血培养检测方法

血培养检测

一、采血指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征：

1．发热（≥38℃）或低温（≤36℃）。

2．寒战。

3．白细胞增多（>10×10 9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。

4．粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10 9/L）。

5．血小板减少。

6．皮肤粘膜出血。

7．昏迷。

8．多器官衰竭。

或同时具备上述几种体征时应采血培养。

在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁以下的幼儿）一般多见于门诊，常伴有明显发热（≥38.5℃）和白细胞增多（≥20×109/L）。老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要指征。

二、皮肤消毒程序：

血培养为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂（碘酊或碘伏）对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。因此，采血前严格执行皮肤消毒。

三、采血量：

对从菌血症或真菌菌血症患者血培养中获得微生物，每个培养瓶抽取的血量是唯一重要的变量。当培养的血量从2ml增加到20ml时，血培养的阳性率增加30%~50%，因为培养的血液量增加1ml，阳性率增加3%~5%。

用静脉穿刺获得的血量，成人和儿童不同。儿童，特别是新生儿很难获得大量的血液，对婴幼儿和儿童，一般静脉采血1ml~5ml用于血培养，当细菌浓度足够高时，血液少于1ml也足以检测菌血症。标本量大于1ml，细菌量也增加，对于感染的儿童每毫升血液比成人有更多的微生物。对于成人血培养的标本量少于10 ml不易培养出细菌，每瓶最低限量应是10ml血液，20ml~30ml最合适，血液和肉汤的比一般推荐为1:5至1:10。几乎所有现代的血培养系统假如血液量均在10ml以上。虽然静脉采血30ml可增加细菌量，但这不太切合实际，这很容易造成医院获得性贫血。

四、血培养的数量和采血时间：

一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单次血培养。研究已经证实，采集适量的血液注入2~3瓶血培养瓶中足以检测所有的菌血症和真菌菌血症。对间歇性菌血症，用于培养的血液应在估计寒战或体温高峰到来之前采集，因为细菌流入血液与寒战发作通常间隔1h，在发烧时血液可能没有细菌，实际上，血培养通常是在寒战或发烧后进行。由于细菌很快会从血液中清除，因此，在寒战或发烧后应尽快抽取血培养。

采血时间：

实际上已经证明在24h内同一时间或任意时间抽血培养发现微生物的结果

相似。无论何时，采集血培养应该在使用抗生素之前进行，推荐同时采集2~3瓶，每瓶20ml~30ml血样进行培养来做最初的评估。

五、采血后注意事项：注意培养皿盖的常规消毒；血液注入培养皿要缓慢，以免注射过快引起溶血。

1．怀疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者：应立即采集2或3份血培养瓶，快速进行血培养。

2. 不明病源的发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热：发热开始采集2或3份血培养。24h至36h后，估计温度升高之前（通常在下午）立即采集2份以上血培养。

3．怀疑菌血症或真菌菌血症，血培养结果持续阴性，应改变学培养方法，以便获得罕见的或苛养的微生物。

4．感染性心内膜炎，对急性心内膜炎患者1h（2h内）采集3份血培养，如果所有结果24h后阴性，再采集3份血培养瓶。入院前两周内接受抗生素治疗的患者，连续三天采集血培养，每天2份。

要点：大部分临床医生对成年患者采集血量不足，采集血培养份数不够，采血时机不合适，通常在患者体温高热时，24h内采集一瓶血培养，降低了血培养的阳性率，不符合采血的基本规程，实验室应该做大量宣传沟通工作。

七、运输标准：

采血后血培养瓶或采集管应立即送到临床微生物实验室。血培养瓶和采集管

短期内置于室温不影响细菌检出，不要冷藏，如果血培养瓶在送往实验室培养或自动化仪器检测之前不得已需放置一段时间，应置于35℃~37℃孵箱中。

八、不规范处理方法：

1. 血培养或培养管无标签或贴错标签、培养瓶或培养管有渗漏、破裂或明显的污染、血标本采集后放置12h以上、用不适当的培养瓶或培养管收集标本。

2. 用失效的培养瓶或培养管收集标本。

3. 送交血标本的量不足或只送一瓶血培养。

4. 未送推荐的培养瓶数或类型。

要点：每位临床医师都应该对患者负责任，实验室工作人员发现不规范的血标本后，应该及时通知临床医生以便重复采集血培养进行补救。

血培养检测——阳性结果的处理：

传统手工法血培养应该每天至少检查一次，对48h~72h未生长的培养瓶至少应进行需氧传种培养一次。