醋酸纤维素薄膜电泳
醋酸纤维素薄膜电泳
实验步骤
注意事项
1. 点样面为不光滑面，勿用手触摸； 2. 点样量适中，垂直居中点样； 3. 点样端靠近电泳仪负极； 4. 膜条背面朝上放置，需与滤纸贴紧，拉直。
思考题
• 分析影响电泳的各个因素。
• 分析自己的实验结果，针对本实验的各项操作提出改进意见。
阻力: F’ = 6πrηυ QE = 6πrην
当电泳达到平衡时，带电颗粒匀速运动: F = F’
ν Q = E 6πrη
• 迁移率: 即ν/E，表示单位电场强度时粒子运动的速度。 该值在
一定条件下决定于粒子本身的性质，即其所带电荷、大小和形状.
影响电泳速度的因素
• 样品本身：带电量、分子大小、形状
• 电场强度：电压
• 缓冲液：成分、pH、离子强度(0.02-0.2 M) • 支持介质：电渗作用、吸附作用 • 温度
正极
－ － － － － － － －－ － － － － － － － ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
负极
表面带负电荷 带正电荷的水层携带粒子向负极移动
如果样品应移向负极，则泳动速度加快； 如果样品应移向正极，则泳动速度减慢。
分类
电泳
显微电泳 自由电泳 等电聚焦电泳 (无支持体) 等速电泳 密度梯度电泳 滤纸电泳(常压及高压) 区带电泳 薄层电泳(薄膜及薄板) (有支持体) 凝胶电泳(琼脂、琼脂糖、淀粉胶、聚丙烯酰胺)
垂直板电泳槽
圆盘电泳槽
水平电泳槽
双向电泳
醋酸纤维薄膜电泳
• 醋酸纤维素薄膜电泳以醋酸纤维素薄膜为支持物。 • 醋酸纤维素是纤维素的醋酸酯，将其溶于丙酮等有机
血清蛋白质的醋酸纤维素薄
膜电泳
醋酸纤维素薄膜电泳原理
醋酸纤维素薄膜电泳原理醋酸纤维素薄膜电泳是一种常见的电泳技术，它利用醋酸纤维素薄膜作为分离介质，将带电粒子在电场作用下进行分离。
其原理如下：1. 醋酸纤维素薄膜制备首先需要制备醋酸纤维素薄膜。
通常采用将醋酸纤维素溶解于有机溶剂中，然后涂布在玻璃板或硅片上，通过挥发有机溶剂使得溶液中的醋酸纤维素形成均匀的薄膜。
2. 薄膜上形成静电场接着，在制备好的醋酸纤维素薄膜上形成一个静电场。
通常使用高压直流电源将两个金属极板连接到两端，然后将极板放置在离玻璃板或硅片一定距离的位置上。
这样就可以在玻璃板或硅片表面形成一个强大的静电场。
3. 样品准备样品需要经过处理才能进行分离。
通常需要将样品溶解在缓冲液中，并加入适量的表面活性剂以保持样品的稳定性。
此外，还需要将样品进行染色以便于观察。
4. 样品注入将处理好的样品注入到醋酸纤维素薄膜上，让其在静电场作用下进行分离。
通常使用注射器或微量泵进行样品注入。
5. 分离过程在静电场作用下，带电粒子会受到电场力的作用，向着极板移动。
不同大小、不同电荷的粒子会受到不同的力，从而发生分离。
这个过程需要一定时间，通常需要几十分钟到几小时才能完成。
6. 结果分析通过观察醋酸纤维素薄膜上的色带可以得到分离结果。
不同大小、不同电荷的粒子会形成不同位置和形状的色带。
通过比对标准样品可以确定待测物质的种类和浓度。
总之，醋酸纤维素薄膜电泳是一种基于静电场作用下带电粒子分离原理的技术。
它具有高效、高灵敏度、高分辨率等优点，被广泛应用于生物学、化学、环境科学等领域。
醋酸纤维素薄膜电泳
各种蛋白质由于氨基酸组成、分子量、等电点 及形状不同，在电场中的迁移速度不同。 以醋酸纤维素薄膜为支持物，正常人血清在 pH8.6的缓冲体系中电泳，染色后可显示5条主 要区带。其中清蛋白的泳动速度最快，其余依 次为α1-、α2-、β-及γ-球蛋白。
三、实验材料
醋酸纤维薄膜（2×8 cm） 镊子
5. 放薄膜的时候毛面朝下，要注意放平，与 滤网充分接触，但不要接触点样端。 6. 电泳时应选择合适的电流强度，一般电流 强度为0.4～0.6mA/cm膜宽度。电流强度高， 则热效应高；电流过低，则样品泳动速度慢 且易扩散。
7. 操作过程为防止指纹污染，应戴手套。
采用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法称为 醋酸纤维素薄膜电泳。
醋酸纤维素薄膜具有均一的泡沫状的结构，厚 度约为120 μm，有很强的通透性，对分子移动 阻力很小，该法具有微量、快速、简便、分辨 力高，对样品无拖尾和吸附现象等优点。
本实验以醋酸纤维素为电泳支持物，分离各种 血清蛋白。
血清中各主要蛋白质的等电点均低于pH8.6， 在该缓冲液中均带负电荷，在电场中向正极移 动。血清中含有清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、 γ-球蛋白和各种脂蛋白等。
2. 点样时，应将薄膜表面多余的缓冲液用滤纸 吸去，以免引起样品扩散。但不宜太干，否则 样品不易进入膜内，造成点样起始点参差不起， 影响分离效果。
3. 点样时，点样不要过多，恰到好处，动作 要轻、稳，用力不能太大，以免损坏膜片或 印出凹陷影响电泳区带分离效果。 4. 醋酸纤维素薄膜电泳常选用pH8.6巴比妥－ 巴比妥钠缓冲液,其浓度为0.05～0.09 mol/L。 (选择何种浓度与样品和薄膜的厚薄有关。缓 冲液浓度过低，则区带泳动速度快区带扩散 变宽；缓冲液浓度过高，则区带泳动速度慢， 区带分布过于集中，不易分辨。)
血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳
血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳一、实验目的1. 掌握醋酸薄膜电泳的原理及操作。
