体外诊断试剂稳定性研究的影响因素和评价要求

体外诊断试剂稳定性研究的影响因素和
评价要求
摘要：体外诊断试剂是指在疾病的预测、预防、诊断、治疗监测、预后观察和健康状态评价的过程中，用于人体样本体外检测的试剂、试剂盒、校准品、质控品等产品，可单独使用，也可与仪器、器具、设备或系统组合使用。

其中，用于血源筛查的体外诊断试剂和采用放射性核素标记的体外诊断试剂按照药品进行管理，其他体外诊断试剂按照医疗器械进行管理。

体外诊断试剂稳定性是指产品在生产企业规定的条件下储存，在规定的时间内保持其性能特性的能力，主要包括实时稳定性、运输稳定性、开瓶稳定性、冻融稳定性、机载稳定性、复溶稳定性（冻干产品）等。

稳定性作为评价体外诊断试剂保持产品性能的重要指标，对产品的研发、生产、运输、保存和使用等环节具有重要意义，通过稳定性研究可以评价和调整产品组方、工艺、包装材料等，确定产品的保存期限和开封后保存期限，明确产品的运输、储存和开封后的保存条件，并可在产品保存期限和储存条件等发生变更时，验证变更后的产品稳定性。

关键词：体外诊断试剂稳定性；影响因素；评价要求
引言
GB/T29791.1-2013明确定义了体外诊断试剂的稳定性:体外诊断医疗器械将性能特性保持在制造商规定的限度内的能力。

该标准规定了三种适用稳定性的情况:第一种情况涉及按照制造商规定的条件储存、运输和使用体外诊断试剂、校准器或调节器；二是按照制造商的指示从封闭容器中提取、配制、使用和储存的溶解干燥材料、工作液和材料；第三，这些是校准仪器或测量系统，其稳定性通常是在体外诊断试剂时测量的。

稳定性是保持产品作为体外诊断试剂的安全性和有效性的重要指标，也是指导产品生产、运输、保存和使用的重要指标。

1开展体外诊断试剂稳定性研究的目的
体外诊断试剂可根据成分结构和反应原理分为不同类别，不同产品的成分比较复杂，许多体外诊断试剂本身就是生物制剂。

一些活性体外诊断试剂基质具有不同的化学不稳定性趋势，易发生水解、酶解和氧化等反应，影响试剂的质量和稳定性。

对于含有肽的冻干粉试剂，贮存环境中的水和氧含量对试剂的稳定性有很大影响。

因此，体外诊断试剂稳定性研究旨在了解各种因素影响下体外诊断试剂的质量变化。

影响体外诊断试剂质量的因素包括温度、湿度、振动、氧化和光照。

根据稳定性研究的结果，企业可以确定体外诊断试剂的储存条件、试验期和使用寿命。

2影响因素
2.1原材料性能
体外诊断试剂反应过程的实现依赖于各组成成分物理、化学、生物特性的稳定，因此原材料性能的稳定，对产品整体稳定性具有关键作用。

体外诊断试剂的原材料成分可能涉及化学物质、抗原、抗体、酶等，而部分原材料的制备可能来源于血液、细胞、细菌、病毒等。

生产企业在产品研发阶段应在满足产品检测需求的条件下，筛选性能稳定的原材料，同时，对于特性稳定性不明确的原材料，在研发阶段应对其稳定性进行充分研究。

如有些产品其反应体系中含有生物酶，包括胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶等。

能够满足反应体系中所需酶活性的酶可能有多种，包括天然的、重组的，天然的还包括动物来源的、微生物来源的等，生产企业在酶的选择中应考虑不同酶的稳定性对产品整体影响；产品反应体系中包含核酸的，应考虑不同核酸分子在储存条件下随时间延长的稳定性，一般而言，相同储存条件下，双链DNA分子比单链DNA分子稳定，环状DNA分子比线性DNA分子稳定，DNA分子比RNA分子稳定；反应体系中包含氧化、还原物质的，应考虑随着储存时间的延长，其氧化、还原特性的改变；产品反应体系中包含荧光物质的，应考虑不同类别荧光物质在储存条件下的衰减等。

