超高效液相色谱法快速检测粮食中玉米赤霉烯酮的含量_谢刚
免疫亲和净化－超高效液相色谱－串联质谱法测定食品中玉米赤霉烯酮类真菌毒素
免疫亲和净化－超高效液相色谱－串联质谱法测定食品中玉米赤霉烯酮类真菌毒素作者：宁阳阳来源：《中国食品》2021年第21期当前在玉米赤霉烯酮类的真菌毒素检测中，使用液相色谱和液相色谱-质谱的方法较多，本文则构建了一种针对食品中6种玉米赤霉烯酮类真菌毒素的免疫亲和净化-超高效液相色谱-串联质谱检测法，包括玉米赤霉酮、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮。
本检测方法的前处理工序非常简便，利用免疫亲和柱进行净化及液标法进行定量，能够同时测定6种玉米赤霉烯酮类真菌毒素。
除了谷物以外，本检测方法还能应用于肉、蛋、乳等食品的检测。
一、材料和仪器1.材料和试剂。
（1）样品：在市场购买大米、麦片、牛肉、猪肉脯、鸡蛋、牛奶等当作样品，大米和麦片研磨成粉，牛肉和猪肉脯捣碎，鸡蛋和牛奶混匀。
（2）试剂：乙腈，色谱纯;乙酸钠，分析纯;玉米赤霉酮标准品、α-玉米赤霉烯醇标准品、β-玉米赤霉醇标准品、α-玉米赤霉醇标准品、β-玉米赤霉烯醇标准品、玉米赤霉烯酮标准品;玉米赤霉烯酮类免疫亲和柱;β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯。
（3）标准储备溶液：称取10mg玉米赤霉烯酮类的各种标准品，置于10mL棕色容量瓶中，利用乙腈进行溶解后定容，制成1mg/mL的标准储备溶液，在-18℃的条件下避光保存。
（4）混合标准溶液：取100μL上述制成的各类标准储备溶液，利用乙腈定容至10mL，制作成10μg/mL的混合标准溶液，在-18℃的条件下避光保存。
2.仪器。
GM200型刀式研磨仪;ACQUITYTM超高效液相色谱-TQS质谱仪;组织捣碎机;T18均质器。
二、实验和方法1.样品处理方法。
（1）谷物。
取粉碎样品25g，添加氯化钠5g，再添加体积分数为80%的乙腈溶液100mL，搅拌提取2min，然后放于离心管（50mL）中，4000r/min离心5min。
取10mL上层提取液，加水40mL并混匀，10000r/min离心5min。
粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮测量不确定度评定
粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮测量不确定度评定摘要采用高效液相色谱法测定粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮测量不确定度进行分析。
根据《测量不确定度评定与表示》，参考《化学分析中不确定度评定的评估指南》，分析粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮含量测定的不确定度因素，确定不确定度来源，最后根据各分量计算出合成不确定度并进行了扩展（k＝2），粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮的扩展不确定度为：X=4.39ug/kg；U=8.78ug/kg；k=2。
关键词粮食和粮食制品；玉米赤霉烯酮；不确定度依据GB 5009.209-2016《食品安全国家标准食品中玉米赤霉烯酮的测定》[1]和JJF 1135—2005 国家计量技术规范《测量不确定度评定与表示》[2]，样品经乙腈溶液提取,经免疫亲和柱净化后,采用液相色谱分离、荧光检测器测定,外标法定量,测定粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮。
本文分析了粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮测量不确定的来源，利用测量获得的结果及其他相关资料，评定该测量结果的不确定度。
1.测定步骤（粮食和粮食制品）1.1提取准确称取约40g粉碎试样 (精确到0.1g )试样于均质杯中 ,加入4g氯化钠和100ml提取液 ,以均质器高速搅拌提取2min,定量滤纸过滤。
移取10.0ml 滤液加入40ml水稀释混匀，经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清，滤液备用。
1.2净化将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下，准确移取10.0ml（相当于0.8g样品）1.1中的滤液注入玻璃注射器中。
将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以1滴/s-2滴/s的流速缓慢通过免疫亲和柱，直至有部分空气进入亲和柱中。
用5ml水淋洗柱子1次，流速为1滴/s-2滴/s，直至有部分空气进入亲和柱中，弃去全部流出液。
准确加入1.5ml甲醇洗脱，流速约为1滴/s。
收集洗脱液于玻璃试管中，于55℃以下氮气吹干后，用1.0ml流动相溶解残渣，供液相色谱测定。
2．空白实验不称取试样，按1.1和1.2的步骤做空白实验。
超高效液相色谱法快速检测粮食中玉米赤霉烯酮的含量
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ： ｇ ｒ ａ ｉ ｎ ； ｚ ｅ ａ ｒ ａ ｌ ｅ ｎ ｏ ｎ ｅ（ Ｚ Ｅ Ｎ） ； ｕ ｌ ｔ ｒ ａ —ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｆ ｒ ｏ ｍａ ｒ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ（ Ｕ Ｐ Ｌ Ｃ） ； ｉ ｍ—
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Ｚ Ｅ Ｎ） 的方 法 。Ｚ Ｅ Ｎ的保 留体 积 为 ０ ． ４ ７ ｍ Ｌ ， 检 出限为 ５ ｐ ｇ ， 在 １ ０～ ５ ０ ０ ． ０ Ｐ ｇ范 围 内呈线 性相 关 ， 相 关 系数 Ｒ 值为 ０ ． ９ ９ ９ ９ ； 在 小麦 、 玉 பைடு நூலகம்样 品 中的加标 回收 率分 别为 ８ ５ ％～１ ０ ２ ％和 ８ ３ ％～１ ｌ ２ ％， 精 密
高效液相色谱法分析(玉米赤霉烯酮)原始记录1
情况
质控措施
样品总数
平行样个数
质控样个数
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（玉米赤霉烯酮）原始记录第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
定容体积
