总黄酮测定(优选.)
刺梨总黄酮的含量测定及资源利用
刺梨总黄酮的含量测定及资源利用
杜薇;刘国文
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2003(024)001
【摘要】目的:测定刺梨中总黄酮的含量,为进一步天发利用贵州丰富的刺梨资源提供科学依据.方法:正交设计优选刺梨中总黄酮的提取条件,用芦丁作对照品、三氯化铝作显色剂、测定波长在420nm、比色法测定刺梨中总黄酮含量.结果:优选提取条件是:用65%乙醇提取4h、每次提取体积100ml、提取一次.测定刺梨中总黄酮的含量,1、2、3号样分别为0.773%、0.874%、0.893%.结论:优选提取方法效率高,含量测定方法操作简便,准确,稳定性好.
【总页数】3页(P112-114)
【作者】杜薇;刘国文
【作者单位】贵阳中医学院药学系,贵阳,550002;贵阳中医学院药学系,贵
阳,550002
【正文语种】中文
【中图分类】TQ041
【相关文献】
1.正交试验优选槐角总黄酮的提取工艺及不同来源槐角中总黄酮的含量测定 [J], 韦华梅;闫腾蛟;林宜沛;王剑波
2.三种黔产淫羊藿不同部位总黄酮的含量测定及资源利用 [J], 陈惠玲;吴珍云;魏升
华
3.刺梨中总黄酮的含量测定分析 [J], 马超
4.枸杞总黄酮提取工艺优化及不同年份枸杞总黄酮含量测定 [J], 刘元林; 龙鸣; 田晓静; 张福梅; 陈士恩; 马忠仁; NuruI Izza Nordin
5.8种川产商品淫羊藿总黄酮的含量测定及资源利用 [J], 张艺;肖崇厚;孟宪丽;刘永源;钟国跃
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正交试验法优选田基黄中总黄酮提取工艺
分别精密量取一定浓度芦丁标准溶液 ０ 、 ．、 ． １ ５ ０
２０ ．、４０ ． ６０ ， 于 ５ｍＬ 容量瓶 中， ．、３０ ．、５０和 ． 置 ｍＬ ０
现代药理研究表明田基黄具有抑菌作用 ，保肝 作用 ， 抑制肿瘤作用 ， 对心血管系统作用， 目前田基 黄已被制成注射剂用于临床治疗急、慢性肝炎【 。 】
按 照１ ． ．２ ２ 方法测定 ，计算出相对平均标准偏差 ，
第 ｌ 期 ２
易运红等 ：正交试验法优选 田基黄中总黄酮提取工艺
２ ｌ
ＲＤ ．６ Ｓ 为０ ５ ％。仪器的精密度 良 。 ４ 好
１ ． 稳定性试验 ．４ ２ 在加入 １％ Ｎ Ｏ 后０ １ｍｉ￣内测定 ，计算 ０ ａＨ ，２ ｎ － ；
此本 文就 提取 工艺展 开研 究 。
１ ． 得芦丁浓度 ｘ 与吸光度 ｙ关系曲线的回归方程 式 ： ．． Ｘ ０ ０１ ， ５ －． ２ ，相关系数 ：Ｒ＝ ． ９ 。浓 ２７ ０ ２０ ９ ５ ９
度在 ０ ０．． ５ ｇ Ｌ范围内线性关系良好 。 ．５ ０ ｍ／ ０ ０２ ｍ
０． ５ ３ ｙ １ ５７ 一 ０ ００ ２ ｘ ２１
中图分类号 ：Ｒ ５ ２ ． ８５ 文献标识码 ；Ａ 文章编号 ：１ ７－９ ５２ １） ０ ００ ６ １ ０ （０ ０． ２ ．３ ９ ０
田基黄味甘、微苦 ，性凉，具有清热利湿 、散 瘀止痛 、消肿解毒 的功效临床用于治疗急、慢性肝
加蒸馏水使体积达到 １ｍ ， ６ Ｌ分别加 ５ ａ Ｏ Ｌ ％Ｎ Ｎ ２ ｍ ， ２
摇匀， 放置 ６ ｉ 后分别加 １％ Ａ （ Ｏ ）２ Ｌ摇匀， ｍｎ ０ Ｉ ３ ｍ ， Ｎ ３ 再放置 ６ ｉ后分别加４ ａ Ｈ２ ｍ ， ｍｎ ％Ｎ Ｏ Ｌ加水至刻度， ０
蒲桃总黄酮提取工艺的优选
２２３最佳条件 的选择 ．－ 根据表 １表 ２进行正交试验 ， ， 结果见表 ３ 。为了确定显著 性 因子 ， 对表 ３ 进行方差分析和显著性检验 ， 结果见表 ４ 。 表 ３正交实验设计及结果表
设 计 列 号
ｌ ２
３
Ａ １
１ １
ｌ
Ｂ ２
１ ２
１２试 剂 ．
６
７ ０
２０： １
３０： １
２ ０
５ ０
芦 丁 标 准 品 （ 国 药 品 生 物 制 品鉴 定 所 ）， ｔ Ｈ ， ａ Ｏ ， 中 ＥＯ Ｎ Ｎ 。 Ａ （Ｏ） Ｎ Ｏ 所有试剂均为分析纯 。 ＬＮ ，， ａ Ｈ， ２方 法 与 结果 ２１比 色法 测 定 总黄 酮含 量 ． ２１ ．２测 定方 法 ．
３
２ ３
１
１ ．７ ０ １ １ ｌ ０５
ｌ ．５ １３
８ ９ ． ６ ９ ７ ４
７ ８ ．１
准确 称 量 卢 丁 标 准 品 １．０ｍｇ于 ５ ｍＬ烧 杯 中 ， 以 ４ ＯＯ ０ ０ ｍＬ ０ ６％的 乙醇溶解 ， 并定容于 ５ ｍＬ容量瓶 中 ， ０ 浓度为 ０２，。 ． Ｌ ｇ ２１ ．． ４标准 曲线的绘制 准确移取 卢丁标准溶 液 ０ ，．，．，．，．，． Ｌ 分别 置 ． １ ２０ ３ ４０ ５Ｏ ， ０ ０ ０ ａ ｒ 于 １ｍＬ容量瓶 中，按 ２１ ０ ．２操作 ，以相应试剂作空 白，在波长 ． ５ ０ ｍ处 测定 吸光度 ， １ｎ 用最 小二乘法经线性 回归 ， 浓度 ｃ与吸 得 光 度 Ａ的线 性 回归方 程 式 ： ９ ３ ９ ＋ ． ９ ．相 关 系 数 ｒ Ａ＝ ． ２ Ｃ ００ ３ ７ ２ ＝
碱韭总黄酮含量测定方法优选
分析检测碱韭总黄酮含量测定方法优选高雪峰1，高 健1，杨昱萍1，门中华1，董贵成2，赵 鹏1*（1.内蒙古科技大学包头师范学院 生物科学与技术学院，内蒙古包头 014030；2.内蒙古农业大学 生命科学学院，内蒙古呼和浩特 010011）摘 要：目的：筛选适用于测定碱韭总黄酮含量的试验方法，并对不同采集年份、不同部位碱韭总黄酮进行分析评价。
方法：以芦丁为对照品，碱韭叶为试验材料，对比NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法、AlCl3比色法、直接测定法对碱韭总黄酮含量测定的影响。
然后对AlCl3比色法测定条件（显色时间、AlCl3加入量、显色温度、pH值和乙醇的浓度）进行了优化。
结果：选用AlCl3比色法测定的结果准确可靠，采用优化后的AlCl3比色法测定条件测得碱韭总黄酮主要存在于叶和花中，平均含量为（38.60±5.79）mg·g-1。
结论：碱韭具有较高的黄酮应用价值，可作为食品黄酮类添加剂和营养保健食品开发利用。
