天然药物化学实验指导
(医疗药品)天然药物化学实验指导
天然药物化学实验指导（供药学药剂专业用）河北医科大学药学院天然药物化学教研室2006年3月前言天然药物化学是运用现代科学理论与技术研究天然药物中化学成分的一门学科，是药学、药剂、药分、中药学等专业及相关专业本科学生必修的专业课，是国家职业药师(中药学)资格考试必考课程。
本课程在有机化学、分析化学、有机化合物波谱学、中药学、生药学等课程的基础上，重点讲授天然药物中化学成分的化学结构、理化性质、提取分离方法、结构鉴定、生理活性、天然药物新药开发等方面的基本原理和实验技能，培养学生具有从事天然药物方面的研究、开发和生产的能力，为我国药学事业的发展输送人才。
天然药物化学实验是天然药物化学课的重要的、必不可少的组成部分。
学习的主要目的是通过实验检验在课堂上所学的理论知识，使学生对理论知识的理解更加深入，掌握得更加牢固；通过实验训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练；使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。
实验教学的重点是加强学生基本操作技能的训练，要求学生掌握以下技能：（一）提取分离方面1.要求掌握常用的经典方法的原理及操作。
其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、逆流分布法）、重结晶法等。
2.掌握纸色谱、薄层色谱、柱色谱的原理和基本操作。
（二）结构鉴定方面1.化学方法①掌握各类化学成分的一般定性反应在鉴定中的应用；②掌握重要衍生物的制备方法及其在结构鉴定中的应用；③了解重要降解反应的原理及应用。
2.光谱方法了解UV、IR、NMR、MS在天然药物化学成分结构测定中的应用。
目录实验须知1实验技能操作规范2实验一大黄中蒽醌苷元的提取、分离和检识8实验二芦丁的提取、水解；黄酮类化合物与糖类的鉴别10实验三苦参生物碱的提取、分离、鉴别和生物碱的检识15实验四利用纸色谱先导设计法从洋金花中提取分离生物碱19实验五一叶萩碱的分离和鉴定23实验六青蒿素的提取、分离和检识25实验七穿心莲内酯的提取、分离、鉴定及亚硫酸氢钠加成物的制备26实验八设计性实验29附录31实验须知学生要求1、第一次实验前要清点所有仪器，若有缺损则向教师报告并填单补充。
实验指导
天然药物化学实验指导一、前言天然药物化学实验是整个天然药物化学课的重要组成部分。
其主要目的是：通过试验，检验在课堂上所学的理论知识。
使学生对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固。
通过试验，训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练。
在实验中，重点是要加强对学生基本操作技能的训练。
天然药物化学实验要求学生掌握以下技能：提取分离方面要求掌握常用的经典方法的原理及操作。
其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、反流分布法）、重结晶法等。
掌握纸色谱、柱色谱（包括吸附柱、离子交换柱等）的原理和基本操作。
鉴定方面化学方法①掌握一般定性反应在鉴定中的用②掌握重要衍生物（乙酰化物、甲基化物生物碱盐类等）的制备方法及其在结构鉴定中的应用。
③了解重要降解反应的原理及应用。
光谱方法了解UV、IR、NMR、MS在天然物结构测定中的应用。
目前要求学员能了解黄酮类化合物的UV、NMR波谱、蒽醌的IR以及麻黄生物碱的NMR谱特征。
二、天然药物化学实验须知在天然药物化学实验中，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、甚至爆炸性药品，试验操作又常在加温加压等情况下进行，需要各种热源、电器或其他仪器，操作不慎易造成火灾、爆炸、中毒、触电等事故。
但只要加强爱护国家财产和保障人民生民安全的责任心，提高警惕，消除隐患，注意实验规则，事故是可以避免的。
实验规则试验前必须预习实验内容，了解原理和操作规程。
随时记录试验应记的项目，以作正式报告。
试验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确，合格后方可进行试验。
试验时不准做无关的事情，严禁吸烟，不得擅自离开，并应随时注意反应情况，仪器有否漏气，破裂等。
药品仪器都是国家财产，须节约爱护使用，公用物品，用完后立即放回原处。
不可调错瓶塞，以免污染，仪器要洗刷干净。
操作易燃性有机溶剂，回流、蒸馏、减压蒸馏时，不能明火直接加热，要放沸石或一端封死的毛细管，若在加热时发现无沸石则应冷却后再加，防止爆沸冲出。
天然药物化学实验指导
天然药物化学实验指导目录实验室注意事项 (1)实验一芦丁的提取分离与鉴定 (2)实验二艾叶及丁香中挥发油的提取鉴定 (5)实验三从红辣椒中分离红色素 (7)实验四咖啡因的提取与分离 (8)自选实验薯蓣皂苷元的提取与分离 (10)自选实验甘草皂苷元的提取与分离 (10)自主设计实验 (15)实验室注意事项天然药物化学实验课具有实验周期长、使用有机溶剂品种多，用量较大等特点，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、实验操作经常在加温，减压下进行，需要使用各种热源和电器，再加上实验室较为拥挤，若操作不慎，易引起着火、触电、中毒、爆炸等事故，为确保实验安全顺利进行，特作如下要求。
一、实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作程序，检查仪器是否完整，装置是否正确，检查合格后方可开始实验。
二、实验室内要保持严肃、安静，不得大声说话打闹；室内严禁吸烟，实验进行时不得擅自离开，必要时委托专人看管。
三、未经教师允许不得擅自使用明火，需使用明火时，实验台周围不得放置易燃有机溶剂，如发生火情,应保持镇静，立即报告指导教师，同时切断火源，移走易燃品！用湿布闷盖或用灭火器进行灭火，切勿轻易用水，以免扩大火势。
四、实验时要做到整齐、清洁、用过的仪器要及时清洗并收人仪器柜内，保持水槽、仪器、桌面、地面四洁。
