嗜肺军团菌致病性与免疫性
军团菌属
3. 抵抗力
1）对化学消毒剂、干燥、紫外线较敏感 2）对氯或酸有一定抵抗
二、致病性与免疫性
1. 致病物质：
多种酶：磷酸酯酶
毒素：细胞毒素
菌毛 微荚膜
2.所致疾病：军团菌病
* 传播途径：
1)主要通过呼吸道吸入带菌飞沫 2)中央空调冷却塔用水污染军团Biblioteka 菌而导致感染* 临床类型：
1)流感样型（轻症型） 2)肺炎型（重症型） 3)肺外感染
一、生物学性状
1. 嗜肺军团菌的形态学特征
* G－杆菌，常规染色不易着色
Giemsa染色：呈红色
Dieterle镀银染色：呈黑褐色
* 端生或侧生鞭毛，有微荚膜和菌毛
* 在组织中呈短杆状，人工培养基上呈
多形态性
2. 培养特性及抗原结构
* 需氧菌，营养要求高 * 抗原组成： 菌体抗原：分型依据，我国流行 1~6型 鞭毛抗原
军团菌属
检验系 刘涛
* 军团菌是引起军团病的病原体，首发于1976 年的美国退伍军人一次聚会，故称作军团病 * 军团菌在自然界普遍存在，在天然水源及人 工冷、热水管系统更多见 * 军团菌在1984年被正式列入变形菌门、γ-变
形菌纲、军团菌目、军团菌科、军团菌属，
其属下共有46个菌种。
嗜肺军团菌 L. pneumophila
3. 免疫性
* 嗜肺军团菌为胞内寄生菌
* 细胞免疫在抗感染中起主要作用
三、微生物学检查法
四、防治原则
谢谢
微生物致病性总结
肺结核感染
（一）肺部感染
1、原发感染：常见于儿童，也称外源性感染。
沿淋巴管
肺泡渗出性炎症（原发灶）肺门淋巴结（肿大）
扩散（炎症）
原发综合症（哑铃型）
特点：特异免疫没有建立，故局部病变较轻，但易扩散
结局：机体抗击力强：形成结核结节→纤维化→钙化→自愈（但病灶内常有细菌的暗藏）机体抗击力差：活动性肺结核→干酪样坏死
全身播散→粟粒样结核
（2）继发感染——常见成人（原发病灶——内源性感染）
特点：局部病变重，但不易扩散
一样局限于肺部，易发生干酪样坏死，可形成空洞和开放性肺结核
（二）肺外感染
部份肺结核患者体内的结核分枝杆菌可经血液、淋巴液侵入肺外器官，引发相应的脏器结核，如脑、肾、骨等。
痰菌被消化道咽入，可引发肠结核等。
嗜肺军团菌生化鉴定结果
嗜肺军团菌生化鉴定结果
嗜肺军团菌生化鉴定结果通常包括以下几个方面：
1.革兰氏染色：嗜肺军团菌是一种革兰氏阴性杆菌，经过革兰氏
染色后呈红色。
2.氧化酶试验：嗜肺军团菌氧化酶试验结果为阳性，这是鉴定该
菌种的一个重要指标。
3.生长条件：嗜肺军团菌需要在特定的生长条件下才能生长繁殖，
例如在36℃左右的水环境中生存，且易通过气溶胶的形式传播。
4.培养特性：嗜肺军团菌需要在特定的培养基上培养才能获得较
好的生长效果，例如在人工水环境（如集中空调循环冷却水、
自来水、淋浴水、温泉浴池水、游泳池水、人造喷泉水）中容
易滋生。
5.抗药性：嗜肺军团菌对不同的抗生素有不同的抗药性，需要根
据药敏试验结果选择合适的抗生素进行治疗。
总之，通过以上几个方面的生化鉴定结果，可以确定是否为嗜肺军团菌感染，并采取相应的治疗措施。
该如何治疗嗜肺军团菌？
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生活常识分享该如何治疗嗜肺军团菌？
导语：该如何治疗嗜肺军团菌？相信一定有很多人对这个问题比较感兴趣想要知道这个问题的答案，小编为大家收集了以下内容来解答这个问题，想要了解
该如何治疗嗜肺军团菌？相信一定有很多人对这个问题比较感兴趣想要知道这个问题的答案，小编为大家收集了以下内容来解答这个问题，想要了解的朋友和我一起来看看下面的内容吧。
人们通常是由于呼吸了被军团杆菌污染的水源散发的水雾而感染。
轻微感染者会出现发烧和肌肉痛等症状，严重感染者甚至可能引发肺炎。
嗜肺军团菌是一种细胞兼性寄生的细菌，可入侵变形虫，或是人类的巨噬细胞内。
该菌的感染力在抗体和血清补体存在下大大提高（但并非绝对需要两者存在）。
嗜肺军团菌为胞内寄生菌，其致病性直接依赖于胞内寄生能力。
该菌会因噬菌作用被伪足包裹进入巨噬细胞，之后，菌体被细胞产生的自噬体包裹起来，阻止了溶酶体的溶解。
在这层保护之下，细菌大量繁殖。
该菌利用一种型为IVB的分泌系统分泌的名为Icm/Dot（细胞器运行缺失/细胞内繁殖）宿主入侵效应蛋白。
这些效应器可以提升细菌在宿主细胞的存活力。
该菌会在培养液里由II型分泌系统产生一种大小约为39kDa的金属蛋白，这种蛋白对某些组织培养的细胞有毒害。
II 型分泌系统也是完全毒化作用的必需。
侵入人体吞噬细胞内后，经过7～10天，机体免疫系统产生了对病菌的特异性细胞免疫，与非特异性免疫相互配合，抑制胞内细菌繁殖并增强NK细胞活性杀伤感染细胞。
此外，特异性抗体也有一定作用，能起调理素作用并激活补体，增加巨噬细胞的吞噬作用。
嗜肺军团菌毒力基因、致病性及实验诊断研究进展
族 氨基 酸和合适 的生 态环境 。嗜肺 军团菌变种的其 他 ５种 毒 力 基 因 ： ０ ｄ ｔ／ｃ Ｇ、 ｏ０ ｉ ｄｔ ｏ ｉ Ｂ、 Ｆ ｍ ｄｔ／ｃ ｍＢ、ｃ Ｘ ｉ ｍ 和 ｐｏ 这 些 毒 力 基 因 负 责 非 巨 噬 细 胞 相 关 毒 力 ， ｒ Ａ， 可 用 信 号标 记 技 术 测 定肺 部 病 原 体 Ｊ 。
根据 嗜 肺 军 团 菌 Ｄ Ａ 序 列 分 析 ， 团 菌 变 种 Ｎ 军
Ｎ ２６ Ｕ １Ｒ转 座 子 插 人 位 置 有 ２个 基 因 操 纵 子 ｉ Ａ ｒ Ｂ， ａ
第 １开 放 阅 读 框 架 （ Ｒ ）ｒ 编 码 ２２个 氨 基 酸 蛋 Ｏ Ｆ ｉＡ ａ ７ 白 ， 似 转 甲基 酶 序 列 ； ２Ｏ Ｆｉ Ｂ编码 ５ １个 氨 类 第 Ｒ ａ ｒ ０ 基 酸 蛋 白 ， 似 原 核 生 物 和 真 核 生 物 的 ２，． 运 载 类 一３肽 蛋 白 。ｉ Ａ ｒ Ｂ基 因 座 大 多 限 于 嗜 肺 军 团 菌 和 其 他 致 ａ 病性 军 团 菌 中 。ｉ Ａ 与 嗜 肺 军 团菌 的 毒 力 有 关 ， ｒ ａ 是 细胞 内感 染 所 必 需 ； ｉ Ｂ基 因 编 码 推 定 为 肽 运 载 而 ｒ ａ 蛋 白 ， 以促 进 铁 的 摄 取 。 铁 是 嗜 肺 军 团 菌 毒 力 和 可 细胞 内生 长 所 必 需 ， 。嗜 肺 军 团 菌 产 生 各 种 毒 力 ６ ７ Ｊ
维普资讯
嗜肺军团菌的致病机制及其抗病特征
嗜肺军团菌的致病机制及其抗病特征嗜肺军团菌（Legionella pneumophila）是一种引起肺炎的病原微生物，目前已知有20多种不同的致病型，其中1型是最常见的致病型。
这种细菌主要生长在水中，包括淡水、海水和土壤中，但也能在暖湿空气中存活并扩散。
嗜肺军团菌的感染方式多种多样，包括吸入感染、食品感染以及接触感染等。
在本文中，我们将重点分析嗜肺军团菌的致病机制及其抗病特征。
一、嗜肺军团菌的致病机制1.病菌侵入呼吸道嗜肺军团菌通过吸入进入呼吸道，然后被吞噬细胞摄入并转化为细胞内寄生体，这使得病原体免于外在抵抗。
在此过程中，嗜肺军团菌暴露出其上的宿主抗原，这导致宿主的免疫细胞识别并发射抗体。
2.病原体抵抗宿主免疫系统嗜肺军团菌寄生在体内，为其提供了保护免疫细胞的机会，以便更好地进行复制和繁殖。
