实验室常用灭菌方法完整版
实验室常见的灭菌消毒方法总结
实验室常见的灭菌消毒方法总结一、消毒和灭菌的区别1、消毒(disinfectioninhospital):杀灭或消除医院环境中媒介物上污染的病原微生物的过程.2、灭菌(sterilization):杀灭或去除外环境中媒介物携带的一切微生物的过程.包括致病微生物和非致病微生物,也包括细菌芽胞和真菌孢子.灭菌是个绝对的概念,灭菌后物品必须是完全无菌的.即灭菌保证水平为106.二、高温灭菌法高温灭菌法是利用高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡,是应用最广泛且有效的灭菌方法。
主要用于器械、容器、试剂等灭菌。
(一)高压蒸气灭菌法用高温加高压灭菌,不仅可杀死一般的细菌,对细菌芽胞也有杀灭效果,是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。
主要用于能耐高温的物品,如金属器械、玻璃、橡胶、耐高温塑料制品及试剂的灭菌。
高压蒸气灭菌器的类型和样式较多,如:①下排气式压力蒸气灭菌器是普遍应用的灭菌设备,压力升至102.9kPa,温度达121~126℃,维持20~30分钟,可达到灭菌目的。
②脉动真空压力蒸气灭菌器已成为目前最先进的灭菌设备。
灭菌条件要求:蒸气压力205.8kPa,温度达132℃以上并维持10分钟,即可杀死包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞在内的一切微生物。
湿热灭菌是目前实验室使用最为广泛,灭菌效果最佳的方法。
目前湿热灭菌的仪器技术上也非常成熟,安全系数较高。
高压蒸气灭菌的注意事项:包裹的物品不宜太大,一般应小于30cm×30cm×50cm,大于该尺寸需要酌情延长灭菌时间;1.高压锅内的包裹不要排得太密,以免妨碍蒸气透入,影响灭菌效果;2.对塑料制品不宜放置过于拥挤,以免发生形变;3.压力、温度和时间达到要求时,指示带上和化学指示剂即应出现已灭菌的色泽或状态;4.锐性器械,如刀、剪不宜用此法灭菌,以免变钝;5.瓶装液体灭菌时,如有塑料瓶盖要适当旋松瓶盖,并用牛皮纸或纱布包扎瓶口;如有橡皮塞时,应插入针头排气,切记要保持瓶内外的连通,防止高温膨胀爆裂;6.注明灭菌日期和物品保存时限,一般可保留1~2周;7.应有专人负责,每次灭菌前,应检查安全阀的性能,以防压力过高发生爆炸,保证安全使用。
实验室的灭菌方法
实验室的灭菌方法在实验室中,灭菌是非常重要的一个步骤,可以有效地消除实验过程中可能存在的各类微生物,确保实验结果的准确性和可靠性。
常用的灭菌方法包括物理灭菌和化学灭菌两种。
一、物理灭菌方法:1. 高温灭菌(烘箱法):将待灭菌的器具(如培养皿、试管等)放入预热至适当温度的烘箱中,通过高温作用杀灭其中的微生物。
常用的温度为160-180摄氏度,时间约为1-2小时。
此方法适用于不耐热的固体物品。
2. 压力蒸汽灭菌(高压灭菌法):将待灭菌的物品放入装有适量清水的高压灭菌锅中,加热至适当的温度(121-134摄氏度),经过一定时间的高压和高温作用,实现微生物的灭活。
常规操作时间为15-30分钟。
这种方法适用于实验器械、培养基、培养瓶等耐热器具。
3. 过滤法:通过微生物滤膜过滤器将待检测的液体或气体经过过滤,将其中的微生物截留下来,达到灭菌的效果。
该方法适用于不耐高温或无法承受高压的液体、气体样品。
4. 紫外线灭菌法:将待灭菌的物品放置在紫外线照射区域,经过一定时间的紫外线照射,使微生物的核酸发生损伤,从而达到杀灭微生物的目的。
该方法适用于表面较为平坦的培养皿、试管等小型器具。
5. 干热灭菌法:将待灭菌的物品置于常温下的烘箱中,在较高的温度(170-180摄氏度)下进行一定时间的干热处理。
该方法适用于不耐水或无法耐受湿热的物品。
二、化学灭菌方法:1. 乙醛灭菌法:将待灭菌的物品放入密闭的容器中,加入一定浓度的乙醛液并封闭容器,在一定时间内使乙醛蒸气作用于物品表面,达到杀菌的目的。
该方法易于操作,适用于对物品表面较干净的物品。
2. 酒精灭菌法:将待灭菌的物品浸泡在一定浓度的乙醇或异丙醇溶液中一段时间,使其达到杀菌的效果。
该方法适用于小型的器具或实验室台面的表面。
值得注意的是,不同的灭菌方法适用于不同类型的物品,我们在选择灭菌方法时要根据物品的性质、尺寸和特点来进行判断。
同时,灭菌操作过程要遵循一定的操作规范,确保操作的安全性和有效性。
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灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性
• 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出,以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热,待压力表降至0,放
汽、开启灭菌器,物品温度降至80℃ 以下 时才能将灭菌器门全部开启
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影响湿热灭菌的因素
• 辐射灭菌:短小芽孢杆菌孢子(ATCC27142等,活孢子数为5×107~
5×108个/片 )
• 气体灭菌:
环氧乙烷灭菌:枯草芽孢杆菌孢子(ATCC9372等,活孢子数为 5×105~5×106菌孢子(ATCC7953等,活孢子 数为1×106~5×106个/片 )
不挥发,不易燃
无色醚样臭味气体,沸点 10.8 扩散穿透能力强,属广谱杀菌
环氧乙烷
