离子水。
-碳源:葡萄糖(1-2%)。
-氮源:氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐:NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质:维生素、酶等。
2.嗜酸菌培养基配方:-水:蒸馏水。
-碳源:果糖(2-4%)。
-氮源:天门冬氨酸盐、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐:NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质:维生素、酶等。
3.嗜碱菌培养基配方:-水:去离子水。
-碳源:葡萄糖(1-2%)。
-氮源:氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐:NaCl、KCl、Na2CO3、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质:维生素、酶等。
4.厌氧菌培养基配方:-水:蒸馏水。
-碳源:葡萄糖(1-2%)。
-氮源:氨基酸、蛋白胨、氨基酸盐。
-无机盐:NaCl、KCl、Na2CO3、Na2HPO4、KH2PO4等。
-辅助物质:维生素、酶等。
除了上述配方外,还可以根据实验需求添加抗生素、指示剂等。
抗生素可以抑制细菌、真菌和其他微生物的生长;指示剂则可以用来检测微生物的生长或一些特殊代谢产物的形成。
总之,微生物实验培养基的配方需要根据微生物的类型和特殊需求进行调整,以提供适宜的营养和环境条件,促进微生物的生长和繁殖。
微生物培养基的配制
其他物质
总结词
提供特殊营养或生理功能的物质。
详细描述
除了上述基本成分外,根据不同种类的微生物和实验需求,培养基中可能还需要添加其他物质,如维生素、氨基 酸、碱或酸等。这些物质可以提供特殊营养或调节培养环境的酸碱度,以满足某些特殊微生物的生长需求。
03
微生物培养基的配制步骤
确定培养目的
01
02
03
分离培养
为了分离出特定的微生物, 选择适合该微生物生长的 培养基。
鉴别培养
通过培养基上的微生物生 长表现,鉴别微生物的种 类或菌株。
生理生化研究
为了研究微生物的生理生 化特性,选择适合该特性 的培养基。
选择合适的培养基类型和材料
固体培养基
选择适宜的营养成分
用于微生物的分离、纯化和鉴别,常 加入琼脂作为凝固剂。
根据需要调整培养基的pH值,保证微生物的正常 生长。
灭菌处理
将配置好的培养基进行高温高压灭菌,以消除杂菌污染。 灭菌后,待培养基冷却至适宜温度后,进行分装、保存或使用。
04
微生物培养基的优化方法
通过实验确定最佳配方
实验设计
通过单因素实验、正交实验等方 法,系统地改变培养基中各成分
的浓度,以确定最佳配方。
溶氧量
对于好氧微生物,通过控制通气速率和搅拌 速度,探究溶氧量对微生物生长和产物生成 的影响,找到最适溶氧量。
选择合适的菌种或菌株
根据生产需求选择合适的菌种或菌株, 了解其生理生化特性,以便为其提供 适宜的培养条件。
对于具有相同功能的菌种或菌株,可 通过比较实验,选择生长快、产物产 量高、耐受性强的菌种或菌株。
实验指标
选择适宜的指标(如菌体生长速率、 产物产量等)来评估培养基的效果, 并确定最佳配方。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨 20g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
三、5%乳糖发酵管成分:蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595使它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取801小4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
微生物学实验常用培养基的配制
牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化10g钠琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL 121℃灭菌20min。
2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀20g粉硝酸钾1g氯化0.5g钠磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼20g脂水1000mLpH7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质,能够为微生物提供所需的营养和环境条件。
不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件,因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。
下面是几种常见的培养基配方。