此外，病菌还能够在囊泡中抗击宿主氧化物，这减少了氧化剂对其的伤害。
3.病原体在细胞内复制病原体在体内复制十分迅速，每隔6个小时便能进行一次。
在细胞内复制期间，病原体会利用宿主细胞内的内源性机制逃避受体调节，并调节宿主的内分泌、细胞周期以及细胞死亡等过程。
4.病原体释放病原体释放涉及到细胞毒素的释放。
这些细胞毒素能够杀死宿主细胞，因此释放后嗜肺军团菌会大量输出以便在宿主体内扩散。
二、嗜肺军团菌的抗病特征1.肺泡复合体的形成在宿主呼吸道内，嗜肺军团菌能够通过表面抗原和肺泡上皮细胞接触形成肺泡复合体，这表明宿主身体正在对抗嗜肺军团菌的感染。
2.宿主抗体生产一旦宿主身体察觉到病原体的存在，其免疫细胞会产生抗体以应对这种威胁。
这些抗体的产生是嗜肺军团菌感染的早期标志，而病原体产生的肺炎是由宿主机体本身抗原抵抗嗜肺军团菌出现的。
3.发热和痰嗜肺军团菌感染的典型征象就是发热，这表明宿主机体正在进行对抗。
此外，病人可能还会产生痰，这是因为嗜肺军团菌感染导致宿主机体肺部黏液分泌增多。
4.临床症状嗜肺军团菌感染有一些特征性的症状，包括喉咙痛、头痛、咳嗽、肌肉疲劳和体重下降等。
军团病杆菌简介
军团病杆菌简介1976年，美国一退伍军人组织宾州军团在费城召开会时暴发了一次肺炎流行，有221人发病，造成34人死亡。
当时病因不明，被称为军团病。
1977年分离到本病的病原体，次年命名为军团病杆菌，简称军团菌，属军团菌科军团菌属(Legionella)。
一、生物学性状杆状。
大小为2～20×0.3～0.9um。
革兰氏染色微弱阴性。
通常Gimenez染色法或Dieterle镀银染色法染色。
抗酸染色常阴性。
无芽胞、无荚膜，但有菌毛和一至数根鞭毛，能运动。
在不同生长阶段形态亦不同，如菌丝状，短菌丝状，杆状等。
细胞壁内含有大量支链脂肪酸，占总脂肪酸量的68%以上。
此特点与分枝杆菌相似，而与其他革兰氏阴性杆菌显著不同。
营养要求特殊，常接种于复合培养基中，生长环境中必须含半胱氨酸和铁。
需氧，2.5～5%CO2能促进生长。
最适生长温度为35℃，最适pH6.1。
生长缓慢，3天后才可见圆形菌落，直径1～2mm，颜色多变，有光泽、湿润，半透明，有特殊臭味。
大多数军团菌产生明胶酶和β～乳酸酶，过氧化氢酶阳性，尿毒酶阴性，不还原硝酸盐。
一般不发酵糖类。
嗜肺军团菌可分解马尿酸盐。
军团菌目前已发现有34个种53个血清型。
嗜肺军团菌是当前流行的主要菌种，至少有15个血清型。
军团菌在自然界中抵抗力很强，尤以水中为最，自来水中可生存一年左右。
对化学消毒剂尚敏感，0.05%苯酚一分钟或碘10 ppm-分钟即致死。
对酸有抵抗力，对pH2的盐酸可耐受30分钟。
二、致病性与免疫性经调查，80～85%的军团菌感染由嗜肺军团菌引起。
它常藏匿于空调冷却器(塔)、热水管道、淋浴喷头等处，并以气溶胶的形式传染宿主。
嗜肺军团菌有微荚膜和菌毛等结构，能抵抗宿主吞噬细胞内杀菌物质的作用，并在其中生长繁殖，产生多种酶、外毒素及内毒素样物质，最后导致细胞死亡，释放出数百个细菌。
军团病多发于夏秋季，既可暴发流行也可散发。
临床表现有两种类型：①军团病，也称肺炎型。
临床助理医师微生物学考点军团菌属.doc
201５年度临床助理医师微生物学考点:军团菌属嗜肺军团菌1976年在费城的退伍军人大会期间,爆发了不明原因的肺炎,从病人体内分离出了一种革兰阴性杆菌,后命名为嗜肺军团菌。
一、生物学性状1、形态染色:Ｇ—短小杆菌,多形性,有鞭毛、菌毛及微荚膜，无芽胞。
2、专性需氧,2.5－5%CO2生长良好,营养要求较高，需特殊培养基—活性炭酵母浸出液琼脂(ＢCYE),生长缓慢,3－5天可见针尖大小灰白色S型菌落。
3、抵抗力：普遍存在于天然淡水和人工水域环境中,如自来水、热水淋浴、中央空调等，故能以气溶胶的方式传播，对化学消毒剂、干燥、紫外线敏感。
二、致病性与免疫性致病机制不很明确。
主要引起军团菌病，飞沫传播，常见于夏秋季。
临床上有3种类型:流感样型、肺炎型、肺外感染型。
流感样型(旁地亚克热):轻症、发热、寒战、上感症状、无肺炎。
肺炎型（军团病）:重症、高热、咳嗽、肺炎、多器官衰竭死亡。
肺外感染型(继发感染):多脏器感染症状。
细胞免疫为主。
治疗首选红霉素。
２0１5年度临床助理医师微生物学考点:葡萄球菌属一.金黄色葡萄球菌(一)生物性状１、颜色和染色：无芽胞,无鞭毛2、培养特性:需氧或兼性厌氧。
培养营养要求不高。
属内不同菌种可产生金黄色、白色、柠檬色等脂溶性色素并使菌落着色。
■致病性葡萄球菌菌落呈金黄色,于血琼脂平板上生长后在菌落周围还可见完全透明溶血环（B溶血)。
3、生化反应：①多数能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气。
②致病性菌株能分解甘露醇,产酸。
③触酶（过氧化氢酶)阳性,可与链球菌相区分。
4、抗原:⑴葡萄球菌A蛋白(ＳPA)：存在于细胞壁上的表面抗原，可与IgG的Fc段结合，可进行协同凝集，并具有抗吞噬等生物学活性。
⑵荚膜多糖:有利于黏附和抗吞噬。
⑶多糖抗原：具有群特异性,存在于细胞壁。
５、分类：⑴按DＮA相关性分:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。
⑵按有无凝固酶(血浆凝固酶)分：凝固酶阳性菌、凝固酶阴性菌。
医学微生物学――第十六章 其他细菌
医学微生物学――第十六章其他细菌第十六章其他细菌第一节弯曲菌属弯曲菌属（Campylobacter）是一类呈逗点状或S形的革兰阴性杆菌。
有13个种，广泛分布于动物界，可引起动物和人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染。
对人致病的有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等，其中以空弯曲菌（C。
jejuni）空肠弯曲菌生物学特性形态细长，呈弧形、螺旋形、S形或海鸥状。
运动活泼，一端或两端有单鞭毛。
无芽胞，无荚膜，革兰阴性。
微需氧，需在5％O2、10％CO2和85％N2的环境中生长。
在36～37℃生长良好，但在42℃中选择性好，此温度可使粪便中其他细菌的生长受到抑制。
营养要求高，用含血清的培养基培养后，在同一培养基上可出现两种菌落，一种为灰白、湿润、扁平边缘不整的蔓延生长的菌落；另一种为半透明、圆形、凸起、有光泽的细小菌落。
生化反应不活泼，不发酵糖类，氧化酶阳性，马尿酸盐水解试验阳性。
有菌体（O）抗原、热不稳定抗原和鞭毛（H）抗原。
根据（O）抗原不同将空肠弯曲菌分为42个血清型。
抵抗力较弱。
培养物放置冰箱中很快死亡，56℃5min即被杀死。
干燥环境中仅存活3h，培养物放室温可存活2～24周。
致病性与免疫性空肠弯曲菌引起胃肠道感染主要是该菌产生细胞毒素和一种不耐热肠毒素，后者与大肠埃希菌的LT和霍乱肠毒素有部分抗原交叉。
空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一。
该菌常通过污染饮食、牛奶、水源等被食入，或与动物直接接触被感染。
