关于动物取血问题
动物采血原则
动物采血原则
动物采血的总体原则是:
采血体积和频率的选择决定于体循环中的血液体积和红细胞更
新的速度。
过量采血会导致低血容量性休克、生理应激甚至死亡。
为了动物健康考虑,采血体积应该是推荐最大体积的下限。
最大采血体积是针对正常健康动物制定的。
采血过程中,应该最小化采血体积。
多次采血的情况下,应该尽量减少采血量。
此外,根据不同动物和具体实验需求,还应当遵循以下原则:
单次采血:在不补充液体的情况下,单次采血的最大采血量约为全血量的10%,即7.7-8µL/g。
如25g小鼠,大约是193-200μL。
如果补充液体,单次采血的最大量约为血液总量的15%,即12µL/g。
在25g的小鼠中,这大约是300µL。
一般补充体液时,应预热后经皮下注射。
多次采血:如果实验需要多次采血,应尽量减少采血量。
每周最大采血量不超过血液总量的7.5%,为6µL/g。
对于25g的小鼠,每周大约为145-150µL。
放血法:通过放血法收集血液,可以收集血液总体积的一半左右,即40µL/g。
以上信息仅供参考,具体操作应根据实际情况和实验需求进行调整,并遵循相关动物伦理和法律法规。
各动物采血方法
各种动物采血方法及考前须知1牛的静脉采血1.1牛颈外静脉采血颈外静脉位于颈部肩骨乳突肌与胸头肌间凹窝处的颈静脉沟内.牛站立,助手保定好头部,使头部稍前伸上仰并稍偏向对侧,颈部稍有弯曲,颈静脉暴露出来,局部剪毛,消毒,术者稍弓腰蹲于颈静脉暴露的一侧,用左手拇指或食指与中指在颈静脉沟稍下方〔近心端〕压迫静脉管,使颈静脉充盈怒张,局部牛由于膘肥看不清,此时就要用左手食指和中指点击颈静脉沟,有跳动,再按压,用右手食指和中指探摸跳动的部位,有波动和弹性的管状物,颈为颈外静脉.右手拇指、食指、中指夹住16号针头,对准颈外静脉, 并使针头与皮肤接近垂直〔75°角〕,用腕力迅速将针头扎进皮肤,穿入血管,血液会喷射出来,即可采血,停止采血后先松左手,后拔针头,用消毒棉球压迫采血部位1min.1.2牛尾静脉采血牛自然站立保定,术者站于牛的正前方,左手抓住牛尾中段用力抬起,使之与地面平行,右手触摸尾椎前段腹侧凹陷沟〔大约在尾后下方4-5cm处〕,消毒后持12号针头与尾椎纵轴成垂直方向,依靠腕力快进针0.5-1cm后血液即喷射出来.2马的静脉采血马的颈静脉比拟浅显,位于静脉沟内,术者用左手拇指或食指和中指横压颈下1/3与颈中1/3处的颈静脉沟,使脉管充盈怒张,右手持16号针头沿颈静脉在压迫点前方与皮肤成45°角用腕力迅速刺入皮肤血管内,感到空虚无阻力即见回血后,再沿脉管向前进针使针头靠近皮肤靠近皮肤以减小其间的角度,近似平行地将针头再伸入血管内1-2cm,血液流出,即可采血.停止采血后,先松左手,后拔出针头,并用消毒棉球压迫采血点2min止血消毒.3猪静脉采血3.1耳静脉采血用捕猪器将猪站立保定,耳静脉局部常规消毒处理,助手用手指捏压耳根部静脉管处或用胶带于耳根部结扎,使静脉充盈,怒张,也可用酒精棉球反复擦静脉血管使之充血,血管怒张, 或用手指弹叩引起血管充盈.术者用左手拇指和食指把持耳尖,将耳拉直托平,用中指、无名指和小指在耳下面向上托,使采血进针部位稍高,右手持一次性血样采集针沿静脉管使针头与皮肤呈30°角,向远心端刺入血管,有空虚感无阻力时即进入血管.回血,立即插入负压管采血.采血结束后,先松开握耳根的手,再拔针头,干棉球压迫采血处1min,伤口不出血为止.3.2前腔静脉采血:前腔静脉由左右两侧的颈静脉与腋静脉在第一对肋骨的胸腔入口的气管腹侧面集合而成.采血部位在第一肋骨与胸骨柄结合处的前方,由于左侧靠近膈神经,易损伤,故多于右侧进行采血,针头刺入方向呈近似垂直稍向中央及胸腔倾斜,刺入深度依猪体大小2-6cm,针头7-12号.站立保定时进针部位在右侧,于耳根至胸骨柄的连线上,距胸骨端1-3cm处,术者拿连接针头的注射器, 稍斜向中央刺向第1肋骨间胸腔入口处,边刺边抽动注射器活塞,见回血即可采血,仰卧保定时胸骨柄向前突出,并于两侧第1肋骨结合处的直前侧方呈两个明显的凹陷窝称为前腔窝:是第1肋骨与胸骨柄结合处的前方与气管围成一个三角区域,用手指沿胸骨柄两侧触诊时感觉明显,多在右侧前腔窝内采血.先固定好两前肢及头部,消毒后术者持连接针头的注射器由右侧沿第1肋骨与胸骨结合部前方的前腔窝处刺入,并稍斜刺向中央及胸腔方面,边刺边回血,见回血后即可采血,采毕后酒精棉球紧压针孔,拔针头,消毒.4羊的静脉采血4.1骑式站立保定头稍上仰偏向对侧,颈静脉露出,剪毛消毒, 术者左手拇指或食指与中指压迫颈静脉下端,使颈静脉充分怒张,右手持12号针头与皮肤成75°角,用腕力直接刺入颈静脉,血液即可喷出,采血结束,松左手,拔针头,用消毒棉球压迫止血1min.4.2侧卧保定适宜于膘肥绵羊,由助手将绵羊放倒,身体右侧着地,将头稍抬高向后弯曲,左侧颈静脉沟充分暴露,在颈中与颈上1/3 结合处颈静脉沟剪毛约2x3cm,毛茬尽量剪断,消毒,对熟练采血者只要用手指拔开毛丛即可.左手拇指或食指与中指在近心端颈下1/3 处施压,使静脉血流受阻而膨胀,如仍看不清那么术者用左手食指和中指施压,用右手食指和中指在跳动的部位探摸,有弹性和波动感的管状物就是静脉血管,右手拇指、食指、中指夹住12号针头沿颈静脉纵向与颈成45°角用腕力刺入血管,感到阻力忽然消失有空虚感即进入血管内,血液随即喷射,采血完毕,松左手,拔针头,酒精棉球压迫止血消毒1min 即可.5禽的静脉采血目前,随着家禽疫病的频频爆发,我们需要采取更准确的实验室血清学检测来准确判断家禽的免疫状况,而在血清学检测和实验研究中,采血技术是一项前提性的工作,采血质量的好坏,直接影响能不能进行实验和判定实验结果.家禽的采血方法主要有翅内侧腋下静脉采血、骨内侧静脉采血和心脏采血法等.下面简要介绍在临床实践中家禽的采血技术.5.1禽常用翼下静脉采血.助手将禽侧卧,禽翅膀展开与地面成30°角,露出腋窝部,术者在禽腹侧用脚踩住两脚,拔去羽毛,见到由翼根进入腋窝的一条较粗的静脉即翼根静脉,其远心端有一条较细的静脉即翼下静脉,常规消毒,术者用左手拇指压迫翼下静脉的近心端,使血管怒张,右手持一次性血样采集针由翼根的肌肉处进针,向翅膀方向即由近心端向远心端斜向刺入翼下静脉,感到有空虚感无阻力即见回血,立即插入负压管采血.