应用高效液相色谱法测定食品中3种防腐剂的含量

应用高效液相色谱法测定食品中3种防

腐剂的含量

摘要：近年食品抽检中发现食品防腐剂超标使用，因此了解常见食品中防腐

剂含量，可为食品安全监管提供参考。采用高效液相色谱法对糖果、中式糕点及

酱卤肉制品中苯甲酸、山梨酸及脱氢乙酸含量进行测定分析。结果表明，中式糕

点均含有苯甲酸，属于违法添加苯甲酸类防腐剂的食品；酱卤肉制品山梨酸含量

超过国家标准规定的限值；其他食品的苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸含量均符合国

家标准规定。可见，苯甲酸、山梨酸存在超标使用问题，需要加强抽样检查监督

管理力度，增加食品安全水平。

关键词：苯甲酸；山梨酸；脱氢乙酸；高效液相色谱

随着经济水平的发展和科技水平的提高，市场上不断出现各式各样、色彩鲜明、可口美味、形状各式的食品，而多数食品易受微生物影响发生腐败变质，但

为了到达更好的贮藏效果，会人为的在食品中适量添加如苯甲酸、山梨酸、脱氧

乙酸等常用的食品防腐剂已达到增加食品储存时间的目的。在国家发布的GB2760《食品添加剂使用标准》中就对所有类型的防腐剂在各种食品中的最多用量设定

了严苛的要求，在规定范围内添加可以有效保证食品安全问题，但化学防腐剂长

期且大量被人体摄入则可能会对人体有影响，如诱发癌症、导致畸变、引起中毒

及其他影响人体健康的潜在危害[1,2]。因此通过合适的方法检测食品中防腐剂的

含量对我们来说是非常必要的。目前国家标准或地方标准中很少有能够同时检测

苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的方法，即使有同时检测的方法但检测过程过于复杂。本文应用高效液相色谱法对6种食品中苯甲酸、山梨酸、脱氧乙酸3种防腐剂的

含量进行测定。

1材料与方法

1.1 仪器与试剂

本次实验所用样品均采集于本市各镇商场超市、门店，实验所用主要仪器为QC系列超纯水机、离心机、数控超声波清洗器、涡旋混匀仪、电子天平；试验条件是高效液相色谱；试剂为甲醇、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸。

1.2 实验方法

1.2.1 苯甲酸、山梨酸及脱氢乙酸标准溶液配制

依次从不同标准储备液中提取出一定数量的溶液，将其掺杂搅拌制作成混合标准液，其浓度是100μg/mL；接着，置于0-4℃环境内贮存备用，用水分别进行稀释，使其变成1μg/mL、5μg/mL、10μg/L、20μg/mL以及50μg/mL的混合标准工作溶液。

1.2.2 样品前处理

(1)中式糕点和酱卤肉制品粉碎均匀后，称取2.5-5g的样品放于烧杯中，20mL的水倒入烧杯后转移至25mL容量瓶中，接着将2.0mL的亚铁氰化钾与

2.0mL的乙酸锌依次放进瓶子之内，摇晃至混合均匀后，超声振荡20min，定容后，离心5min，取上清液过微孔膜，滤液待测。

(2)糖果粉碎均匀后，称取5-10g的样品于小烧杯中，20mL的水倒入烧杯中初步溶解糖果后移入25mL容量瓶，并置于70℃的恒温水域锅内，待样品完全溶解后，拿出置于室温下，温度降至室温后定容，离心5min，取上清液过微孔膜，滤液待测。

1.2.3 色谱条件

色谱柱：C18柱（150mm×4.6mm，5μm），流动相：0.1 mol/L磷酸二氢铵溶液（A）+甲醇（B）；梯度洗脱程序见表1；流速为1.0mL/min；柱温35℃；进样量为20μL；检测波长23nm。

表1 梯度洗脱条件

时间（min)A(%)B(%)

0955

3955

136535

206535

20.1955

25955

1.3 标准工作曲线的制作

取1mL按1.2.1制作形成标准溶液，接着将其放到样瓶之内，根据提前设置

的液相色谱条件展开具体的检测，用检测获得的数据，围绕标准工作曲线进行准

确的制作。有关于苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸这几种标准溶液的液相色谱图、标

准曲线浓度等数据得出苯甲酸线性方程为：Y=55.76189x+1.78332；山梨酸线性

方程为：Y=23.10674x-3.75841；而脱氢乙酸线性方程为：Y=24.98981x-3.21660。

1.4样品含量计算

基于标准溶液的固定峰值，依照峰面积围绕样本溶液内的三种防腐添加剂的

含量进行具体的求算，溶液中苯甲酸、山梨酸与脱氢乙酸这几种成分含量都通过

相同的方程式进行求算，具体如下：

式中：X----样品中被测物含量，单位：g/kg；

C----通过标准曲线获取的样液内被测成分的浓度，以μg/mL为单位；

V----样品溶液定容体积，单位：mL；

m----样品质量，单位：g。

1.5合规性判定

依据GB2760-2014《食品添加剂使用标准》判定酱油、料酒、鸡精鸡粉、糖果、中式糕点、酱卤肉制品样品中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸是否符合食品添加剂的使用标准规定[3]。

2结果与分析

(1)糖果、中式糕点和卤肉制品中苯甲酸含量都没有高于国家有关标准中所限定的最高用量；但在国家所发布的GB2760-2014《食品添加剂使用标准》命令禁止糕点类食品使用苯甲酸这种防腐剂，而本次抽检的中式糕点样品均含有苯甲酸，这显然与标准中所提出的规定相背离，故而这是一种不合格的食品。

(2)糖果、中式糕点与卤肉制品中都含有山梨酸这种防腐剂，且都没有高于国家有关标准中所提出的用量要求；但在国标当中要求熟肉制品中山梨酸防腐剂的含量不可以高于0.075g/kg，但是通过检验发现，酱卤肉制品样山梨酸成分量远远高于国标所给出的最高用量要求。

(3)糖果、中式糕点和酱卤肉制品中脱氢乙酸含量均未超过国家标准规定的最大使用量。

表 2 3种食品中苯甲酸、山梨酸和脱氧乙酸含量（g/kg）

食品分类

苯

甲酸1

苯

甲酸2

山梨

酸1

山梨

酸2

脱氧

乙酸1

脱氧乙

酸2