台氏液(Tyrode's solution)使用说明
肠肌灌流实验 豚鼠
M胆碱受体和H1受体激动药对离题豚鼠回肠的作用实验步骤1．实验装置准备和仪器参数设置（1）离体肠管描记装置的准备见图7-15-1，麦氏浴槽中加固定量的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。
通气管接95%O2＋5%CO2 混合气体管道。
用螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
（2）张力换能器固定于铁支柱上，换能器输出线接微机生物信号处理系统，仪器参数设置：RM6240系统：点击“实验”菜单，“自定义实验项目”菜单中的“肠肌记录”。
系统进入该实验信号记录状态。
仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1s/div。
2．标本准备（1）取豚鼠一只，用木槌击其头部致昏死，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后，在离回盲部1cm 处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于氧饱和的台氏液培养皿中，沿肠壁除去肠系膜，然后将回肠剪成数小段（约1~1.5cm），用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，换以新鲜台氏液备用。
注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。
（2）取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。
注意保持肠管通畅，勿使其封闭。
肠管一端连线系于浴槽固定钩上，然后放入37℃麦氏浴槽中。
再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上，调节肌张力至2~3g（图7-15-1）。
【观察项目】1．待离体回肠稳定10~30分钟后，记录一段正常收缩曲线后，依次向麦氏浴槽中滴加下列药物。
加入一种药液后，观察2~3分钟，并连续记录肠管收缩曲线，然后用台氏液连续冲洗二次，待基线恢复到用药前的水平，随后记录一段基线。
再加入第二种药液。
浴槽液体的容量应相等。
2．加入10-2 g/L ACh 0.2ml，观察并记录其收缩曲线，2~3分钟后换液。
3．重复以上Ach 剂量，待收缩达最高点时，加入1g/L atropine 0.2ml，观察并记录其收缩曲线。
胡椒碱对家兔离体肠平滑肌收缩活动的影响及机制探讨
BL-420E 生物机能试验系统（成都泰 盟科技有限公司），平滑肌离体灌流装置（上 海豪敦工贸有限公司）。
2 方法 [4]
2.1 离体肠段制备及试验系统调整
取健康大耳白兔，禁食 24h，不禁水，
击兔头枕部致死后迅速切开腹部，取十二 2.4 数据分析与统计
指肠肠管 20cm，置于冰冻 Tyrode's 液中， 洗净肠内容物，将其剪成 1-1.5cm 的肠段 作为实验标本。
采用 SPSS17.0 进行统计分析，计量资 料以 表示，进行 t 检验，以 P<0.05 为 差异有统计学意义。用区间测量法测量给 药前 1min 内和给药后 3min 内收缩曲线的 平均振幅和频率，计算公式为：频率（或 振幅）抑制率（%）=（给药前平均频率（或 振幅）- 给药后平均频率（或振幅））/ 给 药前平均频率（或振幅）×100%。
3 结果
肌槽，持续通入混合气（96%O2，4%CO2）， 60-80 个 气 泡 /min， 标 准 负 荷 1g， 平 衡 30min，待试验系统稳定后，进行试验。
2.2 胡椒碱对肠平滑肌自主活动的影响
按 [2.1] 项 下 操 作， 描 记 一 段 小 肠 的 正常收缩曲线后 , 累计加入胡椒碱吐温溶 液，使终浓度分别为 10、20、30、40、50 mM，加药间隔 5 min，对照组加入等量吐 温 -80，累加 5 次，每次间隔 5 min，观察 胡椒碱对小肠平滑肌收缩活动的影响，记 录收缩频率及振幅，并计算抑制率。
3.1 胡椒碱对小肠平滑肌自主活动的影响
吐温 -80 对家兔肠平滑肌运动波形无 明显影响 , 胡椒碱在 10-50 mM 的范围内可 呈浓度依赖性抑制家兔肠平滑肌运动波形； 浓度在 10 mM 时，与对照组相比，对肠平 滑肌运动的幅度和频率影响很小；浓度在 20-50 mM 时可显著性抑制肠平滑肌活动的 振幅（P<0.05），抑制率随浓度的增加而 增强 , 但对收缩频率抑制不明显，结果见 表 1。
常见的两种生理溶液-任氏液和台氏液西方和应用
常见的两种生理溶液－任氏液和台氏液西方和应用
问题的提出
生理盐水是指生理学实验或临床上常用的渗透压与动物或人体
血浆的渗透压相等的氯化钠溶液。
以前知道的任氏液，其实还
有台氏液。
导读：常见的两种生理溶液配方和应用。