如用针管采血,抽血时速度要缓慢,预防静脉瘪陷而采不出血.采毕后,松左手,拔针头,消毒棉球按压针孔1min.由于肌肉自身的收缩压迫止血,一般不会出现血肿. 家禽的采血技术及考前须知5.2翅内侧腋下静脉采血法助手用左手抓住禽的两只脚,右手固定住两翅,使禽背部贴住助手上腹部,右手稍高于左手,暴露出翅内侧,采血者左手拨开翅内侧羽毛, 在翅静脉处消毒后,右手持5号采血器与皮肤呈45度角方向顺血管进针,进针时手要稳,进针不宜过深,如刺穿血管,皮下很快水肿, 导致采血不成功.见血液回流,慢慢回抽针芯,不可操之过急,采血完毕后,局部消毒按压30s后放走.5.3跖骨内侧静脉采血法此采血法一般适用于鸭子或野鸟.助手用一手固定两翼,另一手固定一脚,采血者固定另一只脚,背侧靠近助手,即可见暴露的清楚的静脉,采血者在跖骨内侧静脉处消毒后,持5号采血器与皮肤呈10度角方向顺血管进针,见血液回流,慢慢回抽针芯,采血完毕后,局部消毒按压30s 后放走.5.4心脏采血法该法容易使被采血家禽因失血过多而死亡,所以在常规免疫监测中较少使用.助手固定两翅及两脚,右侧卧保定,在胸骨脊前端至背部下凹处连线1/2处或稍前方可触及心脏明显搏动,在此处消毒后,采血者手持7号采血器垂直刺入2〜3cm,回抽针芯见有血液回流即可.5.5考前须知采血是一项既简单又复杂的根底工作.采血时,采血者要认真做好自身防护工作,采血设备需经消毒枯燥.要做好采血记录,在送样过程中,血样不可剧烈摇晃以免溶血,血样送至实验室后要立即别离血清, 不能立即别离的需及时冷藏.5.6其他补充一、鸡冠采血法:多用于需血量较少的采血,用针头刺破鸡冠吸取血液或在鸡冠的尖端部用剪刀剪去一小片即可.吸取血液时需用手挤压鸡冠一次可吸取30〜80ul血液.此法操作简便,但要十分注意伤口的止血预防感染, 最方便有效的消毒止血方法是用浓碘酒涂抹伤口.二、鸡颈静脉采血法:右侧颈静脉较左侧粗,故常采用右侧颈静脉取血.左手以食指和中指夹住家禽头部,并使头偏向一侧,无名指、小指和手掌握住躯干,拇指轻压颈椎部以使静脉充血怒张.右手持注射器,针头倾斜45度沿血管方向一侧0.3〜0.5cm挑破皮肤前行0.3〜0.5cm刺人静脉,再与血管平行进针0.2〜0.5cm抽取血液.采血完毕后压迫伤口处止血.这种方法采血可应用于15〜45日龄的锥鸡,成年鸡单人操作保定较难,皮色较深不易找到血管.三、鸡心脏采血法:右侧卧保定,在左侧胸部触摸心搏动最明显的地方进行穿刺,连接注射器吸取血液.成年鸡心脏穿刺部位是:从胸骨峭前端至背部下凹处连接线的1/2处.用细针头在穿刺部位与皮肤垂直刺入约2〜3cm即可.家禽品种和个体大小不同进针位置和深度不同要作适当调整.心脏采血可大量采血,但不宜连续使用,因有一定的死亡率.特别是对雏禽,常因针头刺破心脏导致出血过多而死亡,而且心脏的修复水平特别差,对畜禽后期影响较大.四、胸外静脉采血法:胸外静脉采血该脉管在翼下无毛区前方,呈上下偏斜走向,清楚可见. 但由于皮下质肌肉疏松,不易刺中血管,而且血流量不多,所以一般不用.五、鸡翼下静脉采血法:静脉又称容量血管,其内含血量较多且流速较慢,位于翼下静脉具此特点,此静脉易找到,健康平安范围内在此可采血10〜20ml.而且操作方便,单人即可完成,采血量极易限制,止血彻底,对家禽影响小.实验者右手持注射器,左手将家禽双翼提起,露出翼静脉的采血位置,把覆盖血管的羽毛拔开,即可见到明显一条较粗的静脉血管.采血时用左手大拇指夹住覆盖静脉的羽毛,食指协调大拇指夹住双翼, 中指、无名指和手掌轻轻提起或轻按背部保定鸡只,待其安静方可刺针.针头在距静脉血管0.3〜0.5cm 一旁倾斜刺入皮肤,再与血管平行进针0.2〜0.4cm后刺入血管,见有少量回血即可采集血液,采血完成后马上用手压迫伤口止血.六、考前须知:1、采血场所要有充足的光线,室温夏季最好在25〜28℃,冬季14〜20℃为宜;2、采血所用器具:注射器或盛血容器等必须保持清洁干燥;消毒采用部位;3、采血时小心一些鸡只顽强的争扎而把翅膀弄断或抓伤实验者的双手,要待鸡只保定平静下来,再实施采血工作.4、静脉采血时抽血速度要保持缓慢,静脉血管回血流速较慢, 内压忽然降低致使血管壁接触而阻塞了针头,影响继续采血量.5、静脉采血时,假设需反复屡次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉.6犬静脉采血前臂皮下静脉〔也称头静脉〕采血.此静脉位于前肢腕关节正前方稍偏内侧,犬可侧卧伏卧,站立保定〔用透明胶带将嘴扎住〕,犬主人从后面握住犬的肘部,使前臂前伸,用止血带结扎肘上部,局部剪毛,用刀片反复刮,用棉球反复擦拭,或用右手拇指和食指、中指弹叩,使静脉血管充分怒张,用右手食指和中指探摸,有波动和弹性的管状物为静脉血管,术者位于犬前面.一次性采集针由近腕关节1/3 处与前臂成15-30°角刺入,有空虚感即见回血,那么进入血管,立即插入负压管采血.采毕后松开止血带,以干棉球按压针孔拔针止血.7采血时流不畅的原因7.1针头在静脉内位置不当,针头斜面被静脉壁或瓣阻挡.7.2穿刺过深或针头斜面未全部进入静脉内.7.3采血导管被压粘连或弯曲变形.7.4狗用止血带压力缺乏或过紧,造成浅表静脉不充盈或深部静脉回流受阻.7.5猪耳静脉、禽翼下静脉采血应由近心端向远心端进针,否那么易造成静脉瘪陷,采不出血.8考前须知8.1采血前按检验工程要求,准备好相应的采血器材,彻底消毒.8.2用一次性注射器采血完后,取下针头,将血液沿管〔瓶〕壁缓慢注入适当容器,并预防产生泡沫,待血液自行凝固收缩后即可分离出淡黄色透明的血清,如需要全血或血浆,那么将血液注入事先准备好的抗凝管〔瓶〕中,轻轻混匀,预防凝固,即为抗凝全血.8.3采血完毕后应核对好号与编码及对应的畜禽,将用过的器材回收处理,防治污染环境.8.4预防溶血,造成溶血的原因有采血器材不枯燥,不清洁,扎针不顺,损伤组织过多,抽血速度过快,血液注入容器时,血液注入容器时未取下针头或用力推出产生大量的气泡,运送过程振荡.8.5抽血时只能外抽,不能向静脉内推,以免空气注入形成气栓.8.6标本不能及时检测和需保存复查时一般应存放于2-8℃冰箱.8.7采毕后在针孔部位按压1min,以压迫止血,不要按揉针孔, 以免造成皮下血肿,假设出现局部淤血,24小时后用毛巾热敷,促进吸收.8.8采血前尽可能观察畜禽,询问畜主,只有健康并符合检验要求目的方可采血.如果用5ml的一次性使用静脉血样采集容器,每次采血2ml为宜,易渗出血清.。