（mL）
峰面积
（A）
结果
(μg/kg）
平均值
（μg/kg）
相对偏差（%）
备注
试验允差要求：≤15%
仪器使用情况使用前：使用后：
××/××-074
样品处理情况
按照GB 5009.209-2016对样品进行处理。
标准使用液名称及浓度
玉米赤霉烯酮标准使用液1.0ug/mL
仪器
检测条件
检测器：2475荧光检测器
色谱柱：C18反相柱
柱温：室温
流速：1.0 mL/min
激发波长：274 nm
发射波长：440 nm
流动相：乙腈-水-甲醇（46:46:8体积比）
进样量：μL
单标
标液浓度（ng/mL）
峰面积（A）
检出限
粮食和粮食制品：5μg/kg；
酒类：20μg/kg；
酱油、醋、酱及酱制品：50μg/kg；
食用植物油、大豆、油菜籽：10μg/kg
定量限
粮食和粮食制品：17μg/kg；
酒类：66μg/kg；
酱油、醋、酱及酱制品:165μg/kg；
食用植物油、大豆、油菜籽：33μg/kg
检验人：复核人：审核人：
样品空白值
计算公式：X=
式中：X--样品中玉米赤霉烯酮的含量（μg/kg）;
A--样品溶液中被测玉米赤霉烯酮的峰面积;
AS—标准溶液中被测玉米赤霉烯酮的峰面积;
C18固相萃取柱净化-超高效液相色谱法检测谷物中玉米赤霉烯酮
有 特异 、 快速 等特 点 ， 可用 于大 批 量 样 品 的筛选 ； 但 检 测结果 重 复性 差 ， 容易交 叉 反应 ， 从 而造 成样 品假 阳性 。高效 液相 法 是 目前 最 常用 的检 测 方 法 ， 其 特
ｚ ｅ ａ ｒ ａ ［ ｅ ｎ ｏ ｎ ｅ ｉ ｎ ｃ ｏ ｒ ｎ ｗａ ｓ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ． Ｔｈ ｅ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｗａ ｓ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｍｅ ｔ ｈ ｙ ｔ ａ ｔ ｃ ｏ ｈ ｏ ｌ － ｗａ ｔ ｅ ｒ （ ｖ ／ ｖ ＝８ ０： ２ ０ ） ，ｐ ｕ ｒ ｉ ｆ ｉ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｃ 喁ｓ ｏ ｌ ｉ ｄ
Ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｚ ｅ ａ ｒ ａ ｌ ｅ ｎ ｏ ｎ ｅ ｉ ｎ ｃ ｏ ｒ ｎ ｂ ｙ ＵＰ Ｌ Ｃ ｗｉ ｔ ｈ Ｃｌ ８ ｓ ｏ ｌ ｉ ｄ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ ｃ ｌ ｅ ａ ｎ ｉ ｎ ｇ
郁等。
目前 玉米 赤霉 烯 酮 的前处 理净 化技 术 主要包 括
不仅柱效更高 ， 而且通过改进仪器条件 ， 可 以使分离 时 间更 短 ， 峰容 量更 大 ， 能够 更好 地满 足 复杂样 品对
分离 分析 的要 求 。
液一 液 萃 取 和 固相 萃 取 等 ， 前 者操 作 繁 琐 ， 需 要 使 用
（ 陕西省粮油产品质量监督检验所 ， 陕西 西安 ７ １ ０ ０ １ ６ ）
摘
要： 建立了谷物 中玉米赤霉烯酮的 Ｃ 固相 萃取柱净化一 超 高效液相 色谱检测 方法 。样品 经甲醇一 Ｎａ Ｃ １ 水溶 液
玉米赤霉烯酮检测原理
玉米赤霉烯酮检测原理一、引言玉米赤霉烯酮是一种由赤霉菌产生的毒素，常见于玉米等粮食中。
它对人体和动物的健康有很大的危害，因此需要对其进行检测。
本文将介绍玉米赤霉烯酮检测原理。
二、玉米赤霉烯酮的危害玉米赤霉烯酮是一种强烈的神经毒素，可导致中枢神经系统和免疫系统受损。
长期摄入含有该毒素的食品会导致肝脏、肾脏等器官受损，甚至引发癌症。
三、玉米赤霉烯酮检测方法1.高效液相色谱法（HPLC）HPLC是目前常用的检测方法之一。
该方法基于化学分离原理，将样品中的玉米赤霉烯酮与其他物质分离开来，并通过检测其在色谱柱上的保留时间和峰面积来确定其含量。
2.气相色谱法（GC）GC是另一种常用的检测方法。
该方法利用气相色谱柱将样品中的玉米赤霉烯酮与其他物质分离开来，并通过检测其在色谱柱上的保留时间和峰面积来确定其含量。
3.酶联免疫吸附测定法（ELISA）ELISA是一种基于免疫学原理的检测方法。
该方法利用特异性抗体与玉米赤霉烯酮结合，形成固定复合物，再通过底物反应来检测其含量。
4.质谱法（MS）MS是一种高灵敏度、高分辨率的检测方法。
该方法将样品中的玉米赤霉烯酮离子化后进行质谱分析，通过检测其离子信号强度和质荷比来确定其含量。
四、ELISA法玉米赤霉烯酮检测原理1.抗体制备首先需要制备特异性抗体。
将玉米赤霉烯酮结构类似物做为免疫原，注射到动物体内，使其产生对该免疫原特异性的抗体。
然后采用血清学技术从动物血清中提取纯化出特异性抗体。
2.样品处理将待测样品加入到微孔板中，与固定在孔底的抗体结合。
通过洗涤去除非特异性结合物质。
3.检测加入特异性酶标记抗体，与玉米赤霉烯酮形成复合物，再加入底物进行反应。
反应结束后，通过检测底物反应产生的颜色变化来确定玉米赤霉烯酮含量。
五、ELISA法玉米赤霉烯酮检测优缺点1.优点：灵敏度高、操作简便、快速、可大批量检测。
2.缺点：受到交叉反应干扰，需要制备特异性抗体。
六、总结本文介绍了玉米赤霉烯酮的危害及其常用的检测方法。
高效液相色谱—串联质谱法测定玉米油中的玉米赤霉烯酮
高效液相色谱—串联质谱法测定玉米油中的玉米赤霉烯酮摘要：实验建立了玉米油中检测玉米赤霉烯酮的方法，用5 mL正己烷溶解后，10 mL乙腈提取，高效液相色谱-串联质谱法测。
外标法定量，在1-50 μg/L范围内，玉米赤霉烯酮的线性方程相关系数r2 >0.999，方法的检出限和定量限，分别为5.0 μg/kg和10.0 μg/kg，平均回收率为88.7 %~90.4 %，日内精密度为5.0 %~6.4 %，日间精密度为6.1 %~8.1 %。
该方法简便、快捷、准确，可用于玉米油中玉米赤霉烯酮的测定。
关键词：正己烷；乙腈；高效液相色谱-串联质谱；玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEN），也称为F2毒素，是由镰刀菌产生的一种具有类雌性激素活性的一类真菌毒素[1]。
它广泛存在于霉变的玉米、高粱、小麦、大麦等粮食谷物中，是污染范围最广的一种镰刀菌毒素[2]。
玉米赤霉烯酮具有很大的毒性作用，可损伤DNA、诱发肿瘤、对免疫功能方面造成影响[3-4]。
玉米油作为最常见的植物性食用油之一，具有很高的营养价值，是我国主要食用油品之一，但在其收获加工过程中很容易产生玉米赤霉烯酮，食用后会对人体产生一定危害。