1.大肠杆菌液体培养基配方:-蛋白胨或复合氮源:10g-酵母浸出物:5g-葡萄糖:1g-NaCl:5g-K2HPO4:2g-MgSO4:0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方:-牛心提取物:3g-高级琼脂糖:15g-葡萄糖:10g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方:-玉米浸出物:4g-高级琼脂糖:15g-酵母浸出物:1g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方:-液体LB培养基:10mL-高级琼脂糖:15g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方:-羊血:50mL-肉浸出物:3g-酵母浸出物:3g-肉汤培养基:1L-红细胞素:5g-高级琼脂糖:3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方:-肉浸出物:5g-酵母浸出物:5g-NaCl:5g-蒸馏水:900mL- 加入0.1%的L-cysteine:10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项:-培养基中的成分应严格按照配方比例加入,并保持无菌。
-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。
-不同的微生物可能对一些成分非常敏感,需要根据实际情况进行微调。
-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整,一般在7.0左右。
-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中,避免阳光直射以防止成分分解。
这只是一些常见的培养基配方,不同的微生物有不同的需求,可以根据具体的情况进行配方的调整。
在实际使用中,还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。
微生物培养基的配制和原理
微生物培养基的配制和原理
微生物培养基的配制
微生物培养基大致可分为无机盐基础培养基、有机物基础培养基和选择性培养基三类。
无机盐基础培养基的主要成分是无机盐,有机物基础培养基的主要成分是有机物,而选择性培养基根据所需培养的微生物的特征添加不同的生化物质和化学物质。
无机盐基础培养基的配制:
1. 首先准备好所需的无机盐。
无机盐的主要成分包括NaCl、KCl、MgSO4、FeSO4等。
2. 将所需的无机盐按照一定的比例溶解在蒸馏水或双蒸水中,制成基础盐溶液。
3. 将基础盐溶液加入其他成分中,如葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物、磷酸盐等,制成微生物培养基。
有机物基础培养基和选择性培养基的配制方法与无机盐基础培养基类似,只是需要添加不同的有机物和生化物质。
微生物培养基的原理
微生物培养基可以提供微生物生长所需的营养物质和环境条件。
微生物需要不同的营养物质和环境条件才能生长,如碳源、氮源、无机盐、酸碱度、温度和氧气分压等。
培养基的种类和配方根据需要培养的微生物的特征来选择,以满足微生物生长的要求。
无机盐基础培养基主要提供微生物所需的无机盐,有机物基础培养基主要提供微生物所需的有机物,而选择性培养基则通过添加不同的生化物质和化学物质,使得只有对应的特定微生物能够在其上生长。
微生物的营养及培养基概述 培养基的类型及配制原则
人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养 基质。它是进行科学研究,发酵生产微生物制品等的基础 。
培养基的类型 培养基的配制原则
培养基的类型
按照化学组成分为
天然培养基
例:马铃薯、 淀粉等
合成培养基
例:高氏1号培 养基
半合成培养基
例:马铃薯蔗 糖培养基
按照物理状态分
液体培养基 不添加琼脂
➢ 注意各种营养物质的浓度与配比 营养物的浓度:在一般情况下,浓度合适的营养物质才
对微生物表现出良好作用,浓度大时对微生物生长起抑制 作用,浓度小时不能满足微生物生长的需要。
各营养物质之间的浓度比:培养基中各营养物质之间的 浓度比直接影响微生物的生长与繁殖和(或)代谢产物的 形成与积累,尤其是碳氮比(C/N)(碳氮比一般指培 养基中元素碳与元素氮的比值,有时也指培养基中还原糖 与粗蛋白两种成分含量之比)的影响更为明显。例如在微 生物的谷氨酸发酵中,培养基的C/ N为4:l时,菌体大量 繁殖,谷氨酸积累少;当C/N为3:1时,菌体繁殖受到抑 制,而谷氨酸大量增加。
➢ 控制培养基的PH值 各类微生物生长的最适pH各不相同,细菌与放线菌生长
的pH在7—7.5之间,酵母菌与霉菌生长的pH值在4-5之间。 在微生物的生长和代谢过程中,由于营养物质的利用和代 谢产物的形成与积累,常会改变培养基的pH值,为了维持 培养基pH值的相对恒定,通常采用下列两种方式:
内源调节:在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐; 调节培养基的碳氮比。
固体培养基
琼脂添加量: 1.5%-2.0%
.8%
根据用途划分
加富培养基 作用:菌种分 离筛选
鉴别培养基
例如:用于显 色反应
选择培养基
微生物学实验常用培养基的
牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)121℃灭菌20min。
