鉴别培养基
人教版高中生物选修1专题2课题2选择培养基和鉴别培养基(共19页)
尿素的利用：尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能 直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后 才能被植物利用。 尿素分解菌分解尿素的原因：土壤中的细菌能合成脲 酶分解尿素。 脲酶 2NH + CO + H O CO(NH2)2 2 3 2
筛选出尿素分解菌的应用价值: 1.研究其生活习性，为提高农业 生产创设条件； 2.挑选与培养优良菌种，服务农 业生产...
依据：在寻找目的菌种时，要根据它对生存环境的
要求，到相应的环境中去寻找。
启示：
实验室中微生物的筛选原理
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包 括 营养、温度、pH 等)，同时 抑制 或 阻止 其 它微生物生长。
选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时 抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
选择培养基的制作（金牌学案P22）
如培养基中加入青霉素,可筛选出酵母菌和霉菌。
培养基加入某种化学物质，以抑制不需要 选择培养基 的微生物的生长，只生长具有特定目的的 微生物。
含青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌 含高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物 含四环素等抗生素的培养基: 分离导入目的基因的 受体细胞 鉴别培养基 在培养基中加入某种指示剂，鉴别特定的 微生物，可以存在其他微生物。
【资料三】刚果红染色法（P29）
培养基组成 讨论：刚果红（CR）呢？ CMC-Na 5-10g (水溶性羧甲基纤维素钠) 方法一： 先培养微生物，再加入刚果 酵母膏 1g 红进行颜色反应； KH2PO4 0.25g
土豆汁 琼脂
100mL 15g
方法二：在倒平板时就加入 刚果红。
上述物质溶解后，加蒸 馏水定容至1000mL
鉴别培养基的例子
培养基是细胞培养所需的基础材料，它可以提供细胞所需的营养，促进细胞的生长和增殖。
鉴别培养基的方法有很多，下面是一些常见的例子：
1.通过外观鉴别：不同的培养基可能会有不同的颜色和透明度，可以根据外观进行鉴别。
2.通过成分鉴别：可以查看培养基的成分表，看看是否符合需要的细胞所需的营养成分。
3.通过细胞培养效果鉴别：可以观察细胞在不同培养基中的生长情况，看看哪种培养基对细胞的生长最有促进作用。
4.通过pH值鉴别：培养基的pH值对细胞的生长有很大的影响，可以通过测量培养基的pH 值来鉴别。
5.通过培养基的保存期限鉴别：培养基有一定的保存期限，过期的培养基可能会对细胞的生长造成不利影响，可以通过查看培养基的保存期限来鉴别。
鉴别培养基的概念
鉴别培养基的概念随着生物技术的不断发展，培养基作为生物学研究的重要工具之一，也得到了越来越广泛的应用。
在微生物学领域中，鉴别培养基是一种常用的培养基类型，它不仅可以提供适合微生物生长的营养物质，还能通过特定的组分和条件，使不同种类的微生物在培养基上表现出不同的生长特征，从而实现对微生物的鉴别和分类。
本文将对鉴别培养基的概念、种类、制备和应用等方面进行探讨。
一、鉴别培养基的概念鉴别培养基是指通过调整培养基组分和条件，使不同种类的微生物在培养基上表现出不同的生长特征，从而实现对微生物的鉴别和分类的培养基。
鉴别培养基可以通过不同的生长特征，如形态、色素、产物、代谢途径等，来区分不同种类的微生物。
鉴别培养基的设计需要根据不同的微生物分类学特征和生理学特征，选择合适的培养基组分和条件进行调整，以达到鉴别的目的。
二、鉴别培养基的种类鉴别培养基根据不同的鉴别特征和目的，可以分为许多不同的类型。
以下是常见的几种鉴别培养基：1.差异培养基差异培养基是通过改变培养基中某些组分或添加特殊成分，使得不同菌株在培养基上表现出不同的生长特征。
常见的差异培养基有MacConkey培养基、Eosin Methylene Blue(EMB)培养基、XLD(肠杆菌属选择性培养基)培养基等。
2.选择性培养基选择性培养基是通过添加抑制某些微生物生长的成分，来选择性地培养某些微生物。
选择性培养基通常用于寻找某些特定微生物或排除其他微生物的情况，以便在混合菌落中鉴别和分离。
常见的选择性培养基有Sabouraud培养基、VRBD(沙门氏菌选择性培养基)培养基、MRS(乳酸菌选择性培养基)培养基等。
3.指示培养基指示培养基是通过添加某些指示剂，使得某些微生物在培养基上表现出明显的颜色变化或其他鉴别特征。
指示培养基通常用于鉴别某些特定的微生物，以便快速、准确地进行鉴别。
常见的指示培养基有MacConkey培养基、TSA(三氯化铁糖果蜜培养基)培养基、Blood Agar(血琼脂培养基)培养基等。
微生物培养基的分类
应用：实验室内，研究微生物营养、代谢、菌种选
育、菌种鉴定、生物测定等定量要求较高的研究。
2.天然培养基
又称复杂培养基，采用动植物组织或微生物细胞 或其提取物和粗消化产物制成的。 营养物质来源于天然物质。