℃,沸点以下为无色透明液 剂;用于对热敏感的药物等的
体,比重 0.882,溶于水。 灭菌;时间长,费用贵。
苯酚(石炭酸)
3~5%
地面、墙壁喷撒
甲酚皂溶液(来苏尔)
5~100%
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛:容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
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湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条 件。
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式,保证灭菌有
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽 热含量高 潜热大 穿透力强
湿饱和蒸汽
实验室灭菌指南
实验室灭菌指南消毒灭菌方法目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120ºC~150ºC的高热,并保持90~120分钟,杀死细菌和芽孢,达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌,且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥,易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一,在进行动物细胞体外培养工作时,常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0~1.1kg/cm2,维持20~30min即可达到灭菌效果。
3射线灭菌法利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。
紫外线是一种低能量的电磁辐射,可以杀灭多种微生物。
紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。
适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。
灭菌时间为30min。
用紫外线杀菌时应注意,不能边照射边进行实验操作,因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害,而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。
4过滤除菌法是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤,使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留,从而达到除菌的方法。
过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。
目前,常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌,或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。
滤膜孔径应在0.22~0.45μm范围内或用更小的细菌滤膜,溶液通过滤膜后,细菌和孢子等因大于滤膜孔径而被阻,并利用滤膜的吸附作用,阻制小于滤膜孔径的细菌透过。
实验室对培养基灭菌的常用方法
实验室对培养基灭菌的常用方法常用的灭菌方法主要是湿热灭菌和过滤除菌。
1、湿热灭菌:
蒸汽在冷凝时释放出大量潜能,并且蒸汽具有强大穿透力,蒸汽的湿热破坏菌体蛋白质和核酸的化学键,使酶失活,微生物因代谢障碍而死亡。
湿热灭菌的效果,取决于致死温度和致死时间。
致死温度是杀灭微生物的极限温度。
致死时间是在致死温度下杀灭全部微生物所需时间。
高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。
分装后应立即灭菌,应在当天内完成灭菌工作,不可过夜。
消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。
2、过滤除菌:
一些抗生素及有机物等,遇热容易分解,不能与培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌,例如含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂培养基。
过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在凝固之前(50-60℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。
实验室常用灭菌方法
实验室常用灭菌方法实验室是一个涉及到微生物的环境,为了保证实验室中的实验结果的准确性和可靠性,需要对实验室的器材、培养基以及其他物品进行灭菌处理。
灭菌是通过杀灭或去除微生物,以防止感染和污染的过程。
下面将介绍常见的实验室常用灭菌方法。
1.热湿灭菌(蒸汽灭菌)热湿灭菌是一种广泛使用于实验室的常见方法,它利用高温高湿的蒸汽来杀灭微生物。
在热湿灭菌中,常用的设备是高压蒸汽灭菌器(也称为压力锅或高压灭菌器)。
该设备通过提高水的沸点,使水蒸气的温度可达到121°C,压力可达到15 psi(磅力/平方英寸)。
