生理学实验报告-蛙心灌流-(2)

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蛙类心脏实验报告

蛙类心脏实验报告

一、实验目的1. 熟悉蛙类心脏解剖结构。

2. 掌握蛙类心脏灌流实验方法。

3. 观察并记录Na+, K+, Ca2+及肾上腺素(Adr), 乙酰胆碱(ACh), 乳酸对蛙类心脏活动的影响。

4. 分析不同因素对心脏活动的影响机制。

二、实验原理蛙类心脏为两心房一心室,其起搏点位于静脉窦。

心脏的正常节律性活动依赖于离子(如Na+, K+, Ca2+)和神经递质(如Adr, ACh)的调控。

通过改变灌流液的成分,可以观察不同因素对心脏活动的影响。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液、0.65% NaCl、2% CaCl2、1% KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。

2. 实验仪器:显微镜、秒表、记录仪、计算机等。

四、实验步骤1. 暴露心脏:将青蛙处死,打开胸腔,暴露心脏。

2. 灌流实验:将心脏固定在蛙心夹上,连接张力传感器和计算机采集系统。

用任氏液进行心脏灌流,观察心脏的节律性活动。

3. 观察Na+对心脏活动的影响:将灌流液中的Na+浓度逐渐降低,观察心脏节律的变化。

4. 观察K+对心脏活动的影响:将灌流液中的K+浓度逐渐降低,观察心脏节律的变化。

5. 观察Ca2+对心脏活动的影响:将灌流液中的Ca2+浓度逐渐降低,观察心脏节律的变化。

6. 观察肾上腺素(Adr)对心脏活动的影响:在灌流液中加入一定浓度的Adr,观察心脏节律的变化。

7. 观察乙酰胆碱(ACh)对心脏活动的影响:在灌流液中加入一定浓度的ACh,观察心脏节律的变化。

8. 观察乳酸对心脏活动的影响:在灌流液中加入一定浓度的乳酸,观察心脏节律的变化。

五、实验结果与分析1. Na+对心脏活动的影响:降低Na+浓度,心脏节律逐渐减慢,直至停止。

2. K+对心脏活动的影响:降低K+浓度,心脏节律逐渐加快,直至停止。

蛙心生理实验报告(3篇)

蛙心生理实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 探究心脏节律性活动的生理机制。

二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将蛙心取出并置于人工灌流液中,使其在一定时间内保持节律性收缩。

实验中,通过改变灌流液的成分,可以观察不同理化因素对心脏活动的影响,从而了解心脏生理活动的调节机制。

蛙心无营养性血管,离体后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间。

心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。

外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。

三、实验材料与仪器1. 实验动物:青蛙2. 实验器材:蛙心夹、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、套管夹。

3. 生理信号采集系统、计算机。

四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心:取一只青蛙,双毁髓后背位置于蛙板上,按前面的方法暴露心脏。

仔细识别心脏周围的大血管,在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。

2. 插管:用斯氏蛙心插管法,将蛙心夹插入心脏,并通过蛙心夹上的管道与灌流系统连接。

3. 灌流:将蛙心置于任氏液中,开始灌流,调节灌流速度和压力,使心脏保持节律性收缩。

4. 观察与记录:观察心脏的收缩、舒张情况,记录心率和心搏曲线。

5. 改变灌流液成分:分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换任氏液,观察心脏活动的变化。

6. 分析与讨论:分析不同灌流液对心脏活动的影响,讨论心脏生理活动的调节机制。

五、实验结果与分析1. 在正常任氏液中,心脏保持节律性收缩,心率为60-100次/分钟。

离体蛙心实验实验报告(3篇)

离体蛙心实验实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性,了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。

2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。

3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。

在实验过程中,通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质,同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。

实验中,可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件,观察心脏功能的改变,从而了解心脏生理特性及影响因素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。