天然物质：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麦芽汁、玉米粉、
用途：分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏等 。
凝固剂：琼脂、明胶和硅胶三种。 凝固剂要求: ①不被微生物利用分解，生长温度范围为固体。 ②凝固点温度不能太高。琼脂:45 -55℃ ③无毒，灭菌不会破坏。 ④透明及粘着力强。 ⑤凝胶强度和韧度要适中。
2.半固体培养基
在液体培养基中加入少量凝固剂,使之呈柔软的糨糊 状或直接将营养物质配制成半流体状态的培养基。
应用：微生物生理生化特性研究、大规模的工业生 产（啤酒、葡萄酒、乳制品生产）。
液体流乙醇酸盐流体培养基
好氧菌，厌氧菌，兼性厌氧菌的检验
（三）按照培养基的功能分 (1)基础培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基
本营养物质的培养基。 用途:作为一些特殊培养基的基础成分。 细菌:牛肉膏蛋白胨培养基 霉菌:马铃薯葡萄糖琼脂培养基 酵母菌:麦芽汁琼脂培养基
紫色菌落
菌群
培养基是微生物菌种生长繁殖和发酵的重 要物质基础，也是微生物赖以生存的外界环 境。在科学实验和实际生产中，会遇到许多 问题，有些培养基即是液体培养基，又是选 择培养基也可能是天然培养基，掌握不同类 型的培养基特点，并将之灵活地应用于具体 的实际工作之中。
与选择培养基区别： 加富培养基：增加所要分离的微生物数量，成为优 势菌，逐步淘汰其他微生物。 选择培养基：抑制不需要微生物的生长，使所需要 菌成为优势菌。
鉴别培养基的概念
鉴别培养基的概念鉴别培养基是现代微生物学领域中的一个重要概念。
它是指一种特殊的培养基，可以用来鉴别不同种类的微生物。
这种培养基通常包含了多种不同的化学物质，可以提供微生物生长所需的营养物质，并且可以通过不同的反应来鉴别不同种类的微生物。
鉴别培养基的发展历史可以追溯到19世纪末期。
当时的微生物学家们开始尝试在培养基中添加不同的化学物质，以便区分不同的微生物。
最早的鉴别培养基是用来鉴别大肠杆菌和链球菌的，它们分别被称为MacConkey培养基和Blood Agar培养基。
随着时间的推移，越来越多的鉴别培养基被开发出来，以满足不同的鉴别需求。
鉴别培养基可以通过多种方式进行鉴别，包括生理特性、形态特征、代谢产物等。
例如，MacConkey培养基可以通过菌落的颜色和形态来鉴别大肠杆菌和其他肠道细菌；Blood Agar培养基可以通过菌落的颜色和形态来鉴别链球菌和其他血液细菌。
除了常规的鉴别培养基外，还有一些特殊的鉴别培养基，如选择性培养基和差异培养基。
选择性培养基可以通过抑制某些微生物的生长来选择性地培养其他微生物，从而实现鉴别。
差异培养基则是通过微生物的代谢产物来鉴别不同的微生物。
例如，Eosin Methylene Blue Agar（EMB）培养基可以通过微生物的代谢产物来鉴别大肠杆菌和其他肠道细菌。
鉴别培养基的应用范围非常广泛，涵盖了许多不同的领域。
在医学领域，鉴别培养基可以用来诊断病原微生物的感染，从而帮助医生选择合适的治疗方案。
在食品工业领域，鉴别培养基可以用来检测食品中的微生物污染，从而保证食品的安全性。
在环境科学领域，鉴别培养基可以用来研究微生物在不同环境条件下的生态学特性。
总之，鉴别培养基是现代微生物学领域中的一个重要概念。
它可以通过多种方式来鉴别不同种类的微生物，广泛应用于医学、食品工业和环境科学等领域。
随着科学技术的不断发展，相信鉴别培养基还将继续发展和创新，为人类健康和生活的提升做出更大的贡献。
细菌的分离与鉴定题目
细菌的分离与鉴定一、名词解释1、细菌分离及鉴定：使用人工的方法使细菌在适当的环境和营养基质中生长繁殖，获取纯种、进行鉴定与研究等。
2、培养基：人工配置的供细菌生长繁殖的营养基质，是用人工方法将多种营养物质按照各种细菌的需要而组合成的混合营养料。
3、选择性培养基：在培养基中加有出营养成分以外的抑制物质，使之具有选择性，有利于目的细菌的检出和识别，而抑制其他非目的菌的生长或使其生长不佳。
4、鉴别培养基：利用各种细菌分解糖类和蛋白质能力及代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物，观察细菌在其中生长对底物的利用，从而鉴别细菌的培养基。
5、系统鉴定：通过病原菌的形态结构、生长特性、抗原性和病原性等检测，并用已知标准免疫血清确定分离细菌的属、种和型。
6、基因探针技术：用标记物标记细菌染色体或质粒DNA上的特异性片段之辈成细菌探针，待检标本经过短时间培养后，经过点膜、裂解变性、预杂交和杂交后，利用探针上标记物发出的信号可以知道杂交结果并判断杂交结果并判断病原体的性质。
7、毒力：病原细菌的致病能力的强弱。
通常病原细菌的毒力越大，其致病性越强。
8、半数致死量：在一定的时限内能使半数实验动物感染后发生死亡所需的活的细菌量或毒素量。
9、复杂染色法：应用两种或两种以上的染料或再加媒染剂进行染色的方法称为复杂染色法。
10、抑制剂：用于抑制非检出菌的生长或使其少生长，以利于检出菌的生长。
二、填空1、培养基的主要成分有营养物质、水分、凝固物质、抑制剂和指示剂。