2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基培养基的配制:称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤。
用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同,因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基(Nutrient Broth)营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,高压灭菌,分装,即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基(MacConkey Agar)大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基,用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为:蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar)Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为:脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基(Vogel-Johnson Agar)VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属(如克雷伯菌)的培养基。
其配方为:葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸,冷却至55-60°C,加入胆盐酯高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
微生物培养基的类型及配制
微生物培养基的类型及配制微生物培养基是供给微生物生长发育所需营养物质的天然或人造的混合培养基质的总称。
它是一类具有特定性质和功能的营养环境,其作用是刺激微生物快速生长繁殖,产生一些代谢产物以及使微生物的遗传特性得以表达。
微生物培养基的种类繁多,根据其来源、成分及用途可分为多种类型。
一、按培养基来源分1、天然培养基:由动物、植物或微生物组织分离而来的培养基。
如分离土壤微生物的培养基中就使用了牛肉膏、蛋白胨等天然物质。
2、合成培养基:根据微生物的代谢规律,用已知的化学物质配制而成的培养基。
3、半合成培养基:在天然物质的基础上,根据微生物的代谢规律,加入或不加一些已知的化学物质配制而成的培养基。
二、按培养基的物理状态分1、固体培养基:在培养基中加入凝固剂琼脂而成为凝固状态的培养基,多用于菌种分离、鉴定、保藏等。
2、液体培养基:不添加琼脂等凝固剂的培养基,一般用于工业生产。
三、按培养目的分1、选择培养基:根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基,利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来,如鉴别培养基。
2、鉴别培养基:在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同菌种的分析方法。
鉴别不同种类的微生物,是利用不同微生物间某些化学或生理上的特征进行鉴别。
常用的鉴别培养基有伊红美蓝平板(EMB)、SS琼脂平板等。
四、按用途分1、菌种保存用培养基:这种培养基的成分非常简单,仅仅能维持生命,所以也称为维持培养基。
它可用来保存菌种。
2、菌种扩大用培养基:这种培养基既要满足菌种的营养需求又要满足产量需求,所以也称为扩大培养基。
3、发酵用培养基:发酵用培养基是供菌种发酵用,它既要考虑菌种的营养需求又要考虑菌种对氧气的需求,所以也称为发酵培养基或摇瓶培养基。
发酵用培养基由于加入了比较多的营养物质,往往粘度比较大,在摇瓶的时候不容易混匀。
为了解决这个问题往往需要加入一定量的缓凝剂(例如硅藻土)。
36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物经常使用培养基配制之邯郸勺丸创作1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6.2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH7.4~7.6.配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中.3.马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中别离真菌)K2HPO41g,MgSO4•7H2O0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min.待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL). 