生物分离工程试题答案
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1.生物产品的分离包括不溶物的去除,产物分离,纯化和精制。
2.发酵液常用的固液分离方法有离心和过滤等。
3.离心设备从形式上可分为管式,套筒式,碟片式等型式。
4.膜分离过程中所使用的膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为微滤膜,超滤膜,纳滤膜和反渗透膜;
5.多糖基离子交换剂包括葡聚糖离子交换剂和离子交换纤维素两大类。6.工业上常用的超滤装置有板式,管式,螺旋卷式和中空纤维式
7.影响吸附的主要因素有吸附剂的性质,吸附质的性质,温度,溶液pH值,盐浓度,吸附物浓度和吸附剂用量
8.离子交换树脂由载体,活性基团和可交换离子组成。
9.电泳用凝胶制备时,过硫酸铵的作用是引发剂;甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂;TEMED的作用是增速剂;
10.影响盐析的因素有溶质种类,溶质浓度,pH值和温度;
11.在结晶操作中,工业上常用的起晶方法有自然起晶法,刺激起晶法和晶种起晶法;
12.简单地说,离子交换过程实际上只有外部扩散,内部扩散和化学交换反应三个步骤;
13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时,通常遵循Langmuir吸附方程,其形式为Q=q0C/(k+C)
14.反相高效液相色谱的固定相是非极性的,而流动相是极性的;
和C8;常用的流动相有甲醇和乙睛;
常用的固定相有C
18
15.超临界流体的特点是与气体有相似的粘度(扩散系数) ,与液体有相似的密度;
16.离子交换树脂的合成方法有共聚(加聚)和均聚(缩聚)两大类;
17.常用的化学细胞破碎方法有渗透压冲击,增溶法,脂溶法,酶消化法和碱处理法;
18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其等电点(pI)的不同;
19.离子交换分离操作中,常用的洗脱方法有pH梯度和离子强度(盐)梯度;
20.晶体质量主要指晶体大小,晶体性状和晶体纯度三个方面;
4.亲和吸附原理包括吸附介质的制备,吸附和洗脱三步。
11.根据分离机理的不同,色谱法可分为吸附色谱,分配色谱,离子交换色谱和凝胶色谱。
12.盐析实验中用于关联溶质溶解度与盐浓度的Cohn方程为lgS=β-KsI;当保持体系温度、pH值不变,仅改变溶液离子强度进行的盐析操作称为K s盐析法;当保持离子强度不变,改变温度、pH值进行的盐析操作称为β盐析法。
13.过饱和溶液的形成方式有:热饱和溶液冷却,蒸发溶剂,真空蒸发冷却,化学反应结晶和盐析。
14.蛋白质分离常用的色谱法有金属螯合色谱,共价色谱,离子交换色谱和疏水作用色谱。
17. SDS PAGE电泳制胶时,加入十二烷基磺酸钠(SDS)的目的是消除各种待分离蛋白的电荷和分子形状差异,而将分子量作为分离的依据。
19.高效液相色谱分离方法中,液-液色谱是以液体作为流动相;以固定在固相载体表面的液体作为固定相。
20.常用的蛋白质沉析方法有盐析,等电点沉析和有机溶剂沉析。
1.在细胞分离中,细胞的密度ρS越大 ,细胞培养液的密度ρL 越小 ,则细胞沉降速率越大。 2.表示离心机分离能力大小的重要指标是 C 。A.离心沉降速度 B.转数 C.分离因数 D.离心力
3.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力,其中滤饼占主导作用。 4.简答:对微生物悬浮液的分离(过滤分离),为什么要缓慢增加操作压力? 5.判断并改错:在恒压过滤中,过滤速率会保持恒定。(×)改:不断下降。 6.简答:提高过滤效率的手段有哪些?
7.判断并改错:生长速率高的细胞比生长速率低的细胞更难破碎。(×)改:更易破碎。 8.简答:采用哪种方法破碎酵母能达到较高的破碎率? 9.简答:蛋白质复性收率低的主要原因是什么?
