血清尿酸UA测定
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血清尿酸UA测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。
2 实验原理
尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。
尿酸+2H2O+O2尿酸酶尿囊素+ CO2 + H2O2
在过氧化物酶存在的情况下,4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。
2H2O2+H++TOOSa+4-氨基比林过氧化物酶醌二亚胺+4 H2O
醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比,可通过测定吸光度的上升来获得。
3 标本:
3.1 病人准备:使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h 分离血清.
3.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆,尿液。
3.3 标本存放:血清、血浆的稳定性:20~25℃保存可稳定3天;4~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测,结果乘11后报告。
3.4 标本运输:常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准:细菌污染的标本。
4 实验材料
4.1 试剂:上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056
YZB/GER 5724-2014)
4.1.1 试剂组成
R 1 磷酸盐缓冲液:0.05 mol/L,pH 7.8;TOOS:7 mmol/L;脂肪醇聚乙二醇醚:4.8%;抗坏血酸盐氧化酶(EC 1.10.3.3;胡瓜)≥83.5 μkat/L(25℃)
R 2 磷酸盐缓冲液:0.1 mol/L,pH 7.8;亚铁氰化钾(Ⅱ):0.3 mmol/L;4-氨基比林≥3mmol/L;尿酸酶(EC
1.7.3.3;原生节杆菌)≥83.4 μkat/L(25℃);过
氧化物酶(POD)(EC 1.11.1.7;辣根)≥50μkat/L
(25℃)
4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:2-8℃下的保存期限:见试剂标签上的有效期。机上稳定期: 4周
4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。
4.2 校准品:使用罗氏多项生化校准品提供的UA校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
8 计算方法
以UA复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以 mol/L报告。
9 参考值范围:(μmol/L)
血清/血浆
女性男性成人 140~339.2 200~420
儿童
0~5天 113~470 113~470 1~4岁 101~303 131~470
5~11岁 178~381 178~381
12~14岁 190~363 190~440
15~17岁 190~381 268~482
尿液≤4.76mmol/d(正常饮食)
≤3.57mmol/d(低嘌呤饮食)参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。
我室参考值范围女: 140-340 μmol/L
男 :200-420μmol/L
10 临床意义
尿酸和尿酸盐是嘌呤代谢的最终产物。痛风是高尿酸血症最常见的并发症,血清尿酸水平的升高导致在关节处生成尿酸钠晶体。此外导致血液中尿酸升高的原因还有:排泄功能下降的肾脏疾病,饥饿,滥用药物,过度饮酒或某些药物的使用。高尿酸水平也是冠心病的间接危险因子之一。低尿酸血症较少见,其与罕见的遗传代谢紊乱有关。肾脏疾病如急慢性肾炎,肾结石,痛风,以及体内酸分解代谢过盛的疾病,如慢性白血病、多发性骨髓瘤,真性红细胞增多症等可使尿酸量增离,而恶性贫血及应用ACTH皮值素,阿斯匹林等药物时,血中尿酸量下降。
11 操作性能
按照内部协议使用人样本和质控品检测其可重复性。重复性(n=21),中间精密度(每批3管,每天1批,21天)测定结果如下:
血清/血浆
样本重复性批间精密度