4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制办法如下:将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖.5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4•7H2O0.5g,KCl 0.5g,FeSO4•7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0~7.2.6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl 5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL,以上混合后倾注平板.*注意:醋酸铊是极毒的药品,需特别注意平安操纵.7.麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基)葡萄糖0.1g, KCl 0.18g,酵母膏0.25g,醋酸钠0.82g,琼脂l.5g,蒸馏水l00mL.溶解后分装试管,1l5℃湿热灭菌15min.8.葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V.P.反响和甲基红试验)蛋白胨0.5g,葡萄糖0.5g,K2HPO4 0.2g,水100mL,pH7.2,1l5℃湿热灭菌20min.9.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验)蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.2~7.4,121℃湿热灭菌20min.10.糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验)蛋白胨0.2g,NaCl 0.5g,K2HPO4 0.02g,水100mL,溴麝香草酚蓝(1%水溶液)0.3mL,糖类lg.辨别称取蛋白胨和NaCl溶于热水中,调pH至7.4,再加入溴麝香草酚蓝(先用少量95%乙醇溶解后,再加水配成1%水溶液),加入糖类,分装试管,装量4~5cm高,并倒放入一杜氏小管(管口向下,管内充满培养液).115℃湿热灭菌20min.灭菌时注意适当延长煮沸时间,尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡.经常使用的糖类,如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为1.5%).11.RCM培养基(强化梭菌培养基)、(用于厌氧菌培养)酵母膏3g,牛肉膏l0g,蛋白胨10g,可溶性淀粉lg,葡萄糖5g, 半胱氨酸盐酸盐0.5g,NaCl 3g,NaAc 3g,水l000mL,pH8.5,刃天青3mg/L,l2l℃湿热灭菌30min.12.TYA培养基(用于厌氧菌培养)葡萄糖40g,牛肉膏2g,酵母膏2g,胰蛋白胨(bacto-typetone)6g,醋酸铵3g,KH2PO4 0.5g,MgSO4•7H2O0.2g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL, pH6.5,121℃湿热灭菌30min.13.玉米醪培养基(用于厌氧菌培养)玉米粉65g,自来水1000mL,混匀,煮10min成糊状,自然pH,121℃湿热灭菌30min.14.中性红培养基(用于厌氧菌培养)葡萄糖40g,胰蛋白胨6g,酵母膏2g,牛肉膏2g,醋酸铵3g,KH2PO4 5g,中性红0.2g,MgSO4•7H2O0.2g,FeSO4•7H2O0.01g, 水1000mL,pH6.2,121℃湿热灭菌30min.15.CaCO3明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养)麦芽汁(6波美)1000mL,水1000mL,CaCO310g,明胶10g,pH6.8,121℃湿热灭菌30min.16.BCG牛乳培养基(用于乳酸发酵)(A)溶液:脱脂乳粉100g,水500mL,加入 1.6%溴甲酚绿(B.C.G)乙醇溶液1mL,80℃灭菌20min.(B)溶液:酵母膏10g,水500mL,琼脂20g, pH6.8,121℃湿热灭菌20min.以无菌操纵趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板.17.乳酸菌培养基(用于乳酸发酵)牛肉膏5g,酵母膏5g,蛋白胨10g,葡萄糖10g,乳糖5g,NaCl 5g,水1000mL,pH6.8,121℃湿热灭菌20min.18.酒精发酵培养基(用于酒精发酵)蔗糖10g,MgSO4•7H2O 0.5g,NH4NO30.5g,20%豆芽汁2mL,KH2PO4 0.5g,水100mL,自然pH.19.柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养)优质蛋白胨0.4g, NaCl 0.7g,KCl 0.02g, NaHCO3 0.01g,CaCl 0.02g,KH2PO40.09g,NaH2PO40.48g,蒸馏水500mL,无菌兔血清40mL.制法:除兔血清外的其余各成分混合,加热溶解,调pH至7.2,121℃湿热灭菌20min,待冷却后,加入无菌兔血清,制成8%血清溶液,然后分装试管(5~10mL/管),56℃水浴灭活lh后备用.黄豆芽500g,加水1000mL,煮沸lh,过滤后补足水分,121℃湿热灭菌后存放备用,此即为50%的豆芽汁;用于细菌培养:10%豆芽汁200mL,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800mL,pH7.2~7.4.