在此条件下,细菌、真菌和病毒通常能够被迅速灭活,从而达到杀灭微生物的目的。
2.干热灭菌(烘箱灭菌)干热灭菌是另一种常见的实验室灭菌方法,它利用高温而不是湿热来杀灭微生物。
干热灭菌通常使用烘箱,其温度通常在160-180°C之间。
在这种条件下,微生物的蛋白质和核酸结构会受到破坏,从而导致微生物的死亡。
干热灭菌需要较长时间来达到灭菌效果,通常需要1-2小时。
3.紫外线灭菌紫外线灭菌是一种非常方便和快速的灭菌方法,经常应用于实验室的工作台面、安全柜以及透明玻璃器皿等灭菌工作。
紫外线具有较短波长和较高能量,能够对微生物的DNA造成损伤,从而防止其复制和生长。
在紫外线照射下,微生物通常需要20-30分钟才能被杀灭。
4.过滤灭菌过滤灭菌是一种常见的实验室灭菌方法,它通过使用微孔过滤膜来除去或困住微生物,从而实现灭菌的目的。
过滤膜的孔径一般在0.2-0.45微米之间,可以有效地过滤掉大多数的微生物,包括细菌、真菌和病毒。
过滤灭菌可以用于对较小分子量的溶液、培养基以及其他液体样品进行灭菌。
5.化学灭菌化学灭菌是一种使用化学药品来杀灭微生物的灭菌方法。
常用的化学灭菌剂包括酒精(如70%的乙醇)、过氧化氢、漂白粉和酚酞等。
这些化学灭菌剂可以通过破坏微生物的细胞膜和核酸等结构,以达到杀灭微生物的目的。
化学灭菌一般适用于灭菌小面积的表面,如试管、培养皿等。
最齐全的食品实验室常用灭菌方法汇总
最齐全的食品实验室常用灭菌方法汇总消毒灭菌方法目前,常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如,干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1、干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120℃-150℃的高热,并保持90-120分钟,杀死细菌和芽孢,达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌,且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥,易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一,在进行动物细胞体外培养工作时,常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2、湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0-1.1 kg/cm2,维持20-30min即可达到灭菌效果。
3、射线灭菌法利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。
紫外线是一种低能量的电磁辐射,可以杀灭多种微生物。
紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。
适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。
灭菌时间为30min。
用紫外线杀菌时应注意,不能边照射边进行实验操作,因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害,而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。
4、过滤除菌法是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤,使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留,从而达到除菌的方法。
过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。
目前,常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌,或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。
滤膜孔径应在0.22-0.45μm范围内或用更小的细菌滤膜,溶液通过滤膜后,细菌和孢子等因大于滤膜孔径而被阻,并利用滤膜的吸附作用,阻制小于滤膜孔径的细菌透过。
常用的灭菌方法
一、常用灭菌消毒方法1、干热灭菌法火焰灭菌(灼烧灭菌)、干热灭菌2、湿热灭菌巴氏消毒、煮沸消毒、高压蒸汽灭菌、间歇加热灭菌、实罐灭菌3、过滤除菌4、放射线灭菌二、常用的消毒剂理想的消毒剂:杀菌力强,使用方便;价廉;对人、畜无害;能长期保存;溶解度大;无腐蚀性等。
消毒剂种类:氧化剂、重金属盐、有机化合物相对药效:三、影响灭菌与消毒因素1、微生物种类2、培养基3、消毒剂4、环境因素5 节:化学疗剂对微生物作用能直接干扰病原微生物的生长繁殖并可用于治疗感染性疾病的化学药物。
化学疗剂能选择性地作用于病原微生物新陈代谢的某个环节,使其生长受到抑制或致死。
一、抗代谢物结构上类似,竞争性地与酶结合,只有当正常代谢物量少或不存在时才起作用。
最常用的是磺胺类药物。
是氨苯磺胺衍生物,其结构与对氨基苯甲酸(PABA)类似,而PABA 是叶酸分子组成。
叶酸是辅酶,在氨基酸、维生素合成中起重要作用,许多细菌需自己合成叶酸,而人和动物利用现成叶酸,因此不受磺胺干扰。
还有异烟肼rimifon,是吡哆醇对抗物。
二、抗生素作用范围:抗菌谱作用位点:1、抑制细胞壁合成:青霉素,多氧霉素2、影响细胞膜功能:多肽类,多烯类3、干扰蛋白合成:抑制而非杀死4、阻碍核酸合成:对细胞有毒三、微生物抗药性对药物的适应性即是抗药性。