由于空肠弯曲菌对胃酸敏感，经口食入至少104个细菌才有可能致病，该菌在小肠内繁殖，侵入肠上皮引起炎症。
临床表现为痉挛性腹痛、腹泻、血便或果酱样便，量多；头痛、不适、发热。
通常该病自限，病程5～8d。
机体感染空肠弯曲菌后可产生特异性抗体，能通过调理作用和活化补体等作用增强吞噬细胞的吞噬、杀灭细菌及补体的溶菌作用。
诊断与防治可用粪便标本涂片、镜检，查找革兰氏阴性弧形或海鸥状弯曲菌，或用悬滴法观察鱼群样运动或螺旋式运动。
嗜肺军团菌
➢ 1978年命名为嗜肺军团菌，属军团菌科军团菌属
01
形态与染色
嗜肺军团菌Giemsa染色 嗜肺军团菌镀银染色
嗜肺军团菌电镜图
两端钝圆小杆状，显著多形性 革兰氏染色阳性，但不易着色 Giemsa染色(红色) 镀银染色(黑褐色) 有菌毛、单端鞭毛
01
培养特性与生化反应
04
预防 治疗
目前尚无特异预防方法 治疗首选红霉素
legionella ['li:dʒənelə] 军团菌 Legionella pneumophila 嗜肺军团菌
嗜肺军团菌在BCYE培养基上生长现象
营养要求高，普通培养基、血平板上均不生长 必须含半胱氨酸和三价铁培养基才能生长
F-G培养基→F、G两人建立，主要成分磷酸铁+半胱氨酸 BCYE培养基→缓冲液-活性炭-酵母浸膏-半胱氨酸-硝酸铁
专性需氧，初次培养需2.5%CO2 最适温度35℃，最适pH6.4～7.2
生长慢，3～5d圆形、光泽、湿润、灰白色菌落，有特殊臭味
糖分解试验（-），氧化酶、过氧化氢酶（+）
01
抵抗力
自然界：生存能力强，在污水中可存活一年以上 对一般消毒剂敏感：1%甲醛、0.03%戊二醛、2%甲酸、70%酒精
02
致病物质→多种酶、内毒素、外毒素、菌毛
传播途径→呼吸道传播、气溶胶传播
嗜肺军团菌
Legionella pneumophila
作者：王传生
01
生物学性状
02
致病性与免疫性
03
微生物学检查
04
防phila, Lp)
➢ 1976年7月在美国费城退伍军人协会会议上，暴发了一种原 因不明的急性呼吸道传染病，在发病的221人中，34人死于 肺炎和其他并发症。当时病因不明，被称为军团病
其他细菌
铜绿假单胞菌 P. aeruginosa
* 铜绿假单胞菌俗称绿脓杆菌
* 是一种常见的条件致病菌，也是院内感染常见菌
* 因在生长过程中产生绿色水溶性色素，感染后的
脓汁或敷料上出现绿色，故得名
一、生物学性状
1. 铜绿假单胞菌的形态学特征
* 直或微弯G－杆菌，有荚膜，单端有1～3根
鞭毛，运动活泼
革兰染色
* 端生或侧生鞭毛，有微荚膜和菌毛 * 在组织中呈短杆状，人工培养基上呈
多形态性
2. 培养特性及抗原结构
* 需氧菌，营养要求高
* 抗原组成： 菌体抗原：分型依据，我国流行 1~6型 鞭毛抗原
3. 抵抗力
1）对化学消毒剂、干燥、紫外线较敏感 2）对氯或酸有一定抵抗
二、致病性与免疫性
1. 致病物质：
多种酶：磷酸酯酶 毒素：细胞毒素
菌毛 微荚膜
2.所致疾病：军团菌病
* 传播途径：
1)主要通过呼吸道吸入带菌飞沫 2)中央空调冷却塔用水污染军团 菌而导致感染
* 临床类型：
1)流感样型（轻症型） 2)肺炎型（重症型） 3)肺外感染
3. 免疫性
* 嗜肺军团菌为胞内寄生菌
* 细胞免疫在抗感染中起主要作用
心内膜炎、脓胸，也可引起菌血症、败
血症及引起婴儿严重的流行性腹泻 * 医源性感染
3. 免疫性
* 中性粒细胞的吞噬作用
* 分泌型IgA的黏膜表面免疫作用
第四节
假单胞菌属
* 假单胞菌属（Pseudomonas）： 位于变形菌门、γ-变形菌纲、
假单胞菌目、假单胞菌科。
* 该属包括一群G－杆菌，分布广泛
* 与人类关系密切的有：
铜绿假单胞菌（P.aeruginosa） 荧光假单胞菌（P.fluorescens）
不同年龄段嗜肺军团菌肺炎患儿的肺部临床表现及实验室检查分析
不同年龄段嗜肺军团菌肺炎患儿的肺部临床表现及实验室检查分析嗜肺军团菌肺炎是一种由嗜肺军团菌引起的肺部感染疾病，常见于不同年龄段的患儿。
嗜肺军团菌是一种革兰氏阴性杆菌，其在水族动物和环境中广泛分布。
在感染后，嗜肺军团菌可引起支气管肺炎、休克、多器官功能障碍综合征等严重并发症。
本文将对不同年龄段嗜肺军团菌肺炎患儿的肺部临床表现和实验室检查进行分析。
0-2岁儿童的肺部临床表现在0-2岁的儿童中，嗜肺军团菌肺炎的肺部临床表现常常不典型。
患儿可能出现发热、咳嗽、喘息、呼吸急促等症状。
由于儿童的免疫系统尚未发育成熟，因此他们对嗜肺军团菌的抵抗力较弱，易于感染。
在临床上，医生常常需要通过详细的病史询问和体格检查来判断患儿是否患有嗜肺军团菌肺炎。
儿童患者还可能出现食欲不振、烦躁不安、睡眠不好等全身症状。
实验室检查分析对于0-2岁的儿童，嗜肺军团菌肺炎的实验室检查主要包括痰培养、血培养、血液生化检查、C反应蛋白测定等。
痰培养是最常用的检查方法之一，能够明确病原体的种类和药敏情况。
血培养可以帮助医生判断是否存在菌血症，指导临床治疗方案的制定。
血液生化检查可以反映患儿的肝肾功能、电解质水平等情况，为临床治疗提供参考。
C反应蛋白测定则可以反映患儿的炎症程度，有助于判断疾病的严重程度。
3-6岁儿童的肺部临床表现在3-6岁的儿童中，嗜肺军团菌肺炎的肺部临床表现与成人患者相似，包括高热、咳嗽、胸痛、呼吸困难等症状。
儿童患者的免疫系统相对成熟一些，因此一般情况下能够更好地抵抗嗜肺军团菌的感染。
但由于肺部结构尚未完全发育，对于感染性疾病的耐受性相对较差，因此容易出现肺部感染。
实验室检查分析对于3-6岁的儿童，嗜肺军团菌肺炎的实验室检查主要包括痰培养、血培养、胸部CT 检查、肺功能检查等。
胸部CT检查可以清晰地显示肺部病变的情况，有助于确定病变的范围和程度。
肺功能检查可以帮助医生判断肺部功能是否受损，及时进行相应的治疗。
通过以上分析可以看出，不同年龄段的嗜肺军团菌肺炎患儿的肺部临床表现和实验室检查有所不同。
嗜肺军团菌毒力岛分子分型及其致病性研究进展
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综 述
文章 编 号 ：０ ９ ０ ０ （０ ７ １０ ２ － ４ １０ － ０ ２２０ ） － １５ ０ ０
形 成 中起 作用 。
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致 病 菌 ， 泛 分 布 于 天 然 淡 水 环 境 或 人 工水 域 中 ， 阿米 巴 体 内 广 在 寄生 ， 可 感 染 人 巨 噬 细 胞 ， 其 胞 内 繁 殖 和 杀 死 人 巨 噬 细 胞 ， 亦 在 是 引 起 军 团菌 病 （ 军团 菌肺 炎 ） 重 要病 原 体 ＿ 的 １ ］ 团菌 病 在 国 内 。军 外 时 有 暴 发 流行 ， 死 率 较 高 ， 中央 空 调 冷 凝 塔 水 系统 是 引起 病 而 军 团 菌病 的主 要传 染 源 ［１目前 已知 军 团 菌有 ４ 个 种 ７ ｚ。 ３ ８ ０多个 血 清 型 ， 中嗜 肺 军 团 菌 有 １ 其 ５个 血 清 型 ， 清 型 １ 引起 社 区 获 血 是 得性 肺 炎 和 医 院 内感 染 性 肺 炎 的 重 要病 源体 【 。我 们 就 嗜肺 军 明 团 菌毒 力 岛 、 子 分 型 及其 致 病 性 简 要概 述 如 下 。 分