用于霉菌或酵母菌培养:10%豆芽汁200mL,糖50g,水800mL,自然pH.霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖.21.LB(Luria—Bertani)培养基(细菌培养,常在份子生物学中应用)双蒸馏水950mL,胰蛋白胨l0g,NaCl l0g,酵母提取物(bacto- yeast extract)5g,用lmol/L NaOH (约l mL) 调节pH值至7.0,加双蒸馏水至总体积为1L,121℃湿热灭菌30min.含氨苄青霉素LB培养基:待LB培养基灭菌后冷至50℃左右加入抗生素,至终浓度为80~100mg/L.22.复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)、(用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,琼脂20g,乳糖10g,K2HPO40.5g,无水亚硫酸钠5g,5%碱性复红乙醇溶液20mL,蒸馏水1000mL.制作过程:先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到900mL水中,加热溶解,再加入K2PO4,溶解后弥补水至l000mL,调pH至7.2~7.4.随后加入乳糖,混匀溶解后,于115℃湿热灭菌20min.再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中,用少许无菌水使其溶解,在水浴中煮沸10min后,立即滴加于20mL 5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色转变成淡粉红色为止.将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍坚持融化状态的培养基中,混匀后立即倒平板,待凝固后存放冰箱备用,若颜色由淡红变成深红,则不克不及再用.23.乳糖蛋白胨半固体培养基(用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母膏5g,乳糖10g,琼脂5g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,分装试管(l0mL/管),115℃湿热灭菌20min. 24.乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中大肠菌群)蛋白胨10g,牛肉膏3g,乳糖5g,NaCl 5g,蒸馏水l000mL,1.6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL.调pH至7.2,分装试管(l0mL/管),并放入倒置杜氏小管,l15℃湿热灭菌20min.25.三倍浓乳糖蛋白胨培养液(用于水体中大肠菌群测定)将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大3倍加入到l000mL水中,制法同上,分装于放有倒置杜氏小管的试管中,每管5mL,1l5℃湿热灭菌20min.26.伊红美蓝培养基(EMB培养基)(用于水体中大肠菌群测定和细菌转导)蛋白胨l0g,乳糖10g,K2HPO4 2g,琼脂25g,2%/伊红Y(曙红)水溶液20mL,0.5%美蓝(亚甲蓝)水溶液l3mL,pH7.4.制作过程:先将蛋白胨、乳糖、K2HPO4和琼脂混匀,加热溶解后,调pH至7.4,1l5℃湿热灭菌20min,然后加入已辨别灭菌的伊红液和美蓝液,充分混匀,避免产生气泡.待培养基冷却到50℃左右倒平皿.如培养基太热会产生过多的凝集水,可在平板凝固后倒置存于冰箱备用.在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖,其余成分不变.27.加倍肉汤培养基(用于细菌转导)牛肉膏6g,蛋白胨20g,NaCl 10g,水1000mL,pH7.4~7.6.28.半固体素琼脂(用于细菌转导)琼脂1g,水100mL,121℃湿热灭菌30min.29.豆饼斜面培养基(用于产蛋白酶霉菌菌株筛选)豆饼100g加水5~6倍,煮出滤汁100mL,汁内加入KH2PO4 0.1%,MgSO4 0.05%,(NH4)2SO4 0.05%,可溶性淀粉2%,pH6,琼脂2%~2.5%.30.酪素培养基(用于蛋白酶菌株筛选)辨别配制A液和B液.A液:称取Na2HPO4•7H2O 1.07g.干酪素4g,加适量蒸馏水,并加热溶解. B液:称取 KH2PO4 0.36g,加水溶解.A、B液混合后,加入酪素水解液0.3 mL,加琼脂20g,最后用蒸馏水定容至1000mL.酪素水解液的配制:1g酪蛋白溶于碱性缓冲液中,加入1%的枯草芽孢杆菌蛋白酶25mL 加水至100mL,30℃水解l h.用于配制培养基时,其用量为1000mL,培养基中加入100mL以上水解液.31.