抗药性主要表现(产生机制)1、菌体内产生钝化或分解药物的酶2、改变膜的透性而导致抗药性产生3、被药物作用的部位发生改变4、形成救护途径。
五章:微生物遗传遗传heredity—亲代将其特有的生物学特性传递给子代。
遗传性—子代总保持与亲代相同的生物学特性。
遗传型genotype—生物体所具有的全套遗传物质总称。
又称基因型。
表型phenotype—特定环境中生物体表现出的种种形态与生理特征。
变异variation—遗传型的改变。
适应或饰变modification—表型的改变。
基因—指带有足以决定一个蛋白质全部组成所需信息的最短DNA片段。
实验室的灭菌方法
实验室的灭菌方法
实验室常用的灭菌方法主要有以下几种:
1. 热灭菌:使用高温蒸汽或高温烘箱进行灭菌,可有效消除常见的细菌、病毒和真菌。
热灭菌常用于灭菌培养皿、培养基、试剂和玻璃器皿等。
2. 化学灭菌:使用化学消毒剂进行灭菌,常见的消毒剂包括酒精、漂白粉、过氧化氢等。
化学灭菌适用于一些敏感材料,如塑料器皿、塑料管道、橡胶塞和一次性注射器等。
3. 紫外线灭菌:利用紫外线的辐射杀死细菌和病毒,常用于空气和表面的灭菌。
然而紫外线灭菌对于有障碍物遮挡或遮蔽的区域效果有限,且需要较长时间的照射。
4. 过滤灭菌:通过微孔滤膜将细菌和病毒过滤掉。
常用的滤膜材料有聚酯、聚碳酸酯、聚醚砜等。
过滤灭菌适用于渗透性好的溶液、生物液和气体。
5. 辐射灭菌:使用离子化辐射、γ射线或X射线进行灭菌。
辐射灭菌适用于灭菌一次性物品、一次性注射器和药品等。
需要根据实验需要和具体材料的特性选择合适的灭菌方法。
同时在进行灭菌操作时,要遵守操作规范和消毒程序,确保灭菌效果和安全性。
实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总
实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总1、热力消毒灭菌高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固(结构改变导致功能丧失),新陈代谢受到障碍而死亡,从而达到消毒与灭菌的目的。
在消毒中,热可分为湿热与干热两大类。
2、干热消毒灭菌干热是指相对湿度在20%以下的高热。
干热消毒灭菌是由空气导热,传热效果较慢。
一般繁殖体在干热80-100℃中经1小时可以杀死,芽胞需160-170℃经2小时方可杀死。
燃烧法:是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法,因对物品的破坏性大,故应用范围有限。
烧灼法:一些耐高温的器械(金属、搪瓷类),在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法。
将器械放在火焰上烧灼1-2分钟。
若为搪瓷容器,可倒少量95%乙醇,慢慢转动容器,使乙醇分布均匀,点火燃烧至熄灭约1-2分钟。
采集作细菌培养的标本时,在留取标本前后(即启盖后,闭盖前)都应将试管(瓶)口和盖子置于火焰上烧灼,来回旋转2-3次。
燃烧时要注意安全,须远离易燃易爆物品,如氧气、汽油、乙醚等。
燃烧过程不得添加乙醇,以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。
锐利刀剪为保护刀锋,不宜用燃烧灭菌法。
焚烧某些特殊感染,如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料,以及其它已污染且无保留价值的物品,如污纸、垃圾等,应放入焚烧炉内焚烧,使之炭化。
3、电热培养箱利用培养箱的热空气消毒灭菌。
培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流,产生均一效应的热空气直接穿透物体。
一般繁殖体在干热80-100℃中经1小时可以杀死,芽胞、病毒需160-170℃经2小时方可杀死。
热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂等。
灭菌后待箱内温度降至50-40℃以下才能开启柜门,以防炸裂。
4、微波消毒微波是一种高频电磁波,其杀菌的作用原理,一为热效应,所及之处产生分子内部剧烈运动,使物体里外湿度迅速升高;一为综合效应,诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。
目前已广泛应用于食品、药品的消毒,用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。
实验室常用消毒灭菌方法
实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等,每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要,直接影响着整个实验能否顺利进行。
目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1、湿热灭菌法湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法,压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
分为三种:(1)流通蒸气灭菌法:是指在常压条件下,采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法,灭菌时间通常为30-60分钟。
