脓毒症大鼠肝组织基因表达变化的研究

合集下载

Westernblot法检测大鼠肝组织清蛋白的表达实验

蛋白质的分离与电泳
蛋白质的分离与电泳是Westernblot法的关键步骤之一。通过电泳，将复杂的蛋白质混合物根据分子量大小进行分离，以便后续的转膜和检测。
常用的电泳方法包括SDS-PAGE和Native-PAGE，前者利用SDS将蛋白质变性并带负电荷，根据分子量大小分离；后者则在不改变蛋白质天然电荷和形状的情况下进行分离。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
详细描述
实验结果表明，清蛋白在正常大鼠肝组织中高表达，而在肝损伤大鼠肝组织中表达量明显降低。这可能是因为清蛋白合成减少或降解增加导致其在肝损伤大鼠肝组织中的表达量降低。此外，我们还发现清蛋白表达量与肝组织病变程度呈负相关，这提示清蛋白可能对肝组织的保护作用。因此，我们推测清蛋白可能通过某种机制参与了肝组织的保护作用，具体机制需要进一步研究。
处理肝组织样本
将肝组织样本进行匀浆处理，以充分破碎细胞，释放出细胞内的清蛋白。
蛋白质的提取与定量
蛋白质提取
利用细胞裂解液将处理后的肝组织样本中的蛋白质提取出来。
蛋白质定量
利用BCA蛋白浓度测定试剂盒对提取出的蛋白质进行定量，以确保后续实验的准确性。
电泳与转膜
电泳
将提取出的蛋白质进行SDS-PAGE电泳分离，以便将不同大小的蛋白质分开。
荧光染料等）。
通过免疫杂交，目标蛋白质与特异性抗体结合，形成复合物。
显色反应是利用标记物催化底物生成有色产物，从而在膜上显示出目标蛋白质的位置和量。常见的显色反
应包括酶促反应和化学发光反应。
03
实验步骤
肝组织样本的收集与处理
收集大鼠肝组织样本
在实验动物大鼠处死后，迅速取出肝组织，并立即放入液氮中冷冻保存。

乙醇性肝病大鼠创伤弧菌脓毒症肝组织Toll样受体及髓样分化蛋白-2的表达变化

（ＤｐｒｅｔｆＥｅｉｃ，ＴｅＡｌｔｏｉｏｉｌｎｊＭｅｉｌｏｅｅＨａｈｎｎｅｉｏＳｉｃｎｅａｔｎｍｒｅｙｈｆｉｅＴ，ｓｔＴｇｉｄｃｌｇ，ｕｚｏｇＵｉｍ￣ｆｃｎｅａｄｍｏｇｎｉｆａｄ￣ＨｐａｏｏｆａＣｌｖｅ
Ｔｃｎｌｙｕａ３００ＣｉＤｐｒｎｏｅｅｉｙＴｅＦｍｌｔｏｉｌｆＷｎｈｕＭｅｉｌｏｅｅｅｈｏｏ，Ｗｈｎ４０３，ｈｎｇａ；ｅａｍｔｍｒｅ，ｈｉｔｆｉｅＨｓｔｅｚｏｄａｌｇ，ｔｅｆｇｎｃＡａｄｐａｏｉｃＣｌ
ｅｔｔｎｐｏｉ一２ｉｌｅｓｕｆｈｌｈｌｎｕｅｉｒｉａｅｉａｉｉｒｕｎｆｕ（Ｖ）ｓｐｉｎａｏｒｔｎｖｒｉｅｏｅａｏｏ —ｉｃｄｌｅｓｓｎｒｓｗｔｖｉｖｌｉｃｓＶｉｉｅｎｉｔｓｔｃｄｖｄｅｔｈｂｏｉＴ—ＰＲ）ＲＣ技术检测各时点大鼠肝组织ＴＲ、Ｌ４ＭＤ一２ｍＮＬ２ＴＲ、ＲＡ表达及其动态变化。结果：乙醇性肝病创伤弧菌脓毒症组大鼠染菌后６ｈ开始出现较明显的毒血症状，随着时间的延长毒血症状加剧。乙醇性肝病大鼠在染菌后２ｈＴＲ、Ｌ４ＭＤ一２ｍＲＡ表达开始升高，１，Ｌ２ＴＲ、Ｎ２ｈ达峰值，菌后２染４ｈ下降。染菌后各时点ＴＲ、Ｌ４ＭＤ一ＲＡ表达较正常对照组及乙醇性肝病对照组显著升高（Ｌ２ＴＲ、２ｍＮＰ＜００，００）．５Ｐ＜．１。结论：乙醇性

早期脓毒症大鼠肝TLR4和MD-2基因的表达及丙泊酚对其的影响

广东医学
２１０１年１２月第３２卷第２期ＧｕｎｄｎｄｃｌｏｒａＤｃ２１，Ｖ１２ｏ２３ａｇｏｇＭｅｉｕｎｌｅ．０１ｏ．３，Ｎ．３ａＪ
・
３２１・０
早期脓毒症大鼠肝ＴＲＬ４和ＭＤ一２基因的表达及丙泊酚对其的影响木
雷贤英，甘辞海，钟庆，王丽，孙双春周淑敏，，缑剑
泸州医学院附属医院Ｃ中心实验室（ＩＵ７３四川泸州６６０）四川省简阳市人民医院麻醉科（１０）４００；４６４０
【摘要】目的观察早期脓毒症大鼠肝Ｔｌ样受体４ＴＲ）髓样分化蛋白一（Ｄ一）因的表达，以０ｌ（Ｌ４、２Ｍ２基并丙泊酚进行干预，比较肝ＴＲ、Ｄ一Ｌ４Ｍ２基因表达的差异。方法采用大鼠尾静脉注射脂多糖复制脓毒症模型。
ＨｅａｃｅｐｅｓｏｓｏＲ４ａｄＭＤ —２ｇｎｓｉｅｔａｓｄｒｎｅｅｒｙｐａｅａｄｉｔｒｅｔｎｗｉｒｐ－ｐｔｘｒｓｉｎｆＴＬｎｉ — ｅｅｓｐｃｒｔｕｉｇｔａｌｈｓｎｅｖｎｏｔｐｏｏｎｉｈｎｉｈ
Ｃｒｅ，ａｔｏ：ＧＮｉａ．Ｅ —ｍａｌｇｎａｇ３＠ｓｎ．ｏ０ｒ０ｕｈｒＡＣ —ｈｉｉ：ａｙｎｌ０ｉｅｍａ
【ｓａｔＯｊｃｖＴｖｕｔｔｅｈｐｔｘｒｓｉｓｏＴＲｄＭＤ一２ｇｎｓｉｐｉｒｔｄｒｇｔｅＡｂｔｃ】ｂｅｔｅｏｅａａｅａｃｅｐｅｓｎｆＬ４ａｒｉｌｅｈｉｏｎｅｅｓｔａｕｎｎｅｃｓｉｈ

二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌组织CLDN1基因表达及其甲基化

取肝，第２Ｏ周剩余大鼠取肝，应用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测肝组织ＣＬＤＮ１ｍＲＮＡ的表达，应用ＭＳＰ法检测肝组织ＣＬＤＮ１
启动子甲基化和非甲基化。结果模型大鼠病死率为１０％（４／４０），正常组无死亡。至第２Ｏ周，成瘤率达到
２０１３年２月
中国实验动物学报
ＡＣＴＡＬＡＢＯＲＡＴ０ＲＩＵＭＡＮＩＭＡＬＩＳＳＣＩＥＮＴＩＡＳＩＮＩＣＡ
Ｆｅｂｕａｒｒｙ，２０１３
Ｖ０Ｉ．２ｌＮｏ．１
第２１卷
第１期
二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌组织ＣＬＤＮ１基因表达及其甲基化
【摘要】目的探讨二乙基亚硝胺（ｄｉｅｔｈｙ１ｎｉｔｒｏｓａｍｉｎｅ，ＤＥＮ）诱导大鼠肝癌发生中肝癌组织ＣＬＤＮ１基因表达
及其启动子甲基化的规律。方法６５只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机选择４Ｏ只作为模型组，其余作为正常组。模型组在１ —１２周饮用含ＤＥＮ８０ｍｇ／Ｌ的饮水以诱癌（每日８ａｒｇ／ｋｇ），各组在造模过程的第４周、８周、１２周、ｌ６周随机５只
ＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００６２，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅｏｆＱｉｎｇｐｕＢｒａｎｃｈｏｆＺｈｏｎｇｓｈａｎＨｏｓｐｉｔａｌ，ＦｕｄａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１７００）

westernblot法检测大鼠肝组织血清蛋白的表达变化

westernblot法检测⼤⿏肝组织⾎清蛋⽩的表达变化Western-blot⼀、实验⽬的1、⽤于⽬的蛋⽩的表达特性分析2、⽬的蛋⽩与其他蛋⽩的相互作⽤⼆、实验原理在电场的作⽤下将电泳分离的多肽从凝胶转移⾄⼀种固相⽀持体，然后⽤这种多肽的特异抗体来检测的⼀项技术。

与Southern Blot或Northern Blot杂交⽅法类似，但Western Blot法采⽤的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋⽩质，“探针”是抗体，“显⾊”⽤标记的⼆抗。

经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋⽩质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以⾮共价键形式吸附蛋⽩质，且能保持电泳分离的多肽类型及其⽣物学活性不变。

以固相载体上的蛋⽩质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第⼆抗体起反应，经过底物显⾊或放射⾃显影以检测电泳分离的特异性⽬的基因表达的蛋⽩成分。

该技术也⼴泛应⽤于检测蛋⽩⽔平的表达。

Western Blot显⾊的⽅法主要有以下⼏种：i. 放射⾃显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈⾊现常⽤的有底物化学发光ECL和底物DAB呈⾊，体同⽔平和实验条件的是⽤第⼀种⽅法，发表⽂章通常是⽤底物化学发光ECL。

只要买现成的试剂盒就⾏，操作也⽐较简单，原理如下（⼆抗⽤HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁⽶诺，如遇到HRP，即发光，可使胶⽚曝光，就可洗出条带。

三、实验器材及试剂1、器材：（1）可调移液器P1000、P200和P20，经消毒的相应的盒装吸头（2）经消毒的1.5ml Eppendorf管、试管架及⽔浴锅⽤试管架（3）定时器，记号笔，⼀次性⼝罩和筒纸（4）于冷室中预冷的1.4万转台式离⼼机（5）PH试纸（6）分光光度仪，⽯英⽐⾊杯（7）烧杯，量筒，棕⾊试剂瓶（8）0.45um滤纸2、主要试剂(1)⼀抗：⼩⿏抗⼤⿏多克隆抗体（清蛋⽩，分⼦量66kD）(2)⼆抗：⽺抗⼩⿏IgG-HRP(3)定蛋⽩试剂盒：南京建成⽣物⼯程研究所。