2. 实验仪器:手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。

四、实验方法与步骤1. 准备工作:将蟾蜍置于蛙板上,用手术剪剪开胸腔,暴露心脏。

用蛙心夹固定心脏,并连接灌流装置。

2. 灌流液准备:配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。

3. 实验分组:将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。

4. 实验步骤:a. 对照组:灌流任氏液,观察心脏的收缩和舒张情况。

b. 氯化钙组:灌流氯化钙溶液,观察心脏功能的改变。

c. 肾上腺素组:灌流肾上腺素溶液,观察心脏功能的改变。

d. 乙酰胆碱组:灌流乙酰胆碱溶液,观察心脏功能的改变。

5. 记录数据:观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等,并记录数据。

五、实验结果与分析1. 对照组:心脏呈现规律的收缩和舒张,收缩幅度适中,频率约为60次/分钟。

2. 氯化钙组:心脏收缩幅度明显增大,频率加快,收缩时间延长,舒张时间缩短。

3. 肾上腺素组:心脏收缩幅度增大,频率加快,收缩时间延长,舒张时间缩短。

4. 乙酰胆碱组:心脏收缩幅度减小,频率减慢,收缩时间缩短,舒张时间延长。

六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。

2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能,使收缩幅度增大、频率加快。

蛙心倒灌实验报告

蛙心倒灌实验报告

一、实验目的1. 学习蛙心倒灌实验的操作方法。

2. 观察不同灌流液对蛙心活动的影响,探究理化因素对心脏功能的作用。

3. 了解心脏自律性、兴奋性和传导性的生理机制。

二、实验原理蛙心倒灌实验是生理学实验中常用的方法之一,通过将蛙心置于人工灌流液中,模拟心脏在体内的血液流动情况,观察不同灌流液对心脏活动的影响。

实验中,通过改变灌流液的成分和浓度,可以模拟心脏在不同生理和病理状态下的功能变化。

三、实验材料与仪器1. 实验动物:青蛙2. 实验仪器:蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液3. 实验试剂:NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、Na2HPO4、蒸馏水四、实验方法与步骤1. 将青蛙麻醉,背位固定于蛙板上。

2. 暴露心脏,用手术刀将心脏周围的大血管分离,并在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。

3. 将蛙心夹固定在心脏的左心室,连接张力传感器。

4. 将心脏置于培养皿中,加入适量的任氏液。

5. 使用滴管向心脏的左心室注入0.65%NaCl溶液,观察心脏的收缩情况。

6. 分别加入2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液,观察心脏的收缩情况。

7. 记录不同灌流液对心脏收缩频率、幅度和节律的影响。

五、实验结果与分析1. 在0.65%NaCl溶液中,心脏保持正常的节律性收缩,收缩频率和幅度适中。

2. 将灌流液更换为0.65%NaCl溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微减小,说明细胞外液中缺乏Ca2+,导致心肌收缩力降低。

3. 向灌流液中加入2%CaCl2溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微加大,说明细胞外液浓度升高,Ca2+内流增加,心肌收缩力增强。

4. 向灌流液中加入1%KCl溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微加大,说明K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制,细胞外液中K+浓度升高,Ca2+内流减少,心肌的兴奋性降低。

蛙的生理实验报告(3篇)

蛙的生理实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习蛙的解剖结构,掌握青蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。

2. 了解神经和肌肉的兴奋、兴奋性,刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。

3. 掌握蛙心灌流实验方法,观察心脏活动的影响因素。

二、实验原理1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备:蛙的坐骨神经和腓肠肌在生理条件下具有兴奋性和传导性,通过制备坐骨神经-腓肠肌标本,可以观察神经和肌肉的兴奋、兴奋性,刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。

2. 蛙心灌流实验:离体心脏灌流实验是研究心脏生理功能的重要方法,通过改变灌流液的成分,可以观察其对心脏活动的影响,了解心脏的正常节律性活动。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:青蛙、任氏液、生理盐水、剪刀、手术剪、眼科镊、金属探针、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、套管夹、65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。

2. 实验仪器:蛙类解剖台、显微镜、电生理实验系统、刺激器、数据采集系统、蛙心灌流装置。

四、实验方法与步骤1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备:(1)取青蛙一只,用生理盐水冲洗干净,左手握住蛙,使其背部向上。

