果蝇唾腺染色体的观察分析解析
实验四：果蝇唾腺染色体的观察
核内复制：果蝇幼虫的唾腺细胞在发育 过程中，细胞核内的DNA多次复制，但细 胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体 DNA也不分开（核内复制），形成了多线 染色体。 体联会：同源染色体相互靠拢在一起呈 现一种联会状态，使其比一般的体细胞 染色体粗大。
特点 巨大； 体联会现象决定了染色体看起来只有半 数； 各个染色体中异染色质多的着丝粒部分 相互靠拢形成染色中心； 横纹有深浅、数目、疏密的不同，各自 对应排列，具有种的特异性。 若有缺失、易位、倒位、重复等现象， 很容易在唾腺染色体上识别出来。
实验五 果蝇唾腺染色体标本 的制备与观察
实验目的 实验原理 实验材料与药品 实验方法
实验作业
实验目的
练习剥离果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾 腺染色体标本的方法。
观察果蝇唾腺染色体的结构特点。
实验原理
发现 1881年，意大利Balbiani在双翅目昆 虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了 巨大的“永久性染色质纽”。 1930年前后，研究表明，“染色质纽” 实质上是特殊的染色体。 后来，其他学者又在果蝇和其它双翅 目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了 巨大染色体。
幼虫培养的注意事项
培养基要较稀且富含营养 追加酵母 幼虫密度要小 低温培养
唾液腺
位置：在幼虫体前约1/3处。 形状：形如一对香蕉，上小下 大。一边常附着带状的不透明 的脂肪。 颜色：半透明如玻璃，略带白 色，比周围的组织都透明。
实验作业
1、绘制你所观察到的果蝇唾腺 染色体。
2、剥离果蝇唾液腺时应该 注意的
问题？
果蝇唾腺染色体
果蝇各染色体臂的形态
实验四果蝇唾腺染色体的观察
实验四果蝇唾腺染色体的观察引言：果蝇(Drosophila melanogaster)是一个常用的模式生物，被广泛应用于遗传学和发育生物学的研究中。
果蝇的唾腺细胞具有巨大的染色体，可用于观察染色体形态和结构的变化。
本实验旨在通过对果蝇唾腺细胞的染色体观察，探索其染色体变化的特点及遗传机制。
材料与方法：1. 实验动物：野生型果蝇(Drosophila melanogaster)。
2.实验材料：1%醋酸溶液、甘油、果蝇镜片、果蝇剪刀、显微镜、染色液（甘油涂片+1%吡溴染色液）。
3.实验步骤：a.选择成熟的果蝇，并用果蝇剪刀将头部剪下。
b.将剪下的头部放到1%醋酸溶液中，浸泡10分钟以松软组织。
c.将浸泡过的头部放在果蝇镜片上。
d.用果蝇剪刀将头部中的唾腺组织剪下，放在干净的果蝇镜片上。
e.在唾腺组织上滴加适量的甘油，并用另一块果蝇镜片横向刮过组织，将唾腺细胞均匀涂布在镜片上。
f.将涂片放入1%吡溴染色液中浸泡20分钟。
g.取出染色液，用流动自来水将镜片冲洗干净，待其自然干燥。
h.将染色后的涂片放在显微镜中观察，记录染色体的形态和数量。
结果：经过观察，果蝇唾腺细胞的染色体呈现为一串串黑色颗粒，称为染色体棒。
每一串染色体棒包含多个染色体。
染色体棒的形态呈螺旋状，长度不一，通常较短，且中间较粗，两端较细。
染色体棒之间相互平行排列，呈重叠状态。
讨论：果蝇的唾腺细胞染色体观察结果表明，果蝇染色体的形态和结构是高度有序的。
在染色体棒中，每个染色体是由DNA和蛋白质组成的，它们通过蛋白质复合物连接在一起。
染色体的形态和结构主要由蛋白质的排列和DNA的紧密程度决定。
果蝇染色体的结构与其他生物染色体的结构具有相似性。
在果蝇唾腺细胞染色体的观察中，可以看到每一串染色体棒中的染色体数量是相同的。
这是由于果蝇的染色体在有丝分裂前已经复制，每一条染色体通过同源染色单体连接在一起，形成染色体棒。
这种染色体的组织方式称为染色体粘接。
果蝇唾液腺染色体观察实验报告
果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。
果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。
本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。
实验材料和方法。
1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。
2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。
（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。
（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。
（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。
（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。
实验结果和分析。