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Ｌｇｏ ｅ ａｐ ｅｍ ｐ ｉ ｓｆ ｃｍ ｎ ｃｕｅ ｏ ｏ ｕ ｉ － ｃｕｒｄ ｒｓｉ ｔ ｒｃ ｉｆ ｔ ｎ ｎ ｎ ｏｃ— ｅｉ ｌ ｎ ｕ ｏ ｈｌ ｉ ｌ ｏ ｍｏ ａｓ ｆｃｍｍ ｎｔ ａｑ ｉ ｅｐｒ ｏ ｔ ｔ ｎ ｃｉ ｓａｄ ａ ｃａ ｎｌ ａ ｙ ｅ ａｒ ａ ｅ ｏ ｙ
不同年龄段嗜肺军团菌肺炎患儿的肺部临床表现及实验室检查分析
不同年龄段嗜肺军团菌肺炎患儿的肺部临床表现及实验室检查分析1. 引言1.1 嗜肺军团菌肺炎概述嗜肺军团菌肺炎，是由嗜肺军团菌引起的一种严重的肺部感染疾病。
嗜肺军团菌是一种革兰氏阴性杆菌，常见于自然水源中，可以通过呼吸道进入人体引起感染。
嗜肺军团菌肺炎病情严重，病死率较高，特别是对于免疫力较弱的特定人群来说更是危险。
嗜肺军团菌肺炎可表现为肺实质性炎症、肺组织坏死和脓肿形成，患者常出现高热、咳嗽、咳痰、呼吸困难等症状。
在临床诊断中，需要结合患者的症状体征以及实验室检查结果进行综合分析，及时制定合理治疗方案。
对于不同年龄段的患儿，肺部临床表现和实验室检查结果可能会有所不同，因此对不同年龄段的嗜肺军团菌肺炎患儿进行深入研究和分析，有助于提高对该疾病的认识，指导临床治疗，防止病情的恶化和传播。
.1.2 研究目的本研究旨在探讨不同年龄段嗜肺军团菌肺炎患儿的肺部临床表现及实验室检查分析，以增加对该疾病在不同年龄段的特点及规律的认识。
通过比较不同年龄段患儿的肺部临床表现及实验室检查结果，可以为临床医生更好地诊断和治疗嗜肺军团菌肺炎提供参考依据。
通过深入分析不同年龄段患儿的症状和实验室检查结果，有助于探讨疾病的发病机制、危险因素及预后，为临床实践提供更为全面的指导。
本研究还旨在为今后进一步开展相关研究提供基础和借鉴，以促进嗜肺军团菌肺炎的防治工作，提高患儿的治疗效果和生存率。
2. 正文2.1 婴幼儿患儿的肺部临床表现及实验室检查分析婴幼儿是一种易感人群，对嗜肺军团菌肺炎的感染风险较高。
在临床上，婴幼儿患儿常常表现为发热、呼吸困难、咳嗽、喘息等症状。
由于婴幼儿的抵抗力较弱，病情发展较快，因此及时的诊断和治疗尤为重要。
在实验室检查方面，嗜肺军团菌肺炎患儿的血常规检查通常会出现白细胞计数升高，中性粒细胞增多。
血培养和痰培养可以帮助确认病原体，有助于诊断。
婴幼儿患儿的胸部X线检查常常表现为双肺浸润影，甚至有腺泡状浸润。
这些影像学所见与临床症状相符合，有助于确诊。
嗜肺军团菌所要求的生物安全级别
嗜肺军团菌所要求的生物安全级别嗜肺军团菌所要求的生物安全级别众所周知，嗜肺军团菌是一种引起肺炎病症的病原菌，对人类健康造成了巨大的威胁。
为了保障公共安全和健康，科研机构、医疗机构和实验室必须遵守相应的生物安全规范，将嗜肺军团菌的实验和研究工作纳入生物安全管理之中。
根据风险评估和控制措施的不同，嗜肺军团菌所要求的生物安全级别可分为以下几类。
第一级别：BSL-1级（生物安全级别1级）BSL-1级是最低的生物安全级别，适用于对人体健康无任何危害的微生物，包括某些非致病性菌种。
因此，对于嗜肺军团菌这类具备致病性的病原菌而言，绝对不应该在这一级别下进行实验。
BSL-1级的环境要求相对较低，实验室操作人员只需要采取基本的个人防护措施，如穿戴实验服和手套等。
然而，对于嗜肺军团菌这类高致病性的病原菌，远远不能满足安全要求。
第二级别：BSL-2级（生物安全级别2级）对于嗜肺军团菌这类具备一定致病性的病原菌，适用的生物安全级别应为BSL-2级。
在这一级别下，实验室操作人员需要进行相关的培训和教育，严格按照操作规程进行病原菌的操作和管理。
实验室应有相应的安全设施和设备保障，确保实验过程中的安全性。
同时，实验室人员还需要采取适当的个人防护装备，如口罩、防护服和手套等。
实验室空气和废物处理也需要符合相应的安全要求。
第三级别：BSL-3级（生物安全级别3级）对于嗜肺军团菌这样高致病性的病原菌，BSL-2级已经不能满足安全需求，因此应提高到BSL-3级别。
BSL-3级要求更严格，实验室需要具备高度的安全设施和控制措施。
例如，实验室必须设置负压房间，以防止病原菌扩散；实验室人员必须经过专门的培训，熟悉操作规程并理解潜在风险。
此外，实验室还需要规范废物处理、空气过滤和防护设备的使用，以确保全面的生物安全。
综上所述，嗜肺军团菌所要求的生物安全级别应该至少是BSL-2级别，并严格按照BSL-2级别的相关要求进行操作。
当然，针对更高致病性的病原菌，如新型冠状病毒等，还需要更高级别的生物安全控制措施。
嗜肺军团菌dps-lp基因功能及其调控的研究的开题报告
嗜肺军团菌dps-lp基因功能及其调控的研究的开题报告
题目：嗜肺军团菌dps-lp基因功能及其调控的研究
一、研究背景
嗜肺军团菌（Legionella pneumophila）是一种致病性强的革兰氏阴性菌，能够引起严重的肺炎。
其致病性主要归因于其对宿主细胞的侵染和生长，从而导致炎症反应和组织损伤。
近年来，许多研究都着眼于该菌的基因调控及其对菌体生长和致病性的影响。
Dps-Lp是嗜肺军团菌中一个非常重要的蛋白质，被认为对该菌的抗氧化和DNA 保护功能具有重要作用。
此外，早期的研究发现，Dps-Lp表达的调控与其菌体生长和病原性密切相关，但其相关调控机制目前仍然不清楚。
因此，深入研究Dps-Lp的基因功能及其调控，将有助于进一步揭示嗜肺军团菌的生理和致病性机制。
二、研究目的
本研究旨在通过分析Dps-Lp基因的功能和调控机制，探索嗜肺军团菌的生理和致病性机制，为进一步研究该菌致病性提供参考。
三、研究方法
1.构建Dps-Lp基因差异表达系统，包括过表达和敲除基因系统，利用RNA测序和qPCR等技术分析Dps-Lp与其他基因的差异表达情况，确定Dps-Lp在细胞生长和病原性中的功能。
2.利用EMSA（电泳迁移实验）分析Dps-Lp基因转录因子的结合情况，探究其调控机制。
3.利用质谱分析技术研究Dps-Lp基因在不同环境下的蛋白质组成和调控情况，探索其对环境信号的响应机制。
四、研究意义
本研究将有助于深入了解嗜肺军团菌的生理和致病性机制，为在细胞水平控制嗜肺军团菌病理起点的防治提供重要贡献。
同时，该研究也为其他细菌及病原体的基因调控及其相关生理和致病性机制的研究提供经验和参考。
嗜肺军团菌致病机制及快速检测最新研究进展
