天然药化实验print

天然药物化学实验指导

何祥久，刘一品编写

武汉大学药学院

2009年6月

《天然药物化学》实验规则

1. 实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作规程。随时记录实验项目及其现象，以撰写正式实验报告。

2. 实验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确，合格后方可进行实验。实验时不准做与实验无关的事情，严禁吸烟，不得擅自离开实验室，并应随时注意反应情况，仪器是否漏气、破裂等。

3. 药品仪器都须节约爱护使用；公用物品，用后立即放归原处，以便他人使用。不可调错瓶塞，以免污染。器皿用后要洗刷干净。

4. 操作易燃性有机溶剂，回流、蒸馏、减压蒸馏时，不能明火直接加热，要放沸石或一端封死的毛细管。若在加热时发现未放沸石则应冷却后再加，防止爆沸冲出。减压系统应装有安全瓶。加液时应停火或远离火源，勿漏气开口，冷凝水要通畅。启封易挥发溶剂瓶盖时，脸面要避开瓶口慢慢开口，以防气体冲脸上，危机尊容。

5. 有毒、腐蚀性药品应妥善保管，操作后要立即洗手。勿沾及五官、创口及身体暴露部位，以免中毒、损伤皮肤。

6. 实验中，应在通风橱中使用毒气或腐蚀性气体，必要时，可戴防护用具进行工作。

7. 若将玻璃管插入塞中时，可在塞孔中涂些水或甘油等润滑剂，用布包住玻璃管使其旋转而入，防止折断割伤。

8. 实验台上勿放置与实验无关物品，随时保持水槽、仪器、桌面、地面整洁。

9. 实验结束时，应将门、窗、水、电、煤气关好，室内打扫干净，并清点仪器后方可离开实验室。

10．实验室常见的事故如下，应予以特别注意：

(1) 蒸馏或回流时，发现未放沸石，未等溶液冷却就补加沸石，结果溶液冲出瓶外，

容易引起火灾。

(2) 蒸馏易燃物时，未通冷却水，大量蒸气逸出易引起火灾。

(3) 蒸馏易燃物时塞子漏气引起火灾。

(4) 用三角烧瓶做减压装置的受器，结果炸裂。

(5) 减压操作结束后，放气太快，使压力计冲破。

(6) 使用真空干燥器时，未关闭真空泵就直接开干燥器的放气阀，结果使泵内的机油

被吸到干燥器中，使样品被污染等。

《天然药物化学》安全防火须知

1. 实验室存放易燃性有机溶剂时要远离火源，存量不得超过500mL。

2. 在进行易燃性有机溶剂实验时，须按照操作规程进行。不可将易挥发、易燃性有机溶

剂倒入水槽或废液缸内。

3. 烘箱内不能烘盛有易燃性溶剂的器皿。

4. 消防器材、砂箱、石棉布、灭火器等应放在方便固定的地点，不能随意移动，均应处

于备用状态。

5. 万一不慎着火，要沉着冷静积极抢救。应立即切断室内电源和火源，用石棉布将着火

部位盖严，使其隔绝空气而熄灭。或视火势情况选用适当灭火器材进行灭火。在实验室使用二氧化碳灭火器较好，它具有不腐蚀、不导电等优点。

实验一 氧化苦参碱的提取分离和鉴定

1 概述

中药苦参是豆科植物苦参(Sophora flavescens Ait)的干燥根，有清热燥湿、杀虫、利尿之功效。苦参在临床上用于杀虫、治疗痢疾、肝炎、荨麻疹、湿疹、气管炎等。药理实验证明苦参总生物碱有抗心律失常及抗癌活性等。苦参中主要含生物碱和黄酮类成分。苦参中主要生物碱有：苦参碱(1)、氧化苦参碱(2)、槐定(3)、槐果碱(4)，结构如Fig.1。氧化苦参碱有抗癌、抗衰老等作用。

苦参碱 氧化苦参碱 槐定 槐果碱

Fig. 1 苦参中主要生物碱的化学结构

Table 1.1 主要苦参生物碱的理化性质

中英名称 分子式 性状 mp()