在进行离体组织或器官实验时，为了维持标本的“正常”功能活动，必须尽可能地使标本所处的环境因素与体内相近似。
这些因素
包括电解质成分、渗透压、酸碱度、温度，葡萄糖和O2含量等，这样的溶液称为生理溶液。
最简单的生理溶液为0.9%（恒温动物）或0.65%（变温动物）的N a C l溶液，又称生理盐水。
因生理盐水的理化特性与体液有很大不同，所以难以长时间维持离体组织或器官的正常活动。
为此，英国医生塞达尼·任格（S.R i n g e r）研制了能维持蛙心长时间跳动的溶液，称为任氏液（R i n g e r’s），是—种比较接近两栖动物内环境的液体。
常用的生理溶液包括用于两栖类动物的任氏液和用于哺乳类动物的台氏液（T y r o d e），以下是常用的这两种生理溶液的配制方法。
注：配制时，先将除C a C l2以外的母液按比例倒入容器中，然后加蒸馏水至所配溶液体积的2/3，最后滴加C a C l2母液，同时要边加边搅拌，并加蒸馏水至刻度线。
台氏液是进行哺乳动物离体肠肌实验、肌体灌流、清洗组织时使用的试剂，同时需配合不断通入氧气以维持离体肠肌的正常生理功能。
一般情况下，葡萄糖临用时加入，加入葡萄糖的溶液不能久
置，用时需充以95%O2+5%C O2的混合气体，并用N a O H校正p H至7.4左右。
M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用
M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用【摘要】目的：观察胆碱能神经递质乙酰胆碱，炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。
观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和组胺H1受体拮抗扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。
方法：运用RM6240生理信号采集处理系统以及张力换能器记录不同药物作用下的回肠平滑肌肌张力变化。
结果：加入乙酰胆碱后肠肌张力为1.09±0.48g，再加入阿托品与A药肠肌张力减小到0.08±0.03g（p<0.001）；加入组胺后肌张力为2.12±0.80g，加入扑尔敏与肠肌张力减小到0.08±0.04g（p<0.001），加入氯化钡后肠肌大幅度收缩且呈不稳定性，再加阿托品后仅只略微降低其张力。
结论：乙酰胆碱为M胆碱受体激动药，组胺为H1受体激动药，氯化钡为肌肉兴奋剂，三者均可使肠道平滑肌收缩。
阿托品具有强抗胆碱作用；扑尔敏具有部分拮抗组胺作用；阿托品可通过拮抗胆碱能受的作用。
体部分减弱BaCl2【关键词】：平滑肌；张力曲线；拮抗剂；激动剂；M胆碱受体；H1受体1. 材料1.1 实验动物：豚鼠1.2 药品与试剂未标记的激动剂：A，B，C。
10-2g/L氯化乙酰胆碱（acetylcholine chloride）溶液；10-2g/L磷酸组织胺（histamine phosphate）溶液；10g/L BaCl2溶液。
拮抗剂：1g/L硫酸阿托品（atropine sulfate）溶液；10-3g/L氯苯那敏（chlorpheniramine）溶液。
台氏液（Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2, NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。
1.3 仪器：离体装置：双层玻璃浴槽（20ml）、张力换能器、微距调节夹恒温水浴箱多道生理信号采集处理系统 RM6240生物信号采集处理系统2.实验方法2.1 准备：清洗浴槽：清洗后,将台氏液装至刻度；检查温度：37℃±0.5 ℃；检查通氧: 单个小泡溢出;打开电脑：选中桌面RM6240图标，选择“实验”---生理科学实验---肠肌2.2 实验步骤：清醒豚鼠轻击头部后股动脉放血打开腹腔取出回肠制作回肠标本一端固定在通气钩上置含有37℃台氏液的浴槽中通氧另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接连接RM6240生物信号采集处理系统选择“实验”---生理科学实验---肠肌归零调节换能器张力（1g）稳定20分钟2.3 制作回肠标本：找到回盲部，在离回盲部1cm处剪断回肠，取出回肠约15cm左右一段，置于盛有台氏液的培养皿中，将回肠剪成1-1.5cm的小段。
实验课药物对离体豚鼠回肠的作用
2. 方法
2.8 数据处理
1.数据测量：从加药前的基线到最高点的收缩幅度，测得峰峰值。 2.收集数据：离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据收集 3.导出实验图：文件---当前屏图像输出
收集数据
离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
实验小组
Ach收缩幅度g）
Ach
Atr+Ach
