临床生化检验方法的选择和评价

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实验 重复性 回收 干扰 方法对比 重复性和方法对比
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（TE） TE）
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一、方法评价方案
（一）精密度评价 1．目的要求 反映精密度好坏的指标是变异系数CV，CV越 小精密度越好，反之则差，故有人称其为不 精密度。 变异系数CV包括：批内、批间、日间和总CV， 其中总CV最重要，它代表整个分析体系的可 重复程度。
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随机误差
试 验 方 法 结 果
恒定系 统误差
比例系统误差
比较方法结果
误差类型示意图
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揭示误差类型的实验
误差类别 随机误差（RE） 随机误差（RE） 比例误差（PE） 比例误差（PE） 恒定误差（CE） 恒定误差（CE） 系统误差（SE） 系统误差（SE） 总误差
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三级方法的相互关系
应 用 范 围
常规方法
准 确 度 增
参考方法
增 加
加
方法
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（二）标准品的分级 国际标准化委员会将标准品wk.baidu.com参考物） 国际标准化委员会将标准品（参考物） 定义为 一类具有一种或多种成分、 的定义为：一类具有一种或多种成分、 且含量均匀确定的物质。 ；被用于校正 且含量均匀确定的物质。 仪器或用于评价一种测定方法的物质， 仪器或用于评价一种测定方法的物质， 并将其分成三级。 并将其分成三级。
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2．二级标准品（次级参考物， 二级标准品（次级参考物，
secondary reference material
） 包括用于
常规分析的标准液。 常规分析的标准液。这类标准品可由实 验室自已配制或为商品， 验室自已配制或为商品，它的示值必须 用一级标准品和参考方法并由训练有素 的，能熟练掌握参考方法的操作者确定； 能熟练掌握参考方法的操作者确定； 主要用于常规方法的评价或为控制物定 值和常规测定的结果计算。 值和常规测定的结果计算。
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二、方法学评价的基本步骤
1. 2.
确定方法的质量目标 选定及进行适当的揭示分析误差类 型的实验 收集试验数据， 收集试验数据，进行统计学分析 判断方法 的可接受性
3. 4.
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一 检验方法和标准品的分级
（一）方法的分级 临床生化检验方法根据其准确度与精密 度的不同可以分为决定性方法、 度的不同可以分为决定性方法、参考方 法、常规方法等三级。 常规方法等三级。
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3．校准品（calibrator） 用二级标准品和常 ） 规方法测定得到校准品， 规方法测定得到校准品，用于常规测定中 的标准 4 .控制物（control material） 具有与 .控制物 控制物（ material） 检测过程相适应的特性，其成分及基质与 检测过程相适应的特性， 检测样本相同或相似，且均匀、稳定。 检测样本相同或相似，且均匀、稳定。 用于质量控制，控制患者样本的测定误差 用于质量控制，
第二节 临床生化检验方法学评价
一、方法学评价的意义和内容
方法学评价（ 方法学评价（evaluation of methodology） methodology）通过实验途径测定分析 方法的技术性能， 方法的技术性能，并评价其是否能接 受。 评价实验的过程就是对误差的测定。 评价实验的过程就是对误差的测定。
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三、误差的分类和表示
1.系统误差（SE） 1.系统误差（SE） 系统误差 定义： 定义： 指测定值与真值存在的同一倾向的偏 系统误差或正或负，即具有单向性， 差。系统误差或正或负，即具有单向性， 一般由恒定的因素引起， 一般由恒定的因素引起，并在一定条件 下多次测定中重复出现。 下多次测定中重复出现。
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三、误差的分类和表示
2.系统误差分类 系统误差分类 恒定系统误差（ ） 恒定系统误差（CE） 指测定值与真值之间存在恒定的 误差，其大小与干扰物浓度相关， 误差，其大小与干扰物浓度相关，而与 被测物浓度无关。 被测物浓度无关。 比例系统误差（ ） 比例系统误差（PE） 误差大小与被测物浓度成正比。 误差大小与被测物浓度成正比。
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（二）标准品的分级 1．一级标准品（原级参考物，primary 一级标准品（原级参考物， reference material ） 是一种稳定而均一 的物质，它的数值已由决定性方法确定， 的物质，它的数值已由决定性方法确定， 或由高度准确的若干方法确定， 或由高度准确的若干方法确定，所含杂 质也已经定量，且有证书； 质也已经定量，且有证书；用于校正决 定性方法， 定性方法，评价及校正参考方法以及为 二级标准品定值。 二级标准品定值。
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三、误差的分类和表示
3.随机误差（RE） 3.随机误差（RE） 随机误差 定义： 定义： 多次重复测定某一物质时出现的误 误差无一定的大小和方向， 差，误差无一定的大小和方向，数据 呈正态分布。 呈正态分布。