五、回流、蒸馏有机溶剂时，注意检查冷凝水是否通畅，装置不得密闭，接收有机溶剂时不得使用广口仪器，溶剂瓶不得敞口存放。
在进行减压操作时，必须使用安全瓶，弄清操作程序，以免造成回水等事故。
六、使用挥发性试剂或喷显色剂时，应在窗口或通风橱内操作，不慎溅在桌面上的化学药品必须立即清除。
身体直接接触化学物品后应及时用肥皂及大量水冲洗，如碱性试剂可用l％HAc溶液冲洗，酸性试剂可用3％NaHCO3溶液冲洗。
不要用酒精、丙酮等洗涤皮肤上的有机物，以免增加皮肤对有毒物质的吸收，眼睛里溅入化学试剂后，应立即用大量水冲洗，及时到校医室就诊。
天然药物化学实验教程
天然药物化学实验教程天然药物化学实验是研究和分析天然药物化学成分和活性的关键领域之一。
下面是一些关于天然药物化学实验的参考内容：1. 实验目的：天然药物化学实验的目的通常是研究和分析天然药物的化学成分、药效和药理活性，探索其潜在的药物作用机制，为药物研发和临床应用提供理论依据。
2. 实验步骤：天然药物化学实验的一般步骤包括药材采集、样品制备、化学成分分离和鉴定、活性测试等。
具体步骤根据研究对象和实验目的的不同而有所差异。
3. 药材采集和样品制备：药材的采集应根据其生长季节和部位选择合适的时间和地点。
采集后要进行鉴定和干燥处理，以保证样品的纯度和质量。
4. 化学成分分离和鉴定：常用的化学成分分离方法有溶剂萃取、柱色谱、薄层色谱等。
分离得到的化合物可以通过质谱、核磁共振等方法进行结构鉴定，以确定其化学成分和结构特征。
5. 活性测试：常用的活性测试方法包括抗氧化活性、抗炎能力、抗菌活性、抗肿瘤活性等。
这些测试可以通过体外实验、细胞实验和动物实验等手段进行。
6. 分子模拟和药效预测：结合计算机辅助药物设计技术，可以进行分子模拟和药效预测，探究天然药物的可能结合靶点和作用机制，以指导后续的药物研发工作。
7. 质量控制和质量标准：天然药物化学实验还需要考虑质量控制和质量标准的建立，包括原料药的质量评价、指纹图谱的建立、有效成分的含量测定等，以保证药材的质量和药物的稳定性。
8. 毒理学评价和安全性研究：天然药物的安全性评价是非常重要的一步，包括毒理学评价、长期毒性实验、代谢动力学研究等。
实验过程中需要遵循伦理和安全的要求，确保实验结果的准确性和可靠性。
9. 文献研究和结果分析：天然药物化学实验还包括对相关文献的研究和结果的分析，以对已有研究成果进行总结和归纳，为进一步的研究提供参考依据。
10. 结论和展望：实验结果的结论和展望是天然药物化学实验中的重要部分，通过对实验结果的分析和解释，得出实验结论，并对未来的研究方向和应用前景进行展望。
天然药物化学实验指导
实验须知 (1)第一章天然药物化学实验技术 (5)第一节经典的提取和分离方法 (5)第二节结晶和重结晶 (9)第三节层析分离方法 (11)第二章实验部分 (18)实验一中草药化学成分的鉴别法 (18)实验二薄层板的制备、活度测定及应用 (25)实验三秦皮中七叶苷、七叶内酯的提取分离和鉴别 (28)实验四虎杖中游离羟基蒽醌类成分的提取分离和鉴别 (31)实验五芦丁的提取分离和鉴别 (36)实验六黄芩中黄芩苷的提取分离和鉴别 (40)实验七挥发油成分的提取和鉴别 (44)实验八穿心莲内酯的提取分离鉴别与亚硫酸氢钠加成物的制备 (48)实验九女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别 (54)实验十薯蓣皂苷元的提取分离和鉴别 (57)实验十一粉防己生物碱的提取分离和鉴别 (60)实验十二绞股蓝总皂苷的提取分离和鉴别(设计性实验) (65)附录一中草药化学成分检出试剂配制法 (67)附录二常用有机溶媒的性质 (74)实验须知一、天然药物化学实验的特点1．实验周期长。
本实验指导中一般一个提取分离和鉴别实验需要用去8学时，时间长。
因此，在实验过程中，应该注意仪器、试剂尤其是提取物的妥善保管或者保存。
2．所用试剂和溶剂品种较多，用量较大，许多试剂易燃、有毒或有腐蚀性，在一定条件下可能会和空气会形成爆炸混合物。
许多实验需用电炉加热或进行减压操作，学生用到的热源和电器较多，因此应切实注意实验安全，严防产生触电、中毒、烫伤等意外发生，谨防发生火灾、爆炸等重大事故，并保证实验室通风良好。
二、实验规则天然药物化学实验教学是天然药物化学课程的重要组成部分，是使学生进一步理论联系实际，掌握天然药物有效成分提取、分离和鉴定的基本操作技能，提高学生分析和解决问题能力。
养成严谨的科学态度和良好的工作作风是必不可少的教学环节。
为此，提出下列实验注意事项：1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生，若发生事故应立即报告指导教师，进行适当处理。
天然药物化学实验指导书
药用植物学实验指导适用专业：（本科）药学、药物制剂（专科）药物制剂技术郑州华信学院医学院药学系药学教研室目录实验一显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造 (2)实验二植物细胞后含物——淀粉粒、草酸钙结晶体 (6)实验三保护组织和分泌组织 (9)实验四机械组织和输导组织 (12)实验五根的显微构造 (15)实验六单子叶植物地上茎和地下茎观察 (18)实验七双子叶植物茎的初生构造和次生构造 (20)实验八大黄、甘草、人参的鉴定 (22)实验一显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造一、实验目的：1.了解显微镜的基本构造并掌握显微镜的正确使用方法和保养。
2.掌握撕取表皮的制片方法。
3.掌握植物细胞的基本构造。
二、实验仪器与材料1.仪器：生物显微镜。
2.用具：镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、擦镜纸、棉布块。
3.材料：洋葱鳞茎的磷叶或大葱磷叶。
4.试液：蒸馏水、稀碘液、10%硝酸钾溶液。
三、实验内容：（一）显微镜的构造1.机械部分次部分是显微镜的骨架，是安装光学部分的基座。
包括：镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调焦装置等。
