高效液相色谱仪确认方案

高效液相色谱仪（岛津LC－2010AHT）

确认方案

（方案编号：zl-08-2013）

目录

1. 确认方案审批表

2.概述

3.确认目的

4.确认范围

5.人员职责

6.相关文件

7.仪器、仪表校验

8.确认计划与进度

9. 确认步骤

9.1运行确认（OQ）

9.2性能确认（PQ）

10.偏差处理记录

11. 确认结果评定与结论

12.再确认项目及检查周期

13.确认人员培训

14.附件

1.确认方案审批起草

审核

批准

2.概述

2.1设备基本信息

●设备名称：高效液相色谱仪

●设备型号：LC-2010AHT

●国别：日本

●厂名：岛津

2.2设备系统描述

设备结构：LC-2010AHT是主要由4液低压梯度、自动进样器、柱温箱、UV检测部组成的一体型高效液相色谱仪，外接RID-10A型示差检测器、打印机和稳压电源，各部分的操作均可由工作站或液晶控制面板控制。

●工作原理：LC-2010AHT检测步骤主要包括流路清洗、色谱柱平衡及检测器平衡、样品处理、

自动进样程序设定、自动进样、后处理及数据处理等，LC-2010AHT根据不同色谱柱对样品在色谱柱内的保留时间不同，用流动相将样品通过色谱柱洗脱，再通过适合的检测器对洗脱的样品成份进行分析。

●设备用途：低分子量肝素钙及立迈青、小牛血去蛋白提取物及睿保特、干扰素原液、肝素钠

和部分原辅料等相关项目的定性、定量分析检验。

2.3设备技术参数

2.3.1输液泵

方式设定输液泵参数时，请参照以下参数表：

[ISO.方式]：

[GRAD.方式]

2.3.2柱温箱和外围设备

设定柱温箱和外围设备的参数时，请参照以下的一览表：

2.3.3 UV-VIS检测器

设定UV-VIS检测器的参数时，请参照以下的一览表：

3.确认目的

为确认LC-2010AHT高效液相色谱仪检测数据准确可靠，性能稳定，特制订本确认方案，对LC-2010AHT高效液相色谱仪进行确认。

4.确认范围

本方案适用于LC-2010AHT高效液相色谱仪的运行和性能确认。

5.人员职责

6.相关文件

《中国药典》2010年版二部

《中华人民共和国国家计量检定规程液相色谱仪（JJG705-2002）》

《高效液相色谱法标准操作规程》

《高效液相色谱仪使用维护规程》

《高效液相色谱柱使用维护规程》

《注射用低分子量肝素钙标准操作规程》

《岛津LC-2010AHT高效液相色谱仪操作说明书》

《文件检查记录》见附件一

7. 仪器、仪表校验

验证前对验证过程中涉及到的仪器仪表等检验仪器进行确认，保证其在有效期内。《仪器、仪表校验》见附件二

8. 确认计划与进度

运行确认（OQ）：从2013 年02月01日到2013年02 月28日

性能确认（PQ）：从2013 年04月01日到2013 年04 月30日

9. 确认步骤

9.1运行确认：

9.1.1 准备：

●用0.22μm滤膜滤过纯化水500ml。

●将管路滤头都放在已过滤的纯化水中，查看废液收集瓶有是否有足够容量。

●查看电源是否通电。

●仪器网络、管路是否联接好。

9.1.2 开机确认：

●自检：打开HPLC电源开关，仪器进入自检程序，自检通过标明仪器的各部件正常。

●紫外检测器与工作站联接：打开计算机，当仪器自检通过后，打开LCsolution工作站，打开紫外通道，仪器会发出一声“滴”响声，工作站界面显示绿色Ready字样，表明工作站与主机联接正常。

●示差检测器与工作站联接：打开示差检测器及连接器，打开工作站示差通道，工作站界面显示绿色Ready字样时，表明示差检测器与工作站联接正常。

●打印机与工作站联接：打开工作站中任意一份数据，添加到报告模板中，点击打印，查看打印机是否能正常打印数据报告。

●紫外工作站对仪器的控制：点击排气、清洗程序按钮，查看仪器是否能按照设定程序进行排气、清洗管路；点击柱温箱控制按钮，查看柱温箱温度显示是否能正常升温；点击泵控制按钮，查看泵是否能正常开启；点击基线归零按钮，查看基线是否能归零。

●示差工作站对示差检测器的控制：点击检测池冲洗按钮【RID(检测器A)R.流速开/关】，查看示差检测器上冲洗灯（R flow）是否亮起；点击检测器平衡按钮【平衡RID(检测器A)】，查看工作站中基线是否出现平衡峰；点击检测器归零按钮【检测器A零点】，查看工作站中基线是否能归零。

9.1.3 Auto Validation

9.1.3.1 确认项目：

●波长准确性检查

●D2灯能量检查

●输液稳定性的检查

●调温精确度的检查

●吸光度的准确度的检查

●UV-VIS检测器基线漂移的检查

●UV-VIS检测器基线噪声的检查

●压力极限的检查

9.1.3.2仪器与设备：

9.1.3.3 测试条件：

流动相：已过滤的纯化水

检测器：紫外检测器，波长为250nm

柱温：35℃

流速：1.0ml/min

9.1.5.4测试方法和步骤：

●将A、B、C、D流路放入纯化水中。

●装入阻尼管。

●选择输液方式（梯度洗脱），设定流动相流速、紫外检查波长、柱温。

●色谱柱、检测器平衡。

●按液晶控制面板上VP键，显示VP/TOP界面。在VP/TOP界面上按F3[VALID]键，选择第3项，按Enter键，显示Auto Validation 界面。

●按F1[START]键，Auto Validation开始，流路B开始清洗。

●等待清洗结束，切换至下一界面，依次开始波长准确度检查、D2灯能量检查、输液稳定性的检查、调温精确度的检查、吸光度的准确度的检查、UV-VIS检测器基线漂移和噪声的检查、压力极限的检查。

●结果检查：检查结束，输入界面右显示的各检查项目的编号（数字键），可显示检查结果。《实验所需试药及试液制备记录》见附件三

《Auto Validation记录》见附件四

《高效液相色谱仪运行确认记录》见附件五

运行确认合格之后要填写《阶段运行确认表》见附件六

9.2性能确认：考察仪器运行的可靠性、主要运行参数的稳定性和结果的重现性。

9.2.1 流量准确度：

9.2.1.1仪器与设备：秒表、阻尼管。

9.2.1.2 测试条件：

流动相：已过滤的纯化水

柱温：35℃

9.2.1.3测试方法和步骤：

分别设定流速为0.2ml/min，0.5ml/min，1.0ml/min等值进行校验，这些流速覆盖了实验室使用的流速范围。待流速稳定后，在流动相流出口处分别用已称定重量的称量瓶准确收集流动相，用秒