细菌基本培养基(用于筛选营养缺陷型)Na2HPO4•7H2O 1g,MgSO4•7H2O0.2g,葡萄糖5g,NaCl 5g,K2HPO4lg,水l000mL,pH7.0,1l5℃湿热灭菌30min.32.YEPD培养基(用于酵母原生质体融合)酵母粉10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,蒸馏水1000mL,pH6.0,115℃湿热灭菌20min.33.YEPD高渗培养基(用于酵母原生质体融合)在YEPD培养基中加入0.6mol/L的NaCL,3%琼脂.34.YNB基本培养基(用于酵母原生质体融合)0.67%酵母氮碱基(YNB, 不含氨基酸,Difco),2%葡萄糖,3%琼脂,pH6.2.另一配方为:葡萄糖10g(NH4)2SO4 1g,K2HPO40.125g,KHPO4 0.875g,KI 0.0001g,MgSO4•7H2O0.5g,CaCl2•2H2O0.lg,NaCl0.1g,维量元素母液lmL,维生素母液lmL(母液均按常规配制),水1000mL,pH5.8~6.0.35.YNB高渗基本培养基(用于原生质体融合)在YNB基本培养基中加入0.6mol/LNaCl.36.酚红半固体柱状培养基(用于检查氧与菌生长的关系)蛋白胨1g,葡萄糖10g, 玉米浆10g,琼脂7g,水1000mL,pH7.2.在调好pH后,加入1.6%酚红溶液数滴,至培养基变成深红色,分装于大试管中,装量约为试管高度的1/2,1l5℃灭菌20min.细菌在此培养基中利用葡萄糖生长产酸,使酚红从红色酿成黄色,在不合部位生长的细菌,可使培养基的相应部位颜色改动,但注意培养时间太长,酸可扩散以致不克不及正确判断结果.以上各类培养基均可配制成固体或半固体状态,只需改动琼脂用量即可,前者为1.5%~2.0%,后者为0.3%~0.8%.。
各种培养基的配方
各种培养基的配方在微生物学中,培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物,可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。
不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖,为了获得最佳的生长效果,需根据微生物的特性制备相应的培养基。
下面介绍几种常用的培养基及其配方。
1. 加尔沙基培养基(Luria-Bertani,LB培养基)LB培养基是一种常用的细菌培养基,适用于大多数细菌的培养。
其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠,PH为7.0。
配方:- 水:1000ml-氯化钠:10g-酵母提取物:5g-牛肉浸出物:10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源,适合于细菌的快速生长。
2. PDA培养基(Potato Dextrose Agar)PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基,成分简单易得。
它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。
PDA培养基是一种半固体培养基,适合于真菌的产孢。
配方:-马铃薯提取物:200g-葡萄糖:20g-琼脂:20g-静置180s后,灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长,常用于菌落计数和生长的研究中。
3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于多种微生物的培养。
它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
配方:-蛋白水解物:5g-酵母提取物:1g-氯化钠:5g-琼脂:15g- 水:1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长,是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基(Mannitol-Salt Agar,MSA)MSA培养基是一种选择性培养基,主要用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的分离和鉴定。
它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。
配方:-马尼托尔:5g-氯化钠:75g-酵母提取物:1g-琼脂:15g- 水:1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中,可以通过红色菌落的形成来进行识别。
微生物常用培养基配制方法
微生物常用培养基配制方法基础培养基的配制方法如下:1.海藻提取物培养基(海藻提取物培养基是最常见的一种基础培养基,适用于大多数微生物的生长):a.加入20克海藻提取物和1升蒸馏水到容量瓶中;b.加热并搅拌溶解海藻提取物;c.pH值调整至7.0-7.4;d.若需要固化培养基,加入15克琼脂并搅拌均匀;e.加入适当的抗生素(如青霉素或链霉素)以防止细菌污染;f.用蒸气灭菌器或高压灭菌锅高压灭菌。
2.肉汤培养基(适用于一般细菌的培养):a.研磨肉粉,加入1升蒸馏水中;b.进行水浴加热,在60-80℃下保持30分钟;c.过滤肉汤,静置冷却;d.改正pH值至6.8-7.2;e.若需要固化培养基,加入15克琼脂并均匀搅拌;f.加入抗生素(如青霉素、链霉素等)以防止细菌污染;g.用高压灭菌锅高压灭菌。