动物采血法实验报告
一、实验目的1. 掌握动物采血的基本原理和方法。
2. 熟悉常用动物采血技术,如心脏采血、耳缘静脉采血等。
3. 提高实验操作技能,为后续生物学实验奠定基础。
二、实验原理动物采血是生物学实验中常用的技术,主要目的是获取动物血液样本,用于各种生物学研究。
采血方法包括心脏采血、耳缘静脉采血、股动脉采血等。
本实验主要介绍心脏采血和耳缘静脉采血方法。
三、实验材料1. 实验动物:豚鼠、兔子、小鼠等。
2. 实验器材:剪刀、针头、注射器、酒精棉球、碘酒棉球、无菌试管、烧杯、镊子等。
3. 实验试剂:生理盐水、肝素、抗凝剂等。
四、实验步骤(一)心脏采血1. 将豚鼠放入实验台上,用酒精棉球消毒其颈部皮肤。
2. 用剪刀剪开豚鼠颈部皮肤,暴露心脏。
3. 用碘酒棉球消毒心脏表面。
4. 用左手固定豚鼠,右手持注射器,在心脏搏动最明显处,用7号或9号针头刺入心脏。
5. 慢慢抽取血液,约5ml,注入无菌试管中。
6. 用酒精棉球按压针孔处,防止出血。
7. 将血液放入烧杯中,加入适量生理盐水,混匀。
(二)耳缘静脉采血1. 将兔子固定在实验台上,用酒精棉球消毒其耳缘皮肤。
2. 用镊子轻轻提起兔子耳缘,暴露耳缘静脉。
3. 用碘酒棉球消毒耳缘静脉。
4. 用左手固定兔子耳缘,右手持注射器,在耳缘静脉处刺入。
5. 慢慢抽取血液,约5ml,注入无菌试管中。
6. 用酒精棉球按压针孔处,防止出血。
7. 将血液放入烧杯中,加入适量生理盐水,混匀。
五、实验结果通过实验,成功采集到豚鼠和兔子的血液样本,血液颜色正常,无凝块。
六、实验讨论1. 心脏采血和耳缘静脉采血是常用的动物采血方法,适用于不同实验需求。
2. 采血过程中,应注意消毒和止血,防止感染和出血。
3. 实验操作要熟练,避免损伤动物。
七、实验总结本次实验成功掌握了动物采血方法,为后续生物学实验奠定了基础。
在实验过程中,应注意以下几点:1. 实验操作要规范,防止感染和出血。
2. 实验操作要熟练,提高实验效率。
动物实验取血
血液1.动物方面如果是动态取血,那么就只能静脉取血。
如果是一次性取血,大鼠采用腹主动脉取血,小鼠可以采用心脏取血或者腹主动脉取血。
血清做代谢组学效果会更好,因为血浆中的抗凝剂引起的基质效应会对结果造成影响。
但是由于在凝血过程中,(尤其是因为时间地点不同造成的)因操作以及凝血时间的不一致,引起的外源性多肽与黄嘌呤类物质在各样本中出现较大变化,从而导致代谢数据受到影响。
所以对于临床样本,是建议用血浆2.动脉血是在体循环(大循环)的动脉中流动的血液以及在肺循环(小循环)中从肺回到左心房的肺静脉中的血液。
动脉血含氧较多,含二氧化碳较少,呈鲜红色。
由于是刚从心脏发出的,因而动脉血管壁承受血压较高。
动脉血是肺泡中的氧气到身体其它组织的运输载体(准确来说应该是动脉血中红细胞的血红蛋白是载体)。
当经过其它组织将氧气吸收并将二氧化碳释放时,动脉血就会转变为静脉血;静脉血液通常指的是在体循环的静脉中流动的血液。
即大循环中静脉中流动的血液以及在肺循环(小循环)中右心房到的肺动脉中的血液。
动脉血和静脉血在含氧量、氧饱和度和外观颜色上有明显区别,也就是说除了血气分析外的其他生化检测一般结果大致相同。
(即血常规区别几乎没有,生化指标如PH,CO2,PO2少数指标有较大差别)3.全血、血清、血浆的区别1)血液经抗凝处理后的全部血液为全血;离心除去血细胞后所得到的淡黄色液体为血浆。
如血液不经抗凝处理,让其自行凝固,则在抽血后的一段时间内,血液会自动在一系列凝血因子的作用下发生凝集,血液首先凝固成一个整体,再经过一段时间或用离心机离心,血液中凝固的部分会与一些清澈淡黄色的液体分离开,这些液体称为血清。
血清与血浆从表面上看似乎没有什么不同,但其内在的主要区别是血清中不含纤维蛋白原,是未经抗凝处理过的血液凝固后得到的。
抽血做化验中常遇到某些化验要求用血清测定、用全血测定、用血浆测定,即是指血液标本的三种主要处理方式和要求。
2)用途不同:血清多用于血液生化、免疫等方面的测定;血浆多用于凝血等方面的测定;全血则多用在血细胞、血常规、血沉等方面的测定。
基层动物防疫检疫中常用采血方法及注意事项
基层动物防疫检疫中常用采血方法及注意事项摘要:畜牧业是我国经济发展中极为重要的产业类型,是保障动物性食品稳定供给和帮助农民增收的关键产业。
因此,畜牧业发展不仅事关经济更关乎民生。
在保证畜牧业稳定发展的过程中,基层畜牧服务中心发挥着重要作用,承担着动物防疫检疫重任。
从现实角度来看,基层动物防疫检疫实效性将直接影响动物健康情况和畜牧业发展情况。
为此,必须高度重视基层动物防疫检疫工作。
本文着眼于基层防疫检疫中的采血环节,结合实践经验探讨基层动物防疫检疫环节的采血工作,及其常见方法、注意事项;并从提高采血质量、提升基层动物防疫检疫水平和促进畜牧业发展的角度出发,提出推进此项工作提质增效的保障措施。
关键词:采血方法;动物防疫检疫;基层畜牧服务中心;注意事项;颈静脉采血当前,仁义镇畜牧服务中心受区农业农村委员会及镇党政委政府领导,开展动物疫病防控监测工作,承担保障畜牧业健康可持续发展的重任。
对于基层动物防疫检疫工作人员来说,采血是必不可少也至关重要的一项工作;对于基层畜牧服务中心而言,有效采集、使用血样是发挥单位职能的必然要求。
因此,研究基层动物防疫检疫采血方法和注意事项十分必要。
1 基层动物防疫检疫中采血的重要作用动物健康成长是畜牧业可持续发展的根本要求,面对疫病威胁必须强调动物疾病防控。
因此,基层动物防疫检疫成为基层畜牧服务中心的工作重点,也成为保障动物健康的基础措施。