关键词：碱韭；AlCl3比色法；总黄酮Optimization of Determination Method of Total Flavonoids Content in Allium polyrhizum Turcz. ex Regel GAO Xuefeng1, GAO Jian1, YANG Yuping1, MEN Zhonghua1, DONG Guicheng2, ZHAO Peng1*(1.School of Biological Science and Technology, Baotou Teachers College, Inner Mongolia University of Science and Technology,Baotou 014030, China; 2.College of Life Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010011, China)Abstract: Objective: To screen test methods suitable for determining the total flavonoid content of Allium polyrhizum Turcz. ex Regel, and to analyze and evaluate the total flavonoid content of Allium polyrhizum Turcz. ex Regel in different collection years and parts. Method: Using rutin as the reference material and Allium polyrhizum Turcz. ex Regel leaves as the experimental material, the effects of NaNO2-Al(NO3)3-NaOH colorimetric method, AlCl3 colorimetric method, and direct determination method on the determination of total flavonoid content in Allium polyrhizum Turcz. ex Regel were compared. Then, the determination conditions of the AlCl3 colorimetric method (color development time, AlCl3 addition amount, color development temperature, pH value, and ethanol concentration) were optimized. Result: The results obtained by using AlCl3 colorimetric method were accurate and reliable. The optimized AlCl3 colorimetric method was used to determine the conditions under which the total flavonoids of alkali leeks mainly exist in leaves and flowers, with an average content of (38.60±5.79)mg·g-1. Conclusion: Allium polyrhizum Turcz. ex Regel has high flavonoid application value and can be used as a food flavonoid additive and nutritional health food development and utilization.Keywords:Allium polyrhizum Turcz. ex Regel; AlCl3 colorimetric method; total flavonoids基金项目：中央引导地方科技发展资金项目（2020ZY0025）；内蒙古自然科学基金项目（2020MS03071）；内蒙古自治区第十二批“草原英才”创新创业人才团队（内人才发〔2023〕1号）；2022年度“草原英才”滚动支持人才项目（内组通字〔2022〕15号）；内蒙古自治区人才开发基金2022年度（总第二十二批）高层次人才个人项目（内人社办发〔2022〕110号）；包头师范学院专创融合课程建设项目（BSSCKC21003）；国家级大学生创新创业训练计划项目（202210131001）；自治区级大学生创新创业训练计划项目（S202210131015）。
山楂中总黄酮的提取及含量测定
山楂中总黄酮的提取及含量测定（吕培银）一、实验目的1.掌握黄酮类物质的提取方法。
2.掌握分光光度法测定黄酮含量的原理。
二、实验原理山楂富含黄酮类化合物，具有重要的生理活性和药效。
黄酮化合物的母核由C6-C3-C6即A-C-B三个环组成，A环和B环具有芳香化合物的性质，C环具有黄酮化合物的独特性质。
母核中某些位置如C3和C5上含有羟基或具有邻二酚羟基时能与铝、铅等金属离子形成稳定的络合物，这些络合物在光谱上产生明显变化。
黄酮与金属离子的这种作用不仅可以用于鉴别这类成分中羟基的位置，还可以作为进行定量分析的基础。
本实验利用碱性条件下，在亚硝酸盐存在时，硝酸铝与黄酮进行络合反应，生成红色络合物，且在500 nm左右有最大吸收，可利用分光光度法进行测定。
因此，本实验采用索氏提取法提取山楂中的总黄酮，并采用分光光度法对其含量进行测定。
三、实验用品1、仪器：索氏提取器、平底烧瓶、电热套、量筒、试管、容量瓶、移液管、玻璃比色皿、可见分光光度计等。
2、药品：山楂粉末、无水乙醇、芦丁标准品、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等。
四、实验内容1、山楂总黄酮的提取精密称取山楂粉末6 g,滤纸包好后置于250 mL索氏提取器中，加60%乙醇150 mL，连续回流提取1-1.5h, 冷却，将提取液转移至250 mL的容量瓶中，将圆底烧瓶润洗3次，60%乙醇定容至刻度线，摇匀，过滤。
取1 mL滤液稀释至10mL,摇匀，即为样品待测溶液。
2、芦丁标准溶液的配制精密称取芦丁20 mg，加入60 mL无水乙醇超声使其溶解后，以蒸馏水定容至100mL，摇匀，即得0.2 mg/mL的芦丁标准液。
3、芦丁标准曲线的制定分别精密吸取芦丁标准液5mL、6mL、7mL、8mL、9mL至10mL容量瓶中，60%乙醇定容后得到浓度为0.10 mg/mL、0.12 mg/mL、0.14 mg/mL、0.16mg/mL 和0.18mg/mL的芦丁系列浓度梯度溶液。
不同产地蒲公英中总黄酮的测定
[ 2]