经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。
染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。
结论。
通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。
这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
总结。
果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。
本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第1页
一、试验目标
1.了解唾腺CS特点 2. 学习分离唾腺技术 3. 掌握唾腺CS制片方法
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第2页
二、试验原理
• 永久间期CS • 复制而不分开 与观察
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果蝇唾腺染色体特点：
• 剥离唾腺置载片中央,加一滴HCl,解离23
• 吸去HCl,冲洗23次,吸干;加1d染液,染色5
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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4. 压片及观察
• 载片置平整处,加盖 片,轻敲;压片
• 低倍至高倍镜检
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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果蝇唾腺染色体的制片与观察
第20页
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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五、注意事项
1. 水不可太多,不然幼虫会漂浮而且活跃 2. 一定加生理盐水,不然唾腺易干 3. 将脂肪组织去除洁净 4. 吸水时勿将唾腺一起吸走 5. 染色时间不可过长,不然背景也着色 6. 压片时要揉,用力要均匀
果蝇唾腺染色体的制片与观察
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六、作业
1. 制效果很好唾腺CS暂时片1-2张 2. 真实绘制观察到唾腺CS绘图 3. 思索题P66 1-2
4.Puff结构：幼虫不一样发育期，浓缩染色质纤维会成群解 旋、松开，形成泡状涣散结构，使对应基因得以表示，这 种泡状结构称Puff结构，亦称染色体疏松。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
第7页
三、试验材料、器具、药品试剂
• 大果蝇(D. virilis)活体三龄幼虫 • 解剖镜,显微镜,培养箱;培养瓶,
1.巨大染色体：这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um， 长约400um，相当于普通染色体100—150倍，因而又称为巨 大染色体。
实验八果蝇唾腺染色体的观察
【实验项目二】果蝇唾腺染色体的观察实验八果蝇唾腺染色体的观察〖目的和要求〗观察果蝇的唾腺染色体，学习唾腺染色体的制片方法。
〖实验原理〗果蝇唾腺染色体是果蝇幼虫期唾腺细胞核内染色线连续复制，但细胞核不分裂，而形成的多线染色体，又称为巨型染色体。
它比果蝇其它细胞的染色体长100－200倍，有1000－4000条染色体的拷贝。
这种染色体可以观察到由一个“中心”和五个臂组成(2n＝8)。
这是由于各染色体的着丝粒周围的异染色质部分相互结合在一起，形成一个“中心”，又由于同源染色体紧密配对，第Ⅱ、第Ⅲ中位着丝粒的染色体各有左右两条臂，Ｘ染色体是端着丝粒染色体，只能看到一条染色体臂，第Ⅳ染色体则呈点状，所以可见五条臂。
而且每条染色体臂上还呈现不同的横纹(band)。
根据果蝇的表现型和它的唾腺染色体上横纹染色的深浅、宽窄及其它特征可为基因与性状的关系提供一定的依据，并可作出基因的细胞学图。
所以，唾腺染色体是细胞遗传学研究的极好材料。
〖实验材料〗果蝇的三龄幼虫。
〖用具和药品〗双筒解剖镜、普通生物显微镜、解剖针、镊子、载玻片、盖玻片、1％醋酸地衣红或石碳酸品红、0.7％生理盐水、1mol·1-1HCl、蒸馏水等。
〖实验步骤〗1、取16－18℃条件下培养的果蝇三龄幼虫的雌体（鉴别见附录）置于载玻片上，滴加0.7％生理盐水。
2、双筒解剖镜下，用解剖针针尖掀住幼虫靠前端三分之一处，以固定幼虫，再用镊子或解剖针夹紧其口器的头部，用力把头部从身体中拉开。
位于幼虫前端食道两侧的唾腺便随之而出，弃去殊余部分，并剔除唾腺上黄色脂肪。
3、将唾液置于载玻片上，①滴1-2滴45％乙酸溶液于腺体上，5~7s后用滤纸小心地洗净剩余溶液。
②再滴1滴1mol/L HCL于于腺体上，30~40s后用滤纸小心地洗净剩余溶液。