在这一过程中,采血扮演着十分重要的角色。
血样采集的质量和效率与采血技术应用水平有直接关系,而前者还深切影响着动物防疫检疫质效[1]。
由此可见,基层动物防疫检疫中,采血工作必不可少,是影响防疫检疫质量的决定性因素。
从现实角度来看,基于动物采血能够让兽医切实掌握动物的健康状况、病菌携带情况以及疫病抵抗能力,可以为动物防疫检疫提供信息支持,更能够为完善基层动物防疫检疫奠定坚实基础。
2 基层动物防疫检疫采血方法与注意事项结合实践不难发现,以采血为基础的动物防疫检疫工作模式已经十分成熟,实践中可选用的采血方式也十分多样。
动物防疫检疫中常用采血措施及注意事项
动物防疫检疫中常用采血措施及注意事项摘要:采血是动物防疫检疫工作中的重要环节,直接影响检疫结果的准确性,动物采血是兽医工作人员必备的专业技能之一,而采血效率及质量在一定程度上决定了动物防疫检疫的准确性。
因此,应增强采血措施的科学化选择意识,针对不同的动物有序落实保证工作,同时准备相应的消毒工具及采血工具,合理明确采血部位,严格按照规范要求进行血液采集,在保证动物安全性的基础上提高采血工作效率,让动物防疫检疫工作拥有坚实基础。
关键词:动物防疫检疫;采血方法;注意事项血液及血清是动物防疫检疫中不可或缺的检测样品,对检疫水平有关键影响。
所以应该提高对采血环节的重视,并结合检疫对象基本特点、体重等方面的分析,选择适用性更强的采血方法,以强化动物血液采集的实效性、可靠性。
1.动物防疫检疫中采血技术发挥的主要作用开展动物防疫工作的过程中采血是重要环节,采血效率与质量在一定程度上决定了检疫检验结果的准确性。
为此,需要提高对采血方式的重视,熟练掌握采血技巧,不断提高采血工作水平,为检疫检验工作提供合理依据,采血技术直接影响采血质量,是动物防疫检疫工作中不可或缺的重要基础。
为了保证采血工作质量,相关工作人员应该保证血液送检的及时性,加强送检过程中的管理意识,避免受到环境污染,强化动物防疫检疫工作的可靠性。
2.动物检疫防疫中常用的采血措施与注意事项2.1动物颈静脉采血措施及注意事项2.1.1颈静脉采血方法的实际应用通常情况下针对大中型动物而言如牛、羊等,应采用颈静脉采血方式,可以将采血位置选在动物颈静脉中1/3或者下1/3。
进行具体操作时,技术人员应该做好动物保定工作,选择合理的工具处理采血位置的毛,配合落实消毒工作,确保能够在采血过程中看清血管,对较为清晰的血管进行按压,合理调整采血针与血管之间的角度,完成静脉抽血后,利用棉签帮助动物按压采血部位,及时将针头拔出。
2.1.2颈静脉采血注意事项分析为了保证采血操作的规范性、可靠性,需要明确采血注意事项。
小鼠取血方法范文
小鼠取血方法范文小鼠是常用的实验动物之一,常需要从小鼠身上进行取血以获取血液样本进行分析和研究。
小鼠取血方法有多种,包括尾静脉取血、眼眶窝静脉取血、颈静脉穿刺取血等。
下面将对这些方法逐一进行详细介绍。
1.尾静脉取血方法:尾静脉取血是最常用且最方便的小鼠取血方法之一、具体步骤如下:1)麻醉小鼠:使用合适的麻醉方法麻醉小鼠,常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具:准备好所需的器械,如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)清洗尾部:将小鼠放置在无菌条件下,用温水和肥皂轻轻清洗尾部,并用酒精擦拭消毒。
4)取血操作:将小鼠的尾部放置于温暖的环境恢复血流,用酒精擦拭尾部的静脉,然后用一只手控制住小鼠的尾巴,用另一只手将注射器针头的一端插入小鼠尾部的静脉中,缓慢地抽取所需的血样。
5)处理伤口:取血完成后,用棉球轻轻地按压尾部,使创口停止出血,并用消毒棉球擦拭尾部的酒精,帮助伤口愈合。
2.眼眶窝静脉取血方法:眼眶窝静脉取血适用于需要大量血样的实验。
具体步骤如下:1)麻醉小鼠:使用合适的麻醉方法麻醉小鼠,常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具:准备好所需的器械,如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)定位小鼠:将小鼠的头部固定于工作台上,使眼眶窝静脉暴露。
4)消毒处理:用酒精擦拭眼眶窝上方的毛发,然后用酒精将取血点消毒。
5)取血操作:用一只手控制住小鼠的头部,用另一只手将注射器针头的一端插入眼眶窝静脉中,缓慢地抽取所需的血样。
6)处理伤口:取血完成后,用消毒棉球轻轻按压取血点,使创口停止出血,并用消毒棉球擦拭取血点的酒精,帮助伤口愈合。
3.颈静脉穿刺取血方法:颈静脉穿刺取血方法适用于表层静脉无法清晰可见或不方便取血的情况。
具体步骤如下:1)麻醉小鼠:使用合适的麻醉方法麻醉小鼠,常见的方法有气体麻醉和注射麻醉剂。
2)准备工具:准备好所需的器械,如注射器、针头、72%医用酒精等。
3)小鼠体位:将小鼠放置于工作台上,头部略微向后仰。
常用实验动物的采血方法简介
常用实验动物的采血方法一小鼠和大鼠的采血方法1、剪尾采血:需血量较少时常用此法。
先将动物固定,将鼠尾浸在50℃左右温水中浸泡几分钟或用酒精棉球或二甲苯涂擦鼠尾,使尾部血管充盈,剪去尾尖1~2mm(小鼠)或3~5mm(大鼠),便血液顺血管壁自由流入试管或用血红蛋白吸管吸取。
采血结束时,伤口消毒并用棉球压迫止血。
此法每只鼠一般可采血 10次以上,小鼠每次可取血0.1mL左右,大鼠可取血0.3~0.5ml。
2、眶后静脉丛采血:操作者一手固定小鼠或大鼠,拇指和食指尽量将鼠头部皮肤捏紧,或轻轻压迫颈部两侧,使鼠眼球突出,眶后静脉丛充血,另一只手持毛细采血管,以45°从内眼角刺入,并向下旋转,感觉刺入静脉丛后,再向外边退边吸,当得到所需血量后,放松加于颈部的压力,并拔出采血器,以防穿刺孔出血。
若技术熟练,此方法在短斯内可重复采血,小鼠一次可采血0.2~0.3ml,大鼠可采血约0.5ml。
如只进行一次取血,可采用摘眼球法,右手取一眼科弯镊,在鼠右或左侧眼球根部将眼球摘去,并将鼠倒置;头向下,抽取血液。
