造血干细胞的表面标志和临床应用
造血干细胞分选主要标志
造血干细胞分选主要标志造血干细胞是血液系统中最基础的细胞类型,其具有极强的自我更新和分化能力,可以分化为各种具有特定功能的血细胞,如白细胞、红细胞和血小板等。
在临床治疗中,造血干细胞分选可以帮助医生寻找到适合患者的干细胞,用于造血干细胞移植,以治疗一系列血液和免疫系统相关疾病。
而造血干细胞分选所依据的主要标志则成为了重要的参考指标。
造血干细胞分选所基于的主要标志主要包括以下几个方面:第一、表面标记的克隆化抗体在造血干细胞表面,存在着多种特异的抗原。
这些抗原可以通过克隆化抗体进行检测。
其中,CD34是目前应用最为广泛的标志物之一。
CD34能够标记出具备造血干细胞特异性的人类骨髓细胞群,对于造血干细胞的分选十分重要。
第二、表面标志的共有抗原除了特异性抗原外,造血干细胞表面还存在着共有的抗原。
这些共有抗原对于干细胞分选同样具有重要的作用。
此处的共有抗原包括CD45和CD71,它们能够被所有造血系细胞表达,因此可以从细胞表面的角度来确定造血干细胞。
第三、功能标志除表面标记外,功能标志也是造血干细胞分选的重要参考因素。
在这个方面,可以根据细胞的内在功能特性,如依赖多能性(CFU-Mix)的形态、元素的吞噬等方面来对造血干细胞进行分选。
最后,需要强调的是,造血干细胞分选主要标志是多种因素综合作用的结果。
因此在干细胞分选过程中,应该综合考虑多种检测因素,包括表面标记的克隆化抗体、表面标志的共有抗原、功能标志等因素。
只有全方位地综合考虑这些因素,才能更好地判断一个细胞是否适合用于造血干细胞移植等临床治疗。
造血干细胞表面标志物
造血干细胞表面标志物造血干细胞(Hematopoietic stem cells, HSC)是一类成体干细胞,具有干细胞的特性:自我更新和分化潜能。
造血干细胞是一种骨髓来源的多能干细胞,它是血液系统中的“种子”细胞。
造血干细胞(HSCs)在造血过程中形成血系中的所有细胞,包括各种成熟细胞如白细胞、红细胞、血小板等。
在受到适当刺激时还分化为其他非造血组织(如脂肪细胞、心肌细胞、内皮细胞和胰腺细胞)[1]。
造血干细胞具有调节体内平衡、免疫功能、抗微生物、抗炎症等生物学功能。
它在血液病、遗传性血液病和自身免疫性疾病的治疗方面有重要作用。
1. 造血干细胞类型2. 造血干细胞的来源3. 造血干细胞的生物学特性4. HSC和免疫系统5. 人体造血系统层次6. 造血干细胞的细胞表面标志7. HSC的临床应用1. 造血干细胞类型已经定义了两种类型的造血干细胞:能够终生保持自我更新和多谱系分化潜能的长期再生细胞(LTRC);来源于LTRC的短期再生细胞(STRC),虽然它们保持了多能性,但它们表现出更有限的自我更新潜能。
它们重建髓系和/或淋巴系间隔的时间很短,大约6周。
2. 造血干细胞的来源造血干细胞存在于成年人的骨髓中,特别是在骨盆、股骨和胸骨中。
它们也存在于脐带血和少量的外周血中。
2.1 骨髓造血干细胞(HSCs)是一种骨髓来源的多能干细胞。
从骨髓中获取造血干细胞通过外科手术,从两个髂骨后嵴分次采集。
骨髓中每10万个细胞中约有1个是长期造血干细胞(LT-HSC)。
2.2 外周血大部分造血干细胞来源于骨髓,少量的干细胞和祖细胞在血液中循环。
人类造血干细胞的临床移植,可以从外周血中收集供体细胞。
造血干细胞的采集是在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)等造血生长因子的作用下,将骨髓中的HSC动员到外周血后,通过分离的方式采集。
2.3 脐带血(UCB)脐带血是造血干细胞和造血祖细胞的丰富来源,它所含不同类型的造血祖细胞的数量大约是成人血液中观察到的数量的10倍。
微生物学与免疫学基础自考题-4
微生物学与免疫学基础自考题-4(总分:100.00,做题时间:90分钟)一、单项选择题(总题数:30,分数:30.00)1.胸腺外T细胞发育成熟的场所可能是( )A.骨髓 B.脾脏C.淋巴结 D.肠道(分数:1.00)A.B.C.D. √解析:2.妊娠5个月至出生后,造血干细胞主要来源于( )A.骨髓 B.胚肝C.胚胎卵黄囊 D.胸腺(分数:1.00)A. √B.C.D.解析:[解析] 本题主要考查的知识点是造血干细胞的来源。
[要点透析] 造血干细胞最早产生于胚胎卵黄囊,妊娠4周出现于胚肝,妊娠5个月至出生后,造血干细胞主要来源于骨髓。
3.人类造血干细胞表面主要标志为( )A.CD34和CD117 B.CD28和CD40C.CD21和CD34 D.CD28和CD117(分数:1.00)A. √B.C.D.解析:[解析] 本题主要考查的知识点是造血干细胞的表面主要标志。
[要点透析] CD34和CD117是人类表面主要标志,应用CD34单克隆抗体可以从骨髓、胚肝或脐血中分离、富集造血干细胞,CD117对不同分化阶段造血干细胞的发育分化具有诱导和促进作用。
