原核细胞dna的复制

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和复制有关的酶
（一）DNA聚合酶
polⅠ
功能
① 5′→3′聚合酶活性； 酶与模板结合后构象改变，识别碱基，正确配对后才发挥聚合
作②用3′。→ 5′外切酶活性； 主要是对新生DNA链进行校对，防止“错配”
③ 5′→3′外切酶活性； 主要是对DNA损伤的修复，以及在DNA复制时RNA引物 的
大肠杆菌和其它细菌的DNA连接酶需要 NAD+提供能量；在高等生物和噬菌体中， 则要ATP提供能量。T4 DNA连接酶可连接 两个游离的DNA分子
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原核细胞DNA复制的分子机制
半保留复制？
DNA复制方式？
全保留复制？
分散式复制？
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半保留复制的实验证据
亲
1958年Meselson
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终止
1、在DNA聚合酶Ⅰ催化下切除RNA引物；留下的空隙由 该酶催化合成一段DNA填补上；
2、在DNA连接酶作用下，连接相邻的DNA链； 3、修复掺入DNA链的错配碱基；以修复方式填补终止区 50-100bp的空缺。
这样以两条亲代DNA链为模板，各自形成一条新的 DNA互补链，结果形成了两个DNA双股螺旋分子。
RNA引物的合成需要引物合成酶的催化。
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源自文库
延伸
在DNA聚合酶Ⅲ的作用下，活化的脱氧核苷酸加 到引物末端，同时脱掉一个焦磷酸。
前导链连续合成
后随链以一些列冈崎片段和方式不连续合成
冈崎片段：DNA复制过程中，两条新生链都只能 从5‘端向3’端延伸，前导链连续合成，滞后链分段 合成。这些分段合成的新生DNA片段称冈崎片段。
切除及其空隙的填补
④内切酶活性：切掉不配对碱基
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Pol Ⅱ
功能
① 5′→3′聚合酶活性； ② 3′→5′外切酶活性。
该酶无5′→3′外切酶活性；且活性很低，功能尚不清楚
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Pol Ⅲ DNA 复制中起关键作用的酶 功能
①5′→3′聚合酶活性； ②3′→5′外切酶活性。 Pol Ⅲ是由十种亚基构成的不对称二聚体
DNA的复制可分为起始、延伸、终止三个 阶段。
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和DNA复制有关的的概念
复制子：从复制起点到复制终点之间的一 个DNA复制单位称为复制子。
复制原点：原核生物DNA的复制是从DNA 分子上的特定位置开始的，这一位置复制 原点。
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复制叉：DNA复制时双链解开，形成一个Y 形结构，称为复制叉。
代
和Stahl用同位素15N标
记大肠杆菌DNA，首
先证明了DNA的半保
第
留复制。
一
代
第 二 代
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半保留复制
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双链解开
DNA旋转酶(拓扑异构酶Π)、 DNA解链酶、单链结 合蛋白协同作用
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起始----RNA引物的合成
在DNA模板上先合成一段RNA引物，DNA 聚合酶从引物的3’-OH末端开始合成新的 DNA链。
原核细胞DNA的复制
林琳 生科院6666班 （6666666666666）
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什么是DNA复制 和DNA复制有关的的概念 和复制有关的酶 原核细胞DNA复制的分子机制
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2
什么是DNA复制
所谓DNA的复制，即以亲代DNA分子为模 板合成与其完全相同的子代DNA的过程。
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小结
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， α、ε、θ构成核心酶
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ε ε
' '
Pol Ⅲ
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（二）DNA连接酶：
若双链DNA中一条链有切口，而且一端是3′OH，另一端是5′-磷酸基，连接酶可催化这两 端形成磷酸二酯键，而使切口连接。
3'
5'
3' 5'
OH P
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DNA连接酶不能将两个游离的DNA分子 连接起来。