盲肠结扎穿孔术法建立的脓毒症大鼠动物模型不同脏器组织超微结构

ｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉ￣Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１０００５，Ｚｈｅｊｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ）［ＡｂｓｔｒａｃｔｌＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｏｂｅｓｒｖｅｄｙｎａｍｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｍａｊｏｒｏｒｇｎｓａｉｎｓｅｐｔｉｃｒａｔｍｏｄｅｌｅｓｔａｂｌｉｓｈ —
【关键词】盲肠结扎穿孔；脓毒症；多脏器损伤
脓毒症大鼠早期就存在心、
ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１６７１ — ０８００．２０１６．１０．００４【中图分类号】Ｒ５７４．６１；Ｒ６３２．５【文献标志码】Ａ【文章编号】１６７１．０８００（２０１６）１０－１２７１．０３
ＨＵＤａｎｄａｎ，ＹＡＮＧＧｕｏｌｉａｎｇ，ＬＯＵＬｉｍｉｎｇ．ｒ弛ｅＴｈｉｒｄＡｆｉｆｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉ－
动态变化。方法
建立脓毒症大鼠动物模型，观察各组大鼠心肌酶谱、肝肾功能的变化，同时通过透射电镜观察各组大鼠心肌细胞、肝细胞及肾小球超微结构改变。结果稀疏；肝细胞溶解，内质网减少，线粒体肿胀；肾小球结构未见明显改变。至术后２４ｈ，大部分心肌细胞出现自溶，偶见心肌细胞呈核固缩、核碎裂等坏死改变；肝细胞线粒体与内质网广泛的空泡变性，细胞器模糊结构不清；肾小球基底膜部分增厚，部分足突细胞融合消失，肾小球塌陷等。结论肝等多脏器损伤，肾损伤出现较晚。

socs1和socs3在脓毒症小鼠肝、脾中表达的研究

生出盍堂鲤±兰焦监塞墨Ｑ￡墨＝！塑墨Ｑ￡耋墨在壁童疰焦意鼠赶：膣生蠢选的翌ｆ豇附图图１ＲＴ－ＰＣＲ图１．１提取的ＲＮＡ电泳图以下图中：Ｎ代表正常组（ｎｏｒｍａｌ），Ｍ代表Ｍａｒｋｅｒ，Ｓ代表假手术组（ｓｈａｍ），２、６、１２、２４、４８依次代表手术后２、６、１２、２４、４８小时。

图１．２１３一ａｃｔｉｎ电泳图图１‘３脓毒症时ｓｏｃｓ３在肝脏中的表达生出太堂硇±堂焦监塞墨Ｑ￡量：！塑曼Ｑ￡墨：３在丝壹蕉住克鼠旺！眭生盘选的殛宣图１．４脓毒症时ＳＯＣＳ３在脾脏中的表达图１．５脓毒症时ＳＯＣＳＩ在肝脏中的表达图１．６脓毒症时ＳＯＣＳｌ在脾脏中的表达虫出厶堂亟：￡堂笪迨塞ＳＱ￡墨：！塑ＳＱ￡曼：３垂：壁垄蕉体直基旺！盟主盘鲨丝型直图２免疫印迹脓毒症时ＳＯＣＳ在肝脏和脾脏中的蛋白表达图３病理切片幽３１正常肝组织ＨＥ染色（５０倍）幽３．２术后２４小时肝组织ＨＥ染色（５０倍）幽３．３正常肝组织ＨＥ染色（４００倍）幽３．４术后２４小时盯组织ＨＥ染也（４００倍）生出占堂亟二Ｅ堂鱼迨塞墨Ｑ￡墨：！塑墨Ｑ￡曼：！查壁耋蕉篮直鼠赶：蝗主塞垫盟班巍图３．５正常脾纰织ＨＥ染色（５０倍）图３．６术后２４小时脾组织ＨＥ染色（５０倍）幽３７正常脾组织ＨＥ染色（４００倍）幽３．８ＣＬＰ术后２４小时脾组织ＨＥ染色（４００倍）图４免疫组化图４１『Ｆ常肝组织ＳＯＣＳＩ免疫组化（４００倍）幽４．２术后２４小时肝组织ＳＯＣＳＩ免疫组化（４００倍）幽４．３正常肝组织ＳＯＣＳ３免疫组化（４００倍）图４．４术后２４小时片ｆ组织ＳＯＣＳ３免疫组化（４００倍）·ｊ！出盘堂堕±堂笪迨塞苎Ｑ￡曼：！型曼Ｑ￡Ｓ：３查壁生壁签直鼠８［！鲤。

！！盔鲨盐型童图５相关分析的线性拟合图图５．１肝脏ｒｐＳＯＣＳ３ｍＲＮＡ（ＷＧ３Ｎ）同蚩白表达（ＳＧ３）（ｙ＝０４８３＋４Ｉ５２×１０’３ｘ．ｒ＝０３５３．Ｆ５７０６，Ｐ＜０．０５）图５．３月｜ｍｔ”ＳＯＣＳｌｍＲＮＡ（ＷＧｌ）同蚩白袭选（ＳＧｌ）（卿．１１０＋５．７６５×１０‘ｘ，ｒ＝０８３７，Ｆ９３．３０９，Ｐ＜０．０１）倒５５脾脏。

犀角地黄汤对脓毒症大鼠脾组织nf-κb信号通路相关基因表达的影响

actions of BMP signaling[J].Development,2003,130(25):6209.[11]Morgan EA,Nguyen SB,Scott V,et al.Loss of Bmp7and Fgf8signaling in Hoxa13-mutant mice causes hy‐pospadia[J].Development,2003,130(14):3095-3109.[12]Maiuri MC,Le Toumelin G,Criollo A,et al.Func‐tional and physical interaction between Bcl-XL anda BH3-like domain in Beclin-1[J].EMBO(EuropeanMolecular Biology Organization)Journal,2007,26(10):2527-2539.犀角地黄汤对脓毒症大鼠脾组织NF-κB信号通路相关基因表达的影响陈怀宇1，郑则敏2，唐雪华1，林名瑞1，何绍吾1，李玮1（1.福建中医药大学附属人民医院ICU，福建福州350004；2.福建中医药大学附属人民医院中医外科，福建福州350004）摘要：目的探讨犀角地黄汤对脓毒症大鼠脾脏组织NF-κB信号通路相关基因表达的影响。

方法将45只健康雄性Wistar大鼠随机为为对照组、脓毒症组、犀角地黄汤干预组，各15只。

脓毒症组采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建模。

犀角地黄汤干预组大鼠除了CLP外，术前2天开始中药胃饲，每天上、下午各给药1次，术后连续胃饲2d。

对照组仅行开腹、关腹，但不予盲肠结扎穿孔。

3组术毕均肌肉注射平衡液5mL/kg。

术后48h取脾组织提取RNA后采用RNA-seq进行基因检测，应用生物信息学方法分析脓毒症大鼠犀角地黄汤干预后NF-κB信号通路相关基因的表达变化。

结果脓毒症组及犀角地黄汤干预组，脾组织NF-κB信号通路相关基因出现同时表达上调的有2个，同时下调有18个，脓毒症组上调而犀角地黄汤干预组正常表达的有3个，仅脓毒症组下调而犀角地黄汤干预组正常表达的有5个，脓毒症组正常表达而犀角地黄汤干预组表达上调有4个（IL-1β、TNFα、MIP-1β、ICAM）。

Nrf2在脓毒症急性肝损伤（ALI）中的作用机制研究

Nrf2在脓毒症急性肝损伤（ALI）中的作用机制研究谌韦洪【摘要】Objective To investigate and analysis of Nrf2 (nuclear factor ALI (factor) on acute liver injury in sepsis sepsis) in the mechanism of action, and provide guidance to prevention and treatment for sepsis. Methods 40 cases of acute liver damage in pa-tients with sepsis from 2010 Septemberto 2013 September in our hospital as the research object, by randomly divided into control group and observation group with 20 cases in each group, at different postoperative time points were collected serum samples col-lected at the same time, separation of serum, pathological tissue of patients, determination the expression level of Nrf2. Results The observation group ALT level in the sera of patients with increasing amplitude was low, to improve the situation is relatively ob-vious, the patients in observation group were reduced, serum levels of ALT after 2D treatment to (162.44±6.52) IU/L, significantly lower than the control group (262.43±6.96) IU/L, P<0.05. The observation group p atients in different period of pathological tissue levels of Nrf2 expression compared with the control group, 2D was (0.31 ±0.02) uL, increased significantly, P<0.05. Conclusion Nrf2 is the key of oxidative stress in acute liver injury in sepsis, which can be used as an important index to judge the prevention and treatment of sepsis.%目的：探讨与分析Nrf2（核因子相关因子）在ALI（脓毒症急性肝损伤）中的作用机制，旨在为脓毒症的防治提供指导依据。

TGF β1对脓毒症大鼠肝脏MD2表达的影响

ｐｏｅｎ２（ｒｔｉ一ＭＤ２ｔｉｅｅｔｉｏｎｓａｄｔｅｄｎｍｉｃａｇｓｆｈｏｔｎｆ — ｎｉｅｅｏｅｏｓＧＦＢ，１ｆｒｎｍｅｐｉｔｎｈｙａｃｈｎｅｅｃｎｅｔｋＢａｄｇｖｘｇｎｕａｄｆｔｏｔｏＮＦＴ
ＴＦＢ对脓毒症大鼠肝脏ＭＤＧ，２表达的影响
李楠，张或，邢静，方晓君
（连医科大学第一附属医院急诊科，辽宁大连１６１）大１０１
『摘要１目的建立大鼠脓毒症模型，观察不同时间点大鼠肝脏髓样分化蛋白２（ｅｉＤｉｅｅｔｌｒｔｎＭｙｌｄｆｒｎｉｏｅ一ｏａｐｉ２，ＭＤ２）表达情况和ＮＦ —ＫＢ含量动态变化，并给予外源性ＴＧＦＢ干预，探讨ＴＧＦＢ对大鼠脓
ＭｅｈｄｅｈｎｒｄａｄｔｅｔｅｌｙｍａｅＳｒｔｒａｄｍｌｉｉｅｎｏｔｒｅｇｏｐ．ｈｈｍｒｕ，ｈｔｏｓＯｎｕｄｅｎｎｙｈａｔｌＤｓｗｈａｗｅｅｒｎｏｙｄｖｄｄｉｔｅｒｕｓＴｅｓａｇｏｐｔｅｈ
ｉｔｒｅｔｎｔｘｌｒｅｒｌｎｅｐｓｉｌｃａｉｍｆＧＦＢｉｔｅｓｓｄ１ｏｅｔｅｔｎｆｅｓｓｎｅｎｉ，ｏｅｐｏｅｔｏｅａｄｔｏｓｂｅｍｅｈｎｓｏｖｏｈｈＴｎｒｐｉｅｒｈａｍｅｔｐｉ．ａｓｍｏｆｔｒｏｓ
第２卷第４４期
２１０２年７月