2. 定量测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。
二、原理采用醋酸纤维薄膜为支持物的电泳方法, 叫做醋酸纤维素薄膜电泳。
醋酸纤维素, 是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯。
将它溶于有机溶剂（如: 丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等）后, 涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。
该膜具有均一的泡沫状的结构, 有强渗透性, 厚度约为120μm。
醋酸纤维素薄膜电泳是近年来推广的一种新技术。
它具有微量、快速、简便、分辨力高、对样品无拖尾和吸附现象等优点。
该技术已广泛应用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、结合球蛋白、同功酶的分离和测定等方面。
目前, 醋酸纤维薄膜电泳趋向于代替纸电泳。
三、操作方法一、仪器和薄膜的准备1. 醋酸纤维素薄膜的润湿的选择: 将薄膜小心地放入盛有缓冲液的培养皿内, 使它漂浮在液面。
若迅速润湿, 整条薄膜色泽深浅一致, 则表明薄膜质地均匀；若润湿时, 薄膜上出现深浅不一的条纹或斑点等, 则为薄厚不匀的薄膜。
实验中应选用质地均匀的薄膜。
因为, 纤维素薄膜的质量对电泳的结果影响很大。
例如, 膜厚薄不均可以造成区带歪扭不齐、各区带界限不情、背景脱色困难、实验结果难于重复等现象。
将选用的薄膜用镊子轻压, 使它全部浸入缓冲液内, 待膜完全浸透（约半小时）后取出, 夹在清洁的滤纸中间, 轻轻吸去多余的缓冲液, 同时分辨出光泽面和无光泽面。
2．制作“滤纸桥”：剪裁尽寸合适的滤纸条。
取双层附着在电泳槽的支架上, 使它的一端与支架的前沿对齐, 而另一端浸入电泳槽的缓冲液内。
然后, 用缓冲液将滤纸全部润湿并驱除气泡, 使滤纸紧贴在支架上, 即为“滤纸桥”。
按照同样的方法, 在另一个电泳槽的支架上制作相同的“滤纸桥”。
二、点样在薄膜无光泽的一面点样。
点样区距负极端1.5㎝处。
点样时, 先用血色素吸管将2～3微升的血清均匀地涂在点样器表面, 再用点样器“印”在薄膜的点样区内（见图4－1）。
醋酸纤维素薄膜电泳
醋酸纤维素薄膜电泳
醋酸纤维素薄膜电泳是一种高效、快速和准确的分离和鉴定分子的技术。
这种技术被广泛应用于生物化学、医学、环境科学等领域。
醋酸纤维素薄膜电泳是一种基于毛细管电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离技术。
该技术将醋酸纤维素质地的薄膜作为分离介质，样品通过电泳移动分离在薄膜的表面。
这种技术具有高分辨率、高灵敏度、高通量和半制备规模的优点。
醋酸纤维素薄膜电泳技术的应用范围广泛，包括但不限于以下方面：
1、蛋白质分离和鉴定。
醋酸纤维素薄膜电泳技术可以对蛋白质进行高分辨率的分离和鉴定，对于寻找新的蛋白质、筛选生物标志物和新药物的作用非常重要。
2、核酸分离和鉴定。
醋酸纤维素薄膜电泳技术还可以高效地分离和纯化核酸，对于对基因筛选和遗传学研究非常重要。
3、药物分析和质量控制。
对于药物制剂的分析和质量控制，醋酸纤维素薄膜电泳技术可以快速准确地检测出药物中的有效成分和有害成分。
4、环境分析。
醋酸纤维素薄膜电泳技术也可以用于环境分析，例如分析水体中的有机物和无机物质。
在应用这种技术时，需要注意以下几点：
1、选择合适的样品前处理方法，以保证样品的纯度和完整性。
2、选择合适的运行条件，如电场强度、分离介质pH值、电泳时间等，以获得最佳的分离效果。
3、选择合适的检测方法，如荧光检测、吸收光谱检测等，以达到最优的检测灵敏度和选择性。
总之，醋酸纤维素薄膜电泳技术在生物化学、医学、环境科学等领域中具有广泛的应用前景。
我们需要不断地探索和创新，以推动这种技术的发展和应用。
醋酸纤维素薄膜电泳
清蛋白 前清蛋白
制备。
临床意义：
白蛋白：主要在肝脏合成，所以与肝脏疾患密切相关。
α球蛋白的增加与发热有关，与炎症有关。 β球蛋白增加常伴随血中脂质的增加。
γ球蛋白含有抗体成分，在许多慢性感染、免疫性疾病中有异常。
例如：多发性骨髓瘤病人在β球蛋白与γ球蛋白之间出现一个尖峰：M蛋白
肝硬化病人γ球蛋白增加，白蛋白降低。
红蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎 蛋白、类固醇及同工酶等。它具有简单快
-球蛋白
-球蛋白
速、对蛋白质样品吸附极少，无“拖尾”
现象，染色后蛋白质区带更清晰等优点， 电渗作用虽然较高但很均一 ，不影响样
品的分离效果。不足之处是分辨率比聚丙
烯酰胺凝胶电泳低，由于薄膜厚度小（约 10～100μm），样品用量很少，不适于
思考题
P2：1、2、3
预习：实验五、六
• 凝胶层析分离蛋白质混合物的原理？何谓分子筛
效应？ DNS—氨基酸的双向聚酰胺薄膜层析中，各种氨 基酸是怎样得到分离？
•
血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳
——根据迁移率分离
操作步骤
标记 用铅笔在薄膜无光泽面(毛面)一端2cm处
轻画一细线 ，并在右上角做好标记。
浸泡 将醋酸纤维素薄膜毛面向下，在缓冲溶液中浸泡，使其充分浸透。 点样
用镊子将薄膜置于滤纸上，吸收多余的液体(不要太干），利用载玻片 一侧蘸取样品，45度角于毛面细线处点样。
(有效长度)
设：混合物中有A、B两物质：
• 物质A在电场中移动的距离为: dA= AVt/l
