微生物生长繁殖

微生物生长繁殖
生长曲线可分： 延滞期 对数期 稳定期 衰亡期
1.延滞期 将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数 不立即增加，或增加很少，生长速度接近于零。也称延 迟期、适应期。
迟缓期的特点：分裂迟缓、代谢活跃
在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短延滞期：
①通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短； ②利用对数生长期的细胞作为“种子”； ③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大； ④适当扩大接种量等方式缩微生短物生迟长缓繁殖期，克服不良的影响。
交替进行的过程
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个体生长 群体生长
个体繁殖
群体生长
个体生长+个体繁殖
由于微生物的个体极小，所以常用群体 生长来反映个体生长的状况
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第一节 微生物纯培养的获得
平板划线分离法 稀释倒平板法 单孢子或单细胞分离法 利用选择性培养基分离法
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1.平板划线分离法 用接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平 板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线 ， 如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在 平板表面得到单菌落。
常用于对微生物的快速鉴定与检测
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第三节 微生物的生长规律
一、细菌群体生长规律
生长曲线
在不补充营养物质或移去培养物， 保持整个培养液体积不变条件下， 以时间为横坐标，以菌数为纵坐 标，根据不同培养时间时细菌数 量的变化，可以作出一条反映细 菌在整个培养期间菌数变化规律 的曲线。
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4.选择性培养基分离法
各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素等具有不同的抵 抗能力，利用这些特性可配制合适某种微生物而限制其它微生 物生长的选择培养基，用它来培养微生物以获得纯培养。
分离方法
微生物纯培养分离方法的比较 应用范围
平皿划线法
方法简便，多用于分离细菌
稀释倒平皿法
即可定性，又可定量，用途广泛
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3.稳定期
特点：
1 生长速率常数R等于0 2 菌体产量达到了最高值 3 合成次生代谢产物 4 细胞内出现储藏物质，芽孢菌内开始 产生芽孢
产生原因：
营养物尤其是生长限制因子的耗尽 营养物的比例失调，如碳氮比不合适 有害代谢废物的积累（酸、醇、毒素等）
通过补物化充条营件养（物pH质、或氧取化走还原代势谢等产）物不或合改适善培 养条件，如对好氧菌进行通气、搅拌或振荡 等 获得更多的代谢产物微生物生长繁殖
重量法
测
量
生理指标法
方
法
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1.个体计数法 a.直接法
利用血球计数 板，在显微镜 下计算一定容 积里样品中微 生物的数量。
缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数；
需要相对高的细菌浓度； 个体小微的生物细生长菌繁在殖 显微镜下难以观察；
b.间接法 原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可 以通过生长形成菌落。
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2.稀释倒平板法
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3.单孢子或单细胞分离法
采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单 个个体进行培养以获得纯培养 。
在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作，挑取单 孢子或单细胞进行培养。也可以采用特制的毛细管在 载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来，然后移 到合适的培养基进行培养。
x2 = x1*2n
以对数表示：㏒ x2 = ㏒ x1 + n㏒2
㏒ x2 - ㏒ x1
∴n=
= 3.322(㏒ x2 - ㏒ x1 )
㏒2
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（2）生长速度常数（R）
n
㏒ x2 - ㏒ x1
R=
=
t2 – t1
log2( t2 – t1 )
（3）代时(G) 1
G= = R
t2 – t1 3.322(㏒ x2 - ㏒ x1)
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2.重量法 以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量；
通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量； 测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法
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3.生理指标测定法
微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量 热计等设备来测定相应的指标。
第六章
微生物的生长繁殖 及其控制
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生长
生物个体由小到大的增长，即表现为 细胞组分与结构在量方面的增加
繁殖
指生物个体数目的增加
在单细胞微生物中，生长繁殖的速度很快，而 且两者始终交替进行，个体生长与繁殖的界限难以 划清，因此实际上常群体生长作为衡量微生物生长 的指标。
群体生长的实质是包含着个体细胞生长与繁殖
同步生长：以同步培养方法使群体细胞能处于同一生 长阶段，并同时进行分裂的生长方式
同步培养物常被用来研究在单个细胞上难以研究的
生理与遗传特性和作为工业发酵的种子，它是一种
理想的材料。
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同步培养方法
机械方法
离心方法 过滤分离法 硝酸纤维素滤膜法
单细胞挑取法
局限于高度专业化的科学研究
利用选择培养基法
适用于分离某些生理类型较特殊 的 微生物生长繁殖
第二节 微生物生长的测定
评价培养条件、营养物质
微
等对微生物生长的影响；
生
物
评价不同的抗菌物质对微生物产
生
生抑制(或杀死)作用的效果；
长
客观地反映微生物生长的规律；
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Leabharlann Baidu 微
个体计数法
生
物
生 长
2.对数期
指数期的特点 细菌数量呈对数增加 生长速度常数R最大 细胞进行平衡生长 酶系活跃，代谢旺盛 影响指数期微生物增代时间的因素 菌种 营养成分 营养物的浓度
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细菌研究中常用的三个参数
（1）繁殖代数（n） 指数生长方式： 1 2 4 8… …2n
设接种时细胞数为x1, 时间为t1, 到时间t2后，繁殖n代， 细胞数为x2，它们之间的相互关系为：
4.衰亡期
特点：
1 R为负值 2 细胞的形态发生变化，出现不规则的衰退形 3 释放次生代谢产物，芽孢等 4 菌体开始自溶
产生原因：
生长条件的进一步恶化，使细胞内的分解代谢大大超 过合成代谢，继而导致菌体的死亡
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二、同步培养
1.概念
同步培养(synchronous culture)：是一种培养方法， 它能使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或 分裂的群体细胞。