（1）基座是显微镜的底座，支持整个镜体，使显微镜放置平稳。
（2）基柱镜座上面直立的短柱，支持镜体上部的各部分。
（3）镜臂弯曲如臂，下连镜柱，上连镜筒，为取放镜体时手握的部分。
直筒显微镜的镜臂下端与镜柱连接处有一活动关节，可使镜体在一定范围内后倾，便于观察。
（4）镜筒上端置目镜，下端与物镜转化器相连。
（5）物镜转换器连接于镜筒下端的圆盘，可自由转动，盘子有3－4个安装物镜的螺旋孔。
当旋转转换器时，物镜即可固定在使用的位置上，保证物镜与目镜的光线合轴。
（6）载物台放置玻片标本的平台，中央有一通光孔，两侧有压片夹或机械移动器，既可固定玻片标本，也可以前后左右各方向移动。
（7）调焦装置调节物镜和标本之间的距离，得到清晰的物像。
在镜臂两侧有粗细调焦螺旋各1对，旋转时可使镜筒上升或下降，大的一对为粗调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动2mm左右。
天然药化实验指导书-2014版
实验一甘草中总皂苷的提取、分离与含量测定一、实验目的1．熟练进行甘草中总皂苷的提取和精制方法。
2．能够用化学法和色谱法检识甘草中的皂苷类物质。
二、实验原理甘草酸和甘草次酸均为含有羧基的酸性三萜皂苷，甘草酸酸性较强，在植物中与钾成盐而溶于水，易溶于热水。
而甘草酸在冷水中的溶解度较小，所以我们可用水提取甘草酸的钾盐，再加稀酸，放冷，使甘草酸游离沉淀析出。
也可以用乙醇提取后，乙酸乙酯萃取除去甘草中的黄酮类化合物，然后利用大孔吸附树脂的吸附作用，对甘草总皂苷进行富集，再利用硅胶进行柱层析分离。
三、主要仪器及耗材仪器：水浴锅、旋转蒸发仪、循环水真空泵、三用紫外仪。
原料与试剂：甘草粗粉、乙醇、乙酸乙酯、D101大孔吸附树脂（或AB-8大孔树脂）、色谱用硅胶、氯仿、丙酮、硅胶薄层板。
四、实验内容与步骤1．甘草总皂苷的提取（1）水提法：取甘草粗粉20克，加水煎煮提取2～3次，滤过得水提液，静置，取上清液，浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。
浸膏加3倍量水溶解，加硫酸酸化，放置，滤过得甘草酸粗品。
（2）醇提法：取甘草粗粉20g，150mL60%乙醇溶液于70℃下回流提取1.5h，抽滤制得甘草提取液，放置待用。
2．甘草总皂苷的富集甘草提取液减压浓缩至50mL左右，等体积的乙酸乙酯萃取2次，除去黄酮类化合物。
萃取后的水相减压浓缩除去残留的乙酸乙酯后上大孔吸附树脂。
以下两种大孔吸附树脂任选一种即可。
D101型大孔吸附树脂：称取20~25克D101型大孔吸附树脂（或者30gAB-8型大孔吸附树脂），预处理后装柱，甘草总皂苷的粗提液过D101型大孔吸附树脂，待吸附完全后，先用蒸馏水冲洗树脂至流出液无颜色，再用50%乙醇溶液2~3个柱体积冲洗树脂，并收集该部分的洗脱液。
AB-8型大孔吸附树脂：取30克AB-8型大孔吸附树脂，预处理后装柱，甘草总皂苷的粗提液过AB-8型大孔吸附树脂，待吸附完全后，先用蒸馏水冲洗树脂至流出液无颜色，再用2~3个柱体积的70%乙醇溶液冲洗树脂，并收集该部分的洗脱液。
天然药物化学实验指导电子版
天然药物化学实验指导电子版1、从实验微型化出发，改变实验条件微型实验不仅仅是表现为减量和小型化，更是对实验装置的设计改造，对实验方案的改进与探索。
例如我们常常需要根据实验要求和具体情况，寻找适合材料或方法来改善方案，这也是发挥师生的自主创新精神的好机会。
为了易于过滤器，我们从微型化启程，以增加过滤器溶液的体积。
结果辨认出溶液量增大后虽然有利于过滤器，但实验效果并不好，难于观测至现象。
经过进一步实验对其中的一些细节展开了改动：原料表示样量由以前的40 g增大至2 g（考量槐米中芦丁的含量、估算的抽取比非后面的重结晶和鉴别实验）；分别用饱和状态石灰水替代石灰乳，15%hcl替代淡盐酸调节ph（原因就是溶液用量增大后，酸碱调节ph的用量增加，所以必须减少酸碱的浓度，否则溶液ph易过量）；ph由以前的4～5调节至ph=3～4（目的就是增加酸沉时间）；冷却时用表面皿遮住烧杯以增加水分的损失。
条件发生改变后，实验教学质量和效果都获得了很大提升。
2、从教学实践现状出发，激发学生兴趣芦丁的抽取拆分就是实验大纲中一个必搞项目。
芦丁存有比较广为的用途，在医药上用作高血压病的辅助化疗，在食品中搞抗氧化剂，化妆品上搞防晒霜成分之一。
因其在槐米中含量为20%～25%左右，所以通常采用槐米搞抽取实验原料。
芦丁抽取存有几种方法：甲醇流入抽取法、水轻易抽取法、超声波抽取法等。
甲醇抽取法虽然很快就能够观测至晶体，但抽取率为很低；水抽取法时间较长，难引致芦丁水解，抽取率为不及碱提酸沉法；超声波抽取抽取率为较低但杂质含量多，收率较低。
综合以上因素，我们采用工业上以的碱提酸沉法。
能够从天然植物中抽取出来有效率的活性成分（芦丁的价格2.00元/mg），学生非常有兴趣，但经过制药工程、年级学生人的`教学课堂教学，辨认出教学效果不是较好。
主要原因就是：试液困难，真空泵及水槽中到处就是液泡；因溶液量小调节酸碱度需以石灰乳及浓盐酸，不易控制，而且教室中盐酸的气味很难闻；酸沉及重结晶的时间较长，很难在规定的教学时间内顺利完成教学任务，通常须要在1～2 d的时间顺利完成；大部分同学搞出的产品颜色呈圆形褐色或偏绿色与标准品颜色差距很大；大量的残渣很浪费，而且不好处置。
天然药物化学实验指导书
天然药物化学实验指导书制药工程专业生物科学与工程学院2010年1月天然药物化学实验须知一、每次实验以前，必须预习本实验内容，了解其操作程序和理论要点，切勿盲目进行实验，实验时须准备记录薄一本，随时正确记录每一实验应记的项目。
如原料用量，实验时发生的现象，反应结果，产品数量、熔点、沸点、产品纯度等，以作写正式报告的依据。
二、实验所得产品，如不供下一实验用，应交给指导老师，并注明品名、数量、组别、姓名、日期。
三、实验规则1．实验时不能阅读与本实验无关的书籍，不要高声谈笑，也不能擅自离开，严禁在实验室内吸烟及吃东西。
2．实验室要经常保持整齐清洁，桌上不要乱放无用的仪器与药品。
火柴杆、废纸等不要乱抛在地上、废酸、碱液应倒入污水缸中，易燃烧及易挥发的废液应倒入水槽中，并立即用水冲掉。