2、当琼脂含量为1%-2%时可制成固体培养基，含量为0.3%-0.5%时可制成半固体培养基。
3、常用的抑制剂有胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸盐、四硫磺酸盐、叠氮钠、一些染料及某些抗生素等。
4、常用指示剂有酚红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中性红、甲基红、酸性复红等。
5、鉴别培养基主要供生化反应试验用，如糖发酵培养基、七叶苷培养基等。
6、常用的接种方法有平板划线接种法、斜面接种法、倾注培养法、穿刺接种法、半固体培养基接种法、液体接种法、平板涂布接种法。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595使它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取801小4、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
鉴别培养基
麦康凯琼脂麦康凯可能是世界上常用的一种鉴别培养基，它主要通过乳糖发酵鉴别肠道致病菌，还能抑制革兰氏阳性菌生长，发酵乳糖的细菌能使培养基变红，这是因为细菌发酵乳糖产酸而使培养基的PH值变成酸性的。
不发酵乳糖的细菌没有颜色的变化。
麦康凯抑制阳性菌的生长，是因为其中加了结晶紫。
MACCONKEY AGARMacConkey agar is probably the most popular solid differential medium in the world. It is mainly used in identification of lactose fermenting, Gram-negative enteric pathogens and for inhibiting growth of Gram-positive organisms. Bacterial colonies that can ferment lactose turn the medium red. This red color is due to the pH indicators response to the acidic environment created by fermenting lactose. Organisms that do not ferment lactose do not cause a color change.配方g/l蛋白胨 20.0 乳糖 10.0 胆盐 5.0 氯化钠 5.0 中性红 0.075 琼脂 12.0 pH 7.4±0.配制取52克CM7，加1升蒸馏水，加热至溶解完全，121℃灭菌15分钟。
待琼脂表面变干方可接种。
特点CM7符合世界卫生组织（WHO）推荐的培养基。
工业用于检测水、乳制品和生物标本的大肠菌群和肠道致病菌，临床用于分离肠细菌。
此培养基可抑制革兰氏阳性菌，可区分乳糖发酵性和非发酵性菌。
培养基的种类
培养基的种类由于各种微生物所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。
据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理性质以及不同的使用目的等而分成若干类型。
1.按照培养基的化学成分分培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
(1)合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏培养基等。
主要用于工业生产。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2.按照培养基的物理性质分培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
(3)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
3.按照培养的微生物的种类分培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等。
培养基的制备实验总结
培养基的制备实验总结一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）N源：包括无机氮和有机氮。
（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。
微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min可以 __灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
微生物名词解释
65.选择培养基：根据不同微生物的营养需求或对某种化学物质敏感性不同，在培养基中加入相应营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，将所需微生物从复杂的微生物群体中选择分离出来。
66.透过屏障：微生物细胞表面由原生质膜、细胞壁、荚膜及粘液层组成的限制物质进出细胞的屏障。