③滴1滴蒸馏水于腺体上，1~2s后用滤纸吸干。
4.染色。
①滴1~2滴乳酸-乙酸-地衣红或石碳酸品红染色于腺体上，染色30~45 min（染色过程中要随时添加染色液）。
遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察
遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。
其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。
双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。
经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。
黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。
各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。
（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。
因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。
在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。
这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。
果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。
整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。
这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。
黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。
染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。
在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。
果蝇唾液腺染色体制片与观察
同源染色体的两条臂紧密结合，自由伸展。因 此唾液腺细胞染色体数看不出2n的染色体数， 只能观察到从染色中心向空间伸展的染色体臂。 与其它细胞染色体相比的另一个特点是，唾液 腺染色体上有深浅不同、宽窄不一的带纹，这 些带纹的数目和位置是恒定的，代表着种的特 征和一些基因的位置。
由于这些带纹的存在，染色体上发生缺失、重 复、倒位、易位等很容易在唾液腺染色体上识 别出来。
三、实验材料
野生果蝇
四、实验步骤
1、剥离果蝇幼虫的唾液腺
取一洁净的载玻片，滴上1滴0.75%生理盐水。在瓶壁 上挑选肥大的充分发育的三龄幼虫放在的生理盐水中，唾 液腺位于幼虫食道的两侧，长度约占身体总长的1/3—— 1/4左右。
解剖时把载玻片放在解剖镜或放大镜下,一手用解剖针压住头部 (外型似一个黑色小点)，压住的地方越小越好，同时，用镊子夹住幼 虫身体1/2处， 轻轻地将幼虫的头部自身体拉开。唾液腺随同内脏一 起拉出。如果头部拉断,腺体没有拉出,可以用解剖针从镊子附近的腹 部缓缓地向头端挤压,也可压出唾液腺。然后在镜下细心分离，理出双 叉形半透明的囊状腺体即为唾液腺，在生理盐水中无论怎样触动它都 不会发生形状改变。
在显微镜下观察，由单层细胞构成，细胞形状不规则，细胞轮廓 清晰，细胞大，细胞核也大，甚至可以看清细胞核是由染色体卷缩在 一起形成的。唾液腺拉出后，剔除腺体周围乳白色的脂肪组织和身体 的残留部分，只留唾液腺在载玻片上。
2、解离 用滤纸条吸净唾液腺周围的其它物质，然后将唾 液腺放入1N HCl，解离2—3分钟，以松软组织利于 细胞破裂，使染色体散开。 3、水洗 解离后的唾液腺用蒸馏水洗3—4次（或0.4%的 生理盐水），水洗时要注意不要把唾液腺弄丢，水洗 要彻底，目的是洗去盐酸，以免影响染色效果。另外 水洗过程也是细胞低渗过程，使唾液腺细胞膨胀。
实验三 果蝇幼虫唾液腺巨大染色体染色观察
一、实验目的1、对果蝇幼虫唾腺染色体的外形、结构、特征进行观察描述。
二、实验原理果蝇三龄幼虫的唾腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。
加之唾腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般分裂中期体细胞中的染色体长100~150倍。
由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心，以及同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称作明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
另外某染色体上出现的变异，在唾腺染色体相应的臂上就能反映出来，这样这些横纹就成了精确基因定位的“坐标”。
