决明子蒽醌类成分的提取分离及其制剂研究

决明子蒽醌类成分的提取分离及其制剂研究

任国贤

河南大学药学院，河南开封（475001）

摘 要：本文对决明子蒽醌类的几种提取分离方法及其制剂进行研究，并对常规方法和剂型进行改进。介绍改进后的决明子蒽醌类的提取分离方法和有效成分剂型，以期为新药物的生产与研究提供参考。

关键词：决明子蒽醌类；连续提取法；微球；降压；复明

决明子是一味常用中药，为豆科植物决明Cassia obtusifolia L.或小决明C.tora L.的干燥成熟种子，具有降压明目，清热通便之功效．除用生品外，还用炒制品．有报道[1]决明子的降压作用较利血平为好，且维持时间更长．蒽醌类是决明子中的主要成分，其常规提取方法，如浸渍，煎煮，渗漉，回流提取等方法存在很多不足．因此我们设计了用连续提取法提取蒽醌类的方法．传统的汤剂剂型落后，复方制剂成分复杂不便于研究，由此我们针对剂型的改进进行研究．还有报道[2]，决明子可以通过糖酵解的途径，防治老年性白内障，增加眼组织中三磷酸腺苷（ATP）的含量，可以用于防治近视．所以对决明子中蒽醌类的提取方法与制剂开发势在必行，为了方便以后单组分制剂的开发，我们更应对粗提物进一步分离，方便以后进行单组分药理的研究，本文就决明子中蒽醌类的提取分离与制剂工艺进行研究，为产其研究与生提供参考。

1. 提取

常规方法煎煮与浸渍提取蒽醌类成分效果不好，浪费药材；渗漉与回流提取法需求大量的溶剂且耗时麻烦．为了弥补常规方法中的不足，可采用连续提取法．采用此法之前先要对药材烘烤粉碎，烘烤的目的是可以降低其结合蒽醌的含量，提高游离蒽醌的含量[3]，结合蒽醌主要起通便保肝的作用．粉碎是为了充分提取药物中的蒽醌类。

实验仪器，索氏提取器（工业器材装置与索氏提取器相似）

实验溶剂，无水乙醇

实验原理，索氏提取器共分三部分，上部是冷凝器、中部是带有虹吸管的提取管、下部是烧瓶，操作时将决明子药粉的滤纸袋放入提取管中，内装物高度不得超过虹吸管顶部，烧瓶内加入适量乙醇做挥发性溶剂在水浴上加热．溶剂受热气化，通过中部提取管旁边的蒸气上升管到达上部的冷凝器中，冷凝为液体流入提取管中进行成分提取，待溶剂在提取管中进行成分提取，溶剂在提取管中凝集到一定容量，即当其液面超过虹吸管上端时，则因虹吸作用提取管内全部溶液虹吸流入烧瓶中，流回烧瓶的溶剂可再受热而气化，提取出的蒽醌类成分则留在烧瓶中，如此反复提取，至于植物中蒽醌类成分提尽为止。

连续提取法由于在提取过程中，新鲜溶剂不断地加入而始终保持较高的浓度差，故提取效率高，此法仅需少量溶剂，就能使有效成分提取完全．所以连续提取法可以在工业上很好的提取决明子中蒽醌类．所得提取液进行浓缩，回收溶剂，得到提取物蒽醌类．其浓缩方法为：常压／减压蒸馏法，薄膜浓缩法等，浓缩后可得到主要成分蒽醌类粗品，此方法适合工业推广生产，可节约溶剂和药材，提高药材中的有效成的提取率。

2. 纯化

2.1盐析法

实验原理，在水溶液中加入无机盐饱和时，可使某些溶解度小的物质与溶解度大的物质分离，甚至沉淀析出，然后再对溶液进行溶剂萃取，从而萃取出较纯品蒽醌类。

实验步骤，先把决明子粗提物溶于水中，在加入足量的无机盐使其饱和，使少部分溶解度小的物质先沉淀析出，然后过滤，再用氯仿对滤液进行萃取，萃取后蒸干氯仿，干燥可得较纯的蒽醌类成分．此法的缺点是不能达到很好的纯化效果，且有机溶剂有毒不利于安全生产。

2.2沉淀法

实验原理，蒽醌类在一定条件下可以和某些物质溶合形成沉淀物而在水溶液中与其他物质分离，关键是选择适当的沉淀剂，已报道的沉淀剂有四类，即无机盐类，生物碱，蛋白质类和高分子聚合物，其中无机盐类最为常用，其他三类沉淀剂成本高，目前尚处在实验阶段，无机盐类又可分为三类：（１）重金属碱或盐，此盐重金属离子对产品有影响，不易推广；（２）氢氧化物，这类沉淀剂廉价，但强碱对容器壁有腐蚀性；（３）盐离子，如钙，镁，铝，锌等，是一类比较有前途的沉淀剂，较前两种均有优势。