姜黄素在急性梗阻性化脓性胆管炎大鼠肝组织中的实验研究论文

姜黄素在急性梗阻性化脓性胆管炎大鼠肝组织中的实验研究【摘要】目的：研究姜黄素在急性梗阻性化脓性胆管炎大鼠肝组织的作用，探讨姜黄素的调节作用及机制。

方法：制作大鼠aosc 模型，姜黄素组为阳性对照，比较肝功能血清学指标，采用rt-pcr 法检测il-17mrna的表达情况。

结果：aosc组肝组织外周血alt、ast指标明显高于姜黄素干预组（p1.8。

1.3.1.2 rt-pcr反应按照逆转录试剂盒说明书将组织及细胞的总rna逆转录成cdna, 以β-actin为内参照行pcr反应。

rt-pcr扩增引物序列如下：引物序列如下：扩增引物为：目的基因il-18mrna: 5’tcagcacagtacgacg3’（上游引物）；5’cgctgagattgtacagc3’（下游引物），β-actin: 5’ gaaggtgatcggat3’（上游引物）; 5’gaagattgatgg3’（下游引物）;反应条件：95 ℃ 2 min，94 ℃ 15 s，58 ℃ 30 s ，72 ℃ 1.5 min 30个循环，72 ℃ 10 min。

产物用1％琼脂糖凝胶电泳检测。

2 统计学方法应用spss 16.0统计软件分析，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用单因素方差分析，计数资料的比较采用χ2检验。

p<0.05认为差异有统计学意义。

3 实验结果3.1 肝组织中il-17 mrna表达情况il-17 mrna在不同组大鼠肝脏组织中均有表达，aosc组、姜黄素干预组il-17 mrna表达量的相对比值的均值1.79士0.21、0.78士0.18。

两者表达明显差异性（p<0.05）,（见图1后）。

3.2 肝组织血清学指标变化情况姜黄素组不同时间段血清alt、ast表达显著低于aosc组，比较有统计学差异（p<0.05）,（具体情况如表2，见后）4 讨论急性梗阻性化脓性胆管炎（aosc）是急性胆管完全梗阻和化脓性感染所致，起病急、并发症多，死亡率极高2。

亚低温对脓毒症大鼠肝肺组织的保护作用

０１６ｍ１ｇＡ．３）ｏ．～，ＭＰ（．３１３１±０３２ｍ１．～；Ｔ组大鼠肝组织（．１）ｏｇＭＨ湿重）苷酸水平为ＡＰ（４５９±００８腺Ｔ．１．２）ｏ．～，Ｄ（．８０１８ｍ１ｇＡ（．４０３１ｍ１ｇＬＳ组和ＭＨ１ｇＡＰ１４３± ．０）ｏ．～，ＭＰ１５４± ．０）ｏ．～；ＰＴ组均较Ｎｃ组腺苷酸水平ＡＰＴ（．９０４５ｍ１ｇＡＰ１６２±０１１ｍ１ｇＡ４９０± ．５）ｏ．～，Ｄ（．３．８）ｏ．～，ＭＰ（．３０４７ｍ１．降低，尤以Ｌｓ组明显。１７７± ．０）ｏｇＰＭＨＴ组肝组织腺苷酸水平较ＬＳ组明显升高；Ｔ组肝乳酸含量为每克蛋白（．２０２３ｍｏ，ＰＭＨ１４４± ．１）ｍｌ明显低于ＬＳ组的每Ｐ
维普资讯８年１月第３卷第１期
・
４・５
・
论著
文章编号：６３５０（０８０－０５０１７－５１２０）１０４－５
亚低温对脓毒症大鼠肝肺组织的保护作用
克蛋白（．７０２７ｍｌＰ＜００，１６６± ．６）ｍｏ（．５）而与ＮＣ组差异无统计学意义［ｓ克蛋白（．７ｖ每１３９±０３４．１）ｍｍｌＰ＞．５。ｏ，００］
Ｉｓ大鼠肺组织ＴＦ０ｍＲＡ１２和３ｈ表达分别为（．２００５、１１２± ．６）（．００Ｏ４）ＭＨ组ＰＮ一【Ｎ、１０９± ．５）（．３００８和１１７± ．４；Ｔ组大鼠

脓毒症大鼠脾组织基因表达变化

脓毒症大鼠脾组织基因表达变化作者：林名瑞林建东肖雄箭来源：《中华急诊医学杂志》2013年第03期【摘要】目的基于基因芯片技术来研究脓毒症大鼠脾组织基因表达情况，并分析脓毒症时脾功能障碍的可能机制。

方法 30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法等分为对照组和脓毒症组。

采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症大鼠模型；对照组仅开腹、关腹，不行CLP。

两组大鼠术后均肌注平衡液5 ml/kg。

采用RatRef-12大鼠表达谱基因芯片进行检测，用计算机软件筛选并分析比较脓毒症组与对照组大鼠脾组织基因表达的变化。

结果在 22 523 个基因中，与对照组比较脓毒症组大鼠脾组织差异表达基因共205个，占基因芯片总点数的0.910%。

其中表达上调者98个，已知功能基因48个；表达下调者107个，已知功能基因64个。

这些差异基因主要涉及细胞凋亡、炎症反应、能量代谢相关基因表达异常。

结论脓毒症时，脾功能障碍可能是由于细胞凋亡、炎症反应及能量代谢相关基因的表达异常共同作用导致的，可能为脓毒症晚期机体免疫抑制的原因。

【关键词】脓毒症；脾；基因表达谱；基因芯片Gene-expression profiling of spleen in sepsis rat models LIN Ming-rui， LIN Jian-dong， XIAO Xiong-jian. Intensive Care Unit，The Affiliated People’s Hospital of Fujian Traditional Medical University， Fuzhou 350004， ChinaCorresponding author： LIN Jian-dong，Email：linjd@【Abstract】Objective To find out the differences in gene expression of spleen tissue in septic rats by using DNA microarrays. Methods Thirty male Wistar rats were randomly（random number）and equally divided into control group and sepsis group， and septic rat model was induced by cecal ligation puncture （CLP）. The rats of control group were only subjected to a simulated operation without CLP. Gene expression profiles were studied by using RatRef-12 gene chip. Rat gene expression profile was showed by using microarray to detect the changes in gene expression pattern of rat spleen tissue after CLP. And subsequently， by using relevant computer software to screen and analyze， the comparison of differences in gene expression between the sepsis group and control group was made. Results Of 22 523 genes，205 differential genes were found between sepsis group and control group， accounting for 0.910%. Among them 98 genes showed up-regulation，with 48 known functional genes，and 107 genes showed down-regulation， with 64 known functional genes. The function of such different genes were associated mainly with apoptosis， inflammation and energy metabolism of spleen cells. Conclusions Splenic dysfunction may be attibuted to the abnormal expression of relevant genes subjected to apoptosis， inflammation and alteration of energy metabolism. It may be the cause of immunosuppression in the later stage of sepsis.【Key words】Sepsis；Spleen；Gene expression profiles；Gene chips脓毒症及脓毒症相关的多功能器官衰竭为近年来危重病医学研究的热点与难点。

雷帕霉素在脓毒症致肺纤维化大鼠中应用研究

低ＴＧＦ￣β１、α￣ＳＭＡ、ＭＭＰ￣２及ＴＩＭＰ￣１的表达ꎬ减轻脓毒症致肺纤维化的进展程度ꎬ从而发挥对肺损伤的保护作用ꎮ
[ 关键词] 脓毒症ꎻ 肺纤维化ꎻ 雷帕霉素ꎻ 基质金属蛋白酶￣２ꎻ 基质金属蛋白酶组织抑制物￣１
中图分类号:Ｒ４５９７ＤＯＩ∶ １０. １６０４８ / ｊ. ｉｓｓｎ. ２０９５￣５５６１. ２０２１. ０３. ０５文章编号:２０９５￣５５６１(２０２１)０３￣０１８０￣０６
模型ꎬ给予雷帕霉素作为干预措施ꎬ观察脓毒症后
期不同时间点肺组织ＴＧＦ￣β１、 α￣ＳＭＡ、ＭＭＰ￣２及
复碾碎ꎬ 充分混合ꎬ 置于磨口试管中ꎬ 用６ｍｏｌ / Ｌ
滤液加蒸馏水后充分混合ꎬ加入柠檬酸缓冲液和氯
胺Ｔ溶液氧化６ｍｉｎ后ꎬ 过氯酸终止反应ꎮ 静置
ｏｆＭＭＰ￣２ａｎｄＴＩＭＰ￣１ｉｎｒａｐａｍｙｃｉｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｓｅｐｓｉｓｇｒｏｕｐꎬｗｉｔｈｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ
( Ｐ < ００５) . ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＲａｐａｍｙｃｉｎｍａｙｒｅｄｕｃｅｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｉｂｒｏｓｉｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｓｅｐｓｉｓｂｙｄｅｃｒｅａｓｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓ￣
ｒａｔｓｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙｉｎｊｅｃｔｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅꎻｒａｔｓｉｎｓｅｐｓｉｓｇｒｏｕｐｗｅｒｅｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙｉｎｊｅｃｔｅｄｗｉｔｈｌｉｐｏｐｏ￣

利多卡因对脓毒症大鼠预后的影响

利多卡因对脓毒症大鼠预后的影响杨强;常玉林;姚忠岩;刘朝辉【摘要】ObjectiveToexploretheeffectsoflidocaineonprognosisofratswithsepsis.Meth odsTheanimal models were established by cecal ligation and puncture ( CLP) in 96 male Wistar rats in which 48 rats were divided into four groups:control group (group C),model group (CLP group),early lidocaine treatment group (Lido+CLP group) and late lidocaine treatment group ( CLP+Lido group) ,with 12 rats in each group.The rats were sacrificed at 24h and 48h after CLP, respectively,then blood and lung tissue samples were collected for detecting the serum levels of high mobility group box-1 ( HMGB1) , the expression levels of HMGB1 mRNA in lung tissue and the functional parameters in important organs. Furthermore the survival rates were observed in the other 48 rats.Results The serum levels of HMGB1 were positively correlated to the expression levels of HMGB1 mRNA in lung tissue ( r =0.94, P <0.05).The serum levels of HMGB1 and expression levels HMGB1 mRNA in lung tissue in CLP group, Lido+CLP group and CLP+Lido group were significantly higher than those in group C ( P<0.05),however,which in Lido+CLP group and CLP+Lido group were obviously lower than those in CLP group ( P <0.05).As compared with those in CLP group,the levels of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST),blood urea nitrogen (BUN),creatinine (Cr),creatine kinase (CK) were significantly decreased in Lido+CLP group and CLP+Lidogroup ( P <0.01).The survival rates of rats in Lido+CLP group and CLP+Lido group were significantly higher than those in CLP group ( P<0.01).Conclusion Lidocaine can significantly improve the survivalrate,inhibit HMGB1 expression and protect important organs such as liver,kidney and heart in rats with sepsis.%目的：探讨利多卡因对脓毒症大鼠预后的影响。

