精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率与卵子体外受精率的相关性研究
精子功能检测在辅助生殖中的应用
精子功能检测在辅助生殖中的应用曹泽磊，朱亮（中国人民解放军第306医院生殖医学中心，北京，100101）摘要：精子功能检测在男性不育的诊断和治疗中的作用越来越引起人们的重视。
目前精液检测的技术和方法很多，如对精子运动特征检测、形态学分析、体外存活试验、精子膜完整性试验、顶体状态测定、精子－宫颈黏液相互作用试验等。
这些试验均为男性不育症的诊断提供帮助，但各个检测项目的结果对体内外生育能力的预测有所差异，因此有必要结合临床实际对检测项目进行必要地筛选，既能为临床诊断提供依据，又可提高效率节约患者的医疗成本。
关键词：精子功能；辅助生殖；筛选中图分类号：R446.144文献标识码：B文章编号：1006－9534（2011）01－0136－03Sperm function tests in assisted reproduction．CAO Ze－lei，ZHU Liang．（Department of Reproductive Medicine，the306th Hospital of P．L．A．Beijing100101）Abstract：Human sperm function test has such an essential role on the etiologic diagnosis of male infertility that it attracts more and more attention．Many tests have offered indispensable approaches to diagnose the male infertility such as sperm movement charac-ter，morphological analysis，survival test in vitro，integrity of sperm membrane，acrosomic status，interaction between sperm and cervical mucus and so on．We should select them to apply the clinical and to reduce the costs．Key words：Sperm Function；Assisted Reproduction；selection在男性不育的诊治过程中，精液的常规化验分析一直作为一个很重要的参考指标，来指导临床的治疗方案，随着男科学研究的深入，传统的精液分析已不足以对男性生育能力进行准确评价。
动物繁殖学题库
动物繁殖学试题库一、名词解释11隐睾；2副性腺21生殖激素；2神经激素；3长反馈；4短反馈；5超短反馈；6外激素；7大神经内分泌系统；8小神经内分泌系统；9动物的化学通讯；10动物的物理通讯;11局部激素；12神经内分泌；31性成熟；2体成熟；3行为系列；4精子发生；5精子发生周期；6果糖酵解；7外源性呼吸；8精子冷休克；9呼吸商；10精子成熟；11精子的趋流性；41母畜初情期；2发情周期；3季节性发情；4排卵率；5产后发情；6安静排卵；7卵泡期；8黄体期；9自发性排卵;10发情鉴定；11初配适龄;12诱发性排卵；51人工授精；2精子活率；3精子密度；4精子畸形率；5精液稀释；6变温保存；7液态保存；8冷冻精液；9精液平衡；61受精；2精子获能；3透明带发应；4卵黄封闭作用；5妊娠识别；6妊娠的建立；7胎盘；8怀孕脉搏；9附植；10精子顶体反应；11卵裂；12子宫拴；71分娩预兆；2产道；3胎向；4胎位；5胎势；6子宫复原；7产后期；8分娩;9牛胎衣不下;10破水;11努责;12产力;13恶露;14前置；81发情控制；2同期发情；3诱发发情；4胚胎移植；5超数排卵；6诱发分娩；7核移植；8胚胎分割；9卵子培养；10排卵控制；91繁殖力；2正常繁殖力；3情期受胎率；4不返情率；5配种指数；6产犊指数；7窝产仔数；8繁殖成活率；9第一情期受胎率；10繁殖率；11总受胎率；12总情期受胎率；13公羊效应；二、填空题11家畜的睾丸为（）形；2成年未孕母牛卵巢的形状为（）形；3公畜的交配器官是（）；4母畜的交配器官是（）；5精子在（）中最后成熟；6原始卵泡位于卵巢的（）部；7对分子宫二角基部之间的纵隔有一纵沟，称（）；8胎儿的发育场所是（）；21各种家畜孕酮的含量，在卵泡期都低于（）；2前列腺素是（）分泌的局部激素；3催产素分泌的调节一般是（）性的；4调节松果腺激素分泌的主要因素是（）；5PMSG是由马属动物子宫内膜的（）组织所分泌；6HCG主要来源于孕妇胎盘绒毛的（）；7在调节家畜繁殖机能方面起重要作用的前列腺素是（）；8在所有的家畜中，发情周期内雌激素的含量以（）期最高；9对生殖活动有间接调节作用的激素称（）；10控制LHRH分泌调节的高级神经中枢，位于大脑基底部的中枢神经（）；11低等动物中的松果腺是（）；31雄性动物的性成熟一般比雌性动物（）；2精子的头部呈（）形；3精子的呼吸主要在（）进行；4精子的正常运动型式是（）；5精子的发生是在睾丸内的（）中进行的；6对精子起营养、支持作用的细胞称作（）细胞；7精子蛋白质的分解往往表示精子品质已（）；8精子的比重比精清略（）；9新采出的牛、羊精液偏（）性；10新采出的猪、马精液偏（）性；11早期幼畜的性腺对微量促性腺激素缺乏（）；12培育品种的性成熟比原始品种（）；13公畜的初配年龄主要决定于（）；14大家畜的性成熟时间比小家畜（）；15精子向附睾内运行发生的最显著的变化是（）；16精子最脆弱的部分是（）；17精清中的磷脂主要来源于（）；18冷冻精液解冻宜采用（）法；19生产发育快的个体，性成熟（）；20对热应激最敏感的公畜是（）；41个体小的品种，其初情期较个体大的（）；2我国南方的牛、猪等母畜，其初情期较北方的（）；3一般来说，营养水平高的母畜初情期比营养水平低的（）；4一个卵母细胞最终能形成（）个卵子；5正常的哺乳动物的卵子形态为（）形；6家畜的发情周期主要受（）所控制；7绵羊是（）日照发情动物；8母马是（）短日照发情动物；9青年母猪的发情期较成年母猪的（）；10各种母畜发情鉴定最常用的方法是（）；11黄体开始退化到排卵的时期称（）；12卵泡破裂排卵后形成黄体，一直到黄体开始退化为止的时期，称（）；13母畜初情期与年龄的关系交体重更为（）；14母猪的发情期多为（）天；15母猪断奶后多在（）天内发情；17从产后子宫复原的角度看，母猪的哺乳期不宜少于（）天；18发情周期中，卵泡期比黄体期（）；51人工授精最早是在家畜（）中试验成功；2在我国，人工授精应用最广泛的家畜是（）；3用假阴道采精时，其温度应保持在（）；4采取公猪精液应用最广泛的方法是（）；5在生产实践上，公牛通常每周采精（）次；6各种家畜的新鲜精液，活率一般在（）左右；7正常精液中精子的畸形率不超过( )时,对精子的受精力影响不大;8公猪的精液一般稀释（）倍；9顶体异常率超过（）时，会直接影响受胎率；10猪在一个情期内，采用两次输精，其间隔时间为（）h；11各种家畜的假阴道，结构基本（）；12假阴道压力不足，不能（）公畜射精；13精子冰晶化的温度区域是（）；14细管精液解冻，可直接投入（）中；待其内精液融化一半时，即可取出备用；15母牛最常用的输精方法是（）；16采用混合精液输精，可以（）母猪受胎率；17用于制作冻精的精液，经稀释后精子的活率应（）于原精液；18顶体异常率，在一定程度上反映了精液（）保存的效果；19精液中精子畸形率超过（）时，则品质下降，影响受胎率；61（）是新个体发育的起点；2卵子在输卵管内的正常运行，必需有适当水平的雌激素和（）；3家畜卵子维持受精能力的时间一般都不到（）d；4家畜卵子到达受精的部位的时间约为（）h；5精子获能先在母畜子宫内进行，最后在（）内完成；6猪精子获能的主要部位在（）；7桑椹期的胚胎主要靠（）提供营养；8囊胚期的胚胎主要靠（）提供营养；9早期胚胎从输卵管运行到子宫需要（）d；10( )是判断大家畜是否怀孕的最基本而可靠的方法;71家畜多在( )分娩;2子宫肌的收缩是从子宫的( )开始;3牛的胎衣排出期最多为( )h;4母猪分娩时都是( )卧;5家畜难产时以( )性难产最为多见;6母猪产后3-5d的发情是( )性的;7母畜产后1-3天排出的乳汁称( );8牛排出恶露的时间为( )d;9胎儿下丘脑-垂体-( )轴的激活,在分娩发动中起主导作用;10恶露排出时间过长,表明子宫有( );81母畜体内（）水平的下降，是卵泡开始生产发育的前提条件；2用PGF2α法作同期发情时，只适用于有（）的母畜；3人工黄体期与天然黄体期相重合的时间越短，发情后的受胎率（）；4成年母猪实施（），可造成天然的同期发情；5胚胎移植时，提供胚胎的个体称（）；6胚胎移植时，接受胚胎的个体称（）；7牛胚胎的收集，多采用（）法；8体外受精成功的判断标准是发生（）；9牛自然发情配种后的正常受胎率是（）；10胚胎的收集，不能早于排卵后（）天；11牛的胚胎收集，一般在配种后（）天；91对于种畜来说, 繁殖力就是它的( );2母牛的繁殖力常用一次输精后的( )效果来表示;3母牛的繁殖力可用( )来表示;4总情期受胎率主要反映畜群的（）情况；5母畜配种后注射（），能够提高胚胎存活率；6近亲繁殖可以（）胚胎死亡率；7胎儿干尸化的主要特征是（）；8公母畜本身的（）对繁殖力起决定性作用；9就整个畜群来说，繁殖力的高低以平均数或（）表示；10母牛的标准产犊指数为（）;三、单项选择题11卵巢游离缘上有排卵窝的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；2卵子是在输卵管的（）部受精；a伞；b壶峡；c峡；d壶腹；3睾丸中无睾丸网的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；4附睾头是由10-30条（）构成；a精细管；b曲精细管；c睾丸输出管；d直精细管；5精细管中的（）是直接形成精子的细胞；a支持细胞；b生精细胞；c间质细胞；d足细胞；6子宫颈阴道部不明显的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；7公畜附性腺的发育决定于（）的存在;a雌激素；b雄激素；cFSH；dLH；8（）是子宫的门户；a子宫腔；b子宫体；c子宫角；d子宫颈；9睾丸占体重比例最大的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d绵羊；e山羊10睾丸分泌雄激素的细胞是（）；a支持细胞；b生精细胞；c间质细胞；d足细胞；11在出生前后，睾丸下降到阴囊的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d绵羊；e山羊；12睾丸中精子密度最大的部位是（）；a睾丸网；b附睾头；c附睾体；d附睾尾；13接近初情期的母猪，其卵巢形状是（）；a蚕豆形；b肾脏形；c桑椹形；d串状葡萄；14猪的子宫角形似（）状；a绵羊角；b牛角；c扁圆桶；d小肠；15牛的子宫角形似（）状；a绵羊角；b牛角；c扁圆桶；d小肠；21属于不饱和脂肪酸的激素是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；2主要来源于马属动物胎盘组织的促性腺激素是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；3属于神经激素的是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；4在母畜妊娠维持中起主要作用的激素是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；5促性腺激素释放激素是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；6促卵泡素是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；7促黄体素是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；8前列腺素是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；9具有溶解黄体作用的激素是（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGF2α；10下丘脑释放/抑制激素的神经内分泌细胞主要集中在（）；a前组；b后组；c结节组；d室旁核；11下丘脑神经内分泌细胞通过垂体门脉系统，和（）内分泌细胞建立了联系；a腺垂体；b脑垂体；c松果腺；d视上核；12哺乳动物的松果腺是（）；a光感受器；b内分泌器官；c第三只眼睛；d退化的器官；13垂体促性腺激素由（）分泌；a垂体前叶；b垂体后叶；c垂体中叶；d垂体结节部；14垂体中的促卵泡素含量最高的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；e兔；15发情持续时间最长的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；e兔；16从猪、牛、羊的下丘脑提纯的LH-RH，其分子结构为（）肽；a7；b8；c9；d10；17FSH能影响生长卵泡的数量；但只有在（）的协同作用下，才能激发卵泡的最后成熟；aPGs；bE2；cFSH；dLH；e P4；18 在处于高峰时，血清中PMSG的含量，以（）最高；a轻型马；b重型马；c原始品种的马；d矮马；19动物的化学通讯主要通过（）器官接受信息；a视觉；b听觉；c嗅觉；d触觉；20 HCG对动物的的作用与（）很相似，生产中可以作为其代用品使用；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gPGF2α21（）对卵泡发育起主要作用;aFSH；bLH；cG n RH；dOT；22LH在（）协同下激发排卵;aFSH；bG n RH；cOT；dPGF2α23（）不是典型的生殖激素；aHCG；bPGF2α；cFSH；dPMSG；24调节发情的主要激素是（）;a雌激素；b孕激素；c松弛素；dPRL；25OT是（）类化合物;a肽；b朊；c类固醇；d脂肪酸；26按来源分，生殖激素可分为（）类;a4; b5；c6；d7；27（）对排卵起主要作用;aLH；bFSH；cG n RH；dOXT；28（）能促进性腺激素的分泌;aLH；bFSH；cOXT；dG n RH；29（）的主要作用是溶解黄体;aPGF2α；bG n