实验步骤，可以用碱式醋酸钙与蒽醌类络合形成沉淀物质，过滤出沉淀部分，水洗去沉淀的吸附物，再把沉淀混悬与容器中，通过硫化氢气体，硫离子和蒽醌类中的络合铅可以迅速生成沉淀析出，然后过滤出混悬物，反复几次，蒽醌类中的铅被除去生成蒽醌溶于水中，合并滤液，蒸干，干燥，即可得纯品蒽醌类．可用于提取物下一步制剂。

沉淀法的优点是无需使用大量有机溶剂，生产安全性好，大多沉淀剂成本较低，通过对比实验可以筛选出更好的沉淀剂来纯化蒽醌粗品，但重金属盐残留对产品安全性也构成隐3. 分离

实验方法，层析法又称色层法或色谱法，是分离复杂混合物的物理方法．用洗脱剂洗脱，分离混合物中不同组分．关键是柱填料与洗脱剂的选择，可以用硅胶或聚酰胺层析法来分离蒽醌类，我们也可以用磷酸氢钙装柱，用苯洗脱。

实验原理，决明子蒽醌类主要有六种化合物．六种化合物各在磷酸氢钙柱层中以不同的速率移动，分为不同的色带，阻滞力小的随着溶剂在柱层中流动，因此流程短，移动速率快而先流出层析柱；阻滞力大的，流程长，移动速度慢，从层析柱中流出就较晚．由此可达到分离的目的。

实验步骤[4]，把纯制蒽醌类溶于苯中，浓缩后通过磷酸氢钙（干装）柱层析，用苯作洗脱剂，苯展开后可分为５个色带，继续用苯洗脱分别得到第一条色带的苯洗脱液，第二条黄色带的苯洗脱液，第三条黄褐色带的苯洗脱液，第四条黄色带的苯洗脱液，第五条橙黄色带的苯洗脱液。

第一条黄色带的苯洗脱液，蒸干苯后得到一种黄色物质，次此黄色物质溶于石油醚，用石油醚提取得到石油醚提取部分，继续通过磷酸氢钙（干装）柱层析，这次用石油醚展开，分为两个部分，继续用石油醚洗脱，得上面部分的石油醚洗脱液和下面部分的石油醚洗脱液．把上面部分洗脱液中的石油醚蒸干，溶于甲醇进行重结晶可得到单体大黄素－６－甲醚，

其结构式为：

下半部分的石油醚洗脱液也把石油醚蒸干后，甲醇重结晶得到单体大黄酚，其结构式

为：

第二条黄色带的苯洗脱液，对其蒸干后，甲醇重结晶可得到单体钝叶鼠麴素，其结构

式为：

第三条黄褐色带的苯洗脱液蒸干后用乙醇作重结晶溶剂，结晶后得到单体钝叶决明素，其结构式为：

第四条黄色带的苯洗脱液蒸干后，甲醇重结晶可得到单体甲基钝叶决明素，其结构式为：

第五条橙黄色带的苯洗脱液蒸干后，甲醇重结晶可得到单体橙钝叶决明素，其结构式

为：

4.制剂

临床上决明子常被制成汤剂治疗高血压，其煎煮不方便且有效成分溶出不完全．市场上现有中药眼药品种很少，极少部分医院对中药眼药的制剂落后，如散剂使用时，不论用冷开水调匀涂入眼角，还是直接加入眼内，都不方便，受污染的机率较大，眼膏基质几乎全是凡士林等溶性物质．现有市场上降压药与眼药几乎全是西药，其副作用较大，其眼药水几乎采用多剂量包装，为防止滴眼剂多次开启后药液染菌，滴眼剂中必须加入防腐剂，最近的研究报道[5]，滴眼剂中某些常用的防腐剂，如苯扎溴铵，醋酸氯己定等，长期频繁的使用会对角膜上皮有不同程度的损害．所以我们对降压药采用新的制剂包装，对决明子眼药采取提出有效成分的溶液包装，采用单剂量的包装形式，进一步提高产品质量，减少防腐剂长期使用的毒副作用。

4.1片剂

降压药采用片剂比常规机型的优点为：（１）一般情况下片剂的溶出速率好；（２）剂量准确，片剂内药物含量差异较小；（３）质量稳定，片剂为干燥固体，为防止药物氧化，变质及潮解可借包衣加以保护，所以光线，空气，水分，紫外线对此影响较小；（４）携带，运输，服用方便；（５）机械化的生产，其产量大，成本低，＂卫生标准＂也容易达到。