物质B的移动距离为：dB= BVt/l 则两物质移动距离之差为： Δd=(dA-dB)=(A-B)Vt/l 即：物质A、B能否分离取决于两者的迁移率
醋酸纤维素薄膜电泳实验讨论
醋酸纤维素薄膜电泳实验讨论醋酸纤维素薄膜电泳实验讨论引言：醋酸纤维素薄膜电泳是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于生物医学、环境监测和食品安全等领域。
本实验旨在探究醋酸纤维素薄膜电泳在分离和分析中的应用，并进一步研究其影响因素以及优化条件。
实验方法：1. 准备醋酸纤维素薄膜：将质量浓度为4%的醋酸纤维素溶液在玻璃片上匀开，然后在60℃恒温槽中干燥30分钟；2. 准备电泳缓冲液：将100mM的特定缓冲液配制好，保持pH稳定；3. 准备样品：将待测样品进行处理，如酶解、过滤等；4. 实施电泳实验：将醋酸纤维素薄膜与玻璃片固定在电泳板上，注入电泳缓冲液至电极孔上方，然后将样品涂抹在薄膜上，按照特定电压和时间进行电泳。
实验结果：经过实验，我们发现醋酸纤维素薄膜电泳可以有效地分离待测样品中的目标成分。
通过调节电压和时间，我们发现改变这两个参数可以影响分离效果。
在本实验中，我们进行了一系列实验，对不同电压和时间条件下的分离效果进行了分析。
首先，当电压在80V~120V范围内逐渐增加时，电泳分离的效果呈现出明显的改善。
这是因为较高的电压可以提高电泳速度，使目标成分在薄膜上移动的距离更短，从而加快分离过程。
然而，当电压过高时，可能会发生样品电泳坍塌和电解液温升，导致分离效果下降。
其次，我们发现时间对分离效果的影响也很明显。
在时间较短的情况下，目标成分无法完全分离，而在时间较长的情况下，目标成分已经移出薄膜，导致无法检测到。
因此，我们需要根据待测样品的特点和所需分离程度来选择合适的时间。
讨论：本实验结果表明醋酸纤维素薄膜电泳可以作为一种有效的分离和分析技术，同时也揭示了影响分离效果的关键因素。
在进行实际应用时，我们需要根据待测样品的特点和所需分离程度来选择合适的电压和时间条件。
此外，在实验过程中应注意控制电解液的pH值和温度，以保证实验结果的准确性和重复性。
总结：醋酸纤维素薄膜电泳是一种有效的分离和分析技术，可以应用于生物医学、环境监测和食品安全等领域。
醋酸纤维素薄膜电泳的注意事项
醋酸纤维素薄膜电泳的注意事项引言醋酸纤维素薄膜电泳是一种常用的电泳技术，广泛应用于生物、化学等领域。
在进行醋酸纤维素薄膜电泳实验时，需要注意一些关键事项，以确保实验的准确性和可靠性。
本文将详细介绍醋酸纤维素薄膜电泳的注意事项，并提供相关建议和技巧。
实验前的准备工作1.实验装置的准备：在开始实验之前，需要准备好醋酸纤维素薄膜电泳所需的实验装置，包括电泳槽、电源、电极等设备。
检查设备是否正常工作，并进行必要的清洁和消毒。
2.试剂的准备：准备好所需的试剂和缓冲液。
确保试剂的质量和纯度，并按照实验操作要求进行稀释和配置。
3.样品的准备：根据实验的目的和要求，选择合适的样品进行电泳实验。
对于复杂的样品，需要提前进行处理和分离。
实验操作注意事项1.醋酸纤维素薄膜的制备：制备醋酸纤维素薄膜需要一定的技巧和经验。
注意操作过程中的温度、湿度等因素，以确保薄膜的质量和均匀性。
2.样品的加载和处理：在进行电泳前，需要将样品加载到醋酸纤维素薄膜上。
注意样品的加载量和位置，避免过载和重叠导致电泳效果不佳。
对于含有高浓度蛋白质的样品，可以进行预处理，如蛋白质的去盐和去气泡处理。
3.电泳条件的设定：根据实验目的和样品的特性，选择合适的电泳条件。
包括电压、电流、电泳时间等参数的设定。
注意避免过高的电场强度和过长的电泳时间，以防止样品的损失和变性。
4.温度和pH值的控制：醋酸纤维素薄膜电泳对温度和pH值的要求较为严格。
应根据实验要求控制好电泳槽内的温度和pH值，以提高电泳的稳定性和分辨率。
5.实验操作的规范性：操作过程中应严格遵守实验室的操作规程和实验安全要求。
注意个人防护，如戴手套、护目镜等，并避免操作时发生意外事故。
6.数据的记录和分析：进行电泳实验时，需要准确记录实验条件和结果。
注意实验数据的整理和分析，以获得可靠的实验结果和科学结论。
问题和解决方法在进行醋酸纤维素薄膜电泳实验过程中，可能会遇到一些问题，如电泳速度慢、样品分离不清晰等。
醋酸纤维薄膜电泳 原理 步骤 详细
蛋白组分 Alb 1 2
g/L 35～52 1.0～4.0 4.0～8.0 5.0～10.0 6.0～13.0
占蛋白百分数 （%） 57～68
1.0～5.7
4.9～11.2
7.0～13
9.8～18.2
Schematic representation of a protein electrophoresis
电泳40~~4cm时即可断电 （1）加样后，将薄膜条架于支架两端，无光泽面朝下（点样面），点样侧置于阴极端，膜两侧分别塔上纱布，纱布一端垂入缓冲液中。
Schematic representation of a protein electrophoresis
6r
3 影响电泳结果的因素 6 r
是纤维素醋酸酯(acetate ester of cellulose )，由纤维素的羟基进行乙酰化后制得，将它溶于有机溶剂涂抹成均匀的薄膜，待有机溶剂 挥发后，即为白色不透明的醋酸纤维薄膜
2. 电泳图谱分离不清
①标本加量过多 ②电流过低 ③薄膜结构过分致密，透水性差 ④薄膜表面干燥
3. 电泳速度慢
血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 由于血清中各蛋白组分等电点不同而致表面净电荷量不等，加之分子大小和形状各异，因而电泳迁移率不同，彼此得以分离。 由于血清中各蛋白组分等电点不同而致表面净电荷量不等，加之分子大小和形状各异，因而电泳迁移率不同，彼此得以分离。