4.淋巴细胞再循环是指( )A.淋巴细胞从胸腺迁移到淋巴结,并返回到胸腺B.血液中的淋巴细胞进入淋巴循环系统,并返回血液C.淋巴细胞从胸腺迁移到外周,并返回到胸腺D.淋巴细胞在骨髓中的分化发育过程(分数:1.00)A.B. √C.D.解析:[解析] 主要考查的知识点是淋巴细胞再循环。
[要点透析] 血管内T、B淋巴细胞可穿过高内皮小静脉或其间隙,进入淋巴结相应区域,然后再迁移到髓窦,通过输出淋巴管进入淋巴循环,最终经淋巴导管返回血流,完成再循环。
5.初始B细胞是指( )A.未接受过抗原刺激的成熟B细胞 B.骨髓中的原始B细胞C.进入淋巴结中的活化B细胞 D.在骨髓中发生阴性选择的B细胞(分数:1.00)A. √B.C.D.解析:6.皮肤相关淋巴组织的组成细胞不包括( )A.角质细胞 B.巨噬细胞C.NK细胞 D.表皮内T细胞(分数:1.00)A.B.C. √D.解析:[解析] 本题主要考查的知识点是皮肤相关淋巴组织的细胞组成。
第十二章造血干细胞及免疫细胞的生成
第十二章造血干细胞及免疫细胞的生成免疫细胞都属于血细胞,所有血细胞都来源于造血干细胞。
因此在一定意义上讲,免疫细胞的发育分化就是造血干细胞分化成熟的过程。
第一节 造血干细胞的特性和分化一、造血干细胞的起源和表面标记(一)造血干细胞的起源哺乳动物的造血最早发生在卵黄囊,随后转移到胎肝,胚胎发育中期以后以及出生后,骨髓成为主要的造血场所,并为B细胞发育的中枢免疫器官;胸腺是T淋巴细胞的分化成熟的中枢免疫器官。
早期的造血干细胞是多能造血干细胞(pluripotent hematopoietic stem cell),具有自我更新(self−renewing)和分化(differentiation)两种重要的潜能,赋予机体在整个生命过程中始终保持造血能力。
多能造血干细胞最初分化为共同淋巴样祖细胞和共同髓样祖细胞等等。
(二)造血干细胞的表面标记白细胞分化抗原和单克隆抗体技术的应用,为造血干细胞表面标记的研究及其分离纯化提供了重要的理论和实验依据。
人造血干细胞的主要表面标记为CD34和c-kit (CD117),不表达谱系(lineage)特异性标记。
(1)CD34:CD34是一种高度糖基化跨膜蛋白,有1%~4%骨髓细胞表达CD34,其中包括了造血干细胞,是造血干细胞的一种重要标记,应用CD34单克隆抗体可从骨髓、胎肝或脐血中分离、富集造血干细胞。
随着造血干细胞的分化成熟,CD34表达水平逐渐下降,成熟血细胞不表达CD34。
(2)CD117:CD117是干细胞因子(stem cell factor,SCF)的受体,是原癌基因c−kit的编码产物Kit。
CD117是属于含有酪氨酸激酶结构的生长因子受体,胞膜外区结构属IgSF。
CD117+细胞约占骨髓细胞的1%~4%,50%~70%CD117+骨髓细胞表达CD34,因此,CD117也是多能造血干细胞的重要标记。
(3)Lin-细胞:应用针对T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、巨噬细胞、巨核细胞、髓系以及红系等多种谱系相应单克隆抗体的混合抗体(CD2、CD3、CD14、CD16、CD19、CD24、CD56、CD66b和血型糖蛋白A等抗体)结合免疫磁珠分离的方法,除去骨髓、胎肝单个核细胞中上述各个谱系发育不同阶段的细胞,所留下的细胞称为谱系阴性(Lin-)细胞,主要为早期造血干细胞。
造血干细胞ppt课件
2
特征
※造血干细胞有两个重要特征:
其一,高度的自我更新或自我复制能力;
其二,可分化成所有类型的血细胞。
3
分裂方式
正常情况下,造血干细胞经过不对称性有丝分 裂成两个子代细胞。其中一个仍维持造血干细胞的 全部特征,即自我更新(self-renewal)。自我更新 使得干细胞池的大小(干细胞数量)和质量维持不变, 因而又称为自我维持(self-maintenance)。另一个 子细胞可能由于基因表达模式发生改变而使得细胞 特征出现变化,从而逐步走上分化的道路。
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在干细胞不同的分化阶段,有不同的表面标志表 达,故不同的表面标志已成为区分造血干细胞分化 阶段的重要标志。 祖细胞的表面标志为CD34+ Lin+ ,谱系特异性 抗原包括粒系CD11、13、15、16;单核系CD14;B淋 巴系CD19、20、21、22;T/NK系CD2、11、25、7、 56;红系CD47、59、71;巨核系CD31、41、42、61、 63、107等。