将野生型果蝇的带纹与缺失、重复、倒位等突变体的带纹进行比较，就可以将一些基因定位在染色体上。
在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区胀泡，其中最大的一个胀泡叫做巴尔比尼氏环。
胀泡富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。
在个体发育的不同阶段，胀泡或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。
本次实验将通过对果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察，了解并掌握果蝇三龄幼虫唾腺的剖离技术，掌握唾腺染色体标本的制备方法，了解唾腺染色体的形态结构特点。
三、实验材料1.器材：体视解剖镜，显微镜，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸等2.材料：普通果蝇的三龄幼虫3.试剂：改良苯酚品红溶液，生理盐水，1M盐酸，蒸馏水四、实验步骤剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫置于载玻片上。
果蝇唾腺染色体的观察
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放大的唾腺组织
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（3）盖上盖玻片，用刀片支起盖玻片一角，按住盖玻片另 一边，用解剖针轻轻敲打盖玻片，去掉刀片，稍加热后覆 上滤纸垂直压片。
（4）观察，先在10倍镜下观察找到染色体后，再换高倍镜 下观察，比较各染色体的横向纹带、带宽大小、带纹排列 顺序，以及由着丝点纠集组成的染色体中心。
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三、仪器与材料
材料：果蝇的三龄幼虫 试剂： 1%醋酸洋红 器具：显微镜、镊子、解
剖针、载玻片、盖玻片、 滤纸、绘图纸
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四、实验程序
（1）取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，由于果蝇的唾腺位于 幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持镊子按压住虫体后端三 分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部 口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
2、观察果蝇唾腺染色体的形态特征。
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二、实验原理
双翅目昆虫（果蝇等）幼虫期唾腺细胞 中具有相当于普通染色体100－150倍的巨大 染色体，由于存在于唾液腺细胞中，所以称为 唾腺染色体(salivary gland chromosome) 。 它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进 行有丝分裂，永久停留在间期，唾腺染色体经 过多次复制而不分开，约有1000－4000根染 色体丝的拷贝，所以又叫多线染色体 （polytene chromosomes ）。
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果蝇三龄幼虫解剖图
Salivary gland：唾腺 Gonad: 性腺 Ganglion: 神经节 Trachea: 气管 Ovary：卵巢 Intestine：肠
果蝇唾腺染色体的制片与观察
果蝇唾腺染色体的制片与观察一、实验目的1、练习果蝇幼虫唾腺分离技术及唾腺染色体的制片方法；2、观察果蝇的唾腺染色体。
二、实验原理1、唾腺染色体：唾腺染色体是双翅类昆虫唾腺细胞的间期核中所看到的巨型染色体。
唾腺染色体的显著特征是：（1）形状为带状，宽达5微米，长达2000微米它相当于普通染色体的100～200倍；（2）核不分裂，由于染色体不断复制，形成了多线性染色体，宽度增加，同时长度也增加，成为巨型染色体；（3）带的全长几乎都有明显的嗜碱性的横纹，横纹的宽度有大有小，密度有疏有密，但是它的数目，位置等等对于同源染色体来说却都是同样的。
唾腺染色体的DNA含量达4，000—8，000c。
横纹被认为是染色小粒横向排列而成的。
横纹是详细研究染色体的部分缺失、倒位、重复、反复、易位等现象的标记；（4）由于2条同源体细胞染色体联会，在黑腹果蝇（2n= 8）中，V形的第二染色体和第三染色体各有两条臂，又各条染色体在异染色质多的着丝粒附近互相靠拢，与核仁一起在核的中央形成一个染色中心。
唾腺染色体的一条或几条横纹常显著膨起，这部分称为Bal- biani环。
一般把多线性的巨大染色体中的这种膨大起称为疏松结构。