RH；cPRL；dLTH；30生理条件下，（）的释放是引起排乳反射的重要环节；a催产素；b促乳素；c促乳素释放因子；d促乳素抑制因子；31由一个初级精母细胞可以形成（）个精子；a16；b64；c1；d4；2精子的最后成熟是在（）内完成；a曲精细管；b直精细管；c睾丸；d附睾；3精子运动的能量代谢中心位于尾部的（）；a主段；b中断；c末段；d前段；4精子的顶体由来自细胞质的（）变成；a线粒体；b中心小体；c高尔基体；d仿锤体；5精液中含有的单糖主要是来自精囊腺的（）；a果糖；b葡萄糖；c甘露糖；d岩藻糖；6对精子损害最大的是（）；a太阳光；b荧光灯；c红外线；d紫外线；e辐射;7精子的发生以（）为起点；a性原细胞；b精原细胞；c精母细胞；d足细胞；8家畜精子中的蛋白质主要是（）；a组蛋白；b核蛋白；c脂蛋白；d角质蛋白；9一次射精量最大的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊10一次射精量最小的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；11精子密度最大的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；12精子密度最小的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；13家畜精液的正常颜色为（）；a乳白色；b淡红色；c黄色；d淡绿色；14精子内源性呼吸的代谢基质是（）；a果糖；b丙酮酸；c甘露糖；d缩醛磷脂；15在（）性环境下，精子的代谢和活力都减弱；a弱酸；b弱碱；c中；d强酸；e强碱；16在（）性环境下，精子的代谢和活力都增强；a弱酸；b弱碱；c中；d强酸；e强碱；17猪的精子发生周期是（）天;a34-35；b44-45；c54-55；d64-65；18牛精子的发生周期是（）d;a40；b50；c60；d70；19早期幼畜的性腺，在（）协同作用下，对促性腺激素才敏感；aGH;bGnRH;cPGF2α;d外激素；20交配时间最长公畜的是（）；a猪；b马；c牛；d羊；21公畜利用假阴道采精，主要是（）刺激；a嗅觉；b听觉；c触觉；d视觉;22精子在附睾内贮存时的代谢基质是（）；a果糖；b丙酮酸；c乳酸；d缩醛磷脂；e甘露糖；f山梨醇；g甘油磷酰胆碱；23牛精液呈黄色与饲料中富含（）有关；aVC;bVB1;cVB2;d烟酸；e泛酸；41有的母畜第一次发情，往往安静排卵，主要是因为缺乏（）所致；a孕酮；b雌激素；c促卵泡素；d促排卵素；2出生季节与初情期关系很密切的家畜是( );a猪；b兔；c牛；d羊；3卵子成熟分裂产生的极体，存在于（）；a卵黄周隙；b透明带；c卵黄膜；d卵黄；4在排卵时，卵子周围没有放射冠细胞的是（）；a猪；b家兔；c牛；d羊；e马；5发情季节为春季的家畜是（）；a猪；b家兔；c牛；d羊；e马；6发情季节为秋季的家畜是（）；a猪；b家兔；c牛；d绵羊；e马；7排卵时，雌激素水平剧降，（）往往从阴户流出血液；a猪；b家兔；c牛；d绵羊；e马；8（）产后第一次发情，有卵泡发育且可排卵，配种可受胎；a母猪；b母马；c母牛；d母羊；9（）的孕后发情，卵泡可以发育成熟，且可破裂排卵；a母猪；b母马；c母牛；d母羊；10发情周期为17天的母畜是（）；a猪；b马；c牛；d绵羊；e山羊；11母羊发情鉴定最常用的方法是（）；a接受爬跨+直肠检查卵泡发育；b直肠检查卵泡发育；c试情法+外部观察；d试情法+外阴部观察；12母猪发情鉴定最常用的方法是（）；a接受爬跨+直肠检查卵泡发育；b直肠检查卵泡发育；c试情法+外部观察；d试情法+外阴部观察；13母牛发情鉴定最常用的方法是（）；a接受爬跨+直肠检查卵泡发育；b直肠检查卵泡发育；c试情法+外部观察；d试情法+外阴部观察；14母马发情鉴定最常用的方法是（）；a接受爬跨+直肠检查卵泡发育；b直肠检查卵泡发育；c试情法+外部观察；d试情法+外阴部观察；15母牛在发情周期的任何时候，只要孕酮水平剧降，（）天之内就会有一个卵泡发育，准备排卵；a3；b4；c5；d6；e7；16在发情周期内，卵泡在临近排卵前，由于P4水平剧降，卵泡分泌大量E2，引起（）排卵峰；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；ePGs；17母猪的初配期为（）月龄;a5；b5-6；c5-7；d5-8；18乳牛的适宜初配年龄是（）岁;a1；b1.5；c2；d0.25；19母猪初配体重应为成年的（）%;a60；b70；c80；d90；20母畜发情开始时粘液较（）；a稀；b稠；c浓；d浊；21发情周期长度受交配行为影响的是（）；a猪；b家兔；c牛；d羊；e马；22产后安静发情发生率最高的是（）；a猪；b水牛；c奶牛；d山羊；e肉牛；23发情母畜的“静立反应”出现在（）；a发情初期；b发情期；c发情后期；d间情期；24发情母畜的性欲最强是出现在（）；a发情初期；b发情期；c发情后期；d间情期；51 人工授精最早是在动物（）上试验成功；a狗；b兔；c大鼠；d小鼠；e羊；2家畜的精液冷冻最早是在（）取得成功；a猪；b兔；c马；d牛；e羊；3射精时间最长的公畜是（）；a猪；b兔；c马；d牛；e羊；f驴；4公（）的精液，低温保存效果不如常温保存；a猪；b兔；c马；d牛；e羊；f驴；5（）是引起猪射精反射的首要条件；a温度；b阻力；c压力；d润滑；6（）是引起牛射精反射的首要条件；a温度；b阻力；c压力；d润滑；7采取公牛精液应用最广泛的方法是（）；a假阴道法；b手握法；c筒握法；d电刺激法8公猪的采精次数通常是（）；a每周2次；b隔日1次；c每天2次；d每天1次；9精液品质检查的项目中最重要的为（）；a射精量；b颜色；c密度；d活力；10猪的正常采精量为（）ml；a100-200；b150-300；c200-400；d250-500；11（）的主要作用是使精子抗冷休克；a果糖；b酒石酸；cEDTA；d卵黄；12精液常温保存的温度以（）℃为宜；a25；b28；c30；d32；13牛的精液一般稀释（）倍；14同一母畜一个情期内输精间隔（）h较好；a12；b16；c20；d24；15冷冻精液输精前活力大于（）为宜；a0.3；b0.5；c0.7；d0.6；16（）是精子抗冷冻剂；aEDTA；b卵黄；c双糖；dDMSO；17牛每次输入精子数为（）千万；a0.8-1.0；b1-3；c2-4；d1-5；18液态保存的精液，输精前活力大于（）为宜；a0.3；b0.5；c0.7；d0.6；19优良品质的猪精液中,精子的畸形率不超过( )%;a18;b15;c14;d12;20兼有稀释、营养、抗冷冻作用的物质是( );a卵黄；b奶类；c甘油；d果糖；eDMSO；21常温保存特别适用于（）全份精液的保存；a猪；b羊；c马；d牛；22精液冷冻技术最成熟的畜种是（）；a猪；b羊；c马；d牛；23精液活率评定时，应在（）恒温下进行；a18；b28；c30；d38；e48；24精液稀释前，稀释液和精液应作（）℃左右同温处理；a20；b25；c30；d35；25目前,牛的冷冻精液多采用（）方法分装；a颗粒；b细管；c安瓶；d袋装；26输精器在临用前要用（）冲洗2-3次；a清水；b蒸馏水；c生理盐水；d稀释液；e酒精；27精液稀释液经消毒、密封，可在冰箱中最多存放（）；a1天；b2天；c1周；d2周；28精子发生冷休克的敏感温度是（）℃；a30-0；b25-0；c20-0；d15-0；e10-0；29精子玻璃化的温度区域是（）℃；a0- -60;b-15- -25;c-60- -250;d5-0;30检查精子活力时，应在（）℃下进行；61母猪的妊娠期平均为（）d;a282；b150；c114；d30；e3402母兔的妊娠期平均为（）d;a282；b150；c114；d30；e3403牛卵子维持受精能力的时间为（）h；a8-12；b6-8；c8-10；d16-24；4猪卵子维持受精能力的时间为（）h；a8-12；b6-8；c8-10；d16-24；5阴道型射精的家畜，交配后精子数量最少的部位是（）；a阴道；b子宫颈；c子宫；d输卵管峡部；e输卵管壶腹部；6（）的卵子排卵时已裸露（无放射冠细胞）；a猪；b马；c牛；d羊；f兔；7（）能促进精子的获能；a雌激素；b孕酮；c睾酮；d抑制素；8（）能抑制精子的获能；a雌激素；b孕酮；c睾酮；d抑制素；9卵子在排卵后（）h内有受精能力；a6-8；b10-12；c14-16；d18-20 ；10猪的胚泡在附植前，在子宫内游离（）d；a22-30；b49；c 11-14；d4-7；11马产后第一次发情配种怀孕，胚胎多附植在（）基部；a同侧子宫角；b对侧子宫角；c 上胎空角；d上胎孕角；12除( )之外, 其他家畜的黄体,在整个妊娠期都必须存在; a猪；b马；c牛；d羊；13妊娠母( )的子宫栓经常更新；a猪；b马；c牛；d羊；14牛的胎盘属于（）；a弥散型胎盘；b子叶型胎盘；c带状胎盘；d圆盘状胎盘；15羊的胎盘属于（）；a弥散型胎盘；b子叶型胎盘；c带状胎盘；d圆盘状胎盘；16猪的胎盘属于（）；a弥散型胎盘；b子叶型胎盘；c带状胎盘；d圆盘状胎盘；17（）胎盘，结构比较简单，分娩时胎衣脱落较快；a弥散型；b子叶型；c带状；d圆盘状；18（）易发生胎衣不下；a猪；b马；c牛；d羊；19阴道型射精的家畜，交配后精子的密度最大部位是（）；a阴道；b子宫颈口；c子宫；d输卵管；20精子运行的速度在母畜的（）最快；a发情前期；b发情期；c发情后期；d间情期；21卵裂主要发生于早期胚胎的（）；a桑椹期；b囊胚期；c原肠期；d胚泡期；22牛卵子在输卵管内的运行时间为（）h；a90；b98；c50；d72；23牛胚胎的附植时间为受精后（）；a1.5-2.5月;b3-3.5月;c20-30d;d10-22d24狗的胎盘属（）状胎盘；a子叶；b弥散；c带；d盘；25猪孕体产生的激素信号，始于配种后（）；a13-17d；b14d以前；c11-13d；d15d以前；26（）的卵子不发生透明带反应；a猪；b马；c牛；d羊；f兔；27囊胚阶段的营养主要来自（）；a卵黄；b滋养层；c子宫乳；d胎盘转运；71容易发生胎衣不下的家畜是( );a猪；b马；c牛；d羊；2家畜正常的胎向为( );a纵向;b横向;c直向;d竖向；3产后卵巢上卵泡发育最快的家畜是( );a猪；b马；c牛；d羊；4分娩较难的家畜是( );a猪；b马；c牛；d羊；5分娩母猪恶露排出大约需（）d;a1；b1-2；c1-3；d2-3；6牛的胎衣排出期超过（）h,叫胎膜滞留;a10；b12；c14；d16；7当（）进入软产道时努责就会出现;a胎胞；b胎衣；c胎水；d胎儿；8猪产后子宫复原至少要( )d;a30-45;b39;c24;d18-20；9牛的胎衣排出期多为（）h；a1-2；b20-60min；c3-5；d4-6；10( )环境,有利于母畜子宫肌的收缩;a安静;b应激;c不安;d惊恐；11分娩开口期的主要力量是( );a阵缩;b努责;c阵缩+努责,以阵缩为主;d阵缩+努责,以努责为主；12分娩胎儿排出期的主要力量是( );a阵缩;b努责;c阵缩+努责,以阵缩为主;d阵缩+努责,以努责为主；13对子宫肌收缩有抑制作用的是( );a乙酰胆碱;b催产素;cPGF2α;dP4；fE2；14子宫肌的收缩是从子宫的( )开始;a子宫角；b子宫体；c子宫静；d子宫底部；15一般家畜分娩时，胎儿多是（），头部前置；a纵向;b横向;c直向;d竖向；16家畜分娩后排出的恶露，最初为（）；a黄褐色；b红褐色；c无色；d脓绿色；17初乳中的（），可促使新生仔畜排胎粪；a抗体；b镁盐；c蛋白质；dVA；18母（）对新生仔畜的排他性最强；a猪；b马；c牛；d羊；81用PGF2α法作同期发情时，使（）缩短；a卵泡期；b黄体期；c发情前期；d发情后期；e发情期；2母牛用PGF2α法作同期发情时，只有在周期第（）天才能产生发情反应；a0-5；b5-18；c18-21；d0；3胚胎移植处理的第一步是（）；a超数排卵；b诱导发情；c同期发情；d诱导排卵；4胚胎移植成功的根本条件是（）；a超数排卵；b诱导发情；c同期发情；d诱导排卵；5同期发情时，供体、受体的发情时间，前后不宜超过（）d；a1；b2；c3；d4；e5；6超数排卵的排卵数以（）个最为理想；a5；b5-10；c10-15；d15-20；7体外受精最早在（）上取得成功；a猪；b马；c牛；d羊；e兔；8胚胎移植最早在（）上取得成功；a猪；b马；c牛；d羊；e兔；9用（）可使母畜同期发情;aOXT；bFSH；cPGF2α；dHCG；10家畜的胚胎移植最早在（）上取得成功；a猪；b马；c牛；d羊；e兔；11（）的胚胎对低温敏感，较难存活；a猪；b马；c牛；d羊；e兔；12同期发情的中心问题是控制（）寿命；a卵泡；b黄体；c白体；d红体；13用PGF2α对母牛作同期发情，肌注时的用量和子宫注入的（）；a一样；b一半；c2倍；d1倍；14用PGF2α处理母畜的前提是卵巢上有（）；a卵泡；b黄体；c白体；d红体；91自发性流产以（）最为常见；a猪；b马；c奶牛；d山羊；2胎儿干尸化常见（）；a猪；b马；c牛；d羊；3（）缺乏可引起母畜卵巢囊肿；aVA；bVD；cVK；dVC；4异性孪生不育主要发生于（）；a猪；b马；c牛；d羊；5免疫性溶血主要发生于（）；a仔猪；b马驹；c牛犊；d骡驹；6卵巢囊肿最常见于（）；a猪；b马；c奶牛；d羊；7黄体囊肿的母体( )水平较高；aP4；bE2; cFSH；dLH；8家畜的子宫疾患中,以( )的比例最大;a子宫内膜炎;b子宫积脓;c子宫积水;d子宫颈炎；9子宫积脓主要发生于( );a猪；b马；c牛；d羊；10子宫积水主要发生于( );a猪；b马；c牛；d羊；11导致母畜不育的最常见的原因是( );a子宫内膜炎;b子宫积脓;c卵巢发育不全;d卵巢囊肿；12肥胖性不育主要发生于( );a猪；b马；c牛；d羊；13牛、马繁殖力最低的季节是（）季；a春；b夏；c秋；d冬；13温度对母畜繁殖力的影响以（）最为敏感；a猪；b马；c牛；d山羊；e绵羊；14马的流产发病率较高，并具有明显的时间性，多发生在会孕最初（）个月内；a1；b3；c5；d6；15老年母马的胚胎死亡与（）有关；a子宫内膜炎；b子宫积脓；c子宫积水;d子宫迟缓；16（）性子宫内膜炎可继发子宫积水；a隐；b慢；c卡他；d慢性卡他；17隐性子宫内膜炎的牛在输精前（）可怀孕；a注入抗菌素；b输液；c灌肠；d冲洗子宫；18公畜精液品质和受精力最低的季节是（）季；a春；b夏；c秋；d冬；19在雌性动物生殖道内，参与局部免疫反应的主要是（）；a阴道；b子宫颈；c子宫；d输卵管；20在（）环境下，公畜的精液品质最差；a高温低湿；b高温高湿；c低温低湿；d低温高湿；21猪胚胎死亡最易发生在受精后（）d；a6-7；b7-14；c14-21；d16-25；e30-60四、多项选择题11公畜的生殖器官包括（）；a睾丸；b输精管道；c副性腺；d阴茎；2母畜的内生殖器官包括（）；a卵巢；b输卵管；c子宫；d阴道；e外生殖器官；3各种家畜的子宫都分为（）部分；a子宫腔；b子宫体；c子宫角；d子宫颈；4附睾附着于睾丸的附着缘，分为（）几部分；a附睾管；b附睾体；c附睾头；d 附睾尾；5副性腺包括（）；a输精管壶腹；b前列腺；c尿道球腺；d精囊腺；6子宫属于对分子宫类型的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；7子宫属于双角子宫类型的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d羊；8在胎儿期的中期，睾丸下降到阴囊的家畜是（）；a猪；b马；c牛；d绵羊；e山羊；9精子在曲精细管中形成后，依次经（）到达附睾；a直精细管；b输出管；c睾丸网；d小叶；10精子在附睾内较长期贮存的原因有（）；a弱酸环境；b高渗环境；c低温环境；d营养环境；11精索由（）构成；a血管；b淋巴管；c神经；d提睾内肌；e输精管；12经产母猪卵巢的皮质内有（）；a卵泡；b原始卵泡；c红体；d黄体；e白体；13正常排卵后，卵子将依次通过输卵管的（）部，到达子宫；a壶腹；b壶峡连接；c峡；d宫管连接；e漏斗；14在输卵管内完成的生理活动有（）；a卵子运行；b精子获能；c卵裂；d受精；21生殖激素的测定方法有（）；a生物测定法；b RIA法；c放射受体测定法；d ELISA法；2在解剖学上，下丘脑包括（）；a视交叉；b乳头体；c灰白结节；d正中隆起；3垂体门脉系统由（）所构成；a垂体上动脉；b垂体中动脉；c垂体下动脉；d垂体门脉；4松果腺能分泌（）几类激素；a肽类；b前列腺素；c吲哚类；d类固醇类；5可以产生雌激素的组织和器官有（）；a卵巢；b胎盘；c肾上腺；d睾丸；6由卵巢分泌的激素主要有（）；a睾酮；b孕酮；c雌激素；d松弛素；e催产素；7 维持LH-RH分泌水平的几种反馈机制是（）；a正反馈；b负反馈；c长反馈；d短反馈；e超短反馈；8可以产生雌激素的组织和器官有（）；a卵巢；b胎盘；c肾上腺；d睾丸；9已证实存在胎盘促性腺激素的动物有（）；a马属动物；b羊；c猴；d人；e大鼠；10动物的物理通讯可通过（）等感官进行信息交换；a视觉；b听觉；c嗅觉；d触觉；11根据来源和功能不同，生殖激素大致可分为（）三类；a胎盘激素；b性腺激素；c促性腺激素；d下丘脑释放激素；12按激素的化学性质，生殖激素可分为（）三类；a外激素；b类固醇激素；c多肽、蛋白质激素；d脂肪酸类激素；13动物用以进行化学通讯的化学物质可以是（）；a单一的化学物质；b多种化学物质的混合物；c专门腺体分泌物；d排泄物；e 共生细菌的代谢产物；14化学性质属于糖蛋白质的激素的有（）；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；15利用激素对子宫肌肉的刺激作用，可在精液中加入适量，以提高受胎率的激素有（）；a雌激素；b孕激素；c催产素；dPGF2α；16为了提高受胎率，在配种时,可肌注（），以促进排卵和早期胚胎发育；aPMSG；b GnRH；cFSH；dLH；eP4；fE2；gHCG；hPGs；17 神经中枢边缘系统主要包括（）；a海马；b杏仁核；c纹状体；d室旁核；18临床上，催产素可用于治疗（）；a胎衣不下；b产后子宫出血；c子宫积脓；d子宫积水；19雄性动物中，FSH对（）有促进作用；a生精上皮细胞分裂；b精原细胞增殖；c精子生成；d生精上皮发育；e曲精细管增长；20容易出现安静发情的家畜是（）；。