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继1988年第一例应用人类脐带血移植治疗贫血症成功后,脐 带血因其免疫抗原性较弱的特点,被认为是极具潜力的自骨 髓来源和外周血来源后,第三种造血干细胞移植的来源。值 得一提的是,输入的造血干细胞的数量多少,是影响造血干 细胞移植成功率的因素之一。临床应用表明输入的量越大, 成功移植率越高。“纽约血液中心”(NYBC)的国家脐带 血库报道的异基因脐带血造血干细胞移植的参考标准为0.7~ 10×107/kg。同时,脐血移植中有核细胞数量不是一个影响 疗效的独立因素,HLA完全相合可以补偿细胞数量低的影 响。。
生物工程导论:造血干细胞文献综述
造血干细胞的作用及发展状况班级:生物111学号:201138895121姓名:曾斯雨摘要:本文介绍了造血干细胞的基本概念和相关内容、作用及热点、表面标志和临床应用、造血干细胞移植手术概念、预处理研究现状和现状等内容,全面地概括了造血干细胞的作用及发展状况。
关键词:造血干细胞、造血干细胞移植前言:造血干细胞有高度自我更新能力、有很强的分化发育和再生能力,能产生各种类型的血细胞。
由于造血干细胞的这些特性,目前,在临床上应用造血干细胞移植术,根治许多恶性血液病及某些先天性疾病获得成功。
如:白血病、重症再生障碍性贫血、恶性淋巴瘤、重症免疫缺陷病、急性放射病等。
造血干细胞目前的背景:成熟血细胞生命有限,必须通过造血干细胞(hematopoietic stem cells, HSCS)增殖分化而补充。
据研究表明,HSCS也能形成非造血组织,如肌肉、肝脏、血管和皮肤。
本文主要讲述了造血干细胞的作用,重点讲解造血干细胞移植手术,进而说明造血干细胞的发展状况。
一、造血干细胞的基本概念和相关内容图1-1造血干细胞造血干细胞是指尚未发育成熟的细胞,是所有造血细胞和免疫细胞的起源,它不仅可以分化为红细胞、白细胞和血小板,还可跨系统分化为各种组织器官的细胞。
低氧对神经干细胞、造血干细胞增殖调控的影响干细胞(0123 4255,67)在医学研究和临床应用方面有着广泛用途,已成为一个研究热点。
但在低氧时对67 增殖的调控目前国内缺少系统研究。
低氧影响最大的是神经系统,其次是心血管系统,而低氧时心血管系统的变化与造血干细胞活动又有着密切关系。
(1)二、造血干细胞的作用及热点造血干细胞具有自我更新、较强分化发育和再生能力、可以产生各种类型血细胞的始祖细胞,被广泛应用于之来哦血液系统疾病。
如何是造血干细胞在体外扩增和处理的同时保持造血干细胞的自我更新特性成为关键问题。
近年来,通过不同信号通路增强造血干细胞自我更新能力的信号分子成为研究热点。
造血干细胞的特性
造血干细胞的特性一、造血干细胞的起源造血干细胞(hemopoietic stem cell,HSC)是存在于造血组织中的一群原始造血细胞,它不是组织固定细胞,可存在于造血组织及血液中。
造血干细胞在人胚胎2周时可出现于卵黄囊,第4周开始转移至胚肝,妊娠5个月后,骨髓开始造血,出生后骨髓成为干细胞的主要来源。
在造血组织中,所占比例甚少,如在小鼠骨髓中105核细胞中的有10个,在脾中105有核细胞中只有0.2个。
二、造血干细胞的形态干细胞是一种嗜碱性独核细胞,其大小约为8μm,呈圆形,胞核为圆形或肾形,胞核较大,具有2个核仁,染色质细质而分散,胞浆呈浅蓝色不带颗粒,在形态上与小淋巴细胞极其相似,但淋巴细胞体积较小,染色质浓染,核仁不明显且有细胞器。
因此很难用形态学识别干细胞,并与其它独核细胞相区别。
造血干细胞可包括三级分化水平,即多能干细胞(pleuripotent stem cell),定向干细胞(Committed stem cell)及其成熟的子代细胞。
关于对造血干细胞的功能分析,长期以来仅限于对小鼠干细胞的研究,而对人干细胞的存在只是来自间接证据,因为不能在人体内进行如鼠体内的功能分析法。
70年代以来,由于建立了新的体外细胞培养技术,大大促进了对人干细胞的直接研究。
三、造血干细胞的表面标志由于造血组织中造血干细胞在形态学方面无法与其它单核细胞区别,而且数量极少,这为造血干细胞的分离纯化并对其功能分析和分化的研究造成极大困难。
近年来由于单克隆抗体技术的进步,流式细胞仪(FACS)的应用,以及对小鼠和人造血干细胞表面标志的研究,取得了很大进展,为造血细胞的分离纯化及鉴定创造了条件。
1.Thy-1与丝裂原(wheat germ agglutinin,WGA)Visseer等发现小鼠骨髓中造血干细胞对WGA有高亲和性。
利用这一特性,应用FACS自骨髓中分离造血干细胞应及核系Mac-1等谱系抗原与WGA反应性相结合,即可自骨髓中Lin-/WGA+细胞群中分离造血干细胞,也获得良好结果。
造血干细胞研究进展
造血干细胞研究进展摘要:造血干细胞是具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体,在人体造血系统中起着至关重要的作用。
本文介绍了造血干细胞的生物学特征、表面标志以血干细胞在干细胞移植、细胞治疗和基因治疗等方面的临床应用和前景。