6r ①点样时血清点加不均匀 丽春红S染色扫描法结果 （1）加样后，将薄膜条架于支架两端，无光泽面朝下（点样面），点样侧置于阴极端，膜两侧分别塔上纱布，纱布一端垂入缓冲液中。 Amido black 10B
4. 白蛋白（Albumin)区带中间部分不着色，染色不足
醋酸纤维素薄膜电泳法
醋酸纤维素薄膜电泳法
试剂（1)巴比妥缓冲液(pH8.6) 称取巴比妥2.76g、巴比妥钠15.45g，加水溶解使成1000ml。
（2)氨基黑染色液称取氨基黑10B 0.5g，溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。
（3)漂洗液量取乙醇45ml、冰醋酸5ml及水50ml，混匀。
（4)透明液量取冰醋酸25ml、无水乙醇75ml，混匀。
测定法取醋酸纤维素薄膜，裁成2cm×8cm膜条，将无光泽面向下，浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中,待完全浸透，取出夹于滤纸中，轻轻吸去多余的缓冲液后，将膜条无光泽面向上，置含巴比妥缓冲液(pH8.6)的电泳槽架上，通过滤纸桥浸入巴比妥缓冲液(pH8.6)中。
于膜条上距负极端2cm处，条状滴加蛋白含量约5％的供试品溶液2～3μl,在0.4～0.6mA/cm［总电流量=电流量(mA/cm)×每条膜的宽度（cm）×膜条数］电流条件下电泳；同时取新鲜人血清作对照，电泳时间以白蛋白与丙种球蛋白之间的电泳展开距离约2cm为宜。
电泳完毕，将膜条取下浸于氨基黑或丽春红染色液中，2～3分钟后，用漂洗液浸洗数次，直至脱去底色为止。
将洗净并完全干燥的膜条浸于透明液中，待全部浸透后，取出平铺于洁净的玻板上，干燥后即成透明薄膜，可供测定纯度和作标本长期保存。
将干燥的醋酸纤维素薄膜用色谱扫描仪采用反射（未透明薄膜）或透射（已透明薄膜）方式在记录器上自动绘出各蛋白组分曲线图，以人血清作对照，按峰面积计算各蛋白组分的含量(%)。
附注：采用全自动电泳仪操作时，参考仪器使用说明书进行。
醋酸纤维薄膜电泳原理
醋酸纤维薄膜电泳原理醋酸纤维薄膜电泳是一种高效、快速、分离效果好的电泳技术，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
本文将对醋酸纤维薄膜电泳的原理进行详细介绍，希望能够对相关领域的研究者和从业人员有所帮助。
1. 原理概述。
醋酸纤维薄膜电泳是基于电泳技术的一种分离方法，其原理是利用电场对样品中的带电粒子进行迁移，从而实现对混合物的分离。
醋酸纤维薄膜电泳利用纤维薄膜作为电泳介质，通过纤维薄膜的微孔结构和表面电荷特性，实现对样品分子的选择性分离。
2. 纤维薄膜特性。
醋酸纤维薄膜电泳所使用的纤维薄膜具有一定的孔径和表面电荷特性，这些特性对样品的分离起到关键作用。
纤维薄膜的孔径大小决定了样品分子的迁移速率，而表面电荷特性则影响了样品分子与纤维薄膜之间的相互作用，从而影响了分离效果。
3. 电泳过程。
在醋酸纤维薄膜电泳过程中，首先需要将样品加载到纤维薄膜上，然后施加电场，利用电场力驱动样品分子在纤维薄膜上迁移。
在迁移过程中，不同样品分子受到纤维薄膜孔径和表面电荷的影响，表现出不同的迁移速率，从而实现了样品的分离。
4. 分离效果。
醋酸纤维薄膜电泳具有优秀的分离效果，其分离效率和分离分辨率均远高于传统的凝胶电泳技术。
这得益于纤维薄膜的微孔结构和表面电荷特性，使得样品分子在纤维薄膜上呈现出不同的迁移速率，从而实现了高效的分离。
5. 应用领域。
醋酸纤维薄膜电泳已经在生物医药、环境监测、食品安全等领域得到了广泛的应用。
在生物医药领域，它可以用于蛋白质、核酸等生物大分子的分离和分析；在环境监测领域，可以用于水质、大气等环境样品的分析；在食品安全领域，可以用于食品中添加剂、农药残留等有害物质的检测。
总结。
醋酸纤维薄膜电泳作为一种高效、快速、分离效果好的电泳技术，其原理基于纤维薄膜的微孔结构和表面电荷特性，通过电场驱动样品分子在纤维薄膜上迁移，从而实现了对混合物的分离。
它在生物医药、环境监测、食品安全等领域具有广泛的应用前景，对于相关领域的研究和实践具有重要意义。
醋酸纤维素薄膜电泳
醋酸纤维素薄膜电泳
醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。
醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体有以下优点：①电泳后区带界限清晰；②通电时间较短（二十分钟至一小时）；
③它对各种蛋白质（包括血清白蛋白，溶菌酶及核糖核酸酶）都几乎完全不吸附，因此无拖尾现象；④对染料也没有吸附，因此不结合的染料能完全洗掉，无样品处几乎完全无色。
它的电渗作用虽高但很均一，不影响样品的分离效果，由于醋酸纤维素薄膜吸水量较低，因此必需在密闭的容器中进行电泳，并使用较低有电流避免蒸发。
醋酸纤维素薄膜电泳已经广泛用于血清蛋白，血红蛋白，球蛋白，脂蛋白，糖蛋白，甲胎蛋白，类固醇及同工酶等的分离分析中，尽管它的分辨力比聚丙酰胺凝胶电泳低，但它具有简单，快速等优点。
根据样品理化性质，从提高电泳速度和分辨力出发选择缓冲液的种类，pH和离子强度。
选择好的缓冲液最好是挥发性强，对显色或紫外光等观察区带没有影响，若样品含盐量较高时，宜采用含盐缓冲液。
例如血清蛋白电泳可选用pH8.6的巴比妥缓冲液或硼酸缓冲液；氨基酸的分离则可选用pH7.2的磷酸盐缓冲液等。
电泳时先将滤膜剪成一定长度和宽度的纸条。
在欲点样的位置用铅笔做上记号，点上样品，在一定的电压，电流下电泳一定时间，取下滤膜，进行染色。