3、鼠装进固定器,漏出尾巴,同1,使尾部血管充盈,作好尾部消毒,用1 ml针筒接好4号针头,穿刺尾静脉,抽取血液。
4、腋下采血:将麻醉后的小鼠仰卧固定,剪开腋下皮肤,钝性分离腋下的胸肌等组织,暴露腋下血管,剪断腋下静脉,用注射器或吸管吸血。
5、断头采血:用剪刀迅速剪掉动物头部,立即将动物头朝下,提起动物,血液可流入试管中。
6、心脏采血:切开动物胸膛,直接从见到的心脏内采血,也可剪破心脏直接用注射器或吸管吸血。
7、股动脉采血:大量取血时常用此法。
需手术分离股动脉,用注射器套上针头刺入血管取血或剪断股动脉用吸管吸取血样,小鼠的一次采血量可达 0.5ml,大鼠可达2.0ml,操作时防止喷血。
二豚鼠、家兔的采血方法1、家兔耳缘静脉采血穿刺采血法:是家兔最常用的采血方法。
具体方法同耳缘静脉注射给药。
此法一次可采血5~lOml,可多次重复使用。
动物取血方法
生理学实验动物的取血方法(一)大鼠、小鼠1、尾静脉使鼠尾静脉充分充血后,用剪刀剪去尾尖,尾静脉知即可流出,用手轻轻从尾根部向尾尖部挤几下,可以取到数滴血。
2.眼眶动脉和静脉用左手抓住鼠,拇指和食指尽量将鼠头部皮肤捏紧,使鼠眼球突出。
右手取一无钩弯小镊,在鼠右侧眼球根部将眼球摘去,关将鼠倒置,头向下,此法由于取过程动物未死,心脏不断在跳动,因此取血量比断头法多,一般约可取出4-5%鼠体重的血液量。
1-27 切破鼠尾静脉方法1-28 鼠尾静脉取血方法3.后眼眶静脉丛连续穿刺穿刺部位是在眼球和眼眶后界之间的后眼眶静脉丛。
采用特制的硬玻璃吸管,管长15厘米,前端拉成毛细管。
取血时,用手从背部捉住动物,同时用食指和拇指握住颈部,利用对颈部所加的轻压力,使头部静脉淤血,将消毒的吸管用抗凝剂湿润其内壁,从内侧眼角将吸管转向前,并轻压刺入,深约4-5mm就达到后眼眶静脉丛,血液自然进入吸管内。
在得到所需血量后,除去加于颈部的压力,同时抽出吸管。
1-29 小鼠后眼眶静脉丛取血方法1-30 大鼠后眼眶静脉丛取血方法4.断头用大鼠断头器或粗剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉,实验者立即将鼠颈向下,提起动物,对准准备好的容器,鼠血即可从颈部滴入容器内。
如图1-315.心脏左手固定鼠,在左侧第3-4肋间,用左手食指摸到心搏,右手取注射器选择心搏最强处穿刺。
如图1-321-31 小鼠断头取血方法1-32 小鼠心脏取血方法6. 颈静脉作一般颈外静脉分离手术。
颈静脉暴露楚后,用注射器针头沿静脉平行方向刺入,抽取所需血量,采用此法取血,体重20克的小鼠可取0.6ml左右,体重300克的大鼠可取血8ml左右。
1-33 大鼠颈静脉取血方法(二)家兔和豚鼠1、心脏:将兔仰卧固定在手术台上,把左侧胸部相当于心脏的部位的被毛剪去,用碘伏、酒精消毒皮肤。
实验者用左手触摸左侧第3-4肋间,选择心跳最明显处作穿刺。
一般由胸骨左缘外3mm 处将注射针头插入第三肋间隙。
3.6实验动物的取血与处死方法
3.6 实验动物的取血与处死方法3.6 实验动物的取血与处死方法3.6.1 实验动物的采(取)血方法血液常被比喻为观察内环境的窗口,在需要检测内环境变化的生理实验中常需要采取血液样本。
因实验动物解剖结构和体型大小差异,及所需血量的不同,取血方法不尽相同。
(1) 兔①耳中央动脉取血乙醇涂擦耳中央动脉部位,使其充分扩张,用注射器刺入耳中央动脉抽取动脉血样,一次性取血时也可用刀片切一小口,让血液自然流出,收取血样;取血后用棉球压迫局部,予以止血。
②股动脉取血将家兔仰卧位固定。
术者左手以动脉搏动为标志,确定穿刺部位,右手将注射器针头刺入股动脉,如流出血为鲜红色,表示穿刺成功,应迅速抽血,拔出针头,压迫止血。
③耳缘静脉取血耳缘静脉可供采取少量静脉血样,方法与前述耳缘静脉注射给药相似。
④心脏穿刺取血将家兔仰卧位固定,剪去心前区被毛,用碘酒消毒皮肤。
术者用装有7号针头的注射器,在胸骨左缘第三肋间或在心跳搏动最显著部位刺入心脏,刺入心脏后血液一般可自动流入注射器,或者边刺入边抽吸,直至抽出血液。
抽血后迅速拔出针头。
心脏取血可获得较大量的血样。
[注]:如需要抗凝血样时,应事先在注射器或毛细管内加入适量抗凝剂,如枸橼酸钠或肝素,将它门均匀浸润注射器或毛细管内壁,然后烘干备用。
(2) 大白鼠和小白鼠①断尾取血固定动物,露出尾部,用二甲苯擦拭尾部皮肤或将鼠尾浸于45~50℃的热水中数分钟,使其血管充分扩张,然后擦干,剪去尾尖数毫米,让血自行流出,也可从尾根向尾尖轻轻挤压,促进血液流出,同时收集血样,取血后用棉球压迫止血。
该方法取血量较少(图3.6-1)。
②眼球后静脉丛取血术者用左手抓持动物,拇指、中指从背侧稍用力捏住头颈部皮肤,阻断静脉回流,食指压迫动物头部以固定,右手将一特制的毛细吸管(45o)自内眦部(眼睑和眼球之间)插入,并沿眼眶壁向眼底方向旋转插进,直至有静脉血自动流入毛细吸管,取到需要的血样后,拔出吸管(图3.6-2) 。
小鼠取血方法范文
小鼠取血方法范文小鼠是实验动物中最常用的一种,而取血是小鼠实验中常见的操作之一、合理且正确地进行小鼠取血操作,对于确保实验结果的准确性和动物福利非常重要。
在进行小鼠取血操作之前,我们需要准备好以下实验材料:1.小鼠:选择健康、年龄相对一致的小鼠进行实验,以保证可靠的结果。
同时,要依据实验需求选择适当的小鼠品系。
2.取血针和注射器:根据小鼠体重和实验需求选择合适的取血针和注射器,确保尽量减少疼痛和伤害。
3.取血管道:包括收集血液的容器、试管或离心管等。
4.消毒物品:如酒精、碘酒等,用于对实验操作区域进行消毒。
在进行小鼠取血操作之前,还需注意以下准备工作:1.选择适当的取血部位:小鼠的取血部位主要有尾静脉、眼眶静脉、颈静脉等。
根据实验需求选择合适的部位,并确保操作简便、不影响小鼠行动。
2.麻醉小鼠:为了减少小鼠的疼痛和痛苦,通常在取血前需要给小鼠进行麻醉。
常用的麻醉方式有通过给小鼠腹腔注射氯硝安定、异丙酚等。
3.圈养小鼠:为了减少小鼠的压力和痛苦,通常需要将小鼠在合适大小的圈舍中圈养一定时间,使其适应环境。