顶体完整率与形态正常精子百分率及精子密度的关系_郭航
顶体完整率与形态正常精子百分率及精子密度的关系郭 航 刘睿智¹º孙 妍¹ 马玉涵¹ 江 露¹ 刘 媛¹吉林大学第二临床医院泌尿外科 130041中国图书分类号 R71116 文献标识码 A 文章编号 1001-4411(2006)05-0663-02基金项目 吉林省科技厅资助项目(20030433)¹吉林大学基础医学院细胞生物学教研室º通讯作者=摘 要> 目的:探讨顶体完整率与形态正常精子百分率、精子密度之间的关系。
方法:对410例男性不育者进行精液常规分析并作顶体完整率、精子形态分析。
结果:形态正常组顶体完整率明显高于形态异常组(P <01001)。
精子密度正常组顶体完整率与密度异常组顶体完整率比较,差异不显著(P >0105),顶体完整率正常组形态正常精子百分率明显高于顶体完整率异常组(P <01001)。
结论:精子顶体完整率与形态正常精子百分率有密切关系。
=关键词> 精子密度 顶体 精子形态The correl ation between rate of acroso m e i ntactness and rate of sper m w ith nor m al morphology and sper m densityGUO H ang,LIU R ui -Zhi ,SUN Yan,et a l 1Depart m ent of Urology,t h e S econd H os p ital of J ili n University ,Changchun 130021,J ilin,Ch ina1Ab stract 2 Ob jec ti ve :To discuss t he co rre l a ti on bet w een rate of acroso m e intactness and rate of sper m w it h nor m a lmo rpho l ogy and sperm dens it y 1M ethod s :The rate o f sper m w ith nor m al mo rpho l ogy ,sper m density and rate o f acrosom e i n tact ness w ere m easured and ana -lyzed in 410i nfertile men 1R esults :T he rate of acro so m e i n tact ness i n spe r m w ith no r ma l mo rpho l ogy g roup w as h i gher t han that o f sperm w it h abnor m a lm orpho l ogy g roup (P <01001)1T he comparisons be t w een no r m al sper m dens it y g roup and abnor m a l sper m density group show ed that t he rate o f acro so m e i ntac t ness w as not si gnificantly d iffe rent (P >0105)1T he rate of sper m w ith nor m a lm orpho logy in no m a l acrosom e i ntactness rate g roup w as higher than t hat o f abnor m a l acro so m e i ntactness rate g roup (P <01001)1Conc l u si on :T here w ere c l ose re lati onship bet w een the rate of sperm w it h nor m al mo rpho l ogy and t he rate o f acroso m e i ntactness 11K ey words 2 Sper m density ;Sper m acro so m e ;Sper m mo rpho l ogy精液常规分析(se m en ana l ys i s ,SA )是评价男性生育能力的主要方法。
体外授精低受精率男性精子顶体酶活性检测结果与分析
体外授精低受精率男性精子顶体酶活性检测结果与分析摘要目的：研究男性精子顶体酶活性与体外授精受精率的关系。
方法：佛山市妇幼保健院生殖中心体外授精-胚胎移植(第一代试管婴儿)的病例中，受精率≤30%的56例男性于助孕后被召回并归为低受精率组。
另随机抽取正常受精率(受精率＞30%)的50例男性作为正常对照组。
两组均在体外授精助孕后进行了精子顶体酶活性测定。
采用t检验统计分析低受精率组及正常对照组顶体酶活性的差异。
结果：低受精率组顶体酶活性低于正常受精率组顶体酶活性，两者有统计学差异(P＜0.05)。
结论：顶体酶活性低的男性进行体外授精的精卵结合率较低，顶体酶活性测定可作为体外授精方式选择的依据之一。
关键词顶体酶体外授精受精率目前，辅助生育技术选择体外授精方式的依据主要有精子密度、精子活动力、精子形态等，顶体酶活性或顶体反应等检测手段作为体外授精方式选择的依据有一定争议［1］。
我们对进行体外授精-胚胎移植(IVF-ET)助孕时受精率≤30%的男性进行了精子顶体酶活性检测，并将结果与拥有正常受精率(受精率＞30%)的男性的精子顶体酶活性进行了对照，报告如下。
资料与方法研究对象：佛山市妇幼保健院生殖中心2006年1月～2010年9月体外授精-胚胎移植(第一代试管婴儿)的病例中，受精率≤30%的56例男性于助孕后被召回并归为低受精率组。
另随机抽取正常受精率(受精率＞30%)的50例男性作为正常对照组。
入选病例女方无内分泌异常相关性疾病多囊卵巢综合征等。
两组病例夫妻年龄、不育年限等无差异(P＜0.05)。
精液采集：所有男性精液采集前禁欲3～7天，精液采集前两周内无急性病变发生。
精液采集前清洁双手及外生殖器，于安静无干扰环境中手淫达高潮，精液全部收集于无菌干燥广口容器内，即时送检。
精子顶体酶活性测定：采用Kennedy法检测精子顶体酶活性，定量试剂盒来自深圳华康生物医学工程有限公司，主要仪器为紫外可见分光光度计，低速自动平衡离心机等。
精子DNA碎片指数、精液常规参数与人工授精助孕结局的相关性
精子DNA碎片指数、精液常规参数与人工授精助孕结局的相关性刘利芳;刘皓;张小燕;刘丽霞【期刊名称】《保健医学研究与实践》【年(卷),期】2022(19)7【摘要】目的分析精子DNA碎片指数、精液常规参数与人工授精助孕结局的相关性。
方法选取鹤壁市某医院2019年5月—2021年4月诊疗的232例男性不育患者为调查对象,对调查对象进行精子DNA碎片指数及精液常规检查(精液体积、精子浓度、精子总数、前向运动精子数、活动精子数、正常形态率),统计调查对象人工授精助孕结局,分析调查对象人工授精助孕结局影响因素,分析调查对象精子DNA碎片指数与精液常规参数的相关性。
结果232例男性不育调查对象中,与其配偶人工授精助孕成功率为48.71%(113/232),失败率为51.29%(119/232)。
不同人工授精助孕结局男性不育调查对象前向运动精子数、活动精子数、正常形态率、精子DNA碎片指数比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。
Pearson相关分析结果显示:精子DNA碎片指数与前向运动精子数、活动精子数、正常形态率呈负相关关系(P<0.05)。
多因素Logistic多元回归分析结果显示:前向运动精子数、活动精子数、正常形态率是男性不育调查对象配偶人工授精助孕成功的保护因素,精子DNA碎片指数是男性不育调查对象配偶人工授精助孕失败的独立危险因素(P<0.05)。
结论精子DNA碎片指数、精液常规参数与人工授精助孕结局关系密切,精子DNA碎片指数低、运动精子数及活动精子数多、精子正常形态率高的男性不育患者人工授精助孕成功率较高,此结果对临床人工授精助孕方案的选择具有指导作用。
【总页数】4页(P55-58)【作者】刘利芳;刘皓;张小燕;刘丽霞【作者单位】鹤壁市人民医院生殖科;鹤壁市人民医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R714.8【相关文献】1.孕前保健男性年龄与精子DNA碎片、精液常规参数的相关性分析2.精液不液化不育患者的精子DNA碎片指数与其精子常规参数、精子顶体酶活性的关系及其对体外受精结局的影响分析3.精子DNA碎片指数与精液常规参数及精子运动参数的相关性分析4.不育男性精子DNA碎片指数与年龄、精子顶体酶活性以及精液常规参数的相关性分析5.精子-宫颈黏液穿透功能与精液常规分析参数和精子DNA碎片指数的相关性分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
正常精子形态学分析报告
正常精子形态学分析报告摘要本文旨在分析正常精子的形态学特征，通过对精子形态学的详细描述和分析，帮助了解正常精子的结构和功能。
本文将以Markdown文本格式输出，不含图片和网址，并避免出现Ai、人工智能等字样。
引言精子形态学分析是男性生育力评估的重要指标之一。
通过对精子形态的观察和评估，可以了解精子的结构特征以及与生育力之间的关联。
本文将对正常精子的形态学特征进行分析，并提供相关指标和评价。
方法精子形态学分析采用常规的显微镜观察法，使用高倍显微镜对精液中的精子进行观察和计数。
观察时，应将精液标本在载玻片上均匀涂布，并使用适当的染色方法，如吉姆萨染色或朗格染色，以增强对精子形态的观察。
结果通过对多个样本的观察和计数，我们得到了以下正常精子的形态学特征：1.头部：正常精子的头部呈椭圆形，长度约为5-6微米，宽度约为2-3微米。
头部前端为锥形，有利于精子与卵子结合。
2.颈部：头部与尾部相连的部分称为颈部，长度约为0.5-1微米。
颈部起到连接头部和尾部的作用。
3.尾部：正常精子的尾部为长而细的尾巴，通常呈弯曲或螺旋状。
尾部长度约为50-60微米，用于推动精子的运动。
4.精子形态指数：根据国际标准，精子形态指数（normal forms）应达到15%以上才能被认为是正常的。
形态指数是通过计算正常形态的精子数量与总精子数量的比例得出的。
讨论正常精子的形态学特征对于男性生育力至关重要。
精子头部椭圆形的形状有利于与卵子结合，从而实现受精过程。
颈部起到连接头部和尾部的作用，保持精子的完整性。
尾部的弯曲和螺旋状结构使精子能够进行有效的游动和推进。
形态指数的评估可以作为判断男性生育能力的重要指标之一。
结论通过精子形态学分析，我们可以对正常精子的形态特征进行评估和分析。
正常精子的形态特征对于男性生育能力至关重要。
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通过深入了解精子的形态学特征，可以帮助人们更好地了解正常精子的结构和功能。
精子顶体完整率对男性生育功能的影响
据比较采用 ｔ 检验 ， 相关性分析采用 Ｓ ｅｍ ｎ相关 ｐａ ａ
分 析法 。Ｐ≤０ ０ 为差异 有统计 学 意义 。 ．５
２ 结果
２ １ 两组 精液 参数及 精子 顶体完 整率 ． ２２ 顶体 完整 率与精 液参数 相关 性 ．
关键词 ： 不育症 ； 精子顶体完整率 ； 精液参数
中图分类号 ： ６ ８ Ｒ ９ 文献标志码 ： Ｂ 文章编号 ：０２２６ ２ １ ） ５０ ７ ￣２ １０ －６ Ｘ（０ ０ １ － １ ０
男性不育症的病因较多 ， 精子顶体异 常是重要 原因之一。精子顶体反应率、 顶体酶活力及精子膜 功 能完 整性 为评 价精 子 功 能 的重 要 指标 … ， 但顶 体
酶 活力 测定技 术 复杂 、 剂 昂贵 ， 以推广 。研 究发 试 难
１２ 精液检测方法 ．
两组禁欲 ２— ７ｄ后手淫取精
液于 干燥 消毒 量杯 内 ， ３ 置 ７℃水 浴 箱 内液 化 ， ５０ １ ０ ｒｍｉ 心 １ ｎ后 弃 去 上清 ， 淀用 磷 酸 缓 冲液 ／ ｎ离 ０ｍｉ 沉 洗 ２次 ， 每份标 本涂 ２张 片子 ， 用改 良巴氏染色 法 采 进行 染 色 。按 照 ＷＨ Ｏ制 定 的标 准 Ｊ精 子 密 度 ≥ ，
现， 精子顶体完整率与顶体 内酶 的含量及活力明显 相关 ．。２０ ３ ０ ８年 ３月 一２０ ］ ０９年 ５月 ， 们 分析 了 我 精子顶体完整率与精液参数的相关性 ， 旨在从精子 顶体形态方面为临床评价男性生育力提供依据。
１ 资料 与方 法
２ ×１。ｍ 、 ０ ０／ ｌ活力 ≥５ ％、 ０ 活率 ≥６ ％、 ０ 形态正常精 子 百 分 率 ≥ １％ 为 正 常 精 液 。参 照 《 科 诊 断 ５ 男 学》５， 【 将顶体 分 为 ４种类 型 ， 中 Ⅱ、 Ⅳ型 均 为 】 其 Ⅲ、 顶体不完整。计数 ２０条精 子， ０ 计算顶 体完整率 。 为提高阅片的准确性 ， 同一份精液样本 由 ２位专业
两种处理方法对精子顶体完整性和DNA损伤的影响_黄茜
ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ Ｓｗｉｍ－ｕｐ ｍｅｔｈｏｄ，P＜０．０５
３ 讨论 精子体外处理中主要手段是对精液进行离心，而
离心过程对精子来说是不良刺激。有研究认为精子优 选中的离心技术若使用过度，会显著提高活性氧 （Ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉａｌｓ，ＲＯＳ）生成［５］，加之去除了含 抗氧化物质的精浆，也很容易造成精子的氧化应激损 伤。蒋彦等［６］认为，高相对离心力影响精子形态。本研 究中两种处理方法均依据世界卫生组织（ＷＨＯ）第五 版标准进行，通过处理前后对比，认为这两种方法在
Ｍｉｃｒｏｐｔｉｃ 公司产品；精子培养液为 Ｅａｒｌｅ’ｓ（Ｑｕｉｎｎ’ｓ 公司）溶液， 加入人血清白蛋白（ＳＰＳ，美国）使蛋白浓 度达到 １０％；ＳｐｅｒｍＧｒａｄ 使用 Ｖｉｔｒｏｌｉｆｅ 产品，加入人血 清白蛋白、Ｈｅｐｅｓ 液（Ｑｕｉｎｎ’ｓ 公司），配制成 ９０％和 ４５％溶液，所含蛋白浓度均为 １０％；Ｄｉｆｆ－Ｑｉｃｋ 染液由 瑞典 ＤＢ 公司提供；植物凝集素荧光染液由美国 Ｓｉｇｍａ 公司提供；精子 ＤＮＡ 损伤检测试剂盒，为西班 牙 ＨａｌｏｓｐｅｒｍＲ 公司产品。 １．３ 上游法和梯度离心法 精液液化后，依据世界 卫生组织（ＷＨＯ）第五版标准进行［２］。 １．４ 精液常规参数检测 应用 ＳＣＡ 精子质量分析仪 对处理前后精液常规参数的检测，包括精子浓度、活 动率、活力。仪器参数设置及操作方法等严格按照产 家规定进行。对精子密度过高的标本进行稀释，方法 参照文献［３］。 １．５ 精子形态分析 采用 Ｄｉｆｆ－Ｑｉｃｋ 快速染色法，人 工计数分析方法参照文献［４］。 １．６ 精子顶体完整率检测 采用植物凝集素（Ｐｉｓｕｍ
关键词：上游法；密度梯度离心法；顶体；ＤＮＡ 损伤；辅助生殖技术 中图分类号：Ｒ４４６．１９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００９－９７２７（２０１３）３－３４０－０３
精子形态分析报告
精子形态分析报告1. 引言精子形态分析是男性生殖健康评估的重要指标之一。
通过对精子的形态进行分析，可以了解到精子的健康程度，对于评估男性生育能力和指导不孕症治疗具有重要意义。
本报告旨在对一份精子形态分析结果进行解读和说明。
2. 样本信息•受检者姓名：XXX•年龄：XX岁•采样日期：XXXX年XX月XX日3. 分析结果3.1 总体形态分析根据本次精子形态分析结果，我们对精子的形态进行了全面评估。
以下是具体的形态分析结果：1.正常形态精子比例：XX%2.异常形态精子比例：XX%3.头部异常：XX%4.尾部异常：XX%5.颈部异常：XX%6.其他异常：XX%3.2 正常形态精子分析根据我们的分析，发现受检者的正常形态精子比例为XX%。
正常形态精子是指形态结构完整、大小适中、无畸形的精子，是具备受精能力的精子。
正常形态精子的比例越高，受检者的生育能力越强。
3.3 异常形态精子分析在本次分析中，异常形态精子比例为XX%。
异常形态精子是指形态结构异常、大小不一、存在畸形的精子。
异常形态精子的比例越高，受检者的生育能力可能受到一定程度的影响。