不同物质需采用不同的显色方法，如核苷酸等物质可在紫外分析灯下观察定位，但许多物质必须经染色剂显色。
醋酸纤维素薄膜电泳染色后区带可剪下，溶于一定的溶剂中进行光密度测定。
也可以浸于折射率为1.474的油中或其他透明液中使之透明，然后直接用光密度计测定。
它的缺点是厚度小，样品用量很小，不适于制备。
醋酸纤维素薄膜电泳实验报告
醋酸纤维素薄膜电泳实验报告引言：薄膜电泳是一种常用的分离和分析技术，它在生物医学、环境科学等领域得到广泛应用。
本实验旨在研究醋酸纤维素薄膜电泳的原理、操作步骤以及其在分离和分析中的应用。
一、醋酸纤维素薄膜电泳的原理醋酸纤维素薄膜电泳是利用醋酸纤维素薄膜作为分离介质，通过电泳电流的作用将待测物质分离出来的一种技术。
醋酸纤维素薄膜具有良好的电泳分离性能和化学稳定性，能够有效地分离样品中的离子或分子。
二、实验操作步骤1. 制备醋酸纤维素薄膜：将醋酸纤维素溶解于醋酸乙酯中，制备成一定浓度的醋酸纤维素溶液。
然后将溶液滴在玻璃基板上，待其自然干燥形成薄膜。
2. 准备电泳缓冲液：按照实验要求，配置适当浓度和pH值的电泳缓冲液。
3. 将待测样品加入电泳缓冲液中，并进行样品处理。
4. 将制备好的醋酸纤维素薄膜放置在电泳槽中，注入电泳缓冲液。
5. 将带电样品加入电泳槽中，通过施加电场，使样品在醋酸纤维素薄膜上进行电泳分离。
6. 根据实验要求，确定分离时间，停止电泳，取出醋酸纤维素薄膜。
7. 对分离的样品进行染色或检测，得到分离结果。
三、醋酸纤维素薄膜电泳的应用醋酸纤维素薄膜电泳在生物医学、环境科学等领域具有广泛的应用价值。
1. 生物医学应用：醋酸纤维素薄膜电泳可用于分离和检测生物样品中的蛋白质、核酸等生物大分子，对于研究基因表达、疾病诊断等具有重要意义。
2. 环境科学应用：醋酸纤维素薄膜电泳可用于水质和大气污染物的分析，能够对污染物进行快速、高效的分离和测定，为环境监测和治理提供了有效手段。
3. 食品安全应用：醋酸纤维素薄膜电泳可用于食品中有害物质的检测和分离，如农药残留、重金属等，为食品安全保障提供了技术支持。
结论：醋酸纤维素薄膜电泳是一种重要的分离和分析技术，具有广泛的应用前景。
本实验通过制备醋酸纤维素薄膜，利用电泳原理对待测样品进行分离和分析，研究了醋酸纤维素薄膜电泳的操作步骤及应用。
该技术在生物医学、环境科学和食品安全等领域具有重要意义，能够为相关领域的研究和实践提供有效的技术支持。
简述醋酸纤维素薄膜电泳原理及优点
简述醋酸纤维素薄膜电泳原理及优点
醋酸纤维素薄膜电泳是一种电泳分离技术，它是利用醋酸纤维素薄膜作为固定相，将荷电样品在电场作用下在薄膜表面进行分离和富集。
这种电泳技术广泛应用于生物学、化学等领域，在分离、纯化和表征化合物方面具有独特的优点。
醋酸纤维素薄膜电泳的原理是基于涂覆在玻璃或石英片表面的醋酸纤维素薄膜，通过电场使荷电物质在薄膜表面上移动，实现荷电物质的分离。
这种技术与传统的凝胶电泳相比，具有以下优点：
1.高分辨率
醋酸纤维素薄膜电泳是一种高分辨率的电泳技术，由于该技术的固定相为薄膜，因此可以提供一个大的有效表面积，以提高分离效率和分辨率。
与其他电泳技术相比，它可以实现更明显的分离和更清晰的图谱。
2.灵敏度高
醋酸纤维素薄膜电泳技术可以分离和检测非常低浓度的样品，对于物质的分离和检测具有高度的灵敏度。
这使得它成为生物学和化学研究中极为重要的技术。
3.简便易行
醋酸纤维素薄膜电泳技术具有简单易于操作的优点，使用起来非常方便，减少了许多样品前处理的步骤，提高了分析效率和速度。
4.适用广泛
醋酸纤维素薄膜电泳技术在生物学和化学领域有着广泛的应用，可以分离细胞质、蛋白质、核酸和药物化合物等不同的生化分子，成为分离、纯化和分析化合物的重要工具。
总之，醋酸纤维素薄膜电泳技术是一种独特的电泳分离技术，具有高分辨率、高灵敏度、简便易行和适用广泛等优点，在生物学和化学研究中有着广泛的应用前景。
醋酸纤维薄膜电泳实验总结
器
4.点样器：一个/组。
5.滤纸：公用。
6.玻璃板：一块/组。
7.镊子：一个/组。
8.玻棒：公用。
1．巴比妥缓冲液（pH8.6，离子强度0.07）：
四
巴比妥2.76g，巴比妥钠15.45g，用蒸馏水
、
定容至1000mL。
实 验
2．染色液：氨基黑10B 0.25g，用甲醇50mL、 冰醋酸10mL、水40mL溶解（可重复使用）。
图
样过慢，又未及时大桥，导致薄膜过于干燥，使区带成锯 齿状。
谱
➢区带倾斜：薄膜搭载滤纸上的位置歪斜，弯曲，与电流
分
方向不平行，或点样一边多一边少，区带容易泳斜。 ➢显色过浅：点样太少，区带显色不明显。
析
➢区带重叠：染色时，醋酸纤维薄膜不是一张一张放入染 色液的，在染色固定前，薄膜与薄膜之间重叠，造成薄膜
➢拖尾状：点样量过多，被分离的血清蛋白不能分离成5条
区带或产生拖尾。
八
➢有斑点：点样不均匀，不整齐，导致被分离的区带出现 斑点。
、
➢边流现象：点样板蘸取血清一边多一边少，导致区带分 离不清，出现边流现象。
失
➢区带模糊：薄膜过湿，样品扩散迅速，导致样品分离不
败
成区带。 ➢锯齿状：薄膜用滤纸吸水过度（薄膜上出现白斑）或点
后，涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。该膜具有均
一的泡沫状的结构，厚度约为120 μm，有很强的通透性，
对分子移动阻力很小
1、DYY-8C型常压电泳
仪：北京六一仪器厂
三
生产，1套/2组
、
实
2.醋酸纤维薄膜（2 cm×8cm）：2
验
片/人。 3.培养皿：一排桌子（即4组）公用
醋酸纤维素薄膜电泳指导
醋酸纤维素薄膜电泳指导醋酸纤维素薄膜电泳是一种常用的分离和纯化生物大分子的方法。