9.霉菌：以多细胞丝状群体形式生存的真菌。
10.真菌：有线粒体，无叶绿体，没有根茎叶分化，以无性和有性孢子进行繁殖的真核微生物。
11.酵母菌：单细胞真菌。
12.藻类：能进行光合作用的真核微生物。
13.原生动物：缺少真正细胞壁，具有运动能力，进行吞噬营养的单细胞真核微生物。
14.原核生物：一大类细胞微小，只有称作核区（无细胞膜包裹的裸露DNA）的原核单细胞生物。所有原核生物都是微生物，包括真细菌和古生菌两大类群。原核生物与真核生物的主要区别是：1基因组由无核膜包裹的双链DNA环组成。2缺少单位膜分隔而成的细胞器。3核糖体为70S型。
1、晶体：苏云金芽孢杆菌等少数芽孢杆菌在其形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体（内毒素），称为半胞晶体。
2、糖被：包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质。糖被有数种：1，形态固定、层次厚的为荚膜。2、形态固定，层次薄的为微荚膜。3、形态不固定、结构松散的为黏液层。4、包裹在细菌群体上有一定形态的糖被称菌胶团。糖被的主要功能是保护菌体免受干旱损伤或被宿主免疫活性细胞吞噬。
1.菌落：单个微生物细胞在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。
2.菌苔：固体培养基表面众多菌落连成一片时所形成的微生物生长群体。
培养基的分类
培养基种类繁多，根据其成分、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。
(1) 按成分不同划分1)天然培养基(complex mediurn)这类培养基含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物，也称非化学限定培养基(chemically undefined mediunl)。
牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。
基因克隆技术中常用的LB(Luria—Bertani)培养基也是一种天然培养基，其组成见表4—10。
常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表4—11)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡萝卜汁、椰子汁等，嗜粪微生物(coprophilous microorganisms)可以利用粪水作为营养物质。
天然培养基成本较低，除在实验室经常使用外，也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。
表4—11 牛肉浸膏、蛋白胨及酵母浸膏的来源及主要成分营养物质来源主要成分牛肉浸膏蛋白胨酵母浸膏瘦牛肉组织浸出汁浓缩而成的膏状物质将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的粉末状物质酵母细胞的水溶性提取物浓缩而成的膏状物质富含水溶性糖类、有机氮化合物、维生素、盐等富含有机氮化合物、也含有一些维生素和糖类富含B类维生素，也含有有机氮化合物和糖类2)合成培养基(syntheticmedium)合成培养基是由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemically defined mediurn)，高氏I号培养基和查氏培养基就属于此种类型。
配制合成培养基时重复性强：，但与天然培养基相比其成本较高，微生物在其中生长速度较慢，一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。
(2) 根据物理状态划分根据培养基中凝固剂的有无及含量的多少，可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。
鉴别培养基的概念
鉴别培养基的概念鉴别培养基是一种用于微生物学实验中的特殊培养基，它可以帮助我们区分不同种类的微生物。
在医学、食品工业、环境监测等领域中，鉴别培养基被广泛应用。
本文将介绍鉴别培养基的概念、种类、制备方法以及应用场景。
一、鉴别培养基的概念鉴别培养基是一种含有特定成分的培养基，可以促进不同种类的微生物在培养基中生长，并且能够通过不同的生理、生化特性来区分不同种类的微生物。
鉴别培养基可以通过改变培养基的pH值、营养成分、抗生素、染色剂等来实现对微生物的区分。
二、鉴别培养基的种类1.差异培养基差异培养基是一种通过改变培养基的营养成分和添加特定染色剂来区分不同种类的微生物的培养基。
常见的差异培养基有MacConkey培养基、Eosin Methylene Blue(EMB)培养基、XLD培养基等。
2.选择性培养基选择性培养基是一种通过添加特定抗生素或化学物质来选择性地促进某些微生物的生长，而抑制其他微生物的生长的培养基。
常见的选择性培养基有Sabouraud培养基、Mannitol Salt Agar(MSA)培养基、Thayer-Martin培养基等。
3.鉴别性培养基鉴别性培养基是一种通过添加某些化学物质或染色剂来区分不同种类的微生物的培养基。