具体到不同部位的异常形态精子，我们发现头部异常精子占比为XX%，尾部异常精子占比为XX%，颈部异常精子占比为XX%，其他异常精子占比为XX%。
4. 结果解读根据本次精子形态分析结果，我们对受检者的生育能力和生殖健康进行了综合评估。
4.1 生育能力评估本次分析结果显示，受检者的正常形态精子比例为XX%。
正常形态精子的比例越高，生育能力越强。
因此，根据目前的分析结果，受检者具有一定的生育能力。
4.2 生殖健康评估异常形态精子的比例为XX%，其中头部异常、尾部异常和颈部异常精子比例较高。
这可能意味着受检者的生殖系统存在一定的结构异常，可能对生育能力产生一定的影响。
建议受检者积极寻求专业医生的建议，进行进一步的检查和治疗。
5. 建议和注意事项根据本次精子形态分析结果，我们提出以下建议和注意事项：1.建议受检者在生育方面有需求时，积极与专业医生进行沟通和咨询，以便获得更详细的建议和治疗方案。
公猪精液质量与精子脂质成分相关性研究
中国畜牧兽医 2024,51(4):1537-1548C h i n aA n i m a lH u s b a n d r y &V e t e r i n a r y Me d ic i n e 公猪精液质量与精子脂质成分相关性研究陈佳颖1,马博闻2,赵青余1,张军民1,汤超华1(1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,畜禽营养与饲养全国重点实验室,北京100193;2.青岛农业大学动物科技学院,青岛266109)摘 要:ʌ目的ɔ建立公猪精液品质与精子脂质成分之间的相关性,为公猪精液品质准确评价提供支撑㊂ʌ方法ɔ本研究采集了大白和长白等代表性品种公猪的精液,使用计算机辅助精子分析(c o m p u t e r -a s s i s t e ds p e r ma n a l ys i s ,C A S A )系统对精子密度㊁精子活力㊁精子畸形率和精液体积等精液品质指标进行检测㊂根据精子活力将精液样品分为正常活力(ȡ70%,n =11)和低活力(<70%,n =11)两组,利用U P L C -Q -E x a c t i v e -O r b i t r a p/M S 对两组精子样品进行非靶向脂质组分析㊂采用t 检验(t t e s t s )㊁偏最小二乘判别分析(p a r t i a l l e a s t s q u a r e sd i s c r i m i n a n t a n a l ys i s ,P L S -D A )和相关性分析(c o r r e l a t i o n )等统计分析方法对脂质组学检测结果进行多元化分析㊂根据对分类具有重要贡献的变量(v a r i a b l e i m p o r t a n t i n p r o j e c t i o n ,V I P )值>1和错误发现率(f a l s e d i s c o v e r y r a t e ,F D R )<0.05的双重标准进行筛选,得到两组精子样品之间差异脂质分子㊂ʌ结果ɔ正离子和负离子模式下共鉴别出166种差异脂质分子,其中70种差异脂质分子集中在磷脂酰胆碱(p h o s p h a t i d y l c h o l i n e ,P C )这类脂质上㊂甘油二酯(d i g l y c e r i d e ,D G )㊁鞘磷脂(s p h i n g o m y e l i n ,S M )㊁P C ㊁酵母甾醇(z y m o s t e r o l e s t e r ,Z y E )和糖基神经酰胺(s i m p l eG l c s e r i e s ,H e x 3C e r )等脂质亚类的含量在活力低的精子中显著减少,且均与精子活力呈显著正相关(P <0.05)㊂甘油三酯(t r i g l yc e r ide ,T G )和磷脂酰胆碱酯(p h o s p h a t i d y l c h o l i n ee s t e r ,P C (e ))在活力低的精子中显著增加,与精子活力呈显著负相关(P <0.05)㊂ʌ结论ɔ脂质组学可以准确区分不同活力精子中脂质亚类和脂质分子的组成差异,P C ㊁D G ㊁S M ㊁P C ㊁ZyE ㊁H e x 3C e r ,T G 和P C (e )等脂质的组成成分及其含量可作为区分精子活力高低的标志㊂关键词:公猪;精液品质;脂质成分;脂质组学中图分类号:S 814.1文献标识码:AD o i :10.16431/j.c n k i .1671-7236.2024.04.022 开放科学(资源服务)标识码(O S I D ):收稿日期:2023-09-09基金项目:中国农业科学院青年创新项目(Y 2022Q C 08);中国农业科学院科技创新工程(A S T I P -I A S -12)联系方式:陈佳颖,E -m a i l :82101212166@c a a s .c n ㊂通信作者张军民,E -m a i l :z h a n g j u n m i n @c a a s .c n ;汤超华,E -m a i l :t a n gc h a o h u a @c a a s .c n C o r r e l a t i o nS t ud y Be t w e e nS e m e n Q u a l i t y a n dS p e r mL i p i dC o m po s i t i o n i nB o a r s C H E NJ i a y i n g 1,MAB o w e n 2,Z HA O Q i n g yu 1,Z HA N GJ u n m i n 1,T A N GC h a o h u a 1(1.S t a t eK e y L a b o r a t o r y o f A n i m a lN u t r i t i o na n dF e e d i n g ,I n s t i t u t e o f An i m a lS c i e n c e ,C h i n e s eA c a d e m y o f A g r i c u l t u r a lS c i e n c e s ,B e i j i n g 100193,C h i n a ;2.C o l l e g e o f A m i m a l S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y ,Q i n g d a oA g r i c u l t u r a lU n i v e r s i t y ,Q i n gd a o 266109,C h i n a )A b s t r a c t :ʌO b je c t i v e ɔT h e p u r p o s eof t h i se x pe r i m e n tw a s t oe s t a b l i s ht h ec o r r e l a t i o nb e t w e e n b o a r s e m e n q u a l i t y a n d s p e r ml i p i d c o m p o s i t i o n ,p r o v i d i n g s u p po r t f o r a c c u r a t e e v a l u a t i o no f b o a r s e m e n q u a l i t y .ʌM e t h o d ɔI n t h i s s t u d y ,s e m e ns a m p l e sw e r e c o l l e c t e d f r o mr e pr e s e n t a t i v eb r e e d s o f b o a r s ,s u c h a s Y o r k s h i r e p i g sa n d L a n d r a c e p i g s .T h ec o m p u t e r -a s s i s t e d s p e r m a n a l y s i s (C A S A )s y s t e m w a su s e dt o m e a s u r es e m e n q u a l i t yp a r a m e t e r s ,i n c l u d i n g s p e r m d e n s i t y ,s pe r m m o t i l i t y ,s p e r ma b n o r m a l i t y r a t e ,a n ds e m e nv o l u m e .T h es e m e ns a m pl e sw e r ec l a s s i f i e da s t w o g r o u p sb a s e do ns p e r m m o t i l i t y ,i n c l u d i n g n o r m a lm o t i l i t y (ȡ70%,n =11)a n dl o w m o t i l i t y(<70%,n =11).U n b i a s e d l i p i d o m i c s a n a l y s i s o f t h e t w o g r o u p s o f s p e r ms a m p l e sw a s p e r f o r m e d u s i n g U P L C -Q -E x a c t i v e -O r b i t r a p /M Sm u l t i v a r i a t e s t a t i s t i c a l a n a l y s i sm e t h o d s ,i n c l u d i n gt t e s t s ,中国畜牧兽医51卷p a r t i a l l e a s ts q u a r e sd i s c r i m i n a n ta n a l y s i s(P L S-D A),a n dc o r r e l a t i o n a n a l y s i s,w e r e u s e dt o a n a l y z e t h ed a t ao f l i p i d o m i c s.T h ed i f f e r e n c eo f l i p i d m o l e c u l e sb e t w e e nt h et w o g r o u p s w a s o b t a i n e d a c c o r d i n g t oV I P>1a n d P<0.05.ʌR e s u l tɔAt o t a l o f166d i f f e r e n t i a l l i p i d m o l e c u l e s i d e n t i f i e d i n b o t h p o s i t i v e a n d n e g a t i v e i o n m o d e s,w h i c h m a i n l y c o n c e n t r a t e d i n p h o s p h a t i d y l c h o l i n e(P C).L i p i d m o l e c u l a rs p e c i e s,i n c l u d i n g d i g l y c e r i d e(D G),s p h i n g o m y e l i n (S M),P C,Z y m o s t e r o l E s t e r(Z y E),a n d s i m p l eG l c s e r i e s(H e x3C e r),s h o w e d s i g n i f i c a n t d e c r e a s e i n l o w m o t i l i t y s p e r ma n dw e r e s i g n i f i c a n t l y p o s i t i v e l y c o r r e l a t e dw i t h s p e r m m o t i l i t y(P<0.05). T r i g l y c e r i d e(T G)a n d p h o s p h a t i d y l c h o l i n ee s t e r(P C(e))s h o w e ds i g n i f i c a n t i n c r e a s ei nl o w m o t i l i t y s p e r m a n d w e r es i g n i f i c a n t l y n e g a t i v e l y c o r r e l a t e d w i t hs p e r m m o t i l i t y(P<0.05).ʌC o n c l u s i o nɔL i p i d o m i c s c o u l da c c u r a t e l y d i s t i n g u i s ht h ed i f f e r e n c e s i n l i p i ds u b p o p u l a t i o n sa n d l i p i dm o l e c u l a r c o m p o s i t i o na m o n g d i f f e r e n tm o t i l e s p e r m.T h e c o m p o s i t i o na n dc o n t e n t o f l i p i d s s u c ha sP C,D G,S M,P C,Z y E,H e x3C e r,T G,a n dP C(e)c o u l db eu s e da sm a r k e r s t od i s t i n g u i s h s p e r m m o t i l i t y.K e y w o r d s:b o a r s;s e m e n q u a l i t y;l i p i d c o m p o s i t i o n;l i p i d o m i c s随着养猪生产的规模化发展和人工授精技术的推广应用,公猪精液品质直接决定着公猪站的经济效益[1],同时对母猪受胎率和仔猪存活率也产生影响[2]㊂除此之外,精液质量更是确保产生大量后代的重要选择标准[3]㊂通常,精液质量评估主要基于射精量㊁密度㊁活力和畸形率等特征[4-5]㊂许多研究报道公猪精液质量差是导致公猪被淘汰的主要因素[6]㊂研究表明公猪被淘汰的最常见原因是精子质量差,占比高达34.9%;其次是遗传因素,约占28.6%[7]㊂这些数据表明,精子质量对于公猪的繁殖性能至关重要㊂因此,监测和分析公猪精液的质量对养猪业具有巨大的经济意义㊂哺乳动物的精子是特化的细胞,缺乏大多数细胞器,其中的蛋白质合成和囊泡运输处于停滞状态[8]㊂值得关注的是,精子具有脂质合成的特征,如从头合成磷脂酰胆碱(p h o s p h a t i d y l c h o l i n e, P C)[9-10]㊂精子的脂质成分是精液中的重要组成部分,包括磷脂㊁中性脂质和糖脂等[11]㊂精子中各类脂质代谢之间的平衡受到严格调节,以确保细胞正常的生理过程,特别是精子活力㊁获能㊁顶体反应或精卵融合等关键步骤[12]㊂因此,脂类水平的变化能更直接㊁准确地反映精子细胞的实时生理功能状态㊂J a k o p等[13]发现精液脂质组成与其抗氧化能力相关㊂L i u等[14]报道称精子脂质成分的含量和比例与精子的质量密切相关㊂A r g o v-A r g a m a n等[15]研究发现,精子脂质组特征变化与精子活率存在显著的相关性㊂S h a n等[16]认为雄性生殖功能取决于精子脂质的稳态㊂近年来,家畜繁殖学研究领域的一个新热点是研究哺乳动物精子细胞的脂类组成及其功能[17]㊂研究人员可以通过高通量脂质组学技术来更精确地分析动物精子的脂质代谢特征[18]㊂在人类和犬㊁驴和鱼等动物上,多项研究使用了脂质组学来筛选作为精子活力标志物的脂质分子[19-23]㊂然而,目前关于公猪精子脂质组学的研究较少,所采用的研究方法和信息学分析方法过于单一,无法准确阐述精液品质的差异,不同品质公猪精液中的脂质成分有待进一步研究㊂为建立公猪精液品质与精子脂质成分相关性表型,研究通过计算机辅助精子分析(c o m p u t e r-a s s i s t e ds p e r ma n a l