大承气汤对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4表达的影响

［ｂｔａｔＯｊｃｉＴｏｉｖｓｉａｅｔｅｎｌｅｃｆａｈｎｑｅｏｔｎ（承气汤）ｆｉｅｅｔｏｅＡｓｃ］ｂｅｔｅｒｖｅｔｔｈｆｎｅｏｃｅｇｉｃｃｉｎｇｉｕＤｄｏ大ｏｆｒｎｓｓｄｆｄ
ｎｒｌｃｎｒｌｈｍｐｒｔｎ，ｍｏｅ，Ｄａｈｎｑｅｏｔｎｌｗｎｉｈｄｓｒｕｓ（ａｈ，ｎ— ｌ）Ｔｈｏｍａｏｔｏ，ｓａｏｅａｉｏｄｌｃｅｇｉｃｃｉｏａｄｈｇｏｅｇｏｐｅｃｄｏＯ．ｅ
中国中西医结合急救杂志２１００年９月第１７卷第５期
ＣｈｎＪＴＭＭｒａｅＳｐｅｅ００Ｖｏ．７Ｎｏ５ｉＣｗＣｉＣｒ，ｅｔｍｂｒ２１，１１。．ｔ
・２８５・
・
论著・
大承气汤对脓毒症大鼠肝脏Ｔｌ样受体４ｏ词】大承气汤；脓毒症；ｌ样受体关Ｔｏｌ
中图分类号：８．；５．Ｒ２５５Ｒ２６４文献标识码：ＡＤ：０３６／．ｓｎ１０ — ６１２１．５０１ｏＩ１．９９ｊｉｓ．０８９９．０００．１
ｏｉｅｘｒｓｉｎｏｌｌｋｅｅｔｒ４（ｎｌｒｅｐｅｓｏｆＴｏｌｉｅｒｃｐｏＴＬＲ４ｖ）ｍＲＮＡｎｎｌｍｍａｏｙｍｅｉｔｒｎｒｔｔｂｏｎ１ａｄｉｆａｔｒｄａｏｓｉａｓｗｉｈａｄｍｉａ

