血清谷丙转氨酶测定设计实验

• 本实验是在碱性条件下，生成醌类化合物的量反 应丙酮酸的量，即反应了谷丙转氨酶的活性。
• 本法以lml血清与基质液在37℃，保温30分钟生 成2.5μg丙酮酸为谷丙转氨酶活性1单位
• 求酶活性单位的方法：
• 1、标准品对照法：检品与标准丙酮酸液同样处
理呈色，进行比色，计算出酶活性单位。
• 2、标准曲线法：取含待测物的一系列标准溶
。
各管混匀，放37℃水浴5分钟 然后各加呈色试剂0.5ml，混匀
56℃放置5分钟。 加0.4N NaOH液5.0ml 慢慢加入（约1分钟），边加边混匀
室温放置 30分钟 测定OD值, 波长 520nm，用蒸馏水调零点。
一标准对照法 １.原始数据记录
Fra Baidu bibliotek实验结果
2、公式计算酶活性单位（要求带入数据，写出结果） 二、标准曲线法 １.原始数据记录
=
（ODs-ODs＇）
50ug/ml × 0.1 ml
X
=
（ODA-ODB） ×5
（ODs-ODs＇）
SGPT单位=
（ODA-ODB） （ODs-ODs＇×）5
0.1 × 2.5
（ODA-ODB） = （ODs-ODs＇） × 20
二、标准曲线法
配制一系列不同浓度的标准丙酮酸液，并且各加以适量的基质液， 作成标准曲线。具体做法如下表。
实验讨论
分析实验误差产生的原因 血清GPT活性测定的意义
液，作标准曲线，由标准曲线查得活性单位。
实验操作
一、标准品对照法
取试管4支，标号，按下表加试剂：
56℃放置5分钟。 加0.4N NaOH液5.0ml 慢慢加入（约1分钟），边加边混匀。
室温放置 30分钟，
测OD值，波长 520nm，用蒸馏水调零点。
计算
（ODA-ODB）
X （待测样品丙酮酸含量）
2、绘制标准曲线，（要求规范作图） 3、通过方法一的ODA-ODB，在标准曲线中，查得酶活性单位
注意事项
操作中加 0.4N NaOH液时，需以较慢速 度加入，并且边加边摇匀加快时则a一戊酮 二酸引起的发色增强。
本实验中各试剂加量都需要准确，并且要 注意控制条件，保温时间要严格
本法测定SGTP正常值为40单位以下。
实验题目
血清谷丙转氨酶 活性的测定
实验目的
掌握谷丙转氨酶活性测定的 原理和方法
实验原理
血清谷丙转氨酶作用于由丙氨酸及a一酮戊 二酸组成的基质。产生丙酮酸及谷氨酸
血清加基液保温后产生丙酮酸的多少，即 反应出谷丙转氨酶活性的大小。
丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸 二硝基苯腙，在酸性溶液中显黄色，在碱 性溶液中成醌型显棕红色。