苯酚-硫酸法测多糖含量

苯酚-硫酸法测多糖含量

原理

多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。

1．制作标准曲线：准确称取葡萄糖标准贮备液（25mg/100ml），1.4、1.2、1.0、0.8、0.6、0.4、0.2ml,于10ml容量瓶中定容，各取2ml置于试管中，准确加入5%苯酚1.0ml及98%浓硫酸5.0ml,摇匀,静置5分钟,60°C 水浴15分钟，冷却至室温。

空白对照（以超纯水或蒸馏水替代标准液，方法同上）

在490nm测吸光值，以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标，绘制标准曲线，得标准回归方程。

2．样品含量测定：取样2.5mg,在10ml容量瓶定容，取1ml稀释至10ml,其他处理方法同上。