211281697_miR-155在脓毒症脏器功能障碍中的研究进展

㊃综述㊃m i R-155在脓毒症脏器功能障碍中的研究进展李志华,王毅,于湘友新疆医科大学第一附属医院重症医学科,乌鲁木齐830054摘要脓毒症是由宿主对感染反应失调引起的威胁生命的器官功能障碍㊂脓毒症发病过程中炎症介质的过度释放,导致机体炎症反应失控,严重者导致脓毒性休克及多脏器功能衰竭㊂m i R N A是近年来研究较多的内源性非编码小R N A,长度在20~25n t之间㊂m i R-155是目前研究较多的一种m i R N A,近年来,m i R-155表达分析显示m i R-155的表达与脓毒症的严重程度以及器官功能障碍有关㊂关键词脓毒症;器官功能障碍;非编码R N A;m i R-155中图分类号R459.7R515.3A d v a n c e s o fm i R-155i no r g a nd y s f u n c t i o no f s e p s i sL IZ h i h u a WA N G Y i Y U X i a n g y o uD e p a r t m e n t o f c r i t i c a lm e d i c i n e t h eF i r s tA f f i l i a t e dH o s p i t a l o fX i n j i a n g M e d i c a lU n i v e r s i t y U r u m q i830054A b s t r a c t S e p s i s i s a l i f e-t h r e a t e n i n g o r g a n d y s f u n c t i o n c a u s e db y t h em a l a d j u s t e d r e s p o n s e o f t h e h o s t t o i n f e c t i o n T h ee x c e s s i v e r e l e a s e of i n f l a mm a t o r y m e d i a t o r s i n t h e p a t h og e n e s i s o f s e p s i s l e a d s t o th e u n c o n t r o l l e di n f l a mm a t o r y r e s p o n s eI t l e a d s t o s e p t i c s h o c ka n dm u l t i p l e o r g a n f a i l u r e i n s e v e r e c a s e s M i R N Ai s a n e n d o g e n o u s n o n c o d i n g s m a l lR N A w i t ha l e n g t ho f20~25n t m i R-155i sak i n do f m i R N A w h i c hi s w i d e l y s t u d i e da t p r e s e n t I nr e c e n t y e a r s m i R-155e x p r e s s i o na n a l y s i s s h o w s t h a t t h e e x p r e s s i o no fm i R-155i s r e l a t e d t o t h e s e v e r i t y of s e p s i s a n do rg a nd y s f u n c t i o nK e y w o r d s s e p s i s o r g a nd y s f u n c t i o n n o n-c o d i n g R N A m i R-1551脓毒症与多器官功能障碍脓毒症是由宿主对感染反应失调引起的威胁生命的器官功能障碍[1]㊂脓毒症和脓毒性休克是目前人类面临的主要医疗问题,每年影响全球数百万人,其中三分之一到六分之一的人死于此病[2]㊂脓毒症的发病机制复杂,可能与宿主免疫反应[3]㊁凝血功能障碍[4]及炎症因子过度释放[5]有关㊂脓毒症发病过程中炎症介质的过度释放,导致机体炎症反应失控,继而导致脓毒性休克及多脏器功能衰竭㊂脓毒症其发病率及死亡率较高,一直是全球重症医学治疗领域的难点及重点[6]㊂2微小核糖核酸微小核糖核酸(m i R N A s)是近年来研究较多的内源性非编码小R N A(s n c R N A),它在真核生物中大量存在,长度在20~25n t之间[7]㊂在细胞核中,编码m i R N A的基因在R N A聚合酶I I的作用下转㊃58㊃河南大学学报(医学版),2023,42(2)收稿日期:2022-09-02基金项目:国家自然科学基金地区基金(82160360)作者简介:李志华(1987-),女,博士研究生,主治医师㊂研究方向:脓毒症肠道屏障功能障碍㊂通信作者,E-m a i l:y u2796@163.c o mCopyright©博看网. All Rights Reserved.河南大学学报医学版录生成长度约几千个碱基的初级转录本p r i-m i R-N A,继而经蛋白质复合体的第一次加工㊂这个蛋白质复合体由D r o s h a和P a s h a两个蛋白质组成,分别是R N a s e I I I蛋白和双链R N A结合蛋白㊂p r i-m i R N A在D r o s h a的作用下被加工成含有60~70n t具有发夹结构的m i R N A的前体(p r e-m i R-N A)[8]㊂p r e-m i R N A在相关转运蛋白的协助下从细胞核内转运到细胞质中㊂在细胞质中,p r e-m i R-N A被R N A聚合酶I I I家族中的成员D i c e r识别,对p r e-m i R N A的茎环结构进行剪切和修饰,形成约20个碱基对长的m i R N A:m i R N A*双链㊂这种m i R N A:m i R N A*双链与A r g o n a u t e家族蛋白形成R N A诱导的沉默复合体,其中的m i R N A*被降解,m i R N A则被保留在m i R I S C中,最终形成成熟的单链m i R N A[9]㊂m i R N A对基因表达的调控作用主要表现在转录后水平上,m i R N A与其靶基因m R N A的3'非翻译区进行碱基完全或几乎完全的互补配对,促进靶基因m R N A降解,沉默基因转录后表达或特异性的抑制基因表达[10]㊂m i R N A参与了细胞的生长㊁分化㊁衰老㊁凋亡㊁自噬㊁迁移㊁侵袭等多种过程[11-12]㊂3m i R-155与脓毒症脓毒症是一种常见的高死亡率疾病,已成为重症监护病房(I C U)的主要死亡原因[13]㊂目前超过25%~30%的脓毒症患者死于该病,脓毒性休克患者的住院死亡率接近40%~60%[14]㊂于脓毒症的高死亡率和高发病率,提高脓毒症患者生存率的关键在于早期诊断,并准确评估脓毒症患者的严重程度,选择合适的治疗方法㊂因此,寻找脓毒症早期诊断的生物标志物是非常重要的㊂M i c r o-R N A-155(m i R-155)是目前研究较多的一种m i R N A㊂它位于21号染色体非转录B细胞整合簇基因上的第三个外显子[15],m i R-155是m i R N A家族的一个独特成员[16],其在免疫细胞的发育中具有重要作用㊂因此,它们在先天性和适应性免疫反应中起到重要的调控作用[17-18]㊂近年来,m i R-155表达分析显示m i R-155的表达与脓毒症的严重程度以及器官功能障碍有关[19]㊂4m i R-155对脓毒症器官功能的影响4.1m i R-155在脓毒症肺脏中的研究进展脓毒症引起全身炎症反应并随着疾病的进展严重者导致多脏器功能衰竭甚至死亡[20],急性肺损伤(A L I)及急性呼吸窘迫综合征(A R D S)是脓毒症最常见的并发症之一[21],也是引起患者死亡的主要原因[22],主要特征是肺部出现严重的急性炎症反应,导致弥漫性肺泡损伤㊁肺泡毛细血管破裂㊁肺水肿及肺不张的形成[23]㊂近年来,发现多种m i R N A参与体内炎症反应,而研究发现A R D S的发病机制与炎症反应激活有关,大量炎症介质释放到肺泡腔和血液中,导致A R D S的发生㊁发展[24]㊂B a i h e t i n i s h aT u e r d i[25]采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症小鼠模型,发现和对照组相比,m i R-155在脓毒症状态下表达量明显增高,同时在脂多糖(L P S)刺激的作用下,小鼠肺泡上皮细胞(M L E-12)中m i R-155表达增加,下调m i R-155的表达能够抑制L P S刺激的M L E-12上皮细胞凋亡和炎性细胞因子释放[25]㊂近年来的研究发现m i R-155可以结合S O C S-1调控肺泡巨噬细胞的凋亡,导致I型干扰素的产生增多[26]㊂在L P S的刺激下,m i R-155基因敲除的小鼠中S O C S-1表达增加,而m i R-155过表达小鼠中S O C S-1表达减少,这表明在L P S诱导的A L I中,S O C S-1可能受到m i R-155的负调节,通过荧光素酶分析显示m i R-155结合于S O C S-13'U T R端从而抑制S O C S-1的表达[27]㊂在脓毒症等全身急性炎症反应中,S I R T1通过负性调节N F-κB途径参与炎症的消退[28],通过C L P建模导致A L I的小鼠中,m i R-155抑制剂通过靶向结合S I R T1显著提高C L P小鼠的存活率,减轻肺组织的损伤,降低血清T N F-α和I L-1β的表达,并减少中性粒细胞浸润和肺水肿[29]㊂这些研究结果将有助于提高我们对m i R-155在肺部炎症中作用机制的理解,并为探索脓毒症患者A R D S的治疗提供新的思路㊂4.2m i R-155在脓毒症肠道损伤中的研究进展肠道作为人体最大的细菌储源库,在一般情况下,微生物的组成对宿主健康起着至关重要的作用[30],但是在脓毒症等严重急性的刺激作用下肠道免疫功能受抑制,肠黏膜完整性被破坏,导致肠黏膜屏障功能受损,促使肠道细菌移位,引起机体过度炎症反应,诱发/加重全身炎症反应综合征(S I R S),最终形成多脏器功能衰竭或脓毒性休克[31]㊂肠道既是损伤的靶器官,又对炎性介质的产生起到扩增的作用,因此肠道常常被认为是脓毒症及MO D S的启动器官 [32]㊂C a o等[33]研究发现,m i R-155抑制剂通过抑制㊃68㊃J o u r n a l o fH e n a nU n i v e r s i t y M e d i c a l S c i e n c e2023422Copyright©博看网. All Rights Reserved.N F-κB通路激活,减少促炎症介质T N F-α和I L-6的释放,进而减轻脓毒症炎症反应并改善肠屏障功能㊂同时m i R-155通过靶向调节H I F-1α/T F F-3轴参与D S S诱导的小鼠结肠炎的肠屏障功能障碍,其中m i R-155抑制剂通过减少m i R-155的表达,导致H I F-1α/T F F-3表达增加,进而改善D S S诱导的肠黏膜屏障功能障碍[34]㊂既往的研究发现肠黏膜通透性的改变在肠道屏障中发挥重要的作用,黏膜通透性增高提示肠黏膜屏障功能障碍,肠道黏膜的通透性主要受肠上皮细胞的完整性影响[35],而研究发现肠上皮的完整性主要取决于细胞间的紧密连接,如紧密连接蛋白O c c l u d i n㊁C l a u d i n-1和Z O-1[36],一项研究[37]发现,脑外伤后出现血清及肠黏膜m i R-155表达的增加,通过抑制C l a u d i n-1的表达,导致肠黏膜通透性增高,引起肠黏膜损伤,下调m i R-155表达则能增加肠黏膜C l a u d i n-1的表达而减轻肠黏膜损伤的程㊂4.3m i R-155在脓毒症肾脏损伤中的研究进展脓毒症常引起多器官功能障碍,肾脏是最常累及的器官之一,将近60%的脓毒症患者伴发急性肾损伤导致肾功能损害[38],在合并急性肾损伤的危重症患者中,死亡率高达60%,但其发病机制尚未完全阐明,其中微血管功能障碍㊁内皮细胞损伤㊁氧化应激等均有可能参与急性肾损伤[39]㊂m i R-155可通过先天性免疫和获得性免疫反应参与肾损伤的病理过程[37]㊂R e n等[37]的研究发现,在L P S诱导的急性肾损伤大鼠模型中,抑制m i R-155的表达可导致S O C S1高表达,并抑制J A K/S T A T信号通路的激活,导致促炎性介质释放减少,从而减轻脓毒症肾损伤㊂目前,维生素D类似物已被批准用于治疗慢性肾脏疾病,作为降低患者血液中甲状旁腺激素水平及尿蛋白的有效疗法[40-41]㊂对于脓毒症导致的急性肾损伤,维生素D是否能发挥一定的作用,D u等[42]的一项研究发现,在L P S诱导的H K2细胞中,N F-κB通路被激活,导致m i R-155及p53上调,进而引起凋亡调节因子(P UMA)的表达增加,促炎性介质过度释放引起急性肾损伤,但维生素D受体(V D R)可阻断该通路的激活,从而减少肾小管上皮细胞凋亡导致的肾损伤,但这些研究仍需要大量的体外实验及临床研究来验证㊂4.4m i R-155在脓毒症心脏损伤中的研究进展脓毒症心肌病是脓毒症的一种常见且危重的心功能不全并发症,影响患者预后[43]㊂其发病机制涉及全身因素以及心肌细胞的分子㊁代谢和结构变化的相互作用,主要包括免疫和炎症反应失控[44]㊁心肌和线粒体能量代谢紊乱[45]㊁表观遗传模型的改变[46]等,但具体机制仍有待更进一步的研究㊂W a n g等[47]研究证实,脓毒症状态下m i R-155通过靶向结合P e a15a调节细胞凋亡,从而导致脓毒症诱导的心功能不全,并认为m i R-155/P e a15a 通路可能成为脓毒性性心肌功能障碍的潜在治疗靶点㊂近年来,L i u等[48]在研究M1型巨噬细胞在血管生成和心肌梗死后心肌修复中的作用和潜在机制中发现M I微环境中M1样巨噬细胞衍生的外泌体的作用㊂促炎性M1样巨噬细胞释放出大量促炎性外泌体(M1-E x o s)㊂M1-E x o s发挥抗血管生成作用并加速M I损伤㊂它们还表现出高表达的促炎性m i R N A,例如m i R-155㊂m i R-155被转移到内皮细胞(E C s),通过下调其新的靶基因,包括R a c家族小G T P a s e1(R A C1),p21激活激酶2(P A K2),从而抑制血管生成和心脏功能障碍S i r t u i n1(S i r t1)和蛋白激酶AM P激活的催化亚基α2(AM P Kα2)㊂M1-E x o s通过同时靶向五个分子节点(基因)抑制S i r t1 /AM P Kα2-内皮型一氧化氮合酶和R A C1-P A K2信号通路,降低E C的血管生成能力,加重心肌损伤和抑制心脏愈合[49-50]㊂同时,最近有报道[51-52]称m i R-155在多种心血管疾病中发挥重要作用,如动脉粥样硬化㊁肥厚性心脏重构㊁急性心肌梗死㊁酒精性心脏病㊁糖尿病心肌病等㊂4.5m i R-155在脓毒症肝脏损伤中的研究进展肝脏作为人体重要的器官之一,在脓毒症的代谢和免疫稳态中发挥重要作用[53]㊂脓毒症相关肝损伤(S R L I)是指脓毒症直接或间接导致的肝功能损伤,可导致机体出现一系列的症状㊁体征以及生化指标的异常[54],严重的脓毒性肝损伤可进一步导致多脏器功能障碍综合征㊂因此,探讨脓毒性肝损伤的发病机制,寻找有效的治疗方法具有重要意义㊂W a n g等[54]在C L P动物模型中发现m i R-155表达明显升高,且与炎症因子(T N F-α㊁I L-6)水平呈正相关,且伴有明显的肝损伤,提示m i R-155可能参与脓毒性肝损伤的发生㊂而Y a n g等[55]对脓毒性肝损伤的进一步研究发现,m i R-155主要是通过靶向结合N r f2调控氧化应激介导的内质网应激㊁线粒体损伤和细胞凋亡,从而参与脓毒性肝损伤的发生发展㊂有研究[56]发现,抑制m i R-155的表达可以改善脓毒性肝损伤,而后者主要是通过激活J A K/㊃78㊃河南大学学报(医学版),2023,42(2)Copyright©博看网. All Rights Reserved.河南大学学报医学版S T A T通路加重脓毒性肝损伤㊂结果提示,m i R-155可能作为脓毒性肝损伤的潜在治疗靶点㊂5展望近年来,随着对m i R-155研究的深入,其调控的靶基因越来越多被发现,这对m i R-155应用于脓毒症以及相关脏器并发症的治疗提供了新思路及新想法㊂尽管m i R-155在炎症性疾病中的调控中发挥重要作用,但将其运用于脓毒症等炎症性疾病的诊断及治疗仍需要更进一步的研究㊂参考文献1P R E S C O T T H C A N G U S D C E n h a n c i n g r e c o v e r yf r o ms e p s i s a r e v i e w J J AMA 2018319162-752E V A N SL R HO D E SA A L HA Z Z A N IW e t a l S u r-v i v i n g s e p s i s c a m p a i g n i n t e r n a t i o n a l g u i d e l i n e s f o rm a n a g e m e n t o fs e p s i sa n ds e p t i cs h o c k2021J C r i tC a r eM e d202149111063-11433E YMO U RC W G E S T E NF P R E S C O T T H C e t a lT i m e t o t r e a t m e n t a n dm o r t a l i t y d u r i n g m a n d a t e d e m e r-g e n c y c a r ef o rs e p s i s J N E n g lJ M e d2017376232235-22444S E M E R A R O N AMMO L L O C T S E M E R A R O F e ta l S e p s i s t h r o mb o s i s a n d o r g a n d y s f u nc t i o n JT h r o m bR e s20121293290-2955C HO U S T E R MA NBG S W I R S K IFK W E B E RGFC y t o k i n e s t o r ma n ds e p s i sd i s e a s e p a t h o g e n e s i s J S e-m i n I mm u n o p a t h o l2017395517-5286R U D D K E J OHN S O N S C A G E S A K M e ta lG l o b a l r e g i o n a l a n dn a t i o n a l s e p s i s i n c i d e n c e a n dm o r-t a l i t y1990-2017a n a l y s i s f o r t h e g l o b a l b u r d e no f d i s-e a s e s t u d y J L a n c e t20201839510219200-2117K L O O S T E R MA N W P P L A S T E R KR H T h e d i v e r s ef u n c t i o n s o fm i c r o R N A s i na n i m a ld e v e l o p m e n ta n dd i-s e a s e J D e vC e l l2006114441-4508D E N L IA M T O P SBB P L A S T E R KR H e t a l P r o-c e s s i n g o f p r i m a r y m i c r o R N A sb y t h e m i c r o p r o c e s s o rc o m p l e x J N a t u r e2004432231-2359S U N G Y A NJ N O L T N E R K e t a l S N P s i nh u m a nm i R N A g e n e s a f f e c t b i o g e n e s i s a n d f u n c t i o n J R N A20091591640-165110WA N GL Q C H I M CS D N A m e t h y l a t i o no f t u m o r-s u p p r e s s o rm i R N A g e n e s i n c h r o n i c l y m p h o c y t i c l e u k e-m i a J E p i g e n o m i c s2*******-47311C H E V I L L E T JR L e e e t a l I s s u e sa n d p r o s p e c t so f m i c r o R N A-b a s e d b i o m a r k e r si n b l o o d a n d o t h e rb o d y f l u i d s J M o l ec u l e s2014196080-610512MO R IM A L U DW I GRG G A R C I AMA R T I NR e ta l2019E x t r a c e l l u l a rm i R N A s f r o mb i o m a r k e r s t om e d i a t o r s o f p h y s i o l o g y a n dd i s e a s e J C e l l M e t a b2019304656-67313S I N G E R M D E U T S C HMA NCS S E YMO U RC We t a l T h e t h i r d i n t e r n a t i o n a l c o n s e n s u sd ef i n i t i o n s f o rs e p s i s a n ds e p t i cs h o c k S e p s i s-3J J AMA 20163158801-1014C E C C O N IM E V A N SL L E V Y M e t a l S e p s i s a n ds e p t i c s h o c k J L a n c e t20183921014175-8715S E D D I K IN B R E Z A R V R U F F I N N e t a l R o l eo fm i R-155i n t h e r e g u l a t i o no f l y m p h o c y t e i mm u n e f u n c-t i o n a n dd i s e a s e J I mm u n o l o g y2014142132-3816WA NJ X I A L X U W e t a l E x p r e s s i o na n df u n c-t i o no fm i R-155i nd i s e a s e s o f t h e g a s t r o i n t e s t i n a l t r a c tJ I n t JM o l S c i201617570917G U OZ W E NZ Q I N A e t a l A n t i s e n s e o l i g o n u c l e-o t i d e t r e a t m e n t e n h a n c e s t h e r e c o v e r y o f a c u t e l u n g i n-j u r y t h r o u g hI L-10-s e c r e t i n g M2-l i k e m a c r o p h a g e-i n-d u ce de x p a n s i o nof C D4+r eg u l a t o r y Tc e l l s J J I m-m u n o l20131904337-434818O C O N N E L L R M K A HN D G I B S O N W S e ta lM i c r o R N A-155p r o m o t e s a u t o i mm u n e i n f l a mm a t i o nb ye n h a n c i n g i nf l a mm a t o r y T c e l ld e v e l o p m e n t J I m-m u n i t y20103607-61919G O O DW I N A J G U O C C O O K J A e ta l P l a s m al e v e l s o fm i c r o R N Aa r e a l t e r e dw i t h t h e d e v e l o p m e n t o fs h o c k i nh u m a n s e p s i s a n o b s e r