茶树芽叶花色苷含量测定方法的研究
ph示差法测花色苷原理
ph示差法测花色苷原理花色苷，听名字就感觉高大上，是吧？它们就是植物中的一种天然色素，通常藏在水果和花朵里，给我们带来那些迷人的色彩。
说到测量这些花色苷，大家听过“pH示差法”吗？这可是一种挺有意思的方法，像个小魔法一样，能让我们了解这些色素的秘密。
今天就来聊聊这个方法，轻松点，咱们不用专业术语，像聊天一样。
先来点背景知识。
花色苷其实是种有趣的东西，主要存在于植物中，负责色彩的传递。
你看到那些鲜艳的蓝莓、红葡萄，这些颜色可都是它们的功劳。
好吧，别光想着吃的，咱们得说说怎么测它们。
pH示差法可真是个神奇的工具，简单又有效。
它依靠植物色素对酸碱环境的反应，来判断花色苷的含量。
听起来像在做化学实验，但其实就像是在调饮料一样，酸酸甜甜的。
这个方法怎么操作呢？想象一下，你拿着一杯饮料，慢慢加入柠檬汁，颜色会变化，对吧？花色苷也是一样，pH值不同，它们的颜色就会出现大变脸。
比如在酸性环境下，颜色可能偏红；而在碱性环境下，颜色可能变成蓝色，甚至绿色。
是不是很神奇？就像小丑变魔术，令人目不暇接。
科学家们就利用这个变化来测量花色苷的含量，简单又直接。
使用这个方法，咱们需要一些仪器和试剂，像酸碱指示剂这些小家伙。
没啥复杂的，只要把样品调和后加点指示剂，就能看到颜色变化。
然后，再用比较的方法，把结果和标准样本对比，便能得出结果。
其实整个过程就像在玩颜色游戏，轻松又有趣。
只不过，这个游戏可以帮助我们了解植物的营养成分，对农业、药学都有很大的帮助。
很多人会问，为什么选择pH示差法呢？嘿，答案简单。
这个方法不需要高深的仪器，普通的实验室就能搞定。
结果精准，误差小。
它能快速出结果，像快餐一样，省时省力。
想想看，咱们做实验时，等个几天的感觉，真是让人抓狂。
用pH示差法，立马就能看到颜色变化，心里乐开了花。
大家可能想问，这个方法有没有局限性呢？当然有！就像一把双刃剑，既有优点，也有不足。
比如，对于某些复杂的植物样品，可能会出现干扰，导致结果不那么准确。
花青苷(花色苷)种类、提取及检测
花青苷种类、提取及检测一.种类花色素均具有类黄酮的基本结构，由两个苯环和一个含氧杂环组成的(C6-C3-C6)C15化合物(如图)，根据B环羟基化和甲基化位置和数目的不同而将花色素主要分为六类:天竺葵色素((Pelargonidin)、矢车菊色素((cyanidin)、芍药色素(peonidin)(3＇-甲基矢车菊色素)、飞燕草色素(delphinidin)、矮牵牛色素(petunidin)(3＇,5＇-甲基飞燕草色素)和锦葵色素(malvidin)( 3＇,5＇-二甲基飞燕草色素)。
不同植物中花色素发生糖苷化的位点(C3、C5和C7位等)和数目的差异，及酞化程度的不同使植物中存在着不同的花色素普，其结构复杂，但都以这六种花色素为基本结构(Grotewold，2006)。
二.提取国内外学者对花青苷的提取做了大量研究，提取目的及目标花青苷不同，提取方法略有差异。
花青苷易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶液，花青苷的稳定性受酶、温度、氧气、光、pH值、金属离子等理化性质的影响，在中性和碱性条件下不稳定。
提取过程常采用酸性溶液，酸能够破坏植物细胞膜并溶解水溶性色素，甲醇溶液提取效率高于乙醇及水溶液。
花青苷一般用于食品着色，考虑到甲醇的不安全因素，一般选用体积分数为1%的乙醇溶液。
采用盐酸酸化可保持提取液pH值较低，阻止无酰基花青苷的降解。
随着盐酸被浓缩，pH 值升高，导致花青苷的降解。
为获得更接近于天然状态的花青苷，采用弱有机酸或中性溶剂做初步提取，弱有机酸多用甲酸、乙酸、丙酸、柠檬酸和酒石酸，中性溶剂一般采用丙酮作提取剂。
粗提后的花青苷提取液浓度很低，浓缩时一般不超过40℃，时间也不宜太长。
1.2.花青苷含量的测定：用0.1%的盐酸甲醇浸提叶片2 h后,测657nm、530nm处的吸光度。
3.4.5.6.7.8.9.三.检测紫外—可见光谱是花青苷结构鉴定的经典方法，其鉴定方法为：①花青苷有2个最大吸收波长,500~540nm附近及27nm附近，据此可判定是否为花青苷色素；②若B环有邻位酚羟基，则向体积分数0.01%盐酸-甲醇溶液中滴加3~5 滴AlCl3，甲醇或乙醇溶液时会出现蓝移；③糖苷位置可据花青苷吸光度比值A440/A max判定；④在波长300~330nm间有吸收峰，表明存在酰基；⑤若在波长440n处有肩峰，则5号位羟基没被取代；⑥若在紫外光下有荧光，表明在5号位有取代基。
食品中花色苷物质的提取与评价分析方法研究
食品中花色苷物质的提取与评价分析方法研究食品是人类生活中不可或缺的重要组成部分，而食品的质量与营养价值与我们的健康息息相关。
其中，花色苷作为一类重要的生物活性物质，在食品中的含量和质量评价上具有重要意义。
本文将探讨食品中花色苷物质的提取与评价分析方法的研究进展。
首先，花色苷是一类在植物中广泛存在的化合物，其具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种生物活性。
因此，研究食品中花色苷的含量和活性对于评估食品的营养价值和功能性具有重要意义。
目前，常用的花色苷提取方法主要包括传统浸提法、超声波浸提法、微波辅助浸提法等。