(2)用眼科镊和剪刀在青蛙的坐骨神经和腓肠肌处剪开,分离出坐骨神经和腓肠肌。

(3)将坐骨神经和腓肠肌置于任氏液中,用玻璃分针轻轻拨动腓肠肌,观察肌肉收缩情况。

2. 蛙心灌流实验:(1)将青蛙的左心耳和左肺静脉用细线结扎,然后剪断,使心脏与体循环分离。

(2)将心脏置于蛙心灌流装置中,连接计算机采集系统和刺激器。

(3)将灌流液(任氏液)通过灌流装置注入心脏,观察心脏搏动情况。

(4)改变灌流液的成分,如加入肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸等,观察心脏活动的影响。

五、实验结果与分析1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备成功,腓肠肌在刺激下产生明显的收缩反应。

2. 蛙心灌流实验成功,心脏在灌流液的作用下保持节律性搏动。

实验二 离体蛙心灌流

实验二 离体蛙心灌流

实验二蛙心灌流观察体液因素对心脏活动的影响[原理]心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境(如Na+,K+,Ca2+等的浓度及比例、pH值和温度),而内环境的变化则直接影响到心脏的正常节律性活动。

在体心脏还受交感神经和迷走神经的双重支配,交感神经末梢释放递质去甲肾上腺素,使心肌收缩力加强,传导速度加快,心率加快;迷走神经末梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力减弱,心肌传导速度减慢,心率减慢。

将失去神经支配的离体心脏保持于适宜的理化环境中(如任氏液),在一定时间内仍能产生自动节律性兴奋和收缩。

而改变任氏液的组成成分,离体心脏的活动就会受到影响。

用受体阻断剂阻断受体,则相应的受体不能发挥作用。

本实验通过观察内环境理化因素对维持心脏正常节律性活动的重要作用,了解Na+,K+,Ca2+离子以及肾上腺素(β受体激动剂)、乙酰胆碱(M受体激动剂)等激素对心脏活动的调节意义。

各种体液因素都是通过影响细胞质内钙离子浓度来起作用。

钙离子浓度升高,心肌收缩力量增强,反之减弱。

[目的]学习离体蛙心灌流的方法;观察钠、钾、钙三种离子对心脏活动的影响;观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。

[材料及设备]BL-420型生物机能试验系统,蛙,蛙心套管,蛙心夹,任氏液(与蛙心内环境相似的溶液),0.65%氯化钠,2%氯化钙,1%氯化钾,0.01%肾上腺素,0.0 1%乙酰胆碱,滴管,万能支架,张力换能器。

[方法及步骤](一)制备离体蛙心1.用探针破坏蟾蜍的脑和脊髓。

2.蟾蜍固定。

将蟾蜍仰卧位固定于蛙板上。

3.打开蟾蜍胸腔。

用剪刀剪开胸骨表面皮肤并游离、去掉胸骨,再用眼科剪剪开心包以暴露心脏。

4.蟾蜍心脏插管。

用小剪刀在主动脉的根部朝心室的方向剪一小口,以灌有任氏液的蛙心滴管的尖端,由此口插入动脉球。

然后将插管稍向后退,再转向心室中央的方向,插入心腔内。

如确实插入心室,即以另一线将动脉球与套管的尖端一起结扎固定,然后将结扎剩下的线头结扎在套管侧壁的小玻璃钩上,并固定之,以免心脏滑脱。

离体蛙心灌流 2

离体蛙心灌流 2

一、实验目的学习离体蛙心灌流方法,并观察温度、不同离子、神经递质及酸碱度等因素对心脏活动的影像,加深理解内环境相对稳定的生理学意义。

二、实验原理窦房结或静脉窦是心脏节律性活动的正常起搏点,但要维持心脏的正常纪律性活动,还需要一个适宜的理化环境(即相对稳定的内环境)。

因此,利用蟾蜍的离体心脏,用理化特性近似于血浆的任氏液灌流,在一定时间内仍能保持节律性的舒缩活动。

改变灌流液的成分,这种节律性的舒缩活动会随之发生改变,说明内环境理化因素的相对稳定是维持心脏正常节律性活动的必要条件。

三、实验材料蟾蜍,蛙类手术器材,蛙钉,蛙板,双凹夹,试管夹,蛙心插管,蛙心夹,滴管,张力换能器,滑轮,任氏液,40摄氏度任氏液,无钙任氏液,0.65%NaCl,2%CaCl,1%KCl。