v a t i o n a l s t u d y J C r i tC a r e2015181944020邓慧兰韩文慧王辉等微小R N A-145-5p与脓毒症急性肺损伤的相关性研究J临床内科杂志2021388552-55521徐明珑王帅伟白玉等消化系统感染脓毒症血浆中的尼曼-匹克病α蛋白水平的变化及其作用J河南大学学报医学版202241146-5022WA N GZF Y A N G Y M F A N H D i a g n o s t i cv a l u eo fm i R-155f o r a c u t e l u n g i n j u r y a c u t e r e s p i r a t o r y d i s-t r e s s s y n d r o m e i n p a t i e n t sw i t hs e p s i s J JI n t M e dR e s202048730006052094307023B E L L A N IG L A F F E YJG P HAM T e t a l E p i d e m i-o l o g y p a t t e r n so f c a r e a n d m o r t a l i t y f o r p a t i e n t sw i t ha c u t e r e s p i r a t o r y d i s t r e s s s y n d r o m e i n i n t e n s i v e c a r e u-n i t s i n50c o u n t r i e s J J AMA 20163158788-80024S T A P L E T O N R D S U R A T T B T N E F F M J e ta lB r o n c h o a l v e o l a r f l u i d a n d p l a s m a i n f l a mm a t o r y b i o m a r-k e r s i n c o n t e m p o r a r y A R D S p a t i e n t s J B i o m a r k e r s2019244352-359㊃88㊃J o u r n a l o fH e n a nU n i v e r s i t y M e d i c a l S c i e n c e2023422Copyright©博看网. All Rights Reserved.25T U E R D I B Z U OL MA Y e t a l D o w n r e g u l a t i o no f m i R-155a t t e n u a t e s s e p s i s-i n d u c e da c u t e l u n g i n j u r y b y t a r g e t i n g S I R T1J I n tJC l i nE x p P a t h o l201811 94483-449226WA N G P HO U J L I N L e ta l I n d u c i b l e m i c r o-R N A-155f e e d b a c k p r o m o t e st y p eII F N s i g n a l i n g i n a n t i v i r a l i n n a t ei mm u n i t y b y t a r g e t i n g s u p p r e s s o ro f c y t o k i n e s i g n a l i n g1J J I mm u n o l20101856226-623327WA N G W L I U Z S U J e ta l M a c r o p h a g e m i c r o-R N A-155p r o m o t e s l i p o p o l y s a c c h a r i d e-i n d u c e d a c u t e l u n g i n j u r y i n m i c ea n dr a t s J A m JP h y s i o lL u n g C e l lM o l P h y s i o l20163112494-50628L I U TF Y O Z AB K G A Z Z A R M E e t a l N A D +-d e p e n d e n tS I R T1d e a c e t y l a s e p a r t i c i p a t e si ne p i g e-n e t i cr e p r o g r a mm i n g d u r i n g e n d o t o x i nt o l e r a n c e J T h e J o u r n a l o fB i o l o g i c a lC h e m i s t r y201128611 9856-986429T U E R D I B Z U OL MA Y e t a l D o w n r e g u l a t i o no f m i R-155a t t e n u a t e s s e p s i s-i n d u c e da c u t e l u n g i n j u r y b y t a r g e t i n g S I R T1J I n t e r n a t i o n a lJ o u r n a lo fC l i n i c a l a n dE x p e r i m e n t a l P a t h o l o g y20181194483-4492 30B A UMG A R TDC D I G N A S SA U I n t e s t i n a l b a r r i e r f u n c t i o n J C u r rO p i nC l i nN u t rM e t a bC a r e200256685-69431O T A N IS C O O P E R S M I T H C M G u t i n t e g r i t y i n c r i t i c a l i l l n e s s J J I n t e n s i v eC a r e201920717 32C A O YY WA N GZ WA N GZH e t a l I n h i b i t i o n o f m i R-155a l l e v i a t e s s e p s i s-i n d u c e d i n f l a mm a t i o na n d i n-t e s t i n a lb a r r i e rd y s f u n c t i o nb y i n a c t i v a t i n g N F-κBs i g-n a l i n g J I n t I mm u n o p h a r m a c o l202190107218 33L I U Y Z HU F L IH e t a l M i R-155c o n t r i b u t e s t o i n t e s t i n a l b a r r i e r d y s f u n c t i o n i nD S S-i n d u c e dm i c e c o l i-t i s v i a t a r g e t i n g H I F-1αT F F-3a x i s J A g i n g A l b a-n y N Y2020121414966-1497734高进殷娟沈文娟等山奈酚对脓毒症大鼠肝损伤的影响及其与H I F-IαH k z通路的关系J中国急救医学2023434279-28435Y A N GT WA N GLU S U NR e t a l H y d r o g e n-r i c h m e d i u m a m e l i o r a t e sl i p o p o l y s a c c h a r i d e-i n d u c e db a r r i e r d y s f u n c t i o nv i a R h o a-M d i a1s i g n a l i n g i n C a c o-2c e l l sJ S h o c k2016452228-23736P A N P B A IL HU A X e ta l M i R-155r e g u l a t e sc l a ud i n1e x p r e s s i o ni nh u m a n s w i t hi n t e s t i n a lm u c o s ad y s f u n c t i o na f te rb r a i ni n j u r y J T r a n s p l a n t P r o c 201951103474-348037R E N Y C U IY X I O N G X e t a l I n h i b i t i o no fm i-c r o R N A-155a l l e v i a t e sl i p o p o l y s a c c h a r i d e-i n d u c e dk i d-n e y i n j u r y i nm i c e J I n t JC l i nE x p P a t h o l20171099362-937138Z A R B O C K A G OM E Z H K E L L UM J A S e p s i s-i n d u c e d a c u t e k i d n e y i n j u r y r e v i s i t e d p a t h o p h y s i o l o g y p r e v e n t i o na n df u t u r et h e r a p i e s J C u r r O p i n C r i t C a r e2014206588-59539K HA L I D U B OW E N T F R A S E RDJ e t a l A c u t e k i d n e y i n j u r y a p a r a d i g mf o rm i R N Ar e g u l a t i o no f t h e c e l l c y c l e J B i o c h e m S o cT r a n s20144241219-122340D EB O R S T MH HA J HO S S E I N Y R T AM E Z H e t a l A c t i v e v i t a m i nDt r e a t m e n t f o r r e d u c t i o n o f r e s i d u a l p r o t e i n u r i a a s y s t e m a t i c r e v i e w J JA m S o cN e p h-r o l201324111863-187141D EZ E E UW D A G A RWA LR AM D A H L M e t a l S e l e c t i v e v i t a m i nDr e c e p t o r a c t i v a t i o nw i t h p a r i c a l c i t o l f o r r e d u c t i o n o f a l b u m i n u r i a i n p a t i e n t sw i t h t y p e2d i a-b e t e s V I T A L s t u d y ar a n d o m i s e dc o n t r o l l e dt r i a lJ L a n c e t201037697521543-155142D UJ J I A N GS HUZ e t a l V i t a m i nDr e c e p t o r a c-t i v a t i o n p r o t e c t s a g a i n s t l i p o p o l y s a c c h a r i d e-i n d u c e d a c u t ek i d n e y i n j u r y t h r o u g hs u p p r e s s i o no f t u b u l a r c e l l a p o p t o s i s J A mJP h y s i o lR e n a lP h y s i o l201931651068-107743Y A N G H Z HA N GZ S e p s i s-i n d u c e dm y o c a r d i a l d y s-f u n c t i o n t h e r o l e o fm i t o c h o n d r i a l d y s f u n c t i o n J I n-f l a mm R e s2021704379-38744S U NLJ Q I A O W X I A O YJ e t a l N a r i n g i nm i t i-g a t e sm y o c a r d i a l s t r a i na n dt h e i n f l a mm a t o r y r e s p o n s e i n s e p s i s-i n d u c e dm y o c a r d i a l d y s f u n c t i o n t h r o u g h r e g u-l a t i o no f P I3K A K T N F-κB p a t h w a y J I n t I mm u n o-p h a r m a c o l20197510578245V A N WY N G E N EL V A N D E WA L L EJ L I B E R TC R e p r o g r a mm i n g o f b a s i cm e t a b o l i c p a t h w a y s i n m i c r o-b i a l s e p s i s t h e r a p e u t i c t a r g e t s a t l a s t J E M B O M o l M e d2018108e871246S A C K M N E m e r g i n g c h a r a c t e r i z a t i o no f t h er o l eo f S I R T3-m e d i a t e d m i t o c h o n d r i a l p r o t e i nd e a c e t y l a t i o n i n t h eh e a r t J A mJP h y s i o lH e a r tC i r cP h y s i o l2011 30162191-219747WA N G H B E IY HU A N G P e ta l I n h i b i t i o no f m i R-155p r o t e c t s a g a i n s tL P S-i n d u c e d c a r d i a c d y s f u n c-t i o na n d a p o p t o s i si n m i c e J M o l T h e r N u c l e i c A c i d s2016510e37448L I US C H E NJ S H I J e t a l M1-l i k em a c r o p h a g e-d e r i v e d e x o s o m e s s u p p r e s s a n g i o g e n e s i s a n d e x a c e r b a t e c a r d i a c d y s f u n c t i o n i nam y o c a r d i a l i n f a r c t i o n m i c r o e n-v i r o n m e n t J B a s i cR e sC a r d i o l2020115222下转第113页㊃98㊃河南大学学报(医学版),2023,42(2)Copyright©博看网. All Rights Reserved.c o l o nc a n c e r J F r o n t i e r s i nI mm u n o l o g y202213 957865d o i103389f i mm a202295786540杨明邓婷婷王雨洁等Y B X3通过MA P K途径促进鼻咽癌增殖和生长的实验研究J实用癌症杂志2022372175-18041Q I N H L WA N G XJ Y A N G B X e t a l N o t o g i n-s e n o s i d e R1a t t e n u a t e s b r e a s tc a n c e r p r o g r e s s i o n b y t a r g e t i n g C C N D2a n dY B X3J C h i n M e dJ E n g l 20211345546-55442HU JQ HA N C Y Z HO N GJY e ta l D y n a m i c n e t w o r kb i o m a r k e ro f p r e-e x h a u s t e dC D8+Tc e l l s c o n t r i b u t e dt o T c e l le x h a u s t i o ni nc o l o r e c t a lc a n c e rJ F r o n t I mm u n o l20211269114243G A OXL Z HA O N D O N GLY e t a l An o v e l l i p i d p r o g n o s t i c s i g n a t u r eo fA D C Y2L I P E a n d O L R1i n h e a da n dn e c ks q u a m o u s c e l l c a r c i n o m a J F r o n tO n-c o l20211173599344Y A N GJF X U J G A O Q e ta l I d e n t i f i c a t i o no f a d e n y l a t e c y c l a s e2m e t h y l a t i o n i nb l a d d e r c a n c e rw i t h i m p l i c a t i o n s f o r p r o g n o s i sa n d i mm u n o s u p p r e s s i v em i-c r o e n v i r o n m e n t J F r o n tO n c o l2022121025195 45桂慧慧刘霞基于多数据库分析MY H10在肾透明细胞癌中的表达与意义J医学信息20223510 20-2546刘波姚雪婷路卯等基于公共数据库分析C L D N10与MY H10在肾透明细胞癌中表达及预后的意义J实用癌症杂志2021362231-23547Z HA N G X H L IT Y HA N Y N e t a l m i R-125b p r o m o t e sc o l o r e c t a lc a n c e r m i g r a t i o na n di n v a s i o nb y d u a l-t a r g e t i n g C F T Ra n dC G N J C a n c e r s B a s e l 20211322571048S U Z U K I M S A I T O-A D A C H I M A R A IY e ta l E74-l i k e f a c t o r3i s a k e y r e g u l a t o r o f e p i t h e l i a l i n t e g r i-t y a n di mm u n er e s p o n s e g e n e si nb i l i a r y t r a c tc a n c e r J C a n c e rR e s2021812489-50049H I R A N O T I L-6i n i n f l a mm a t i o n a u t o i mm u n i t y a n d c a n c e r J I n t I mm u n o l2021333127-148责任编辑:刘红林(上接第89页)[49]A HM E DU,K HA L I QS,A HMA D H U,e t a l.P a t h o-g e n e s i s o f d i a b e t i cc a r d i o m y o p a t h y a n dr o l eo fm i R N A[J].C r i tR e vE u k a r y o tG e n eE x p r,2021,31(1):79-92 [50]H EY,WA N GG,L I C,e t a l.T h e p r o t e c t i v e e f f e c t s o f p h o s p h o d i e s t e r a s e-5i n h i b i t o r,s i l d e n a f i l o n p o s t-r e s u s-c i t a t i o n c a r d i a c d y s f u n c t i o n o f c a r d i a c a r r e s t:b y r e g u l a-t i n g t h em i R-155-5p a n dm i R-145-5p[J].S c a n d JT r a u-m aR e s u s cE m e r g M e d,2021,29(1):2[51]N A P O L IC,B E N I N C A S A G,D O N A T E L L IF,e t a l.P r e c i s i o n m e d i c i n e i nd i s t i n c t h e a r t f a i l u r e p h e n o t y p e s: f o c u s o nc l i n i c a le p i g e n e t i c s[J].A m H e a r tJ,2020, 224:113-128[52]Y a n M,Y uY,M a oX,e t a l.H y d r o g e n g a s i n h a l a t i o na t t e n u a t e s s e p s i s-i n d u c e d l i v e r i n j u r y i naF U N D C1-d e-p e n d e n tm a n n e r[J].I n t I mm u n o p h a r m a c o l,2019,71: 61-67[53]蒋华,周江,戴林峰,鲁俊,陈明祺.危重病患者肝损伤的研究进展[J].东南大学学报(医学版),2015,34(06): 1041-1044[54]WA N GZH,L I A N GYB,T A N G H,e t a l.E x p r e s s i o na n d e f f e c t s o fm i c r o R N A-155i n t h e l i v e r s o f s e p t i cm i c e[J].Z h o n g g u o W e i Z h o n g B i n g J i J i uY iX u e,2012,24(3):154-157.[55]Y A N GZB,C H E N W W,C H E N HP,e t a l.M i R-155a g g r a v a t e ds e p t i c l i v e r i n j u r yb y o x i d a t i v e s t r e s s-m e d i a-t e dE Rs t r e s sa n d m i t oc h o nd r i a l d y s f u n c t i o nv i a t a r g e-t i n g N r f-2[J].E x p M o l P a t h o l,2018,105(3):387-394 [56]L U X,Z HA N G Y,C U IY,e t a l.I n h i b i t i o no fm i c r o-R N A155r e l i e v e s s e p s i s i n d u c e d l i v e r i n j u r y t h r o u g h i n-a c t i v a t i n g t h e J A K/S T A T p a t h w a y[J].M o lM e dR e p, 2015,12(4):6013-6018责任编辑:段金卯㊃311㊃河南大学学报(医学版),2023,42(2)Copyright©博看网. All Rights Reserved.。