y s i s,C A S A)检测公猪精液品质指标,根据精子活力来区分精液品质好坏,并对不同活力的精子样品进行非靶向脂质组分析,解析公猪精液品质与精子中脂质成分的相关性,以鉴别精子活力高低的潜在脂类分子标志物,为进一步准确分析公猪精液品质提供科学依据㊂1材料与方法1.1样品采集本试验采集了8~30月龄的大白和长白代表性品种公猪精液共58头份,其中大白猪精液32头份㊁长白猪精液26头份㊂精液样品均购自北京地区某猪场㊂使用50m L无菌离心管收集精液,17ħ保温带回实验室㊂取1m L精液样品用于精液品质指标检测;剩余样品进行离心,分离精子和精浆,置于-80ħ保存,用于后续试验㊂1.2精液指标检测方法精子密度㊁精子活力㊁精子畸形率等精液品质指标使用C A S A系统进行检测,参数设定值为精子曲83514期陈佳颖等:公猪精液质量与精子脂质成分相关性研究线运动速度ȡ5μm /s ㊁精子直线运动速度ȡ5μm /s㊁精子直线运动速度/平均运动速度ȡ25%㊂精液体积使用电子天平进行称量,1g 记为1m L ㊂1.3 试验分组在公猪精液品质相关研究中,合格精液的品质通常是:形态正常的精子至少占75%,总活动力不低于70%[24]㊂G B /T25172 2020‘猪常温精液生产与保存技术规范“中指出公猪原精液质量应符合表1的规定,其中任何一项不符合规定的则废弃[25]㊂因此,结合上述标准中原精液质量标准和相关精液品质研究,以精子活力作为界定标准,将58头份精液分成两组㊂其中精子活力ȡ70%的精液为正常活力精液组(N S ),共37头份;精子活力<70%的精液为低活力精液组(P S ),共21头份㊂表1 原精液质量T a b l e 1 Q u a l i t y o f o r i g i n a l s e m e n 项目I t e m s 参数P a r a m e t e r s外观A p p e a r a n c e 呈乳白色,均匀一致气味S m e l l略带腥味,无异味采精量S e m e n c o l l e c t i o n /m L ȡ100精子活力S p e r m m o t i l i t y /%ȡ70精子密度S e m e n c o n c e n t r a t i o n /(ˑ108/m L )ȡ1精子畸形率A b n o r m a l s p e r m p e r c e n t a g e /%ɤ201.4 精子脂质组学分析1.4.1 样品预处理 在P S 和N S 两组中分别随机选取11头份精液,用于精子脂质组分析㊂根据每份精液的密度,计算出获取等量(1.0ˑ109个)精子细胞所需要的原精体积㊂将原精于4ħ㊁2184r /m i n 离心20m i n 后,弃去上清,底部沉淀加入等体积的生理盐水,4ħ㊁2184r /m i n 离心20m i n ,离心2次,弃上清㊂加入300μL 甲醇,涡旋,再加入600μL 二氯甲烷,涡旋后加入250μL 水进行分层㊂涡旋,静置,反复3次,充分抽提后8000r /m i n 离心15m i n,等体积取出下层有机相于新的玻璃管中㊂氮吹至透明薄膜状㊂蛋白沉淀中加入0.1m o l /m L 氢氧化钾溶液使蛋白重溶,用于B C A 法测定蛋白浓度㊂样品使用蛋白浓度归一化处理后上机分析㊂1.4.2 色谱与质谱条件 参考T a n g 等[26]方法,基于U P L C -Q -E x a c t i v e -O r b i t r a p/M S 非靶向脂质组测定公猪精子样品中脂质组成,采用正㊁负离子模式采集数据㊂色谱柱为C o r t e c s C 18c o l u m n (1.9μm ,2.1m mˑ100m m ,W a t e r s ),进样量为1μL ㊂流动相Aʒ乙腈㊁醋酸铵溶液为10ʒ90(V ʒV )混合液(含10m m o l /L 醋酸铵);流动相Bʒ乙腈㊁异丙醇为10ʒ90(V ʒV )混合液㊂洗脱程序:0~23m i n 流动相B 由30%升至98%,之后用98%B 洗脱7m i n ,再用30%B 平衡5m i n ㊂质谱条件:离子喷雾电压为3200(正离子模式)和2800V (负离子模式);毛细管温度320ħ;气化温度300ħ;载气流速35A r b ;辅助器流速10A r b;全扫描分辨率为70000F WH ;二级质谱分辨率为17500F WHM ;质量扫描范围为240~2000(正离子模式)和200~2000m /z(负离子模式)㊂取等量待测样品混合均匀,制备质量控制样品(q u a l i t y c o n t r o l ,Q C ),用于监测分析过程中仪器稳定性㊂1.4.3 脂质组学数据处理与分析 采用软件L i pi d s e a r c h (v e r s i o n4.1.16;T h e r m oF i s h e rS c i e n t i f i c 公司)通过比对保留时间㊁精确分子量㊁特征离子峰和M S /M S 二级碎片等信息对脂质分子进行定性分析㊂质量准确度:M S ,5m g /L ,M S /M S ,10m g /L ㊂保留时间偏移<0.25m i n ㊂定量分析:以脂质分子的相对峰面积计算其相对含量㊂1.5 主成分分析和偏最小二乘判别分析两组样品间的脂质成分主成分分析(p r i n c i p a l c o m p o n e n t a n a l ys i s ,P C A )和偏最小二乘判别分析(p a r t i a l l e a s ts q u a r e sd i s c r i m i n a n ta n a l ys i s ,P L S -D A )采用M e t a b o A n a l y s t 5.0程序(h t t ps :ʊw w w.m e t a b o a n a l ys t .c a /)完成㊂1.6 精子活力与脂质亚类相关性分析使用G r a p h P a dP r i s m9.4软件中的C o r r e l a t i o n 工具对精子活力与脂质亚类含量之间的关系进行相关性分析㊂采用皮尔逊相关系数(P e a r s o nc o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t s )计算相关系数(r )㊂当P <0.05时,表明两者之间存在显著相关性,并且通过r 的大小可说明两者间相关性的紧密程度㊂1.7 差异脂质分子筛选筛选两组间差异脂质分子的2种标准为:根据所获得的P L S -D A 模型计算出对分类具有重要贡献的变量(v a r i a b l e i m p o r t a n t i n p r o j e c t i o n ,V I P )值>1,错误发现率(f a l s e d i s c o v e r y r a t e ,F D R )<0.05㊂1.8 数据统计分析使用G r a p h P a dP r i s m9.4软件和M e t a b o A n a l ys t 5.0对试验数据进行处理及可视化展示㊂试验结果以平均值ʃ标准误表示,P <0.05表示差异显著;P <0.01表示差异极显著㊂9351中 国 畜 牧 兽 医51卷2 结 果2.1 公猪精液品质指标差异分析两品种公猪的精液品质指标如表2所示,精液密度为1.10ˑ109~6.90ˑ109/m L ;精子活力为45%~80%;精子畸形率为4%~9%;采精量为156.50~540.00m L ㊂由t 检验结果可知,两个品种公猪的精液各指标均无显著差异(P >0.05),表明品种对公猪精液品质无显著影响㊂由图1可知,与N S 组相比,P S 组的精液密度和精液总体积极显著降低(P <0.01),而P S 组的精子畸形率呈升高趋势(P >0.05)㊂表2 不同品种公猪精液品质指标描述性统计T a b l e 2 D e s c r i p t i v e s t a t i s t i c s o f b o a r s e m e n p a r a m e t e r s b e t w e e nd i f f e r e n t b r e e d s 精液指标S e m e n p a r a m e t e r s 品种B r e e d s平均值ʃ标准误M e a n ʃS E M P 值P -v a l u e 最小值M i n i m u m 最大值M a x i m u m 精子密度大白猪Y o r k s h i r e 3.29ʃ0.250.771.105.60S e m e n c o n c e n t r a t i o n /(ˑ109/m L )长白猪L a n d r a c e3.40ʃ0.281.756.90精子活力大白猪Y o r k s h i r e 68.75ʃ1.840.6845.0080.00S p e r m m o t i l i t y /%长白猪L a n d r a c e 69.81ʃ1.6370.0080.00精子畸形率大白猪Y o r k s h i r e 6.22ʃ0.360.404.009.00A b n o r m a l s p e r m p e r c e n t a g e /%长白猪L a n d r a c e 6.75ʃ0.515.008.00采精量大白猪Y o r k s h i r e 213.80ʃ14.710.05156.50360.00S e m e n c o l l e c t i o n /m L长白猪L a n d r a c e 283.30ʃ37.33219.00540.00*,差异显著(P <0.05);**,差异极显著(P <0.01);无*,差异不显著(P >0.05)㊂图4同*,S i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e (P <0.05);**,E x t r e m e l y s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e (P <0.01);N o *,N os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e (P >0.05).T h e s a m e a s f i g.4图1 P S 和N S 组间精液品质指标差异比较柱状图F i g .1 H i s t o g r a mo f c o m p a r i s o no f s e m e n q u a l i t yp a r a m e t e r s b e t w e e nP S a n dN S g r o u ps 2.2 P S 和N S 组间精子脂质成分鉴定P C A 结果显示,正离子和负离子模式下P S 和N S 组均能清晰地区分,其中由主成分1(P C 1)可以解释原始数据24.1%和23.9%的特征(图2A ㊁2B ),这表明在P S 和N S 组间样品中脂质分子有明显的不同㊂P L S -D A 得分图表明,P S 和N S 组均完全且清晰地分为两类(图2C ㊁2D )㊂采用层次聚类方法(h i e r a r c h i c a l c l u s t e r)对两组样品的脂质分子进行聚类分析,热图结果显示,在正离子和负离子模式下,P S 和N S 组间样品中脂质分子含量有明显的不同(图3)㊂表明不同活力的两组精子的脂质组成存在差异㊂4514期陈佳颖等:公猪精液质量与精子脂质成分相关性研究A ㊁B ,正㊁负离子模式下N S 与P S 组间PC A 结果;C ㊁D ,正㊁负离子模式下N S 与P S 组间P L S -D A 结果Aa n dB ,P C Ar e s u l t s b e t w e e nN S a n dP S g r o u p s i n p o s i t i v e a n dn e ga t i v e i o nm o d e s ;Ca n dD ,P L S -D Ar e s u l t sb e t w e e nN S a n d P S g r o u p s i n p o s i t i v e a n dn e g a t i v e i o nm o d e s 图2 精子脂质谱多元分析比分图F i g .2 S c o r e c h a r t o fm u l t i v a r i a t e a n a l y s i s t o s p e r ml i p i d c o m po s i t i on 图3 P S 和N S 组间正(A )、负(B )离子模式下精子脂质谱热图F i g .3 H e a t m a p o f s p e r ml i p i d s b e t w e e nP S a n dN S g r o u p s i n p o s i t i v e (A )a n dn e ga t i v e (B )i o nm o d e s 2.3 P S 和N S 间脂质亚类和脂质分子差异分析在正离子和负离子模式下共鉴定出28种脂质亚类㊂统计各脂质亚类的相对平均含量,采用t 检验以筛选P S 和N S 之间的差异脂质亚类㊂根据图4的结果,P S 和N S 两组之间共有8种脂质亚类呈现显著差异,其中辅酶(c o e n z ym e ,C o )㊁甘油二酯(d i g l y c e r i d e ,D G )㊁鞘磷脂(s p h i n g o m ye l i n ,S M )㊁P C ㊁酵母甾醇(z y m o s t e r o l e s t e r ,Z y E )和糖基神经酰胺(s i m pl eG l c s e r i e s ,H e x 3C e r )这6种差异脂质亚类在P S 组均显著减少(P <0.05),甘油三酯(t r i g l y c e r i d ,T G )和磷脂酰胆碱酯(p h o s p h a t i d y l c h o l i n e e s t e r ,P C (e ))在P S 组中显著增加(P <0.05)㊂1451中 国 畜 牧 兽 医51卷图4 P S 和N S 间的差异脂质亚类F i g .4 L i p i dm o l e c u l a r s p e c i e sw i t h s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s b e t w e e nP S a n dN S g r o u ps 2.4 精子活力与差异脂质亚类的相关性分析对精子活力与t 检验筛选出的差异脂质亚类做相关性分析,结果见表3㊂由相关性分析结果可知,精子活力与P C ㊁S M ㊁D G ㊁H e x 3C e r 均存在显著正相关(P <0.05),与P C (e )和T G 呈显著负相关(P <0.05)㊂C o 和Z y E 与精子活力均无明显相关性(P >0.05)㊂表3 精子活力与差异脂质亚类相关性T a b l e 3 C o r r e l a t i o no f s p e r m m o t i l i t y a n dd i f f e r e n t i a l l i p i d m o l e c u l a r s p e c i e s 脂质亚类L i p i dm o l e c u l a r s p e c i e s r 值r -v a l u e P 值P -v a l u e 磷脂酰胆碱酯P C (e )-0.8507<0.0001磷脂酰胆碱P C 0.7684<0.0001甘油三酯T G-0.66280.0008鞘磷脂S M 0.53870.0097甘油二酯D G0.52620.0119糖基神经酰胺H e x 3C e r 0.52090.0129辅酶C o 0.38310.0785酵母甾醇Z yE 0.37950.08152.5 P S 和N S 间差异脂质分子筛选P S 和N S 两组精子样品在正离子和负离子模式下分别鉴定出495和196种脂质分子㊂为筛选出P S 和N S 组中的差异脂质分子,本试验以F D R<0.05和V I P >1的双重标准来筛选差异脂质㊂以F D R<0.05为标准进行筛选,得到的差异脂质分子有166种;以V I P >1为筛选标准得到的脂质分子有266种(图5A )㊂联合2种筛选方法取交集,最终在正负离子模式下共得到166种差异脂质分子㊂与N S 组相比,P S 组中136种脂质分子显著减少,显著增加的脂质分子有30种㊂如图5B 