GB 2761-2017《食品中真菌毒素限量》中规定谷物及其制品的玉米赤霉烯酮限量值为60 μg/kg，而对玉米油中的含量暂无要求，只是做为风险监测的一项指标。
目前用于粮谷和植物性油脂中玉米赤霉烯酮的检测方法主要有薄层色谱法、酶联免疫吸附法、液相色谱法和液相色谱-串联质谱法[5-9]等。
但是，由于薄层色谱和免疫分析法准确度较低且存在干扰，很容易出现假阳性，只适合于定性或初筛，现在已较少使用；液相色谱法被广泛使用，能满足日常检测需要；而高效液相色谱—串联质谱法抗干扰能力强，准确度和精密度更高，可用于定性定量分析。
对于样品的前处理方法主要有直接稀释法[10]、免疫亲和柱[11]、固相萃取柱净化[12]等方法，稀释法的前处理存在净化不彻底、基质干扰大的问题，而免疫亲和柱虽使用范围广、特异性强，适用于处理复杂基质的样品，但价格昂贵，批量检测成本高，且前处理较为复杂。
粮油检测粮食中玉米赤霉烯酮的检测超高效液相色谱方法编制说明
《粮油检测粮食中玉米赤霉烯酮的测定超高效液相色谱方法》行业标准制定编制说明玉米赤霉烯酮(Zearalenone) 又称F-2毒素，主要由木贼镰刀菌（）、尖孢镰刀菌（）、禾谷镰刀菌、三线镰刀菌（）、茄病镰刀菌（）、串珠镰刀菌（Fusarium. moniliforme）等产生。
ZEN是一种生殖系统毒素（雌性激素），有强烈的致畸作用,被国际癌症研究中心归类为3类致癌物,主要污染小麦、大麦、水稻、玉米、小米和燕麦等谷物。
面粉、啤酒等农产品加工品中也常能检测到该毒素的存在。
阿根廷报道新收获玉米的含量在未检出到83 mg/kg之间, 储存玉米的含量在未检出到17 mg/kg之间。
我国小麦和玉米中也经常发生玉米赤霉烯酮的污染，危害消费者健康。
研究表明：我国成人通过玉米制品暴露ZEN 的量超过每日允许限量（TDI），部分儿童通过玉米制品暴露ZEN 的量也超过了TDI。
我国食品安全国家标准《GB2761-2011 食品中真菌毒素限量》中规定谷物及其制品中玉米赤霉烯酮限量为60 μg/kg。
目前报道用于检测玉米赤霉烯酮的分析方法有酶联免疫法、免疫胶体金试纸法、气相色谱质谱联用法、高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法、多不对称波形离子迁移谱质谱、间接竞争免疫分辨荧光免疫分析、薄层色谱法等。
薄层色谱法由于操作复杂，目前应用较少；胶体金和酶联免疫方法用于快速筛查;普通液相色谱方法目前应用较多，但分析速度较慢，耗费溶剂较多，成本增加；液质联用仪检测需要高端的质谱仪。
当前急需建立一种更加灵敏、高效、低溶剂量的玉米赤霉烯酮微量快速定量方法。
为了满足当前我国粮食绿色检测、监测定量分析的需要，通过查阅文献，根据范德米特(van Deemeter)方程理论，结合免疫亲和净化手段，基于UPLC分离技术，建立了一种进样量小、分离度高、快速准确、环保的玉米赤霉烯酮定量分析方法。
本标准项目的研究有助于提高粮食样品检测、监测效率，降低成本，保护环境，保障从业人员健康安全。
玉米赤霉烯酮检测方法
玉米赤霉烯酮检测方法玉米赤霉烯酮是一种由产自赤霉菌的黄曲霉烯酮合成的毒素。
该毒素在玉米和其他谷物中广泛存在，对人和动物的健康有害。
因此，玉米赤霉烯酮的检测方法至关重要，以保障食品安全和质量。
目前，市场上常用的玉米赤霉烯酮检测方法主要有以下几种：1. 高效液相色谱法（HPLC）：该方法是将样品溶解后经过净化处理，然后使用高效液相色谱仪进行分析。
这种方法可以测定不同类型的赤霉烯酮类毒素，但是需要较复杂的样品预处理过程。
2. 气相色谱法（GC）：这种方法是将样品中的赤霉烯酮蒸发，然后通过气相色谱进行定量分析。
该方法对于特定类型的赤霉烯酮类毒素的测定较为准确，但需要耗费较多的时间和资源。
3. 免疫分析法：这种方法利用特殊的抗体与赤霉烯酮结合，产生可见的信号，从而测定样品中的赤霉烯酮含量。
这种方法操作简便，结果可即时获得，但是对样品中的干扰物较为敏感。
4. 毛细管电泳法（CE）：这种方法利用样品在毛细管中的化学性质差异，通过分离电泳来测定赤霉烯酮的含量。
该方法适用于复杂的样品矩阵，并且可同时测定多种赤霉烯酮。
除了以上主流的检测方法，还有一些新兴的检测技术被应用到玉米赤霉烯酮的检测中：1. 生物传感器：利用生物分子与赤霉烯酮的特异性结合，通过传感器产生的电信号来测定赤霉烯酮含量。
这种方法具有灵敏度高、响应速度快的优势，但是需要对传感器进行特定设计和构建。
2. 分子印迹技术：利用功能单体与赤霉烯酮形成特异的相互作用，构建具有特异性识别能力的分子印迹聚合物。
该方法具有高选择性和较好的再生性，但是制备分子印迹聚合物需要较长的时间和较高的成本。
以上只是介绍了部分常用的玉米赤霉烯酮检测方法，每种方法都有其优缺点和适用范围。
在实际应用中，可以根据实验室条件、检测要求和经济成本等方面考虑选择合适的方法。
同时，需要注意的是，不同国家和地区可能存在不同的食品安全标准和监管要求，因此在检测过程中也需要遵循相应的法规和指南。
HPLC法测定玉米中的玉米赤霉烯酮
分析检测HPLC法测定玉米中的玉米赤霉烯酮王晨箐（湖南农业大学，湖南长沙 410128）摘 要：本文采用高效液相色谱法对玉米中的玉米赤霉烯酮进行检测。
优化的提取液为乙腈、水、甲醇，比例为46∶46∶8。
得出标准曲线方程y=0.043 4x+0.011 8，相关系数R2=0.999 93。
玉米赤霉烯酮的检出限为0.12 μg·kg-1，回收率为84.0%～92.4%，偏差为-1.5%，在PBS缓冲液样品中，检测值为254.1 μg·kg-1，回收率为95.6%。
通过优化样品前处理方法和色谱条件，实现了对玉米中玉米赤霉烯酮的准确、快速的定量分析。
关键词：高效液相色谱法；玉米；玉米赤霉烯酮Determination of Zearalenone in Maize by HPLCWANG Chenqing(Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China)Abstract: High performance liquid chromatography was used to detect zearalenone in corn. The optimized extract was acetonitrile, water and methanol in a ratio of 46∶46∶8. The standard curve equation y= 0.043 4x+0.011 8 is obtained, and the correlation coefficient R2=0.999 93. The detection limit of zearalenone was 0.12 μg · kg-1, the recovery rate was 84.0 %～92.4 %, and the relative standard deviation was -1.5 %. In the sample of PBS bu ff er, the detection value was 254.1 μg·kg-1, and the recovery was 95.6%. The accurate and rapid quantitative analysis of zearalenone in corn was realized by optimizing the sample pretreatment method and chromatographic conditions.Keywords: high performance liquid chromatography; corn; zearalenone高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用且成熟的技术，具有准确性高、分离效果好、操作简便等优点[1]。
高效液相色谱法测定饲用玉米中玉米赤霉烯酮的不确定度评定
高效液相色谱法测定饲用玉米中玉米赤霉烯酮的不确定度评定作者：王露李晓伟冯培培赵素勤王继美来源：《食品安全导刊·中旬刊》2022年第10期摘要：本文按照GB/T 28716—2012檢测饲用玉米中玉米赤霉烯酮的含量，按照CNAS—GL 006：2019的要求，建立数学模型，分析检测过程中的不确定度分量的来源，并进行量化评定。
结果表明，饲用玉米中玉米赤霉烯酮的含量为76.23 μg·kg-1，扩展不确定度为8.55μg·kg-1（k=2）。
本实验中不确定度的主要来源是标准物质溶液配制和高效液相色谱仪操作引入的相对不确定度。
关键词：高效液相色谱；玉米赤霉烯酮；不确定度Uncertainty Evaluation on Determination of Zearalenone in Feed Corn by High Performance Liquid ChromatographyWANG Lu， LI Xiaowei， FENG Peipei， ZHAO Suqin， WANG Jimei（Henan Zhongbiao Testing Service Co.， Ltd.， Zhengzhou 450000， China）Abstract： In this paper，the content of zearalenone in forage maize was determined according toGB/T 28716—2012. And according to CNAS—GL 006：2019， a mathematical model was established， and the sources of the uncertainty components in the determination process were analyzed for quantitative evaluation. The results showed that the content of zearalenone in feed corn was 76.23 μg·kg-1， and the expanded un certainty was 8.55 μg·kg-1 （k=2）. The main sources of uncertainty in this paper are the relative uncertainty caused by the preparation of standard substance solution and the relative uncertainty caused by the operation of HPLC.Keywords： high performance liquid chromatography; zearalenone; uncertainty玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEA），又称F-2毒素，是由镰刀菌属菌株产生的代谢产物，广泛存在于霉变玉米等谷物作物中，会导致畜禽出现生殖、免疫疾病，造成畜牧企业的经济损失。
高效液相色谱法定量检测玉米油中玉米赤霉烯酮的溶剂萃取预处理方法研究
玉米 赤 霉烯 酮 （ＺＥＮ）是一 种 由镰 刀菌 属 霉菌 产 生的有毒代 谢物… ，具有 免疫毒 性 、肝 毒性 和细胞 毒性 。玉米油作为玉米制品 ，在收获 、加工、运输
等过程 中易受镰 刀菌污染产生 ＺＥＮ。 目前 ，国内外测定食品中 ＺＥＮ的方法主要有酶
联免 疫 法【３ ］、胶 体 金 快 速 测 试 法［５］、薄层 色 谱
１１２４＠ １２６．ｃｏａｌ。
法 、液相色谱法 卜 等。前 ３种 方法多用于定 性 检测 ，定量检测则 以液相色谱法 （ＨＰＬＣ）最为常用 ， 且常与免疫亲和柱 （ＩＡＣ）层析¨们、净化柱层析… 的 预处理方法结合使用 。对于食用油 中 ＺＥＮ的定 量 分析 ，同样 以 ＨＰＬＣ最 为 常用 。 我 国食 品 安 全 国 家 标 准 ＧＢ ５００９．２０９－２０１６规 定 食 用 植 物 油 中 ＺＥＮ
收稿 日期 ：２０１７—０９—２０；修 回 日期 ：２０１７—１０—１７ 基 金项 目：“十三 五”国家重 点研 发计￣ｌＪ（２０１６ＹＦＤ０４０１４００） 作者 简介 ：朱文倩 （１９９３），女 ，在读硕 士 ，研 究方 向为脂 质科 学 与技术 （Ｅ－ｍａｉｌ）ｚｈｕｗｅｎｑｉａｎ２３＠１６３．ｃｏｒ ｎ。 通信 作者 ：黄健花 ，副教授 ，硕士生导师 （Ｅ．ｍａｉｌ）ｈｕａｎｇｊｉａｎｈｕａ
ｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｏｌｖｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｅｒｅ ｏｂｔｍｎｅｄ ａｓ￣ｌｌｏｗｓ：ｗｉｔｈ ９０％ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｗａｔｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ １：４ ａｎｄ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ２０ ｍｉｎ． Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｒｅａｌｉｚｅｄ ｔｈｅ ａｃｃｕｒａｔｅｌｙ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＺＥＮ． Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆ
高效液相色谱
班级:08生物制品姓名:谢琦学号:43高效液相色谱法对玉米中玉米赤霉烯酮的测定尹青岗1,2王锋1周洪杰1张海伟1谢芳1哈益明1(中国农业科学院农产品加工研究所1,北京100193)(西南大学食品科学学院2,重庆400716)摘要：研究了高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮的方法。
样品借鉴了GB/T 19540-2004中提取玉米赤霉烯酮的方法,通过Oasis HLB净化柱对提取液净化,以agilent extent C18色谱柱为分离柱,乙腈-水(V水∶V乙腈=55∶45)为流动相进行荧光检测(λex=235 nm,λem=460 nm)。
玉米赤霉烯酮的质量浓度在12 ~2400μg/kg范围内呈良好线性,相关系数为0.9994,对添加高、中、低3个浓度玉米赤霉烯酮的玉米样品进行加标回收试验,平均回收率分别为96.736%、93.839%、86.240%,变异系数在1% ~10%之间,最低检测限为10μg/kg。
此方法对玉米中玉米赤霉烯酮的检测是可行的,且可给谷物中玉米赤霉烯酮检测方法优化提供参考。
关键词：玉米赤霉烯酮；高效液相色谱；荧光检测器；玉米Determination of Zearalenone in Maiz e by HPLC-FLD Yin Qinggang1,2Wang Feng1Zhou Hongjie1 Zhang Haiwei1Xie Fang1Ha Yiming1 (Institute of Agro Food Science and Technolony,The Chinese Academy of Agri cultural Sciences1,Beijing100193)(College of Food Science, Southwest University2, Chongqing400716)Abstract：A method was established for determination of mycotoxin zearalenone(ZEN) in maiz e by high performance liquid chromatography(HPLC). Using the method of GB/T 19540:2004 as reference, samples were cleaned up through Oasis HLB column. Extracted samples were analyzed by HPLC on an agilent extent C18column with acetonitrile/water (45∶55) as mobile phase (1.0 mL min 1), and fluorescence detection (λex=235 nm,λem=460 nm) was conducted. Results: The calibration graphs are linear up from 12~2 400μg/kg for ZEN in maiz e and correlation coefficient is 0.9994. For maiz e samples added with high, middle or low level of ZEN reference material, the recovery is 86.240%, 93.839%,96.736%, respectively. The relative standard deviations are 1%~10%, and t he minimum detection limit is 10μg/kg. This determination method for ZEN is feasible and may also provide reference to improve ZEN determination in other cereal grains.Key words：zearalenone; HPLC; FLD; maiz玉米赤霉烯酮(zearalenone,简写ZEN)最初从污染了禾谷镰刀菌的发霉玉米中分离得到,是Fusarium culmorum和Fusarium gra minearum等镰刀菌属的次级代谢产物,化学分子式为C18H22O5,是一种2,4-二羟基苯甲酸内酯类化合物(6-(10-羟基-)6-氧基碳烯基-β-雷锁酸-μ-内酯)[1],其结构与雌激素类似,是一种危害极大的真菌毒素[2-4]。
粮食中玉米赤霉烯酮含量的测定
现代农业研究玉米、燕麦、小米、大米、小麦、大麦等谷物是玉米赤霉烯酮的主要污染对象，有较强的耐热性，还具有可在生殖系统上起作用的雌激素作用，能同时使家禽、实验小鼠及家畜产生激素亢进症。
孕妇食用的食品中若含有玉米赤霉烯酮将会引起畸形、死胎及流产。
用于制作各种面食的面粉中若含有玉米赤霉烯酮，将会对被食用者的中枢神经系统产生中毒症状，如头痛、恶心及神经抑郁等[1]。
目前用于检测该真菌毒素的分析方法有很多，本文采用高效液相色谱法，本文参照GB/T 5009.209-2008，分析了玉米中的玉米赤霉烯酮，得到了令人满意的分析结果。
1实验条件1.1仪器本实验应用的是岛津型号为LC-30A 的超高效液相色谱仪，使用二元高压梯度系统。
详细配置：，CBM-20A 系统控制器,SIL-30AC 自动进样器，Lab-Solutions Ver.5.42SP3色谱工作站，DGU-20A5R 在线脱气机，CTO-30A 柱温箱，LC-30AD 输液泵，RF-20AXS 荧光检测器。
1.2实验分析条件[2],[3]流动相：乙腈+水+甲醇（40+53+7）混合，并脱气；进样体积：2μL；检测波长：Ex=305nm，Em＝460nm；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；洗脱方式：等度洗脱；色谱柱：Shim-pack XR-ODS II 2.2μm ，75mm L×3.0mmI.D.。
1.3样品制备1.3.1标准溶液配制用乙腈作溶剂将适量准确称取的玉米赤霉烯酮的标准品配制成0.1mg/mL 浓度的标准储备液，并避光放置于4℃的冰箱中保存。
用流动相将玉米赤霉烯酮标准储备液稀释成标准工作溶液，浓度为10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L。
粮食中玉米赤霉烯酮含量的测定（本溪国家粮油质量监测站117000）【摘要】本文通过使用超高效的液相色谱仪建立了一种测定玉米赤霉烯酮在粮食中含量的方法。