!综述!嗜肺军团菌致病机制及快速检测最新研究进展鲁曦%!李王平%!李春梦7!孙瑞琳%!房延凤%!金发光%"#$"%&'()**+,-.'/'0112'%3*4536&7'7&%)'&%'&7;基金项目"国家自然科学基金资助项目#)%;*&&3*$唐都医院科技创新发展基金#7&%;9Db 9&&*$作者单位"*%&&()西安%第四军医大学唐都医院呼吸内科%*%7&&&西安%陕西省中医医院检验科7通信作者"金发光%<-.0="/02>.?@%3(',J -关键词 !嗜肺军团菌&!致病机制&!快速检测中图法分类号 F;3(文献标识码 G!!军团菌#+2&#*%2<<$$在%6*3年被首次报道%当时在美国费城参加退伍军人聚会的老兵中有%)7人出现了严重的肺炎症状%%4*人住院%76人死亡)%*+经过密切的调查之后%发现致病菌是一种革兰氏阴性杆菌%命名为嗜肺军团菌#+2&#*%2<<$8%2(1*80#<$$)7*+自军团菌首次报道之后很短的时间内%共发现了;&余种军团菌%其中至少74种与人类疾病相关+6&Z 以上的军团病是由嗜肺军团菌导致)(*%但在某些特定条件下%免疫缺陷患者可能对任何军团菌种普遍易感+嗜肺军团菌共有%;种血清型%在全世界范围内有)4Z 的军团菌感染是由血清%型引起+一项在法国的环境与临床对比研究中发现%嗜肺军团菌血清%型占环境中军团菌的7)Z %但却占患者体内分离到军团菌的6;Z )4*+其余人类易感军团菌包括"波兹曼军团菌#+2&#*%2<<$1#>=$=2#$,米克达德军团菌#+2&#*%2<<$1#>=$=2#$和长滩军团菌#+2&#*%2<<$<*%&Y 2$>0$2$共占人类军团菌感染的7Zg *Z )4*+军团病于%6)7年在我国南京首次报道);*以来%在我国成散发和小规模局部暴发%受到了我国政府和卫生部门的高度重视+因此%了解军团菌感染机制,熟悉军团菌最新的检测技术是控制军团病的关键所在+本文对该领域最新研究成果进行简要综述+一,嗜肺军团菌的致病机制%'嗜肺军团菌在真核细胞内复制的机制研究进展"嗜肺军团菌与真核细胞的相互作用%是理解该菌致病机制的关键+一般而言%吞噬体利用细胞内吞作用形成可以被消化的囊泡%随后与溶酶体融合后通过酸化和蛋白酶的作用将大多数微生物降解消化)3*+然而%含有军团菌的囊泡#+2&#*%2<<$,J 2S .0202?_B 10,=B 1%V E X $却能够推迟与溶酶体的融合)**+首先%通过P$5(激酶依赖#或非依赖$的方式发生军团菌内吞%形成VE X ))*%初级V E X 能够推迟溶酶体融合与酸化%在内吞作用发生的;-02内%V E X 开始募集内质网分泌的囊泡%这些囊泡原先是用于内质网和高尔基体之间物质交换的%在内吞作用之后的4g %&U %V E X 就利用了这些囊泡中的蛋白质在QR 中性的VE X 中%以二分裂的方式开始复制%并突破宿主细胞)6*+在VE X 形成之后的%)g 74U 之后才开始出现内吞作用的标志物#包括VG ]P 5%,组织蛋白酶"和F .K;$%而这些标志物在内吞大多数微生物之后的早期就会出现)%&*+最近研究发现%VE X 能够特异的招募F .K%分子%而非F .K7和F .K3+实验发现抑制F .K%活性%能够抑制嗜肺军团菌在胞内的复制)%%*&利用FY G 干扰技术发现D.L %和G L >%分子敲减%也能够抑制嗜肺军团菌在胞内的复制)%7*+此外某些证据表明%嗜肺军团菌对宿主细胞自噬的调控作用对其在胞内复制也十分重要%例如%与自噬有关的GS ?*和G ?S )表现出能够与VE X 短暂的交联%这种相互作用可能是利用自噬为嗜肺军团菌的胞内复制提供营养)%(*+但也存在一些相反的证据%例如自噬缺陷的宿主细胞并不影响嗜肺军团菌的复制)%4*+因此%自噬对嗜肺军团菌复制的影响仍需进一步研究+7'嗜肺军团菌进出真核细胞的分子机制研究进展"人们对于嗜肺军团菌如何进入真核细胞并最终释放和感染其他细胞的过程知之甚少+目前在该领域存在两种假说%其一为利用宿主传统的内吞作用进入细胞的假说"例如研究人员发现了某些哺乳动物细胞和阿米巴虫%能够通过卷吞噬作用#,J 0=02?QU.?J ,T S J 101$使嗜肺军团菌进入宿主%但这种机制#卷吞噬作用$发生频率很低)%;*&再比如骨髓来源的巨噬细胞通过大胞饮#-.,L J Q02J ,T S J 101$作用使军团菌进入宿主)%3*&此外还有经典的拉链样机制和调理素依赖的吞噬机制)%**%都属于支持嗜肺军团菌利用宿主内吞作用进入细胞的证据+此外%即使像P$5(激酶介导内吞这种有较多证据,且相对成熟的机制也同样存在争议"例如最近的一项研究%利用P $5(激酶抑制剂#N J L S -.2202$并没有显著影响巨噬细胞对嗜肺军团菌的内吞作用)%)*+第二种假说是毒力因子介导的侵袭作用"其证据包括非吞噬细胞中的实验%例如G ;46%E R #5\%和R B V .细胞实验均支持这一假说)%657%*+目前已发现有;种蛋白与嗜肺军团菌侵袭相关%他们分别是<2UE ,V Q2<,F S ^G ,V _U87和R S Q8%其中研究得相对透彻的是R S Q8蛋白%当嗜肺军团菌进入宿主细胞形成VE X 之后%R S Q8蛋白在宿主细胞和V E X 中表达上调)77*+最新研究结果表明R S Q8对于募集线粒体至初始V E X 的过程中起到了关键作用)7(*+('嗜肺军团菌基因组"截至作者发稿#7&%*年%7月$%已有3*株嗜肺军团菌基因组被完整测序%M E Z 介于()'%Zg ()'3Z %基因组大小介于7'3)]g ('*)],预测基因数量介于764;g(;%7个+根据生物信息学比对分析%发现不同嗜肺军团菌基因组中有)&Z 左右的基因同源%只有%&Z 左右的基因为菌株特异性+研究发现%这些菌株特异性基因组!%&%!中华肺部疾病杂志 电子版 !7&%)年&7月!第%%卷第%期!E U029V A2?"01 <=B ,S L J 20,<C0S 0J 2 W B KL A.L T 7&%) X J =%% Y J '%区域的M E含量与全基因组平均M E含量存在较大差异%例如费城%型株特异性基因组到包含一个S L K+S L.区域和若干外排泵基因)74*+推测这些区域可能是通过种间的基因水平传播获得)7;*+而对于嗜肺军团菌的核心区域编码%基本与感染宿主,复制等过程相关%这些核心区域高度保守)73*+系统进化树分析发现%嗜肺军团菌共有四大谱系%但各种谱系与菌株分离的地理位置以及流行性并不相关)7357**+以上实验说明嗜肺军团菌具有高度多样性%目前难以从基因组水平判断某种嗜肺军团菌的感染能力+4'嗜肺军团菌毒力因子研究进展"嗜肺军团菌不仅具有多种传统的细菌毒力因子%例如脂多糖#=0QJ QJ=T1.,,U.L0CB%V P D$,鞭毛#>=.?B==A-$,$型分泌系统和外膜蛋白等%还能够利用"J S+$,-4型分泌系统向真核宿主细胞内传递将近(&&种效应蛋白%并影响宿主生理活动+下面对这种嗜肺军团菌特有且具有十分重要的分泌系统的研究进展进行简要概述+目前研究发现%"J S+$,-4型分泌系统组分几乎参与了胞内生存嗜肺军团菌的各种生理活动%例如嗜肺军团菌进出宿主细胞,胞内复制,V E X形成,甚至能够抑制宿主细胞凋亡+该系统分为两个致病域%其中(区由CJ S"E8和CJ S G5 0,-X H a基因编码)7)*%$区由%)个不同型的CJ S和0,-基因编码)76*+"J S+$,-4型分泌系统组成的跨膜蛋白在嗜肺军团菌表面形成一种类似菌毛的结构%能够插入宿主细胞质膜和V E X膜进而传送多种效应蛋白+例如V0CG%作为该分泌系统最早鉴定的效应分子%与F.K的捕获识别相关%能够识别包括F.K%,F.K3和F.K)在内的多种F.K1)(&5(%*+D0C]分子能够专一性识别F.K%分子%具有(个结构域%其中Y端结构域负责修饰F.K%%E端参与该分子与V