量瓶中, 以蒸馏水洗涤滤纸并加至刻度。以石油醚 萃取 3 次 ( 石油醚用量依次为 50 、 50 、 30 mL ) , 弃去 上层醚相, 以除去脂溶性色素。合并水相 , 水相以正 丁醇萃取 3 次( 正丁醇用量依次为 50、 50 、 30 mL ) , 弃去下层水相, 以除去蛋白、 多糖等水溶性杂质, 合 并正丁醇提取液, 水浴蒸至近干, 加 85% 乙醇溶解, 并过滤至 50 mL 量瓶中 , 以 85% 乙醇洗涤滤纸 , 并 加至刻度。精 密量取 1 mL 置 100 mL 量瓶 中, 加 60% 乙醇至刻度, 摇匀 , 备用。 2 3 对照品溶液的制备: 精密称取 120 干燥恒重 的芦丁对照品 10 0 mg , 置 100 m L 量瓶中, 另加甲 醇 10 m L 使之溶解 , 加蒸馏水定容 , 摇匀即得 ( 含芦 丁 0 1 mg/ mL ) 。 2 4 标准曲线的制备 : 精密量取芦丁对照品溶液 0 0、 0 5、 1 0、 2 0、 3 0、 4 0、 5 0 mL , 分别置 10 mL 量瓶中 , 依次加入 5% NaN O2 溶液 0 4 mL , 摇匀 , 放 置 6 min; 加 10% AlCl3 溶液 0 4 m L, 摇匀 , 放置 6 m in; 再加 4% NaOH 溶液 4 mL , 加蒸馏水稀释至刻 度 , 摇匀 , 放置 15 min。以芦丁对照品溶液中的 0 0 m L 为空白, 在 510 nm 处测定吸光度。以吸光度为 纵坐标 ( A ) , 质量浓度为横坐标 ( C) 绘制标准曲线, 统计学处理得回归方程 A = 1 044 8 C + 0 010 8, r = 0 999 7, 线性范围为 0 005~ 0 050 mg/ mL 。 2 5 精密度试 验: 芦 丁对照 品溶液 处理后 在 510 nm 处测定吸光度 , 重复 5 次, 记录吸 光度值, 计算 得其 RSD 为 0 45% 。
鹿衔草中总黄酮的提取及含量测定
、
Ｃ ＩＲ ｉ Ｘ ＥＹ ｎ ＪＮＷｅ， Ｕ ｏｇｙ ， Ｉ ｉ —ｉｇ （ ａａ ｏ ｐｅｅｓ ｅ ａｏａｏｙｏＰ ａｍ ｃ ，ｈ ｎｉ ｄｃｌ ｎ ｅ ｉ ， Ａ ｕ ， Ｉ ｉ ， Ｉ ｉ Ｇ Ｏ Ｈ ｎ—ｅ Ｂ ａ ｐｎ ’ Ｂ ｓｌ ｍ ｒ ｎ＆ ｂｒｔ ｈ ｒ ａｙ Ｓ ｘ Ｍｅｉ ｗ ￣ｔ Ｘ ｏ Ｃ ｈ Ｌ ｒ ｆ ａ ａＵ ｙ Ｔ ｉｕｎ００ ０ ，ｈｎ ； ｏｒｐ ｎ ｉ ｕｈ ｒＥ ｍ ｉ：ｉ ｉ ＠ ｙｈ ｏｃｒ ｃ） ａ ａ ３ ０ １ Ｃ ｉ Ｃ ｒ ｓｏｄｎ ａ ｔ ， — ａｌｂ ｐｎ ｙ ａ ｅ ｇ ｏ ｘ ｇ ａ ｏ．ｏ ．ａ ｎ
ｗ ｉ ａ ｅｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎｒｎ ｅ ｆ ． ０ ０ ０ ０ ｍ ｍ ｉ ｏ ｅ ｔ ｎｃｅ ｃ ｎ ｏ ＝ ． ９ ． ｈ ｅｔ ｘ ａｔ ｎｃ ｎ ｉｏ ｓ ｎｒ ｎ ｈ ａ ｌ ｅ ｉ ｔ ｏ ｃ ｎｒ ｉ ｇ ｓ ０ ２— ． ７ ｓ ｌ ｔ ｃ ｒ ｌ ｉ ｏｆ ｉ ｔ ｆ ０ ９ ９９ Ｔ ｅｂ ｓ ｅｔ ｃ ｏ ｏ ｄｔ ｎ ａｏ ａ ｏ０ ／ ｗ ｈ ｒ ａｏ ｉ ｅ ｒ ｒ ｉ ｉ
山西 医科大学学报 （ ｈｎｉ ｄＵ ｉ）２ １ 年 １ ，４ （ １ ＪＳ ａｘ Ｍｅ ｎｖ ０ １ １月 ２ １
・
８９・ ９
鹿 衔 草 中 总黄 酮 的提 取 及 含 量 测 定
蔡 蕊， 谢 茵， 金 伟 ， 郭红 叶 ， 毕 小平 （ 山西医科大学药学基础综合实验室。 太原 ０００ ； 通 ３０１
优选中药淫羊藿总黄酮含量测定方法
优选中药淫羊藿总黄酮含量测定方法陈永刚;刘晓涵;林励;区计明;肖凤霞;罗穗红【期刊名称】《广州中医药大学学报》【年(卷),期】2009(026)003【摘要】[目的]比较不同测定方法对中药淫羊藿总黄酮含量测定的影响.[方法]分别采用<中国药典>(2005版)方法(药典法)和<保健食品检验与评价技术规范>(2003版)中2种方法(检验一法和检验二法)测定.[结果]3批淫羊藿药材中,药典法所测总黄酮含量均值为27.21 g/kg,检验一法所测总黄酮含量均值为9.22 g/kg,检验二法测得的总黄酮含量均值为8.21 g/kg.[结论]采用保健食品检验二法测定淫羊藿总黄酮含量更为简便、合理,可考虑作为淫羊藿中黄酮类物质含量测定的首选方法.【总页数】4页(P274-276,280)【作者】陈永刚;刘晓涵;林励;区计明;肖凤霞;罗穗红【作者单位】广州中医药大学中药学院,广东广州,510006;广州中医药大学中药学院,广东广州,510006;广州中医药大学中药学院,广东广州,510006;广州中医药大学中药学院,广东广州,510006;广州中医药大学中药学院,广东广州,510006;广州中医药大学中药学院,广东广州,510006【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.刺玫果多糖含量测定方法优选 [J], 陈帅;孙毓婷;李锐;钟方丽2.金针菇中总多酚含量测定方法的优选 [J], 汪佳丹;徐婷;韩伟3.钙片中钙含量测定方法的优选研究 [J], 徐春放;靳忠欣4.正交试验法优选复方止血胶囊的提取制备工艺及含量测定方法研究 [J], 孟德钢;葛虹5.面向中药精制过程的中药水提液淀粉含量测定方法的改进与比较 [J], 彭静;朱华旭;李博;茅向军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
冰糖草总黄酮提取工艺优选及含量测定
摇匀 ， 即得 浓度 为 ０ ． ２ ４ ０ ４ ｍ ｇ ／ ｍ ｌ 的
等 ，为玄参 科植 物野 甘草 Ｓ ｃ ｏ ｐ ａ ｒ ｉ ａ １ ． ３ 试 剂 芦 丁对 照 品 （ 供 含 量 芦丁对 照 品溶 液 。
购 自中国药品生物制品检 ２ ． ２ 标 准 曲线 的制备 精 密吸取 ｄ ｕ ｌ ｃ ｉ ｓ Ｌ ｉ ｎ ｎ ． 的全草 ， 是壮族地 区常 测定用 ， 用 的一 味壮 药 。 其 味甜 ， 性凉 ， 具有 定 所 ， 批号 ： １ ０ ０ ０ ８ ０ — ２ ０ ０ ７ ０ ７ ） ； 所 用 芦丁对 照 品溶液 ０ ． ５ ｍ ｌ 、 １ ｍ ｌ 、 ２ ｍｌ 、 ４ ｍ ｌ 、 ８ ｍ ｌ 、 １ ０ ｍｌ ， 分别置 ２ ５ ｍ ｌ 容 清热毒 、 除湿毒 、 通气道 和水道 的 试 剂均 为分 析纯 。 功效 ［ 。近年研究表明， 其含有黄 酮类 、 挥发油类等多种成分［ ； 具 ２ 提 取条 件考 察预试 验
关键 词 冰糖 草 ； 总黄酮 ； 提取 工 艺； 含 量 测定 文献 标识码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ３ — ０ ７ １ ９ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ６ — ０ ０ ６ ６ — ０ ５ 中图分类 号 ： Ｒ ２ ８ ４ ． １
冰糖草 ， 又称野甘草 、 土 甘 草 子分 析天 平 （ 德 国赛 多利斯 ） 。
加 乙醇 溶解 ， 并 定 容 至刻度 ， 验 法 优 选 冰 糖 草 总 黄 酮 的提 取 工 瓶 中 ， 于５ ０ ６ ａ ｍ 波长处 测定 ，记 录吸光