本文将对醋酸纤维素薄膜电泳的操作步骤进行详细介绍，并提供实验指导。
一、实验材料准备1. 醋酸纤维素薄膜：可准备自制醋酸纤维素薄膜或购买商用的醋酸纤维素薄膜。
2. 缓冲液：根据需要选择适当的缓冲液，常用的有Tris缓冲液、磷酸盐缓冲液等。
3. 模版DNA：准备需要分离和纯化的DNA样品。
4. 电泳仪和电源：确保电泳仪和电源的正常工作。
二、膜制备1. 制备醋酸纤维素溶液：将适量醋酸纤维素加入足够的乙醇中，并充分搅拌溶解。
2. 漏斗滴膜：将制备好的醋酸纤维素溶液倒入装有膜模的漏斗中，边转动漏斗边滴膜于预处理过的载玻片上，使其均匀涂布在玻片上。
3. 干燥膜：将滴膜后的载玻片在通风处自然干燥，确保膜完全干燥后再进行下一步操作。
三、电泳条件设定1. 调节电泳仪：按照电泳仪的设备说明书正确设置电泳仪的参数，如电压、时间等。
2. 准备缓冲液：根据实验需要选择合适的缓冲液，并按照比例配置好缓冲液。
3. 进行预电泳：将准备好的醋酸纤维素薄膜浸入缓冲液中，进行预电泳处理。
四、样品处理和装载1. DNA片段制备：将目标DNA打断成合适的片段大小，并使用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析确认打断效果。
2. 样品加载：将制备好的DNA样品加载到醋酸纤维素薄膜上，可采用直接加载或间接加载的方式。
五、电泳操作1. 启动电泳：将装有DNA样品的醋酸纤维素薄膜浸入缓冲液中，确保电泳液覆盖薄膜，并启动电源。
2. 电泳过程：根据需求设定合适的电源参数，进行电泳分离。
注意观察电泳过程，确保电泳效果和样品分离。
3. 停止电泳：根据实验需要设定合适的电泳时间，完成电泳后断开电源。
六、薄膜处理和分析1. 取出薄膜：将电泳结束的薄膜小心取出，避免扭曲或损坏。
2. 染色处理：可根据需要选择合适的染色方法染色薄膜上的DNA 样品，如乙锐亮绿、溴化乙锭等染料。
3. 分析结果：使用合适的分析工具，如UV-Vis分光光度计、荧光成像仪等，对薄膜上的DNA样品进行定量或定性分析。
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳ppt课件
11
4.电泳：红正黑负。 电压120 V。 电泳时间约40 ~ 50 min。
5.染色：氨基黑10B, 染色1-2 min. 6.脱色：2个表面皿，装入漂洗液，依次漂去多余染
料，直到背景漂白为止。
12
五、结果与分析
1.定性观察：染色后的薄膜上可显现清楚的五条区带。
2.定量测定：光密度仪扫描法，洗脱比色法
2. 点样：毛面向上，用点样器，在距膜一端约1.5 cm 处，点加3-5 μL待分离血清。注意取样适量、均匀； 血清线位置适当，粗细均匀，不能有明显扩散现象。
1.5cm
10
3. 搭桥：首先将双层纱布铺好，分别放置于电泳槽两 端，其下端要浸入缓冲液中。然后，将点好样的薄膜 光面向上平直地贴于电泳槽的支架上。注意桥的方向， 点样的一端位于负极，点样线不能搭在滤纸上。
1
实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳
2
一、实验目的
1.了解电泳的基本原理； 2.掌握电泳分离蛋白质的原理； 3.熟悉醋酸纤维素薄膜电泳的方法。
3
二、实验原理
1.电泳的基本原理 电泳——是带电粒子在电场中向其电性相反的电极 发生移动的现象。 利用电泳技术可进行物质分离、纯化及鉴定。
4
影响带电粒子电泳速率的因素： 1. 带电量 F=qE 2. 分子量 3. 形状
13
六、临床意义
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳在临床上常用于分 析血、尿等样品中的蛋白质，供临床上诊断肝、肾等疾 病参考。
1．肝硬化时清蛋白明显降底，α2和β-球蛋白无显 著变化，而γ球蛋白可显著增加。正常生理情况，清蛋 白与球蛋白之比约为1.5~2.5∶1，而肝硬化时有可能出 现清∶球＜1的情况，常称为清、球比例倒置，说明肝 功能严重受损。
实验三、血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳
血清蛋白质的分类和特性
分类：白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等 特性：白蛋白具有维持血浆渗透压、运输物质等功能；球蛋白具有免疫、防御等功能；纤维蛋白原具有参与凝 血的作用。
电泳分离血清蛋白质的机制
血清蛋白质带电性质：蛋白质分子带电在电场中向相反电极移动 电场作用：电场使蛋白质分子在电场中移动不同蛋白质分子移动速度不同 分离原理：利用蛋白质分子量、电荷和形状的差异实现蛋白质的分离 醋酸纤维素薄膜的作用：作为支持物使蛋白质分子在电场中分离
03
实验材料
实验所需的材料
血清蛋白质溶液
电泳缓冲液
添加标题
添加标题
醋酸纤维素薄膜
添加标题
添加标题
染色液和脱色液
材料的质量和来源
血清：应选用新鲜、无溶血、无污染的血清样本 醋酸纤维素薄膜：应选用孔径一致、无杂质、无气泡的薄膜 电泳缓冲液：应选用质量稳定、浓度适宜的电泳缓冲液 染色液和脱色液：应选用质量稳定、染色效果好的染色液和脱色液
准备实验器具和玻璃器皿确保清 洁干燥。
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
准备电泳仪和电源检查仪器是否 正常工作。
熟悉实验步骤和注意事项确保实 验安全可靠。
操作步骤及注意事项
添加项标题
准备实验器材和试剂确保干净、无菌。
添加项标题
将血清样品与染色剂混合摇匀后滴加在醋酸纤维素薄膜上。