这些方法均能有效提取食品中的花色苷物质，但其提取效率和稳定性仍然是需要改进的方面。
其次，针对花色苷物质的评价分析方法也日益多样化。
最常见的评价方法是高效液相色谱法（HPLC），该方法通过对待测样品进行分离和检测，能够准确测定花色苷的含量，并且具有灵敏度高、分辨率好等优点。
此外，近年来还涌现出一些新的评价方法，如基于荧光、红外光谱等技术的分析方法。
这些新方法能够提高测定效率，减少样品前处理步骤，并且能够对多个成分进行同时测定，从而更好地满足食品分析的需求。
另外，花色苷的评价分析方法也面临一些挑战和问题。
首先，不同食品样品中花色苷的组成和含量可能存在较大差异，因此，开发适用于不同食品的标准分析方法是亟待解决的问题。
其次，一些食品中的花色苷物质含量较低，对于灵敏度要求较高的分析方法仍然有待改进。
此外，花色苷物质的结构多样化，导致不同花色苷物质之间的相互转化和互相影响，使得分析方法的选择和分析结果的解释变得更加复杂。
综上所述，食品中花色苷物质的提取与评价分析方法的研究是一个具有挑战性和重要意义的课题。
当前，虽然已经有许多方法被提出和应用于花色苷的提取和评价，但仍然需要进一步完善和改进。
相信随着科学技术的不断发展和进步，我们能够找到更加高效、灵敏和准确的方法，为评估食品的营养价值和功能性提供更有力的支持。
食品科学领域的专家和研究者们将继续努力，推动食品分析方法的创新和改进，为人类提供更加健康和有益的食品。
植物花色苷检测
迪信泰检测平台
植物花色苷检测
花色苷（Anthocyanin）是广泛存在于植物根、茎、叶、果实等器官的细胞液中的黄酮类化合物，由花色素与糖以糖苷键结合而成的，可使植物呈现由红、紫红到兰等不同颜色。
作为一种天然色素，具有抗氧化、抗衰老、抗癌、抑菌、抗病毒及预防心脑血管疾病等多种生物学功能，因此在食品、化妆品、医药领域具有重要的开发利用价值和应用前景。
迪信泰检测平台采用生化法，可高效、精准的检测植物花色苷的含量。
此外，我们还提供其他氧化应激类检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定植物花色苷样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关参数（中英文）。
3. 图片。
4. 原始数据。
5. 植物花色苷含量/活性信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
茶树花的化学成分及开发利用研究进展
黑龙江农业科学２０１２（１）：１３９～１４３Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ茶树花的化学成分及开发利用研究进展崔晓明１，喻云春１，张广成２，葛 衡２（１．贵州省茶叶研究所，贵州贵阳５５０００６；２．信阳市浉河区茶叶办公室，河南信阳４６４０００）摘要：很多研究表明，茶树花含有和茶叶相似的丰富的内含物质，是一种附加价值很高的茶资源。
现就近年来对茶树花在化学成分及开发利用等方面的研究进展进行了较为全面的综述，并对其研究和开发前景进行了展望，以期为今后茶树花资源的研究和开发提供理论参考。
关键词：茶树花；化学成分；开发利用中图分类号：Ｓ５７１．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－２７６７（２０１２）０１－０１３９－０５收稿日期：２０１１－０７－２２基金项目：贵州省农业科学院专项资金资助项目［院２Ｘ（２００７）０２２］第一作者简介：崔晓明（１９６２－），男，贵州省湄潭县人，学士，农艺师，从事茶叶栽培及茶资源研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｉａｎｇｓ８１＠ｙａ－ｈｏｏ．ｃｎ。
茶树［Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ．）Ｏ．Ｋｕｎｔｚｅ］花属完全花，两性，虫媒花，一般由５～９片花瓣组成，花瓣中有２００～３００个雄蕊，雌蕊位于雄蕊群的中央［１］。
茶树花具有增强免疫力、延缓衰老、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抑菌和防癌抗癌等功效［２－７］。
我国茶树花资源丰富，茶区每年可产茶树鲜花２００万～３００万ｔ［８］。
但长期以来，关于茶的研究多局限于芽叶，对花关注较少［９－１０］。
近年来，随着对茶树花的不断研究，发现茶树花与鲜叶的化学成分相似［１１］；而且茶树花粉蛋白质、氨基酸、维生素Ｂ２的含量均较高，脂肪含量低，是一种优质的蛋白质营养源［１２］；充分利用茶树花资源对提高茶树附加价值、促进茶产业的发展具有重要的现实意义。
为此，该文就近年来对茶树花的化学成分及开发利用等方面的研究进展进行了较为全面的综述，以期为今后茶树花资源的研究和开发提供一定的理论参考。
植物花色苷的提取和鉴定研究
１ 花 色 苷 的种 类
花 色苷 是 由花色 素 与糖类 以糖 苷键 结合 而成 的糖 苷化 合物 ， 是 各类 花色 素不 同颜色 的核 心组分 ， 构 成
了植物 中绝 大多 数 品种 的蓝色 、 红色、 紫 色 和黄色 等 ． 自然 界 中 已知 的花 色素 有 ２ ２大类 ＿ ２ ］ ， 在食 品 中常 用