℃旋光

溶解度

苦参碱 (matrine) C 15H 24N 2O

白色针状结晶

76 +39.11°

易溶于醇、氯仿，溶于乙醚、苯，难溶于水氧化苦参碱 (oxymatrine) C 15H 24N 2O 2 白色方晶207-208+47.7°

易溶于水、乙醇、甲醇、氯仿，不溶于乙醚、苯

槐定 (sophoridine)

C 15H 24N 2O 白色棱晶

106-108

槐果碱

(sophocarpine)

C 15H 22N 2O 白色棱晶

80-81 -29.44°

同上

从苦参中提取生物碱一般用水、酸水或醇提法，粗提物用树脂法或酸碱法纯化，分离方法多用氧化铝或硅胶柱层色谱。

N

N

O

2 实验目的与要求

2.1 掌握渗漉法的原理、操作与影响因素，了解离子交换树脂的结构、性质及使用方法。 2.2 掌握连续回流提取法的原理、特点及仪器的使用方法。 2.3 学习粗提物的纯化方法，学会分析纯化过程中所应用的原理。 2.4 进一步理解对粗品进行检识的意义及方法。

3 操作步骤

3.1 实验装置图

3.2 离子交换树脂的预处理

将70g 聚苯乙烯磺酸型树脂(交联度3%)，放入烧杯中，加200ml 80℃的蒸馏水溶胀30分钟，倾出蒸馏水后加入2mol/L 盐酸300ml ，充分搅拌，放置半小时(静态转型)，后装入树脂柱(2cm×100cm)，并使全部酸水溶液通过树脂柱(动态转型)，流出液的速度以液滴不成串为宜。后用蒸馏水洗至中性，待用。注意从装柱到洗涤过程中始终保持液面高于树脂床。

Fig. 1.2 实验装置图

3.3 总生物碱的提取与纯化

称苦参根的粉末200g，加入260ml左右0.5%的盐酸湿润，搅匀，放置20分钟后装入渗漉筒，加入适量0.5%盐酸至下口有溶液流出且筒内无气泡。

将渗漉筒与树脂柱相连，计算渗漉速度。然后以合适的流速开始渗漉和离子交换，实验开始时及每过1小时之后检查渗漉液和交换液的pH值和生物碱反应，并讨论其变化的原因。当生物碱提取完全或树脂完全饱和时终止实验。

停止渗漉后，用蒸馏水洗树脂至中性，倾出水层，将树脂倒入搪瓷盘中，铺平，空气中晾干。

将晾干的树脂称重后放入烧杯中，加14%的氨水湿润(使树脂充分溶胀又无过剩的水)，加盖，静置20分钟，装入沙氏提取器，用300ml 95%乙醇回流提取生物碱约6小时，中间注意检查生物碱是否已被提取完全。停止实验后，将树脂回收，提取液置500ml三角瓶中保存。

3.4 氧化苦参碱粗品的获得

将乙醇提取液常压回收乙醇至小体积（6ml左右），加入70ml~80ml氯仿溶解，转入分液漏斗中，静置分层，分出氯仿层，油状物另外保存。氯仿溶液用无水硫酸钠干燥1~2小时(注意干燥过程中经常振摇)，回收氯仿至干。残留物用丙酮析晶，即析出黄白色固体，放置，抽滤，用少量丙酮洗涤，得氧化苦参碱粗品，交给老师，放干燥器中干燥，母液放置待用。氧化苦参碱粗品用丙酮重结晶可得其精品。

4. 生物碱的定性试验

4.1 取渗漉液1 mL，加硅钨酸试剂(Bertrad’s reagent ) 数滴，产生淡黄色沉淀

4.2 取渗漉液1 mL，加碘化钾试剂 (Wagner’s reagent) 数滴，产生棕褐色沉淀

4.3 取渗漉液1 mL，加碘化铋钾试剂 (Dragendorff’s reagent) 数滴，产生棕红色沉淀

5．氧化苦参碱的分离

5.1 薄层分析

方法：硅胶HF254-CMC碱性薄层，调合剂为0.5%CMC溶液—4%NaOH(9:1)，(5×15cm2，4块/人)

展开剂：①氯仿—甲醇（4:1）