His收缩幅度（g）
Ach
Atr+Ach
His收缩幅度（g）
His
Chl+His
3.3 结果
表2. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响
组别
标本数
收缩幅度（g）
乙酰胆碱
10
阿托品+乙酰胆碱
10
组胺
10
氯苯那敏+组胺
10
*P<0.05:**P<0.01;***P<0.001与乙酰胆碱比较。#P<0.05: # #P<0.01; # # #P<0.001与组胺比较。
• 观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体 拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）对乙酰 胆碱、组胺的拮抗作用。
实验原理
激动剂与拮抗剂的作用机制：
1. 乙酰胆碱：小剂量时有M胆碱受体激动作用。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流↑，肌浆 [Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有.N胆碱受 体激动作用，使胃肠道平滑肌兴奋。
2. 阿托品：为M胆碱受体拮抗剂。阿托品与平滑肌细胞膜 M-受体结合，阻断乙酰胆碱与M-受体结合，从而阻断 乙酰胆碱对M-受体的激动作用。
实验原理
台氏液的作用
台氏液
台氏液的作用
进行哺乳动物离体肠肌实验时使用试剂，同时需配合不断通入氧气以维持离体肠肌的正常生理功能。
台氏液配制 1000ml台氏液含：NaCl 8.0g、10% KCl 2.0ml(0.2g)、10% MgSO4.7H2O 2.6ml(0.26g)、5% NaH2PO4 .2 H2O 1.3ml(0.065g)、NaHCO3 1.0g、1M CaCL2 1.8ml （0.2g）、葡萄糖 1.0g。
注意：CaCl2溶液须在其它基础溶液混合并加蒸馏水稀释之后，方可一面搅拌一面逐滴加入，否则将生成钙盐沉淀，葡萄糖应在临用时加入，加入葡萄糖的溶液不能久置。
台氏液（Tyrode）
进行哺乳动物离体肠肌实验时使用试剂，同时需配合不断通入氧气以维持离体肠肌的正常生理功能。
台氏液配制 1000ml台氏液含：NaCl 8.0g、10% KCl 2.0ml(0.2g)、10% MgSO4.7H2O 2.6ml(0.26g)、5% NaH2PO4 .2 H2O 1.3ml(0.065g)、NaHCO3 1.0g、1M CaCL2 1.8ml （0.2g）、葡萄糖 1.0g。
注意：CaCl2溶液须在其它基础溶液混合并加蒸馏水稀释之后，方可一面搅拌一面逐滴加入，否则将生成钙盐沉淀，葡萄糖应在临用时加入，加入葡萄糖的溶液不能久置
相关文献
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∙CGP37157对心肌线粒体超微结构的影响-解剖学杂志-2012年第4期 (2)。
第五节实验药物剂量的换算和常用生理溶液.
第五节实验药物剂量的换算和常用生理溶液.第五节实验药物剂量的换算和常用生理溶液一、药物剂量的换算在动物实验中，常会遇到给药剂量问题，药物对于某种动物的适当剂量均来自实验。
在实验前，首先应查阅有关文献资料，确定某一药物对某一动物的剂量，如能查到相同实验目的用药记录，就应该直接照试。
如果查不到待试动物的合适剂量，但知道其他动物的剂量或人用剂量，则可进行换算，如查不到相关资料，可先参考LD 50来设计剂量并进行实验。
关于不同种类动物间用药剂量的换算，一般认为不宜简单地按体重比重增减，而须按单位体重所占体表面积的比值来进行换算。
下面将分述按体重换算和按体表面积换算的方法。
（一）按体重换算药物剂量已知A 种动物每千克体重用药剂量，欲估算B 种动物每千克体重用药的剂量，可先查表3-2，找出折算系数（W ），再按下式计算：B 种动物的剂量= W ×A 种动物的剂量（mg/kg ）（1.1）例1 已知某药对小鼠的有效剂量为20 mg/kg ，求家兔的用药剂量。
查表3-2，A 种动物为小鼠，B 种动物为家兔，交叉点折算系数W =0.37，根据（1.1）式计算得：家兔的剂量= W ×小鼠的剂量（mg/kg ）=0.37×20（mg/kg ）=7.4（mg/kg ）表3-2 动物与人体重的每千克体重等效剂量折算系数A 种动物或成人及标准体重（kg ）小鼠大鼠豚鼠兔猫犬人折算W[0.02] [0.20] [0.40] [1.50] [2.00] [12.0] [60.0] 系数小鼠02] 1.001.40 1.602.703.204.80 9.01 [0.大鼠20] 0.70 1.00 1.14 1.88 2.30 3.60 6.25 豚鼠40] 0.61 0.87 1.00 1.65 2.05 3.005.55 兔 [1.50] 0.37 0.52 0.60 1.00 1.23 1.76 3.30 猫 [2.00] 0.30 0.42 0.48 0.81 1.00 1.442.70犬 [12.0] 0.21 0.28 0.34 0.56 0.68 1.00 1.88B 种动物或成人及标准体重（kg ）人 [60.0] 0.11 0.16 0.18 0.30 0.37 0.53 1.00[0.[0.（二）按体表面积折算药物剂量药物的剂量以往多用体重折算，以mg/kg 表示。
