菊花核型分析

本科生毕业论文（设计）

题目: 菊花染色体的核型分析

姓名: xx

学院: 农学院

专业: 农学

班级: 10级2班

学号: xxx

指导教师: xxx 职称: 教授

2014 年5月15日

安徽科技学院教务处制

目录

摘要 (2)

关键词 (2)

1 材料和方法 (2)

1.1 材料 (2)

1.1.1 实验材料 (2)

1.1.2 主要仪器 (2)

1.1.3 主要试剂 (2)

1.2方法 (3)

1.2.1实验设计 (4)

1.2.2实验方法 (4)

2.结果与分析 (5)

2.1 菊花染色体数目 (5)

2.2菊花染色体核型 (5)

3 小结与讨论 (6)

3.1小结 (6)

3.2 讨论 (6)

致谢 (7)

参考文献 (7)

英文摘要 (8)

菊花染色体的核型分析

农学叶超

指导老师崔广荣

摘要:以菊花试管苗根尖为材料、1/2mS为基本培养基，通过8-羟基喹啉、卡洛式固定液、解离液处理，在使用改良苯酚品红染色后在显微镜下观察菊花染色体的数目及其核型。经过试验可以得知，二号菊花苗染色体数目为36条属于二倍体，核型为2A型，通过对着丝点的位置观察和统计得出该品种菊花的核型公式为2N=2X=36=31m+5sm.

关键词: 菊花;组织培养;生根;核型分析；2N=2X=36=31m+5sm;2A

菊花是菊科菊花属多年生的宿根草本植物，是原产于我国的一种花。它花色比较丰富，品种很多，是具有很强观赏价值的一种花，目前菊花石世界上栽培最广泛的切花及盆花之一。国内外对菊花的组织培养研究自1972年以来，有过不少报道，目前菊花快速繁殖的技术已经很成熟。有关菊花的研究只要集中在组培方面。有关菊花细胞学方面的研究比较少，关于菊花染色体及其核型分析方面的文章及报道更是少见。菊花染色体核型分析的方法有多种，本次试验采取传统方法。本实验在于通过菊花核型鉴定实验确定菊花染色体的数目及其核型，为菊花品种鉴定及菊花新品种选育提供帮助。[1-3]

1.1 材料

1.1.1 实验材料

实验材料为安徽科技学院遗传育种实验室组培室培养的2号的试管苗。1.1.2 主要仪器

(1) 高压蒸汽灭菌锅

(2) 电子分析天平

(3) 组织培养瓶

(4)无菌操作台

(5) 刀剪镊灭菌器

（6）PTEC数码显微镜

（7）手术刀片

（8）载玻片及盖玻片

（9）无菌纸

1.1.3 主要试剂

培养基所用试剂:蔗糖、MS培养基专用液（微量元素、大量元素、有机、铁盐）、琼脂粉、广泛PH指示纸、蒸馏水、8-羟基喹啉、卡洛固定液、解离液、改良苯酚品红染色液。

1.2方法

1.2.1试验设计

将继代培养的菊花试管苗取出，切取茎段，切取得到的茎段每段必须带有侧芽。然后将茎段扦插在1/2mS培养基上培养。等一个星期以后根尖长到1CM-1.5CM 左右时取出，洗去培养基。

然后用8—羟基喹啉、卡洛固定液、解离液处理后、切取根尖0.5MM用改良苯酚品红染色液处理，再在显微镜下观察菊花染色体的数目、形状及其染色体的配对情况。

1.2.2试验方法

第一阶段：菊花试管苗生根所用的培养基配制以1/2ms为基本培养基，添加5g/L琼脂粉作为凝固剂、另加30g/L蔗糖作为碳源。第一阶段7d长根的光照周期为每天12h，光照强度为1500Lx～2000Lx观察菊花长根情况。

第二阶段：等一个星期左右生根培养基里面的菊花茎段长出根以后，将菊花整体取出，切取根，洗去上面粘得琼脂，配置8-羟基喹啉、卡洛固定液、解离液及改良苯酚品红染色液，将洗净的菊花根尖放入8-羟基喹啉中处理2个小时，洗净以后再用卡洛固定液处理12小时，在洗净后再用解离液处理半个小时，取出菊花根清洗干净后放于75%酒精中保存。切取处理后的根尖5mm用改良苯酚染色液染色10min,压片，再放置在显微镜观察，将比较清晰的图片拍照。这个过程主要观察菊花根尖切片里面的细胞中染色体的数目、核型及其配对情况。

第三阶段：染色体数目统计，在观察的清晰有效的细胞里面随机选取30个细胞观察染色体数目,对所有观察细胞染色体的数目进行统计，统计所有观察菊花细胞里面有不同染色体数目的细胞在所有观察的细胞中所占的百分比。冲洗三张放大照片，将染色体剪下来同源染色体配对，测量长度。[ 4-6]

数据统计菊花染色体数目与染色体类型及其配对情况

菊花染色体相对长度、染色体臂比、类型。

2 结果与分析

2 .1 染色体数目

细胞个数染色体数目百分比

52 36 86.7 %

3 35 5.0%

4 37 6.67 %

1 30 1.63%

表1菊花染色体数目

通过对60个菊花染色体图片有效分裂相的观察（表1），其中含有36条染色体的有52个细胞，在所有的观察的细胞中占86.7%。含35条染色体的有5个细胞，在所有细胞中占5.0%。含37条染色体的有4个细胞，占所有细胞的6.67%。染色体数目为30的细胞1个，占所有细胞数目的1.63%。参考陈瑞阳等的《关于植物核型分析的标准化问题》，在所有观察的细胞中有36条染色体的细胞52个，占所有观察细胞总数的86.6%，分析得出菊花染色体数目为36条[ 7 ]

2.2 染色体长度与核型

图1菊花跟尖染色体

1 2 3 4 5 6 7 8

9 10 11 12 13 14 15 16 17

18

图2 菊花根尖染色体核型

图3 菊花染色体核型模式