常见的鉴别性培养基有Triple Sugar Iron(TSI)培养基、Urea培养基、Nitrate培养基等。
三、鉴别培养基的制备方法制备鉴别培养基需要根据不同的培养基种类选择不同的制备方法。
通常的制备方法包括以下几个步骤：1.准备培养基的基础成分，包括碳源、氮源、矿物质等。
2.根据不同的培养基种类，添加特定的化学物质或染色剂。
3.将基础成分和化学物质或染色剂混合，加入适量的蒸馏水，制备成液体培养基或固体培养基。
4.将制备好的培养基进行滤器灭菌或高温高压灭菌，以保证培养基的无菌性。
四、鉴别培养基的应用场景鉴别培养基被广泛应用于医学、食品工业、环境监测等领域。
在医学领域中，鉴别培养基可以用于诊断病原微生物，如肠道致病菌、泌尿道感染菌等。
纤维素刚果红培养基鉴别纤维素原理
纤维素刚果红培养基鉴别纤维素原理
纤维素刚果红培养基是一种常用的微生物鉴别培养基，其主要原理是
利用纤维素酶和刚果红染色剂的作用，对微生物进行鉴别。
纤维素是一种多糖类物质，存在于植物细胞壁中，是一种难以被微生
物降解的物质。
纤维素酶是一种能够分解纤维素的酶，只有一些微生
物具有这种酶的产生能力。
因此，纤维素刚果红培养基可以通过检测
微生物是否能够分解纤维素来鉴别微生物的种类。
刚果红是一种染色剂，可以与纤维素酶反应生成红色的沉淀物。
在纤
维素刚果红培养基中，如果微生物具有纤维素酶的产生能力，它们就
能够分解培养基中的纤维素，产生红色的沉淀物。
如果微生物没有纤
维素酶的产生能力，则无法分解纤维素，培养基中不会产生红色的沉
淀物。
通过观察培养基上的红色沉淀物的形态和分布情况，可以进一步鉴别
微生物的种类。
例如，如果红色沉淀物分布均匀，且呈现出网状结构，则说明微生物可能是纤维素分解菌。
如果红色沉淀物呈现出点状或线
状分布，则说明微生物可能是非纤维素分解菌。
总之，纤维素刚果红培养基是一种简单易用的微生物鉴别培养基，通
过检测微生物是否具有纤维素酶的产生能力，可以鉴别微生物的种类。
在实际应用中，需要结合其他鉴别方法，如形态学观察、生理生化特
性检测等，才能准确鉴别微生物的种类。
实验八肠道杆菌
五糖：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、 蔗糖
现象：大肠杆菌各管均呈黄色，有气泡
伤寒杆菌的2、5管不变色
可用于致病与非致病菌的鉴别
二、吲哚试验(靛基质试验)
原理：有些细菌能分解培养基中的色氨酸 生成吲哚(无色)，向其中参加吲哚指示剂 (对二甲基氨基苯甲醛)，可与吲哚结合生成 玫瑰吲哚而呈红色，为吲哚试验阳性。
蛋白胨水培养基：蛋白胨、蒸馏水、氯化 钠，调PH值7.2即可。
大肠杆菌的吲哚试验阳性。
三、五糖发酵管试验
成分：蛋白胨、水、氯化钠、酚红指示剂 和各种糖类
是否能够分解乳糖是鉴别肠道致病菌和非 致病菌的重要依据之一。通常非致病菌能 分解乳糖产酸产气，而致病菌那么不能分 解乳糖。
观察大肠杆菌和伤寒杆菌在SS琼脂培养基 上的生长现象：
大肠杆菌分解乳糖产酸产气，使指示剂变 红，故菌落为粉红色。
伤寒杆菌不分解乳糖，那么不变色，为橙 黄色菌落。
2、EMB(伊红-美蓝)琼脂平板培养基：
实验八 肠道杆菌
实验目的：
观察大肠杆菌，伤寒杆菌在SS琼脂平板和 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱEMB琼脂平板生长状态。
观察大肠杆菌，伤寒杆菌在双糖含铁斜面 的菌落特点。
五糖发酵试验。
吲哚试验。
一、肠道鉴别培养基
1、SS琼脂培养基：
这种培养基除含有根本的营养物质外，
还含有乳糖和中性红指示剂(遇酸变红，遇 碱变黄)。
下层为半固体培养基，含葡萄糖和酚红指 示剂。
分别接种大肠和伤寒杆菌在双糖含铁培养 基上，观察现象：
大肠杆菌：试管由红变黄，有气泡，有动 力。
伤寒杆菌：上层仍为红色，下层由红变黄， 有黑色沉淀，有动力。
硫化氢试验：
有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸(胱 氨酸、半胱氨酸等)，产生硫化氢气体，可 与培养基中的硫酸亚铁生成黑色沉淀，为 硫化氢试验阳性。
培养基的分类
培养基种类繁多，根据其成分、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。
(1) 按成分不同划分1)天然培养基(complex mediurn)这类培养基含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物，也称非化学限定培养基(chemically undefined mediunl)。
牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。
基因克隆技术中常用的LB(Luria—Bertani)培养基也是一种天然培养基，其组成见表4—10。
常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表4—11)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡萝卜汁、椰子汁等，嗜粪微生物(coprophilous microorganisms)可以利用粪水作为营养物质。