目（ ２ ０１ ０ Ｒ５ ０ Ｏ ２ ４ — ６） ．
通信作者 ： 沈
波（ １ ９ ６ ５ ） ， 男， 教授 ， 博士 ， 主 要 从 事 水 稻 生 理 与 遗 传研 究 ． Ｅ — ｍａ ｉ ｌ ： ｂ ｓ ｈ ｅ ｎ ６ ５ ＠ｈ ｏ ｔ ｍａ ｉ ｌ ． ｃ ｏ ｍ
３ ９ ２
的主要 有天 竺葵 色素 （ ｐ ｅ ｌ ａ ｒ ｇ ｏ ｎ ｉ ｄ ｉ ｎ ， Ｐ ｇ ） 、 芍药色素（ ｐ ｅ ｏ ｎ ｉ ｄ ｉ ｎ ， Ｐ ｎ ） 、 矢 车 菊色 素 （ ｃ ｙ ａ ｎ ｉ ｎ ｄ ｉ ｎ ， Ｃ ｙ ） 、 飞 燕 草 色
素（ ｄ ｅ ｌ ｐ ｈ ｉ ｎ ｉ ｄ ｉ ｎ ， Ｄ ｐ ） 、 锦 葵色 素 （ ｍａ ｌ ｖ ｉ ｄ ｉ ｎ ， Ｍｖ ） 和牵 牛色 素 （ ｐ ｅ ｔ ｕ ｎ ｉ ｄ ｉ ｎ ， Ｐ ｔ ） 等 ６类 ， 在植 物 可 食 用部 分 的 分 布 比例依 次 为 ５ ｏ ％、 １ ２ 、 １ ２ 、 １ ２ 、 ７ 和 ７ ， 尤 以天竺 葵色 素最 高 ． 花色苷 的种类 因植 物 的不 同而有 差异 ， 且不 同植 物 花色 苷 含量 也 不 同． 如黑 莓 仅 含有 几 种 花色 苷 ， 主 要 花 色苷 为矢 车菊 素一 ３ 一 葡萄糖 苷 ， 其次 为矢 车菊 素一 ３ 一 芸香苷， 而 葡萄 则含 几 十种 花色 苷 ， 葡 萄 中花色 苷
花色苷研究——精选推荐
花⾊苷研究花⾊苷的研究状况引⾔花⾊苷⼜称花青素，属酚类化合物中的类黄酮，是构成花瓣、果实等颜⾊的主要⽔溶性⾊素，⾃然界中已知的花⾊素有22⼤类。
⾷品中重要的花⾊素有⽮车菊⾊素、天竺葵⾊素、飞燕草⾊素、芍药⾊素、牵⽜⾊素和锦葵⾊素等6类[1]。
花⾊苷作为⼀种天然⾷⽤⾊素，安全、⽆毒、资源丰富，⽽且具有⼀定的营养和药理作⽤，在⾷品、化妆品和医药领域有着巨⼤应⽤潜⼒[2]。
花⾊苷对⼈体具有许多保健功能如清除体内⾃由基、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化和⾎⼩板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视⼒等。
⽬前花⾊苷作为⼀种天然⾊素，安全、⽆毒，且对⼈体具有许多保健功能，已被应⽤于⾷品、保健品、化妆品、医药等⾏业，随着⼈们崇尚⾃然消费观念的转变，花⾊苷必将得到更加⼴泛的应⽤。
摘要本⽂对花⾊苷的资源分布、结构性质、稳定性研究、提取、定性定量分析⽅法以及发展前景进⾏了综述。
1.花⾊苷的资源分布花⾊苷⼴泛存在于被⼦植物的花、果实、茎、叶、根器官的细胞液中，分布于27 个科，72 个属的植物中。
⼴泛存在于紫⽢薯、葡萄、⾎橙、红球⽢蓝、蓝莓、茄⼦⽪、樱桃、红橙、红莓、草莓、桑葚、⼭楂⽪、紫苏、⿊(红)⽶、牵⽜花等植物的组织中。
2.花⾊苷的结构及性质花⾊苷的结构如右图所⽰，不同的R1、R2代表不同的花⾊苷类型。
⾷品中重要的6中花⾊苷如表1。
表1花⾊苷溶于⽔和⼄醇，不溶于⼄醚、氯仿等有机溶剂，花⾊苷在酸性溶液中存在4种平衡转换如图1：⾃然界中的游离态花⾊苷极其少见，通常常与 1 个或多个葡萄糖（glucose）、⿏李糖（rhamnose）、半乳糖（galactose）、⽊糖（xylose）、阿拉伯糖（arabinose）等通过糖苷键连接形成花⾊苷，3-单糖苷、3-双糖苷、3，5-⼆糖苷和3，7-⼆糖苷是4类最常见的花⾊素配糖形式，其中⽮车菊素-3-葡萄糖苷在⾃然界中分布最⼴[3]。
3.花⾊苷的稳定性研究影响花⾊苷稳定性的因素有很多，pH值、氧⽓、温度、花⾊苷浓度和结构、光、⾦属离⼦、酶，以及其他辅助因素等均能使花⾊苷的颜⾊产⽣变化。
总花色苷含量测定
总花色苷含量测定—分光光度法1、综合国内外资料,主要有以下几种计算吸光值A的方法[1]:(1) 当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含量的影响;此时,计算公式为: A = (Amax - A620) - 0.1(A650 - A620)(2) 含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:a) 直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。
计算公式为: A = Amax直接法吸收光谱测定:用××分光光度计于250 - 800nm 下全波长扫描,得到花色苷在0.1 % 盐酸—80 % 乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大波长下测定各样品的吸光值A 。
b) pH 示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和花色苷具有相同的能量吸收范围。
这类花色苷总量的测定,通常用pH示差法[8] 。
计算公式为: A = (Amax - A700) pH1.0 - (Amax - A700) pH4.5pH 示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λma x下的吸光度在分光光度计的线性范围内;然后制备两个样品稀释液,其中一个用氯化钾缓冲液(0.025M,pH1.0) 稀释,另一个用醋酸钠缓冲液(0.4M,pH4.5) 稀释,将稀释液平衡15min 后,用蒸馏水做空白,分别测定两种样品稀释液在λm ax和700nm处的吸光值A。