选择性培养基的配制方法如下:1. MacConkey琼脂培养基(选择性培养大肠杆菌等肠道杆菌):a. 加入28.5克MacConkey琼脂培养基和1升蒸馏水到容量瓶中;b.加热并搅拌溶解琼脂培养基;c.若需要选择性抑制革兰阳性菌,可加入50毫克靛胆盐和20毫克碱性溴心兰紫;d.若需要选择性抑制革兰阴性菌,可加入2毫克氯化罗红素;e.pH值调整至7.0-7.4;f.若需要固化培养基,加入15克琼脂并搅拌均匀;g.加入青霉素(100国际单位/升)以防止细菌污染;h.用高压灭菌锅高压灭菌。
2.酵母蔗培养基(选择性培养真菌、酵母菌):a.加入10克蔗粉、4克乳酪粉和1升蒸馏水到容量瓶中;b.加热并搅拌溶解蔗粉和乳酪粉;c.pH值调整至5.5-6.0;d.若需要固化培养基,加入15克琼脂并搅拌均匀;e.加入青霉素(100国际单位/升)以防止细菌污染;f.用高压灭菌锅高压灭菌。
以上是微生物常用培养基的配制方法,不同细菌或真菌对培养基的要求略有不同,因此配方可能会有所调整。
另外,严格按照消毒操作要求进行灭菌,以确保培养基的无菌状态。
146种常见培养基的配方
146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具,通过调配合适的培养基,可以提供微生物生长所需的营养物质,从而促进微生物菌落的繁殖和生长。
下面将介绍一些常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
1.琼脂肉汤培养基(NB)-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基(LB)-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基(Deoxycholate Agar)-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基(KV培养基)- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基(Mannitol Salt Agar)-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基(Burkholder's Basal Salt Medium)-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基(Cetrimide Agar)-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基(Chapman Agar)-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基(Reduced Gram-negative Broth)-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
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1、培养基的制备记录
每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及
其来源,和各种成份的牌号,最终pH值、消毒的温度和时
间制备的日期和制备者等。
记录应复制一份,原记
录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发
生混乱。
2、培养基成分的称取
培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最 好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种 成分即在配方上面做出记号,并将所需称取的药品一次取 齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称 取完毕后,还应进行一次检查。
3、培养基各成份的混合和溶化
指示剂应在调节好PH值后再加入; 煮溶后要补加足水份; 不能把培养基煮焦,焦化的不能使用。
4、培养基pH的校正
灭菌后PH值会下降0.1~0.2, 在做培养基校正PH值时,应比实际 值高0.1~0.2;
PH调整后,还应将培养基煮沸。
5、培养基的过滤澄清
液体培养基可用滤纸过滤法 琼脂培养基,可用中间夹有薄层吸水棉
(二)、水
用蒸馏水,不能用自来水
(三)、凝固剂
琼脂、明胶、血清等 要求:清一色、杂质少
(四)、抑制剂
1、作用:鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖,增加待检菌的检出率 2、种类: 盐类:氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾(钠)、亚硒酸钠等 染色剂类:煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红 胆盐类:猪(牛、羊)胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸
分离培养用的培养基
名称 SS琼脂培养基 HE琼脂培养基 伊红美蓝琼脂培养基 麦康凯琼脂培养基(MacC) 甘露醇高盐琼脂培养基) XLD琼脂培养基 中国蓝琼脂培养基 碱性琼脂培养基 高盐蔡氏琼脂培养基