木香对家兔离体小肠平滑肌收缩的影响及机制研究
木香对家兔离体小肠平滑肌收缩的影响及机制研究黄文君;辛敏【摘要】目的:分析木香对家兔离体小肠平滑肌收缩的影响,并探讨其作用机制.方法;用BL-420F生物机能实验系统记录小肠收缩力,观察木香对小肠的收缩作用;分析阻断α和β受体后,木香对小肠的收缩作用.结果:木香抑制小肠收缩,20 g/L的木香对小肠收缩幅度的抑制率达(44.88±1.38)％,对小肠收缩紧张性的抑制率达(29.68士2.36)％,差异有统计学意义(P＜0.05),但不影响其收缩频率.阻断β受体,木香对小肠收缩的抑制作用消失;阻断α受体.木香抑制小肠收缩的作用没有明显改变.结论:木香抑制家兔离体小肠平滑肌收缩,其作用可能通过激活平滑肌β受体.【期刊名称】《华夏医学》【年(卷),期】2014(027)001【总页数】3页(P24-26)【关键词】木香;小肠平滑肌;α受体;β受体【作者】黄文君;辛敏【作者单位】桂林医学院生理学教研室,广西桂林541004;桂林医学院生理学教研室,广西桂林541004【正文语种】中文【中图分类】R333.3木香是菊科植物木香(Aucklandia lappa Decne.)的干燥根，始载于《神农本草经》，列为上品。
2010年版药典[1]中记载：木香辛、苦、温；归脾、胃、大肠、三焦、胆经；行气止痛，健脾消食。
木香可用于治疗胸胁、脘腹胀痛，泻痢后重，食积不消，不思饮食。
《本草纲目》云其为“三焦气分之药，能升降诸气”。
目前，临床上将木香用于治疗胃肠动力紊乱引起的消化系统疾病，取得较好疗效，但其作用机制尚未明确[2-5]。
作者研究木香对家兔离体小肠平滑肌收缩的影响，并探讨其作用机制。
1.1 材料与试剂新西兰兔20只，体重(2.2 ± 0.3) kg，雌雄各半，随机分为5组，由桂林医学院动物中心提供。
木香配方颗粒购自江阴天江药业有限公司，将其溶于台氏液中配成0.3 g/ml的原液备用。
盐酸普萘洛尔购自Sigma公司，取药粉溶于蒸馏水中，配成4 mg/ml的原液备用。
台氏液(Tyrode's solution)
北京雷根生物技术有限公司
台氏液(Tyrode's Solution)
简介：
Leagene Tyrode's Solution 也属于平衡盐溶液的一种，主要由氯化钠、磷酸盐、氯化钙、葡萄糖等组成，不含HEPES ，缓冲能力较改良Tyrode's Solution(CZ0063)稍弱。
经常用于哺乳肌体灌流、清洗组织，并维持离体肠肌的正常生理功能。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 根据实验具体要求，保存或清洗离体组织。
1、 由于Tyrode's Solution 含钙离子，容易产生沉淀。
如果产生少许沉淀，可以加热溶解或过滤后使用，产生大量沉淀应弃用。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 CZ0061 Storage Tyrode's Solution 500ml 4℃ 使用说明书 1份。
胰蛋白酶消化液 (0.25%) 不含酚红使用说明
胰蛋白酶消化液(0.25%)不含酚红使用说明货号：T1350规格：100ml产品说明：在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。
常用的消化液为胰蛋白酶，EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞外基质）水解，使组织或贴壁细胞分散成单个细胞，制成细胞悬液用于进一步的实验。
胰蛋白酶消化液(Trypsin Solution)含0.25%胰酶，不含EDTA和酚红，溶于无钙镁平衡盐溶液中，经过滤除菌，可以直接用于培养细胞和组织的消化。
胰蛋白酶消化液通常室温消化2分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
保存：-20℃保存，有效期12个月。
使用方法：1.贴壁细胞的消化：a)吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
b)加入少量胰蛋白酶消化液，盖过细胞即可，室温放置1-2分钟。
不同的细胞消化时间有所不同，对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c)显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。
此时吸除消化液。
加入含血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