2、花色苷总含量的测定[2]：通过波长扫描,确定××花色苷在可见区的最大吸收波长为λmax。
利用花色苷的结构特性,当pH为1.0时在λmax处有最大吸收峰,而当pH 为4.5时,花色苷转变为无色查尔酮形式,在λmax处无吸收峰,用示差法计算溶液中总花色苷含量。
花色苷测定
3.3.1 花色苷含量的测定
（1）缓冲液的制备：
pH1.0缓冲液：使用电子分析天平准确称量1.86g氯化钾，加蒸馏水约980ml，用盐酸和酸度计调至pH1.0，再用蒸馏水定容至1000ml。
pH4.5缓冲液：使用电子分析天平准确称量32.81g无水醋酸钠，加蒸馏水约980ml，用盐酸和酸度计调至pH4.5，再用蒸馏水定容至1000ml。
（2）花色苷含量的测定：
采用pH示差法[33]：用pH1.0、pH4.5的缓冲液，将样液稀释到适当的倍数,放在暗处，平衡15min。
用光路直径为1cm的比色皿在可见分光光度计的510nm 和700nm处，分别测定吸光度，以蒸馏水做空白对照。
按下式计算花色苷的含量。
A=[ ( A510 - A700 ) pH1.0 - ( A510 - A700) pH4.5]
花色苷浓度C ( mg/L) = A×MW×DF×1000 /(ε×l)
两式中：
( A510 - A700 ) pH1.0—加pH1.0缓冲液的样液在510 nm和700 nm波长下的吸光值之差；
( A510 - A700) pH4.5—加pH4.5缓冲液的样液在510 nm和700 nm波长下的吸光值之差；
MW=449.2（矢车菊—3—葡萄糖苷的分子量，mg/mol）；
DF=样液稀释的倍数；
ε=26900（矢车菊—3—葡萄糖苷的摩尔消光系数，mol-1）；
l=比色皿的光路直径，为1cm。
花色苷提取及纯化研究进展
花色苷是花青素在自然界状态下的天然糖基化产物，是存在于许多植物组织中的重要水溶性色素。
它们赋予植物根、茎、叶、花、果实等不同器官紫红、兰、红等色彩。
花色苷属于类黄酮化合物，由于其结构中含有多个酚羟基，因而具有良好的抗氧化功效，能够清除体内自由基、抑制脂质过氧化，同时具有预防肿瘤、抗炎杀菌、调节血糖等功效。
中国是水果生产大国，年产量达2400万吨，其中水果加工占水果产量的38%左右，产生的果渣下脚料近千万吨，果实与果渣中都有着丰富的花色苷资源，且果渣废弃物的高值化利用是当前食品加工开发的热点，因此，利用果渣提取花色苷，不仅可以提高果渣综合利用率，解决工业废料处理问题，减轻环保压力，而且可得到高附加值产品以提高经济效益。
花色苷的高效提取与纯化是实现其工业化应用的前提。
本文介绍了近年来国内外关于花色苷提取技术和纯化方法的主要研究进展，为花色苷类天然色素和功能性食品的提取、制备和工业化应用提供参考和指导。
摘要：花色苷属于黄酮类化合物，广泛存在于各种植物的器官中，它不仅是自然界重要的水溶性色素，还同时具有良好的抗氧化、抗癌、预防疾病等多种生物活性，因而被广泛应用于食品、制药、化妆品等行业。
天然植物花色苷的提取和纯化是花色苷应用的前提。
该文综述了花色苷提取与纯化的最新研究进展，分析比较了不同提取和纯化方法对产品提取率及纯度的影响，为进一步开展植物花色苷研究，实现花色苷的高效提取与高值化利用提供参考。
结论影响浆果及果渣中花色苷提取的因素主要为样品基质特征（如样品的水分活度、植物细胞壁刚性等）以及提取工艺参数（如pH、溶剂、温度、时间等）。
目前，提取方法已经从传统溶剂法发展到了低共熔溶剂提取、超声辅助提取、微波辅助提取、超临界流体提取等新兴技术。
与传统溶剂提取相比，新技术在提取率、能耗、提取时间、保护环境等方面均具有非常明显的优势，但也存在一些不足，比如设备要求高、工艺优化标准高等。
从工业化角度出发，微波与超声辅助提取已有工业应用；超临界流体萃取、高压脉冲电场辅助提取法等因设备成本问题工业化较为困难。
花色苷的检测方法
花色苷的检测方法我前几天又试了个新方法检测花色苷，这次总算成功了，可把我之前折腾的劲儿都补回来了。
我一开始也是瞎摸索。
先尝试了一种比较基础的方法，就是比色法。
这就好比看颜色猜东西一样。
你得先把样品处理好，这步可不能马虎。
就像做菜得把菜洗干净切好才能下锅似的。
要从植物组织里提取出花色苷来，我当时就是直接研磨植物样本，可这么做有点粗糙，有时候提取得不完全，这就是我的一个教训。
提取出来以后要先调pH值，这个很关键，就像调收音机的频道一样，得调到合适的位置，才能有清晰的反应。
但比色法有个问题就是不太精确，容易受其他物质干扰。
后来我又试过高效液相色谱法（HPLC）。
这个可复杂多了。
这个方法就像警察破案一样，一个一个把里面的成分都分离开，然后识别出来。
首先样品的准备就得特别精细，我那时候为了把样品处理成适合进柱子检测的状态，弄了好久。
要过滤除掉杂质，就像过滤咖啡渣一样，滤不干净柱子就会堵住。
一开始我不知道这个重要性，进去了一些杂质，结果仪器就出问题了，检测结果乱七八糟的。
流动相的选择也很麻烦，就相当于不同的交通工具，得选合适的流动相才能把花色苷这种“乘客”稳稳当当送到目的地给检测出来。
紫外- 可见分光光度法我也捣鼓过。
这方法听起来挺简单的，但是实际操作起来也是有不少坑的。