用途 沙门氏和志贺氏菌属分离 志贺氏菌分离鉴别 大肠杆菌、产气杆菌分离鉴别 肠道致病菌分离 绿脓杆菌分离鉴别 志贺氏、沙门氏菌分离 肠道菌分离鉴别 霍乱弧菌分离 真菌、酵母菌分离
1、增殖培养基
在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜 欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖 速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基 称为增殖培养基。
增菌、运送用培养基
B2 胆盐乳糖培养基(BL)
大肠杆菌增菌
B3 亚硒酸盐增菌培养基
沙门氏菌增菌
B4 亚硒酸盐半胱氨酸增菌培养基
食品中沙门氏菌增菌
B5 四硫磺酸钠亮绿基础培养基
(一)、根据培养基的物理状态来区分
固体培养基 液体培养基 半固体培养基
1、液体培养基
主要用于增菌培养、鉴别性培养
2、固体培养基
用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计 数、保藏、生物测定等
3、半固体培养基
观察微生物的动力,有时用来 保藏菌种。
(二)、根据培养基的用途来区分
增殖培养基 选择培养基 鉴别培养基
3、鉴别培养基
在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区 分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助 开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴 别培养基。
鉴别用培养基
名
称
蛋白胨水培养基 乳糖胆盐发酵培养基 0.5%乳糖发酵培养基 半固体培养基 三糖铁琼脂培养基(TST)
氰化钾基础培养基 脱羧红试验 大肠杆菌发酵乳糖试验 肠道菌生化试验(复发酵) 动力试验和菌种保存 肠杆菌糖发酵及硫化氢反应
沙门氏菌分离 细菌脱羧酶试验
(三)培养基制备的基本方法和注意事项
培养基的制备记录 培养基成分的称取 培养基各成份的混合和溶化 培养基pH的初步调正 培养基的过滤澄清 培养基的分装 培养基的灭菌 培养基的质量测试 培养基的保存
沙门氏菌增菌
B6 GN肉汤培养基
志贺氏菌增菌
B7 碱性蛋白胨水培养基
霍乱弧菌增菌
B8 7.5%氯化钠肉汤培养基
金黄色葡萄球菌增菌
B9 缓冲蛋白胨水培养基
沙门氏菌增菌
B1 血液增菌培养基
0 B1
SCDLP液体基础培养基
血液中细菌增菌 化妆品中细菌增菌
2、选择培养基
在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要 的菌种生长的培养基,称之为选择培养基。
盐 抗菌素:青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素
(五)、指示剂
1、作用:用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质 和含氮化合物,产酸产碱的能力。
2、常用的指示剂: 酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复
红、伊红、美蓝、孔雀绿等
二、培养基的类型
在实验室中配制的适合微生物生长 繁殖或累积代谢产物的任何营养基质, 都叫做培养基(Media)。由于各类微生 物对营养的要求不同,培养目的和检 测需要不同,因而培养基的种类很多。 我们可根据某种标准,将种类繁多的 培养基划分为若干类型。
的双层纱布过滤
6、培养基的分装
斜面: 1/5管 半固体培养基:1/3管 高层斜面:1/4~1/3管 平板:13~15ml
7、培养基的灭菌
(1)含糖类或明胶的培养基: 113℃灭菌 15分钟或115℃灭菌10分钟。
(2)无糖培养基: 121℃灭菌15~20分钟。
(3)血液、体液和抗生素等以无菌操作技 术抽取后再加入冷却至约50℃左右的培养 基中。
(3)、组织浸液
组织浸液,主要为微生物生长繁殖提 供可溶性含氮物质、核酸降解物、维生 素及无机盐等,补充蛋白胨营养成分的 不足部分。包括动物组织浸液、植物组 织浸液、微生物细胞浸液。
2、糖、醇类物质
单糖:葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖 双糖:蔗糖、麦芽糖、乳糖 多糖:淀粉、纤维素、菊糖 醇类:甘露醇、卫茅醇、甘油
(4)琼脂斜面培养基应在灭菌后冷至55℃60℃时取出,再摆置成适当斜面。
8、培养基的质量测试
(1)如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培 养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。
(2)将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜, 如发现有菌生长,即弃去。
第一节 培养基
一、培养基中的主要成分及其作用
(一)、营养物质 N源、C源、无机盐、生长因子、水
1、常用的N源物质
蛋白胨 牛肉膏 肉浸汁 酵母膏
(1)蛋白胨
有: 普通蛋白胨 示胨 胰蛋白胨
(2)、牛肉浸液
成份:
含氮物: 肌酸、嘌吟、核苷酸尿酸肌肽等 糖类物质:葡萄糖、肝糖、P-已糖 生长因子:硫胺、核黄素、泛酸、叶酸等8种B 族维生素