许多双翅类以及二、三种脉翅类昆虫的食道、肠、马氏管和神经细胞中，以及在植物界的Rhinanthus（胡麻科）的胚盘细胞、虞美人草的反足细胞等都能看到具有这样特征的染色体（巨大染色体或多线染色体）。
果蝇唾液腺：2、果蝇三龄幼虫的唾腺发育到一定阶段后，细胞的有丝分裂停留在间期，构成一个永久间期系统。
唾腺细胞数目不增加，但体积增大，其中每条染色体的常染色质区的核蛋白纤维（染色质纤维）不断复制，多则可达2的10次方至15次方次复制，其复制产物不分开，成千上万条染色质纤维平行而精巧地排列形成一大束宽而长的带状物，称为多线染色体。
由于细胞分裂停止在间期，核物质螺旋化程度低而充分伸展，这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约2000um，是其体细胞中期染色体长度的100—200倍。
02实验二 果蝇唾腺染色体的观察
一、实验目的
1.学习剖取果蝇三龄幼虫唾腺的方法以及制 作果蝇唾腺染色体的方法和技术； 2.观察果蝇的唾腺染色体，注意其作为巨大 染色体的特征： ①巨大，② 染色体上横纹的染色性能、横纹 数目及排列方式，③ 各染色体的异染色质 多的着丝粒部分相互靠拢形成染色中心。
二、实验原理
三、实验材料、器具和试剂
Байду номын сангаас
• 材料：果蝇三龄幼虫活体； • 器具：显微镜，载玻片，盖玻片，镊子， 解剖针（2支），吸水纸，酒精灯； • 试剂：无水乙醇，冰乙酸，1%醋酸洋红， 1mol/L 盐酸，蒸馏水。
四、实验内容和步骤
一）、实验内容： 1．幼虫的培养；2．唾腺的剖取，处理；3．染色、 压片及观察。 二）、实验步骤 １．幼虫培养：营养条件好，温度低则幼虫个体肥 大，便于操作。当幼虫爬上培养瓶壁准备蛹化前， 即为三龄幼虫。 ２．唾腺剖取： 选取一只发育良好，个体肥大的三 龄幼虫置于载玻片上的蒸馏水中，双手各持解剖针， 左手用解剖针压住虫体中后部（末端1/3处），固定 幼虫，右手用解剖针按住幼虫头部（口器稍后方）， 轻轻向前拉，使头部扯离虫体，唾腺会被随之拉出 来，这时可看到一对透明的囊状腺体，其一侧附着 着一条泡沫状脂肪体，这就是果蝇的唾液腺。用解 剖针剔除脂肪体，只保留唾腺。
五、结果
1. 找出染色中心和辨认各条染色体臂，绘制 果蝇唾腺染色体图； 2. 观察染色体上横纹数量、形状和排列顺序。
六、分析讨论
1. 多线染色体的形成原因，染色体上的横纹 与基因座位的排列有何对应关系。 2. 多线染色体玻片制作过程中的操作要领和 注意事项，分析失败的原因。
• 果蝇、摇蚊等双翅目昆虫幼虫期的唾腺细胞很大， 其中的染色体——唾腺染色体，是由500 - 1000条染色 线聚在一起形成的，故又称多线染色体（长约400μm ， 宽约5μm ，比普通染色体大千倍），是进行染色体畸 变观察和研究的好材料。 • 果蝇的唾腺位于幼虫前端的食道两侧和神经球附近。 其中的唾腺染色体是由于唾腺细胞只长大但不分裂， 染色体多次复制但不分裂，同源染色体紧密并合在一 起，且染色体的螺旋相当松开，因而形成多线特征的 巨大染色体。 • 唾腺染色体只有5条染色体臂，即2L、2R、3L、3R、 X（端部着丝点染色体），有时也可在染色中心处发现 短小的（点状）第IV 号染色体，而Y染色体几乎包含 在染色中心里。
05果蝇唾腺巨大染色体标本制备和特征分析061016[1]
![05果蝇唾腺巨大染色体标本制备和特征分析061016[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/6f120b720722192e4536f65e.png)
实验七果蝇唾腺巨大染色体标本制备和染色体特征分析（书上p82-84实验17）一、实验目的:1.掌握果蝇唾腺巨大染色体标本制备技术2.联系遗传学意义，区辨巨大染色体带型、疏松区等二、实验内容:幼虫培养和唾腺剖取巨大染色体标本制备不同染色体及其带型、疏松区等特征观察绘图唾腺染色体的发现：唾腺染色体的特点：1）巨大性/多线化：宽约有5 μm ，长约400 μm （普通染色体的100-150倍）含有约1000-4000条平行紧密排列的染色质丝拷贝（多线染色体）摇蚊果蝇幼虫唾腺，气管，前肠，中肠，马氏管三、实验原理:2）体细胞配对/永久间期：“体联会”（somatic synapsis）：所有染色体的着丝粒区聚在一起，形成染色中心（chromocenter）。
∴细胞中巨大唾腺染色体数目为n=4而非2n。
多线化和“体联会”是造成唾腺染色体巨大性的主要原因3）唾腺染色体特征：5条长臂、1条短臂自中央（染色中心）放射状伸展。
带（band）：深浅、宽窄不同的横纹疏松区（puff）[膨泡，巴氏环（Balbiani ring）]：幼虫不同阶段，染色体不同部位会出现膨大区域（大而成环状的膨泡即巴氏环）。
显示单个染色质丝上的袢环区多次DNA复制造成大量并列在一起的染色质丝果蝇多线染色体5000条带中的6条研究价值：1）染色体结构变异*带的形成：染色质丝平行排列，袢环区排在一起*85%DNA分布在带上*种属特异性*果蝇：~5000条带和5000条带间102个区→A-F 6个亚区/区→带纹编号（1、2、3……）2）基因表达与调控疏松区（puff）的形成：为折叠的染色体袢环松解的缘故。
疏松区总处于动态变化之中，是遗传上的活跃区域，是RNA合成的场所。