E X膜的锚定作用)(75((*+总之%"J S+$,-4型分泌系统在利用宿主细胞调控囊泡转运,形成V E X%进而逃避降解,抑制宿主细胞凋亡并参与复制中均起到了关键性作用+;'嗜肺军团菌感染的免疫应答#%$嗜肺军团菌感染的固有免疫应答"军团菌感染的各种动物模型中发现豚鼠对嗜肺军团菌易感%气溶胶暴露(C即可出现军团菌感染的症状)(4*%但是绝大多数小鼠却对除长滩军团菌#+7<*%&Y2$>0$2$之外的军团菌产生天然抵抗%而这为研究对军团菌的免疫应答提供了有利条件+研究发现对军团菌高度抵抗的E;*8V3小鼠%(号染色体中=?2%位点存在一系列高度多态性的重复序列%其中包括神经元细胞凋亡蛋白#Y.0Q$%和棒状病毒$P G#80L,%$都与嗜肺军团菌易感性相关)(;5(**+Y.0Q;是一种细胞内鞭毛蛋白识别分子%一旦巨噬细胞吞嗜肺军团菌%Y.0Q;会立刻激活,.1Q.1B5%%进而导致$V5%"产生%并促进V E X与溶酶体融合%最终将嗜肺军团菌降解)(**+同时发现Y.0Q;的敲除能够逆转对嗜肺军团菌在细胞内复制的限制作用)()5(6*+一项最新的研究发现% ]T"))%一种I J==样受体的配体分子的敲除%能够增加小鼠肺内嗜肺军团菌载量%降低嗜肺军团菌感染小鼠的生存率)4&*+虽然小鼠感染模型研究已比较透彻%但是对人感染嗜肺军团菌的固有免疫应答仍知之甚少+在一项回顾性分析研究中发现%嗜肺军团菌感染患者的$W Y57水平比非军团菌感染患者低)4%*%提示$W Y57产生能力降低%与嗜肺军团菌的易感性相关+军团菌感染后宿主细胞以释放I U%型细胞因子以限制军团菌的复制)47*+此外对于军团菌易感人群的研究中发现%I V F多态性是军团菌感染的独立风险因素%I V F;在(67位为终止密码子的I V F;(67DI#P型在人群中的比例大约为%&Z%但军团菌易感性却显著高于其他类型I V F;的人群)4(*+#7$嗜肺军团菌感染的适应性免疫"尽管多种炎症反应对于机体控制军团病的进展十分重要%但是I细胞和8细胞对于清除感染依然不可或缺+例如"在小鼠体内的研究发现%利用E";或E")I细胞的单克隆抗体处理小鼠%能够降低嗜肺军团菌感染小鼠的生存率%并且会极大的加速感染模型中军团菌的清除时间)44*%然而%对于上述免疫细胞如何被激活并产生保护作用的具体机制仍然知之甚少+小鼠骨髓来源的树突细胞或巨噬细胞被嗜肺军团菌感染后能够刺激E"4I细胞产生$W Y57%同时发现E"4I细胞的激活有赖于V E X的形成并且抑制与溶酶体的融合作用)4;*+以上结果提示%虽然宿主内的嗜肺军团菌存在于V E X中%但依然能够为E"4I细胞提成抗原+例如%感染嗜肺军团菌的小鼠%"E细胞能够上调E a(E V%趋化因子%进而诱导I细胞激活)43*+在人类嗜肺军团菌感染的研究中已证实存在细胞介导的免疫反应%但成果有限+根据临床观察发现%接受激素治疗和艾滋病%以及某些类型的血液疾病是罹患军团菌病的风险因素)4**+二,嗜肺军团菌检测技术进展%'传统微生物培养法"军团菌的分离培养是军团病确诊以及流行病学研究的金标准%该方法是利用了嗜肺军团菌在M X P E和8E b<琼脂平板上生长%但在V5半胱氨酸缺失的8E b<琼脂平板上不生长这一特点%再经进一步生化试验和血清学实验进行确认的技术+菌落一般呈灰白色%偶见紫色或蓝绿色+虽然该方法检测周期长%不利于现场快速诊断%但该技术结果可靠%而且对于获得军团菌完整信息%例如研究其基因背景,耐药性或分子分型依然十分必要+7'免疫学检测技术"抗体检测"患者体内特异性$?]能够作为军团菌感染的早期诊断依据%常用的检测方法包括间接凝血实验#02C0L B,S UB-.??=AS02.S0J2%$R G$,酶联免疫吸附测定法#B2l T-B5=02OB C0--A2J1J L KB2S.11.T%<V$DG$,微量凝集实验#-0,L J.??=AS02.S0J2B^QB L0-B2S%]G I$等%其中$R G可以诊断嗜肺军团菌%54型血清型的抗体&<V$DG用于检测军团病疑似患者体内特异性$?M水平%常用于流行病学回顾性分析)4)*+虽然免疫学检测受限于患者免疫状态%并且存在与其他病原体交叉的情况%尤其是难以对急性感染和既往感染进行鉴别%不过%抗体检测技术操作简便%目前仍在使用+抗原检测"通过对疑似患者呼吸道分泌物进行直接免疫荧光检测%能够快速特异的检测%但该技术灵敏度低%与某些致病菌#例如铜绿假单胞菌$存在交叉反应+此外%尿抗原是临床上常用的军团菌检测方法%该方法检测靶点为军团菌细胞壁的热稳定性V P D+由于军团菌尿抗原会在感染后%C即可检出并持续若干天%目前已有多种尿抗原检测产品评价的论文发表)46*+该技术操作简单%样本易获取%可用于早期诊断%但该技术目前只能对嗜肺军团菌%型血清型进行检测%且成本较高+('基于脂肪酸检测技术进展"脂肪酸分型技术是根据!7&%!中华肺部疾病杂志 电子版 !7&%)年&7月!第%%卷第%期!E U029V A2?"01 <=B,S L J20,<C0S0J2 W B KL A.L T7&%) X J=%% Y J'%微生物短链脂肪酸#E65E%&$种类和含量的特异性与多样性%利用气相色谱仪对微生物短链脂肪酸进行鉴定%并与数据库进行比对%从而快速准确的对微生物进行鉴定和分型的新技术);&*+目前该技术获得美国E"E和W"G认证%具有较高的应用价值+但该方法只能对分离得到的菌株进行检测%而无法对环境或临床样本直接检测+4'核酸水平检测技术进展#%$基于P E F的检测技术"P E F是一种可靠的核酸扩增技术%对于嗜肺军团菌%常利用-0Q基因和%3D L F Y G作为靶基因进行检测%-0Q基因具有嗜肺军团菌种特异性&而%3D L F Y G基因不仅可以用于嗜肺军团菌的特异性检测%而且能够对军团属进行鉴别);%*+目前常用荧光定量P E F对临床及环境样本直接检测%具有快速灵敏的特点%而且是目前除分离培养技术之外唯一被写入标准技术规范的检测方法+ #7$基于等温扩增的检测技术"等温扩增技术也属于核酸扩增技术%种类较多,发展迅速+由于扩增温度恒定而不需要依赖P E F仪%具有简便,快速,灵敏的特点更加适用于现场快速检测%目前主流技术包括Y G D8G,R G",F E G和V G]P技术+由于V G]P技术成本较低%目前国内外多家体外诊断试剂公司已成功开发除军团菌检测试剂盒并上市+虽然等温扩增技术原理复杂%但是操作简单%有利于推广应用);7*+#($基于探针杂交的检测技术进展"利用探针杂交技术应用于军团菌的检测%具有一定前景%由于可将探针连接在芯片上从而实现高通量检测%同时不仅能够对军团菌的属,种进行鉴定和鉴别%同时还能够了解军团菌的毒力基因和耐药基因等遗传背景信息+该技术的高通量特点极大节省了人力%但由于操作复杂%依赖复杂的仪器设备和人员数据处理能力%目前尚未普及+#4$基于二代测序的检测技术进展"二代测序是相对于焦磷酸法测序#一代$而言的高通量测序技术%目前市场上主流使用的是$==A-02.