该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌,但不能保证杀灭所有芽孢,是非可靠的灭菌方法。
(2)间歇蒸汽灭菌法:利用反复多次的流通蒸汽加热,杀灭所有微生物,包括芽胞。
方法同流通蒸汽灭菌法,但要重复3次以上,每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜,目的是使芽胞发育成繁殖体。
若被灭菌物不耐100℃高温,可将温度降至75℃~80℃,加热延长为30~60分钟,并增加次数。
适用于不耐高热的含糖或牛奶的培养基。
(3)高压蒸汽灭菌法:103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃,维持15-20分钟。
2、干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120ºC~150ºC的高热,并保持90~120分钟,杀死细菌和芽孢,达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌,且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥,易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一,在进行动物细胞体外培养工作时,常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
化学灭菌方法
化学灭菌方法化学灭菌方法是一种通过使用化学物质来杀灭或去除细菌、病毒和其他微生物的方法。
它在医疗、实验室和食品工业等领域得到广泛应用。
本文将介绍几种常见的化学灭菌方法及其原理。
一、酒精灭菌法酒精灭菌法是一种常见的化学灭菌方法,常使用70%的乙醇溶液进行消毒。
酒精能够破坏细菌的蛋白质结构和细胞膜,从而杀死细菌。
这种方法适用于表面消毒,但对于一些耐酒精的细菌和孢子可能不够有效。
二、过氧化氢灭菌法过氧化氢灭菌法是一种常用的化学灭菌方法,常使用3%的过氧化氢溶液。
过氧化氢能够产生氧自由基,对细菌的蛋白质、核酸和细胞膜产生氧化作用,从而杀死细菌。
这种方法广泛应用于医疗设备的消毒,但对于某些耐氧化作用的细菌可能不够有效。
三、氯化物灭菌法氯化物灭菌法是一种常见的化学灭菌方法,常使用含氯消毒剂如次氯酸钠溶液。
氯化物能够破坏细菌的细胞膜和细胞内的蛋白质,从而杀死细菌。
这种方法适用于表面消毒和水处理等领域。
四、气体灭菌法气体灭菌法是一种常用的化学灭菌方法,常使用乙烯氧化物、过氧乙酸或氧化亚氮等气体。
这些气体能够渗透到细菌的细胞内部,对细菌的蛋白质和核酸产生氧化作用,从而杀死细菌。
这种方法适用于灭菌物品的包装和密闭空间的消毒。
五、臭氧灭菌法臭氧灭菌法是一种常用的化学灭菌方法,常使用臭氧气体进行消毒。
臭氧能够破坏细菌的细胞膜和核酸,从而杀死细菌。
这种方法广泛应用于水处理、食品工业和医疗设备的消毒。
除了上述常见的化学灭菌方法外,还有一些其他方法也被广泛应用。
例如,紫外线照射能够破坏细菌的核酸,从而杀死细菌。
电解水是一种通过电解产生氯离子的方法,也可以用于灭菌。
冷凝碘灭菌法是一种使用碘蒸气进行消毒的方法。
总结起来,化学灭菌方法是一种通过使用化学物质来杀灭或去除细菌、病毒和其他微生物的方法,包括酒精灭菌法、过氧化氢灭菌法、氯化物灭菌法、气体灭菌法、臭氧灭菌法和其他一些方法。
这些方法各有优缺点,应根据具体情况选择合适的灭菌方法。
细胞工程实验室常用的灭菌方法和所适用的灭菌材料
细胞工程实验室在进行细胞培养和实验操作时需要保持无菌环境,以确保实验结果的准确性和可靠性。
而灭菌就是维持实验室无菌环境的重要手段之一。
灭菌方法和所适用的灭菌材料是实验室工作中不可或缺的部分,下面将介绍细胞工程实验室常用的灭菌方法和所适用的灭菌材料。
一、常用的灭菌方法1. 高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌是实验室中常用的灭菌方法之一,通过高温、高压的蒸汽对实验器材进行灭菌。
这种方法能够快速且有效地灭杀细菌、真菌和病毒,对各类器皿、培养皿、培养瓶等物品都适用。
常见的高压蒸气灭菌设备有高压灭菌锅和培养箱。
2. 紫外线灭菌紫外线灭菌是利用紫外线对物品表面进行灭菌的方法,适用于实验室器皿、工作台面等表面的灭菌。
紫外线灭菌的优势在于不需要加热和化学药剂,操作简便,但其效果受到光线照射范围和时间的限制。
3. 酒精消毒酒精消毒是实验室常用的表面消毒方法,适用于对器皿、试剂瓶等物品进行简单的灭菌。
酒精能够迅速杀灭大部分细菌和真菌,是实验室内常备的消毒材料之一。
二、适用的灭菌材料1. 高压灭菌锅高压灭菌锅是进行高压蒸气灭菌的常用设备,通常由不锈钢制成,具有耐压、耐高温、密封性好等特点。
在进行器皿、培养瓶等物品的灭菌时,高压灭菌锅是必不可少的设备之一。
2. 培养箱培养箱既可以用于培养细胞,也可以用于对实验器皿等物品进行高温、高压蒸气灭菌。
在细胞工程实验室中,培养箱也经常用作高压蒸气灭菌设备。
3. 紫外线灭菌灯紫外线灭菌灯是用于实验室表面消毒的工具,通过紫外线对工作台面、器皿表面进行灭菌。
紫外线灭菌灯通常采用紫外C波段,能够快速、有效地消毒实验室表面。
4. 酒精酒精是实验室常备的消毒材料之一,适用于对实验器皿、试剂瓶等物品的简单消毒。
在进行实验前,使用酒精对实验器皿进行表面消毒是十分必要的步骤。
三、结语细胞工程实验室常用的灭菌方法包括高压蒸气灭菌、紫外线灭菌和酒精消毒,而适用的灭菌材料包括高压灭菌锅、培养箱、紫外线灭菌灯和酒精等。
实验室常用灭菌方式?