膨泡的数量和位置——发育和器官特异性。
∴果蝇巨大唾腺染色体是研究基因表达与调控的理想材料。
黑腹果蝇（D.melanogaster）唾腺染色体黑腹果蝇（D. virilis）唾腺染色体各臂末段1. 唾腺的解剖（在1滴生理盐水中）：五、实验步骤四、实验材料黑腹果蝇（D. melanogaster ）:幼虫、成体小，4对染色体大果蝇（D. virilis ）:幼虫、成体大，6对染色体请做实验比较左针：幼虫中部右针：头部（口器处）体前1/4~1/3处图示果蝇三龄幼虫果蝇三龄幼虫2.酸处理：吸去多余的生理盐水，5N盐酸处理5-10min （目的？）3.水洗：吸去多余盐酸，在载片上用蒸馏水多次冲洗4.染色及压片：吸净水分→改良品红10min→盖片、压片（注意垂直，力度大小）5.显微镜观察唾腺脂肪体图示三龄幼虫唾腺果蝇唾腺染色体的品红染色唾腺染色体的荧光染色PI 染色DAPI 染色——一种着丝粒蛋白的实验结果实验报告：据自己制片观察，画出果蝇（标出物种）唾腺细胞的巨大染色体（显示带型特征，标出染色体臂*、染色中心、疏松区等）。
实验4 果蝇唾腺染色体
果蝇唾腺染色体的观察
染色体分区、 示X-染色体分区、段、条 染色体分区
如染色体有缺失、重复、倒位、易位等， 如染色体有缺失、重复、倒位、易位等， 很容易在唾腺染色体上识别出来。 很容易在唾腺染色体上识别出来。
果蝇唾腺染色蝇唾腺染色体形态特征。 观察果蝇唾腺染色体形态特征。 掌握果蝇唾腺染色体的制片方法。 掌握果蝇唾腺染色体的制片方法。
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果蝇唾腺染色体的观察
实验材料
果蝇三龄幼虫
果蝇唾腺染色体的观察
蝇
果 蝇 的 生 活 周 期
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺
果蝇唾腺染色体的观察
实验步骤
解剖（生理盐水） 解剖（生理盐水） 染色（15-20min） 染色（ ） 压片 镜检
果蝇唾腺染色体的观察
注意事项
1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 2. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃。如水多了，请 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃。如水多了， 再剥离唾腺前吸走些，唾腺剥离后请勿吸水， 再剥离唾腺前吸走些，唾腺剥离后请勿吸水，以防将 唾腺一起吸走。 唾腺一起吸走。 3. 清除脂肪组织时要量力而行。 清除脂肪组织时要量力而行。 4. 染色液勿过多，否则压片时唾腺易随染色液漂走。如染 染色液勿过多，否则压片时唾腺易随染色液漂走。 色时间到后，染色液已干，应再少加些染色液， 色时间到后，染色液已干，应再少加些染色液，再盖 上盖波片，避免气泡产生。 上盖波片，避免气泡产生。 5. 压片时要均匀用力，轻敲盖片。 压片时要均匀用力，轻敲盖片。
3R X
果蝇染色体模式图
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇染色体模式图
2R 3L 4 4 2R 着 丝 粒 3R X 3L 3R 2L X
唾液腺染色体观察
果蝇唾腺染色体标本的制作和观察一、实验目的1、练习果蝇幼虫唾腺的分离技术；2、学习制作唾腺染色体标本的方法；3、观察、识别果蝇唾腺染色体的特征。
二、实验原理果蝇幼虫唾腺的细胞核非常大，唾腺染色体比其他细胞染色体大200多倍。
由于重复复制后的众多染色线没有分开，一条染色体内含有染色体线多达千条以上，是通过核内有丝分裂形成的多线染色体。
一般来说，多线染色体是处于永久性前期中的一种体细胞染色体配对形式，普遍存在于双翅目昆虫某些物种的幼虫唾腺细胞内。
唾腺染色体的特征：巨大；体细胞配对，染色体只有半数（n）；各染色体着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；有深浅不同、疏密各别的横纹。
唾腺染色体经染色后出现的横纹的数目和位置常常恒定，标志着物种的特征。
当染色体上有结构变异，如缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾腺染色体上鉴别。
例如：果蝇Ⅰ号染色体上16A区中有六条横纹的是正常复眼，有12条横纹的是棒状眼，有18条横纹的是加倍棒状复眼。
三、实验材料果蝇三龄幼虫；解剖镜，显微镜，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸，生理盐水，醋酸洋红四、实验步骤1、幼虫培养置于16-18℃下饲养，当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前，即为三龄幼虫，此时虫体肥大，便于解剖，是制备唾腺染色体的最理想时期。
2、幼虫的解剖将载玻片置于解剖镜下，滴一滴生理盐水，将幼虫置于其中，左手持解剖针按住幼虫前端1/3处，固定幼虫。
右手持针按住幼虫头部正中，快速用力向右拉，把头部从身体拉开，腺体即随之而出。
唾腺为半透明小囊状，其上附有脂肪带，食道两侧各一个。