艺， 并对其进行含量测定 ， 为完善 质量控制提供实验依据。
１ 材料 与仪 器
表 １ 药 材基 源表
ห้องสมุดไป่ตู้
１ ． １ 材 料 冰 糖 草 采 自广 西 各 地， 经 广西 中医药 大学 蔡毅 教授 鉴 定 为玄 参科 植 物野 甘草 Ｓ ｃ ｏ ｐ ａ ｒ ｉ ａ
不同产地蜂胶中总黄酮的提取及含量测定
２２蜂胶 中总黄酮 的提取 －
２２１正交设计优选蜂胶提取工艺 －． 根 据蜂胶理化性质知水提取效 果差 ，适用 乙醇为溶剂提 取， 选择 乙醇浓度、提取 时间、提取 次数、乙醇用量作为考察 因素，以蜂胶总黄酮得率（ 总黄酮含量＋ 蜂胶重量× ０ １０％） 为评 价指标 。因素水平安排见表 １ 。 表 １ 因素水平表
Ｔ ． Ｆ ｃ ｏ ｓａ ｄ ｌｖ ｌ ， １ ａ ｔ ｒ ｎ ｅｓ ｅ
水 平
１
２
Ａ乙
５ Ｏ ６ ５
８ ０
度
Ｂ乙
】 ０
１ ２
彰 ｃ提 取 时间ｍ
Ｄ提
１
称取蜂胶样品（ 江西产） １ ，精密称定，共９ 约 ｇ 份，按正交 实验表（ 见表２于７ ） ０℃温浸 ，过滤于 １０ｍ 量瓶 中，用乙醇洗 ０ Ｌ 涤残渣 ，定容 ，吸取 １ Ｌ 溶液置５ ｍ 量瓶 ，加 乙醇溶液至刻 ｍ ０Ｌ 度 ，摇匀 ，作为供试 品溶液 。精确 移取 供试 品溶 液ｌｍＬ，置 ２ Ｌ ５ｍ 容量瓶 中，加水至 ６ｍ Ｌ，Ｊ１ Ｊ５％亚硝酸钠溶液ｌ Ｌ，摇 ￣ ｍ 匀 ，静置６ ｎ ；加 ｌ ｍｉ ０％硝酸铝溶液 １ Ｌ，摇匀 ，放置６ｍ ｎ ｍ ｉ； ／ｌ． Ｊ４３％氢氧化钠溶液１ ｔ ０ ｍＬ，加水稀释至刻度 ，摇匀 ，放置 １ ｉ， 波长５ ０ｒ ５ ｎ在 ａ ｒ ０ ｍ处测定吸光度 ， ｉ 根据标准曲线算 出样 品 中总黄酮含量。 直 观 分 析 表 明 对 总 黄 酮 得 率 的 影 响 因 素 大 小 为 Ｂ Ｃ Ａ Ｄ，优化处方为Ａ Ｂ Ｃ Ｄ３ ＞＞＞ ２ ２ ３ ；根据方差分析 ，可知，Ｂ 因素—ｌ Ｉ １ 的用量对总黄酮提取影响显著 ；Ｄ因素 ，即提取 ，即乙醇 ２ ２ ２ ３ ３ ３ Ａ 次数对总黄酮提取 影响最不显著 ， 综合分析结果和实际应用情 况 ，选择Ａ： ２ 为蜂胶 中总黄酮提取 条件 ，蜂胶最佳提取 ＢＣ Ｄ２ 工艺为 ｌ倍量６ ％乙醇 ，温浸２ ，每次２ ２ ５ 次 小时。按 此提取方 法提取蜂胶（ 江西产） 中总黄酮 ，总黄酮得率平均为 ｌ． ２９ ８％，
均匀试验法优选三七中总黄酮的提取工艺
均匀试验法优选三七中总黄酮的提取工艺摘要三七（Panax notoginseng）是一种传统的中草药药材，具有活血化瘀，消肿止痛的功效。
黄酮类化合物是三七有效活性成分之一，具有改善血液微循环的作用。
为了从三七中提取总黄酮，采用均匀试验法研究三七总黄酮的提取工艺，考察了甲醇溶液的浓度，浸泡时间，超声时间，加入提取液倍数，提取次数5个因素对三七总黄酮提取率的影响。
确立了三七总黄酮最佳提取条件为：甲醇浓度为60%，浸泡时间60min，超声时间35min，加入提取液倍数40倍，提取次数1次。
以此方案提取不同规格三七中总黄酮，并利用紫外分光光度计在波长210nm处对不同规格三七总黄酮的含量进行测定，从而分析得出不同规格三七中总黄酮含量的变化规律。
为更有效的开发、利用三七总黄酮提供一定的科学依据。
关键词：三七；总黄酮；提取工艺；均匀试验Uniform Test for Optimization of Extraction Technology of TotalFlavonoids in Panax notoginsengAbstract: Panax notoginseng is kind of traditional herbal medicinal materials, which famous for itsinvigorate, acetanilide, detumescence. Furthermore, flavonoid is one of effective ingredient of Panax, which can improve blood microcirculation. In order to extract flavonoids from notoginseng, Panax uniform test of the extraction process of total flavonoids was investigated the concentration of methanol solution, soaking time, ultrasound time, adding extract multiples of the number of five factors on the extraction of total flavonoids Panax extraction rate. Established Panax optimum extraction conditions were: 60% methanol concentration, soaking time of 60min, ultrasonic time of 35min, adding a multiple of 40 times the extract, extracting the number 1. With this program different from flavonoids of Panax notoginseng, and then use the UV spectrophotometer to determine content of flavonoids in wavelength 210nm. What’s more, I will analyze and think over to the exchange rules in the content of flavonoids from the different Panax notoginseng. Providing scientific basis to develop and utilize perfectly the flavonoids of Panax notoginseng.Key words: Panax notoginseng; Flavonoids; Extraction; Uniform目录1 引言 (1)2 背景知识 (1)2.1 黄酮类化合物的药理作用 (1)2.2 三七简介 (2)2.3 黄酮类化合物的提取方法简介 (3)2.4 黄酮类化合物的展望 (3)3 国内外研究现状 (4)4 仪器及实验 (5)4.1 仪器和试剂 (5)4.2 实验方案设计及优化 (5)4.2.1 最大吸收波长的确定 (5)4.2.2 实验方案 (6)4.2.3 标准曲线的绘制 (7)5 结果与讨论 (8)5.1 三七中总黄酮最佳提取方案的确定 (8)5.2 不同规格三七中总黄酮含量变化 (9)6 结论 (10)参考文献 (11)致谢 (12)曲靖师范学院化学化工学院2012届本科毕业论文1 引言三七别名开花三七、人参三七、田七、金不换。