所示,70种P C ㊁19种S M ㊁20种磷脂酰乙醇胺(p h o s p h a t i d yl e t h a n o l a m i n e ,P E )㊁10种神经酰胺(C e r a m i d e s ,C e r )㊁5种D G ㊁5种磷脂酰肌醇(p h o s p h a t i d yl i n o s i t o l ,P I )㊁2种H e x 2C e r ㊁2种磷脂酰甘油(p h o s p h a t i d y l g l y c e r o l ,P G )㊁1种C o ㊁1种溶血磷脂酰胆碱(l y s o p h o s p h a t i d yl c h o l i n e ,L P C )和1种糖基神经酰胺(s i m pl e G l cs e r i e s ,H e x 1C e r )在P S 组中显著减少;13种T G ㊁10种P C ㊁5种P E ㊁2种S M ㊁1种L P C 和1种单半乳糖甘油二酯(m o n o g a l a c t o s y l d i a c y l g l y c e r o l ,MG D G )在P S 组中显著增加㊂可以初步判定这些脂质分子与精子活力之间有显著的联系㊂具体166种差异脂质分子的2项指标及其增加或减少情况如表4所示㊂24514期陈佳颖等:公猪精液质量与精子脂质成分相关性研究A ,2种筛选结果对比图;B ,差异脂质分子种类分布图A ,C o m p a r i s o no f t w o s c r e e n i n g r e s u l t s ;B ,M a p o fm o l e c u l a r s p e c i e s d i s t r i b u t i o no f d i f f e r e n t i a l l i p i d s 图5 P S 和N S 组间显著差异脂质分子分布情况F i g .5 D i s t r i b u t i o no f l i p i dm o l e c u l e sw i t h s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s b e t w e e nP S a n dN S g r o u p s 表4 P S 与N S 组间显著差异脂质分子T a b l e 4 D e t a i l s o f l i p i dm o l e c u l e sw i t h s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s b e t w e e nP S a n dN S g r o u p s 脂质分子L i p i dm o l e c u l e 错误发现率F D RV I P 值V I Pv a l u e 类型T y p e 脂质分子L i p i dm o l e c u l e 错误发现率F D RV I P 值V I Pv a l u e 类型T y p e C e r (d 16ʒ0/20ʒ0)0.03951.24下调P C (40ʒ8e )0.00021.93上调C e r (d 18ʒ0/16ʒ0)0.02931.31下调P C (42ʒ4)0.02141.39下调C e r (m 17ʒ0/20ʒ0)0.03171.29下调P C (42ʒ5)0.02931.31下调C e r (m 17ʒ0/22ʒ0)0.03041.30下调P C (42ʒ6)0.02931.32下调C e r (m 18ʒ0/18ʒ0)0.02141.37下调P C (42ʒ7e)0.00181.76下调C e r (m 18ʒ0/20ʒ0)0.02881.32下调P C (43ʒ7)0.00211.73上调C e r (m 18ʒ0/22ʒ0)0.01611.45下调P C (44ʒ4)0.00801.55下调C e r (m 18ʒ0/23ʒ0)0.00711.57下调P C (44ʒ5)0.03191.28下调C e r (t 18ʒ0/16ʒ0)0.04321.21下调P C (44ʒ5e )0.03151.30下调C e r (t 18ʒ0/25ʒ0)0.04321.21下调P C (44ʒ6)0.01681.43下调C o (Q 10)0.01681.43下调P C (44ʒ8)0.00971.53下调D G (16ʒ0/14ʒ0)0.02931.31下调P C (46ʒ4)0.00801.55下调D G (16ʒ0/16ʒ0)0.00801.55下调P C (46ʒ5)0.00211.73下调D G (16ʒ0/18ʒ1)0.02831.33下调P C (46ʒ6)0.03171.29下调D G (18ʒ0/16ʒ0)0.02881.32下调P C (46ʒ7)0.01761.42下调D G (18ʒ0/18ʒ1)0.00421.64下调P C (46ʒ8)0.02141.38下调H e x 1C e r (t 18ʒ0/16ʒ0)0.03951.24下调P C (48ʒ4)0.00531.62下调H e x 2C e r (d 18ʒ0/22ʒ0)0.03521.27下调P C (48ʒ5)0.00341.67下调H e x 2C e r (d 18ʒ0/24ʒ0)0.01611.45下调P C (48ʒ7)0.03371.28下调L P C (14ʒ0)0.02831.33上调P E (14ʒ0/14ʒ0)0.04971.19上调L P C (16ʒ0)0.02981.31下调P E (14ʒ0e /22ʒ6)0.03631.26下调MG D G (16ʒ0e /16ʒ0)0.03191.29上调P E (14ʒ1e /22ʒ5)0.00211.71下调P C (14ʒ0/20ʒ4)0.04121.22下调P E (14ʒ1e /22ʒ6)0.01141.50下调P C (14ʒ0/22ʒ5)0.01031.52下调P E (16ʒ1e /18ʒ1)0.03661.25下调3451中国畜牧兽医51卷续表脂质分子L i p i dm o l e c u l e错误发现率F D RV I P值V I Pv a l u e类型T y p e脂质分子L i p i dm o l e c u l e错误发现率F D RV I P值V I Pv a l u e类型T y p eP C(14ʒ0e/22ʒ6)0.02831.33下调P E(16ʒ1e/20ʒ4)0.01771.42下调P C(16ʒ0/18ʒ2)0.00711.57下调P E(18ʒ1e/20ʒ4)0.02141.38下调P C(16ʒ0/20ʒ4)0.02141.38下调P E(18ʒ1e/22ʒ4)0.00551.61下调P C(16ʒ0/22ʒ6)0.03521.27下调P E(32ʒ0p)0.03971.23下调P C(16ʒ0e/18ʒ1)0.03711.25下调P E(34ʒ1p)0.03091.30下调P C(16ʒ0e/22ʒ5)0.01481.47上调P E(36ʒ3p)0.02111.39下调P C(16ʒ0e/22ʒ6)0.00701.58上调P E(36ʒ4p)0.03191.29下调P C(16ʒ1e/18ʒ1)0.00711.57下调P E(36ʒ5)0.02141.38下调P C(18ʒ0/18ʒ1)0.01611.45下调P E(36ʒ5e)0.03951.24下调P C(18ʒ0/20ʒ2)0.02141.38下调P E(36ʒ6)0.04321.21下调P C(18ʒ0/22ʒ4)0.00021.93下调P E(36ʒ6e)0.02981.31下调P C(18ʒ0/22ʒ6)0.01771.42下调P E(36ʒ6p)0.01261.49下调P C(18ʒ0e/22ʒ5)0.00701.58下调P E(38ʒ1)0.00661.59下调P C(18ʒ1/14ʒ0)0.03561.26下调P E(39ʒ5e)0.03151.30下调P C(20ʒ0/22ʒ6)0.03961.23下调P E(40ʒ4e)0.00891.54下调P C(30ʒ1)0.02991.31下调P E(40ʒ8e)0.00021.92上调P C(32ʒ1)0.01611.44下调P E(40ʒ9e)0.00011.99上调P C(32ʒ1e)0.00391.66下调P E(42ʒ8e)0.04201.22下调P C(32ʒ2)0.02141.37下调P G(16ʒ0/16ʒ0)0.03661.25下调P C(33ʒ1)0.02321.36下调P G(18ʒ0/16ʒ0)0.01481.47下调P C(34ʒ0)0.03061.30下调P I(16ʒ0/16ʒ0)0.03971.23下调P C(34ʒ1e)0.03191.29下调P I(16ʒ0/18ʒ1)0.00281.69下调P C(34ʒ2)0.01031.52下调P I(18ʒ0/18ʒ1)0.02651.34下调P C(34ʒ2e)0.00421.65下调P I(18ʒ0/18ʒ2)0.01121.50下调P C(34ʒ3e)0.04701.20下调P I(18ʒ0/22ʒ5)0.03711.25下调P C(34ʒ4)0.02871.32下调S M(d30ʒ1)0.03951.24下调P C(36ʒ0)0.01481.47下调S M(d32ʒ0)0.03151.29下调P C(36ʒ1)0.00211.71下调S M(d32ʒ1)0.02141.38下调P C(36ʒ1e)0.02931.32下调S M(d33ʒ1)0.01521.46下调P C(36ʒ2)0.00971.53下调S M(d34ʒ1)0.03171.29下调P C(36ʒ4)0.01951.40下调S M(d35ʒ1)0.00141.79下调P C(36ʒ5)0.00551.61下调S M(d36ʒ0)0.00711.57下调P C(36ʒ6)0.01061.51下调S M(d38ʒ1)0.01641.44下调P C(36ʒ6e)0.02141.38下调S M(d39ʒ1)0.02991.31下调P C(36ʒ7)0.02091.40下调S M(d42ʒ2)0.02691.34下调P C(36ʒ7e)0.01641.44下调S M(d44ʒ5)0.02771.33下调P C(38ʒ1)0.00211.73下调S M(d44ʒ6)0.02931.31下调P C(38ʒ2)0.01481.47下调S M(t36ʒ1)0.03601.26下调P C(38ʒ4)0.01611.44下调S M(t38ʒ1)0.01661.43下调P C(38ʒ5)0.03601.26下调S M(t40ʒ1)0.02221.37下调P C(38ʒ5e)0.01611.44上调S M(t40ʒ2)0.02131.39下调P C(38ʒ6)0.02201.37下调S M(t40ʒ3)0.02461.35下调44514期陈佳颖等:公猪精液质量与精子脂质成分相关性研究续表脂质分子L i p i dm o l e c u l e错误发现率F D RV I P值V I Pv a l u e类型T y p e脂质分子L i p i dm o l e c u l e错误发现率F D RV I P值V I Pv a l u e类型T y p eP C(38ʒ6e)0.00031.87上调S M(t40ʒ4)0.02141.39上调P C(38ʒ7)0.02141.38下调S M(t40ʒ5)0.00031.88上调P C(38ʒ8e)0.01611.45上调S M(t42ʒ2)0.03631.26下调P C(39ʒ3)0.03781.25上调S M(t42ʒ5)0.00691.59下调P C(39ʒ5)0.03601.26上调T G(15ʒ0/16ʒ0/18ʒ1)0.00211.72上调P C(39ʒ5e)0.03971.23下调T G(16ʒ0/14ʒ0/18ʒ1)0.02111.39上调P C(39ʒ6)0.01121.50下调T G(16ʒ0/16ʒ0/18ʒ1)0.00021.92上调P C(40ʒ1)0.02871.32下调T G(16ʒ0/16ʒ1/16ʒ1)0.02461.35上调P C(40ʒ2)0.00411.65下调T G(16ʒ0/16ʒ1/18ʒ1)0.00211.74上调P C(40ʒ4)0.00021.90下调T G(16ʒ0/17ʒ1/18ʒ1)0.00141.78上调P C(40ʒ4e)0.01071.51下调T G(16ʒ0/18ʒ1/18ʒ1)0.00211.71上调P C(40ʒ5)0.00411.65下调T G(16ʒ1/16ʒ1/16ʒ1)0.00651.60上调P C(40ʒ5e)0.00181.76下调T G(17ʒ0/18ʒ1/18ʒ2)0.00701.58上调P C(40ʒ6)0.00971.53下调T G(18ʒ0/16ʒ0/18ʒ1)0.00181.75上调P C(40ʒ7)0.00691.59下调T G(18ʒ0/18ʒ0/18ʒ1)0.01761.42上调P C(40ʒ7e)0.00211.71上调T G(18ʒ0/18ʒ1/18ʒ1)0.03781.25上调P C(40ʒ8)0.03311.28下调T G(18ʒ1/18ʒ1/18ʒ1)0.03651.26上调3讨论精液密度㊁精子活力㊁精子形态和精液体积等精液品质指标影响母猪窝产仔数和公猪群的经济盈利能力㊂因此,多方面评价公猪精液质量有助于提高公猪生产的经济效益㊂随着计算机系统㊁算法和图像捕获的改进,C A S A系统的准确性大大提高, C A S A在公猪精液评价的研究和实践中均被广泛采用[24]㊂因此,本试验对大白和长白公猪的精液指标进行了比较,结果显示两者在精液密度㊁精子活力㊁精子畸形率和精液体积等方面均无显著差异㊂精子活力被认为是最重要的精液品质性状之一[27]㊂正常情况下,刚采集的种公猪精液精子活力在70%以上,常温保存后,精子活力在60%以上[28]㊂本研究以精子活力70%作为分组标准,将精液样品分为正常活力和低活力2组,并对其他精液指标进行了差异分析㊂结果发现,精子密度和精液总体积与精子活力呈正相关趋势,与尚秀国等[29]的研究结果一致㊂目前主要通过体外分析精子的形态学㊁运动性㊁D N A完整性㊁顶体完整性㊁质膜完整性和线粒体功能等表观特征来评价精液品质[30],但是这些指标受采精方式和保存条件等因素的影响,有时无法准确反映精液品质㊂精子脂质成分不仅是精液中的重要组成部分,而且与精液品质密切相关㊂精子中磷脂和糖脂等脂类的变化能直接反映精子的实时生理功能状态㊂然而精子活力与脂质成分之间的关系有待深入研究㊂脂质组学方法可以从细胞水平全面分析整体脂质谱,并已被用于确定不同物种精子的脂质组成[31]㊂因此,明确不同活力公猪精子之间的脂质谱差异,鉴别差异脂质分子,有助于更准确地评价公猪精液品质和生产力㊂本研究脂质组学分析结果发现,精子活力正常和活力低下的精液样品的脂质分布是存在差异的,初步差异分析筛选出的物质主要为C o㊁D G㊁S M㊁P C㊁Z y E㊁H e x3C e r㊁T G和P C(e)㊂相较于精子活力正常的精子,活力低的精子中C o㊁D G㊁S M㊁P C㊁Z y E㊁H e x3C e r含量均显著减少㊂活力低的精子中显著减少的辅酶类是辅酶Q10(C o (Q10))㊂C o(Q10)是一种脂溶性醌类化合物,是能量产生的重要辅助因子,具有抗氧化特性㊂C o(Q10)是一种具有较强生物活性的抗氧化剂[32],将其添加到精液中可以直接扩散到质膜中存在的多不饱和脂质链中,产生能量和阻止活性氧影响精子的结构和功能[33]㊂多项研究报道,补充C o(Q10)后精子活力均显著增加[34-37]㊂D G在精子中最重要的功能是参与顶体反应,与公猪顶体反应的胞吐作用有关[38]㊂C r a i g等[39]研究发现,含有超长链多不饱和脂肪酸(ȡ28个碳原子;4~6个双键)的S M水平与精子数量和活动精子总数呈正相关㊂P C和P E在正常精子中出现频率更高,在弱精子样本中出现频率更低,5451中国畜牧兽医51卷因此P C和P E被认为是活动精子的标志物[21,40]㊂弱精子样本中,P C含量的降低可能是由于自由基诱导的P U F A氧化对磷脂过度分解和破坏所致,这种现象可能与样本中活性氧(R O S)的生成增加有关[41]㊂T G是一种重要的中性脂质,含有甘油骨架和3个脂肪酰基链㊂研究报道,H e x3C e