3．药品、仪器都是国家财产，须节约爱护使用，若有损坏，应填写仪器损坏单，报告指导教师，及时领取，并酌情赔偿。
4．试剂、药品、公用用具，使用后立即放回原处，不可乱放，并应注意不可盖错试剂瓶塞，以免污染试剂。
5．装有易燃性液体的瓶子，不得放在灯火近旁。
6．加热乙醇、乙醚、石油醚、苯等易挥发可燃的液体时，应使用装有冷凝管的烧瓶，在水浴上进行加热，加热前应放入沸石1—2粒，或一端封死的毛细管，防止爆沸冲击，若在加热时未放沸石则应冷却后再加，不可热时追加，添加溶剂时应离开火源，稍冷后再添，并应重新加入沸石。
7．实验过程中，万一遇见溶液着火，应立即用石棉布或其他物品把它盖上，使其隔绝空气而熄灭。
8．实验完毕后，应将用过的仪器洗刷洁净放好，并应指定值班人员将实验室打扫干净，污水缸的废液拿到室外适当地方处理埋掉，离开实验室时，应检查门、窗、水电是否关好。
9．严禁将实验室内的仪器、药品携带室外。
以上须知清严格遵照执行。
实验一大黄中蒽醌类化合物的预试大黄为蓼科大黄属植物掌叶大黄(Rheum Palmatum L)，唐古特大黄(R．tanguticum Maxim．)或药用大黄(R．officinale Baill)的根茎，主要含蒽醌类化合物，有泻下和抗菌作用，为常用中药之一。
中药化学和天然药物化学实验指导
中药化学和天然药物化学实验指导实验一：中药提取与分离目的：了解中药提取与分离的基本原理和方法，熟悉提取过程和分离技术。
实验步骤：1. 准备工作：-准备所需中药材和溶剂。
-研磨中药材为粉末或切碎。
-配置适当浓度的溶剂。
2. 提取操作：-将中药材加入溶剂中，并进行适当的浸泡时间。
-进行反复提取，可采用常规提取法、超声波辅助提取等。
-过滤提取液，获得提取物。
3. 分离操作：-使用适当的分离技术，如萃取、蒸馏、结晶等。
-监控分离过程中产物的纯度和质量。
4. 实验记录与结果分析：-记录实验过程中的观察现象和操作步骤。
-对提取物和分离产物进行性质描述和分析。
实验二：天然药物成分鉴定目的：学习天然药物成分的鉴定方法，掌握常用的色谱技术和光谱分析方法。
实验步骤：1. 准备工作：-准备待测天然药物样品。
-准备色谱柱和相关试剂。
2. 色谱分析：-选择适当的色谱技术，如薄层色谱、气相色谱或液相色谱等。
-进行样品的预处理和适当的萃取操作。
-运用色谱技术对样品进行分离和检测。
3. 光谱分析：-利用紫外可见光谱、红外光谱、质谱等技术进行结构鉴定。
-根据光谱数据和参考文献比对，确定天然药物中的化学成分。
4. 实验记录与结果分析：-记录实验过程中的观察现象和操作步骤。
-对分析结果进行解释和分析，判断样品中存在的化学成分。
注意事项：1. 在操作中要注意安全，避免有毒物质的接触和误食。
2. 注意实验仪器的正确使用和维护，以保证实验结果的准确性。
3. 实验前要详细阅读实验指导，了解实验步骤和注意事项。
4. 鉴于中药提取和天然药物分析的复杂性，建议在有经验的老师或指导下进行实验。
以上是中药化学和天然药物化学实验的简要指导。
具体的实验步骤和条件可根据教学需求和实验设备的可用性进行调整和完善。
天然药物化学实验指导
天然药物化学实验指导《天然药物化学实验指导》嘿！同学们，你们知道吗？天然药物化学实验就像是一场神奇的冒险之旅！想象一下，我们走进实验室，就像探险家踏入了神秘的森林。
这里的每一个仪器、每一种试剂，都是我们探索未知的工具。
还记得第一次做实验的时候，我紧张得手都有点发抖。
老师站在旁边，温和地说：“别害怕，大胆去尝试！”我深吸一口气，告诉自己：“这有啥难的，别人能行，我也一定行！”我们的实验从提取植物中的有效成分开始。
就好像在大海里捞针，要从一堆复杂的混合物中找出我们想要的宝贝。
比如说，从金银花里提取绿原酸，那过程可不容易！得经过浸泡、加热、过滤好多步骤。
我当时就在想，这小小的绿原酸咋就这么会藏呢？有一次，我和同桌一起做实验，我俩手忙脚乱的。
“哎呀，这个量是不是加多啦？”“糟糕，加热时间是不是太长啦？”就在我们焦头烂额的时候，旁边小组的同学过来帮忙，“别着急，慢慢来，你们看，应该这样操作。
”在大家的帮助下，我们终于完成了实验，那一刻，心里别提多高兴啦！在实验中，我们还得特别小心。
稍微一个不小心，可能实验就失败啦。
这就像走钢丝，得时刻保持平衡和专注。
有时候，我也会抱怨：“怎么这么麻烦呀！”可当看到最后的成果，又觉得一切都值得。
做天然药物化学实验，不只是动手操作，还得动脑子思考。
为什么这个步骤要这样做？为什么那种方法不行？这不就跟解数学难题一样吗？得反复琢磨，才能找到答案。
而且呀，做实验可不能马虎。
有个同学因为没认真记录数据，结果得出了错误的结论，被老师狠狠地批评了一顿。
这让我们都明白了，认真仔细是多么重要！通过这些实验，我越来越觉得，天然药物化学就像一个神秘的宝库，等待着我们去打开。
每一次的实验，都是一次靠近宝藏的机会。
难道我们不应该好好珍惜吗？同学们，让我们一起在这个神奇的世界里探索吧！相信通过不断的努力，我们一定能揭开天然药物化学的神秘面纱，发现更多的奇妙之处！我觉得呀，天然药物化学实验真的太有趣啦，不仅能让我们学到知识，还能培养我们的耐心和细心，难道你们不这么认为吗？。
天然药化实验教学教案
天然药化实验教学教案一、实验目的与要求1. 实验目的(1) 了解天然药物中有效成分的提取、分离和鉴定方法。
(2) 掌握天然药物化学成分的基本分析技术。
(3) 培养学生的实验操作能力和科学思维。
2. 实验要求(1) 熟悉实验原理和操作步骤。
(2) 准确称量、测量和配制实验试剂。
(3) 严格遵循实验安全规程，预防实验事故。
二、实验原理1. 天然药物化学成分提取原理(1) 溶剂萃取法(2) 超声波辅助提取法(3) 微波辅助提取法2. 天然药物化学成分分离原理(1) 薄层色谱法（TLC）(2) 高效液相色谱法（HPLC）(3) 气相色谱法（GC）三、实验材料与仪器1. 实验材料(1) 天然药物原料(2) 标准品(3) 实验试剂（有机溶剂、酸碱指示剂等）2. 实验仪器(1) 提取设备（如萃取罐、超声波清洗器等）(2) 分离设备（如薄层板、高效液相色谱仪等）(3) 分析仪器（如光谱仪、质谱仪等）四、实验内容与步骤1. 实验一：天然药物有效成分的提取(1) 称取一定量的天然药物原料。