实验室常用灭菌方式?一、高温干热灭菌原理:利用高温干热空气使蛋白质变性或凝固,核酸破坏,酶失去活性,杀死细菌和芽孢,导致微生物死亡。
灭菌范围:主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌,且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥,易于贮存。
二、高温湿热灭菌原理:利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使微生物的蛋白质及核酸变性导致其死亡。
这种变形首先是分子中的氢键分裂,当氢键断裂时,蛋白质及核酸内部结构被破坏,进而丧失了原有功能。
灭菌范围:适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和PBS的灭菌。
三、过滤除菌原理:是用物理阻留的方法将液体或空气通过有微孔的滤膜过滤,使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留除去,以达到无菌目的。
目前,常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌,或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。
滤膜孔径应在0.22~0.45μm范围内或用更小的细菌滤膜,溶液通过滤膜后,细菌和孢子等因大于滤膜孔径而被阻,并利用滤膜的吸附作用,阻制小于滤膜孔径的细菌透过。
灭菌范围:主要用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、血清、毒素、抗生素、培养基等不耐热生物制品及空气的除菌。
四、酒精喷洒原理:75%的酒精与病毒的渗透压相近,可以在病毒表面蛋白未变性前逐渐不断地向病毒体内部渗入,使病毒所有蛋白脱水、变性凝固,最终杀死病毒。
切记:酒精的浓度不宜过高或过低。
(1)酒精浓度低于75% 时:由于渗透性降低,也会影响杀死病毒能力。
(2)酒精浓度过高:对病毒蛋白脱水过于迅速,使病毒表面蛋白质首先变性凝固,形成了一层坚固的包膜,酒精反而不能很好地渗入病毒内部,以致影响其杀死病毒能力。
消毒范围:超净台、安全柜、传递窗在使用完成后应用75%酒精擦拭、器材的浸泡等。
注意:在使用酒精消毒时不要大面积喷洒,需要保证通风,远离高温的物体与明火,避免发生火灾。
培养基灭菌的常用方法
培养基灭菌的常用方法培养基灭菌是在微生物实验室中进行微生物研究和培养时必不可少的步骤之一、灭菌的目的是杀死或去除培养基中的所有微生物,以确保实验得出的结果是由引入的特定微生物引起的,而不是其他微生物的污染。
下面将介绍一些常用的培养基灭菌方法。
1.热灭菌方法(高温灭菌):热灭菌是一种简单而广泛使用的培养基灭菌方法。
高温能有效地杀死或去除培养基中的大部分微生物。
常见的热灭菌方法包括:-干热灭菌:将培养基放入烤箱或高温灭菌器中,在170°C至180°C下加热2至3小时。
这种方法适用于含有熔点较高的成分的培养基,如糖肉汤。
-湿热灭菌(压力灭菌):常用的方法是使用高压蒸汽灭菌器(也称为压力釜)进行培养基的灭菌。
在121°C至134°C的高温下,通过给培养基施加高压蒸汽,可以在短时间内杀死或去除培养基中的微生物。
这种方法适用于绝大多数常见的培养基。
2.过滤灭菌方法:过滤灭菌是一种无需高温的灭菌方法,适用于含有热敏感成分的培养基。
过滤灭菌方法通常使用微孔过滤器将培养基通过过滤膜来除去微生物。
常见的过滤灭菌方法包括:-常压过滤:将培养基通过微孔滤膜过滤,常用的滤器孔径为0.22微米或0.45微米,以保留大部分微生物。
这种方法适用于灭菌前培养基体积较小的情况。
-打压力过滤灭菌:通过使用活性碳或膜微孔过滤器,将压力加到过滤器上,可以加速微生物的过滤速度。
这种方法适用于较大体积的培养基。
3.化学灭菌方法:化学灭菌是使用化学物质来杀灭或去除培养基中的微生物的方法。
常见的化学灭菌方法包括:-醋酸灭菌:将培养基浸入醋酸中浸泡3至4小时,然后用蒸馏水冲洗,可以有效地杀死或去除绝大多数微生物。
这种方法适用于含有热敏感成分的培养基。
-过氧化氢灭菌:将过氧化氢加入培养基中,使其达到高浓度,然后静置一段时间,再用蒸馏水冲洗。
过氧化氢可以氧化微生物细胞的组分,以达到杀菌的效果。
这种方法适用于较小体积的培养基。
灭菌方法及适用范围
灭菌方法及适用范围灭菌是指杀灭或去除所有微生物的过程,是一种常见的微生物控制方法。
在医疗、食品加工、实验室等领域,灭菌都扮演着至关重要的角色。
本文将介绍常见的灭菌方法及其适用范围,希望能够为相关领域的从业人员提供参考。
一、热力灭菌。
热力灭菌是利用高温杀灭微生物的方法,常见的热力灭菌方法包括干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌适用于耐热器皿、玻璃器皿等物品的灭菌,其温度和时间取决于被灭菌物品的特性。
湿热灭菌则适用于耐热塑料器皿、培养基等物品的灭菌,常见的方法包括蒸汽灭菌和高压灭菌。
二、化学灭菌。
化学灭菌是利用化学药剂杀灭微生物的方法,常见的化学灭菌方法包括乙烯氧化灭菌、过氧化氢灭菌等。
乙烯氧化灭菌适用于对温度敏感的器皿和设备的灭菌,其优点是能够渗透到器皿的每个角落进行灭菌。
过氧化氢灭菌适用于对乙烯氧化灭菌敏感的物品的灭菌,其优点是灭菌后无残留物质。
三、辐射灭菌。
辐射灭菌是利用辐射杀灭微生物的方法,常见的辐射灭菌方法包括紫外线灭菌和γ射线灭菌。
紫外线灭菌适用于对物品表面进行灭菌,其优点是不产生化学污染物。
γ射线灭菌适用于对大批量物品进行灭菌,其优点是能够穿透物品对微生物进行杀灭。
四、适用范围。
不同的灭菌方法适用于不同的场合和物品。
热力灭菌适用于对耐热物品的灭菌,如玻璃器皿、金属器皿等;化学灭菌适用于对温度敏感的器皿和设备的灭菌,如塑料器皿、培养基等;辐射灭菌适用于对表面进行灭菌或对大批量物品进行灭菌的场合。
