总黄酮测定方法
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总黄酮测定(紫外分光光度法,以柚皮苷计)[26]
1)标准曲线
精密称取柚皮苷对照品10mg ,以无水乙醇溶解并定容至50mL ,得0.2mg/mL 柚皮苷溶液。分别取此浓度0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL ,以无水乙醇定容至5mL ,在284nm 处测定吸光度。
从图1-2中,得回归方程:A=0.0067c-0.0033,R 2=0.9993(n=3)。
式中:c —测定用样品液中的总黄酮含量,μg
A —吸光度
图1-2 总黄酮标准曲线
Fig.1-2 The calibrate curve of flavonoids
2) 样品中总黄酮含量的测定
准确称取试样,以乙醇溶解定容,按标准曲线方法测定[26]。样品中总黄酮提取率计算公式为:
10010
V m K V c %)P(621⨯⨯⨯⨯⨯= 式中:p: 样品中总黄酮提取率,%;
c :从标准回归曲线中计算得到的样液的总黄酮含量,μg;
V 1:样品提取液总体积,mL ;
V 2: 测定用体积,mL ;
K :稀释倍数;
m: 样品的投料量,g