d)如果发现消化不足，可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e)如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。
1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2.组织的消化：不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项：1．由于组织或细胞性质不同，实验人员应依据具体情况，确定最佳消化时间；消化细胞时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状况；2．本产品不含抑菌剂，在使用过程中要特别注意无菌操作，避免消化液被微生物污染；3．不宜4℃长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存；4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
动物繁殖调控技术+
相关延伸技术（胚胎冷冻、性别鉴定、胚
胎分割、胚胎嵌合、细胞核移植和基因导入 等）
一、人工受精技术
（Artificial Insemination,AI）
1、历史研究 1780年，意大利Spallanzani首次用犬进行人工受精，获得 成功; 1899年，俄国伊万诺夫进行马和牛的AI工作，将犬的假 阴道改进成了马、牛、羊用假阴道，并研究精液处理方 法，使AI技术进入实际应用阶段; 1951年，英国人Polge等将甘油用于-79℃超低温冷冻保存 牛精液并输精，同年产下世界第一头冷冻精液牛犊; 1952年，Polge又发表了用经液氮在-192℃保存9个月鸡精 液的受精卵孵化出了雏鸡的报告
二、MOET技术
3、受体同期发情处理
同期发情是利用某些外源激素人为控制并调 整一群母畜发情周期的过程,使之在预定的时 间内集中发情,以便有计划地合理组织胚胎移 植所进行的同期化处理方法,也称同步发情。 当前常用的激素药物有PMSG、GnRH、LHRH、 FSH、LH、hCG、PGF2α 、P4及类似物等。在牛上 常 用 二 次 PGF2α , 一 般 注 射 后 36-48h, 有 45% ～ 60%母牛均表现发情。
动物繁殖调控技术
人为地调控动物的 生殖活动，提高动物生 产的效益和质量，使之 适合于人们经济发展与 维持生态平衡的需要， 要求人们加速发展经济 动物、观赏动物及保护 濒危动物，这些促进了畜牧兽医工作者对动物生 殖进行有效了调控，充分发挥动物的生殖潜力， 提高繁殖效率，使之进一步满足人民生活在社会 发展的需求。
二、MOET技术
2.2人工授精
两次授精,以增加获得受精卵母细胞的机会。 动物一般在停药后24-48h内有95%的母畜均表现 发情。一般上、下午各输1次, 因母畜为超排处 理.有多个卵子排出，而需加大输精量.用原精的 0. 2 ml(含4亿精子)/次。如第二次授精时供体 牛仍处于发情状态,则须在8～12h后再进行第三 次授精。
冠状静脉窦的解剖和电生理
为了解冠状静脉窦是否能成为右心房与左心房之间进行 电连接的一条通道 , Antz等 [8 ]系统研究了 6条犬的心脏 。他 们将犬的心脏离体后 ,予台氏液 ( Tyrode’s solution)进行灌注 。 然后 ,于冠状静脉窦内及左心房的二尖瓣环处各置入一根 20 极的电极导管 (它们恰好相邻 ) ,又于冠状静脉窦的肌袖内及 邻二尖瓣环的心房肌内插入微电极 ,以对比局部细胞电活动 与电极导管所记录电位的关系 。结果是 : (1)当起搏左心房的 侧壁时 ,冠状静脉窦的电极导管可记录到双“心房 ”电位 (图 3A) 。第一个电位是低频的信号 ,远端领先于近端 ,且与二尖 瓣环电极导管记录的信号同步 ,提示其为来自于左心房内邻 近二尖瓣环的心肌的电活动 ;而第二个电位是高频的信号 ,只 在冠状静脉窦肌袖所分布的区域 (距冠状静脉窦口约 0 ～ 35 mm范围内 )可记录到 ,且与冠状静脉窦肌袖微电极所记录 的电信号同步 ,提示第二个电位是冠状静脉窦肌肉自身形成 的电活动 。第二个电位的最早激动点 距 冠 状 静脉 窦 口约
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外翻肠囊法研究奥硝唑对映体在大鼠不同肠段的吸收特性王嫦鹤;刘雪峰;王莉;耿庆光【摘要】目的：考察奥硝唑在大鼠各肠段的吸收特性及奥硝唑两手性对映体在大鼠不同肠段吸收的差异性。
方法采用大鼠外翻肠囊法，以HPLC手性色谱柱法测定奥硝唑在不同肠段的吸收量以及S‐奥硝唑及R‐奥硝唑的同一肠段肠吸收量，并分别计算吸收速率常数（Ka ）和表观渗透系数（Papp ），同法考察了P‐蛋白抑制剂（维拉帕米和环孢素A）对奥硝唑肠吸收特性的影响。
结果奥硝唑在不同肠段吸收均呈线性，符合零级药物吸收速率，吸收趋势为空肠＞回肠＞结肠。