天然培养基成本较低，除在实验室经常使用外，也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。
表4—11 牛肉浸膏、蛋白胨及酵母浸膏的来源及主要成分营养物质来源主要成分牛肉浸膏蛋白胨酵母浸膏瘦牛肉组织浸出汁浓缩而成的膏状物质将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的粉末状物质酵母细胞的水溶性提取物浓缩而成的膏状物质富含水溶性糖类、有机氮化合物、维生素、盐等富含有机氮化合物、也含有一些维生素和糖类富含B类维生素，也含有有机氮化合物和糖类2)合成培养基(syntheticmedium)合成培养基是由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemically defined mediurn)，高氏I号培养基和查氏培养基就属于此种类型。
配制合成培养基时重复性强：，但与天然培养基相比其成本较高，微生物在其中生长速度较慢，一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。
(2) 根据物理状态划分根据培养基中凝固剂的有无及含量的多少，可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。
常用细菌培养基配方
常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
鉴别培养基名词解释
鉴别培养基名词解释鉴别培养基，又称选择性培养基，是一种在微生物学实验中使用的含有特定成分和添加剂的培养基。
其主要作用是通过改变培养基的成分和条件，使特定种类的微生物能够生长并形成菌落，从而便于对微生物进行鉴别和分离。
鉴别培养基的基本成分和特点:1. 碳源：鉴别培养基通常含有特定的碳源，可以是单糖、双糖或多糖，如葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
不同的微生物对碳源的利用有差异，利用不同的碳源可以促进特定微生物的生长。
2. 氮源：鉴别培养基的氮源也是关键成分之一，常用的氮源包括氨基酸、蛋白质、氨和硝酸盐等。
不同的微生物对氮源的利用也有差异，利用不同的氮源可以选择性地促进或抑制特定微生物的生长。
3. 选择性剂：鉴别培养基中通常含有选择性剂，其主要作用是抑制或限制某些微生物的生长，从而促进目标微生物的生长。
选择性剂可以是抗生素、染料、酸、碱等物质，根据目标微生物的特性选择合适的选择性剂。
4. 指示剂：鉴别培养基中还常含有指示剂，用来显示目标微生物的生长情况。
指示剂可以是染料、底物或其他物质，当目标微生物生长时，会产生特定的反应，使培养基产生某种颜色的变化，从而更方便地鉴别目标微生物。
5. pH值：鉴别培养基的pH值也是需要注意的因素之一。
不同的微生物在适宜的pH条件下生长能力有差异，通过调整培养基的pH值，可以选择性地促进或抑制特定微生物的生长。
鉴别培养基的应用:鉴别培养基在微生物学实验中具有广泛的应用，主要用于鉴定和分离特定微生物。
其应用领域包括医学、食品、环境等。
1. 医学应用: 鉴别培养基可以用于检测和鉴别致病菌，如大肠杆菌、沙门氏菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等。
通过在培养基中添加选择性剂和指示剂，可以选择性地促进目标菌种的生长，并使其形成特定的菌落特征，从而进行鉴别和分离。
2. 食品领域: 鉴别培养基可以用于食品卫生检测，检测并区分食品中的致病菌和食品腐败微生物。
通过在培养基中添加适当的选择性剂和指示剂，可以促进目标菌种的生长，并使其形成特定的菌落特征，从而进行鉴别和分离。
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麦康凯琼脂
麦康凯可能是世界上常用的一种鉴别培养基，它主要通过乳糖发酵鉴别肠道致病菌，还能抑制革兰氏阳性菌生长，发酵乳糖的细菌能使培养基变红，这是因为细菌发酵乳糖产酸而使培养基的PH值变成酸性的。
不发酵乳糖的细菌没有颜色的变化。
麦康凯抑制阳性菌的生长，是因为其中加了结晶紫。
MACCONKEY AGAR
MacConkey agar is probably the most popular solid differential medium in the world. It is mainly used in identification of lactose fermenting, Gram-negative enteric pathogens and for inhibiting growth of Gram-positive organisms. Bacterial colonies that can ferment lactose turn the medium red. This red color is due to the pH indicators response to the acidic environment created by fermenting lactose. Organisms that do not ferment lactose do not cause a color change.