新疆锁阳中总黄酮的提取工艺优化及含量测定
Ｋ ＡＮＧ Ｘｉ ｐｉｇ， ＮＡ Ｋａ ｓｍｕ ， Ｉ —ｉ ｇ ｎ— ｎ ＲＥ — ｉ Ｌ Ｕ Ｙａ ｔｎ
（ ｃ ｏｌ ｆＰ ａｍ ｃｌ ｉ ｌ ｃ ｎｅ， ｉ ａ ｇＭｅｉ ｌ ｎ ｅ ｉ ， ｒｍ ｉ ３ ０ ４ Ｃ ｉａ Ｓ ｈｏ ｏ ｈ ｒ ａｏｏ ｃ ｉ ｃｓＸｎ ｎ ｄｃ ｉ ｒ ｔ Ｕ ｕ ｑ ８ ０ ５ ， ｈ ） ｇ ａＳ ｅ ｉ ｆ ａ Ｕ ｖ ｓｙ ｎ
关 键 词 ： 阳； 黄酮类化合物 ； 最佳提取 工艺 ； 超声 锁
中图分类号 ： ２ ４ ２ Ｒ 编号 ：０ ８０ ０ （ ０ ９ ０ －１５ ２ １０ －８ ５ ２ ０ ） １ ０ － ０ ０
Ｄｅｅｍｉａｉｎａ ｄＯｐｉ ｍ ｘｒｃｉｎｏ ｅＴ ｔｌ ｌｖ ｎ ｓｏ ｉｊ ｎ ＂Ｃ ｎ ｍｏｉｍ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｔ ｏ ｍｕ Ｅ ｔａｔ ｆ ｈ ｏａ ａ ｏ ｅ ｆＸ ｎｉ ｇ ｙ ｏ ｒｕ ｏ ｔ Ｆ ａ ｓ
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Ａｂ ｔａ ｔ ０ｂｅｔ ｅＴ ｓｅｔｉ ｔ ｐｉｕ ｏｄｔ ｎｆ ｘ ａｔ ｇＣ ｎｍ ｒ ｍ ｓｎ ａｉ ｍ Ｒ ｐ． ｔｏｓ Ｔ ｋ ｇ ｕｉ ａ ｓｒ ｃ ： ｊｃ ｖ ｏａｃｒ ｎ ｈ ｏｔ ｍ ｃｎ ｉｏ ｒ ｔ ｃ ｎ ｙｏ ｏｉ ｇ ｒ ｕ ｕ ｒＭｅｈ ｄ ａｉ ｔ ｓ ｉ ａ ｅ ｍ ｉ ｏｅｒ ｉ ｕ ｏ ｃ ｎｒ ｎ
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优选中药淫羊藿总黄酮含量测定方法
优选中药淫羊藿总黄酮含量测定方法1. 背景淫羊藿是一种常见的中草药，主要生长于我国中南部地区。
淫羊藿具有清热解毒、利尿消肿、降压降脂等功效，在临床上广泛应用。
其中，淫羊藿中的总黄酮是一种具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性的物质，对人体健康具有重要的保护作用。
因此，淫羊藿中总黄酮的含量测定方法也成为了目前中药研究中的热门课题之一。
2. 目的本文旨在介绍一种优选中药淫羊藿中总黄酮含量测定的方法，该方法具有简便、准确、可靠和重复性好的特点，可以为淫羊藿的质量控制提供有效的科学依据。
3. 材料和方法3.1 材料•七氟丙酮（HPLC级）•草酸二水（重量法纯）•乙醇（色谱级）•甲醇（色谱级）•硫酸（AR级）•多孔陶瓷过滤片（0.45 μm）•百草枯（常用草甘膦，AR级）•水•淫羊藿样品3.2 仪器设备•精密天平•超声波清洗仪•恒温振荡器•比色计•紫外可见分光光度计•高效液相色谱仪（HPLC）3.3 方法3.3.1 提取样品1.将淫羊藿样品粉碎；2.取1.0 g淫羊藿样品，加入50 mL 70%乙醇；3.超声波清洗仪中超声波解提30 min，静置1h；4.吸滤过滤；将滤液收集于50 mL量瓶中，再用70%乙醇洗涤漏斗，直至漏斗洗涤液几乎无色；5.试管中取2 mL，再加入0.5 mL 5% NaNO2溶液。
混匀后加入1 mL10% Al(NO3)3溶液，混匀后加入5 mL 1 mol/L NaOH溶液，稀释至50 mL，作为测试液。
3.3.2 建立标准曲线1.取草酸二水0.01 mol/L溶液1.0 mL放入100 mL容量瓶中，加入适量水稀释至刻度，均匀混合，备用；2.取7管干燥的50 mL体积瓶分别称取0.1~0.7 mL上述草酸二水溶液，加适量H2O至定容，形成干燥质量浓度分别为10~70 μg/mL的草酸二水标准溶液；3.取10 μL、20 μL、40 μL、80 μL草酸二水标准溶液，分别加入10mL重铬酸钾合铬酸锌溶液中，沸水浴加热10 min。
优选中药淫羊藿总黄酮含量测定方法-药学论文
作者：陈永刚刘晓涵林励区计明肖凤霞罗穗红【摘要】[目的]比较不同测定方法对中药淫羊藿总黄酮含量测定的影响。
[方法]分别采用《【关键词】淫羊藿/化学总黄酮/分析分光光度法紫外线淫羊藿为小檗科植物淫羊藿(EpimediumbrevicornumMaxim.)、箭叶淫羊藿〔Epimediumsagittatum(Sieb.etZucc)Maxim.〕、柔毛淫羊藿(EpimediumpubescensMaxim.)、巫山淫羊藿(EpimediumwushanenseT.S.Ying)、或朝鲜淫羊藿(EpimediumkoreanumNakai)的干燥地上部分。
《本草纲目》称其有"益精气，坚筋骨，补腰膝，强心力"之功效。
各种淫羊藿均以淫羊藿苷、淫羊藿次苷及淫羊藿新苷等黄酮类成分为主[1]。
现代药理实验研究表明[2],淫羊藿总黄酮能增加心脑血管血流量，促进造血功能、免疫功能及骨代谢，具有抗衰老、抗肿瘤等功效。
关于总黄酮的测定方法报道较多[3-4]，目前收载入相关国家标准的有3种方法：国家食品药品监督管理局颁布的"保健食品检验与评价技术规范实施手册"收载的2种方法[5](简称"检验一法"和"检验二法");2005版《中国药典》收录的方法(简称"药典法")[6]。
但关于此3法的准确性、合理性比较研究尚未见报道。
本试验以淫羊藿为研究对象，以其总黄酮含量为评价指标，比较了上述3种方法对其含量测定的影响，为淫羊藿中总黄酮最佳测定方法的优选提供依据。
现报道如下。
1材料1.1仪器8453E型紫外可见分光光度计(美国Agilent);BP211D电子分析天平(德国Sartorius);KQ 500型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2药材与试剂淫羊藿药材(样品1批号为080602，样品2批号为080626，样品3批号为080731)购自广州致信药业有限公司，经广州中医药大学中药学院林励研究员鉴定，其原植物为小檗碱科植物淫羊藿(EpimediumbrevicornumMaxim.)的干燥地上部分;淫羊藿苷对照品(批号：110737 200414)、芦丁对照品(批号：100080 200306)均购自中国药品生物制品检定所;聚酰胺粉(柱层析用，60 80目)由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂生产;水为双蒸水，甲醇、乙醇、苯、硝酸铝等试剂均为分析纯。
保健食品中总黄酮的测定