这个方法是基于花色苷在紫外和可见光谱区有特征吸收峰。
我当时以为只要把样品放进去测就行了，但是发现吸收峰老是对不上标准的值。
后来才意识到样本的浓度还有纯度也是相当会影响检测结果的。
就好比同样一杯果汁，浓的和稀的看起来颜色就不一样，检测出来的值也会不一样。
要说现在觉得哪个最好用，我还不太确定，反正不同的情况可能要用不同的方法。
如果只是初步检测，比色法简单快捷。
但是想要精确检测到花色苷的具体含量和结构，HPLC就比较靠谱了。
要是有大量样本需要粗略判断一下，紫外- 可见分光光度法还是可以试试的，只是得更仔细控制样本的条件罢了。
哦对了，还有纸层析法，这就像小朋友画画用的颜料晕染法差不多。
花色苷纯化分离及鉴定研究进展
收稿日期：2013－11－20;修稿日期：2013－12－04基金项目：国家自然科学基金(31271836);湖南省研究生创新课题(CX2012B290)作者简介：魏一枝(1990－)，女，硕士，研究方向为农产品加工及贮藏工程。
通信作者：邓洁红(1967－)，女，教授，博士生导师，研究方向为园艺产品深加工理论与技术，通信地址:410128湖南长沙市芙蓉区湖南农业大学食品科技学院，E-mail :hongjiedeng@163．com 。
花色苷纯化分离及鉴定研究进展魏一枝1，邓洁红1，2，王维茜1，刘永红3(1．湖南农业大学食品科技学院，长沙410128;2．食品科学与生物技术湖南省重点实验室，长沙410128;3．湖南生物机电职业技术学院，长沙410127)摘要：花色苷是高等植物中最重要的水溶性色素。
因其种类繁多、来源广泛、安全无毒并有一定的营养和保健功效而引起国内外的广泛关注，具有十分重要的开发价值和广阔的应用前景。
文中介绍了国内外花色苷分离纯化(层析法、高速逆流色谱、膜分离法、固相萃取)、以及花色苷鉴定(高效液相色谱-串联质谱法，核磁共振法)的研究方法，并对各种方法进行了分析评价。
对全面认识和开发利用花色苷具有一定的参考价值。
关键词：花色苷;纯化;分离;鉴定中图分类号：TS264．4文献标志码：A 文章编号：1005－1295(2014)01－0050－05doi ：10．3969/j．issn．1005－1295．2014．01．013Ｒesearch on Isolation and Identification of AnthocyaninsWEI Yi-zhi 1，DENG Jie-hong 1，2，WANG Wei-qian 1，LIU Yong-hong 3（1．College of Food Science and Technology ，Hunan Agricultural University ，Changsha 410128，China ；2．KeyLaboratory of Food Science and Biological Technology of Hunan Province ，Changsha 410128，China ；3．Hunan Biological and Electromechanical Polytechnic ，Changsha 410127，China ）Abstract ：Anthocyanins are the most important water-soluble pigment in plants．It caused widespread concern at home and abroad because of its variety and wide range of sources ，safety and rich in nutrition and health effects ，it has a very important development value and broad application prospects．The present paper mentioned some methods for anthocyanin separation and purification （chromatography ，high-speed countercur-rent chromatography ，membrane separation ，solid phase extraction ），and identification （high performance liq-uid chromatography-tandem mass spectrometry ，nuclear magnetic resonance spectroscopy ）．Key words ：anthocyanin ；purification ；separation ；identification0引言随着人们对食品安全意识的提高，开发和应用天然色素已成为食品色素行业的发展趋势。
花色苷的提取的研究进展
[6] 刘清玮 , 赵权 , 毛欣欣 . 酶对黑 果腺肋花楸中花色苷提取率的影响 [J]. 食品工业 ,2018,39(11):158-162.
[7] 戚家栋 . 莲雾花色苷提取工艺 [J]. 食品工业 ,2020,41(3):49-51.
[3] 王 鑫 , 韩 茜 宇 , 薛 宏 坤 . 山 葡 萄皮花色苷提取工艺优化及其组分分 析 [J]. 食品工业 ,2020,41(6):55-59.