配方g/l
蛋白胨 20.0 乳糖 10.0 胆盐 5.0 氯化钠 5.0 中性红 0.075 琼脂 12.0 pH 7.4±0.
配制
取52克CM7，加1升蒸馏水，加热至溶解完全，121℃灭菌15分钟。
待琼脂表面变干方可接种。
特点
CM7符合世界卫生组织（WHO）推荐的培养基。
工业用于检测水、乳制品和生物标本的大肠菌群和肠道致病菌，临床用于分离肠细菌。
此培养基可抑制革兰氏阳性菌，可区分乳糖发酵性和非发酵性菌。
还可以区分耶尔森菌和巴斯德氏菌，巴斯德氏菌不能生长。
以下是各菌种在麦康凯琼脂经35℃培养24小时后的菌落外观：
菌种形态菌落颜色、
大肠杆菌红色、非黏液样有胆盐沉淀环
产气杆菌粉红色、黏液样
肠球菌红色、微小、圆形
链球菌苍白粉红色、不透明
绿脓杆菌棕绿色、荧光绿
乳糖发酵性菌红色
乳糖非发酵性菌无色
沙门氏菌无色大菌落
使用
按常规操作，将尿液、粪便、污水等标本接种至麦康凯琼脂，分离单菌落，35℃培养18-24小时。
其实该菌最重要的用途还不只是在肠道细菌的鉴别上，对于非发酵菌的鉴定中就有一项是麦康凯生长，主要是观察细菌对胆盐的耐受性的，在这里是作为一项生化反应试验而应用的。
另外，在实际工作中巧妙的利用不同细菌在各种不同的培养基上的生长特性就可以快速的对细菌进行初步分群和鉴定：
例如：痰标本，直接接种标本后的第二天，如果在血琼脂上形成针尖状透明小菌落，在巧克力培养基上形成无色到灰色半透明，光滑闪光菌落，在麦康凯上不生长，直接涂片均为G-细小杆菌，或者细丝状杆菌的就多半是嗜血杆菌；
而如果在CSF标本，血琼脂上生长良好，含万古霉素巧克力不生长，麦康凯上不生长，直接涂片是杆菌，氧化酶阴性，触酶阳性，动力阳性，哪怕染出来看起来是“G-杆菌”，我也不会考虑G-，而会毫不犹豫的判断为G+杆菌，李斯特菌！
中国蓝平板
中国蓝平板中含有中国蓝和玫瑰红酸。
中国蓝在酸性溶液中呈蓝色，在碱性溶液中呈微蓝至无色。
玫瑰红酸在酸性溶液中呈黄色，在碱性溶液中呈红色。
此培养基pH7.4，制好后应呈淡紫色。
过碱呈鲜红色，过酸呈蓝色，均不适用。
玫瑰红酸能抑制革兰阳性细菌生长，但对大肠埃希菌没有抑制作用，故粪便标本接种量不宜过多。
多数肠道致病菌不分解乳糖，其菌落为透明或半透明淡红色；大肠埃希菌分解乳糖产酸，形成大而浑浊的蓝色菌落。
中国篮平板正常颜色是蓝色,不是红色,这一点要注意.
