第三章-细胞化学染色

【原理】
POX的染色方法有多种，如复方联苯胺法、二氨 基联苯胺法、四甲基联苯胺、改良的pereira染色法等 等。二氨基联苯胺染色是临床常用的方法。
二氨基联苯胺法：血细胞内的POX，能分解H2O2 而释放出新生氧，后者氧化二氨基联苯胺，形成金黄 色不溶性沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。
.
第三章 第二节 细胞化学染色
pH值不同
非特异性酯酶
α- 醋酸萘酚酯酶 中性酯酶
醋酸AS-D萘酚酯酶
碱性酯酶( α-丁酸萘酚酯酶 )
.
第三章 第二节 细胞化学染色
来自百度文库
（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色
【原理】
血细胞内的氯乙酸AS-D萘酚酯酶水解基质液中的 氯乙酸AS-D萘酚，产生AS-D萘酚，进而与基质液中 的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀，定位于细胞质 内酶所在的部位。本试验常用的重氮盐为坚牢紫酱 GBC，形成的有色沉淀为红色。
胞白血病和慢性淋巴细胞白血病。 活性减低：见于急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血
病、急性单核细胞白血病、骨髓增生异常 综合征、放射病及退化性中性粒细胞。
.
第三章 第二节 细胞化学染色
二、苏丹黑（SB）染色
【原理】
苏丹黑是一种脂溶性重氮染料，能溶解于细胞内的 含脂结构（如中性脂肪、磷脂、糖脂和类固醇）中， 使脂类物质呈棕黑色或深黑色而显示出来。脂类物质 在粒细胞中含量丰富，在单核细胞中也有少量。
.
第三章 第二节 细胞化学染色
一、过氧化物酶（POX）染色
【正常血细胞的染色反应】
1.粒细胞系统 2.单核细胞系统 原始单核细胞呈阴性，幼稚及成熟 单核细胞多呈弱阳性，其颗粒细少稀疏，分布不均。 3.其他细胞 淋巴细胞系统、红细胞系统及巨核细胞 系统的细胞均呈阴性，浆细胞、组织细胞也呈阴性， 吞噬细胞有时呈阳性。
.
第三章 第二节 细胞化学染色
急性早幼粒细胞白血病的POX染色 １.原始红细胞，呈阴性；其. 他早幼粒细胞均呈强阳性
一、过氧化物酶（POX）染色
【临床意义】
1.帮助鉴别急性白血病的类型 （3）急性单核细胞白血病有时需与组织细胞白血病、 恶性组织细胞病相鉴别，异常组织细胞的过氧化物酶呈阴 性，而白血病性幼单核细胞和单核细胞呈弱阳性。
一、过氧化物酶（POX）染色
【正常血细胞的染色反应】
1.粒细胞系统 分化差的早期原始粒细胞为阴性， 分化好的晚期原始粒细胞至中性成熟粒细胞均呈阳性， 且随着细胞的成熟，阳性反应的程度逐渐增强；中性 分叶核粒细胞呈强阳性，衰老的粒细胞阳性程度减弱 甚至呈阴性；嗜酸性粒细胞阳性反应最强，嗜碱性粒 细胞为阴性。
.
第三章 第二节 细胞化学染色
二、苏丹黑（SB）染色
【正常血细胞的染色反应 】 结果与POX染色基本一致 【临床意义 】 与POX染色基本相似
.
第三章 第二节 细胞化学染色
三、酯 酶 染 色
根据 酯酶 特异 性高 低分 为:
特异性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶)
酸性酯酶(酸性α- 醋酸萘酚酯酶 )
第三章 细胞化学染色
编辑制作 何旭春
.
第一节 概 述
定义：
细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形 成的一门科学，是以细胞形态学为基础，结合 运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学成 分(如酶类、酯类、铁、蛋白质、核酸等)作定 性、定位、半定量分析的方法。
.
第三章 细胞化学染色
第一节 概 述 基本步骤
.
第三章 第二节 细胞化学染色
（一）氯乙酸AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色
【正常血细胞的染色反应 】
1.粒细胞系统 分化差的原始粒细胞呈阴性，分化好
的呈阳性，自早幼粒细胞至成熟中性
粒细胞均呈阳性。嗜酸性粒细胞呈阴
.
第三章 第二节 细胞化学染色
急性粒细胞白血病（M2a) 的POX染色 原始粒细胞. 均呈阳性
急性淋巴细胞白血病的POX染色 1.中性成熟粒细胞，呈强阳性. ；其他原始淋巴细胞均呈阴性
一、过氧化物酶（POX）染色
【临床意义】
1.帮助鉴别急性白血病的类型 （2）急性早幼粒细胞白血病有时需与急性单核细胞白 血病鉴别，如果白血病细胞呈过氧化物酶强阳性，应确定 为急性早幼粒细胞白血病。
.
第三章 第二节 细胞化学染色
急性单核细胞白血病的POX染色 1.中性成熟粒细胞，呈强阳性；2.原始单核细胞，呈阳性；
3.原始单核细胞，呈弱阳性.；其他原幼单核细胞呈阴性
一、过氧化物酶（POX）染色
【临床意义】
1.帮助鉴别急性白血病的类型 2.成熟中性粒细胞过氧化物酶活性的变化 活性增高：见于再生障碍性贫血、感染、急性淋巴细
.
第三章 第二节 细胞化学染色
1.中性3成.单熟核粒细细胞胞，，呈呈弱强阳阳. 性性；；42..浆晚细幼胞红，细呈胞阴，性呈阴性；
一、过氧化物酶（POX）染色
帮助鉴 别急性 白血病 的类型
临床意义
是辅助判断急性白 血病细胞类型的首选、 最重要的细胞化学染色
成熟中性 粒细胞过 氧化物酶 活性的变 化
.
第三章 细胞化学染色
第一节 概 述
辅助判断急性白血病的细胞类型
临
床
辅助血液系统等疾病的诊断和鉴别诊断
应
观察疾病疗效和预后
用
探讨发病机制
.
第三章 细胞化学染色
第二节 细胞化学染色
过氧化物酶染色
苏丹黑染色
酯酶染色 过碘酸-雪夫反应
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
酸性磷酸酶染色
铁染色
.
第三章 细胞化学染色
一、过氧化物酶（POX）染色
固定 显示
复染
.
第三章 细胞化学染色
第一节 概 述
干燥固定
固
蒸汽固定
物理法
化学法
火焰固定
定
液体固定
.
第三章 细胞化学染色
第一节 概 述
显示
金属 沉淀 法
雪夫 反应
偶氮 偶联 法
联苯 胺法
普鲁 士蓝 反应
.
第三章 细胞化学染色
第一节 概 述
复染
复染的目的在于使各种细胞能显示出来以 便于观察。选择复染液的颜色应与有色沉淀的 颜色有明显的对比度，即能使细胞结构显示又 能清楚地看出细胞化学染色结果。
.
第三章 第二节 细胞化学染色
一、过氧化物酶（POX）染色
【临床意义】
1.帮助鉴别急性白血病的类型 （1）POX染色是鉴别急性淋巴细胞白血病和急性粒细 胞白血病的重要指标。 急性粒细胞白血病时，原始粒细胞可呈阳性。急性淋 巴细胞白血病时，原始淋巴细胞和幼稚淋巴细胞均呈阴性。 急性单核细胞白血病时，原始单核细胞、幼稚单核细胞多 数呈阴性或弱阳性。