添加项标题
将薄膜放入电泳槽中加入电极缓冲液接通电源进行电泳。
解读：实验结论表明醋酸纤维素薄膜电泳是一 种有效的血清蛋白质分离和分析方法具有操作 简便、分离效果好、分辨率高等优点。
意义：实验结论对于临床诊断、疾病监测、疗效评 估等方面具有重要的应用价值可以帮助医生更好地 了解患者病情为制定治疗方案提供依据。
醋酸纤维素薄膜电泳-精品医学课件
5、时间：30-40min
（四）显色与脱色
1、显 色 氨基黑10B（1-2min） 2、脱色
5%冰醋酸漂洗3次
注意：用干净镊子夹电泳槽中的膜 污染镊子用于显色与脱色
( isoelectric point, pI)
当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白 质解离成正、负离子的趋势相等，即成 为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的 pH称为蛋白质的等电点。
3、血清蛋白质
1）依据电泳结果分类
清蛋白(69.000) 1-球蛋白(200.000) 2-球 蛋 白(300.000) -球蛋白(90.000-150.000) -球蛋白(156.000-950.000)
2）各血浆蛋白质的等电点
分类
pI
清蛋白
4.64
1-球蛋白 5.06 2-球蛋白
-球蛋白 5.12
-球蛋白
6.857.3
pH8.6
— — — — —
组成比例
56一62％ 4一7％ 9一11％ 11一15％ 12一16%
A
B
清蛋白 1 2
清蛋白 1 2
血清蛋白电泳图谱
[操作]
1．电泳介质 ——醋纤膜的准备
醋酸纤维素膜（2×8cm） 放入pH8.6的巴比妥缓冲液
2．样品 ^
1)γ-球蛋白 前面分离提纯、浓缩
2)血清:对照
3、点样
粗糙面点样
1.5c m
注意：点样量 适度 过多：拖尾和扩散 过少：则无法检出
4、电泳
将点好祥的醋纤膜点样端放进电泳 槽架负极（黑色）
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蛋 白 质
1 2 3 4
实验目的 实验原理 实验步骤
注意事项
实验目的
掌握电泳的基本原理，了解电泳仪， 电泳槽的基本结构和功能。
熟悉电泳的基本过程与定量方法。 熟悉血清电泳在临床诊断中的作用。
实验原理
1. 醋酸纤维薄膜电泳是用醋酸纤维素薄膜作为支 持物的电泳方法。 2. 血清中各种蛋白质的等电点在 pH4.88 ～ 7.50 之 间，在pH8.6的缓冲溶液中均带负电荷，在电场 中向正极泳动。血清中各种蛋白质的等电点不 同，所以带电荷量也不同。此外各种蛋白质的 分子大小各有差异，因此在同一电场中泳动的 速度不同。分子小而带电荷多者，泳动较快； 反之，则较慢。
蛋白质的染色方法
1. 2. 3. 氨基黑10B ：蓝色酸性染料，可与蛋白质结合 形成青色结合物。灵敏度为考马斯亮蓝R-250 的20%。 考马斯亮蓝R-250:可通过非共价键与蛋白质结 合，适用于微量SDS-蛋白质染色。 银染 染色机制与摄影过程中Ａg离子的还原 相似，灵敏度比考马斯高100倍。常用于凝胶 低电泳中极微量蛋白质的染色。
５温度
。
热不利于电泳 热蒸发缓冲液，影响缓冲液的离子强度，甚至导致样品
变质。 热会增加样品的扩散 为了减少热对实验的影响，可控制电泳或电流，也可安 装冷却完散热装置。
电渗作用
：
电渗：在电场作用下液体对固体支持物相对移动的现象。
以纸电泳为例:
正极 负极
－－－－－－－－ ＋＋＋＋＋＋＋＋
１样品性质
影 响 电 泳 分 离 效 果 的 因 素
迁移率与电荷量成正比，与相对分子质量成反比。
２电场强度
电压越高，速度越快。但高电压 介质温度升高 样品扩散 和对流速度增加 分辨率降低。低电压会延长电压时间，但 可以减少产热。所以，实验中我们要选择合适的电压，同时要冷 却降温。
３缓冲液的性质
缓冲液的ｐH决定了生物的解离程度。对于蛋白质和氨基酸来说，我们知 道溶液的pH离等电点越远,，所带的净电荷越多，迁移速度越快。因此选 择一个合适的pＨ，使各种蛋白质所带的净电荷数量差异越大，以利于分 离。缓冲液要求性能稳定，不易电解。 同时，缓冲液的离子强度会对自身缓冲能力有影响。过高，缓冲能力差， 过高则会阻碍分子的迁移，使样品速度减慢。
步骤
４、平衡 将膜条无光泽向下置于电泳槽支架上
，点样端靠近负极。薄膜两端要紧贴滤纸，（点 样线不要压在滤纸上）中间平直悬空，加盖密封 ，平衡５min。
５ 、电泳
将点样端的薄膜平贴在阴极电泳槽支架的滤纸桥上 （点样面朝下），另一端平贴在阳极端支架上 (见下图 ) 。 要求薄膜紧贴滤纸桥并绷直，中间不能下垂。连接好电泳 仪。在室温下电泳，打开电源开关，调节电流强度 0.5mA/cm膜宽度，通电50min后，调节旋钮使电流为零，关 闭电泳仪切断电源。
原理
影响电泳迁移率的因素：
1 、 内在因素：蛋白所带净电荷的性质和所带电
荷的多少、蛋白的大小和形状 2、外界因素：电场强度、溶液的pH值、溶液的 离 子强度和电渗现象
等电点（pI)
以生物大分子为例
COOH＋
COOH＋
COOH
Pr
OH－
Pr
OH－
Pr
NH3+
NH2
NH3+
pH>pI
pH=pI
pH<pI
短，着色不易区分，或造成条带染色不均匀，必要时可进行 复染。
７、每次电泳时应交换电极，使两侧电泳槽内缓冲液的正负
离子相互交换，使缓冲液的pH维持在一定水平。
电泳失败的原因
①电泳图不整齐（点样不均匀，温度过高等） ②各组分分离效果不佳（点样过多，电流过低 等） ③染色后蛋白区带中间着色浅（染色试剂不足 等）
。
步骤