造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)又称多能干细胞,是存在于造血组织中的一群原始造血细胞。
也可以说它是一切血细胞的原始细胞,即由造血干细胞定向分化、增殖为不同的血细胞系,并进一步生成血细胞。
人类造血干细胞首先出现于胚龄第2~3周的卵黄囊,在胚胎早期(第2~3月)迁至肝、脾,第5个月又从肝、脾迁至骨髓。
在胚胎末期一直到出生后,骨髓成为造血干细胞的主要来源。
造血干细胞是干细胞中研究最早、最多、最深入的一种,近年来在造血干细胞的多个研究领域均取得了重要进展。
1 造血干细胞的发现造血干细胞的发现源于第二次世界大战后放射医学的研究,Jacobson 等[1-3]发现小鼠与豚鼠的脾脏与骨髓中存在有一类细胞,即造血干细胞,能够重建经致死剂量射线照射过的小鼠与豚鼠的造血系统。
随着单克隆抗体技术与流式细胞分选技术的出现,人们利用多种针对细胞表面抗原的抗体组合,分离到相对较纯的小鼠与人骨髓与胚胎组织中的造血干细胞与造血前体细胞群(hematopoietic progenitorcell)。
其中,美国斯坦福大学Weissman 实验室在分离与鉴定小鼠与人的造干细胞方面所做的工作最为杰出[4-9]。
长期以来,对于造血干细胞是由多种不同的、可以分化成不同种类成熟细胞所组成,还是由一类可以分化成所有造血系统成熟细胞所组成,人们存有争论。
直到1996 年,Osawa 等[10]通过单个细胞移植的方法,验证了一个造血干细胞就可以重建机体整个的造血系统,才结束了对于这一问题的争论。
2 对小鼠造血干细胞的早期发生的研究造血干细胞的发生到目前为止,人们对于小鼠造血干细胞的早期发生研究得相对较多。
临床血液学检验技术考试题库及答案(二)
临床血液学检验技术试题及答案第二章造血基础理论一、选择题A 型题1. 血细胞由原始向成熟发育演变规律不正确的是A. 胞体由大到小B. 巨核细胞由小到大C. 核染色质由紧密粗糙到疏松细致D. 胞浆由少到多E. 胞质内颗粒从无到有2. 人体内具有多项分化能力的最早的造血细胞是A. 红系祖细胞B. 造血干细胞C. 粒系祖细胞D. 巨核系祖细胞E. T淋巴系祖细胞3. 成人在正常情况下产生红细胞、粒细胞和血小板的唯一器官是:A. 肝脏B. 脾脏C. 骨髓D. 胸腺E. 淋巴结4. 关于造血祖细胞下述哪项是正确的A. 具有多项分化能力B. CD34+ CD38-C. CD34+ Lin-D. 分化能力较局限E. 高度的自我更新能力5. 胚胎期造血下列错误的是A. 卵黄囊壁上的血岛是人类最初的造血中心B. 肝脏造血是由卵黄囊血岛的造血干细胞迁移到肝脏而引起的C 胚胎第五个月以后骨髓成为造血中心D. 淋巴结不参与胚胎期造血E. 胎肝的造血干细胞经血流入脾,在此增殖、分化和发育6. 参与造血正向调控的细胞因子是A. 干细胞因子和转化生长因子B. 干细胞因子和趋化因子C. 干细胞因子和集落刺激因子D. 集落刺激因子和转化生长因子E. 干细胞因子和干扰素7. 正常成人骨髓造血分布区域下列不符合的是A. 胸骨B. 肋骨C. 下肢股骨远心端D. 脊椎骨E. 颅骨X 型题8. 关于红骨髓下列正确的是A. 含大量发育的各阶段血细胞而呈现红色B. 18岁后红骨髓仅存在于扁骨、短骨及长管骨的近心端C. 红骨髓约各占骨髓总量的50%左右D. 红骨髓是脂肪化的骨髓E. 在正常情况下不再参与造血,但仍保留造血潜能9. 血细胞分化是指A. 分化过程是不可逆的B. 分裂后产生新的子细胞在生物学性状上产生了新的特点C. 通过特定基因的表达合成了特定的蛋白质D. 血细胞失去某些潜能,转变为具有新功能细胞的过程E. 分化后的新细胞与原来的细胞有了质的不同10. 造血干细胞出现的表面标志是A. Lin-B. CD38+C. CD38-D. CD34-E. CD34+11. 造血干细胞的基本特征是A. 对称分裂能力B. 高度自我更新能力C. 定向分化能力D. 多向分化能力E. 有明显的形态特征12. 造血微环境包括:A. 网状细胞B. 造血细胞C. 基质细胞和基质细胞分泌的细胞因子D. 骨髓微血管系统E. 造血岛13. 胚胎期参与造血的器官有:A. 骨髓B. 肝脏C. 胸腺D. 脾脏E. 淋巴结14 髓外造血可发生在下述哪些情况:A. 婴幼儿严重贫血B. 急性再障C. 骨髓硬化症D. 严重感染E. 血友病二、名词解释1. 造血祖细胞2. 血细胞分化3. 髓外造血4. 造血器官三、问答题1.试述造血微环境的作用。
造血干细胞及免疫细胞的生成
B细胞在骨髓的发育
B细胞发育 的两个阶段
免疫应答的特异性 (specificity)
抗原受体基因结构及其重排
TCR和BCR(Ig)的胚系基因结构 淋巴细胞发育过程中抗原受体基因重排
人免疫球蛋白基因定位
定位于非淋巴组织 血液脾脏中有
记忆性T 细胞的产生
Tcm:来源于刚活化Tn---Ta---无适当刺激信号---不成为 Te---无AICD---返回静息状态并存活成为Tcm.