在空肠段两对映体以近于1∶1的比例同时吸收，吸收速率不存在显著差异，随着供试液中奥硝唑质量浓度的上升，Ka呈线性增加（R2＞0．99），Paap基本保持不变，P‐蛋白抑制剂对奥硝唑的肠吸收没有显著性影响（P＞0．05）。
结论奥硝唑在不同肠段的吸收有差异，空肠部位是吸收的最佳部位（P＜0．05），S‐奥硝唑与R‐奥硝唑在肠道中吸收速率不存在显著差异，吸收以被动扩散机制为主，奥硝唑不是P‐糖蛋白的底物。
%Objective To study the absorption characteristics of ornidazole and the absorption difference of ornidazole enantiomers at different intestine segments by isolated in vitro‐everted sac intestine model ,and to investigate the effe ct of P‐inhibitors to ornidazole intestinal absorption .Methods Rat in vitro‐everted intestine sac was used to determine the characteristics of ornidazole . The concentration of ornidazole and its enantiomers at different intestine segments were determined by HPLC equipped with chiral chromatographic column .Then the constant of absorption rate(Ka ) and the apparent permeability coefficient (Papp ) were calculat‐ed .Same method was applied ininvestigating the impact of the P‐glycoprotein inhibitors(verapam il and cyclosporin A) on the ab‐sorption of ornidazole in intestinalsegments .Results The absorption of ornidazole in different intestinal segments showed a linear absorption and complied with the zero order kinetics .The descending order of ornidazole absorption wasjejunum ,ileum and colon . There was no significant difference among the absorption rate of the two enantiomers .Ka increased linearly (R2 >0 .99) and Paap re‐mained unchanged with the rise of concentration for ornidazole in solution at jejunu m .P‐protein inhibitors had no significant effect on the intestinal absorption(P>0 .05) .Conclusion The absorption of ornidazole in different intestinal segments was different and the Ka and Paap at jejunum were significantly higher than that at the other segments of intestine (P<0 .05) .There was no signifi‐cant difference between S‐ornidazole and R‐ornidazole in the intestinal absorption rate and met the passive transport mechanism . Ornidazole would not be the substrate of P‐protein inhibitor .【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2016(031)004【总页数】4页(P371-374)【关键词】奥硝唑;肠外翻;对映体;P-糖蛋白【作者】王嫦鹤;刘雪峰;王莉;耿庆光【作者单位】陕西省食品药品检验所，西安 710061;陕西省食品药品检验所，西安 710061;陕西省食品药品检验所，西安 710061;陕西省食品药品检验所，西安710061【正文语种】中文【中图分类】R945·药物分析·奥硝唑是硝基咪唑类药物，结构中有一个手性中心，故有一对手性对映体。