脓毒症大鼠脂联素表达水平变化的实验研究

・
论著・
脓毒症大鼠脂联素表达水平变化的实验研究
李莎鲍红光
【摘要】目的探讨脓毒症大鼠脂联素的表达水平变化规律及其与肿瘤坏死因子一【ＴＦｄ）０（Ｎ —
的关系。方法采用经尾静脉注射内毒素（Ｐ）ＬＳ方法制备大鼠脓毒症模型。４８只健康Ｗｉａ雄性大ｓｒｔ
鼠随机分为正常对照组（Ｃ组，ｎ＝２）４和脓毒血症组（ＰＬＳ组，２）分别于注射ＬＳ或生理盐水后ｎ＝４。Ｐ
４ｈ和２，用心脏放血法处死各组大鼠。留取附睾周围脂肪组织，逆转录一４ｈ采用聚合酶链式反应（ＴＲ—
照组相比无统计学差异；４ｈ时，达显著降低（００）血浆脂联素水平于注射ＬＳ后４ｈ开始２表Ｐ＜．５。Ｐ
下降（００）直至２（００）Ｐ＜．５，４ｈ时Ｐ＜．５。结论
过程。
脓毒症大鼠血浆脂联素水平和附睾脂肪组织中脂
ｒｎｏｌｉｄｄｉｏｔｏｇｕｓｒｓｅｔｅｈｏｍｌｃｎｏｎ＝２）ｇｏｐａｄｔｅＬＳ（ａｄｍｙｄｖｅｔｒｐ，ｅｐｃｉｌｔｅｎｒａｏｔｌ（ｉｎｗｏｖｙｒ４ｒｕ，ｎｈＰｎ＝２４）
ｒｕ．ｈｕｓａｄ２ｏｒｆｅｄｎｓａｉｆＬＳｏｇｏｐＡｔｏｒｎ４ｈｕｓａｔｒａｍｉｉｒｔｎｏＰｒＮＳ，ａｓｗｅｅｓｃｆｅｙｈａｔｈｅｏｏ．４ｔｏｒｔｒａｒｉｄｂｅｒｐｌｂｔｍｙｉｃＥｉｉｙｌａｉｏｅｔｓｕｅｅｓｍｐｅ．ｈｘｒｓｉｎｏｄｐｎｃｉｐｄｄｍａｄｐｓｉｓｅｗｒａｌｄＴｅｅｐｅｓｆａｉｏｅｔｍＲＮａｄＴ一【ｍＲＮＡｉｈｏｎＡｎＮＦ０ｎｔｅ

spesis

脓毒症动物模型的研究进展[摘要]脓毒症是由感染所致的破坏性的全身炎症反应综合征。

脓毒症作为危重症患者的一种常见病，其发病率持续上升，并且能发展为血流动力学不稳定、肺功能不全、肾功能不全等多脏器功能衰竭。

死亡率各文献报道不同，大致在30-70%的范围内。

脓毒症的发病机制极其复杂，使临床治疗非常困难。

动物模型是在动物身上模拟人类疾病，加速对发病机制及临床有效治疗手段的研究。

本文将对常见的脓毒症动物模型及其结果在临床中的应用进行综述。

[关键词]脓毒症；动物模型；治疗[Abstract]Sepsis is a syndrome characterized by a disrupted inflammatory response to infection. As a common disease in critically ill patients，the incidence of sepsis is rising constantly, and can develop into hemodynamic unstable, lung dysfunction, and renal function deterioration and so on. The mortality rings from 28-47% for different reports. The pathogenesis of sepsis is of great complexity that makes the clinical therapeutics of sepsis very difficult. Animal models mimic human disease to hasten the development of clinically useful therapeutics. However, animal models of sepsis at present can just create reproducible systems for studying sepsis pathogenesis and preliminary testing of potential therapeutic agents.This review summarizes the common animal sepsis models and highlights how results of recent human clinical trials might affect their use.[Key words] sepsis; animal model; therapeutics脓毒症(sepsis)是由感染所致的破坏性的全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）[1-4]。

《丙泊酚对脓毒症大鼠肝损伤保护作用的实验研究》范文

《丙泊酚对脓毒症大鼠肝损伤保护作用的实验研究》篇一一、引言脓毒症是一种由感染引起的全身性炎症反应综合征，常常导致多器官功能衰竭，其中肝脏损伤是常见的并发症之一。

目前，对于脓毒症的治疗仍以药物治疗为主，而丙泊酚作为一种常用的麻醉药物，近年来在临床上的应用逐渐增多。

本研究旨在探讨丙泊酚对脓毒症大鼠肝损伤的保护作用，以期为临床治疗提供新的思路和方法。

二、材料与方法1. 材料实验动物：健康成年SD大鼠，体重约200-250g。

药品与试剂：丙泊酚、脓毒症造模所需细菌、血清生化指标检测试剂等。

仪器设备：手术器械、离心机、酶标仪、显微镜等。

2. 方法（1）动物分组与造模：将大鼠随机分为正常对照组、脓毒症模型组、丙泊酚治疗组。

通过细菌感染法建立脓毒症大鼠模型。

（2）药物处理：丙泊酚治疗组在造模后给予丙泊酚治疗，正常对照组和脓毒症模型组给予等量溶剂处理。

（3）指标检测：检测各组大鼠的肝功能指标（如ALT、AST等）、炎症因子水平、组织形态学变化等。

（4）统计分析：采用SPSS软件进行数据分析，比较各组间的差异。

三、实验结果1. 肝功能指标变化实验结果显示，脓毒症模型组大鼠的ALT、AST等肝功能指标明显升高，而丙泊酚治疗组的大鼠肝功能指标较模型组有所降低，接近正常对照组水平。

2. 炎症因子水平变化脓毒症大鼠体内炎症因子水平升高，而丙泊酚治疗可以显著降低炎症因子水平，减轻炎症反应。

3. 组织形态学变化显微镜下观察发现，脓毒症模型组大鼠肝脏组织损伤严重，而丙泊酚治疗组的大鼠肝脏组织损伤程度较轻，与正常对照组相似。

四、讨论本实验研究表明，丙泊酚对脓毒症大鼠肝损伤具有保护作用。

这可能与丙泊酚的抗炎、抗氧化、稳定细胞膜等作用有关。

丙泊酚通过抑制炎症反应、减轻氧化应激、保护肝细胞膜的完整性等机制，从而减轻肝脏损伤。

此外，丙泊酚还可能通过调节免疫功能、改善微循环等途径，进一步发挥其保护作用。

五、结论本实验研究结果表明，丙泊酚对脓毒症大鼠肝损伤具有明显的保护作用。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

脓毒症大鼠肝组织基因表达变化的研究摘要】目的应用基因芯片技术初步分析脓毒症大鼠肝脏组织细胞基因表达谱的变化。

方法健康Wistar 大鼠40 只，随机分为模型组和假手术组，每组各20 只。

通过盲肠结扎穿孔术（CLP）制备大鼠脓毒症模型，应用含有22523 个大鼠基因cDNA 克隆的表达谱基因芯片进行检测，筛选差异表达基因，用计算机软件分析脓毒症大鼠肝脏组织术后24 小时的基因表达变化。