[4] 薛宏坤 , 李鹏程 , 钟雪 , 等 . 高速 逆流色谱分离纯化桑葚花色苷及其抗氧化 活性 [J]. 食品科学 ,2020,41(15):96-104.
食品科技
花色苷的提取的研究进展
摘 要：归纳花色苷提取方法，为进一步优化花色苷提取工艺提供理论依据。 关键词：花色苷提取；溶剂浸润；超声辅助提取；微波辅助提取；酶法
□ 徐诗音 西北农林科技大学
花 色 苷 属 于 黄 酮 类 化 合 物， 存 在 于很多植物体内。花色苷具有抗氧化、 抗糖尿病和减肥等生理活性功能。在 生物、食品及医药等方面有一定的应 用价值。本文旨在综述近年来关于各 种植物中花色苷的提取方法，为花色 苷的利用提供一定的参考。 1 溶剂浸润提取法
超声辅助提取法相比普通的溶剂 浸提法，克服了浸提时间长、溶剂量大、 浸提温度高等缺点，避免了由这些缺 点可能引起的花色苷生物活性结构被 破坏或降解。超声波的热效应、机械 效应和空化效应可以使植物组织细胞 壁快速破碎，加速所添加的提取溶剂 进入细胞内与被提取物质混合的速度， 促进提取物从细胞中溶出、扩散。王 鑫等 [3] 的研究发现随着超声功率和超 声时间的增加，提取效果增加后又下 降。在超声波辅助提取过程中，超声 功率过大色素结构会被超声波热效应 产生的热量破坏分解，超声时间过长 色素容易发生降解。故在利用超声辅 助提取法时，必须确定最佳的超声功
一种山茶花中多种花青苷的含量检测方法[发明专利]
![一种山茶花中多种花青苷的含量检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/d54223d8fbb069dc5022aaea998fcc22bcd1431f.png)
专利名称：一种山茶花中多种花青苷的含量检测方法专利类型：发明专利
发明人：李辛雷,张莹,杨美英,范梦龙,吴思
申请号：CN202111352064.4
申请日：20211116
公开号：CN114062547B
公开日：
20220520
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种山茶花中多种花青苷含量的检测方法包括供试品溶液的制备，对照品溶液的制备，高效液相色谱法检测；其中，所述供试品溶液的制备是取山茶花花瓣进行前处理，然后至于回流提取装置中提取，提取结束，离心，离心结束取上清液，定容，以微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。
本发明同时检测14中花青苷含量分离度高，相邻两成分峰间可达到基线分离，准确度高，回收率满足含量检测要求，精密度良好，6次检测同一样品，RSD均小于3%，满足精密度要求，供试品溶液稳定性好，常温放置，12小时内样品溶液稳定，本发明方法操作简单，大大提高了工作效率与检测精度，对山茶花中花青苷的质量评估具有积极的意义。
申请人：中国林业科学研究院亚热带林业研究所
地址：311400 浙江省杭州市富阳区富春街道大桥路73号
国籍：CN
代理机构：重庆晶智汇知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：李靖
更多信息请下载全文后查看。
高速逆流色谱结合半制备型液相色谱分离茶树紫芽花色苷研究
高速逆流色谱结合半制备型液相色谱分离茶树紫芽花色苷研究张拓;刘林峰;林玲;周阳;肖文军;龚志华【摘要】花色苷是植物中一类具有重要生物活性的次生代谢产物,因其含量较低,使得分离制备花色苷高纯品难度较大.本研究以茶树紫芽为实验材料,以花色苷得率与纯度为考察指标,优化筛选了应用高速逆流色谱结合半制备型液相色谱分离纯化花色苷高纯度的方法.结果表明,茶样经提取、脱脂、阳离子交换树脂分离等前处理后,总花色苷得率28.18 mg/g,纯度为20.38％;以高速逆流色谱分离的最优溶剂体系乙酸乙酯:正丁醇:乙腈:0.1％三氟乙酸水溶液=8:35:13:60(v/v/v/v),除去部分杂质后,总花色苷得率达到160.59 mg/g,纯度为43.64％,再结合半制备型液相色谱分离出5种花色苷组分,纯度最高达90.61％,其优化色谱条件为C18制备柱、波长280 nm、柱温30℃、流动相1％醋酸水溶液(A)-乙腈(B)、流速5 mL/min、进样量1 mL、梯度洗脱(0～55 min,10％～40％B).研究表明高速逆流色谱结合半制备型液相色谱可有效地分离纯化茶树紫芽花色苷及其组分.【期刊名称】《茶叶通讯》【年(卷),期】2019(046)002【总页数】9页(P192-200)【关键词】茶树紫色芽叶;花色苷;高速逆流色谱;半制备型高效液相色谱【作者】张拓;刘林峰;林玲;周阳;肖文军;龚志华【作者单位】湖南农业大学茶学教育部重点实验室,国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南长沙 410128;湖南农业大学茶学教育部重点实验室,国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南长沙 410128;湖南农业大学茶学教育部重点实验室,国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南长沙 410128;湖南农业大学茶学教育部重点实验室,国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南长沙410128;湖南农业大学茶学教育部重点实验室,国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南长沙 410128;湖南农业大学湖南省植物功能成分利用协同创新中心,湖南长沙 410128;湖南农业大学茶学教育部重点实验室,国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南长沙 410128【正文语种】中文【中图分类】S571.1;R284花色苷是一类具有2-苯基苯并吡喃基本母核结构的植物次生代谢产物，具有调节糖脂代谢、提高免疫、清除自由基、抗氧化等多种生物活性[1-4]，是近年天然产物开发利用领域的热点之一。