(2) 加入适宜的溶剂，采用溶剂萃取法提取有效成分。
(3) 收集提取液，浓缩得到提取物。
2. 实验二：薄层色谱法（TLC）分离提取物(1) 制备薄层板，点样。
(2) 发展薄层色谱，观察并记录色谱行为。
(3) 采用Rf值法初步鉴定目标成分。
3. 实验三：高效液相色谱法（HPLC）测定提取物中目标成分含量(1) 制备HPLC分析样品。
(2) 设定HPLC参数，进行色谱分析。
(3) 计算目标成分的含量。
4. 实验四：气相色谱法（GC）分析提取物中的挥发性成分(1) 制备GC分析样品。
(2) 设定GC参数，进行色谱分析。
(3) 计算挥发性成分的含量。
5. 实验五：天然药物化学成分的鉴定(1) 采用光谱仪、质谱仪等分析仪器对提取物进行分析。
(2) 比对标准品，鉴定目标成分。
(3) 综合实验结果，确认天然药物中的有效成分。
五、实验报告与评价1. 实验报告(2) 实验数据应真实可靠，图表清晰。
天然药化实验指导书 (1)
《天然药物化学实验》课程实验指导书主撰人解军波审核人天津商业大学生物技术与食品科学学院二零零九年十月前言1．实验总体目标天然药物是人类防病治病药物的一个重要来源。
提取、分离天然药物中具有生理活性的化学成分，是天然药物化学研究的一个重要课题。
天然药物化学实验主要是学习天然药物有效成分的提取、分离、纯化、鉴定的方法。
通过实验，加深学生对理论知识的深入理解，训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，为将来从事相关研究打下坚实的实践基础。
⒉适用专业年级制药工程专业三年级（第五学期）⒊先修课程分析化学、有机化学⒋实验环境实验室的标准温度为20℃,实验室内的相对湿度一般应保持在50－70％。
实验室的噪音、防震、防尘、防腐蚀等方面的环境条件应符合在室内开展的检定项目之检定规程。
5. 实验总体要求提取、分离、纯化、鉴定是贯穿于天然药物化学实验的全过程的基本操作单元。
正确掌握和灵活处理各个环节的操作技能是训练学生严格认真的科学态度与良好工作习惯，促进理论与实践结合的一个重要环节。
通过本实验让学生掌握、熟悉天然药物化学提取、分离、鉴识技术的基本原理与基本方法，能够进行日常的天然药物研究工作。
6.本实验的重点、难点及教学方法建议为了保证实验的正常进行和培养学生良好的实验作风及保证实验质量，学生必须遵守下列要求：1、实验前必须充分预习实验讲义，明确实验目的、要求，防止实验盲目性，讲求实验质量。
2、实验时要严格按照规范操作进行，仔细观察实验现象，认真记录有关数据。
要善于思考，学会运用所学理论知识解释实验现象，研究实验中的问题。
3、重视安全操作，遵守实验室安全守则，使用易燃、易爆、有毒物品时要小心谨慎，避免事故发生。
4、要认真写好实验报告，实验报告要清楚、简练、整洁。
实验一从三棵针中提取、分离小檗碱与小檗胺三棵针为小檗属(Berberis)植物，种类繁多，是黄连、黄柏的重要代用品。
根中含多种生物碱，有季胺类生物碱，如小檗碱(Berberine)1.2—3％，根皮含3—5.5％，少量巴马亭(Palmatine)、药根碱(Jatrorrhigine)、非洲防己碱(Columbamine)、木兰花碱(Magnoflorine)，有叔胺碱，如小檗胺(Berbamine)0．45—3.84％，尖刺碱(Oxyacanthine)，异粉防己碱(1sotetrandrine)等。
天然药物化学实验指导(临床药学)
天然药物化学实验指导药化教研室天然药物化学实验指导一．说明天然药物化学是一门实验学科，实验教学占重要地位，通过实验要达到以下目的。
1．能检验学生在课堂上所学的理论知识。
使学生对理论知识的理解更加深入，掌握的更加牢固。
2．训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作和实际工作的基本训练。
3．使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。
实验中，重点是加强对学生基本技能的训练。
二．实验须知1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。
若发生事故应立即采取措施并报告指导老师。
2．实验前做好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法。
安排的实验计划，争取准时结束，实验过程中应养成及时记录的习惯，凡是观察到的现象和结果及有关数据，应随时如实地记录。
实验完毕，要认真总结，写好实验报告，实验所得的提纯物要包好，贴上标签，交给老师。
3．实验室内应保持安静，不得大声喧嚷，不许抽烟。
进入实验室必须穿工作服，实验过程中，不许随便离开。
4．实验台前应保持整洁，与实验无关的物品不得放在台前。
实验中废弃的固体物，要丢入废物桶内。
5．爱护仪器，节约药品，仪器损坏后应填写报损单，注明原因，由指导教师按规定处理。
6．实验过程中要节约用水、用电。
7．每次实验结束后，值日生应将实验室打扫干净，倾倒废物桶，关好水、电、门窗，方可离去。
实验一虎杖蒽醌类成分及白黎芦醇苷的提制和鉴定虎杖系蓼科蓼属植物polyganum cuspidetum siebet zucc.（即Reynoutrin japonica Houobluyn）的根茎。
又名阴阳莲。
民间用于消炎、杀菌、利尿、通经和镇痛。
近年来用于烫伤、止血、消结石和降血脂均有疗效。
虎杖根茎中含有大量的蒽醌类成分和二苯乙烯类成分。
后者具有降血脂的作用。
一、部分已知成分的物理性质1．大黄酚（chrysophanol ） 3O O金黄色六角形结晶（丙酮中结出）或针状结晶（乙醇中结出），mp196℃，能升华。
天然药物化学实验指导全文
天然药物化学实验注意事项天然药物化学试验的特点是实验周期长,所用溶剂和试剂品种多,而且用量较大。
许多有机溶剂具有易燃、有毒、腐蚀性,刺激性和爆炸性等特点。
在实验操作过程中又经常需要加热或减压等操作,学生将接触各种热源和电器。
如果操作不慎,易引起中毒、触电、烧伤、烫伤、火灾、爆炸等事故。