总之,灭菌是微生物控制的重要手段,不同的灭菌方法适用于不同的场合和物品。
在选择灭菌方法时,需要根据被灭菌物品的特性和灭菌要求进行综合考虑,以确保灭菌效果和物品质量。
希望本文能够为相关领域的从业人员提供一些帮助。
以上就是本文对灭菌方法及适用范围的介绍,希望对您有所帮助。
祝您工作顺利!。
微生物实验室常用消毒、灭菌方式汇总
微生物实验室常用消毒、灭菌方式汇总微生物试验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等,每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要,直接影响着整个试验能否顺当进行。
(一)常见消毒灭菌方法目前,常用的消毒灭菌方法多采纳物理方法(如,干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线消毒法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1.干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120℃~170℃的高热,并保持90~120分钟,杀死细菌和芽孢,达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌,且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥,易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一,在进行动物细胞体外培育工作时,常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2.湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培育液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0~1.1 kg/cm2,维持20~30min即可达到灭菌效果。
3.射线消毒法利用紫外线灯进行照耀消毒的方法。
紫外线是一种低能量的电磁辐射,可以杀灭多种微生物。
紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。
适合于试验室空气、地面、操作台面消毒。
消毒时间为30min。
用紫外线杀菌时应留意,不能边照耀边进行试验操作,由于紫外线不仅对人体皮肤有损害,而且对培育物及一些试剂等也会产生不良影响。
4.过滤除菌法是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤,使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留,从而达到除菌的方法。
过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培育液等。
实验室常用灭菌方法
实验室常用灭菌方法实验室是一个进行科学研究和试验的地方,其中可能存在各种微生物,包括细菌、病毒和真菌等。
为了确保实验的准确性和安全性,实验室必须采取适当的灭菌方法来杀灭这些微生物。
物理灭菌方法包括:1.高温灭菌:高温灭菌是最常用的物理灭菌方法之一、常见的高温灭菌设备有高压灭菌器和烘箱。
在高温条件下,可以杀灭包括细菌、病毒和真菌在内的微生物。
高压灭菌器通常使用蒸汽,在121℃下灭菌物品20分钟,而烘箱通常在160℃下灭菌物品2小时。
2.紫外线灭菌:紫外线灭菌利用紫外线的辐射杀灭微生物。
紫外线具有破坏微生物DNA的能力,从而对微生物的细胞分裂和繁殖产生抑制作用。
实验室常用的紫外线灭菌设备有紫外线灯箱和紫外线传感器。
化学灭菌方法包括:1.酒精消毒:酒精消毒是一种常见的化学灭菌方法。
酒精对细菌、病毒和真菌具有广谱杀菌作用。
常见的酒精消毒剂有乙醇和异丙醇。
酒精消毒可以直接喷洒或浸泡实验器材和工作台面等表面。
2.其他化学消毒剂:实验室还可以使用其他化学消毒剂,如过氧化氢、次氯酸钠和氯化钠等。
这些消毒剂可以杀灭微生物,并且对环境和人体较为安全。
除了以上的物理和化学灭菌方法,实验室还有其他一些灭菌方法,如微生物过滤和辐照灭菌。
1.微生物过滤:微生物过滤是一种通过过滤器将微生物从液体或气体中去除的灭菌方法。
过滤器可以选择不同的孔径,可以选择将不同大小的微生物滤除。
2.辐照灭菌:辐照灭菌是一种使用电离辐射来杀灭微生物的方法。
常用的辐射灭菌方法是γ射线灭菌和电子束灭菌。
这些方法可以杀灭各种微生物,但需要特殊的设备和条件。
在实验室中,根据需要可选择不同的灭菌方法。
一般来说,物理灭菌方法更适用于固体和耐高温的试剂器材,而化学灭菌方法更适用于液体和易燃物品。
同时,实验室中要做好灭菌前的准备和灭菌后的处理工作,包括清洗和消毒工作台、分装媒体和试剂等。
总之,在实验室中,合适的灭菌方法选择与正确的操作是确保实验的准确性和安全性的重要环节,它可以有效地杀灭和控制微生物的生长,防止污染和感染的发生。
实验室常用消毒灭菌整体方案
实验室常用消毒灭菌整体方案实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等,每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要,直接影响着整个实验能否顺利进行。
目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、生物抑菌)两大类。
01干热灭菌法02湿热灭菌法细菌的繁殖体在干燥状态下,80ºC-100ºC 1小时可被杀死;芽胞需要加热至160ºC-170ºC 2小时才杀灭。