高效液相色谱法对玉米中玉米赤霉烯酮的测定
高效液相色谱法对玉米中玉米赤霉烯酮的测定尹青岗;王锋;周洪杰;张海伟;谢芳;哈益明【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2009(024)007【摘要】研究了高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮的方法.样品借鉴了GB/T 19540-2004中提取玉米赤霉烯酮的方法,通过Oasis HLB净化柱对提取液净化,以agilent extent C18色谱柱为分离柱,乙腈-水(V水:V乙腈=55:45)为流动相进行荧光检测(λex=235 nm,λem=460 nm).玉米赤霉烯酮的质量浓度在12～2 400μ/kg范围内呈良好线性,相关系数为0.9994,对添加高、中、低3个浓度玉米赤霉烯酮的玉米样品进行加标回收试验,平均回收率分别为96.736%、93.839%、86.240%,变异系数在1%～10%之间,最低检测限为10μ/kg.此方法对玉米中玉米赤霉烯酮的检测是可行的,且可给谷物中玉米赤霉烯酮检测方法优化提供参考.【总页数】4页(P138-141)【作者】尹青岗;王锋;周洪杰;张海伟;谢芳;哈益明【作者单位】中国农业科学院农产品加工研究所,北京100193;西南大学食品科学学院,重庆400716;中国农业科学院农产品加工研究所,北京100193;中国农业科学院农产品加工研究所,北京100193;中国农业科学院农产品加工研究所,北京100193;中国农业科学院农产品加工研究所,北京100193;中国农业科学院农产品加工研究所,北京100193【正文语种】中文【中图分类】R155.5+2【相关文献】1.单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米中的玉米赤霉烯酮 [J], 田苗;林维宣2.分子印迹亲和净化—高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮 [J], 裴瑞利;柳家鹏;王莹3.高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮 [J], 罗小虎; 包清彬; 杨潇; 孔凌4.反相高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮 [J], 康维钧;王玉平;杨福江;谈敦芳;计融5.高效液相色谱法测定小麦、玉米中玉米赤霉烯酮 [J], 叶蔚云;陈永红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
粮油作物中玉米赤霉烯酮检测方法研究及建议
玉米赤霉烯酮（ZEN），又称F-2毒素，是由镰刀菌属真菌产生的一种次级代谢产物，具有雌激素样活性的非甾体类真菌毒素，起初发现于玉米赤霉病之中，后经突变衍生出多种毒素种类。
玉米赤霉烯酮主要通过被污染的谷物、肉及奶制品等进入人体，危害人体生殖系统的发育，会对动植物造成生殖毒害与致畸突变。
为了人们的健康，对粮食中玉米赤霉烯酮的含量必须严格控制。
玉米赤霉烯酮广泛存在于玉米、大米、小麦、豆类等粮油作物中，其污染范围广、程度深、危害大。
为了控制玉米赤霉烯酮的危害，各国制定了其在粮油产品中的限量标准，以利于保障食品安全[1]。
我国对玉米赤霉烯酮的最高限量为60μg/kg。
为了控制玉米赤霉烯酮在粮食产品中的含量，近年来兴起了一些快速、灵敏、准确的玉米赤霉烯酮检测方法。
1化学检测方法1.1薄层色谱法薄层色谱法主要的优点是成本低、过程简便，因此是应用较多的检测方式。
但该方法的检测灵敏度却是所有方法中最低的。
薄层色谱法对玉米赤霉烯酮含量检测的灵敏度极限为300ng/g。
在检测过程中主要采用CHCl3、色谱硅胶、甲醇-三氯甲烷等方式，并在此过程中依次对样品进行提取、层析净化与洗脱。
1.2气相色谱—质谱联用法气相色谱—质谱联用法检测灵敏度较高，不仅能对玉米赤霉烯酮、DES等进行检测，二期还能够同时对其他多种毒素进行检测，该检测法主要是采用比对法对结果进行评价，其结果具有很高的准确度。
该方法中主要是对样品代谢物进行标准谱图库的比对，所用设备较为特别，因此在应用中只能作为大型或官方检测方法。
气相色谱—质谱联用法也是美国AOAC官方指定检测方法。
粮油作物中玉米赤霉烯酮盛开（吉林省吉林市粮油监测站，吉林市132000）摘要：文章就玉米赤酶烯酮的常用检测方法进行了概述和比较，同时对相关方法的检测原理及最新研究进展进行了重点阐述，并对玉米赤酶烯酮检测技术的研究方向提出建议。
关键词：玉米赤霉烯酮；真菌毒素；检测方法中图分类号：S816.17文献标识码：A文章编号：2096-8515（2022）01-0033-03--331.3高效液相色谱法玉米赤霉烯酮具有荧光特性，因此可运用HPLC检测其在样品中的含量，该方法灵敏度较高，玉米赤霉烯酮检测极限为0.31μg/kg。
高效液相色谱法对饲料中玉米赤霉烯酮的测定
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分析方法，可以用于饲料中玉米赤霉烯酮的测定。
下面是一个简要的步骤：
样品准备：将饲料样品进行粉碎、均匀混合，取适量样品加入溶剂中进行提取。
提取：使用合适的溶剂对样品进行提取，将玉米赤霉烯酮溶解出来。
净化：对提取液进行净化处理，去除杂质和干扰物质，以获得纯净的玉米赤霉烯酮溶液。
样品注射：将净化后的样品溶液注入高效液相色谱仪中。
色谱条件：选择适当的色谱柱和移动相，设置合适的流速和温度条件，以实现对玉米赤霉烯酮的分离和定量。
检测：使用紫外或荧光检测器进行检测，测量玉米赤霉烯酮的浓度。
数据分析：根据标准曲线或内标法，计算样品中玉米赤霉烯酮的含量。
需要注意的是，具体的方法和步骤可能因实验室条件和设备不同而有所差异。
因此，在进行实际测定之前，建议参考相应的标准方法或专业文献，并在合适的实验室环境下进行操作。
超高效液相色谱法快速测定粮食中玉米赤霉烯酮
２ 岛 津企业管理（ 中国） 有限
［ 摘要 ］ 建立 了一种使 用岛津超 高效液相 色 谱仪 Ｌ Ｃ 一 ３ ０ Ａ测定粮食 中玉米赤霉烯酮的方法。 实验结果表 明： 在
浓度 １ ０ － ５ ０ ０ Ｌ内， 校 准 曲线相 关 系数 为 ０ ． ９ ９ ９ ８ ； 样量 ２ Ｌ ， 仪 器检 出限 为 １ ． ５ Ｉ ￣ ｇ ／ Ｌ ， 定 量 限为 ５ Ｉ ￣ ｇ ／ Ｌ 。３
个浓度 下标 准品 的保 留时 间和峰 面积 的相 对标 准偏 差分 别在 ０ ． ０ ３ ％～ ０ ． １ ５ ％和 ０ ． ２ ８ ％～ １ ． ７ １ ％；玉米样 品平 均
加标 回收 率为 ９ ２ ． ７ ％一 １ ０ ４ ． ０ ％。