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method） 2．参考方法（reference method） 是 参考方法（ 指准确度与精密度已经充分证实的分析 方法，干扰因素少， 方法，干扰因素少，系统误差与重复测 定的随机误差相比可以忽略不计， 定的随机误差相比可以忽略不计，有适 当的灵敏度、特异性及较宽的分析范围。 当的灵敏度、特异性及较宽的分析范围。 这类方法在条件许可的实验室中应经常 使用。用于评价常规方法和试剂盒， 使用。用于评价常规方法和试剂盒，鉴 定二级标准品。 定二级标准品。
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2．评价前的准备 ①对于评价对象和评价方案均应熟悉。 ②实验试剂应是同批次配制，或同一批号的商品 试剂盒和参考物，仪器也应处于良好的工作状态 ③实验用标本一般选择2个（亦可更多），一个 在正常范围或在医学决定水平附近，另一个为异 常值，实验标本的介质应与临床标本一致。 ④先作一个初步的批内精密度测定，即一个标本 重复测定20次，计算出均值，标准差和变异系数
二级参考物 用途： 用途：常规方法的工作 标准及为控制物定值
各级实验方法与参考物的相互关系
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二 常规方法选择的原则
（一）适用性
微量快速 方法简便 安全可靠 成本低廉
（二）可靠性
较高精密度、 较高精密度、准确度 较好检测范围
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临床生化检验方法的选 择和评价
临床生化检验方法的选择和评价， 临床生化检验方法的选择和评价， 是临床生化检验质量控制的重要基础工 当建立一个新的方法， 作。当建立一个新的方法，或引进新的 方法、都应对它们的技术性能作出评价， 方法、都应对它们的技术性能作出评价， 以便科学的选择和应用。 以便科学的选择和应用。
（二）方法选择的步骤
（一）提出要求 （二）获取资料 （三）选定候选方法 （四）候选方法的初步试验 标准曲线的线性范围和重复性； 标准曲线的线性范围和重复性； 重复试验——精密度 精密度； 重复试验——精密度； 对比试验——准确度 准确度； 对比试验——准确度；
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method） 3．常规方法（routine method） 指性 常规方法（ 能指标符合临床或其他目的的需要， 能指标符合临床或其他目的的需要，有 足够的精密度、准确度、 足够的精密度、准确度、特异性和适当 的分析范围，而且经济实用。 的分析范围，而且经济实用。这类方法 经有关学术组织认可后可称为推荐方法 method）， ），推荐方法应 （recommended method），推荐方法应 具有足够的实验证据
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决定性方法 用途： 用途：评价参考方法 及为一级参考物定值
一级参考物 用途：发展和评价参考方法， 用途：发展和评价参考方法， 校正决定性方法和参考方法， 校正决定性方法和参考方法， 产生二级参考物
参考方法 用途：为二级参考物及控制物定值， 用途：为二级参考物及控制物定值， 评价常规方法（标准化、偏差、 评价常规方法（标准化、偏差、干扰 因素） 因素）
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(2)比较前准备 (2)比较前准备 实验者应熟悉所用的仪器、试验方法、 ①实验者应熟悉所用的仪器、试验方法、 比较方法和评价方案。 比较方法和评价方案。 ②实验标本应收集新鲜的正常和异常的 临床标本，应有足够宽的浓度范围， 临床标本，应有足够宽的浓度范围，各 浓度应有合适的比例。如不能及时测定， 浓度应有合适的比例。如不能及时测定， 标本应妥善保存并应在分析物的稳定期 内测定。 内测定。
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（二）准确度评价
1．方法比较试验 (1)要求 (1)要求 比较方法应是参考方法或推荐 方法， 方法，如该测定没有参考方法或推荐方 法亦可用公认的常规方法。 法亦可用公认的常规方法。 但须具备： 但须具备： 比较试验方法有更好的精密度。 ①比较试验方法有更好的精密度。 干扰影响已知。 ②干扰影响已知。 与试验方法使用相同的计算单位。 ③与试验方法使用相同的计算单位。
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主要的方法技术性能指标： 主要的方法技术性能指标： 准确度(accuracy) 准确度(accuracy) 灵敏度(sensitivity) 灵敏度(sensitivity) 特异度(specificity) 特异度(specificity) 分析测量范围(analytical 分析测量范围(analytical measure AMR)评价实验的过程就是对误 range, AMR)评价实验的过程就是对误 差的测定。 差的测定。
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method） 1．决定性方法（definitive method） 决定性方法（ 是指准确度最高，系统误差最小， 是指准确度最高，系统误差最小，经过 详细的研究，没有发现产生误差的原因 详细的研究， 或在某些方面不够明确的方法。 或在某些方面不够明确的方法。用于发 展及评价参考方法和一级标准品。 展及评价参考方法和一级标准品。
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3．评价步骤 用2个标本每天测定2次（2次测 定间隔不得少于2小时），每次测定均作双份， 共测定20天。每次测定至少做一个质控。
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（二）准确度评价
1．方法比较试验 将试验方法（待评价或待验证的方法）与 将试验方法（待评价或待验证的方法） 比较方法（ 比较方法（参考方法或准确度已知的方 进行比较， 法）进行比较，用于评价试验方法的恒 定和比例系统误差。 定和比例系统误差。