10.简答: 常用的包含体分离和蛋白质复性的工艺路线之一。 11. B可以提高总回收率。
A.增加操作步骤
B.减少操作步骤 C.缩短操作时间D.降低每一步的收率 12.重力沉降过程中,固体颗粒不受C的作用。 A.重力 B.摩擦力
C.静电力D.浮力 13.过滤的透过推动力是 D 。
A.渗透压 B.电位差 C.自由扩散 D.压力差 14.在错流过滤中,流动的剪切作用可以 B 。
A.减轻浓度极化,但增加凝胶层的厚度 B.减轻浓度极化,但降低凝胶层的厚度 C.加重浓度极化,但增加凝胶层的厚度 D.加重浓度极化,但降低凝胶层的厚度
15.目前认为包含体的形成是部分折叠的中间态之间 A 相互作用的结果。A.疏水性B.亲水性 C.氢键D.静电
16.判断并改错:原料目标产物的浓度越高,所需的能耗越高,回收成本越大。(×)改:原料目标产物的浓度越低。
17.菌体和动植物细胞的重力沉降操作,采用D手段,可以提高沉降速度。 A.调整pH B.加热 C.降温 D.加盐或絮状剂 18.撞击破碎适用于D的回收。A.蛋白质B.核酸 C.细胞壁D.细胞器
19.重力沉降过程中,固体颗粒受到重力, 浮力,摩擦阻力的作用,当固体匀速下降时,三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。
20.为了提高最终产品的回收率:一是提高每一级的回收率 ,二是减少操作步骤。21.评价一个分离过程效率的三个主要标准是:①浓缩程度②分离纯化程度③回收率。 22.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。
23.差速区带离心的密度梯度中最大密度 B 待分离的目标产物的密度。 A.大于 B.小于 C.等于 D.大于或等于 24.简答:管式和碟片式离心机各自的优缺点。
25.单从细胞直径的角度,细胞越小,所需的压力或剪切力越大,细胞越难破
碎。
1.防止蛋白质沉淀的屏障有蛋白质周围的水化层
和双电层
。 2.判断:当蛋白质周围双电层的ζ点位足够大时,静电排斥作用抵御蛋白质分子之间的分子间力,使蛋白质溶液处于稳定状态而难以沉淀。(√)3.降低蛋白质周围的水化层
和双电层
厚度,可以破坏蛋白质溶液的稳定性,实现蛋白质沉淀。
3 4.常用的蛋白质沉淀方法有: 盐析
沉淀,等电点
沉淀,有机溶剂
沉淀。 5.判断并改错:蛋白质水溶液中离子强度在生理离子强度(0.15~0.2mol·kg-1)之外,蛋白质的溶解度降低而发生沉淀的现象称为盐析。(×)改:离子强度处于高离子强度时。 6.在Cohn方程中,logS=β-KsI中,盐析常数Ks反映C
对蛋白质溶解度的影响。 A.操作温度B.pH值 C.盐的种类D.离子强度7.在Cohn方程中,logS=β-KsI中,β常数反映 B
对蛋白质溶解度的影响。A.无机盐的种类 B.pH值和温度C.pH值和盐的种类 D.温度和离子强度8.Cohn方程中,Ks越大
,β值越小
,盐析效果越好。9.蛋白质溶液的pH接近其等电点时,蛋白质的溶解度 B 。 A.最大 B.最小 C.恒定D.零10.蛋白质溶液的pH在其等电点时,蛋白质的静电荷数为0
。11.判断并改错:在高离子强度时,升温会使蛋白质的溶解度下降,有利于盐析沉淀,因此常采用较高的操作温度。(×)改:只在离子强度较高时才出现。12.判断并改错:利用在其等电点的溶液中蛋白质的溶解度最低的原理进行分离,称为等电点沉淀,而不必考虑溶液的离子浓度的大小。(×)改:在低离子强度条件下。13.等电点沉淀的操作条件是低离子强度
和pH=pI
。14.判断并改错:无论是亲水性强,还是疏水性强的蛋白质均可采用等电点沉淀。(×)改:适用于疏水性强的蛋白质(酪蛋白)。15.有机溶剂沉淀时,蛋白质的相对分子质量越大
,则有机溶剂用量越少
;在溶液等电点附近,则溶剂用量越少