结果与假手术组比较，共筛选出差异表达基因共285 条，占基因芯片总点数的1.26%，其中已知基因180 条，93 条基因表达上调，87 条基因表达下调。

涉及到一系列与细胞生长调节相关基因，物质能量代谢相关基因，信号转导、炎症、应激反应相关基因，转录调控及蛋白质翻译、修饰、加工、降解相关基因等相关的基因异常表达。

结论脓毒症导致的多脏器功能不全（MODS）是多种基因作用的结果，采用基因芯片技术全面揭示脓毒症肝脏基因表达的模式，有利于发现新的研究目标和治疗途径。

【关键词】脓毒症肝基因表达基因芯片【中图分类号】R394 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）08-0053-03脓毒症(Sepsis) 及其所导致的多脏器功能不全（MODS），在临床上发病率高，病死率高，临床救治棘手，源于其发病机制非常复杂。

目前多数认为是过度的炎症反应与代偿性抗炎反应失衡，出现免疫系统功能紊乱的病理生理过程，并与机体多系统、多器官病理生理改变密切相关，涉及感染、炎症、免疫、凝血及组织损害等一系列基本问题[1]。

国内外已有学者运用基因芯片技术对经C L P 或腹腔注射脂多糖制备小鼠脓毒症模型的多个脏器组织的基因差异表达分别进行研究，其结果初步显示了这些组织中部分基因表达的特异性改变，但并未对脓毒症机制和治疗的研究提出新的看法。

本实验再次运用基因芯片技术研究分析脓毒症时肝脏相对应的基因表达谱变化，旨在进一步探讨脓毒症的研究治疗新途径。

1 材料和方法1.1 实验动物及模型制备雄性健康Wi s t a r 大鼠40 只，体重180 － 220g，购自上海斯莱克实验动物有限公司。

实验前在清洁级环境下饲养2 周，常规饲料喂食、正常饮水。

按随机数字表法分组：假手术组（n ＝ 20 只）、模型组（n ＝ 20 只）。

模型组：采用盲肠结扎穿孔术（CLP）方法建立大鼠肠源性脓毒症模型。

实验前大鼠禁食过夜，自由饮水，称体重后以氯胺酮（100mg/ kg）腹腔麻醉固定，消毒铺巾，沿中下腹正中线切开2cm 开腹提出盲肠，7 号丝线距盲肠根部1c m 处血管弓内结扎盲肠；用9 号无菌针头刺穿盲肠3次，使肠内容物流出，避免伤及肠系膜血管，然后将盲肠放回腹腔，缝合腹部切口。

假手术组：不结扎和穿刺盲肠外，其余操作同CLP组。

两组术毕皮下注射平衡液5ml/kg以补充术中丢失的体液并抗休克治疗，术后正常饮食、自由饮水。

1.2 肝组织的留取和处理两组大鼠（n＝40只）24h断颈活杀迅速开腹摘取肝脏，置入液氮罐中骤冷保存，温度－70℃，备用。

1.3 基因芯片杂交及检测分析用一步法总RNA提取试剂（Trizol）抽提液氮中肝组织总RNA。

反转录并标记探针，与RatRef-12大鼠表达谱基因芯片(由联合基因技术有限公司制作，每个芯片含有22523个大鼠基因cDNA克隆)杂交过夜，洗片、晾干后扫描，采用ScanArrav 4000型激光共聚焦扫描仪以两种不同波长扫描芯片，应用Gene Pix Pro 3.0图像处理软件分析Cy3和Cy5两种荧光信号的强度和比值，以两次芯片两种荧光信号强度结果比值（Ratio值）均>2.0或均<0.5的基因为差异表达基因，前者示模型组的基因表达显著上调，后者示模型组的基因表达显著下调 [2]。

通过美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库查询基因功能并加以分类。

2 结果肝脏基因表达谱差异分析：在模型组中共筛选出差异表达基因共285条，占基因芯片总点数的1.26%，其中已知基因180条，93条基因表达上调，87条基因表达下调；未知基因105条，58条基因表达上调，47条基因表达下调。

2．2．1脓毒症组肝脏组织出现表达上调的部分已知差异基因(见表1)：表1脓毒症组肝组织出现表达上调的部分已知差异基因2.2 脓毒症组肝脏组织出现表达下调的部分已知差异基因（见表2）：表 2 脓毒症组肝脏组织出现表达下调的部分已知差异基因3.讨论肝脏是营养物质、炎症介质、激素及内毒素的主要代谢器官。

在脓毒血症的发生发展中，肝功能障碍往往在肺、肾功能衰竭发生后出现，可以加速肺脏和肾脏等器官的损伤和功能障碍，从而影响整个机体的新陈代谢，增加脓毒症的救治难度和病死率。

Roule和Kettlewell发现，脓毒症患者肝功能异常表现为：白蛋白和胆固醇的降低，以及碱性磷酸酶和血清谷草转氨酶的升高 [3]。

死于脓毒血症的患者，其肝脏组织学改变为：肝小叶中带和外带坏死，有急性炎症反应和胆汁淤积。

肝细胞坏死似乎成了脓毒血症的特征之一。

本实验对 CLP脓毒症模型大鼠晚期(24小时)肝脏组织中的差异表达基因按其所编码的蛋白质功能予以聚类分析，初步显示了脓毒症是肝脏组织中部分基因表达的特征性改变：①各种基本营养物质代谢及生物转化酶类相关基因表达明显异常： a. Pdp2 (调节糖有氧氧化代谢的关键酶)、UgP2（调节糖原合成的催化酶）等基因的表达量发生了下调；Sds、Got1（糖异生途径中的丙酮酸转运）等基因表达上调，说明机体处于糖异生旺盛状态，葡萄糖有氧氧化途径受限，糖氧化功能减少，无氧酵解供能使机体能量代谢处于衰竭状态。

b. Bhmt（蛋氨酸循环代谢）、Oat（鸟氨酸代谢）、Hspa14(热休克蛋白)、MVd（胆固醇合成限速酶）、Plala（甘油磷脂降解途径）、Fabp2（肠道脂肪酸转运）、Lpl（脂肪分解代谢）等基因表达均上调；Acbd6、Slc22a5（脂酸氧化关键酶和转运载体）、Fabp7、Hacl1（脂肪酸合成代谢酶）等基因表达均下调，提示：机体处于蛋白质代谢旺盛状态，急性期蛋白合成增加。

脂肪动员状态，脂肪分解增加，脂肪的氧化供能尚未受到充分抑制。

c . E p h x1、U g t 家族、A ld h l a1、G l y a t、G s t m3、A k r7a3、CyP450 家族等基因，以及Gclc、Gclm（谷胱甘肽生物合成）等基因均表达下调，提示肝脏的氧化还原及生物转化功能严重受损，药物、毒物及内源性物质（如激素、神经递质、胺类）等非营养性物质的代谢障碍。

本实验以上基因表达情况，说明全身炎症反应使机体处于一种严重的物质能量代谢紊乱状态，物质合成及生物转化的抑制和高分解代谢是其主要特点，这种高代谢的净效应将导致机体细胞群进行性丢失，并最终导致MODS。

肝细胞根据其结构和功能的异质性分为三个带。

其中，Ⅲ带（小叶中心带）是接近中央静脉的肝细胞，其营养条件最差，主要负责糖原生成、糖酵解、脂类生成、氨解毒、生物转化作用等。

该实验中，与这些功能相关的基因表达均明显下调，提示肝小叶中心带肝细胞的生理功能严重受损，这与病理标本的光镜下表现一致。

脓毒症肝损害的机理目前尚不完全清楚，可能的机理有：1、脓毒症时高排低阻的循环特点使肝脏供血减少，局部的高代谢，导致氧债增加，肝小叶中央或局部出现缺血[4、5]；2. 细胞因子或介质介导及氧化剂可能是导致肝损害的另一原因。

3、肝脏不仅因原发病因素受损，而且受损的肝脏本身可能参与维持这种损害的存在，如肝Kupffer 细胞所释放的细胞因子可能发挥这种作用[6]。

对于目前的认识，进行快速充分的复苏，保持内脏高血流量仍是预防肝细胞缺血坏死的最好办法，进一步研究肝小叶中心带细胞坏死的机制，可能为脓毒症的治疗提供新的靶点。

② 调控转录相关的基因有12 个表达上调，6 个表达下调；信号转导相关基因有13 个上调，11 个下调。

显示脓毒症时肝细胞的D N A 转录与信号转导处于紊乱状态。

其中，类固醇激素受体相关基因N r1i3 表达下调，可能与脓毒症时核因子-κB(NF-κB) 的过度表达有关，可导致脓毒症时的类固醇激素抵抗。

S O C S 家族蛋白是一类可被多种细胞因子诱导产生，反过来又能以负反馈方式对信号转导途径进行抑制调节的蛋白分子。

虽然SOCS 蛋白被首先证明是JAK-STAT 路径的抑制剂，但其家族中也有参与提升信号蛋白退化的细胞信号，并且与其他许多信号转导因子都有联系。

在脓毒症的免疫反应中，S O C S 蛋白在T 细胞分化为T 辅助细胞分型时有着重要的作用[7]，它还可通过调节B C L -2 家族成员来调节细胞凋亡[8]。

因此，Socs2 表达下调可导致炎症因子的量产生与释放，进一步促进了脓毒症的发展。

③ 与炎症反应相关的基因中，有7 个促炎症相关基因表达上调，如： Fabp4、Cxcl1、Cxcl9、A2m、Dusp1、Il18bp、Nfil3，2 个表达下调, 如： Kikb1、Sectmla；抗炎症相关基因表达上调5 个，如：S100a8、Btg2、Danjb4、Sgk、Procr，2 个表达下调，如：Hspb1、Il15。

表明脓毒症时机体同时存在炎症反应和抗炎反应。

临床中有一部分脓毒症患者致炎因素强于抗炎因素，表现为全身炎症反应综合征(SIRS)；也有相当一部分患者抗炎因素强于致炎因素，表现为代偿性抗炎反应综合征（C A R S）和免疫抑制[9]，但实际上在I C U 中更常见的是另一种不协调的促炎症反应和抗炎症反应同时存在的混合拮抗反应状态（MA R S）[10]。

脓毒症是由致炎、抗炎细胞因子和细胞因子拮抗物间复杂的相互作用而发生发展的。

就目前认识的水平来看，促炎症反应和抗炎症反应因素在数量和时间上的关系将决定脓毒症患者的免疫状态，任何一方的过度反应都对患者造成不良影响，特别由于MA R S 的存在，使获得一种适当的协调关系成为艰难的治疗挑战，故而任何试图去封闭、抑制或中和炎症及其调节过程的单一因素，势必矫枉过正导致新的炎症紊乱，如果能更好的了解促炎反应和抗炎反应之间的协调或失调的关系，可能寻找到脓毒症合并MODS 的有效治疗方法。

④ 该实验中发现细胞凋亡相关基因上调5 个包括：D d i t4、Ho mx1、Lcn2、Sgk、Tnfrsf12a，下调5 个包括：Aldhla1、Dnase1l3、O s g i n l、R n d3、T n f s f10；抗凋亡相关基因上调7 个包括：I g f b p1、Ntf3、Pref1、Timp1、Tspan31、S100a8、Myc，下调4 个包括：Hs pb1、Il15、Prlr、Socs2。

表明脓毒症时肝脏细胞的生长调控处于紊乱状态。