６、染色 取下薄膜直接浸于氨基黑 10B 染色 液中，染色５～ 10min 。然后在漂洗液中漂去剩余染 料，直至背景无色为止。回收漂洗液。。 仪内，记录仪上自动绘出蛋白质组分曲线图。每一个 峰代表一种蛋白质组分。若使用具有电子计算机附件 的自动扫描光密度仪，可通过相关软件的分析，直接 。 获得每条区带蛋白质的百分含量。
７、定量 将干燥的薄膜电泳图谱入自动扫描光密度
注意事项
1、薄膜的浸润与选膜是电泳成败的关键之一。 2、点样时，应将薄膜表面多余的缓冲液用滤纸吸去。 3 、点样时，动作要轻、稳，用力不能太大，以免损坏薄膜
影响分离效果。
4 、点样应点在薄膜的毛面上，点样量要适量，不宜过多或
过少。
5、电泳时应将薄膜的点样端置于电泳槽的负极端。 6 、应控制染色时间。时间长，薄膜底色不易脱去；时间太
表面带负电荷 带正电荷的水层携带粒子向 负极移动
如果样品原本是移向负极的，则泳动的速度加快；
如果样品原本是移向正极的，则泳动的速度减慢。
电泳技术：指利用电泳现象对混合物进行分离分析的技术。 电泳技术的优点：快速，准确，重复性好。 电泳分类： 按装置的差异有：薄膜电泳，垂直板电泳，平板电泳，垂直圆 盘电泳和毛细管电泳 按支持介质有： １ 醋酸纤维素薄膜电泳：分辨率高，成本低，灵敏度高，应用 广泛。 ２ 琼脂糖凝胶电泳：操作简单，分辨率高，重复性好，结果可 定量分析，电泳后易洗脱。 ３ 聚丙烯酰胺凝胶电泳；灵敏度高，对pH和温度变化较温度， 应用广。 ４ SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳具有聚丙烯酰胺凝胶电泳的所有 优点。 ５ 等电聚焦电泳。 ６ 双向电泳：具有极高的灵敏度和分辨率。
缓冲液pH=8.6
pI＜pH
血清蛋白均带负电荷,在电场中向正极移动 在醋酸纤维素薄膜分为五条带。电泳迁移率最大的是白蛋 白，其后为α1球蛋白，α2球蛋白，β球蛋白和γ球蛋白
+
白蛋 白(A)
α 1
α β
2
γ
实验器材
电泳仪，电泳槽，滤纸，醋酸纤维素薄膜 脱色摇床，染缸，点样器
试剂
４ x 电极缓冲液： 1.5mol/L Tris-HCl(pH 8.6)
临床意义: 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳在临床上 常用于分析血、尿等样品中的蛋白质，供临床上 诊断肝、肾等疾病参考。
意义
肝炎:白蛋白,a1-球蛋白,a2高 肝硬化 : 白蛋白 ,a1- 球蛋白 ,a2- 球蛋白 下降明显, γ-球蛋白极度升高 肾病综合症:白蛋白降低,α2和β球蛋白 升高
血清蛋白电泳结果的临床意义
可能相关疾病 骨髓瘤 白蛋白
α 1 球蛋 α 2 球 蛋 β 球 蛋 γ 球 蛋 白 白 白 白
↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↓
肾病综合症
肾炎 肝硬化
↓ ↓（显著） ↓ ↓
急性肝坏死
传染性肝炎 急性感染初期
慢性炎症 / 感染 后期
低球蛋白血症
２、浸膜
在膜条无光泽面距一端１ .５cm处用铅笔轻划点样线，浸入电
极缓冲液中，至完全浸透为止（≧２０min)。用镊子取出薄膜， 点样线向上平放于干净滤纸上，用滤纸轻轻地按压，吸去薄膜上 多余的液体。
３、点样
取少量待测血清均匀涂布在玻璃片上，用宽１cm的平整的塑
料软片末端取少许样品，垂直轻印到薄膜点样线上，形成一条 细窄而均匀的直线。（注：点样量不宜过多）此步是实验的关 键。以印章法加样时，点样量不宜过多，动作应轻，稳，用力 不能太重。
（Tris三羟甲基氨基甲烷）
染色液：称取0.5g氨基黑，甲醇50ml，冰醋
酸10ml，蒸馏水加至100ml。
漂洗液： 取甲醇 45ml ，冰乙酸 5ml 和蒸馏水
50ml，混匀置塞试剂瓶内贮存。
实验操作
１、准备 将电极缓冲液加入电泳槽的电极室内， 使正，负极室的液面等高，调节电泳支架宽度正好 适合醋酸纤维素薄膜的长度。用４层纱布或滤纸做 盐桥，一端浸入缓冲液中，一端搭在支架上。
４支持介质
理想的介质：具有网状结构，不带电荷，对分离物质无 吸附作用的惰性材料。 网状结构：提高电泳分辨率 电渗：降低分辨率。导致电渗的原因是支持介质表面存 在带电基团。 吸附：降低电泳分辨率。（常用支持介质中，高纯度的 琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶的吸附最小，醋酸纤维素薄膜 次之，滤纸最大
血清中几种主要蛋白组分：
血清蛋白质 白蛋白 α1球蛋白 α2球蛋白 β球蛋白 γ球蛋白 等电点 4.８８ 5.0６ 5.06 5.12 6.85～7. ５０ 分子量 69,000 200,000 300,000 90,000～ 150,000 156,000～ 950,000 占总蛋白的 ％ 57～72 2～ 5 4～ 9 6.5～12 12～2９
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳
——第三组
陈艳 李秀清 张伟 孙金山
定义：带电粒子在电场中向着与其电性相反的电极移动 的现象。
负 极
正 极
－
那 么 什 么 是 电 泳？
电泳为何能分离混合物？
迁移率（mobility)：表示单位电场强度粒子 的速度。 又叫泳动度，用 μ表示。 μ＝v/E=Q/(6πrη) 可知，在一定pH条件下，不同的蛋白质由于具 有不同的等电点而带不同性质的电荷，因而在一 定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同， 即它们的电泳迁移率不同，因此，可对它们进行 分离。 电泳的应用：分离各种有机物；分析某种物质的 纯度及分子量。