该平板的指示剂就是中国篮，时何种成分有待查找。
35度18小时培养后细菌颜色如下：
中国蓝平板中的生长现象：
显蓝色大肠埃希氏菌菌落大小 3－4mm
葡萄球菌属菌落大小 1mm
链球菌菌落大小 0.5mm
不显色沙门氏菌，沙雷氏菌属等
中国蓝平板指示剂是用的10g/L中国蓝的水溶液，其水溶液应隔水煮沸灭菌使用，不发酵乳糖细菌的菌落是半透明，淡紫红色，分解乳糖的细菌是大而浑浊的蓝色菌落
大肠杆菌菌落蓝色，克雷伯兰粉色大而粘稠，不动杆菌粉色，沙门氏菌和痢疾杆菌为透明，嗜麦芽窄食单孢菌为黄粉色特别典型，霉菌、酵母杨真菌也都可生长，易于鉴别，建议你试一试。
记录部分
科玛嘉念珠菌显色培养基（大多数典型菌落形态）
白色念珠菌草绿色翠绿色
热带念珠菌蓝绿色铁蓝色
光滑念珠菌紫色光滑型
克柔念珠菌粉红色粗糙型、菌落大
中国蓝平板细菌生长现象：
显蓝色大肠埃希氏菌菌落大小 3－4mm
葡萄球菌属菌落大小 1mm
链球菌菌落大小 0.5mm
不显色沙门氏菌，沙雷氏菌属等
不发酵乳糖细菌的菌落半透明，淡紫红色，
分解乳糖的细菌大而浑浊的蓝色菌落
大肠杆菌菌落蓝色，
克雷伯兰粉色大而粘稠，
不动杆菌粉色
沙门氏菌和痢疾杆菌透明
嗜麦芽窄食单孢菌黄粉色
SS琼脂平板
使用方法：
1、原理：
胨、牛肉膏粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质；乳糖、葡萄糖为可发酵的糖类；三号胆盐、柠檬酸钠和煌绿抑制革兰氏阳性菌及大多数的大肠菌群和变形杆菌，但不影响沙门氏菌的生长；硫代硫酸钠和柠檬酸铁用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；中性红为pH指示剂，发酵糖产酸的菌落呈红色，不发酵糖的菌落为无色；琼脂是培养基的凝固剂。
称取本品56.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，待冷至50℃左右，在无菌环境中，倾注灭菌平皿，待凝固后，备用。
2、分离：用接种环取增菌液一环，划线接种于平板上。
3、培养：将平板放入恒温培养箱中，36±1℃培养18—24h。
4、观察结果。
本培养基倾注平皿，待冷却后呈暗红色，质控菌株接种后。
36±1℃培养18—24h，观察结果如下表：
用途：用于沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养。
主要有ss平板，EMB:伊红美兰培养基和双糖铁培养基，
肠道致病菌不分解乳糖，所以在SS平板上生长的菌落为无色透明的小菌落。
如能产生H2S，则菌落中心呈黑色。
大肠杆菌在SS平板上一般不生长，但如粪便标本接种得多，大肠杆菌量多所以仍有少数生长。
大肠杆菌能发酵乳糖产酸，菌落呈红色，或菌落中心显红色，很容易和致病菌区分。
观察半固体-双糖铁培养基结果。
如果双糖铁培养基中乳糖不发酵，可能为肠道致病菌。
根据葡萄糖发酵结果、运动力的有无等可初步判定为哪一类细菌。
伊红美兰培养基上大肠埃希菌(非致病菌)发酵乳糖产酸，结合伊红美兰形成紫黑色金属光泽有色的菌落，伤寒沙门菌等(致病菌)不发酵，不能结合乳糖伊红美兰，形成无色的菌落
SS为强选择性培养基.其成分除了有必要的胨、牛肉膏等氮、碳源外，其他则为选择性抑制剂和缓冲剂。
如柠檬酸钠、胆盐、硫代硫酸钠的协同作用及煌绿共同来抑制肠道非病原性细菌及部分大肠杆菌的生长。
对志贺菌属及沙门菌属相对抑制性较弱。
硫代硫酸钠有助于大肠菌的着色，柠檬酸铁能缓解某些药物对病原菌的毒副作用，同时与细菌产物起反应呈黑色菌落。
中性红指示剂可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌鉴别开，前者为红色菌落，后者为无色菌落。
表10-1 大肠杆菌在普通琼脂平板及选择鉴别培养基上的菌落特征
培养基菌落特征
普通琼脂平板圆形，中等大小，灰白，整齐，光滑菌落
SS平板呈红色
中国蓝平板呈蓝色
伊红美蓝平板呈紫黑色，有金属光泽
*Salmonella -Shigella medium ss是沙门氏菌贺志氏菌的意思
请问霍乱弧菌进行分离培养时常用的选择培养基TCBS是那些成分组成?
其他细菌在碱性pH平板上不易生长,故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基; 在碱性平板上菌落直径为2mm,圆形,光滑,透明. 常用的选择培养基为：硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS),霍乱弧菌在其中可形成较大的菌落。