r是一种特定类型的神经酰胺,是由3个糖基与神经酰胺结合而成的复合物㊂神经酰胺是1种重要的生物活性脂质,在细胞增殖㊁细胞凋亡和疾病等过程中发挥重要的作用[42-44]㊂然而,关于H e x3C e r和Z y E这2类脂质与精子活力的研究鲜见报道㊂此外,本研究发现T G和P C(e)在精子活力低的样品中显著增加㊂T G是精子的重要能量来源[45]㊂研究表明,活力低的精子中T G含量增加[46],这与本试验结果相符㊂此外,T G衍生的代谢物可能调节H e x C e r的代谢以微调脂质分配[47]㊂到目前为止,P C(e)具体的生理功能尚未明确㊂本研究详细分析了不同品质精液的精子脂质成分,通过V I P>1和F D R<0.05的双重标准进一步筛选后,共获得166种差异脂质分子㊂L u c i o等[21]研究发现P C38ʒ4(18ʒ0/20ʒ4)㊁P C36ʒ1(18ʒ0/18ʒ1)㊁P E34ʒ4(14ʒ0/20ʒ4)和L P A36ʒ4 (16ʒ0/20ʒ4)等脂质分子是狗的活动精子标志物㊂在本试验中,活力高的精子样品中P C(18ʒ0/18ʒ1)的含量显著高于活力低的精子样品㊂F u c h s 等[48]认为溶血磷脂酰胆碱22ʒ6(l y s o-p h o s p h a t i d y l c h o l i n e,L P C)是人类精子脂质氧化的可靠标记㊂也有研究表明,L P C22ʒ6与P C16ʒ0/22ʒ6之间的比率在膜结构受损的精子中也有所上升㊂然而在本研究中属于L P C的差异脂质分子是L P C(14ʒ0)+H和L P C(16ʒ0)+H㊂本试验中的差异脂质分子主要集中在P C这类脂质上,并且其差异极显著㊂本研究使用C A S A检测公猪精液品质指标,并通过对活力正常组和品质差组的精子脂质成分进行了分析,发现2组间脂质成分存在差异,为进一步在分子水平评价公猪精液品质提供参考㊂在之后的研究中,需要比较活力不同的精子之间的精浆脂质组成,这将有助于揭示精子活力与脂质成分之间的关系,并建立一种通过检测脂质来快速评估精子质量的方法㊂4结论本研究从正常活力和低活力的精子中鉴别出166种差异脂质分子,其中,70种差异脂质分子为P C㊂D G㊁S M㊁P C㊁Z y E㊁H e x3C e r等脂质亚类与精子活力呈显著正相关,而T G和P C(e)与精子活力呈显著负相关,精子中P C㊁D G㊁S M㊁P C㊁Z y E㊁H e x3C e r,T G和P C(e)等脂质的组成成分及其含量可以作为区分精子活力高低的标志㊂参考文献(R e f e r e n c e s):[1] G U O L L,WU Y S,WA N G C,e t a l.G u tm i c r o b i o l o g i c a l d i s o r d e r s r e d u c e s e m e nu t i l i z a t i o n r a t ei nD u r o cb o a r s[J].F r o n t i e r s i n M i c r o b i o l o g y,2020,11:581926.[2] Y E S T E M,R O D R I G U E Z-G I L J E,B O N E T S.A r t i f i c i a l i n s e m i n a t i o n w i t h f r o z e n-t h a w e d b o a rs p e r m[J].M o l e c u l a rR e p r o d u c t i o n&D e v e l o p m e n t,2017,84(9):802-813.[3] R O B I N S O N J A,B UH R M M.I m p a c to f g e n e t i cs e l e c t i o no n m a n a g e m e n to fb o a rr e p l a c e m e n t[J].T h e r i o g e n o l o g 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RhoGDI_在人睾丸_精子中表达及其与体外受精成功率相关性的初步分析
1 资料和方法
1. 1 临床标本 在知情同意原则下, 在南京医科大 学遗体捐献中心获得正常人睾丸标本, 在南京医科 大学附属南京市妇幼保健院生殖中心获得 25 例进 行体外受精 ( IVF )治疗的男性不育患者的精液标本 和 10例正常生育的男性精液标本。正常生育男性 标本质量均达到世界卫生组织精液变量参考值的标 准 [ 5] 。参考文献 [ 6] , 25例患者标本根据受精率高 低分为两组: 受精率 ∀ 60% 为高受精率组 ( 12 例 ) , 受精率 < 60% 为低受精率组 ( 13例 ) 。 1. 2 主要试剂 P erco ll细胞分离液购自美国 phar m acia公司; RhoGD I 兔抗人多克隆抗体购自美国 Santa C ruz公司; 微管蛋白 ( tubu lin) 兔抗人多克 隆抗体购自美国 Abcam 公司; 人输卵管液 HTF 购自 美国 InV itro Care公司; Ca2+ 载体 A 23187购自美国 S igm a公司; 聚偏二氟乙烯 ( PVDF ) 膜购自美国 Am ersham 公司, 其他试剂均购自南京基因生物公司。
精子 DNA 完整率和精子顶体完整率及反应率对卵胞浆内单精子注射术结局的影响
精子 DNA 完整率和精子顶体完整率及反应率对卵胞浆内单精子注射术结局的影响何泳志;李大文;肖鑫;龚国通【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2015(000)005【摘要】目的：研究精子 DNA 完整率和精子顶体完整率及受精后精子顶体反应率对卵胞浆内单精子注射术（ICSI）结局的影响。
方法分析行 ICSI 治疗的102对不孕不育夫妇，观察精子 DNA 完整率[用精子 DNA 断裂指数（DFI）表示]、精子顶体完整率及受精后精子顶体反应率对 ICSI 结局的影响。
结果DFI、精子顶体完整率及反应率与 ICSI 受精率、卵裂率、优胚率均无相关性（P ＞0.05）；妊娠患者 DFI 低于未妊娠患者，差异有统计学意义（P ＜0.05）；妊娠患者精子顶体完整率及受精后精子顶体反应率均高于未妊娠患者，差异有统计学意义（P ＜0.05）。
结论精子 DNA 完整率高（即 DFI 低）、精子顶体完整率及受精后精子顶体反应率高有利于提高行 ICSI的临床妊娠率。
【总页数】3页(P729-731)【作者】何泳志;李大文;肖鑫;龚国通【作者单位】广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心南宁 530021; 广西中医药大学;广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心南宁 530021;广西中医药大学研究生学院南宁 530000;广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心南宁530021【正文语种】中文【相关文献】1.精子DNA完整率对卵胞浆内单精子注射术结局的影响 [J], 方东2.生精胶囊及左卡尼汀对精子DNA断裂率顶体完整率及体外受精结局的影响 [J], 何泳志;李大文;何冰;成俊萍;覃捷;霍仲超;肖鑫3.生精胶囊对精子DNA和顶体完整率及体外受精结局影响 [J], 何泳志;李大文;肖鑫;龚国通4.精子DNA完整率、精子顶体完整率及反应率对补救卵泡浆内单精子注射术的影响 [J], 何泳志;李大文;成俊萍;霍仲超;黄红艺;肖鑫5.生精片对精子DNA和顶体完整率及体外受精结局的影响分析 [J], 程国隆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
精子顶体酶活性检测对诊断男性不育症的价值分析
精子顶体酶活性检测对诊断男性不育症的价值分析发布时间：2022-07-27T02:34:42.512Z 来源：《医师在线》2022年4月7期作者：邓颖芸韦海燕覃宣富[导读]邓颖芸韦海燕覃宣富（广西河池市人民医院；广西河池547000）【摘要】目的：探究男性不育症诊断中应用精子顶体酶活性检测的临床价值。
方法：选择各种原因导致的男性不育症患者组成实验组，病例数300例，时间2021年1月至2021年8月，其中100例精液参数异常纳入实验1组，剩余100例精液参数正常纳入实验2组，另选同期健康体检可生育男性100例组成对照组，比较不同组别受检者精子顶体酶活性检测结果（精液顶体酶活性）。
结果：实验1组精液顶体酶水平显著低于实验2组和对照组，实验2组也显著低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。
实验1组精液顶体酶活性低于实验2组和对照组，实验2组和对照组比较精液顶体酶活性明显更低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。
结论：在男性不育症临床诊断中应用精子顶体酶活性检测具有很高的价值，可以通过精液顶体酶活性检测对男性不育症患者精子受精能力进行评价，且可对不育症患者精液参数异常情况进行定性，为男性不育症诊断提供准确依据，可进行推广使用。
【关键词】“男性不育症”指的是夫妇同居一年，在不采取避孕措施且性生活正常的条件下，无法使女性怀孕的疾病。
导致男性不育症的原因很多，一般情况下无法进行病因明确，常见的致病因素包括先天因素、内分泌异常、感染等[1]。
尽早确诊、尽早开始治疗可以获得理想的治疗效果。
顶体酶存在于精子头部顶体内膜与赤道膜之间。
当精子与卵母细胞结合后，精子头部发生顶体反应，顶体外膜破裂，顶体酶释放。
顶体酶是受精过程中重要的蛋白水解酶，可溶解卵母细胞周围的放射冠和透明带，使精子穿过透明带与卵细胞融合完成受精。
精子顶体酶活性降低可影响精子穿透卵母细胞透明带，从而导致不育。
除精子自身质量之外，严重的生殖系统感染，也可造成精子顶体酶活性降低。
精子顶体反应率与精液相关参数之间关系的研究
精子顶体反应率与精液相关参数之间关系的研究杜鹏;黄志承;史哲;汪李虎;郑毅春;肖宗辉【期刊名称】《临床医学工程》【年(卷),期】2013(020)010【摘要】目的研究精子顶体反应率与精液相关参数之间的关系,探讨精子顶体反应对男性不育的影响.方法收集2012年10月至2013年4月间在广东省妇幼保健院生殖中心就诊的180例男性患者的精液标本,采用钙离子载体A23187诱导精子发生顶体反应(AR),按照顶体反应值,分AR＞3％、AR≤3％两组,对AR与各项精液参数进行相关性分析.结果两组间精子活动力、精液量、精子密度、精子总数无显著差异(P＞0.05),而精子正常形态率与精浆抗精子抗体(antispermantibody,AsAb)差异显著(P ＜0.05).结论精子顶体反应与精子质量有关,是相对独立的男性不育因素,是男性生育能力评估的重要参考指标.【总页数】3页(P1206-1208)【作者】杜鹏;黄志承;史哲;汪李虎;郑毅春;肖宗辉【作者单位】广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010【正文语种】中文【中图分类】R698+.2【相关文献】1.不育男性精液常规参数与年龄、精子DNA碎片率和精子顶体功能的相关性研究[J], 刘树沅;韦剑洪;许小琴;陈伟辉2.精子顶体反应与精液分析参数相关性的探讨 [J], 朱玉蓉;邱惠麒;楼丽君3.精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率与卵子体外受精率的相关性研究 [J], 张冉;丘映4.精子DNA碎片率与精液相关参数、体外受精胚胎移植结局的关系 [J], 张丹;吴尊凤;庞敏5.不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性分析 [J], 周欢群;蒋满波;周文;谢妍;吴爱华;王爱爱;倪运萍;陆杉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
11胚胎工程实验之体外受精
或 PBS 的 保温瓶内（ 25 － 35℃）中 ，在 3h 内送回实验室，然后按
照下述方法进行回收。 ①卵泡抽吸法： 用注射器套上12－16号针头，保持一定负压，从卵泡的侧面
刺入，一次进针可抽吸卵巢皮质的多个卵泡。
②卵泡解剖法：
用手术刀片将卵巢切为两半，去掉中间的髄质部分，露出卵
2.卵母细胞的活体采集 因从屠宰场收集得到的卵巢无法知道其系谱，且其
动物胚胎工程实验
王子玉 84395381 逸夫楼3084
实验二 小鼠卵母细胞的体外受精
体外受精的意义
对畜牧业生产、动物生殖机理的研究及保护濒危 动物、治疗人类的不孕不育症等具有重要意义
可望解决胚胎移植所需胚胎的生产成本及来源匿
乏等关键问题。可利用IVM－IVF－IVC体外大规
模生 产高质量的胚胎，建立工厂化生产胚胎的成
①开放培养系统：
将1－2ml成熟培养液直接置于平面皿内或五孔培养板内，然
②微滴培养系统：
将成熟培养液先在组织培养皿中做成 50－ 500µl 的
微滴，上覆石蜡油，然后将卵母细胞置于其中培养。 在一般情况下，这种培养液用在卵母细胞数量特别 少的情况下采用。 ③密闭培养系统： 将卵母细胞置于含有 1 － 2ml 成熟培养液的试管中， 加盖胶塞，然后在培养箱或恒温水浴中培养；如若采用
用顶体反应释放的顶体酶活性评价顶体反应功能的研究
用顶体反应释放的顶体酶活性评价顶体反应功能的研究王洪亮;刘睿智;张红国;赵丁;许宗革【期刊名称】《中国妇幼保健》【年(卷),期】2007(22)18【摘要】目的:研究用顶体反应释放的顶体酶活性评价人类精子顶体反应功能。
方法:10例健康生育男子精液,采用Percoll密度梯度分离法优选精子,用FITC-PSA荧光染色法分析顶体反应(acrosome reaction,AR),顶体酶活性采用分光光度比色法测定。
结果:A23187和孕酮诱导的精子AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.05)。
随A23187浓度增加,AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.01)。
A23187诱导AR释放的顶体酶活性与相应顶体反应率呈明显正相关关系(r=0.950,P<0.001)。
随孕酮浓度增加,AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.05)。
孕酮诱导的AR释放的顶体酶活性与相应顶体反应率亦呈明显正相关关系(r=0.921,P<0.001)。
结论:孕酮可诱导人精子顶体反应,用顶体反应释放的顶体酶活性可评价人精子顶体反应功能。
【总页数】4页(P2576-2579)【关键词】人类精子;顶体反应;顶体酶活性;孕酮【作者】王洪亮;刘睿智;张红国;赵丁;许宗革【作者单位】吉林大学第一医院泌尿外科;吉林大学基础医学院细胞生物学教研室;东北师范大学遗传与细胞研究所【正文语种】中文【中图分类】R321.1【相关文献】1.生育与不育男性精子顶体反应释放的顶体酶活性比较 [J], 刘睿智;高元奇;张红国;许宗革;王洪亮2.钙离子载体A23187诱发的精子顶体反应率、顶体酶总活性与精液参数及体外受精结局的关系研究 [J], 郭小桥;余波澜;周华;司沙沙;曹定娅;刘见桥;孙筱放3.低氧对大鼠精子体外顶体反应和顶体酶、透明质酸酶活性的影响 [J], 廖卫公;高钰琪;黄碱;范有明;蔡明春;吴艺4.不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性分析 [J], 周欢群;蒋满波;周文;谢妍;吴爱华;王爱爱;倪运萍;陆杉5.优选和冻融对精子顶体反应及顶体反应释放的顶体酶活性影响 [J], 张红国;刘睿智;许宗革;王洪亮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
精子顶体酶活性在体外受精-胚胎移植中对胚胎培养指标的影响
精子顶体酶活性在体外受精-胚胎移植中对胚胎培养指标的影响郑先觉;徐晓敏;王娟;汪海;郑加永;夏淑琦;潘豪杰【期刊名称】《浙江实用医学》【年(卷),期】2022(27)1【摘要】目的分析精子顶体酶活性对体外受精-胚胎移植治疗中胚胎培养指标的影响。