接下来,具体介绍尾静脉取血和眼眶静脉取血两种常用方法。
1.尾静脉取血:a.麻醉小鼠:将小鼠放置在适当的麻醉设备中,通过尾静脉注射氯硝安定麻醉。
b.准备操作区域:使用消毒剂彻底清洗操作区域,并用棉球或消毒液清洁小鼠尾部。
c.固定尾部:将小鼠尾部固定在台面上,使其保持稳定。
d.消毒取血针:使用酒精或碘酒消毒取血针,确保操作无菌。
e.技术操作:将取血针小心地穿刺小鼠尾部,并顺利插入尾静脉。
采取适当的采集血液量,注意不要对小鼠造成过多的伤害。
f.收集血液:使用注射器或其他血液收集管道收集需要的血液,并避免任何污染。
g.固定伤口:在取血后,用棉球轻轻按住小鼠尾部取血点,帮助止血。
h.醒鼠:在小鼠完全醒来后,将其放回适当的圈舍中,让其恢复。
2.眼眶静脉取血:a.麻醉小鼠:将小鼠放置在适当的麻醉设备中,通过腹腔注射异丙酚麻醉。
小鼠取血方法
小鼠取血方法主要有三类方法:1、少量取血:鼠尾采血法一一固定动物并露出鼠尾,将尾部侵入45-50度温水中数分钟,使静脉充血,擦干,再用酒精棉球擦拭消毒。
剪掉尾尖约0∙2-0.3cm。
拭去第一滴血。
然后用毛细管定量吸取尾血。
采血完毕用棉球压迫止血2、中等量取血:眼眶静脉丛采血一一左手拇指及食指紧紧握住小鼠颈部,压迫颈部两侧使眶后静脉丛充血,但用力要恰当,防止动物窒息死亡。
右手持玻璃毛细管从右眼或左眼内眦部以45度角刺入,刺入深度为2-3mm。
若遇阻力稍后调整角度后再刺入,如穿刺恰当,血液能自然流入毛细管内。
得到血厚,即除去颈部压力,拔出毛细管,用干棉球压迫止血3、大量采血:断头采血一一用于动物实验结束后。
左手握住小鼠,右手持剪刀,快速剪掉头颈部,倒立动物让血液滴入容器。
注意防止断毛落入•卜鼠利大鼠剪尾取IilL祛;将清嘔鼠袈入探顒色的布袁中,粽鼠身塩疾・用酒精涂擦或用锻水浸趟怏机管扩张,剪斷尾光已堆静肚血脚可就出,川丁轻轻地从厘根绷冋尾次挤崔,可取到一定量的血敲U UlIl 后,川柿球斥迫止血・也可采刖交誓切割壓静脉方法収血’用一糠利刀片在尾光部切破一段尾靜J⅛∙ ⅛J⅛ 血即可流曲毎⅛∏Γ⅛0.3-0. S nl・⅛-⅛lfr^⅛⅛J⅛.三根毘清關町替换册害IL ⅛J≡⅛∣5J⅛⅛C切⅛L 由丁鼠血易瓶屈要仝血时,应事先将抗旅刘直丁和IiL管中”如用ιliL⅛D∣J⅛⅛⅛HS・⅛±j½i⅛⅛⅛i⅛.恨琲同抄怵妝取血法:左于持孤脚忻与中捋抓仕现讯皮抓疲壻按托头都向下,阴瞬静膩冋流,便腹球后静肮丛范机,眼球外突.右于持俠肝素浒浸池过的FI制吸血器,从内毗部刺入,沿内卜谨咂⅛向眼球后折谜4~5血.旋转吸Mtt头,切开静脉M t IfiL液H初斑入吸Ill憎筒.轮轻拥吸M管〔防止负乐压1⅛^⅛A⅛抽血电圉恭人拔出吸Ifiith放松手床力.4⅞∣f∣ι⅛J∏⅛⅛f?止-也可用转制的披璃取血管悄长7〜10 Ui IJ前刑憧成毛MU管,内⅛0- 1 -L 5皿1 UIl l后站管悴为0«T “哮要吋可在屈S I剌?L重覆収血・it法也适用諱鼠和家兔。
实验动物采血完全指南
实验动物采血完全指南采血方法的选择,决定于实验的目的所需血量以及动物种类。
凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。
当需血量较多时可作静脉采血。
静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。
例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度,必须采取动脉血液。
采血时要注意:⑴采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25-28℃,冬季,15-20℃为宜;⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂.1.取少量血a.尾静脉大鼠、小鼠b.耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊c.眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠d.舌下静脉兔e.腹壁静脉青蛙、蟾蜍f.冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅2.取中量血a.后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫b.前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫c.耳中央动脉兔d.颈静脉狗、猫、兔e.心脏豚鼠、大鼠、小鼠f.断头大鼠、小鼠g.翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅h.颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅3.取大量血a.股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔b.心脏狗、猴、猫、兔c.颈静脉马、牛、山羊、绵羊d.摘眼球大鼠、小鼠采动物品种最大安全采血量(ml) 最小致死采血量(ml)小鼠0.2 0.3大鼠 1 2豚鼠 5 10兔10 40狼狗100 500猎狗50 200猴15 601.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。
固定动物并露出鼠尾。
将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。
再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。
也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。
动物防疫检疫中常用的采血方法及注意事项
