基因工程与蛋白质工程知识归纳及试题例析

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知识归纳及试题例析”“基因工程与蛋白质工程一、知识归纳分子相关的酶1．与DNA作用参与的生理过程应用名称基因工程限制性核酸内切酶切割某种特定的脱氧核苷酸序列

基因工程DNA连接酶DNA片段连接两个DNA复制在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧酸DNA聚合酶转录RNA聚合酶在核苷酸链上添加单个核糖核苷酸

DNA 解旋酶复制及转录使碱基间氢键断裂

逆转录及基因工程逆转录酶以RNA为模板合成DNA

特别注意：，DNA（1）限制性核酸内切酶的来源：多数来自原核生物；作用特点：主要切割外源不起作用从而达到保护自身的目的；作用结果：形成DNA片断末端。对自身的DNA）各种酶都具有专一性，特别是限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定（2 的碱基之间切开。．基因工程的基本操作程序2

（1）获取目的基因

①基因文库：是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中通过克隆而储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。

②基因组文库：基因文库中含有一种生物所有的基因就叫做基因组文库。

③部分基因文库：含有一种生物的部分基因，就叫做部分基因文库，如cDNA文库。

PCR技术与DNA复制的比较

比较项目PCR技术DNA复制

原理DNA双链复制（（碱基互补配对）相原料同四种游离的脱氧核苷酸

点条件模板、ATP、酶等

解旋方式解旋酶催化DNA在高温下变性解旋不主要在细胞核内场所体外复制同热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）细胞内含有的酶DNA聚合酶点在短时间内形成大量的DNA片段形成整个DNA分子结果

（2）基因表达载体的构建（基因工程的核心）

①构建目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。

②一个基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因等。

③构建方法

资料Word

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）将目的基因导入受体细胞—转化（3微生物细胞动物细胞生物种类植物细胞

Ca2+显微注射技术常用方法处理法农杆菌转化法

原核细胞受体细胞体细胞受精卵

Ca2+处理细胞→感受态细将目的基因插入Ti质粒的将含有目的基因的表达载体胞→重组表达载体与感受态提纯→取卵（受精卵）→显TDNA上→农杆菌→导入植转化过程细胞混合→感受态细胞吸收微注射→受精卵发育→获得物细胞→整合到受体细胞的DNA→表达DNA 具有新性

状的动物分子特别注意：受体细胞中常用植物受精卵或体细胞（经组织培养）、动物受精卵（一般不用体细胞）、微生物──大肠杆菌、酵母菌等，但要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必需用真核生物酵母菌──需内质网、高尔基体的加工、分泌。一般不用支原体，原因是它营寄生生活；一定不能用哺乳动物成熟红细胞，原因是它无细胞核和众多的细胞器，不能合成蛋白质。

（4）目的基因的检测与鉴定

3．基因工程和蛋白质工程比较

比较项目基因工程蛋白质工程

中心法则的逆转基因重组原理预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测获取目的基因→构建表达载体→导入受体过程氨基酸序列→合成DNA细胞→目的基因的检测与鉴定→表达出蛋白质

定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需区实质要的生物类型或生物产品（基因的异体表定向改造或生产人类所需要的蛋白质别

达）

结果生产自然界中已经有的蛋白质生产自然界中没有的蛋白质

蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程，对现有蛋白质的改造或制联系造新的蛋白质必须通过基因修饰或基因合成来实现

二、相关试题

1．下列关于基因工程的叙述，错误的是（）

A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物

B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶

资料Word

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C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性

D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达

2．下表有关基因表达的选项中，不可能的是（）

基因表达的的细胞表达产物

细菌抗虫蛋白细菌抗虫蛋白基因 A 抗虫棉叶肉细胞B 正常人皮肤细胞人酪氨酸酶基因人酪氨酸酶C 动物胰岛素动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌细胞

D

兔血红蛋白基因兔血红蛋白兔成熟红细胞3．下列叙述符合基因工程概念的是（）A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因

B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株

C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株

D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上

4．甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是

（）

A．甲方法可建立该细菌的基因组文库

B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库

C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料

D．乙方法需要逆转录酶参与

5．科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色莱航鸡的受精卵DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，而且用这些鸡蛋孵出的雌鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋。下列有关叙述正确的是（）

A．表达载体的导入运用了显微注射技术

B．受精卵的发育需要运用胚胎移植技术

C．这种变异属于不定向的变异

D．这种变异来源于染色体变异

6．科学家在某种农杆菌中找到了抗枯萎的基因，并以质粒为运载体，采用转基因方法培育出了抗枯萎病的金花茶新品种。下列有关说法正确的是（）

A．质粒是最常用的运载体之一，质粒的存在与否对宿主细胞生存有决定性的作用

B．通过该方法获得的抗枯萎病金花茶，将来产生的花粉中不一定含有抗病基因

C．该种抗枯萎病基因之所以能在金花茶细胞中表达，是因为两者的DNA结构相同

D．为保证金花茶植株抗枯萎病，只能以受精卵细胞作为基因工程的受体细胞

7．（双选）下列关于限制酶的说法，错误的是（）

A．限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布

B．自然界中限制酶的天然作用是用来提取目的基因

C．不同的限制酶切割DNA的切点不同

D．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

资料Word

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