茶树色素含量测定
茶树色素含量测定
茶树叶中的色素含量是评价茶叶品质的重要指标之一，通常包括叶绿素、类黄酮和类胡萝卜素等。
以下是一种常用的方法来测定茶树叶中的色素含量：
1.提取样品：取一定量的新鲜茶叶样品，经过洗涤和干燥后，将其研磨成细粉末，以便提取色素。
2.色素提取：将粉末样品加入适量的提取溶剂（如乙酸乙酯、丙酮等），放入热水浴中加热提取一段时间。
提取溶剂的选择可以根据不同的色素类型进行优化，以提高提取效率。
3.离心分离：经过提取后，使用离心机将提取液离心分离，得到上层的色素提取液。
4.测定吸光度：取适量的色素提取液，使用紫外可见分光光度计测定不同波长下的吸光度。
常见的测定波长为叶绿素的663 nm、类黄酮的415 nm 和类胡萝卜素的470 nm。
5.计算含量：根据吸光度值，使用已知浓度的标准溶液作为对照，通过标准曲线法或者外标法计算出样品中色素的含量。
6.数据分析：将得到的色素含量数据进行统计分析，比较不同样品之间的色素含量差异，评价茶叶品质。
需要注意的是，以上步骤中的提取条件、测定波长以及标准曲线的制备等操作都需要严格控制，以确保测定结果的准确性和可靠性。
此外，为了减小误差，最好在实验过程中采用多个样品的平行处理和多次测定的方法。
茶树紫色芽叶花青苷组分分析及结构推测
茶树紫色芽叶花青苷组分分析及结构推测李智;王日为;张丽霞;韩晓阳【期刊名称】《茶叶科学》【年(卷),期】2014(34)3【摘要】A rapid method for analysis of anthocyanins in purple buds and leaves of tea plant was established by high-performance liquid chromatography (HPLC) based on the screening of mobile phase and the optimization of elution gradient. Using the established HPLC method, nine major chromatographic peaks were separated from crude extracts of anthocyanins from purple buds and leaves of tea plant. Further, the ultraviolet-visible spectrum and mass spectrum data of seven out the nine components were obtained by HPLC-DAD-MS/MS analysis. Combined with the literature data, five major components of anthocyanins were identified as delphindin-3-galactoside, cyanidin-3-gal-actoside, delphindin-3-rutinoside, cyanidin-3-rutinoside, and pelargonium-3-rutinoside. Additionally, each component was quantitatively analyzed using an external standard method, and crude extracts of anthocyanins were obtained at the purity of 32%. The proposed method is conven ient and rapid with high accuracy and reproducibility, which can be applied for determining anthocyanins in purple buds and leaves of tea plant.%通过筛选流动相、优化洗脱梯度，建立了茶树紫色芽叶花青素 HPLC 的分析方法，并从提取的花青素粗制品中分离出9个主要色谱峰；运用 HPLC-DAD-MS/MS联用技术，获得了其中7个组分的紫外-可见光谱信息、质谱数据，结合文献资料，初步推测了茶树紫色芽叶花青素中5个主要组分，分别为：飞燕草-3-半乳糖苷、矢车菊-3-半乳糖苷、飞燕草-3-芸香糖苷、矢车菊-3-芸香糖苷和天竺葵-3-芸香糖苷，此外，采用外标法对各组分进行了定量分析，并获得了粗提物，纯度为32%。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
摘 要 ： 树 芽叶 中的花 色苷含 量 测 定 尚无 国 家标 准 ， 茶 目前 仍 沿用 单一 ｐ 法进 行 测 定．比较 了单 Ｈ 一 ｐ 法和 ｐ 示 差 法对花 色苷 含 量测 定 的结 果．单 一 ｐ 法所测 花 色苷含 量 高于 ｐ 示差 法 ， Ｈ Ｈ Ｈ Ｈ 两者