健康养殖·防控2020.23 畜牧业环境75摘 要:动物防疫检疫工作是现阶段动物养殖过程中的一项重要工作,动物自身的品质不但影响着养殖场的生产效益和经济效益,而且也紧密关联着市场上相关产品的安全性和养殖业的未来发展,想要针对动物的自身发育情况进行全方面的控制,就需要定期开展相应的检查工作,针对动物进行采血,通过血液和血清开展检测工作,从而及时判断出动物自身体内是否存在着有害病毒。
笔者主要针对动物防疫检疫中最常见的采血方法进行全面细致的分析和说明。
关键词:动物防疫检疫;常用采血方法;注意事项1 动物防疫检疫中的采血技术1.1 静脉采血静脉采血属于动物防疫检疫工作中最常见的一项采血技术,主要是通过对动物的静脉血管进行施针采血,从而有效地保障采血的效果和质量。
静脉采血主要分为:颈部静脉采血、耳部静脉采血、前腔静脉采血,此种采血方式适用于像猪、羊、牛等这类大中型的动物。
正确的静脉采血步骤为:(1)在动物静脉的中间部位或中间往下的1/3处将动物的毛发剔除,务必要保证采血工作前的整洁、卫生,最大限度地确保采血的品质;(2)相关工作人员可使用碘伏对动物刚刚采血的部位进行认真的清理和消毒;(3)而后再用拇指对准动物临近心端的血管处进行按压,以保障动物的血管得以怒张,此时便需立即使用采血针头对动物身上需要注射的部位进行相应的采血工作,需要注意的是采血的针头一定要与动物的局部静脉相对准,待针头顺利进入动物的静脉血管后,则可以适当地将针头再向里推进一些,这是为了保证采血的效率;(4)待采血工作完毕之后,应使用棉球对准动物的采血部位轻摁一段时间,以起到止血的作用。
1.2 耳静脉采血耳静脉采血的适用群体主要是猪、兔等采血量普遍较少的动物类型。
正确的耳静脉采血步骤为:(1)务必要让猪、兔保持横卧状态,如遇突发情况,则可借助必要的固定工具。
在施针时应对准猪、兔血管相对清晰的部位刺入,这样才能更有效地保障采血效果和质量;(2)需要将猪或兔的耳根部用力卡紧,而后再使用相同的方式要求猪、兔保持良好的持续状态。
大鼠取血方法(总结)
大鼠取血方法1.割(剪)尾采血:当所需血量很少时采用本法。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。
2.鼠尾刺血法:大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3.眼眶静脉丛采血:体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。
4.断头取血:采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。
右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。
小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。
5.心脏采血:鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。
若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。
小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。
1.浅麻醉大鼠2.四肢展开固定在平板上3.按常规碘酒、酒精消毒后4.用食指感觉心博最动处5.大约在胸骨下缘1/3处、稍偏左0.2-0.5左右的地方垂直进针(1/4号)6.针头抵心脏有明显的搏动感,再稍进针,有空虚感,血液跳跃而上针腔7.从血液的颜色很容易判断在心室还是心房,一般都在心室8.多次同一大鼠的心脏采血,切记初次进针的位置及深度,不要随意更换固定姿势!9.我每次取1ml血液,大约可操作4-5次(200g大鼠)6.颈动静脉采血:先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。
在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。
离心取上清后,余下的红细胞加适量生理盐水从尾静脉中回输给大鼠,这样可能对大鼠的血量、体内药物的浓度等影响均小些。
动物采血优缺点比较
附页:实验动物采血方法的收集及优缺点的比较
参考文献:
1. 李晓晶 刘瑾,实验动物采血优缺点比较,《辽宁中医药大学学报》 第11卷 第11期 2009年11月 P217
2. 杨靖亚 实验一实验动物的捉拿和给药途径 上海海洋大学海洋生物制药实验指导 P90-97
3. 李志祥,实验家兔心脏采血技术,《云南畜牧兽医》CNKI:SUN:YNXM.0.1994-03-021
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4. 张长在,家兔耳缘静脉采血法,《包头医学院学报》
CNKI:SUN:BTYX.0.1999-02-038
5. 姚建华,家兔颈部4中采血方法和采血量比较 《数理医药学杂志》CNKI:SUN:SLYY.0.2005-02-022
制作者:上海海洋大学食品学院(0834110)
合作者:上海海洋大学 生命学院 08生物技术A组
制作日期:2011-4-21。
动物采血的注意事项
动物采血的注意事项
1. 合理规划采血频率,避免过度采血对动物健康造成伤害。
2. 采血前应进行动物体检,并选择健康状况良好、精神状态稳定的动物。
3. 需要采血部位必须经过消毒处理,避免感染。
4. 采血器具必须经过消毒、灭菌处理,避免传播病原体。
5. 采血过程中必须遵守操作规程,严格按照采血量和采血时间的要求进行。
6. 采血后需要给予适当的护理,避免出现感染或出血等并发症。
7. 采血后需要对采血部位进行观察,如果出现异常情况,应及时就医处理。
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1、关于小鼠血液量的问题:
小鼠循环血量占体重的6%,或50-70ml/kg,采血占全血量的10%不会对机体造成严重的不良影响。