在干热状态下,由于热穿透力较差,微生物的耐热性较强,必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。
因此,干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。
为了保证灭菌效果,一般规定:135-140摄氏度灭菌3-5h;160-170摄氏度灭菌2-4h;180-200摄氏度灭菌0.5-1h。
干热灭菌法适用于耐高温的玻璃和金属制品,以及不允许湿热气体穿透的油脂(如油性软膏机制、注射用油等)和耐高温的粉末化学药品的灭菌。
注意事项:待灭菌的物品干热灭菌前,应洗净,防止造成灭菌失败或污物炭化,玻璃器皿灭菌前应洗净并干燥,灭菌时勿与烤箱底部及四壁接触,灭菌后要使温度降到40℃以下再开箱,防止炸裂。
西冲推荐yamto 干热灭菌器:按美国FDA 标准设计,最高工作温度260ºC ,温度控制精确箱体外壳低于50ºC无风密闭型设计,可以避免细菌扩散到室内。
压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
加热器将罐体内的水加热直至沸腾,蒸气被密封在罐体内,积聚而产生压力。
蒸气的压力增高,温度也随之增高。
用蒸气压力104.0-137.3kPa 时,温度可达121-126℃,维持30分钟,即能杀死包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞在内的一切细菌,达到灭菌目的。
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实验室常用灭菌方法 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
实验室常用灭菌方法
1.高压蒸汽灭菌
为湿热灭菌方法的一种。
是微生物培养中最重要的灭菌方法。
这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去,而聚集在密封的容器中,在密闭的情况下,随着水的煮沸,蒸汽压力升高,温度也相应增高。
(PV=nRT)
高压蒸汽是最有效的灭菌法,能迅速地达到完全彻底灭菌。
一般在15磅/英寸2压力下(℃),15~30分钟,所有微生物包括芽孢在内都可杀死。
它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。
进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。
高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅,有立式与卧式两种。
可以用电热、煤气、蒸汽等。
锅上装有压力表,有的还装有温度计,能及时了解锅内压力及温度。
锅上还设有排气口,其作用是在密闭之前,利用蒸汽将锅内的冷空气排净,另外还装有安全活门,如果压力超过一定限度,活门即可自动打开,放出过多的蒸汽。
2.干热灭菌
微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。
一般在电烘箱中进行。
干热灭菌所需温度较湿热灭菌高,时间也较湿热灭菌长。
这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。
一般须在160℃左右保持恒温3~4小时,方能达到灭菌的目的。
干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基,都不能进行干热灭菌。
3.间歇灭菌
各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。
而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。
间歇灭菌就是根据这一原理进行的。
间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体,然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时,使芽孢和孢子萌发成为营养体。
这时再以100℃处理半小时,再放置24小时。
如此连续灭菌3次,即可达到完全灭菌的目的。
间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行,也可用普通铝锅代替。
这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌,这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间,会被破坏,而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用,又使被处理的物质免遭破坏。
4.紫外线灭菌
紫外线杀菌力最强的是波长2650~2660?(10-1nm)的部分。
无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。
无菌室和缓冲间的照射时间为20~50分钟(视房间大小而定),接种箱照射10~15分钟即可。
为了加强紫外线灭菌的效果,在照射前,可在无菌室、缓冲间或接种箱内喷洒5%石炭酸,以使空气中附着有微生物的尘埃降落,同时也可以杀死一部分微生物。
无菌室的工作台的台面和椅子,可用2~3%的来苏儿擦洗。
然后再照射紫外线。
由于紫外线对人体有伤害作用,所以人不要直视正在照射的紫外线灯,也不要在照射情况下进行工作。
灭菌后,为了检验紫外线的灭菌效果,可以在无菌室、缓冲间或接种箱内放一套盛有培养基的培养皿,将皿盖打开5~10分钟,盖好后,放入温箱中培养。
如果只有一、二个菌落,可认为灭菌效果良好。
如杂菌丛生。
则需延长照射时间或同时加强其它灭菌措施。