四、实验步骤暴露心脏:取蟾蜍一只,用探针刺毁脑和脊髓后,将蟾蜍仰卧固定在蛙板上,用镊子提起胸骨后端腹部的皮肤,剪一小口,然后将剪刀由切口伸入皮下,向左右两侧锁骨外侧方向剪开皮肤,并向头端掀开皮肤。

用镊子提起胸骨后端的腹肌,在腹肌上,剪一小口,将大剪刀伸入胸腔内,剪断胸肋骨和左右锁骨,使创口成一个倒三角形。

用小镊子提起心包膜,用小剪将心包膜剪开,暴露心脏。

插蛙心:插管用连线蛙心夹在心室舒张期夹住心尖约1mm。

将蛙板倒转,使动物头端靠近实验者。

结扎右主动脉,在左主动脉下穿一线以备固定插管用。

用小剪在靠近动脉圆锥处,朝心脏方向将左主动脉斜形剪开一半(注意:既要剪破血管让血流通出,又不把血管剪断)。

取一管尖大小适宜的蛙心插管,注入少量任氏液入管内,左手用小镊子夹住切口上缘轻轻上提,使切口扩大。

右手持蛙心插管插入动脉内,直达动脉圆锥,然后左手放下镊子,轻轻向右提起蛙心夹上的连线,使心室与动脉圆锥成一直线。

在心室收缩时,右手向前并略向左推动蛙心插管,使之进入心室(如进入心室,插管中的液面会随着心室的舒缩而上下移动)。

最后结扎插管并将结扎线固定于插管侧面的小钩上,防止标本滑落。

蛙心灌流报告

蛙心灌流报告

蛙心灌流报告生理学实验报告蛙类离体心脏灌流院系:生命科学学院实验人:张优13941202邓晓娟13941201(本次实验报告由张优撰稿)一、实验目的1、自学斯氏离体蛙心灌流法。

2、介绍心肌的生理特性。

3、观察na+,k+,ca2+及肾上腺素,乙酰胆碱对离体心脏活动的影响。

二、实验原理(一)两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环,心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。

即心室肌直接从心室腔中获得营养。

故用任氏液置换心室中的血液后,心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。

(二)心肌对细胞外离子浓度和体液因数脆弱(三)钾、钙和钠离子对心肌特性的影响1.血钾浓度过低时(低于7.9mmol/l),心脏兴奋性、自律性、传导性及膨胀性都上升,整体表现为膨胀力弱化、心动过缓和传导阻滞,轻微时心脏Murviel搏于舒张期。

2.血钙浓度升高时,心脏收缩力增强,过高可使心室停搏于收缩期。

血钙浓度降低,心肌收缩力减弱。

3.钠离子浓度的轻微变化,对心肌影响不显著,只有出现显著变化时,才可以影响心肌的生理特性。

肾上腺素可以并使心率大力推进、传导大力推进及心肌膨胀力进一步增强,乙酰胆碱则与肾上腺素的促进作用恰好相反。

三、实验材料青蛙、常用手术器械、蜡盘、蛙心缠、计算机收集系统、张力传感器、支架、双凹陷缠、滴管、大烧杯、纱布、棉线、任氏液、蛙心套管、套管夹、0.65%nacl、5%naci、2%cacl2、1%kcl、1:5000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、300u/ml肝素。

四、实验步骤(一)蛙心的解剖1.毁脑毁脊髓2.打开胸腔3.剪高兴包膜、曝露心脏(二)斯氏蛙心插管法1.绝育左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。

左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。

2.插管左主动脉绝育处下方用眼科剪剪一小切口,将器皿任氏液+少量肝素的蛙心插管1生理学实验报告由此口插入主动脉,至动脉圆锥时约“向后向下向前”试插,当心室收缩时容易经主动脉瓣插入心室腔内。

动物生理学-蛙心灌流实验报告

动物生理学-蛙心灌流实验报告

一、实验结果1、正常心搏曲线2、滴加0.65%NaCl溶液3、滴加2%CaCl2溶液2滴4、滴加1%KCl溶液5、滴加0.01%Adr溶液6、滴加0.01%Ach溶液7、加2滴0.01%阿托品和0.01%Ach二、分析与讨论1、正常心搏曲线从图中可以看出本组牛蛙心跳比较微弱,再结合本组牛蛙心脏外表上有不规则小黑斑这一点,可推断出这只牛蛙可能患有心脏疾病。