3-4周后可以重新采集一次。
特别注意的是:老年小鼠血量降低。
疾病会加重不良反应,所以必须考虑这些影响因素。
采血后应补充响应体积的液体,如果需要很短时间反复采血,比如每天一次,每次的采血量不应超过全血的1%。
2、关于取血方法的问题:
(1)尾尖取血:当所需血量很少时采用本法。
固定动物并历出鼠尾,将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使局新血管扩张。
将鼠尾擦干,剪去尾尖,血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。
如需间隔一定时间,多次采取鼠尾尖部血液,每次采血时,将鼠尾剪去很小一段,取血后,先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤口。
也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾势脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向切割,每次可取0.2~0.3ml血,切割后用棉球压迫止血。
这种采血方法在大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检查。
(2)眼眶后静脉丛取血:当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。
用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突(示眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管,沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入。
刺入深度小鼠2~3mm,大鼠4~5mm。
当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,由于血压的关系,血液即流人玻璃管中。
得到所需的血量后,拨出毛细管。
若手法恰当,小鼠约可采血0.2~0.3ml,大鼠约可采血0.4~0.6ml。
(3)断头取血:当需要较大量的血液,而又不需继续保存动物生命时采用此法。
左手捉持动物,使其头略向下倾,右手持剪刀猛力剪掉鼠头,让血液滴入盛器。
小鼠可采血0.8~1.0ml,大鼠可采用5~8ml。
(4)眶动脉和眶静脉取血:此法既能采取较大量的血液,又可避免断头取血法中因组织液的混入导致溶血的现象,现常取代断头取血法。
先使动物眼球突出充血后,以弯头眼科镊迅速钳取眼球,并将鼠倒置,头向下,眼眶内很快流出血液,让血液滴入盛器,直至不流为止。
此法由于取血过程中动物未死,心脏不断在跳动,因此取血量比断头法多,一般可取鼠体重4~5%的血液量,是一种较好的取血方法。
(5)心脏取血:动物仰卧固定在固定板上,剪去心前区部位的被毛,用碘酒酒精消毒皮肤。
在左侧第3~4肋间,用左手食指摸到心搏处,右手取连有4~5号针头的注射器,选择心搏最强处穿刺,当针刺入心脏时,血液由于心脏跳动的力量自动进人注射器。
此法要求实验者掌握以下要点:要迅速而直接插入心脏,否则,心脏将从针尖处滑脱;如第一次没刺准,将针头抽出重刺,不要在心脏周围乱探,以免损伤心、肺;要缓慢而稳定的抽吸,否则,太多的真空反而使心脏塌陷。
若不需保留动物生命时,也可麻醉后切开动物胸部,将注射器直接刺人心脏抽吸血液。
(6)大血管取血:大、小鼠还可从颈动、静脉,股动、静脉和腋下动、静脉取血,在这些部位取血均需麻醉后固定动物,然后作动、静脉分离手术,使其暴露清楚后,用注射器沿大血管平行刺入(或直接用剪刀剪断大血管),抽取所需血量。
切断动脉时,要防止血液喷溅。
3、关于抗凝剂的问题
取血清不用抗凝;若取血浆则用抗凝剂采血管(肝素按1mg等于100个国际单位,10个国际单位能抗凝1ml血液计,肝素的抗凝血作用很强,纯的肝素10mg能抗凝100ml血液。
一般可配成1%肝素生理盐水溶液,取0.1ml加入试管内,加热80℃烘干,每管能使5~10ml血液不凝固。
兔10mg·kg-1。
而且这也是动物实验最常用的抗凝方法)。
4、关于血浆、血清制备的问题
血浆:抗凝血静置后红细胞开始沉降,血浆占3/5,半透明金黄色。
下层红细胞2/5,暗红色。
红细胞上层是白细胞和血小板,灰色薄层。
分离方法:抗凝血4℃ 12h自然分离,或3000rpm/min 5-10min离心加速分离后,吸取上层。
由采血6h内从全血分离的血浆低于-18℃保存6个月。
血清:静置2-4小时(4℃过夜),待血浆凝固后,血清析出,再3000转离心10分钟吸取血清(3500r,15min;5000r,10min;5000r,10min)。
血液置室温中凝固1h,然后置4度过夜,使血块收缩。
将血块自容器壁分离,将血清全部倾入离心管,4℃ 2500rpm离心血块30min,取上清与前面血清混合,4℃ 1500rpm离心全部血清部分,分装-20或-70度保存。
但鸡血清不宜冻存。
大鼠和小鼠的抗体与其它动物比较不稳定,因此血液凝固后立即分离。
如果需要加叠氮钠防腐,应加至0.02%。
将抗体分装于多个离心管,对于血清,每管适宜容量是100~500微升。
(总结:最好离心2次,血清比较纯。
要用粗针头以免溶血。
放置37℃或4℃待凝块收缩。
前者迅速,但得血清较少;后者时间长,有时还会出现溶血,但获得血清多,而且效价不会下跌)。
5、关于血清保存的问题
1)4摄氏度保存。
用此法可以存放3个月到半年。
效价高时一年之内不影响使用。
将抗血清除菌后用液体状态保存与普通冰箱。
保存时要加入0.01%硫柳汞或0.1%的叠氮钠防腐,若加入半量的甘油则保存期可延长。
2)低温保存。
放在-20至-40摄氏度,五年之内效价不会有明显降低。
切勿反复冻融。
3)冰冻干燥。
制品内水分不高于0.2,一般在冰箱中保存5-10年,效价不会明显降低
4)解冻时,逐级解冻。