所以要求每个实验操作者,必须加强爱护国家财产和保障人民生命安全的责任心,严格遵守操作规程,树立严密的科学实验态度,提高警惕,消除隐患,预防事故的发生。
为了确保实验的安全进行,特作如下要求:一、实验前要必须充分预习实验内容,明确实验原理、操作步骤及注意事项。
实验开始前应检查仪器是否完整无损,装置是否正确,经检查合格后方可开始实验。
二、实验时要保持室内整齐、清洁、安静。
不准做与实验无关的事情,不得擅自离开岗位。
在实验过程中应密切观察实验进程是否正常,仪器又无漏气,破裂等现象。
三、倒取和存放易燃性有机溶剂时,要远离火源。
不得随意将易燃性、易爆性的有机溶剂及药品倒入水槽或污水缸内。
不得在烤箱内烘烤留有易燃性有机溶剂的仪器或物品。
四、使用精密仪器及电气设备时,应先了解其原理及操作规程,检查好电路,按操作规程进行。
遇到不明了的问题应及时向老师请教,切忌自作主张,乱倒以仪器。
电线及仪器不应放在潮湿处,不要用湿手接触电器。
电器用完后,应立即清理,关好电源。
五、回流或蒸馏易燃性有机溶剂时,应检查冷凝水是否畅通,仪器装置是否漏气。
不得用明火直接加热,应根据其沸点选用水浴、油浴或砂浴。
蒸馏溶剂时要加入沸石,否则将发生爆沸。
添加溶剂时要移开水浴,待溶剂冷却后再加,并应重新加沸石。
六、实验室中常用的苯、卤代苯、苯酚、苯胺、甲醇、二硫化碳、氰化物、汞和铅盐等化合物均为有毒或剧毒药品。
人体中毒的途径一般为消化道、呼吸道或皮肤吸收。
所以取用毒剧药时要注意切勿洒在容器外,不要接触皮肤或口腔。
室内要通风良好,产生毒气的操作应在通风厨内进行。
毒物及废液不得随意乱倒。
天然药物化学实验指导
天然药物化学实验指导目录天然药物化学实验须知实验一薄层色谱(TLC)实验二从三棵针中提取、分离小檗碱与小檗胺实验三从洋金花中提取分离东莨菪碱和莨菪碱实验四大黄中蒽醌类化合物的提取分离实验五芦丁的提取与鉴定实验六甘草酸的提取实验七烈香杜鹃挥发油的含量测定实验八丹皮酚的提取、分离和制剂辨别实验九预实验附录一经常使用溶剂的物理性质附录二经常使用溶剂的回收及精制方式附录三经常使用干燥剂性能的说明仪器清单天然药物化学实验须知一、每次实验以前，必需预习本实验内容，了解其操作程序和理论要点，切勿盲目进行实验，实验时须预备记录薄一本，随时正确记录每一实验应记的项目。
如原料用量，实验时发生的现象，反映结果，产品数量、熔点、沸点、产品纯度等，以作写正式报告的依据。
二、实验所得产品，如不供下一实验用，应交给指导教师，并注明品名、数量、组别、姓名、日期。
三、实验规那么1．实验时不能阅读与本实验无关的书籍，不要高声谈笑，也不能擅自离开，严禁在实验室内抽烟及吃东西。
2．实验室要常常维持整齐清洁，桌上不要乱放无用的仪器与药品。
火柴杆、废纸等不要乱抛在地上、废酸、碱液应倒入污水缸中，易燃烧及易挥发的废液应倒入水槽中，并当即用水冲掉。
3．药品、仪器都是国家财产，须节约爱惜利用，假设有损坏，应填写仪器损坏单，报告指导教师，及时领取，并酌情补偿。
4．试剂、药品、公用用具，利用后当即放回原处，不可乱放，并应注意不可盖错试剂瓶塞，以避免污染试剂。
5．装有易燃性液体的瓶子，不得放在灯火近旁。
6．加热乙醇、乙醚、石油醚、苯等易挥发可燃的液体时，应利用装有冷凝管的烧瓶，在水浴上进行加热，加热前应放入沸石1—2粒，或一端封死的毛细管，避免爆沸冲击，假设在加热时未放沸石那么应冷却后再加，不可热时追加，添加溶剂时应离开火源，稍冷后再添，并应从头加入沸石。
7．实验进程中，万一遇见溶液着火，应当即用石棉布或其他物品把它盖上，使其隔间空气而熄灭。
8．实验完毕后，应将用过的仪器洗刷干净放好，并应指定值班人员将实验室打扫干净，污水缸的废液拿到室外适本地址处置埋掉，离开实验室时，应检查门、窗、水电是不是关好。
天然药化实验教学教案
天然药化实验教学教案一、实验目的与要求1. 实验目的（1）了解天然药物中有效成分的提取、分离和鉴定方法。
（2）掌握天然药物化学成分的基本分析技术。
（3）培养学生的动手能力、观察能力和科学思维。
2. 实验要求（1）学生应提前预习实验内容，了解实验原理和操作步骤。
（2）实验过程中，学生应严格遵循实验规程，注意安全。
二、实验原理1. 天然药物有效成分的提取利用溶剂法、超声波法、微波法等方法从天然药物中提取有效成分。
2. 天然药物有效成分的分离采用色谱法、沉淀法、萃取法等方法对提取的有效成分进行分离。
3. 天然药物有效成分的鉴定利用光谱法、色谱法、质谱法等方法对分离出的有效成分进行结构鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料（1）天然药物：黄连、金银花、丹参等。
（2）试剂：甲醇、乙醇、氯仿、乙酸乙酯等。
（3）对照品：生物碱、黄酮、酚酸等。
2. 实验仪器（1）提取设备：超声波提取器、微波提取器等。
（2）分离设备：薄层色谱板、柱色谱柱、高效液相色谱仪等。
（3）鉴定设备：光谱仪、质谱仪、紫外-可见光谱仪等。
四、实验步骤1. 天然药物有效成分的提取（1）称取一定量的天然药物，加入适宜的溶剂。
（2）采用超声波法或微波法提取一定时间。
（3）滤过，收集滤液。
2. 天然药物有效成分的分离（1）将提取得到的滤液进行薄层色谱分离。
（2）收集目标成分的色谱条带。
3. 天然药物有效成分的鉴定（1）将分离得到的有效成分进行光谱法、色谱法或质谱法分析。
（2）记录分析数据，确定有效成分的结构。
五、实验结果与分析1. 实验结果（1）提取率：计算各天然药物中有效成分的提取率。
（2）分离效果：观察薄层色谱分离效果，评价分离效果。
（3）鉴定结果：记录光谱、色谱、质谱等分析数据。
2. 实验分析（1）分析提取条件对提取率的影响，优化提取工艺。
（2）探讨分离方法在天然药物有效成分分离中的应用价值。
（3）根据鉴定结果，分析天然药物中有效成分的结构特征。
天然药物化学实验报告
实验名称：天然药物化学成分提取与鉴定实验日期：2023年10月25日实验地点：化学实验室实验目的：1. 学习并掌握天然药物中有效成分的提取方法。
2. 掌握薄层色谱（TLC）技术进行成分鉴定。
3. 了解天然药物化学成分的结构和生物活性。
实验原理：天然药物化学成分提取是通过选择合适的溶剂和提取方法，从植物、动物、矿物等天然物质中提取出具有药理活性的成分。