Tn—IL-2(高)—分泌IFN-—Tc Tn—IL-2(低)或IL-15(高)—维持中间状态,保 留CCR7—Tcm Tem:Ag 刺激—Ta—95%AICD,少部分细胞缺乏抗原的 持续刺激,难于启动 AICD得以存活,成为记忆细胞。 如脑膜炎病毒刺激 T细胞研究发现:病毒滴度高: 有强的初次应答,弱的回忆反应,原因是AICD导致 CD8Tc过度耗竭;病毒滴度低,有弱的初次应答,强的 回忆反应。
MHC-I →DP细胞表面CD8分子结合
导致CD4分子 表达关闭
CD4-CD8+细胞
MHC-II →DP细胞表面CD4分子结合
导致CD8分子 表达关闭
CD4+CD8-细胞
T细胞发育的阴性选择-获得自 身耐受性
树突状细胞和巨噬细胞表达高水平的 MHC-I和MHC-II类抗原,并与自身抗原 形成复合物,SP细胞如能识别自身抗原 肽-MHC复合物,即发生凋亡,否则继续 发育成熟,保证进入外周淋巴器官的T细 胞库中不含有针对自身抗原成分的T细胞。
Ig的合成和肽链转运
TCR基因重排
围绕TCR成熟发生一系列基因的有序表达 和关闭:
T细胞和B细胞
T细胞和B细胞集团档案编码:[YTTR-YTPT28-YTNTL98-UYTYNN08]T淋巴细胞和B淋巴细胞(免疫细胞)免疫细胞概述定义:泛指所有参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前体。
一、造血干细胞(HSC)1具有自我更新和分化潜能、持续赋予机体造血功能的细胞。
2.表面标志(1)CD34(2)CD117(C-Kit):即干细胞因子(SCF)受体3.造血干细胞来源:→骨髓→外周→脐带血→胎盘二、淋巴细胞T淋巴细胞(T lymphocyte)来源于骨髓→在胸腺内发育成熟→移行至外周淋巴组织→执行特异性免疫应答。
(一)T细胞表面标志及其功能细胞抗原受体(T cell antigen receptor, TCR)细胞特异性识别抗原的受体b.所有成熟T细胞的特征性表面标志;c.与CD3分子结合成TCR-CD3复合物;TCR多样性原因:①组合多样性②连接多样性N序列插入概率高,故TCR多样性远高于BRC亦发现于NK细胞表面受体包括(T细胞受体):TCR-CD3复合物,T细胞通过识别抗原肽-MHC分子复合物产生活化T细胞的第一信号,由CD3传递至T细胞内辅助受体:CD4和CD83.辅助(共、协同)刺激分子①CD28:与APC表面的辅助刺激分子B7-1/2结合并相作用,为初始T细胞活化提供最重要的第二信号②CD40L:与CD40结合提供第二信号CD4,CD8 (T细胞的辅助受体)病毒受体:HIV—CD4分子抗原:所有T细胞均表达MHC-I类分子,人T细胞激活后还可表达MHC-II类分子(活化后有抗原提呈能力)。
5. 丝裂原受体:刀豆素A(ConA)、植物血凝素(PHA)PWM商陆丝裂原丝裂原(mitogen):亦称有丝分裂原,可致细胞发生有丝分裂,进而增殖,6.细胞因子受体(cytokine receptor, CKR)IL-1R,IL-2R,IL-4R,IL-6R,IL-7R等T细胞表面的协同信号分子(刺激)CD28?由二条相同多肽链组成的二聚体。
T细胞和B细胞
T淋巴细胞和B淋巴细胞(免疫细胞)免疫细胞概述定义:泛指所有参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前体。
一、造血干细胞(HSC)1具有自我更新和分化潜能、持续赋予机体造血功能的细胞。
2.表面标志(1)CD34(2)CD117(C-Kit):即干细胞因子(SCF)受体3.造血干细胞来源:→骨髓→外周→脐带血→胎盘二、淋巴细胞T淋巴细胞(T lymphocyte)来源于骨髓→在胸腺内发育成熟→移行至外周淋巴组织→执行特异性免疫应答。
(一)T细胞表面标志及其功能1.T细胞抗原受体(T cell antigen receptor, TCR)a.T细胞特异性识别抗原的受体b.所有成熟T细胞的特征性表面标志;c.与CD3分子结合成TCR-CD3复合物;TCR多样性原因:①组合多样性②连接多样性N序列插入概率高,故TCR多样性远高于BRC表面受体包括1.TCR(T 细胞受体):TCR-CD3复合物,T 细胞通过识别抗原肽-MHC 分子复合物产生活化T 细胞的第一信号,由CD3传递至T 细胞内2.TCR 辅助受体:CD4和CD8亦发现于NK 细3.辅助(共、协同)刺激分子①CD28:与APC表面的辅助刺激分子B7-1/2结合并相作用,为初始T细胞活化提供最重要的第二信号②CD40L:与CD40结合提供第二信号CD4,CD8 (T细胞的辅助受体)病毒受体:HIV—CD4分子4.MHC抗原:所有T细胞均表达MHC-I类分子,人T细胞激活后还可表达MHC-II类分子(活化后有抗原提呈能力)。
5. 丝裂原受体:刀豆素A(ConA)、植物血凝素(PHA)PWM商陆丝裂原丝裂原(mitogen):亦称有丝分裂原,可致细胞发生有丝分裂,进而增殖,6.细胞因子受体(cytokine receptor, CKR)IL-1R,IL-2R,IL-4R,IL-6R,IL-7R等T细胞表面的协同信号分子(刺激)CD28 由二条相同多肽链组成的二聚体。
《造血干细胞》ppt课件
造血干细胞进一步分化发育成不同 血细胞系的定向干细胞。定向干细胞多 数处于增殖周期之中,并进一步分化为 各系统的血细胞系,如红细胞系、粒细 胞系、单核-吞噬细胞系、巨核细胞系 以及淋巴细胞系。
由造血干细胞分化出来的淋巴细胞有两 个发育途径,一个受胸腺的作用,在胸腺素的 催化下分化成熟为胸腺依赖性淋巴细胞,即T 细胞;另一个不受胸腺,而受腔上囊(鸟类) 或类囊器官(哺乳动物)的影响,分化成熟为 囊依赖性淋巴细胞或骨髓依赖性淋巴细胞,即 B细胞。并分别由T、B细胞引起细胞免疫及体 液免疫。如机体内造血干细胞缺陷,则可引起 严重的免疫缺陷病。
现已知道,造血干细胞不是纯一的细胞群 体,而是由不同年龄等级的干细胞组成。这些 不同年龄等级的干细胞的表面抗原、免疫表型 和粘附分子的表达不一,生物学特性也有一定 的差异。
造血原理
人类造血干细胞首先出现于胚龄第2~3周的 卵黄囊,在胚胎早期(第2~3月)迁至肝、脾, 第5个月又从肝、脾迁至骨髓。在胚胎末期一直到 出生后,骨髓成为造血干细胞的主要来源。具有 多潜能性,即具有自身复制和分化两种功能。在 胚胎和迅速再生的骨髓中,造血干细胞多处于增 殖周期之中;而在正常骨髓中,则多数处于静止 期(G0期),当机体需要时,其中一部分分化成 熟,另一部分进行分化增殖,以维持造血干细胞 的数量相对稳定。