公司生产的各型号测序平台以%而罗氏公司的4;4测序仪已经退出市场+二代测序平均读长约为几百KQ%可以通过提高测序深度达到提高分辨率和灵敏度的目的+二代测序的问世极大降低了每个碱基测序成本%为深入进行军团菌的基因组,转录水平研究提供了有力工具);(*+此外基于%3D的测序也为嗜肺军团菌所处环境的菌群研究提供了技术保证+虽然嗜肺军团菌属于环境微生物%但它能够在真核细胞内复制%并且逃避宿主免疫系统攻击而导致严重的肺炎+随着高通量测序技术的推广%越来越多军团菌菌种以及它们的毒力因子和效应蛋白被发现%极大地加深了人们对该物种的了解%提高了对嗜肺军团菌胞内复制,毒力分泌和侵袭的认识+这必将有助于人们理解嗜肺军团菌的进化方式和流行病学特征%也必将有助于开发新型军团菌检测技术和军团病的治疗方法%对于控制嗜肺军团菌在人群中的爆发和传播提供有力保障0参!考!文!献%!W L.1B L"H%I1.0I F%#L B21S B02H%B S.='+2&#*%%$#92@c C01B.1B"CB1,L0QS0J2 J>.2B Q0CB-0,J>Q2B A-J20.)9*'Y<2?=9]B C%%6**%76*#77$"%%)65%6*'7!8L B22B L"9%DS B0?B L N.=S G M%],".CB9<'E=.110>0,.S0J2J>S UB+2&#*%%$#92@C C01B.1B K.,S B L0A-"+2&#*%2<<$8%2(1*80#<$%?B2A12J_A-%1QB,0B1 2J_.%J>S UB>.-0=T+2&#*%2<<$>2$2%>.-0=0.2J_.)9*'G22$2S B L2 ]B C%%6*6%6$"3;353;)'(!b A X V%P=J A>>B9W%P.1S J L01]E%B S.='"01S L0KAS0J2J>+2&#*%2<<$ 1QB,0B1.2C1B L J?L J AQ101J=.S B C KT,A=S AL B02Q.S0B2S1N0S U1QJ L.C0, ,J--A20S T5.,oA0L B C=B?0J2B==J101".202S B L2.S0J2.=,J==.KJ L.S0_B 1AL_B T)9*'9$2>B,S"01%7&&7%%)3#%$"%7*5%7)'4!]ACB L F F%b A X V'$2>B,S0J2CAB S J V B?0J2B==.1QB,0B1J S UB L S U.2V' Q2B A-J QU0=.)9*'E=02$2>B,S"01%7&&7%(;#)$"66&566)';!康晓明%汤忠群%夏锡荣'嗜肺军团菌感染%例报告)9*'解放军医学杂志%%6)7%*#4$"74&'3!M.L029%"0B l F%\0B>>B L D%B S.='I UB QU.?J1J-B QL J S B J-B"0210?US 02S J QU.?J1J-B>A2,S0J21)9*'9E B==80J=%7&&%%%;7#%$"%3;5%)&' *!\.?.29E%F J T E F'+2&#*%2<<$80$&*@*12@02S B L,B QS_B10,A=.L S L.>>0, >L J-B2CJ Q=.1-0,L B 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2021临床医学 病原生物学和免疫学-医学微生物学-其它致病菌-嗜肺军团菌
* 军团菌是引起军团病的病原体，首发于1976 年的美国退伍一次聚会，故称作 军团病。
* 军团菌在自然界普遍存在，在天然水源及人工冷、热水管系统更 多见。
第一页，共七页。
嗜肺军团菌 一生物学性状
1 嗜肺军团菌的形态学特征
* G-杆菌，常规染色不易着色 Giemsa染色：呈红色 Dieterle镀银染色：呈黑褐色
第七页，共七页。
一般取下呼吸道分泌物、肺活检组织或胸腔积液等标本进 行细菌学检查。首选红霉素治疗。
第六页，共七页。
内容总结
* 军团菌是引起军团病的病原体，首发于1976 年的美国退伍一次聚会，故称作军团病。* 军团菌是 引起军团病的病原体，首发于1976 年的美国退伍一次聚会，故称作军团病。* 军团菌在自然界普遍存 在，在天然水源及人工冷、热水管系统更多见。培养基：活性炭-酵母浸出液琼脂〔BCYE〕培养基F-G〔 Feeley-Garman〕琼脂培养基。抵抗力较强 ：在蒸馏水中可存活100天以上，在下水道可存活1年。肺炎 型〔重病型〕
• 抵抗力较强 ：在蒸馏水中可存活100天以上，在下水道可存活1年。对热和化学 消毒剂敏感。
第三页，共七页。
二致病性与免疫性
* 致病物质：微荚膜、菌毛、毒素和多种酶类
* 所致疾病：军团病
流感样型〔轻型〕
肺炎型〔重病型〕 肺外感染
医院内感染
污染中央空调、冷却塔水后引起
第四页，共七页。
三微生物学检查与防治
* 端生或侧生鞭毛，有微荚膜和菌毛 * 在组织中呈短杆状，人工培养基上
呈多形态性
第二页，共七页。
2 培养特性、抗原结构及抵抗力
• 培养基：活性炭-酵母浸出液琼脂〔BCYE〕培养基F-G〔Feeley-Garman〕琼脂 培养基
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四、防 治 原 则
预防
（1）加强卫生管理，改善营养条件。
（2）早期发现和治疗病人 （3）接种卡介苗
治疗
链霉素、利福平、异烟肼、对氨水杨酸为第一线药物, 强调联合用药、足疗程，防止耐药性、减少毒性。
麻风分枝杆菌
M.leprae
是引起慢性传染病麻风的病原体。
Mycobacterium leprae
白喉棒状杆菌
四、防 治 原 则
人工主动免疫 人工被动免疫 药物预防：青霉素、红霉素、氯霉素 抗毒素治疗
白喉棒状杆菌
嗜肺军团菌
Legionella pneumophila
嗜肺军团菌
1976年新发现的菌属。各种天然水源及冷、 热水管道系统（如自来水、空调系统、冷却 水塔）是本菌的储存场所。
混合反应 6～18h红肿, 4～7d达峰
同前
6～18h红肿 3～4d反应消退
有免疫力，超敏反应
免疫力，超敏反应
原理：毒素抗毒素的中和作用原理
三、微生物学检查法
标本
直接涂片镜检:可作初步诊断 分离培养 毒力试验： 1、体外法：SPA协同凝集反应 2、体内法：动物（豚鼠）试验
白喉棒状杆菌
对照
试验
试验前腹腔注射白喉抗毒素250-500U 皮下注射待检菌的48h培养液
白喉外毒素的组成及其毒性作用; 了解：麻风病防治原则；锡克试验。
呼吸道感染细菌
概念：经呼吸道传播，主要引起呼吸道器 官或呼吸道以外器官病变的一类细菌。 范围：
1、结核分枝杆菌 2、白喉棒状杆菌 3、嗜肺军团菌 4、百日咳鲍特菌 5、流感嗜血杆菌 6、肺炎克雷伯菌
结核分枝杆菌
M.tuberculosis
掌握：
分枝杆菌的共同特性；
结核杆菌细胞壁脂类含量与其染色性、培养特性、抵抗力和致病 性的关系；结核杆菌的致病性与免疫性；结核菌素试验的原理、
结果意义及应用价值；
白喉棒状杆菌的生物学特点、致病性、特异性防治; 熟悉：结核杆菌的微生物学检查原则及特异性预防；麻风杆菌的
致病特点、微生物学诊断。
一、生物学性状
麻风杆菌形态、染色与结核
杆菌相似，常在细胞内呈束状或