2、滴加0.65%NaCl溶液滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,灌注液中缺乏Ca2+,以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。

3、滴加2%CaCl2溶液2滴加入CaCl2后,心跳略微增强。

细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。

Ca2+浓度增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。

Ca2+浓度增高使Ca2+内流增多,心肌收缩能力增强。

4、滴加1%KCl溶液滴加1%KCl后,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度也逐渐下降。

这是因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+减少,心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱,心肌收缩力降低。

所以心搏曲线振幅减小。

5、滴加0.01%Adr溶液滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲线幅度明显增大。

其作用机理是,肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,导致肌浆中Ca2+浓度增高,使心肌收缩增强。

另外,肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力,促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度,刺激Na+与Ca2+交换,使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速,这样,将使心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显增强。

6、滴加0.01%Ach溶液滴加乙酰胆碱后,蛙心收缩减弱,心率减慢。

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告
实验目的,通过对蛙心进行灌流实验,观察心脏的生理反应,了解心脏的工作
原理。

实验材料和方法,实验所需材料包括蛙心、生理盐水、注射器、心电图仪器等。

首先将蛙心取出并清洗干净,然后将其放置在生理盐水中。

接着使用注射器将生理盐水注入蛙心,记录心脏的生理反应,并通过心电图仪器进行监测。

实验结果,在进行蛙心灌流实验的过程中,我们观察到蛙心在接受生理盐水灌
流后,心脏开始收缩和舒张,呈现出规律的跳动节奏。

通过心电图仪器的监测,我们可以清晰地看到心脏电活动的变化,进一步了解心脏的工作原理。

实验结论,蛙心灌流实验结果表明,心脏在接受生理盐水灌流后,能够正常地
进行收缩和舒张,保持正常的跳动节奏。

这一实验结果有助于我们深入了解心脏的生理功能,为进一步研究心脏疾病和治疗提供了重要的参考。

实验意义,蛙心灌流实验是生理学实验中常用的一种实验方法,通过对心脏的
灌流观察,可以帮助我们更好地理解心脏的工作原理和生理功能。

这对于心脏疾病的研究和治疗具有重要的意义,也为医学研究提供了重要的实验数据。

在本次实验中,我们通过对蛙心的灌流观察,获得了有益的实验结果,进一步
加深了对心脏生理功能的理解。

希望通过这一实验结果,能够为医学研究和临床实践提供有益的参考,为保护人类健康作出更大的贡献。

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告

实验二离体蛙心灌流实验专业:学号:姓名:一、实验目的1.学习离体器官(蛙心)灌流的方法。

2.观察理化因素对蛙心活动的影响。

二、实验原理蛙心的灌流:蛙心无营养性血管,离体之后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间,心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。

心肌:1.含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、Na2HPO4和蒸馏水,其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。

2.0.65%NaCl灌流:3.2%CaCl2灌流:4.1%KCl灌流:5.1:10000 E灌流6.1:10000 Ach灌流7.心得安β1受体阻断剂,抑制肾上腺素与β1受体结合,使E不能发挥作用。

8.阿托品M受体阻断剂,抑制Ach减慢心率,加速房室传导,增加心房收缩力。

三、 实验器材离体蛙心任氏液、l %KCl 溶液、2%CaC12溶液、0.65%NaCl 溶液、1:10000 肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、心得安、阿托品四、 实验步骤五、 结果与分析心率:34次/min 最大收缩力:2.5g 最小收缩力:1.1g图1 正常脉搏曲线心率:35次/min 最大收缩力:1.6g 最小收缩力:1.1g图2 0.65%NaCl 灌流脉搏曲线任氏剂 0.65%NaCl任氏液清洗2%CaCl 2任氏液清洗1%KCl任氏液 2.药物试剂E 任氏液清洗 心得安+E 任氏液清洗Ach任氏液清洗 阿托品+Ach任氏液1.离子试剂分析:细胞外液中Ca2+浓度降低,2期Ca2+内流减少,胞浆中Ca2+减少,心肌收缩力降低。