造血干细胞的检测方法
造血干细胞的可塑性 造血干细胞的临床应用
造血干细胞的表面标志
造血干细胞在细胞大小上类似于小淋巴细 胞,细胞密度一般小于1.066g/ml。因此,至今 仍不能单纯从形态学上来识别造血干细胞。而 要对造血干细胞进行研究,首先必须能把它从 造血组织中分离出来。最常用的方法就是利用 造血干细胞表面的标志蛋白对其进行分离。
造血干细胞来源
脐带血储存cd34标准
脐带血储存cd34标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:脐带血干细胞特点之一为其富含CD34阳性干细胞。
CD34是一种细胞表面标记分子,被广泛认为是造血干细胞的标志。
脐带血中的CD34阳性细胞具有重建造血系统的潜力,可以重建患者的免疫系统,促进血液的再生。
脐带血中CD34阳性细胞的含量对于干细胞移植的成功率起着至关重要的作用。
目前,国际上对于脐带血中CD34阳性细胞的计数和储存有着一定的标准。
根据世界卫生组织的要求,脐带血单位中至少含有CD34阳性细胞的数量应达到1×10^6/kg。
这一标准是保证脐带血具备治疗作用所必须的关键指标之一,也是干细胞移植成功率的重要指标之一。
具备符合CD34标准的脐带血单位才能被认可为适合干细胞移植的供体。
为了确保脐带血中CD34阳性细胞的准确计数和储存,目前的主要做法是采用流式细胞术进行计数,并采取适当的储存方法保存脐带血单位。
流式细胞术是一种用于细胞表面标记物的定量和鉴定的技术,通过荧光共振技术测定细胞中的CD34阳性细胞数量。
这种方法具有高灵敏度、高准确性和高重复性,能够准确计数脐带血中CD34阳性细胞的数量,确保脐带血单位的质量标准。
在脐带血单位的储存方面,通常采用冷冻保存的方法。
在采集后,将脐带血样本迅速送至实验室,进行流式细胞术计数后,加入适量的冷冻保护剂,然后分装成小份装冻存管,通过快速冷冻的方式保存于液氮槽中。
冷冻保存可以有效保护脐带血中的CD34阳性细胞,延长其存储时间,为后续的干细胞移植提供保障。
除了单纯的计数和储存外,对于脐带血中CD34阳性细胞,还需要进行其功能性评估。
通过体外实验和动物实验等方法,可以评估脐带血中CD34阳性细胞的再生及增殖潜能,以确保其在移植后能够有效地重建患者的造血系统。
脐带血中CD34阳性细胞的计数和储存标准是干细胞移植治疗成功的关键因素之一。
严格遵守国际标准,采用科学的计数和储存方法,保证脐带血单位的质量和有效性,对于提高干细胞移植的成功率,减少患者的并发症,具有重要的意义。
造血干细胞文献综述
造血干细胞与疾病治疗文献综述班级:11级三系一班姓名:xxx 学号:xxxxx摘要:各种疾病导致的组织器官病理损伤和功能障碍是人类健康的主要危害,传统治疗方法效果往往不尽人意。
基础研究显示,干细胞具有分化为多种细胞的潜能,干细胞移植具有促进细胞因子分泌、改善微循环、对抗凋亡等作用,用干细胞技术来治疗各种组织损伤性疾病为克服传统治疗的不足提供了一种新的技术手段。
关键词:造血干细胞疾病治疗临床治疗引言:近几年来细胞治疗发展迅速,国内外已有大量干细胞移植治疗终末期肝病、心肌梗死、扩张型心肌病、心功能衰竭、血液病、糖尿病、进行性老年性痴呆、帕金森病等顽重症的临床报道。
因此,许多学者致力于通过细胞移植来修复受损组织及功能,促进微循环建立,减少截肢或器官移植,改善患者预后。
1,造血干细胞简介。
造血干细胞(Hemopoietic Stem cell ,HSC)是指一种尚未发育成熟的细胞,是所有造血细胞和免疫细胞的起源。
因此是多功能干细胞,医学上称其为“万用细胞”,也是人体的始祖细胞。
干细胞是具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞,是机体的起源细胞,是形成人体各种组织器官的祖宗细胞。
它有两个重要特征:其一,高度的自我更新或自我复制能力;其二,可分化成所有类型的血细胞。
其主要功能是通过不断分化产生各系造血祖细胞, 终生为造血系统提供新细胞来源。
同时它们又能自我更新即自我复制, 维持自身数量不变, 从而能长期维持机体的正常造血机能。
2,树突状细胞疫苗在抗肿瘤免疫治疗。
树突状细胞(DC)起源于造血干细胞。
DC自身具有免疫刺激能力,是目前发现的惟一能激活未致敏初始型T细胞的APC。
虽然DC有强大的免疫监视功能,但由于肿瘤细胞相关的一些因素致使DC不能有效提呈肿瘤细胞,故肿瘤细胞逃避免疫系统的监控。
肿瘤免疫逃逸的机制有: ①肿瘤细胞的免疫原性弱; ②肿瘤细胞的漏逸; ③肿瘤细胞MHCⅠ类分子表达低下或缺失,缺乏协同刺激分子; ④肿瘤细胞分泌免疫抑制因子。
免疫细胞:造血干细胞(HSC) PPT课件
脐血T、B细胞相对不成熟,GVHD发生率低; 脐血NK和LAK细胞多,有利于GVL; 脐血含基质细胞,能提供HSC生长的微环境。
2009.02.27报道:
一名26岁产妇临产前突然查出患白血病,第 三军医大学新桥医院的专家待其分娩后,用该产 妇父亲“骨髓和外周血” HSC+ 婴儿出生时采集 的脐带血对白血病进行联合移植治疗,获得成功。
通过造血干细胞“动员”技术,使骨髓 HSC 进入外周血,采集分离约 200ml外周血
即可获得足够数量HSC并用于移植。
脐血移植:
脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后 残留在胎盘和脐带中的血液,含有可以重建 人体造血和免疫系统的HSC,可用于移植。
脐血移植的优势:
来源丰富、取材简单; 对供受体HLA相符的要求相对较低; 不易受病毒或残留肿瘤细胞污染; HSC增殖和自我增殖能力强;
适应症:
恶性血液疾病
重症免疫缺陷
遗传性疾病
某些自身免疫病
放/化疗后造血支持
造血干细胞移植包括:
骨髓移植 外周血干细胞移植 脐血移植
骨髓移植:
20 世纪 50 年代开始使用。 HSC 存在于扁骨、
不规则骨和长骨两端的红骨髓,为采集600ml骨髓,
需给供者局部麻醉,经多次骨穿才能完成。
外周血干细胞移植:
造血干细胞与基因治疗
HSC是导入外源基因理想的靶细胞:
HSC具有自我更新能力,可在患者体内长期存 活并表达外源基因产物; HSC具有多向分化潜能,分化成的转基因血细 胞可分布全身发挥效应; 多种疾病与造血细胞异常有关,将缺学家在Science上报道:
从 2 名患有严重免疫缺陷症的患儿骨髓中抽取 HSC ,以逆转录病毒为载体,将正常基因导入 其中,然后回输给病孩。经 10 个月随访,获得 较满意的效果,患儿免疫系统达到正常水平。
造血细胞分离、集落培养及表型分析
造血细胞分离、集落培养及表型分析动性好,同时也避免了细胞因受力而损伤的情况。
流式细胞仪通过激光束照射细胞,检测细胞表面标记物的荧光强度,进而分析细胞表型,包括细胞表面标志、大小、形态等。
2、集落培养集落培养法是一种常用的检测造血干细胞的方法。
将待测细胞在半固体培养基中培养,待细胞分裂形成集落后,根据集落的形态和数量来判断细胞的分化能力。
常用的集落包括粒-巨嗜细胞集落形成单位(CFU-GM)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)等。
集落培养法可以检测细胞的增殖能力和分化潜能,是评估细胞功能的重要方法。
二、实验步骤1、细胞样品制备将待测细胞制成单细胞悬液,使得细胞可以均匀地分布在流式细胞仪的流动室中,方便后续的细胞表型分析。
2、流式细胞仪分析将制备好的细胞悬液加入样品管中,加入特异性荧光染料后,通过流式细胞仪进行细胞表型分析。
根据细胞表面标志物的荧光强度,可以判断细胞的类型和状态。
3、集落培养将待测细胞在半固体培养基中培养,待细胞分裂形成集落后,根据集落的形态和数量来判断细胞的分化能力。
常用的集落包括粒-巨嗜细胞集落形成单位(CFU-GM)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)等。
三、实验结果分析通过流式细胞仪和集落培养的结果,可以分析细胞的表型和功能。
例如,CD34+、CD38-、HLA-DR-、Thy-1+、c-kit+、LFA-1-、CD45RA-、CD71-、lin-等标志物被广泛认为是造血干细胞的标志。
同时,集落培养的结果也可以评估细胞的增殖能力和分化潜能。
这些结果对于研究造血干细胞的生物学特性和临床应用具有重要意义。
本实验采用流式细胞仪技术对脐血中的造血干细胞进行分离和检测。
流式细胞仪的测量区利用样品流和鞘流的气压差的层流原理,使细胞依次排列成单行,每个细胞以均等的时间依次通过测量区。
被荧光染料染色的细胞受到强烈的激光照射后发出荧光,同时产生散射光。
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CRTERP.O.Box1200,Shenyang110004kf23385083@sina.comwww.zglckf.com0引言干细胞(stemcells)是具有自我更新能力(self-renewing)的多潜能细胞[1]。
造血干细胞(hematopoieticstemcell,HSC)是干细胞的一种,是具有高度自我更新能力和多项分化潜能的造血前体细胞[2],是干细胞中研究最早、最多、最深入和应用最广的一种。
其被认识和应用已经近50年。
成年人血液造血干细胞主要存在于骨髓,约占骨髓细胞的0.05%。
其主要功能是通过不断分化产生各系造血祖细胞,终生为造血系统提供新细胞来源。
同时它们又能自我更新即自我复制,维持自身数量不变,从内蒙古民族大学医学院,内蒙古自治区通辽市028041白旭华,男,1955年生,内蒙古自治区通辽市人,满族,1984年内蒙古民族医学院毕业,副教授,主要从事内分泌生理学研究。
xuhuabai@126.com中图分类号:R394.2文献标识码:A文章编号:1673-8225(2007)15-02952-04收稿日期:2007-02-27修回日期:2007-03-22(07-50-2-1134/GW·Q)造血干细胞的表面标志和临床应用白旭华SurfacemarkerandclinicalapplicationofhematopoieticstemcellsAbstractOBJECTIVE:Toexploretheorigin,cellsurfacemarkersandclinicalapplicationperspectiveofhematopoieticstemcells.DATASOURCES:TheMedlinepublishedfromJanuary1989toDecember2006andEmbasebetweenJanuary1986andDecember2006wereundertakentoidentifythearticlesonhematopoieticstemcellsandstemcelltransplantationwiththekeywordsof"hematopoieticstemcells,stemtransplantation"inEnglish.WanfangdatabasewassearchedforrelevantarticlespublishedfromJanuary1990toApril2006withthekeywordsof"hematopoieticstemcells,stemtransplantation"inChinese.STUDYSELECTION:Thearticleswerecheckedfirstly,andrelevantarticlesontheoriginofhematopoietiestemcells,cellsurfacesignandhematopoieticstemcelltransplantationwereselected.Articlesofobviouslynon-randomizedclinicalexperimentsweredeleted.DATAEXTRACTION:Totally32articlesontheoriginofhematopoietiestemcells,cellsurfacemarkerandhematopoieticstemcelltransplantationwithrandomizedornon-randomizedresearcheswereinvolved,and27ofthemmettheinclusivecriteria.Therest5articleswereaboutrepeatedresearch.DATASYNTHESIS:Stemcellswereinitialcellswithself-renewing,highproliferationandmultiple-directionaldifferentiationability.Hemopoieticstemcellswereakindofstemcells,andmainlyexistedinadultblood,andaccountedforabout0.05%ofbonemarrowcells.Itcoulddifferentiateintovarioushemopoieticprogenitorcells,andinthelifetimeprovidednewcellsforhemopoieticsystem.Hemopoieticstemcellcoloniesincludedcellsdevelopedindifferentphases,buttherewaslackofdirectmorphologicalfeaturebetweenbloodstemcells/progenitorcellsandsubsequentbloodcells.Therefore,theresearchonexpressionruleofsurfaceantigenofhemopoieticstemcellswouldprovideabasisoffurtherstudy.Applicationofhemopoieticstemcellsincludedhemopoieticstemcelltransplantationandastargetcellsforgenetherapy.CONCLUSION:Theremaybetwokindsofhematopoietiestemcellsinthehumanbody,namelyCD34+andCD34-.Hematopoietiestemcellscanpromotethereconstitutionofhematopoiesisandcanbetargetcellsofgenetherapy.BaiXH.Surfacemarkerandclinicalapplicationofhematopoieticstemcells.ZhongguoZuzhiGongchengYanjiuyuLinchuangKangfu2007;11(15):2952-2954(China)[www.zglckf.com/zglckf/ejournal/upfiles/07-15/15k-2952(ps).pdf]摘要目的:探讨造血干细胞的来源、细胞表面标志及其临床应用前景。
资料来源:应用计算机检索Medline1989-01/2006-12和Embase1986-01/2006-12期间有关造血干细胞、干细胞移植的文献,检索词“hematopoieticstemcells,stemtransplantation”,并限定文章语言种类为English。
检索万方数据库1990-01/2006-04期间相关文献,限定文章语言种类为中文,检索词“造血干细胞,干细胞移植”。
资料选择:对资料进行初审,选取实验包括造血干细胞来源、细胞表面标志及造血干细胞的移植相关文献,删除明显不随机临床实验研究。
资料提炼:共检索32篇关于研究造血干细胞的来源、细胞表面标志及造血干细胞的移植的随机和未随机实验研究,27篇符合纳入标准。
排除的5篇实验是重复的同一研究。
资料综合:干细胞是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的原始细胞。
造血干细胞是干细胞的一种。
成年人血液造血干细胞主要存在于骨髓,约占骨髓细胞的0.05%。
其主要功能是通过不断分化产生各系造血祖细胞,终生为造血系统提供新细胞来源。
造血干细胞群体存在着不同发育阶段的细胞,但血液干/祖细胞与其后续阶段的血细胞相比缺乏直接的形态学特征,所以对造血干细胞表面抗原的表达规律的研究,将为造血干细胞的进一步研究打下重要的基础。
造血干细胞的应用包括造血干细胞移植和作为基因治疗的靶细胞。
结论:人体内可能存在CD34+和CD34-两种造血干细胞,造血干细胞可以促进造血功能的重建,并可作为基因治疗的靶细胞。
关键词:造血干细胞;干细胞移植;综述文献白旭华.造血干细胞的表面标志和临床应用[J].中国组织工程研究与临床康复,2007,11(15):2952-2954[www.zglckf.com/zglckf/ejournal/upfiles/07-15/15k-2952(ps).pdf]综述MedicalCollege,InnerMongoliaUniversityfortheNationalities,Tongliao028041,NeiMonggolAutonomousRegion,ChinaBaiXu-hua,Associateprofessor,MedicalCollege,InnerMongoliaUniversityfortheNationalities,Tongliao028041,NeiMonggolAutonomousRegion,Chinaxuhuabai@126.comReceived:2007-02-27Accepted:2007-03-22中国组织工程研究与临床康复第11卷第15期2007-04-15出版JournalofClinicalRehabilitativeTissueEngineeringResearchApril15,2007Vol.11,No.152952CRTER沈阳1200邮政信箱110004kf23385083@sina.comwww.zglckf.comwww.zglckf.com白旭华.造血干细胞的表面标志和临床应用ISSN1673-8225CN21-1539/Rkf23385083@sina.com而能长期维持机体的正常造血机能[3]。
应用计算机检索Medline1989-01/2006-12、Embase1986-01/2006-12与万方数据库1990-01/2006-04期间相关文献,对造血干细胞的来源、细胞表面标志及其临床应用前景进行了综述。
1胚胎期造血干细胞的发生和造血器官的演变许多年来,哺乳类动物造血干细胞在胚胎期的形成部位一直存在较多争议[4]。
人类胚胎发育过程中造血干细胞的发生很早,由受精卵经数次分裂产生的胚胎干细胞在分化为胚胎和胚外结构的同时就开始向造血干细胞分化。
在胚外结构中,卵黄囊血岛首先出现造血干细胞,它们是由胚外中胚层的原始生殖细胞(primordialgermcells,PCCs)分化而来的。
在妊娠16~19d的胚胎期,卵黄囊壁、体蒂和绒毛膜等胚外组织均有造血干细胞发育成红细胞,称为卵黄囊造血期。