薄层色谱（TLC）是一种快速、简便的分离和鉴定化合物的方法，通过观察样品在固定相和流动相中的分配行为，可以确定化合物的存在和相对位置。
实验材料：- 植物样品：丹参（Salvia miltiorrhiza）- 溶剂：甲醇、乙醚、石油醚、水- 薄层板：硅胶G薄层板- 显色剂：紫外灯、碘蒸气- 仪器：层析缸、微量移液器、紫外灯、电子天平实验步骤：1. 样品处理：将丹参粉末用甲醇提取，过滤，浓缩得到提取物。
2. TLC制备：将提取物溶解在适量甲醇中，点样于硅胶G薄层板上，展开剂为甲醇-水（7:3）。
3. 展开与显色：将薄层板放入层析缸中，进行展开，取出晾干，用紫外灯观察，再用碘蒸气显色。
4. 结果分析：根据Rf值（相对迁移率）和紫外灯下的颜色，鉴定提取物中的主要成分。
实验结果：1. 提取物在甲醇-水（7:3）展开剂中，出现了两个明显的斑点，分别对应于丹参酮IIA和丹参酮IIB。
2. 在紫外灯下，斑点呈现蓝色荧光，与文献报道相符。
3. 碘蒸气显色后，斑点呈现棕色，进一步证实了提取物中的成分。
实验讨论：1. 本实验采用甲醇作为提取溶剂，是因为丹参酮类化合物易溶于甲醇。
2. 薄层色谱法是一种简单、快速、灵敏的分离和鉴定化合物的方法，适用于天然药物化学成分的研究。
3. 丹参酮IIA和丹参酮IIB是丹参的主要活性成分，具有扩张冠状动脉、抗血栓形成等作用。
实验结论：1. 本实验成功提取并鉴定了丹参中的主要活性成分。
2. 天然药物化学成分提取与鉴定是研究天然药物的重要手段，有助于开发新型药物。
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天然药物化学实验指导（供药学药剂专业用）河北医科大学药学院天然药物化学教研室2006年3月前言天然药物化学是运用现代科学理论与技术研究天然药物中化学成分的一门学科，是药学、药剂、药分、中药学等专业及相关专业本科学生必修的专业课，是国家职业药师(中药学)资格考试必考课程。
本课程在有机化学、分析化学、有机化合物波谱学、中药学、生药学等课程的基础上，重点讲授天然药物中化学成分的化学结构、理化性质、提取分离方法、结构鉴定、生理活性、天然药物新药开发等方面的基本原理和实验技能，培养学生具有从事天然药物方面的研究、开发和生产的能力，为我国药学事业的发展输送人才。
天然药物化学实验是天然药物化学课的重要的、必不可少的组成部分。
学习的主要目的是通过实验检验在课堂上所学的理论知识，使学生对理论知识的理解更加深入，掌握得更加牢固；通过实验训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练；使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。
实验教学的重点是加强学生基本操作技能的训练，要求学生掌握以下技能：（一）提取分离方面1. 要求掌握常用的经典方法的原理及操作。
其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、逆流分布法）、重结晶法等。
2. 掌握纸色谱、薄层色谱、柱色谱的原理和基本操作。
（二）结构鉴定方面1. 化学方法①掌握各类化学成分的一般定性反应在鉴定中的应用；②掌握重要衍生物的制备方法及其在结构鉴定中的应用；③了解重要降解反应的原理及应用。
2. 光谱方法了解UV、IR、NMR、MS在天然药物化学成分结构测定中的应用。
目录实验须知 (1)实验技能操作规范 (2)实验一大黄中蒽醌苷元的提取、分离和检识 (8)实验二芦丁的提取、水解；黄酮类化合物与糖类的鉴别 (10)实验三苦参生物碱的提取、分离、鉴别和生物碱的检识 (15)实验四利用纸色谱先导设计法从洋金花中提取分离生物碱 (19)实验五一叶萩碱的分离和鉴定 (23)实验六青蒿素的提取、分离和检识 (25)实验七穿心莲内酯的提取、分离、鉴定及亚硫酸氢钠加成物的制备 (26)实验八设计性实验 (29)附录 (31)2 / 32实验须知学生要求1、第一次实验前要清点所有仪器，若有缺损则向教师报告并填单补充。
以后做实验时如有损坏要立即向教师报告，填单补充并按学校规定比例赔偿。
最后一次实验课结束后在教师监督下清点所有仪器。
2、每次实验前要求提前预习实验内容，了解实验的原理和操作过程。
实验中随时做好记录，在检查仪器装置正确后方可进行实验。
实验完毕后认真总结，写好报告，提取纯化所得单体产物包好，交给老师。
3、实验中不准做与实验无关的事情，严禁吸烟、饮食、大声喧哗，未经允许不得擅自离开，并应随时注意观察实验异常情况。
4、实验结束时，应将实验室清扫干净，门、窗、水、电关好，经老师检查许可后方可离去。
实验室须知天然药物化学实验中所用的药品多数是易燃、有毒、腐蚀性、挥发性、刺激性及易爆的药品，实验操作有时在加温加压等情况下进行，需要各种热源、电器或其它仪器，操作不慎易造成火灾、爆炸、中毒、触电等事故。
所以应加强安全的责任心，提高警惕，消除隐患，遵守实验规则，避免事故。
1．仪器药品都是国家财产，须节约爱护使用；公用物品用完后立即放回原处。
2．使用易燃、易挥发及有毒的有机溶剂时，在回流、蒸馏、减压蒸馏等操作过程中，不能明火直接加热，要放沸石；若在加热时发现无沸石则应冷却后再加，防止爆沸冲出。
减压系统应装有安全瓶。
加液或移液时应停火或远离火源。
起封易挥发溶剂瓶盖时，脸面要避开瓶口，慢慢启开，以防气体冲向脸部。
3．接触有毒及强腐蚀药品应小心操作，操作后要立即洗手。
4．实验中，若涉及有毒或腐蚀性气体产生应在通风橱中进行操作。
必要时可戴好防护用具进行工作。
在进行易燃性有机溶剂实验时，一定要按照操作规程进行。
不可将易挥发、易燃性有机溶剂倒入水槽中，应按老师要求处理，有机废液应倒入废液瓶内。
5．实验台上不得放无用的药品仪器。
在实验时要做到水槽、仪器、桌面、地上清洁整齐。
6．万一不慎着火，要沉着冷静积极抢救，立即切断室内电源和火源，用石棉布将着火部位盖严，使其断绝空气而熄灭；或视火势情况选用适当灭火器材进行灭火。
在实验室宜使用二氧化碳灭火器。
消防器材，沙箱、石棉布、灭火器等应放在方便固定的地点，不能随意移动，均应处于备用状态。