［ 关键词 ］ 玉米赤霉烯酮； 粮食 ； 超高效液相 色谱
１ 材料 与方法
１ ． １ 主要仪 器
加入 ４ ｇ氯化 钠 和 １ ０ ０ ｍＬ甲醇 一 水（ ８ ＋ ２ ） ， 以均 质器
高速搅拌提取 ２ ｍ ｉ ｎ ， 通过折叠快速定性滤纸过滤 ，
准确移取 １ Ｏ ． ０ ｍ Ｌ滤 液并 加入 ４ ０ ｍＬ水 稀 释 混 匀 ，
本实验使用岛津超高效液相色谱仪 Ｌ Ｃ 一 ３ ０ Ａ二 元高压梯度系统 。具体配 置为 ： Ｌ Ｃ 一 ３ ０ Ａ Ｄ输液泵 ，
０ Ａ系统控 制器 ， Ｌ ａ ｂ Ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ Ｖ ｅ ｒ ． ５ ． ４ ２ Ｓ Ｐ ３色谱工 霉病的玉米中分离得到 ， 有ｌ ５ 种以上的衍生物Ⅲ 。 玉 ２ 米 赤霉烯 酮 主要污 染玉米 、 小麦 、 大米 、 大麦 、 小 米 和 作 站 。
燕 麦等谷 物 。玉米 赤霉烯 酮性 质稳 定 ， 耐 热性 较强 ， １ ． ２ 色谱 条件 色谱 柱 ： Ｓ ｈ ｉ ｍ— ｐ ａ ｃ ｋ ＸＲ — Ｏ Ｄ Ｓ Ｉ Ｉ ３ ． ０ ｍｍ￣ ７ ５ ｍ ｍ×
玉米赤霉烯酮最新国家标准
玉米赤霉烯酮最新国家标准玉米赤霉烯酮是一种由镰刀菌属真菌产生的毒素，它主要存在于玉米和其他谷物中，对人体和动物健康造成严重威胁。
因此，制定和实施玉米赤霉烯酮国家标准具有重要意义，可以有效保障食品安全，保护公众健康。
根据最新的国家标准，玉米赤霉烯酮的限量标准得到了明确规定。
在玉米及玉米制品中，玉米赤霉烯酮的限量标准为每公斤不超过5μg。
这一限量标准的制定，充分考虑了玉米和玉米制品的生产加工特点，既能有效控制玉米赤霉烯酮的含量，又不至于对玉米产业造成过大影响。
此外，国家标准还对玉米赤霉烯酮的检测方法进行了详细规定。
采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）进行检测，可以确保对玉米赤霉烯酮进行准确、快速的检测。
这一检测方法的确定，为监管部门提供了科学、可靠的手段，保障了玉米及玉米制品中玉米赤霉烯酮的监测工作。
除了限量标准和检测方法外，国家标准还对玉米赤霉烯酮的风险评估和风险管控进行了全面规定。
通过对玉米赤霉烯酮的毒性、暴露途径、暴露水平等方面进行科学评估，可以更好地了解玉米赤霉烯酮对人体健康的影响，为相关部门制定风险管控措施提供科学依据。
总的来看，玉米赤霉烯酮最新国家标准的出台，为玉米及玉米制品的生产、加工、流通和监管提供了明确的指导和依据。
在实际操作中，各级监管部门和生产企业应严格按照国家标准的要求进行生产和监管，确保玉米及玉米制品中玉米赤霉烯酮的含量符合国家标准要求，保障公众健康和食品安全。
在未来，国家标准的修订和完善也将是一个持续的过程，监管部门和科研机构需要不断跟进最新的科学研究成果，及时修订和完善国家标准，以更好地适应玉米赤霉烯酮监管的需要，保障公众健康和食品安全。
综上所述，玉米赤霉烯酮最新国家标准的出台，标志着我国在食品安全领域迈出了重要一步，为玉米赤霉烯酮的监管提供了更加科学、严格的依据，有助于保障公众健康和食品安全。
希望各级监管部门和生产企业能够切实履行监管责任，共同维护食品安全，保障公众健康。
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粮油食品科技 第 22 卷 2014 年 第 2 期
到样品提取液。 1． 5． 2 样品净化与洗脱 将免疫亲和柱连接于 10 mL 玻璃注射器下。准 确移取 10． 0 mL 上述提取滤液注入玻璃注射器中， 将空气压力泵与玻璃注射器连接， 调节压力使溶液 直至有 以约 1 ～ 2 滴 / s 流速缓慢通过免疫亲和柱， 。 10 mL 1 部分空气通过柱体 以 水淋洗柱子 次， 弃 去全部流出液， 并使部分空气通过柱体。 准确加入 1． 0 mL 甲醇洗脱， 流速控制为 1 ～ 2 mL / min， 收集全 部洗脱液于玻璃试管中， 过 0． 22 μm 有机滤膜， 供 测定。 1． 6 样品测定 将玉米赤霉烯酮标准工作液和样液按上述色谱 条件进行 UPLC 分析， 得到标准曲线回归方程， 以外
添加 ZEN 的小麦、 玉米样品， 每个浓度做 5 个 平行样检测， 测方法回收率， 结果见表 4 。 对小麦和
图3 玉米赤霉烯酮的色谱图 ZEN 的保留体积 0． 2 0． 48 标准偏差 相对标准偏差 （ STD） （ ＲSD） / % 0． 006 1． 3 样品 添加量 / （ ng / g） 小麦 20 /50 /100 20 /50 /100 玉米 表1 流速 / （ mL / min） 保留体积 / mL 0． 1 0． 47
72
标法定量， 计算分析
激发波长、 发射波长的选择 用荧光 实验过程中采用流动相作为背景溶液， 检测器对玉米赤霉烯酮标准液在 190 ～ 600 nm 进行 扫描（ 见图 1 ） 。 结果表明， 玉米赤霉烯酮最佳激发 波长为 305 nm， 最佳发射波长为 460 nm。
1
1． 1
材料与方法
仪器与试剂 超高效液相色谱仪 （ Acquity UPLC ） ： 美国 Wa-
ters 公 司； 荧 光 检 测 器 （ FLD ） ： 美 国 Waters 公 司； EMPOWEＲ 色谱工作站； 玉米赤霉烯酮免疫亲和柱： 90mm ） ： 美国 Vicam 公司； 玻璃纤维滤纸 （ GF / B ， 英国 Whatman 公司； 0． 22 μm 有机滤膜： 天津津腾； 6 位泵流操作架： 北京中检维康公司； PL403IC 型电 子分析天平： 梅特勒上海有限公司； Pulverisette14 高 速旋转粉碎机： 德国 Fritsch 公司； 高速均质器： 美国 Waring 公司。 玉米赤霉 烯 酮 甲 醇 溶 液 标 准 品 ： 国 家 粮 食 局 乙腈 （ 色谱纯 ） ： 美国 Fisher 科学研究院研制 ； 甲醇 、 公司 ； 实验用 水 为 Milli － Q 超 纯 水 ： 美 国 Millipore 公司 。 1． 2 玉米赤霉烯酮标准溶液的配制 准确移取一定体积的玉米赤霉烯酮溶液标准物 ， 浓度分 质 用流动相稀释成适当浓度的标准工作液 ， 10 、 20 、 50 、 100 、 200 、 500 μg / L。 别为 0 、 色谱条件 Acquity UPLC ； 色 谱 柱： Waters Acquity UPLC BEH C18 （ 50 mm × 2． 1 mm，1． 7 μm ） ； 流动相 ∶ 乙腈 + 水 + 甲醇， 按体积比 46∶ 46∶ 8 混合， 并脱气； 流速： 0． 15 mL / min； 柱温： 25 ℃ ； 进样量： 1 μL； 检 测 器： Acquity FLD 检 测 器， 激 发 波 长 305 nm； 发 射 波 长 1． 3 455 nm； 样品室温度： 25 ℃ 。 1． 4 样品加标 未检出 ZEN 的稻谷、 小麦、 玉米样品用高速旋 转粉碎机粉碎， 过 0． 5 mm 筛。 称取 40 g 粉碎的稻 谷、 小麦、 玉米样品分别放入 250 mL 具塞三角瓶中， 添加玉米赤霉烯酮标准溶液， 使小麦、 玉米中 ZEN 20 、 50 、 100 ng / g ， ， 的含量分别为 避光 室温过夜。 1． 5 样品提取与净化 1． 5． 1 样品提取 将稻谷、 小麦、 玉米样品及过夜后的加标样品， 加入 4 g 氯化钠和 100 mL 甲醇—水（ 8 + 2 ） ， 以均质 器高速搅拌提取 2 min， 通过折叠快速定性滤纸过 滤， 准确移取 10． 0 mL 滤液并加入 30． 0 mL 水稀释 混匀， 用玻璃纤维滤纸过滤 1 ～ 2 次， 至滤液澄清， 得