名词委审定 汉英生理学名词
强度-时间曲线 strength-duration curve
顺应 accommodation
适应 adaptation
不应期 refractory period
绝对不应期 absolute refractory period
相对不应期 relative refractory period
最大刺激 maximal stimulus
阈下刺激 subthreshold stimulus
反应 response, reaction
阈下反应 subthreshold response
局部反应 local response
基强度 rheobase
利用时 utilization time
超常期 supranormal period
低常期 subnormal period
极化 polarization
细胞膜两侧电荷不均匀分布的状态。
去极化 depolarization
复极化 repolarization
超极化 hyperpolarization
超射 overshoot
肌电图 electromyogram,EMG
神经生理学 neurophysiology
神经科学 neuroscience
神经生物学 neurobiology
协调 coordination
本能 instinct
组构 organization
整合作用 integration
回荡 reverberation
膜电流 membrane current
膜电阻 membrane resistance
微生态制剂对小鼠受损肠道的修复作用
微生态制剂对小鼠受损肠道的修复作用目的：探究微生态制剂对小鼠肠道损伤后的修复作用。
方法：将小鼠分5组，每组10只，对1～4组小鼠进行腹腔注射顺铂，1 mL/100 g，造受损肠道模型。
然后分别用乳酸菌、功能寡糖、乳酸菌和功能寡糖混合、饮用水（阳性对照）喂养1～4组小鼠，第5组小鼠作阴性对照，常规饲料饲养。
2周后比较各组小鼠小肠石蜡切片和离体小肠平滑肌收缩能力。
结果：乳酸菌和功能寡糖混合3组，切片观察小肠黏膜细胞排列紧密，小肠平滑肌收缩力最强。
结论：乳酸菌与功能寡糖制剂能有效修复损伤后小肠，增强小肠蠕动。
微生态制剂，是利用正常微生物或促进微生物生长的物质制成的活的微生物制剂[1-3]。
也就是说，一切能促进正常微生物群生长繁殖及抑制致病菌生长繁殖的制剂都称为微生态制剂[4-5]。
乳酸菌作为重要的益生菌来源，主要通过恢复或增强肠道稳态发挥作用，是一类具有佐剂活性的非病原细菌，并有作为黏膜疫苗载体使用的潜能[6]。
其中双歧杆菌是人类肠道菌群中唯一的一种既不产生内毒素又不产生外毒素，无致病性的具有许多生理功能的有益微生物[7]。
功能性低聚糖是肠道内有益菌的增殖因子，其中最明显的增殖对象是双歧杆菌，因为双歧杆菌细胞表面具有寡糖的受体，而许多寡糖是有效的双歧因子。
本实验主要比较不同组合的几种微生态制剂对受损肠黏膜的修复作用，优化最佳组合方案，以此维护肠道健康，提高患者的生存质量，为临床应用提供参考。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物選择同批次的KM小鼠，雌雄各半，体重（28±2）g，购于山东省农业科学院畜牧兽医研究所。
1.1.2 药品及试剂顺铂（10 mL/支，批号：H37021358）购自齐鲁制药有限公司；低聚异麦芽糖（食品级，纯度：99.8%），购自安徽中南生物科技有限公司；乳酸菌（含双歧杆菌BB-12、保加利亚乳杆菌、嗜热乳链球菌等，产品标准号Q/TZCXG0001）北京川秀科技有限公司。
台氏液粉剂（Tyrodes
台⽒液粉剂（Tyrodes Solution,⽆钙）上海笃玛⽣物科技有限公司代理的品牌：试剂：Sigma、TCI、Amresco、Aldrich、Fluka、MERCK、Roche⽣物试剂及耗材：R&D、Abcam、santan cruz、CST、 Cayman、ClioCell、Gibco、Invitrogen、Axygen、Costar、Gilson、Eppendorf、Nichipet、Dragonmed、GE Healthcare等笃玛主要经营：ELISA试剂盒，标准品，抑制剂，染液，抗体等。
笃玛⽣物外包实验免疫组化、TUNEL（凋亡）实验、原位杂交实验、HE染⾊、特殊染⾊、免疫印迹（WB），免费代测ELISA实验染⾊步骤:（1）切⽚脱蜡⾄蒸馏⽔（2）放⼊预热的 1 当量盐酸中 10 分钟（3）蒸馏⽔洗（4）Schiff 液中染 10 分钟（5）⾃来⽔洗 15 分钟⾄细胞核红⾊（如 2～5 步不做，可在染好爱先蓝后染核固红 2 分钟）（6）蒸馏⽔洗（7）⾼铁⼆胺液 18～24 ⼩时（8）爱先蓝液 (pH2.5) 染 10～20 分钟（9）蒸馏⽔洗（10）脱⽔, 透明, 封固2、结果: 硫酸化酸性粘液呈棕⿊⾊, 羧基化酸性粘液（唾酸粘液）物质蓝⾊。