定容至 １００ ｍＬ，即得 ５０ ｕｇ／ｍＬ。 吸取芦丁标准溶液：０、１．０、２．０、 ３．０、４．０、５．０ ｍＬ 于 １０ ｍＬ 比色管中， 用甲醇定容至刻度，摇匀，于波长 ３６０ ｎｍ 比色。求回归方程，计算试样中总 黄酮含量。
2 测定
在相同实验条件下测定标准溶液 和样品溶液，制作标准曲线，样品中 总黄酮的含量按式（１）计算含量。 （1） 式中： Ｘ—试样中总黄酮的含量， ｍｇ／１００ ｇ ； Ａ—由标准曲线算得被测液中黄酮 量，ｕｇ； Ｍ—试样质量，ｇ； Ｖ１—测定用试样体积，ｍＬ； Ｖ２—试样定容总体积，ｍＬ。 ２．１ 结果表示 计算结果保留两位有效数字。 ２．２ 标准曲线 按 照 １．４ 的 方 法 配 制 ６ 个 梯 度 的 芦丁 － 甲醇的标准溶液，精密吸取芦 丁对照品溶液 ０、１．０、２．０、３．０、４．０、 ５．０ ｍＬ 于 １０ ｍＬ 容量瓶中，加甲醇至 刻度，摇匀，测定吸收度。以浓度为 横坐标，吸收度为纵坐标，进行线性 回 归， 方 程 为 Ｙ＝０．０３８１Ｘ＋０．００６７，Ｒ２ ＝０．９９９７，在 ０．０—２５．０ ｕｇ／ｍＬ 的浓度范
以浓度为横坐标吸收度为纵坐标进?线性回归方程为y00381x00067r209997在00250ugml的浓度范jan2016chinafoodsafety121technology科技科技文苑图1芦丁标准品曲线表1胶囊状样品总黄酮回收率已知样品目标物含外加标准品标示含量加标测定值量g100gg100gg100g回收率平均回收率151529397733154669714815615976974652156519726715801977表2片剂状样品总黄酮回收率已知样品目标物外加标准品表示含加标测定值含量g100g量g100gg100g回收率平均回收率111020597617102589562010288960957422102999342910375961表3口服液样品总黄酮回收率已知样品目标物外加标准品表示含加标测定值含量mgl量mglmgl回收率平均回收率20950253977356503989805025053797397805455058998960250633971围内线性良好
正交试验法优选艾叶总黄酮提取工艺研究
Ｗ ｄ ４ ｉ ， ｅ ｐ ｃ ｉｅｙ Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｎ ： ｈ ａ ｏ ｏ ｄ ｃ ｍｐ ｕ ｄ ｒ ｂ ｎ ａ ｃ ｌ ｍ ｔｍｉ ａ ｇ ｉ ｄｈ ｄ ｓ ｏ ｇ ａ ｔ ｏ ｉ ａ ｔ ｎ ａ ０ ｒ ｎ ｒ ｓ ｅ ｔ ｌ． ｎ ｌ ｓｏ ｓ Ｔ ｅｆ ｖ ｎ ｉ ｏ ｏ ｎ ｓ ａ ｖ ｌ ｗｅｅｉ ａ ｕ ｄ ｎ ｅｉ Ｆｏ ｉ Ａｒ ｎ ｎ ｕ ｅ ｓ ｅ ｉ Ａｒ ｖ ａ ｔ ｎ ｉ ｘｄ ｎ ａ ｒ ｎ — ｎ
（． １西北农林科技 大学食品科学与工程学院，陕西 杨凌 ７２ ０ ） １１ ０
（． ２郑州轻工 业学院食 品与生物工程 学院 ，河南 郑 州 ４００ ） ５０２
摘要 ：本文为测定艾叶 中总黄酮的含量采用 ，设计正交设计优选艾叶 中总黄酮的提取条件 ，用芦丁作对照品，硝酸铝作显色剂，
测定波长在 ５０ｎ 处，比色法测定艾叶总黄酮的吸光度。实验结果获得优选提取务件是 ：用 ７ ０ １ ｍ ０ｍＬ６ ％的 乙醇浸泡 １ ０ ． ０ｇ左右 的 ０ 艾叶粉末 ２ ，在超声波功率为 ２ ０Ｗ 的条件下，辅助萃取 ４ ｉ。结论：艾叶 中含有丰富的黄酮类化合物 ，具有很强的抗氧化活 ４ｈ ０ ０ｒ ｎ ａ 性，认 为艾叶有很 强的开发应用价值 。 关键词：艾叶；总黄酮；超声波 中图分类号：Ｔ ２ ；文献标识码：Ａ；文章篇号：６３９ ７ （０ ７０ —０ ２０ Ｑ０８ ｌ７ —０ ８２０ ）９０６ —４
维普资讯
《 现代 食品科技 》
Ｍｏ ｅｎＦ ｏ ｃ ｎ ｅ ｎ ｅｈ ｏｏ ｙ ｄ ｒ ｏ ｄＳ ｉ ｃ ｏ９ ２ 湛 ９
正交试验法优选艾叶总黄酮提取工艺研 究
龚珍林 ，闫克玉 ，贾玉红
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苹果皮中总黄酮的提取与含量测定
苹果皮中总黄酮的提取与含量测定
丁莉倩
【期刊名称】《山东化工》
【年(卷),期】2024(53)4
【摘要】黄酮类化合物广泛存在于植物果蔬中,且属于重要的抗氧化物质,几年来研究发现,类黄酮清除自由基的能力较强,而苹果皮中含有酚类、黄酮等生物活性物质,这些活性物质作用很大,尤其是在冠心病、心血管疾病等慢性疾病的预防方面有效,同时也能很好地降低发病率。
如果在食品中加入少量苹果皮粉,可以增加食物中多酚和类黄酮的含量,这样苹果皮粉就可以被用作生产强化食品的一种食品添加剂,不仅仅合理利用了资源,增长了苹果产业的价值,又能够减少环境污染,因此具有很大的潜在价值和意义。
实验中选用了红富士苹果的皮为原料,采用有机溶剂-乙醇提取皮中的总黄酮,并且使用紫外-分光光度法对其含量进行了测定,与此同时采用控制变量法,分析影响苹果皮里总黄酮收率的条件,通过正交试验选取适宜条件,最终结果表明:料液比为1∶45(g∶mL),乙醇体积分数为75%,提取温度为65℃以及提取时间2 h 为最佳提取工艺条件,并测得苹果皮里总黄酮的含量为4.875%。
【总页数】5页(P171-174)
【作者】丁莉倩
【作者单位】江苏省泰兴中等专业学校
【正文语种】中文
【中图分类】TS209
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红景天中总黄酮提取工艺的优选
红景天中总黄酮提取工艺的优选【摘要】目的：研究红景天中总黄酮的提取工艺。
方法：应用正交设计表L9(34)设计总黄酮的提取工艺，采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定红景天中总黄酮的量。
结果：最佳提取工艺为取红景天药材，加药材6倍量的水，浸泡20 min，提取3次，每次80 min。
结论：该提取工艺合理、可行。
【关键词】红景天；总黄酮；正交设计；提取工艺红景天系蔷薇目景天科(Crassulaceae)红景天属(Rhodiola L.)多年生草本或弧灌木野生植物，花、根、茎之浸液均成红色而得名。
红景天具有提高机体免疫力、增强体质、改善人体造血机能、抗缺氧、抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、降血糖、抗病毒、抗辐射、预防高原反应等多种功能[1]。
国内外对红景天的化学成分研究较多，其中总黄酮为其主要有效成分[2]。
为了提高红景天中黄酮类成分的提取率，更好开发利用黄酮类成分，我们采用正交设计表L9(34)设计红景天的提取工艺，优选其最佳的提取工艺，现报道如下：1 试药与仪器药材红景天(购买于广东省佛山市德林医药有限公司，产地：云南，批号20070622，经鉴定为正品)，无水乙醇(广东省佛山远东化学试剂厂，分析纯，批号20070618)，芦丁(中国药品生物制品检定所，化学对照品，供含量测定用，批号0080—9705)。