找到唾腺后尽可能把腺体上的脂肪剔除。
3、染色前处理清除残体，使载片上只留下唾腺。
4、酸解：把腺体放入1N HCl中浸泡2-3分钟，dH2O洗3次。
5、染色滴上几滴醋酸洋红于唾腺上，染色30分钟，染色时用镊子将唾腺稍捣碎。
6、压片在载片上加盖玻片，盖片上覆盖一吸水纸，然后以拇指适当用力压片，将唾腺细胞核压破，以染色体伸展而不破碎为好。
果蝇唾液腺染色体的制片与观察
果蝇唾液腺染色体的制片与观察一、实验目的学会果蝇幼虫的解剖技术学习唾腺染色体的染色制片方法观察唾腺染色体了解染色体横纹的特点二、实验原理黑腹果蝇幼虫期的唾腺细胞核非常大，唾腺染色体比其它细胞染色体大200多倍并且总是处于前期状态。
这是由于染色体复制而分不开，纵向并列形成像电缆那样的巨大染色体，这样的染色体称为多线染色体，染色体上的染色粒排列在成横带在染色体的部位是一定的。
从唾腺染色体的制片中可以看到五条长臂，好似从一共同的中心发射出来的，这个中心叫做染色中心。
它是由于所有染色体在刚一接近其纺锤丝附着点时，即被相互吸引及紧密结合而成，这五条臂分别称为X、2L、2R（第二染色体的左右臂），3L及3R（第三染色体的左右臂），还有一小段用4来表示（第四染色体），每一条臂都含有二条紧密聚合的同源染色体，一条是母本的，来自卵核，一条是父本的，来自精子。
在雄体的唾腺中，Y染色体大大的萎缩，X染色体则呈现不配对而成细长的一条。
因为，每一条臂都含有二条紧密聚合的同源染色体，所以，当它们有相同的构造时，没有办法从两条紧密配对的双股的染色体复合体来彼此区分它们。
但两条同源染色体之间有差别时，则很容易看出来。
例如，当一条染色体缺失一个片段时，它的同源染色体，在这一段不能配对，就会拱起来，形成了一弧状结构，此外重复、倒位、易位等染色体畸变也可以看到。
所以，果蝇唾腺染色体是研究染色体畸变的好材料，制备唾腺染色体标本，可以用果蝇3令幼虫，越肥越好，（温度在15℃左右，能使幼虫长得肥而大），果蝇的幼虫呈半透明状，有黑点的一端是头部，黑点是它的神经节，唾腺在神经节下面，呈两个半透明的棒状物，中间有一个细丝相连。
三、 实验材料及器材解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、醋酸洋红、85%的生理盐水、1NHCl 的盐酸，以及果蝇幼虫（3令的越肥越好的果蝇幼虫）。
四、 实验步骤1、从果蝇的培养瓶中的找出一只又大又肥的果蝇幼虫，用解剖针将其挑出放在载玻片上，滴两滴85%的生理盐水在果蝇的幼虫上。
遗传学实验--果蝇唾腺染色体的压片及其观察
果蝇唾腺染色体的压片及其观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、学会制作唾腺染色体压片3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验材料黑腹果蝇的三龄幼虫，活跃的，雌性幼虫。
盖玻片、载玻片、解剖针、解剖镜、45%醋酸溶液、卡宝—品红染液、盐酸、乳酸醋酸溶液三、实验原理唾腺染色体的特点：大、粗。
唾腺细胞是一个处于间期的细胞，染色体处于一个伸展的状态，所以特别长，因为这个唾腺细胞是一个多倍体的细胞，每条染色体的话有1000到4000条核蛋白纤维丝（包括DNA和蛋白质）。
唾腺染色体的所有的着丝粒聚在一起形成了一个染色中心，伸开五条臂。
X染色体体联会在一起。
果蝇染色体分区：果蝇染色体一共分为120个区，从端部开始1-20为x染色体，21-40在第二染色体的左臂，61-80在第三染色体的左臂，101—102位于点状染色体。
右臂是从基部开始分区，41-60在第二染色体的右臂， 81-100位于第三染色体的右臂。
每一个分区里边又分成段这个段，用A、B、C、D来表示。
四、实验步骤唾液腺制片：1、取一张载玻片，擦干净表面的酒精，放在解剖镜的载物台上。
2、打开解剖镜，使用上光源。
并在载玻片上滴一滴生理盐水。
3、用解剖针取一只黑腹果蝇的三龄幼虫。
4、用一支解剖针固定幼虫头部，另外一支解剖针压入口沟的位置，将其拉断。
找到口沟附近的一对透明的唾液腺，将唾液腺留在中间，用吸水纸将其他的部分擦去。
5、加入45%的醋酸溶液固定，时间为 5—7秒。
让唾液腺离开原来的位置，时间到了之后将多余的液体吸掉。
6、加一滴盐酸起软化作用，再加一滴蒸馏水洗去多余的盐酸，时间大概1—2秒。
让唾液腺离开原来的位置。
7、滴加染液，染色三十分钟。
8、重新做一张制片9、吸掉多余的染液，加一滴乳酸醋酸溶液，将唾液腺充分的洗涤。
吸去多余的溶液。
10、盖上盖玻片，用两层滤纸，中间打折压住盖玻片手点住盖玻片的两个角轻轻的按抚，吸去多余的溶液。
11、压片显微镜观察：先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。
果蝇唾腺染色体观察
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果蝇唾腺染色体的特点：
1. 巨大；
2. 多线；
3. 体细胞联会：
4.
- 唾腺染色体形成的最初，其同源染色体即处于紧密配
对几乎完全融合状态。
5.
- 在以后不断的复制中仍不分开，所以唾腺染色体只呈
现二倍体染色体数目的单元数。
6.