存 在 良好 的 线 性 关 系 （ ＝ ． ９ ） Ｈ 示 差 法 能 较 好 地 消 除 干 扰 物 质 对 测 定 结 果 的 影 响 ， 茶 Ｒ ０ ９ ２７ ．ｐ 为
第 ２ ９卷 第 ２期 ２ １ 年 ３月 ０１
北 京 工 商 大 学 学 报 （自然 科 学 版 ） Ｊｕｎ ｌ ｆ ｅ ｉｇＴ ｃｎｌｇ ｎ ｕｉｅｓＵ ｉ ｒｔ（ ａｕａ Ｓｉ ｃ ｄｔ ｎ ｏ ｒａ ｏ ｉｎ ｅｈ ｏｏｙａｄＢ ｓ ｓ ｎｖ ｓ ｙ Ｎ ｔｒｌ ｃｅ ｅＥ ｉｏ ） Ｂｊ ｎ ｅｉ ｎ ｉ
外文 献 中一 般 用 ｐ 示 差 法 分 析 花 色苷 含 量 Ｈ ． 对于 茶树 芽 叶 中花 色苷 的含 量 测 定 ， 目前 没 有 国 家
Ｈ０
ＯＨ
标 准 ， 沿 用 单 一 ｐ 法 进 行 测 定 ．本 研 究 采 用 而 Ｈ 单 一 ｐ 法 、Ｈ示 差法 来 测定 茶 树 紫 色芽 叶 的花 色 Ｈ ｐ 苷含量 ， 比较茶 树 芽 叶花 色苷含 量 测定 的方 法 ， 为 可
到关 注 ．
植 物 中花色 苷单 体 的准确 定量 受 到花 色苷 分离 纯度 的 限制 ， 并需 要单 体标 准 品作 为对 照 ， 目前 的研 究多 将花 色苷 作 为一个 整 体测 定 其 总含 量 ．定量 方
植 物 体 内发 现 的 花 青 素 有 ２ ２种 ， 品 中 主 要 有 ６ 食 种， 自然 条件 下 游 离 状 态 的 花 青 素 极 少 见 ， Ａ 环 其
呈 现 五彩缤 纷 颜 色 的 主 要 水 溶 性 色 素 ， 及 ２ 涉 ７个 科 ，３个 属 的 数 万 种 植 物 ， 布 极 为 广 泛 ．花 青 素 ７ 分 的 结 构 以 ｃ 一３ ｃ ６ｃ 一 ６为 基 本 骨 架 ， 图 １ ． 目前 在 见
而 ， 着多 种 富含 花 色苷 的天 然 植 物 的研 究 揭示 了 随 花 色苷 具有 抗氧 化 、 炎 、 肿 瘤 、 抗 胰 岛 素调 节 抗 抗 抵 等 的特 殊功 能 活性 后 ， 叶紫 色 芽 叶的 研究 开始 受 茶
收 稿 日期 ： ０ ０—１ ～２ ２１ ２ ４
ｎ ｍ．单一 ｐ Ｈ值 法测 定花 色苷 含 量 需要 在 一 个 恒定 的 ｐ 介质 中进 行 ， 于花 色苷 单 体 之 问差 别 很 小 Ｈ 由
基 金 项 目 ： 东 省 中 医 药 局 科 研 基 金 资 助 项 目 （０ ０ ０ ３ ９９） 广 东 食 品 药 品 职 业 学 院 自然 科 学 青 年 基 金 资 助 项 目 （０ ９ ０ ４ 广 ３ １ １ １０ １ ； ２ ０ ＹＺ０ ） 作 者 简 介 ：陈 琼 ， ， 师 ， 士 ， 要 从 事 食 品 科 学 方 面 的教 学 与科 研 工作 ． 女 讲 硕 主
在 自然 界 的茶 树 中 ， 见 有部 分 红 紫 色 芽 叶 的 常 茶 树 品种 或单 株 ， 高 海拔 、 光 照 、 秋 季茶 园 中 ， 在 强 夏 茶 树紫 芽 的发 生率较 高．花 色苷 是 茶树 紫 色 芽 叶 的
主 要 特 征 内 含 成 分 ， 量 远 高 于 绿 色 芽 叶 ．在 传 含
Ｖ０ ． ９ ＮＯ ２ １２ ．
Ｍａ．２ １ ｒ ０１
４１
文 章 编 号 ：６ １１ １ （ ０ １ ０ —０ １０ １７ —５ ３ ２ １ ） ２０ ４ — ４
茶 树 芽 叶 花 色 苷 含 量 测 定 方 法 的研 究
陈 琼 陆瑞 琼 ，
（ ． 东食 品 药 品 职 业 学 院 食 品 科 学 系 ，广 东 广 州 ５ ０ ２ ： １广 １ ５ ０ ２ 华 南农 业 大 学 食 品 学 院 ，广 东 广 州 ５ ０ ４ ） ． １ ６ ２
Ｏ Ｈ
茶树 紫 色芽 叶的 开发研 究 提供 基础 ．
图 １ 花 色 苷 母 核 结 构
Ｆｉ ．１ Ｍ ｏ ｈｅ ｕｃ ｅ ｓ ｓ ｒ ｃ ｕｒ ｆ ａ ｔ ｃ ｎｉ ｇ ｔ ｒ ｎ ｌ ｕ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｎ ｈｏ ｙａ ｎｓ
１ 方 法 原 理
１ １ （ 自然 科 学 版 ）
植 物 花 色 苷 的 最 大 吸 收 波 长 一 般 在 ５ ０～５ ０ ０ ４
ｎ 而 茶 树 芽 叶 花 色 苷 的 最 大 吸 收 波 长 在 ５ ０～５ ０ ｍ， ２ ４
统 的绿 、 等茶 叶加 工 过程 中 ， 红 紫色 芽 叶 由于其 滋 味
苦 涩 、 泽 深 暗 、 杂 等 不 良 品 质 特 征 而 被 剔 除 ．然 色 花
３ ，一７碳 位 上 的 羟基 以糖 苷 键 与 糖结 合 形 成 花 色 一５ ， 一
苷， 与花 青素 结合 的糖 种 类 、 量 、 合位 置不 同 ， 数 结 花
色 苷 的种 类 则 不 相 同 Ｊ ．
法根 据其 光学 特 性 ， 紫 外一 见分 光光 度法 进行 分 用 可
析 ， 单一 ｐ 有 Ｈ法 、 Ｈ示差 法 、 ｐ 差减 法等 ．近年来 ， 国
叶 的 花 色苷 定 量 分 析 提 供 了依 据 ．
关键 词 ： 茶树 紫 芽 ； 色苷 ；ｐ 示差 法 花 Ｈ
中 图 分 类 号 ：Ｔ ２ ７ ３ Ｓ０． 文 献 标 志 码 ：Ａ
花青 素 （ ｎｈ ｃａ ｉｉ） 其 糖苷 （ ｎｈ ｃａ ｉｓ ａ ｔｏｙｎｄｎ 及 ａｔｏｙｎｎ ） 是 植物 中一 大类 次 级代 谢产 物 ， 是使 植 物花 朵 、 果实