以下为实验室中常发生的事故，应予以特别注意且避免：1．蒸馏或回流加热时，发现未放沸石、未等溶液冷却就补加沸石，结果溶液冲出瓶外而引起火灾。
2．蒸馏或回流易燃物或有毒物时，忘记开冷凝水，大量蒸气逸出亦易引起火灾或造成人员中毒。
3．蒸馏易燃物时塞子漏气引起火灾。
4．用三角烧瓶作减压装置的接收器容易炸裂。
5．使用真空干燥器时，用完就直接开干燥器的放气阀，结果使泵内的机油被吸到干燥器中，样品被污染。
6．实验室水槽被杂物堵塞。
第一部分天然药化实验中常用实验技能操作规程一、圆形（径向）纸色谱技术（一）操作技术及程序1. 准备仪器及试剂培养皿、色谱滤纸、毛细管、相关试剂等。
2．准备色谱滤纸取直径12.5cm的普通圆形滤纸，将滤纸划分出数个区间（根据所点样品的数目划分区间，滤纸不得折叠），在此色谱滤纸中心处用铅笔轻轻画直径约为 1.5～2.0cm的圆，做为点样的起始线。
在此圆的中心打一小孔，将一个长方形的滤纸条搓成一个滤纸芯，插在色谱滤纸的小孔中，纸芯与色谱滤纸成直角，纸芯的高度要比培养皿上下合盖后的内部高度稍低。
3．点样用毛细管将样品及对照品溶液点在色谱滤纸上所画的圆形起始线上，晾（吹）干。
做好标记。
4．选择及配制展开剂。
5．展开将展开剂适量倒入培养皿中，上下盖好，平衡放置，保持5分钟左右，使其内部达液～气饱和。
然后将色谱滤纸小心“扣盖”在培养皿的下皿中，色谱纸保持水平，纸芯保持直立并插入展开剂中，扣好培养皿上盖。
展开剂将沿小纸芯向上浸湿，到达色谱滤纸后以一个圆形的湿斑慢慢向四周扩展。
在展开剂浸湿色谱纸一定距离（一般接近培养皿边沿）时即可结束展开。
将色谱滤纸取出，做好展开剂到达前沿标记，自然晾干或吹干。
6．显色根据所测样品性质选择合适的显色方法，观察色斑的位置。
7．观察实验结果确定出化合物斑点的位置后，用尺子测量距离，计算比移值（R f）或与标准品对照。
（二）注意事项1．色谱纸小心取放，不要折叠、污染。
2．展开剂一定要选择合适，否则样品展开效果差。
3．点样量要合适，浓度小则展开后观察不清楚，浓度太大则有拖尾现象。
径向纸色谱示意图二、硅胶薄层色谱检识技术（一）操作技术及程序1．准备仪器及试剂色谱缸、TLC专用玻璃板（5cm×20cm）、研钵、薄层用硅胶G、0.5%羧甲基纤维素钠（CMC）水溶液、其它相关试剂等。
2．制板①硅胶G-CMC板称取2.5～3g硅胶G放入研钵中，加入约7～9ml 的0.5%CMC水溶液（硅胶：粘合剂CMC约1：2~3），混合成均匀的粘稠状溶液，再将其倒在TLC 玻璃板上并涂布均匀，然后轻轻颠荡，使硅胶均匀地分布在玻璃板上，形成均匀厚度的硅胶层。
水平放置，自然晾干。
②荧光薄板称取硅胶GF254 2.5～3g，同硅胶G－CMC板法制备。
③AgNO3-硅胶板方法一：将AgNO3加入少量水溶解，再加甲醇稀释成10％溶液，把预先制好的硅胶薄层浸入该溶液内约一分钟，取出避光阴干。
方法二：在硅胶G中加入一定量10％硝酸银水溶液（代替水）调成糊状铺板，避光阴干。
3．活化将自然晾干的硅胶板放于烤箱中，在105~110℃中活化0.5～1.0小时。
4．点样在距硅胶玻璃板下端1.5～2cm处用铅笔点样轻轻划一直线，注意不破坏硅胶平面，作为点样起始线。
分别用毛细管将样品及对照品溶液点在硅胶板的起始线上，晾(吹)干，做好标记。
样品点的直径应在2～3mm，样品点之间的间隔应不少于1cm。
5．选择及配制展开剂。
6．展开将展开剂适量倒入色谱缸中，将薄板放于色谱缸中（不得浸入展开剂中），盖好上盖，保持15~30分钟左右，使其内部达液-气饱和。
然后将硅胶板下端小心慢慢地插入到展开剂中，不要使展开剂浸没点样起始线，上端用玻璃物体支起，盖好上盖。
此时将会观察到展开剂沿硅胶板逐渐地向上浸湿（即展开），展开的距离一般为15cm以上。
将硅胶板取出，在前沿处作出标记，自然晾干或吹干。
7．显色根据样品性质选择合适的显色方法进行样品的显色观察。
8．计算比移值R f及与标准品对照。
（二）注意事项1．硅胶板小心取放，硅胶板不要受污染、刮蹭。
2．样品的点样量要合适，如果浓度小则展开后观察不清楚；如果浓度太大或点样的点直径过大可能有拖尾现象。
如果样品溶液的浓度较低，可用毛细管反复在点样处多点几次。
3．展开剂一定要选择合适，否则样品展开分离效果差。
.4．荧光硅胶（硅胶-GF254）与硅胶-G的使用方法相同，但不用显色剂，可在紫外灯（254nm）下观察样品展开情况。
R f值测量示意图三、硅胶柱色谱分离技术（一）操作技术及程序1．准备仪器及试剂玻璃色谱柱、铁架台、接收瓶、相关试剂等。
2．装柱【湿法】取100～200目的柱色谱用硅胶适量，置于烧杯中，加入适量的有机溶剂，搅拌使硅胶完全湿润并无气泡，然后将硅胶加入到色谱柱中。
注意加硅胶时要打开活塞，让硅胶自然下沉，液面保持在硅胶之上，硅胶柱中不得有气泡。
加样前，液面高度要保持在5~10mm。
【干法】取100～200目的柱色谱用硅胶适量，加入到色谱柱中，（主意要打开活塞）加时不断轻轻敲打色谱柱壁，使硅胶紧密均实。
3．加样方法一：一般将样品溶液溶于少量开始的洗脱剂中，制成样品溶液，轻轻注入已准备好的硅胶柱上面，勿使柱面受到扰动，否则影响色谱效果。
方法二：如样品不溶于开始的洗脱剂，则将样品溶于挥发性的溶剂（如乙醇、甲醇）中，然后取少量吸附剂与其拌匀，除尽溶剂，再将含有样品的吸附剂均匀地加入到色谱柱的顶端，再覆盖上少量硅胶或脱脂棉、小玻璃球将其压住，以防洗脱时冲乱顶部的拌样硅胶。
4．选择及配制洗脱剂。
5．洗脱及接收选择好洗脱剂后，放在分液漏斗中，打开活塞慢慢连续不断地滴加在吸附柱上。
同时打开色谱柱下端活塞，等份收集洗脱液，流速保持1～2滴/秒，一般先选用洗脱能力弱的溶剂，逐步增加洗脱能力。
6．同时配合TLC或其它方法检查接收液。
（二）注意事项1．硅胶吸附拌样的比例约为：样品：硅胶=1:1或1:2。
2．吸附剂硅胶的使用量比例约为样品：硅胶=1:30~60或1:100(难分离物)。
3．洗脱剂的极性选择要合适，否则得不到很好的分离。
4．洗脱的速度要合适，一般保持在2~15ml/min。
色谱柱分离过程示意图四、离子交换柱色谱分离技术（一）操作技术及程序1．准备仪器及试剂色谱柱、铁架台、接收瓶、相关试剂等。