BS110S电子天平(德国赛多利斯)，紫外可见分光光度计(上海精密仪器厂)。
2 方法与结果2.1 标准曲线的制备：精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品200 mg，置100 ml量瓶中，加甲醇70 ml，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
精密吸取10 ml，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升中含无水芦丁0.2 mg)。
精密吸取芦丁对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0与6.0 ml，分别置25 ml量瓶中，各加水至6 ml，加50 mg/L亚硝酸钠溶液1ml，使混匀，放置6 min，各加100 mg/L硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠试液10 ml，再加水至刻度，摇匀，放置15 min，照分光光度法，在500 nm的波长处测定吸收度，计算结果求得回归方程：y=0.004026+10.942x (r=0.9998)2.2 提取工艺的正交设计：根据提取工艺选定浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数作为考察因素，各取3个水平，以提取液中总黄酮的量作为考察指标，选用L9(34)正交表进行试验，见表1。
鹿血复方口服液制备工艺优选及总黄酮和氨基酸成分测定
鹿血复方口服液制备工艺优选及总黄酮和氨基酸成分测定
薄士儒 1*，李帛儒 1，王全凯 2
（1.吉林农业科技学院，吉林 吉林 132101；2.吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130000）
摘要：目的：对鹿血复方口服液进行制备工艺优选及成分测定。方法：正交试验法，对醇沉浓度，静置时间，加蜂蜜量进行制备工艺优
表 3 结果表明，其氨基酸含量高于民间工艺鹿血酒（氨基 酸含量为 0.133%）[2]。 4 结论
本试验将复方鹿血口服液的口感作为本品的一项客观指 标，增强其风味，在有营养作用的同时，也注意其视觉和感觉， 以 增 强 其 可 服 用 性。同 时 ，明 确 对 总 黄 酮 和 氨 基 酸 成 分 的 测 定 结果，为大规模工业化生产奠定理论基础。
取鹿血口服液 5 毫升，加水定容至 25 毫升，摇匀，参照标 准曲线测定方法计算氨基酸含量。另取一份不加 2%茚三酮乙 醇溶液的为空白对照。 2.2.2 鹿血口服液中总黄酮的测定 分别精密量取对照品溶液 0.00 毫升、1.00 毫升 、2.00 毫升、3.00 毫升 、4.00 毫升、5.00 毫 升于 25 毫升容量瓶中，分别加 水 5.0 毫升、4.0 毫 升、3.0 毫 升、2.0 毫升、1.0 毫升、0.00 毫升，再各加入 5%亚硝酸钠溶液 1 毫升，摇匀，静置 6 分钟，各加 10%硝酸铝溶液 1 毫升，摇 匀，放置 6 分钟，加 1 毫升 NaOH，加水至刻度，摇匀，放置 15 分钟，在 509 纳米处测定吸光度，以芦丁为对照品浓度为横坐 标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
取鹿血口服液 15 毫升，加水定容到 100 毫升容量瓶中， 摇 匀 。参 照 标 准 曲 线 测 定 方 法 计 算 总 黄 酮 含 量 。另 取 一 份 不 加 亚硝酸钠和硝酸铝作为空白 2 可以看出，影响试验结果的因素主次顺序为 A >C >B ，即醇沉浓度对试 验结 果影响较 大，其次 为加入 蜂蜜 量 ， 醇沉时间对试验结果影响较小。由正交试验所得较好的工艺 为 A2、C3、B2 。 3.2 总氨基酸和总黄酮测定结果 3.2.1 氨基酸标准曲线 回归方程 y=2.7268x-0.1929，r=0.9998。 3.2.2 总黄酮标准曲线 回归方程 y=9.9963x+0.0014，r=0.9998。 3.2.3 鹿血口服液总氨基酸和总黄酮含量（见表 3）
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蕨菜中总黄酮和多糖的还原力测定一．前言1.项目的意义蕨菜是采自蕨科蕨属中蕨的幼嫩叶。
近年来已成为深受人们喜爱的山野菜。
蕨菜还具有清热化痰、利尿安神等功效,经常食用蕨菜会有一定的保健作用。
蕨菜中所含黄酮类化合物具有抗溃疡、抗过敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病等药用保健功能,也是一类具有广阔开发前景的天然抗氧化剂。
文中对蕨菜黄酮的含量测定、抗氧化作用等方面进行了研究,为蕨菜的保健功能研究,更为蕨菜的深度加工与开发提供依据。
2.黄酮的研究进展由于黄酮具有广谱的药理作用，特别是在抗癌、防癌和抗自由基方面的作用，引起人们极大的开发兴趣。
微波、超声波、酶解、浸提和超临界提取等几种黄酮的提取方法可以单独使用，也可以相互辅助使用。
黄酮的分离和鉴定方法主要有高效液相色谱法、紫外分光光度法和颜色判别法。
测定黄酮的活性时，主要是测其抗氧化性能。
近年来，研究黄酮的学者越来越多，相信黄酮会更多地应用到医药、化妆、食品等领域。
3.实验内容首先采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定样品中总黄酮含量。
利用黄酮类化合物与铝盐反应生成红色络合物,以芦丁为标准在510nm处测吸光度,进行黄酮含量的测定[陈乃富,2007]然后通过对蕨菜中总黄酮还原力测定[李进,2010] 和DP PH自由基清除能力的测定[李波，2010]及超氧阴离子清除能力的测定[张建平，2009] 对黄酮的抗氧化能力进行测定。
二、项目实施环节及实施方案 1.材料与方法1.1材料 蕨菜（天水市售）1.2试剂 磷酸缓冲液、六氰合铁酸钾溶液、三氯乙酸溶液、三氯化铁溶液、DPPH 乙醇溶液、无水乙醇、水杨酸-乙醇溶液、硫酸亚铁溶液、水杨酸、30%双氧水、Vc 、BHT 、Tris-HCl 缓冲液、Hcl 溶液、邻苯三酚1.3仪器 紫外可见分光光度仪，超声波裂解仪、干燥箱、恒温水浴锅、电磨机、离心机、索氏提取器等。
1.4方法 通过对蕨菜中总黄酮还原力测定[李进,2010] 和DPPH 自由基清除能力的测定[李波，2010]及超氧阴离子清除能力的测定[张建平，2009] 对黄酮的抗氧化能力进行测定。