2.2产品储存条件
一般而言，已上市的体外诊断试剂在用户使用前，应为密闭保存，密闭保存条件对于产品稳定性具有重要作用。

一是体外诊断试剂多为液体状态保存，未进
行密闭保存的产品随着保存时间的延长可能导致液体蒸发，进而影响产品的反应
体系，对产品稳定性产生影响；二是产品未进行密闭保存时，随着保存时间的延长，产品组成成分中某些物质长期接触空气中的一些气体（如氧气、二氧化碳等），会对其性能产生影响，氧气可能会氧化组分中处于还原态的物质，二氧化
碳可能影响组分中的氢氧根离子，与之反应生成碳酸根离子等，这些反应均会影
响产品稳定性；三是未进行密闭保存的产品，空气中的微生物可能进入产品中，
干扰反应体系，如消耗反应体系中的蛋白质、改变反应体系pH等，进而影响产
品的性能。

3体外诊断试剂稳定性的研究方法
3.1加速稳定性
体外诊断试剂的加速稳定性主要是指试剂规范在非贮存环境中要求进行的稳
定性研究，以评估诊断试剂的性能，包括在极端环境中检测到体外诊断试剂，以
及据国家食品和药物管制局称，有两种核查方法:寿命稳定和热稳定。

加速稳定
性检测主要基于诊断试剂在运输过程、贮存过程和使用过程中的不稳定性因素，
在诊断试剂稳定性研究实验中仍有一定意义，但根据国家食品药品监督总局的规
定诊断试剂实时有效的稳定性检测仍然是判定试剂稳定性的主要检测依据，加速
稳定性是辅助稳定性检测的实验指标。

3.2复溶稳定性
溶解度的稳定性主要是检验工具包中使用的干粉或与工具包结合使用的干粉
是否影响试剂在规定条件下与指定溶剂溶解后的性能。

目前，在临床实验室，干
粉试剂主要是用于质量控制和校准活动的质量控制和校准产品。

与液体试剂相比，干粉质量控制产品具有较长的有效期和良好的稳定性。

此外，干粉质量控制产品
通常是多种工程质量控制产品的混合物，可以同时对多种产品进行质量控制。

因此，良好的干粉质量控制产品对检测结果质量有很大影响。

对于干粉试剂的溶解
度稳定性，通常需要选择三个指标，如批次检验精度、批次内精度和批次间精度。

在确定溶解度条件时，应充分考虑温度、溶剂等因素。

，严格遵守溶解度要求，
减少产品以外的因素造成的误差，保证质量控制结果和临床试验结果的可靠性和
准确性。

一般而言，粉末产品应提供溶解度稳定性研究数据，除非是溶解后立即
适用的一次性产品，在这种情况下不要求溶解度稳定性。

此外，对于某些产品，
孔径稳定性是溶解度稳定性因此，只要选择研究的孔径或溶解稳定性特性之一，就可以使用开口后的缓冲液进行溶解，并按照说明的要求进行保存。

3.3样本稳定性
对于检测到的不同样品，操作方式也存在差异，样品的稳定性在一定程度上
影响到整个检测的成败。

目前检测工作中常见的检测主题是蛋白质、DNA和RNA，它们对热条件敏感，而微生物污染往往影响蛋白质的准确性，并受到诸如沉淀、
变质和蛋白质退化等条件的影响；此外，在对医疗机构常用的血细胞样品进行稀
释处理时，通过检查下列指标可以看出，不同稀释浓度的样品之间的检测数据差
异很大:RBC、WBC、PLT和hggb。

当血液样品稀释率过高时，血细胞检测仪器中
血细胞数量太少，严重影响血细胞分析的准确性。

当稀释倍数过低时，血液细胞
的循环速度在测试过程中会减慢，这也影响到血细胞测试结果的准确性。

在此基
础上，选择最佳血细胞样品稀释比例是提高检测质量的重要标准之一。

DNA型核
酸样品易受化学试剂的影响，有重组、突变和DNA序列破裂的危险；RNA核酸更
容易发生突变、被气溶胶污染等在提取核酸的过程中。

结束语
稳定性研究贯穿于整个产品的研发阶段，其结果是支持产品上市后储存条件
及有效期的关键证据。

作为产品性能评价的一个重要方面，稳定性研究与产品其
他分析性能（如准确性、特异性、灵敏度）不同，不能采用直接测量的研究方法，需将试验样品按规定的储存条件储存，评价产品特性随储存时间的变化情况。

产
品稳定性研究是生产企业的职责，稳定性研究持续时间长，因此生产企业应在研
究开始前，设定合理的研究方案，以期能够为产品储存条件及有效期提供科学合
理的证据。

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