温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
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3.激活剂与抑制剂:激活剂能增加酶的活性,而抑 制剂则会抑制酶的活性,Cl-为唾液淀粉酶的激活 剂,而Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。 4. 唾液淀粉酶所催化的反应为: 淀粉→糊精→麦芽糖
碘液显色反应:碘液本身为棕色,与淀粉反应
显深蓝色,与分子量大小不同的糊精呈蓝、紫、红
等色,与麦芽糖不呈色。
[步骤]
温度、pH、激活剂和抑制剂 对酶活性的影响
[目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理; 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程;
[原理] 1. 温度:对酶的活性的影响为双效性,当酶促反应 的温度为最适温度时,最有利于酶促反应的进行。 温度过低,酶的活性减弱,温度太高,会使酶变性、 失活; 2.pH :酶活性最大时的环境 pH 为最适 pH 。 pH 不仅 会影响酶的活性,还会影响底物的解离状态,从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。
2、pH对酶活性的影响 B.PH值组 B1管 PH5.0 2ml 10d B2管 PH6.8 2ml 10d B3管 PH8.6 2ml 10d
磷酸盐缓冲液 (2ml) 1%淀粉 唾液
摇匀,立即置37℃保温,每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中(小池预先加好0.1%碘液)。当碘液不 变色时,分别向3管中加入1%碘液2滴,观察颜色变化。
3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
C.激活剂、 抑制剂组 1%淀粉 试剂 (2滴) 唾液
C1管
1ml 1%NaCl 10d
C2管
1ml 1%CuSO4 10d
C3管
1ml
C4管
1ml
1%Na2SO4 蒸馏水 10d 10d
摇匀, 37℃保温,每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷 盘小池中(小池预先加好0.1%碘液) 。当碘液不变色时, 分别向4管中加入1%碘液2滴,观察颜色变化。
收集唾液 ( 自来水漱口、收集唾液约 2-3ml 于小烧杯 中,蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A.温度组 唾液 (2ml) 1%淀粉 (1ml) 1%碘液 A1管 冰水浴 5分钟 冰水浴 15分钟 2d A2管 37 ℃水 浴5分钟 37℃水浴 15分钟 2d A3管 沸水浴 5分钟 沸水浴 15分钟 2d
3.激活剂与抑制剂:激活剂能增加酶的活性,而抑 制剂则会抑制酶的活性,Cl-为唾液淀粉酶的激活 剂,而Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。 4. 唾液淀粉酶所催化的反应为: 淀粉→糊精→麦芽糖
碘液显色反应:碘液本身为棕色,与淀粉反应
显深蓝色,与分子量大小不同的糊精呈蓝、紫、红
等色,与麦芽糖不呈色。
[步骤]
温度、pH、激活剂和抑制剂 对酶活性的影响
[目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理; 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程;
[原理] 1. 温度:对酶的活性的影响为双效性,当酶促反应 的温度为最适温度时,最有利于酶促反应的进行。 温度过低,酶的活性减弱,温度太高,会使酶变性、 失活; 2.pH :酶活性最大时的环境 pH 为最适 pH 。 pH 不仅 会影响酶的活性,还会影响底物的解离状态,从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。
2、pH对酶活性的影响 B.PH值组 B1管 PH5.0 2ml 10d B2管 PH6.8 2ml 10d B3管 PH8.6 2ml 10d
磷酸盐缓冲液 (2ml) 1%淀粉 唾液
摇匀,立即置37℃保温,每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中(小池预先加好0.1%碘液)。当碘液不 变色时,分别向3管中加入1%碘液2滴,观察颜色变化。
3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
C.激活剂、 抑制剂组 1%淀粉 试剂 (2滴) 唾液
C1管
1ml 1%NaCl 10d
C2管
1ml 1%CuSO4 10d
C3管
1ml
C4管
1ml
1%Na2SO4 蒸馏水 10d 10d
摇匀, 37℃保温,每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷 盘小池中(小池预先加好0.1%碘液) 。当碘液不变色时, 分别向4管中加入1%碘液2滴,观察颜色变化。
收集唾液 ( 自来水漱口、收集唾液约 2-3ml 于小烧杯 中,蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A.温度组 唾液 (2ml) 1%淀粉 (1ml) 1%碘液 A1管 冰水浴 5分钟 冰水浴 15分钟 2d A2管 37 ℃水 浴5分钟 37℃水浴 15分钟 2d A3管 沸水浴 5分钟 沸水浴 15分钟 2d