2.试验方案2.1.1标准溶液的配制（0.1g/L ）称取约20mg 芦丁标准品于称量瓶中,置103℃烘箱中烘干至恒重,干燥器中冷却,精确称取10mg 芦丁标准品,用70%乙醇定容至100mL 为标准液。
2.1.2标准曲线制作精确吸取芦丁标准液0·0、1·0、2·0、3·0、4·0、5·0mL,分别置于6支具塞试管中,各补水至5mL,加5%NaNO2溶液0·3mL,摇匀,放置6min 后,加质量分数10%Al(NO3)3溶液0·3mL,摇匀,放置6min 后,再加4%NaOH 溶液4mL,加水0·4mL,摇匀,放置15min 后,在510nm 处测吸光度-浓度值,所得吸光度-浓度曲线及回归方程。
2.1.3样品黄酮含量的测定吸取待测液4ml 置于具塞试管中补蒸馏水至5mL,加5%NaNO2溶液0.3mL,摇匀,放置6min 后,加10%Al(NO3)3溶液0.3mL,摇匀,放置6min 后,再加4%NaOH 溶液4mL,加水0.4mL,摇匀,放置15min 后,在510nm 处测吸光度。
计算公式如下：X=1000100⨯⨯⨯⨯V m C A式中 ：X —为样品中总黄酮含量（以芦丁计，mg/100 g ）,A —为根据标准曲线计算出样品提取液中黄铜含量（μg ），C—为样品定容体积（mL），V—为待测液体积（mL），m—为样品质量（g）2.2蕨菜中总黄酮的还原力测定[李进,2010]取一定体积的提取液（黄酮提取液）(提取液的用量为2ml、4ml、6ml、8ml、10ml)于试管中，各补水至10mL,依次加入2.5mL的0.2mol/L的磷酸缓冲液(PBS，pH6.6)和2.5mL的质量分数1%六氰合铁酸钾溶液(K3Fe(CN)6)，于50℃水浴保温20min后，快速冷却，再加入2.5mL的质量分数10%三氯乙酸溶液(TCA)。
以3000r/min的转速离心10min，取上清液2.5mL，依次加入4mL蒸馏水，1mL的质量分数0.1%三氯化铁溶液(FeCl3)，充分混匀，静置10min后，在700nm下测定其吸光度A700nm(以蒸馏水做参比液)，吸光度越大表示还原能力越强。
2.3 DPPH自由基清除能力的测定[李波，2010]1 2 3 清除率蒸馏水提取液2ml提取液4ml提取液6ml提取液8ml提取液10mlVCBHT（老师，我们VC和BHT的浓度梯度不知道该怎么确定。
）吸取不同体积的样品溶液, (提取液的用量分别为2ml、4ml、6ml、8ml、10ml)于试管中，各补水至10mL,加入2×10-4mol/L的DPPH乙醇溶液2mL,摇匀后,在室温黑暗处放置30min。
以无水乙醇调零,测定517nm处的吸光值(A样品)。
同时做空白和对照,并与Vc和BHT进行比较。
DPPH自由基清除率=[1-(A样品-A空白)/A对照]×100%。
以0～0．2 mg/mL的抗坏血酸绘制出不同浓度的抗坏血酸对DPPH·清除率曲线。
根据以下公式计算清除率:清除率(%)=［1－(Ai－Aj)/Ac］×100式中:Ai为Vc与2 mL DPPH溶液混合、在暗处反应30 min后，最大吸收峰波长处的吸光值;Aj为Vc与2 mL无水乙醇混合、在暗处反应30 min后，最大吸收峰波长处的吸光值;Ac为无水乙醇与2 mL DPPH溶液混合、在暗处反应30 min后，最大吸收峰波长处的吸光值，作为对照组。
以0～0．2 mg/mL的BHT绘制出不同浓度的BHT对DPPH·清除率曲线。
根据以下公式计算清除率:清除率(%)=［1－(Ai－Aj)/Ac］×100式中:Ai为BHT与2 mL DPPH溶液混合、在暗处反应30 min后，最大吸收峰波长处的吸光值;Aj为BHT与2 mL无水乙醇混合、在暗处反应30 min后，最大吸收峰波长处的吸光值;Ac为无水乙醇与2 mL DPPH溶液混合、在暗处反应30 min后，最大吸收峰波长处的吸光值，作为对照组。
3.5 清除羟基自由基能力的测定[李波，2010]1 2 3 清除率蒸馏水提取液1ml提取液2ml提取液3ml提取液4ml提取液5mlVcBHT取1mL 9mmol/L FeSO4,加1mL 9mmol/L水杨酸-乙醇溶液, 吸取不同体积的样品溶液, (提取液的用量分别为1ml、2ml、3ml、4ml、5ml)于试管中，各补水至7mL,最后加入1mL 8.8mmol/L H2O2。
在37℃水浴中反应0.5h,以蒸馏水作参比,在510nm下测定吸光值。
同时做空白和对照,并与Vc和BHT进行比较。
清除率=[A空白-(A样品-A待测液本底)]/A空白×100%。
以0～0．2 mg/mL的抗坏血酸绘制出不同浓度的抗坏血酸对羟基自由基清除率曲线。
根据以下公式计算清除率:清除率=[A空白-(A样品-A待测液本底)]/A空白×100%。
以0～0．2 mg/mL的BHT绘制出不同浓度的BHT对DPPH·清除率曲线。
2.4 超氧阴离子清除能力的测定[张建平，2009]1 2 3 清除率蒸馏水提取液0.5ml提取液1ml提取液1.5ml提取液2ml提取液2.5mlVcBHT将3mL Tris-HCl缓冲液(pH8.2)加入不同体积的样品溶液,(提取液的用量分别为0.5ml、1ml、1.5ml、2ml、2.5ml)于试管中，各补水至6mL, 25℃水浴保温20min后加入3mL 7mmol/L邻苯三酚,反应4min后加入0.5mL 10mol/L HCl终止反应,420nm处测吸光度值。
同时做空白和对照,并与Vc和BHT进行比较。
清除率=[A空白-(A样品-A待测液本底)]/A空白×100%。
以0～0．2 mg/mL的抗坏血酸绘制出不同浓度的抗坏血酸对羟基自由基清除率曲线。
根据以下公式计算清除率:清除率=[A空白-(A样品-A待测液本底)]/A空白×100%。
以0～0．2 mg/mL的BHT绘制出不同浓度的BHT对DPPH·清除率曲线。
3.参考文献[1]陈乃富,张莉,陈科等.大孔吸附树脂法纯化蕨菜黄酮的初步研究[J].食品工业科技,2007,28(8):82-85.[2]邱志敏，芮汉明.微波辅助提取枸杞多糖的工艺优化及其抗氧化性研究[J]. 食品工业科技, 2012, 33(7):220-227.[3]唐乔玉，朱玉昌，周毅峰.蕨菜中多糖含量及其活性分析[J].食品工业科学.2008.[4]李进，李淑珍，冯文娟等.黑果枸杞叶总黄酮的体外抗氧化活性研究[J]. 食品科学,2010, 31(13):259-262.[5]李波,徐贵华,芦菲.七种云南产食用菌的抗氧化活性研究[J].食用菌,2010,(2):66-67.张建平,易醒,肖小年.泽泻提取物自由基清除能力的研究[J].时珍国医国药,2009,20(5):1181-1182.最新文件---------------- 仅供参考--------------------已改成-----------word文本 --------------------- 方便更改赠人玫瑰，手留余香。