团状排列，外观似松叶或烟丝撒 落在纸上为其特点。含菌的细胞 浆呈泡沫状，称麻风细胞。 典型胞内菌 人工体外培养迄今尚未成功。
动物感染模型：小鼠足垫模型、犰酴模型
二、致病性与免疫性
传染源：瘤型麻风 病人为主要传染源 传播途径：呼吸 Nhomakorabea、接触传播
不完全吞噬
胞内菌
致病性
肺结核的两种表现
原发感染 原发后感染
原发综合征：原发灶、 淋巴管炎、肺门淋巴结 肿大
病程呈慢性渐进性，伴有乏力、 体重减轻、咳嗽、盗汗、午后潮 热、胸痛等。病灶多局限呈干酪 样结节，若结节破溃，则可形成 空洞，传染性强。
1、细胞免疫为主,为传染免疫（infection immuity)/有菌免疫， 2、免疫与变态反应共存
细胞免疫功能（4）在未接种BCG的人群中调查结核病的 流行情况。
三、微生物学检查
临床资料、细菌学检查、放射学诊断仍是目前肺结
核诊断的主要依据，其中细菌学检查具有确诊意义。
标本采集和集菌
直接涂片镜检：抗酸染色
分离培养 动物试验
检测鉴定新技术：PCR、核酸探针、DNA RFLP、色
谱分析技术、Bactec TB-460系统等
肉芽肿损害
色素减退 感觉缺失
以细胞免疫为主
三、微 生 物 学 检 查
标本采集：鼻粘膜或皮损
涂片染色镜检
病理组织切片检查
麻风菌素试验：不能用于诊断，但可用于分型及
了解麻风患者及接触者的预后。
四、防 治 原 则 防
目前尚无特异性预防方法 普查、定期检查，早期发现，早期隔离 BCG预防有一定效果
抵抗力
对湿热抵抗力不强，但对寒冷和干燥抵抗力强。 对青霉素、氯霉素、红霉素敏感。
白喉棒状杆菌
致病性
二、致病性与免疫性
溶原性转换
致 病 物 质 ： 白 喉 外 毒 素
Electron micrograph of corynebacteriophage ß, which carries tox
瘰痨分枝杆菌、 鸟-胞内分枝杆 菌、蟾分枝杆菌、偶发分枝杆菌 麻风分枝杆菌
一、生物学性状
形态与染色
形态：细长略带弯曲或直的杆菌，有时有 分枝；在不同条件下形态不尽相同， 呈现多形性。 大小：1～4×0.4μ m 排列：常聚集成团 染色性：齐-尼抗酸染色阳性（红色）
Much颗粒
培养特性
专性需氧。生长缓慢，约18小时分 裂1代，2-4周才见菌落生长。 营养要求高，初次分离常用含有蛋黄、甘油、马铃薯、无 机盐和孔雀绿的Lowenstein-Jensen(罗氏）培养基。 典型菌落：粗糙型。菌落呈颗粒、结节或菜花状，乳白色 或米黄色、粗糙、不透明。 液体培养基：在管底开始生长，最后 在表面形成菌膜。结核杆菌有毒株呈 索状生长，细菌排列呈索状。
M. tuberculosis
Bacteria reproduce in macrophages
Lesion begins to form (caseous necrosis) Activated macrophages Bacteria cease to grow; lesion calcifies Immune suppression Spread to blood organs Reactivation Death Phagocytes, T cells, and B cells trying to kill bacteria
传染免疫（infection immuity)/有菌免疫——即只有当TB菌在体 内存在时才有免疫力，一旦体内的TB菌被杀灭，免疫也随之消失。
结核菌素试验
是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌是 否能引起变态反应的一种试验。 原理：迟发型变态反应 试剂：OT（tuberculin)、PPD
The cervical lymph nodes enlarge causing oedema of the neck (a classical condition of ‘bullneck’)
传染源：患者和带菌者
传播途径：飞沫、接 触被污染的物品
皮肤白喉
咽白喉 咽炎 假膜阻塞性缺氧 发热 淋巴结炎
一、生物学性状
形态与染色
形态：菌体细长微弯，一端 或两端膨大呈 棒状； 排列：不规则，常成V、L 及栅栏状。
染色性：G+
美蓝染色：菌体着色不均， 有浓染颗粒。 Neisser /Albert染色：有异染颗粒。
白喉棒状杆菌
培养特性
Loffler （吕氏）血清斜面 上 生 长迅 速 ， 12 ～ 18 小时 生成细小、灰白色、湿润、 圆形凸起的菌落。 鉴别培养基：亚碲酸钾血 琼脂平板上，菌落呈黑色。
Lesion liquefies
Bacteria coughed up in sputum
TUBERCULOSIS
Large caseating tubercle Miliary tubercles
HUMAN LUNG
HUMAN LUNG
Clinical features with AIDS
• systemic disease (versus pulmonary) – greater in AIDS • lesions often lepromatous
（4）蜡质D：具有佐剂作用，可激发机体产生迟发型变态反应。
（5）硫酸脑磷脂：抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合，使其能在 吞噬细胞中长期存活。
2、蛋白质：
主要成分是结核菌素。与蜡质D共同作用引起迟发型变态反应。
3、分枝杆菌生长素：
脂溶性的铁螯合剂。
致病性
致 病 物 质
蛋白质 脂质
结 核 杆 菌 细 胞 壁 上 的
生化反应：不活跃
糖发酵（-） 人型可合成烟酸和还原硝酸盐，而牛型不能。
结核杆菌触酶（+）、热触酶（-），而非结核分枝杆菌均为（+）
抵抗力：较强
抗干燥，耐酸硷，对多种染料有抵抗力 对紫外线敏感，可用于患者衣物的消毒 对链霉素、利福平、异烟肼、环丝氨酸、乙胺丁醇、卡那霉
素、对氨水杨酸敏感，但长期用药易出现耐药性。
白喉外毒素
催化功能区
A片段 受体结合 功能区
B片段
穿膜功能区
Diphtheria Toxin (DT)
Cleaved to yield A/B fragment, joined by S-S bond - A (catalytic domain) - B (transmembrane and receptor binding domains)
循环并发症：
毒性外周神经病、 致病性 毒性心肌炎和充 血性心衰
Elek immunodiffusion test.
免疫性
病后可产生牢固的免疫，抗毒素是保护性抗体。
Schick test结果分析
试验侧 对照侧 本质
阴性反应
阳性反应
–
24～48h , 4 ～ 7d达峰
–
–
有免疫力
无免疫力
假阳性反应 6～18h红肿,1～2d消退
耐药性的变异
磷脂 脂质
致 病 物 质
蛋白质
分枝菌酸 索状因子 蜡质D 硫酸脑苷脂 结核菌素最重要
分枝杆菌生长素
二、致病性和免疫性
1、脂质
（1）分枝菌酸：细胞壁脂质中的主要成分，与抗酸性有关。 （2）磷脂：促使单核细胞增生，引起结核结节形成与干酪样坏死。 （3）索状因子：能破坏细胞线粒体膜，抑制白细胞游走和引起慢性肉 芽肿。