Ｒapid detection of zearalenone in grain by UPLC
XIE Gang，WANG Song － xue，CUI Hua，ZHANG Yan，LI Ｒui （ Academy of State Administration of Grain，Beijing 100037 ） Abstract： A rapid method，immunoaffinity column － ultra － high performance liquid chromatography，was established for determining zearalenone （ ZEN） in grain． The retention volume of ZEN was 0． 47 mL，the detection limit 5 pg． The linear detection ranges of ZEN was 10 ～ 500 pg with correlation coefficients （ Ｒ2 ） of 0． 999 9． Ｒecovery rates in grains （ wheat，corn） spiked with ZEN was in the range of 85% ～ 102% ， 83% ～ 112% ，respectively，with the relative standard deviation of 2． 7% ～ 6． 9% ． The method with analytical time less than 45 min was suitable for the determination of ZEN in the raw grain，with the advantages of simplicity，rapidness，sensitivity，good reproducibility，and less solvent． Key words： grain； zearalenone （ ZEN ） ； ultra － high performance liquid chromatography （ UPLC ） ； immunoaffinity column（ IAC ） ZEN ） 又称 F － 2 玉米赤霉烯酮 （ Zearalenone， 毒素， 主要由木贼镰刀菌 （ Fusarium． equiseti ） 、 尖孢 镰刀菌 （ Fusarium． oxysporum ） 、 禾谷镰刀菌 （ Fusarium． graminearum ） 、 三 线 镰 刀 菌 （ Fusarium． trcinctum） 、 茄 病 镰 刀 菌 （ Fusarium． solani ） 、 串珠镰刀菌 ［1 － 2 ］ （ Fusarium． moniliforme ） 等 产 生 。 ZEN 是 一 种 有强烈的致畸作用 ， 生殖系统毒素 （ 雌性激素 ） ， ［4 ］ 被国际癌症研究中心归类为 3 类致癌物 ， 主要污 染小麦、 大麦、 水稻、 玉米、 小米和燕麦等谷物。小麦 粉、 啤酒等农产品加工品中也常能检测到该毒素的 存在。阿根廷报道新收获玉米的含量在未检出到 83 mg / kg 之 间，储 存 玉 米 的 含 量 在 未 检 出 到 17 mg / kg 之间
粮油食品科技 第 22 卷 2014 年 第 2 期
质量安全
方法进行检测。 添加量为 100 ng / g 的同一批样品 每天测 7 次， 做方法精密度实验， 结果 重复测 7 天， 见表 3 。从表 3 的数据看， 方法具有较好的精密度。
表3 ＲSD s r / % 精密度实验结果 日内 2． 7% 日间 6． 9%
玉米加标样品的考察结果显示， 本方法的回收率为 83 ～ 112% （ 见表 4 ） 。
71
收稿日期： 2013 － 09 － 29 基金项目： 国家科技部 863 课题（ 2012AA101609 ） 1974 年出生， 作者简介： 谢刚， 男， 副研究员． 1977 年出生， 通讯作者： 王松雪， 男， 博士， 研究员．
质量安全
近年来建立在亚 2 μm 填料技术上的超高效液相色 具有超高分离度、 超快速度、 超高 谱系统（ UPLC ） ， ［18 － 19 ］ 。本文结合 灵敏度的特点， 适于微量快速分析 免疫亲和净化手段， 基于超高压快速液相色谱分离 技术， 建立了一种进样量小、 分离度高、 快速准确、 环 以满足当前绿色 保的玉米赤霉烯酮定量分析方法， 。 检验的需要
应用较少 ； 胶体金和酶联免疫方法用于快速筛查 ； 普通液相色 谱 方 法 目 前 应 用 较 多 ， 但分析速度较 慢， 耗费溶 剂 较 多 ， 成 本 高； 液 质 联 用 仪 检 测 需 要 高 高端的质 谱 仪 。 当 前 急 需 建 立 一 种 更 加 灵 敏 、 效、 低溶剂量的玉米赤霉烯酮微量快速定量方法 。
［5 ］ ［3 ］ ［6 － 7 ］ ， 赤霉烯酮的污染 危害消费者健康。 研究表明： 我国儿童对 ZEN 的膳食暴露量均高于成人， 是膳食 ［8 ］ 暴露 ZEN 的高危人群 。 我国食品安全国家标准
《食品中真菌毒素限量》 （ GB 2761 —2011 ） 中规定谷 物及其制品中玉米赤霉烯酮限量为 60 μg / kg。 目前报道用于检测玉米赤霉烯酮的分析方法 ［9］ ［10］ 有酶联免 疫 法 、 免疫胶体金试纸法 、 气相色
图1
玉米赤霉烯酮激发波长扫描谱图
图2
玉米赤霉烯酮发射波长扫描谱图
2． 2
流动相及流速 根据以上条件， 参考 GB / T 5009． 209 —2008 的 流动相， 以乙腈 + 水 + 甲醇， 按体积比 46 ∶ 46 ∶ 8 混 合， 流速不同时， 峰的保留体积基本相同， 表明该流 ZEN ， 1 。 动相对 来说很稳定 结果见表