血清肌酐测定

血清肌酐测定

1. 实验原理

样品中的肌酐在肌酐酶的催化下水解生成肌酸。在肌酸酶的催化下肌酸水解产生肌氨酸和尿素。肌氨酸又在肌氨酸氧化酶的作用下氧化生成甘氨酸、甲醛和过氧化氢，最后，偶联Trinder反应，比色法测定。

肌酐+ 水肌酐氨基水解酶→肌酸

肌酸+ 水肌酸氨基水解酶→肌氨酸+ 尿

素

肌氨酸+ 氧气+ 水肌氨酸氧化酶→甘氨酸+ 甲醛+ 过氧化氢

过氧化氢+ 白色染料POD→呈色剂

2. 标本：

2.1 病人准备：血清无特殊要求。要留取24小时尿样。

2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:19稀释。

3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳

定7天；-20℃保存可稳定1年。尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。

4. 标本运输：常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。

6. 实验材料

6.1 试剂：欧泰克肌酐测定试剂盒6.1.1 试剂组成Tris缓冲液PH8.0 150 mmol/L

谷氨酸脱氢酶（GLDH）≥

0.72U/ml

ADP 1.5 mmol/L

NADH 0.23 mmol/L

α-酮戊二酸13.8 mmol/L

脲酶≥35.0 U/ml

6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存

试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效

期。试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。不要入口，吞下有害。保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2 校准品：使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

7. 仪器：日立7060生化分析仪

8. 操作步骤

8.1 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件

8.2 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件

9. 检验结果的判断与分析

10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控

警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以用罗氏复合化学定标物校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以μmol/L报告。

12. 参考值范围国际单位(μmol/L)

血清/血浆男性59-104

女性45-84

尿液24 h尿样7000-25000 μmol/day

13. 临床意义：血清和尿液中的肌酐是正常人体肌肉组织代谢的产物，与饮食变化无关。男性血清肌酐含量高于女性。由于尿肌酐主要通过肾小球排泄，不被肾小管重吸收，所以测定血清和尿液中的肌酐浓度可以检查肾小球的通透率。

急性或慢性肾衰竭，尿路阻塞，肾血流减弱，休克，脱水，横纹肌炎都可造成血清肌酐浓度上升。虚弱和肌肉量减少可造成肌酐浓度降低。运动会使肌酐廓清率升高，但当尿量减少时该指标不可靠。

14. 线性范围：血清4-2650μmol/L；尿液:：84-5310μmol/L（乘以稀释倍数20倍的结果）。

15. 超出范围结果处理：本法线性上限为血清2650

μmol/L；尿液：53100μmol/L（乘以稀释倍数20倍的结果）。如果样品中Cr浓度超出系统的测试线性范围，血清或血浆用生理盐水，重新测试。将测试结果乘以稀释倍数，就得到原始样品中Cr的浓度。

16. 病危报警值的处理当肌酐测定值>352 mol/L 时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。