硫酸化酸性粘液可见于⼤肠粘膜，⽽⼩肠粘膜仅出现唾酸粘液，此法多⽤于确定肠化的分型。
HP（硝酸银法）1、试剂配制：（1）醋酸缓冲贮备液，PH3.60.2N 醋酸缓冲液，PH3.6 10 ml蒸馏⽔ 240 ml以下各液均⽤此液配制（2）1 % 硝酸银液硝酸银 1 g醋酸缓冲贮备液，PH3.6 100 ml（3）2 % 硝酸银液硝酸银 0.2 g醋酸缓冲贮备液，PH3.6 10 ml（4）5 % 明胶液明胶 5 g醋酸缓冲贮备液，PH3.6 100 ml先把醋酸缓冲贮备液加温⾄ 40℃左右，然后倾⼊明胶，于 37℃温箱内慢慢溶解，搅拌。
（5）3 % 对苯⼆酚液对苯⼆酚 0.3 g醋酸缓冲贮备液，PH3.6 10 ml（6）明胶对苯⼆酚液3 % 对苯⼆酚液 1 ml5 % 明胶液 15 ml（7）显影液明胶对苯⼆酚液 16 ml2 % 硝酸银液3 ml在操作到第 4 步完成前 5 分钟充分混合，置于 56℃⽔浴箱中保温待⽤。
分离小鼠心肌细胞protocol
分离小鼠心肌细胞Protocol实验动物：小鼠, 体重20~30g1急性分离心肌细胞A 实验准备：1）无钙台氏液：配500mL无钙台氏液(50mL台氏母液+450mL去离子水+1g 葡萄糖), 用NAOH 调PH，一般在7.35~7.4之间即可，注：充氧后调PH值，否则充氧后PH下调。
调PH值前严格校正PH计，小鼠心肌细胞对PH值特别敏感。
表1：台式母液配方mM MW g/L g/500ml (10x)NaCl 126 58.44 7.363 36.82KCl 5.4 74.55 0.403 2.02Hepes 10 238.3 2.383 11.92MgCl2.6H2O 1.0 203.3 0.203 1.02NaH2PO4.2H20 0.33 156.01 0.052 0.2574CaCl2 1.8 147.03Glucose 10 198.2注：CaCl2, Glucose配制时后加，（浓度0.9M CaCl2母液 6.616g(有水)或者4.995g(无水)+50ml去离子水），0.2ml CaCl2母液/100ml无钙台氏液2）称取5mg胶原酶Ⅱ+8mg白蛋白3）配有钙液200ml：即200ml无钙液+0.4ml CaCl2 (0.9M)。
注：小鼠心肌细胞对钙浓度特别敏感，我们为了缩短心脏复跳时间，减少心肌耗氧，把有钙液中钙离子浓度降到正常的浓度的1/44) 准备器械：大弯剪刀一把，小直剪刀两把，直镊子两把，止血钳两把，弯镊子两把，纱布一块，注射器60mL一个，10mL一个；手术线一团(小鼠主动脉比较细，手术线比大鼠的要细)；表面皿三个，小烧杯50mL 三个，量筒50mL两个，500mL 一个；大烧杯500mL一个250mL一个；滤纸若干！滴管4个, 7号注射针头一个（尖端磨平，靠近尖端两厘米处用止血钳夹出一道深沟以便于固定主动脉时系线）。
5）KB 液配方mM MW g/LGlutamic acid70 147.13 10.3(谷氨酸)15 125.14 1.875Taurine(牛黄酸)KCl 30 74.55 2.237Hepes 10 238.3 2.383MgCl2.6H2O 0.5 203.3 0.1015Glucuse 10 198.2 1.982EGTA 0.5 380.4 0.19KH2PO410 136.09 1.36注：5M KOH 调PH 值（7.3-7.4），5M KOH 配制：28g KOH 溶于100ML去离子水，KB 液保存在-20℃冰箱中保存。
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台氏液(Tyrode's solution)使用说明
货号：T1421
规格：100ml/500ml
保存：2-8℃保存，有效期1年。
产品简介：
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution，BSS)与细胞生长状态下的pH值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中，细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
台氏液（Tyrode's solution）属于平衡盐溶液的一种，主要由氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、葡萄糖、BSA等组成，含HEPES，缓冲能力强。
经常用于哺乳动物离体肠肌实验并维持离体肠肌的正常生理功能、肌体灌流、清洗组织。
操作步骤（仅供参考）：
1、按具体实验要求，保存或清洗立体组织。
注意事项：
1、由于本Tyrode's solution含有钙离子，容易产生沉淀。
如果产生少许沉淀，可以加热溶解或过滤后使用，产生大量沉淀应弃用。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。