advia2400-ALT测定

丙氨酸氨基转移酶（ALT）试验标准操作程序Standard Operation Procedure of Alanine Aminotransferase（ALT）Test (Siemens Adiva 2400)

1．目的 3

2．范围 3

3.术语 3

4.测定原理 3

4.1原理 3

4.2公式 3

5.试剂组成 3

5.1试剂盒： 3

5.1.1试剂成分以及浓度 3

5.1.2有效期 4

6.试剂校准及量值溯源 4 6.1校准步骤 4

6.2量值溯源体系图 4

7.参数设定 4

8.干扰性 5

9.方法学特性 5

9.1精密度 5

9.2 可分析范围： 6

9.3相关回归统计 6

10工作程序 6

10.1样本准备 6

10.2标本的拒收 6

10.4质量控制 6

10.5标本测定 7

10.6临床意义 7

11.生物参考区间 8

12安全性和注意事项 8

13.主要参考文献 8

1．目的

1.1主要用于定量测定血清或血浆中ALT的活性

1.2本程序用于操作的规范化

2．范围

2.1住院病人，门诊病人，体检人群

3.术语

3.1．丙氨酸氨基转移酶测定是基于Wroblewski and LaDue的工作工程序，后经H.U. Bergmeyer改良的IFCC推荐的方法进行.

4.测定原理

4.1原理

丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化L-丙氨酸转氨基到a-酮戊二酸（a-KG），形成L-谷氨酸盐和丙酮酸盐在乳酸脱氢酶的作用下还原为乳酸盐，同时将NADH氧化为NAD+。光吸收的改变与ALT的活性成正比，采用双波长（340/410nm）速率法测定。

4.2公式

L-丙氨酸 +a-酮戊二酸丙酮酸盐 + L-谷氨酸盐

丙酮酸盐+ NADH 乳酸盐 + NAD

5.试剂组成

5.1试剂盒：

Siemens Advia 2400配套试剂

5.1.1试剂成分以及浓度

试剂成分浓度

试剂1 L-丙氨酸610 mmol/L LDH（猪心脏）≥ 1.2 KU/L 叠氮化纳0.09%

试剂2 a-酮戊二酸93 mmol/L

警告：该试剂含有动物来源的成份，防止病原携带及污染

注意：高浓度叠氮化纳易在铜或铅制管道内形成易爆品，在排放前大量用水进行稀释，按相关医疗废物排放标准进行排放，

5.1.2有效期

在2-8℃下保存，未开封的试剂盒上有效期内均有效。开封后在机稳定期为60天。

注意：试剂不可冷冻保存

6.试剂校准及量值溯源

校准是采用固定系统因子值（FV），该值是根据NADH在340nm的摩尔消光系数，同时结合IFCC参考方法病人结果进行修正。建议每天做RBL。

6.1校准步骤

6.1.1在操作面板上,按s tart→选择one-pnt.smp Analyze→选择Temp.item select→选择Temp.sample select→选择CTT位置→CTT01→Start运行。

6.1.2查看校准结果：在菜单面板上，点Calibration→View calibration curve→选择Test name→查看定标结果。

6.1.3校准结果的评价：校准完成后对BAbs、S1Abs、K值进行判断，是否符合其校准要求，比较K值变化，K值超过±2SD应重新校准，并记录校准情况及K 值。符合〈生化组生化分析仪校准程序〉LAB-PF-028-03。

6.2量值溯源体系图

ALT 可溯源到IFCC 参考方法, 参考品为IFCC-454 并结合病人样本。

7.参数设定

8.干扰性

Advia 2400

干扰物干扰物水平ALT样本检测结果干扰性

胆红素（结合/未结合）25mg/dL 49 U/L 无显著干扰溶血500 mg/dL 49 U/L 无显著干扰脂血500 mg/dL 50 U/L 无显著干扰

在仪器Analytical Parameters (Serum) window设置窗口, 可以建立该系统的脂血（混浊度）、

溶血及黄疸指数。

干扰实验数据结果如下：

9.方法学特性

9.1精密度

Advia 2400

批内总变异

样本类型水平( U/L)

SD CV% SD CV% 血25 0.6 2.3 0.9 3.7 尿138 0.9 0.7 1.5 1.1

9.2 可分析范围：

0 U/L to 1100 U/L，采用仪器自动重检分析范围可高达6600 U/L。

9.3相关回归统计

10工作程序

10.1样本准备

常规空腹采血。在血清或血浆准备时，应避免血清和已分离的红细胞过长接触。见标本管理文件.

10.2标本的拒收

病人姓名、标本联号、病区、床号、ID号、住院号不符者拒收。抽血不足

1mL标本，抽血不当导致标本被严重稀释等不符者按标本拒收程序文件执行。

10.3标本的储存和处理

报告发出后，标本存放于注明日期,标本类型,检验者放入冰箱保存3天,3天后按生物安全管理程序处理。

警告：所有血液标本都应视为具有潜在的生物危害性，对于血液标本的处理应遵照本科室的生物安全防范的相关规定。

10.4质量控制

10.4.1质控品：

质控品与样品的性质类似，是监测仪器正常工作的必须品。因为样品可在有随机检测能力的仪器中随机检测而非批量检测，所以质控品应该包含在整个24小时的时间段内。质控品包括至少包括二个浓度值的配套质控品或替代质控品，按照厂家规定进行保存。在正式使用前均应建立各自的平均值和可接受范围。若质控结果超出了可接受变异范围，则根据您的Advia2400系统操作手册中列出的步骤进行排除或重新定标校准。

10.4.2 Siemens质控品，两个浓度水平。中值和高值

10.4.3质控标本测定

每天早晨标本上机前进行质控的测定。在冰冻室内取出配制分装好的质控（一次配制10天用的质控品，放入冰冻室）放置与室温相同。运行仪器，将QC1和QC2分别放Advia 2400生化仪样品架上相应设置位置，在样品菜单选择质控项目，开始测定。结果判断及失控处理：采用Westgard多规则质控法判断质控结果，观察质控图，若有失控，按失控处理程序纠正,参见010-MP-ProcIQC-C2001《生化室内质控程序》。完成后仪器将留下原始记录，并同时通过LIS传入电脑。