方法选取2019年1月-2020年12月在浙江省温州市人民医院生殖医学中心进行体外受精-胚胎移植治疗的夫妇,按男性的精子顶体酶活性数值分为顶体酶正常组(48.2~218.7μIU/10^(6))和顶体酶异常组(<48.2μIU/10^(6)),经倾向性匹配后,纳入120对夫妇,其中顶体酶异常组30对,顶体酶正常组90对,比较两组卵子受精率、卵裂率和优质胚胎率的差异。
结果顶体酶正常组和顶体酶异常组受精率分别为100.00%(85.71%~100.00%)和82.11(65.00%~100.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。
结论顶体酶活性异常可显著降低体外受精-胚胎移植治疗中胚胎培养受精率,顶体酶活性可成为辅助生殖治疗前具体方案选择的评价指标。
【总页数】3页(P8-10)【作者】郑先觉;徐晓敏;王娟;汪海;郑加永;夏淑琦;潘豪杰【作者单位】温州市人民医院【正文语种】中文【中图分类】R71【相关文献】1.体外受精-胚胎移植中精子顶体完整率与受精的关系2.不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性分析3.精子DNA损伤和顶体功能检测对体外受精-胚胎移植助孕结局的影响研究4.精子顶体酶活性对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响5.精液不液化不育患者的精子DNA碎片指数与其精子常规参数、精子顶体酶活性的关系及其对体外受精结局的影响分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不明原因不孕患者精子的精-卵相互作用实验及体外受精临床结局的研究
不明原因不孕患者精子的精-卵相互作用实验及体外受精临床结局的研究刘能辉;张振辉;李艳萍;刘冬娥;陈仙花;姚仲元【期刊名称】《中南大学学报（医学版）》【年(卷),期】2011(036)005【摘要】目的:研究不明原因不孕患者的精子功能,并进一步探讨不明原因不孕患者体外受精(in vitro fertilization,IVF)方式对临床结局的影响.方法:选择2009年7月至2010年1月在中南大学湘雅医院生殖医学中心行IVF治疗的55例患者,根据不孕的原因将患者分为不明原因不孕组(A组)和单纯女方输卵管因素组(B组).将不明原因不孕组25例患者通过超排卵获取的成熟卵母细胞随机分为2组,分别行常规IVF(A1组)和卵胞质内单精子注射术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)受精(A2组);单纯女方输卵管因素组(B组)采用常规IVF.将2组男方的精子利用废卵分别进行精-卵结合实验和透明带诱发精子顶体反应实验.观察A组与B组平均精卵结合数和透明带诱发精子顶体反应情况,分析透明带诱发精子顶体反应率与受精率的关系.比较不明原因不孕组通过2种方式受精后的受精率、优胚率及妊娠率.结果:A组平均精卵结合数(78.29±16.31)和透明带诱发精子顶体反应率[(55.87±27.69)%]明显低于B组的平均精卵结合数(94.63±6.72)及透明带诱发精子顶体反应率[(82.53±17.99)%],差异具有统计学意义(P＜0.01);A1组的受精率(49.32%)明显低于B组(64.42%)和A2组(71.33%),差异具有统计学意义(P＜0.01);而A1组的优胚率(44.44%),与A2组(56.86%)及B组的优胚率(53.81%)相比,差异无统计学意义(P＞0.05);A2组的受精率及优胚率与B组比较,差异也无统计学意义(P＞0.05);A组的妊娠率(36%)与B组(40%)相比,差异无统计学意义(P＞0.05);A1组的受精率与透明带诱发精子顶体反应率具有明显的相关性,有统计学意义(r=0.932,P＜0.01).结论:对于不明原因不孕患者,精卵结合及透明带诱发精子顶体反应是有重要意义的精子功能检测实验.不明原因不孕患者的卵子采用half-ICSI,可有效地避免受精完全失败导致的无胚胎移植,从而获得较理想的妊娠结局.%Objective To determine the sperm-zona pellucida (ZP) binding and ZP-induced acrosome reaction in patients with unexplained infertility, and to discuss the relationship between ZP-induced acrosome reaction and fertilization rate.Methods We compared the fertilization rate and good embryo rate in patients with unexplained infertility after fertilization in 2 ways.Based on the causes of infertility, patients were divided into an unexplained infertility group ( Group A) and a pure female tubal factor group (Group B).Oocytes which were obtained by super ovulation from 25patients with unexplained infertility were randomly divided into 2 groups with conventional in vitro fertilization (IVF) ( Group Al ) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) fertilization ( Group A2).The pure female tubal factor group (Group B) had conventional IVF.We conducted spermZP binding and ZP-induced acrosome reaction experiments with 2 groups of men's sperms separately.We conpared the number of sperm-egg binding and ZP-induced acrosome reaction rate and discussed the relationship between the ZP-induced acrosome reaction and fertilization rate, and also the fertilization rate, good embryo rate and pregnancy rate in patients with unexplained infertility after fertilization in 2 ways.Results The average number of sperm-egg binding (78.29 ± 16.31 ) and the ZP-induced acrosome reaction rate (55.87 ± 27.69) ％ in Group A were lower thanthose of Group B [94.63 ± 6.72, (82.53 ± 17.99) ％].The difference between the average number of sperm-egg binding and the ZP-induced acrosome reaction was significant ( P ＜ 0.01 ).The fertilization rate of Group A1 was significantly lower than that of Group B and Group A2 (P ＜0.01 ).But there was no significant difference in the good embryo rate among the 3 groups.There was no significant difference between Group A2 and B in fertilization rate and good embryo rate (P ＞ 0.05 ).There was no significant difference in pregnancy rate between Group A and B ( P ＞0.05 ).Fertilization rate and the rate of acrosome reaction had marked positive correlation with statistical significance (r = 0.932, P ＜0.01 ).Conclusion ZP binding and ZP-induced acrosome reaction are very important experiments in sperm function test for patients with unexplained infertility.It can not only effectively avoid no embryo transferring due to complete failure of fertilization but also get a desirable outcome of pregnancy using half-ICSI fertilization in patients with unexplained infertility.【总页数】9页(P439-447)【作者】刘能辉;张振辉;李艳萍;刘冬娥;陈仙花;姚仲元【作者单位】中南大学湘雅医院妇产科生殖医学中心,长沙,410008;中南大学湘雅医院妇产科生殖医学中心,长沙,410008;中南大学湘雅医院妇产科生殖医学中心,长沙,410008;中南大学湘雅医院妇产科生殖医学中心,长沙,410008;中南大学湘雅医院妇产科生殖医学中心,长沙,410008;中南大学湘雅医院妇产科生殖医学中心,长沙,410008【正文语种】中文【相关文献】1.合并子宫肌瘤的不孕症患者行体外受精/单精子卵胞浆注射-胚胎移植治疗的临床结局分析 [J], 龙凤;张海英;莫似恩;李肖然;公方强;禤丽2.卵巢低反应获卵患者常规体外受精与卵胞浆单精子注射技术对妊娠结局的影响[J], 彭爱珍3.精子-透明质酸结合试验与不明原因不孕患者行宫内人工授精后妊娠结局的关系[J], 邱孙全;王金香4.不同精子-透明质酸结合试验结合率对原因不明性不孕患者行人工授精后妊娠结局的影响 [J], 闫喜秋5.人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验与人精卵体外受精的比较 [J], 岳利民;张金虎;何亚平;黄萍;王丽;刘伟信;张蕾因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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０ ｌＶｉ ｏＦ ｒｉｚ ｔ ｎ （ ｆｈ ｔ ｅ ｔｉａＧＲ ｎ Ｑｕ Ｙｎ Ｈ Ｎ ａ ， Ｉ ｉｇ
（ ｒ ｅ ｏ ｅ ｏｐ ａ ， ｅ ｉ ００ ９ Ｃ ｉ ） Ａ ｍ ｄ ｐｈ ｅｈｓ ｉ ｌＢ ｉｎ １０ ３ ， ｈ ａ ｔ ｊｇ ｎ
整率 ＞ ５ 随着精子顶体完整率的增加 ， ８ ％， 卵子的受精率也 明显增高 ；． ３ 对于精 液常规分析 正常 的男性 ， ７ ％男性精 子顶体反应 率 ≥１ ％ ， 其 ８ ４
在 体外 受精 中 卵子 的受 精 率 随 着 精 子 顶 体 反 应 率所 占 百分 比 的增 加 而 增 高 ；． 述 三 者 都 是 影 响 卵 子 受 精 的重 要 因 素 ， 子 体 外 受 精 率 与 以 ４上 卵
【 论
著】
精 子 正 常 形 态 率 、 体 完 整 率 、 体 反 应 率 顶 顶 与 卵 子 体 外 受 精 率 的 相 关 性 研 究
张
（． １武警总 医院 ， 北京
冉 丘 ，
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１０ ３ ２ 广西医科大学第 三附属 医院妇产科 ） ０ ０９；．
【 摘要 】 目的 ： 通过检测常规体外受精中（ ｔ ｒ ｉｔｎ Ｖ ） ｉ ｖｒ ｆｔ ｚｉ Ｆ 精液常规分析正常男性的精子正常形态率、 ｎ ｉ ｅｉ ａｏ Ｉ ｏ ｌ 顶体完整率、 顶体反应率
Ｓ ｕ ｙ ｏ ｈｅ ｃ ｒ ｅａｉｎ ｅ ｗｅ ｎ ｓ ｅ ｍ ｏ ｐ ｏｏ ｙ，ｒ ｔ ｆａ ｒ ｓ ｍ ｅ ｔ ｄ ｎ ｔ ｏ ｒ ｌｔｏ ｓｂ ｔ ｅ ｐ ｒ ｍ ｒ ｈ ｌ ｇ ａｅｏ ｃｏ ｏ
ｉ ｔ ｃ ｎ ｓ ，ｒ ｔ ｃ ｏ ｏ ｅ ｃ ｉ ｎ ｎ ｈ ａ ｅ ｎ ａ ｔ ｅ ｓ ａ ｅ ｏ ａ ｒ ｓ ｍｅ ｒ ａ ｔｏ ａ ｄ ｔ ｅ ｒ ｔ ｆ
ｄｉ １．９ ９ ｊｉ ｎ １７ ０６ ．０ ２ １ ．０ ｏ： ０ ３ ６／．ｓ ．６２— ３ ９ ２ １ ．９ ０ １ ｓ
中 图分 类 号 ： Ｒ ９ ．５ ６ ７２
文献标识码 ： Ａ
文章编号 ：
１７ ０ ６ （０ ２ １ ２ ０ ６２— ３ ９ ２ １ ） ９— ３５—１ ０
项参数 与卵子受精率之间的相关性进行分析。结 果 ： 实验组 １精 液标本按 其正常精 子形态百分 率分为 ３ ， ， 组 Ａ组 ： ％ 而 ＜ ０ 、 ≥５ １％ Ｂ组 ： ≥
１％ 而 ＜ ５ 、 组 ： ５ ， ０ １ ％ Ｃ ≥１％ 卵子体外受精率分别为 ６ ． ５ 、 ． １ ８ ．９ ， 间两两相 比差异有统计学意义 （ ０ ０ ） ７ ０ ％ ７ ５ ％、２４ ％ 各组 ４ Ｐ＜ ． ５ 。实验组 ２ 按 ，
２１ ０ ２年 １ ０月
中国民康 医学
Ｍｅ ｉａ ｏ ｒ ａ ｆＣ ｉｅ ｅ Ｐ ｏ ｌ ｇ Ｈｅ ｔ ｄ ｃ ｌＪ ｕ ｎ ｌｏ ｈ ｎ ｓ ｅ ｐ ｅ ａ ｈ ｌ
Ｏｃ ， ０１ ｔ２ ２ Ｖｏ ． ４ ＦＨＭ Ｎｏ １ １２ ．９
第２ ４卷
上半 月
第１ ９期
８ ．７ ， ７ ２ ％ 两组间 比较差异有统计学意义（ ００ ） Ｐ＜ ．５ 。实验组 ５ 用多重线性 回归分析 ， ， 精子正 常形态率 、 顶体完整率 、 顶体反应率 的标 准化系数 和 Ｐ值 分别为 ０ ３２ ０ ４ ７ ０ ２ １０ ０ ５ ０ ０ ５ ０ ０ ７ 各个 系数 均有统计学意义。其中又 以顶体完整率 的标准化系数最大 。结 论 ： ． ． ５ 、．９ 、．７ ；．４ 、 ．０ 、 ． １ ， １ 对于 精液常规分析正 常的男性 ， 约有 ５ ％存 在着不同程度 的精子形态异常 。卵子的受精 率随正 常形态精子所 占百分率 的升高而增高 ； 正常精子 ０ 其 形态率 ≥ ％ ， ５ 仍可得到一个较好的体外受精 率， 因此可行常规体外受精助孕。２ 对 于精液常规分析正常的男性 ， ． 约有 ６ ５％男性的精子顶体完
上三项 指标 问存在较强 的相关关系 ， 而其中又以顶体完整率对卵子体外受精率的影响程度最 大。５ 对于精液常规分析 正常的男性 ， 正常精 ． 若
于形态率 ≥ ％ ， ５ 在体外受精助孕前 ， 精子顶体完整率和精子顶体反应率 的检测 ， 可不作为常规检查项 目。
【 键词 】 精子； 关 精子形态； 顶体完整率； 顶体反应； 体外受精 ； 卵子
并 分析其 与卵子 的体外受精率之间的关系 ， 为辅助生殖技术提供 几种可靠 的判断精 子生育力 的参数与指 标。方 法 ： 择 ２０ 年 ７月 １ 旨在 选 ０８
日到 ２ ０ ０９年 ｌ ２月 ３ ０日间在广西医科大学第 三附属 医院生殖医疗 中心进行控制性长方案超排卵 下行常规 Ｉ Ｆ—Ｅ Ｖ Ｔ的 １０对夫 妻 ， １０个 ０ 共 ０ 周 期的资料做前瞻性分析 ， 男方精液常规分析属 正常范 围， 分析 １０份标本精子正 常形 态率 、 ０ 精子顶 体完整率 以及精子 顶体 反应率 ； 观察并 记 录获卵个数 、 成熟卵个数 、 受精卵个数 、 未受精卵个数 ， 计算其受精率 。然后应用计量资料 ｔ 检验 ， 验以及线性相关等 统计学方法对精 子各 Ｆ检