- 由于其体细胞同源染色体的配对，故易于进行染色体
的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。
2. 果蝇唾腺染色体的制备与观察
实验目的：
1. 练习取出果蝇唾腺的技术和制作唾腺染色体标本 的方法。
2. 观察唾腺染色体的特征：巨大、多线、体细胞联 会、横纹、疏松区 等。
3. 绘多线染色体图。
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实验原理：
•果蝇等双翅目类昆虫幼虫期有很大的 唾腺细胞，其中的染色体也很巨大： 宽约5μm，长约400μm，相当于普通 中期相染色体的100-150倍，称巨大染 色体（giant chromosome）
果蝇三龄幼虫。其它？ 剖取唾腺：
盲囊 脂肪体
气管
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唾腺
果蝇的唾腺
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果蝇的唾腺 2010
詹朝宇
柳珍
李连杰
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唾腺与肠道的区别
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步骤
解离：用滤纸吸取多余盐水，在唾腺上 滴一 滴 1M HCl ，解离2-3分钟，用蒸馏水洗净， 然后让唾腺在蒸馏水中吸涨10-15分钟
染色：将水吸干后滴上几滴改良苯酚品红于 唾腺上，染色10分钟（及时补充液）。
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步骤
压片：盖上盖玻片，左手指按压住，同时用 右手大拇指指肚稍用力摁压盖玻片，然后用 铅笔头轻敲盖片，最后用吸水纸吸尽多余染 液，使唾腺细胞核破裂，核中的染色体舒展 开来。
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果蝇三龄幼虫解剖图
Salivary gland：唾腺
Gonad: 性腺 Ganglion: 神经节 Trachea: 气管 Ovary：卵巢 Intestine：肠
挑取果蝇唾腺的过程
唾腺的位置及形态特征
（2）滴加一滴醋酸洋红，在显微镜下（4倍镜）去除唾腺周 围的脂肪等其他组织部分。唾腺是一对透明的棒状腺体， 外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分， 并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
分离出来的果蝇唾腺
位置：在幼虫体前约1/3 处； 形状：形如一对香蕉，上 小上大。一边常附着带状 的不透明的脂肪。 颜色：半透明如玻璃，略 带白色，比周围组织透明； 细胞特征：唾腺上的细胞 较大，轮廓清晰，用低倍 镜即可清楚看到。
唾腺组织
不同人操作得到的唾腺组织可能不一样
放大的唾腺组织
放大的唾腺组织
[作业] ： 1、绘出所观察到的唾腺染色体简图。 2、果蝇唾腺染色体与其他染色体在形态结构上有什 么区别？
放大的唾腺组织
（3）盖上盖玻片，用刀片支起盖玻片一角，按住盖玻片另 一边，用解剖针轻轻敲打盖玻片，去掉刀片，稍加热后覆 上滤纸垂直压片。 （4）观察，先在10倍镜下观察找到染色体后，再换高倍镜 下观察，比较各染色体的横向纹带、带。
10倍镜
实验五 果蝇唾腺染色体的观察
一、实验目的
1、学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色 体的制片方法； 2、观察果蝇唾腺染色体的形态特征。
二、实验原理
双翅目昆虫（果蝇等）幼虫期唾腺细胞 中具有相当于普通染色体100－150倍的巨大 染色体，由于存在于唾液腺细胞中，所以称为 唾腺染色体(salivary gland chromosome) 。 它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进 行有丝分裂，永久停留在间期，唾腺染色体经 过多次复制而不分开，约有1000－4000根染 色体丝的拷贝，所以又叫多线染色体 （polytene chromosomes ）。
染色质丝的不同部位螺旋化程度 不同，其中螺旋化程度较高的部位形
成染色粒，这些染色粒经多线染色体
的“放大”，形成染色较深的横纹。
横纹的相对大小和空间排列是恒定的，
可以作为天然的精确基因定位的“坐
标”。这些横纹的数目和位置一般是 恒定的，具有果蝇种的特征，染色体
的缺失、重复、倒位、易位等，都能
banded chromosomes 1000x
黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是
从染色中心向四周放射状地伸出5 长1短共6条臂。果蝇染色体数为2n
＝8。其中1号染色体（X染色体）
为端着丝粒染色体，其着丝粒附着 地一端在染色中心上，另一端游离； 2号、3号染色体为中部着丝粒染色 体，每条呈“V“伸展两臂，4号染 色体很短小，呈点状附在染色中心 边缘。
特征 巨大； 体细胞配对，染色体只有半数（n）； 各染色体的异染色质多的着丝粒部分互 相靠拢形成染色中心； 深浅不同、疏密个别的横纹。
在唾腺染色体上辨别出来。
三、仪器与材料
材料：果蝇的三龄幼虫 试剂： 1%醋酸洋红 器具：显微镜、镊子、解 剖针、载玻片、盖玻片、 滤纸、绘图纸
四、实验程序
（1）取果蝇三龄幼虫置于载玻片上，由于果蝇的唾腺位于 幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持镊子按压住虫体后端三 分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部 口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
40倍镜
100倍镜
[重要实验步骤]： • 取果蝇三龄幼虫，一手持镊子夹住虫体中部稍后， 固定幼虫，另一手持解剖针按住幼虫头部，轻缓 拉开头部，去除幼虫的其他组织部分和唾腺周围 的脂肪等其他组织，再用常规染色体制片方法制 片。
[实验注意事项] ： 1、取果蝇三龄幼虫最佳，其行动迟缓，肥大，爬上 管壁（将要化蛹）。 2、要辨别清楚哪些是唾腺细胞。 3、去除唾腺周围的其它组织部分。