心率:38次/min最大收缩力:3.5g最小收缩力:1.1g图3 2%CaCl2灌流脉搏曲线分析:心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关。

心肌肌浆网不发达,储钙能力差,易受细胞外钙离子浓度高低影响。

细胞外液中Na+与Ca2+有竞争性抑制,细胞外液Ca2+浓度升高,细胞兴奋时内流Ca2+增加,心肌收缩力增强。

离体蛙心灌流实验报告

离体蛙心灌流实验报告

一、实验目的1. 学习离体器官(蛙心)灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 掌握实验操作技巧,提高实验技能。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验,通过人工灌流的方法,使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。

实验原理如下:1. 蛙心无营养性血管,离体后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间。

2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。

3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素,可以观察蛙心活动的变化,了解理化因素对心脏活动的影响。

三、实验对象与用品1. 实验对象:蟾蜍2. 实验用品:斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。

四、实验方法与步骤1. 实验准备:将蟾蜍仰卧固定于蛙板上,用剪刀剪开胸壁,暴露心脏。

用蛙心夹夹住蛙心尖部,固定在蛙板上。

2. 动脉插管:在主动脉分支下预埋一条棉线,结扎主动脉左支,剪一向心斜切口,插入斯氏蛙心套管,送入动脉球。

3. 连接实验装置:将蛙心套管与二道仪相连,记录蛙心活动。

4. 灌流液准备:配制正常灌流液(任氏液)和实验灌流液(分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等)。

5. 实验操作:a. 将蛙心置于正常灌流液中,观察蛙心活动,记录心率、收缩幅度等指标。

b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中,观察蛙心活动的变化,记录心率、收缩幅度等指标。

c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。

五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下,蛙心以正常节律收缩和舒张,心率适中,收缩幅度适中。

2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后,蛙心收缩幅度稍微减小,收缩力稍微减弱。

分析原因:相当于细胞外环境中缺乏Ca2+,动作电位2期Ca2+内流减少,胞浆中Ca2+减少,心肌收缩力降低。

蛙心灌流实验实验报告

蛙心灌流实验实验报告

一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 掌握实验操作技能,提高实验观察和分析能力。

二、实验原理蛙心灌流实验是研究心肌细胞生理特性的常用方法。

通过离体蛙心灌流,可以观察和比较不同理化因素对心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的影响。

实验中,利用任氏液作为灌流液,维持蛙心的正常生理活动。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:蟾蜍、蛙心夹、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等。

2. 实验仪器:手术显微镜、蛙板、蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、套管夹等。

四、实验步骤1. 制备蛙心标本:将蟾蜍放入装有冰块的容器中,使其昏迷。

在蟾蜍背部剪一小口,暴露心脏。

在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。

将心脏与动脉分离,用任氏液冲洗,置于蛙心夹上。

2. 连接实验装置:将蛙心夹固定于支架上,连接张力传感器和计算机采集系统。

将任氏液滴入培养皿中,用滴管控制液面高度。

3. 观察正常蛙心活动:打开计算机采集系统,观察蛙心在任氏液中的正常收缩和舒张活动。

4. 改变灌流液成分,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化:a. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

b. 在灌流液中加入2%CaCl2溶液,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

c. 在灌流液中加入1%KCl溶液,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

d. 在灌流液中加入1:10000肾上腺素,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

e. 在灌流液中加入1:10000乙酰胆碱,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

f. 在灌流液中加入3%乳酸,观察心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性的变化。

5. 记录观察结果,分析实验现象。

五、实验结果与分析1. 以0.65%NaCl溶液替换任氏液后,心肌细胞兴奋性、传导性和收缩性稍微减小,表现为心跳频率和幅度降低。

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告导言:蛙心灌流实验被广泛应用于生物医学领域,尤其在心血管疾病的研究中具有重要价值。

通过灌流蛙心,我们可以观察和分析心脏的生理特性以及对不同药物的反应。

本实验旨在通过蛙心灌流实验,探究心脏的基本功能和药物对心脏的影响,为心脏病的治疗和预防提供科学依据。

材料与方法:1. 实验材料:蛙心、生理盐水、维生素溶液、草酸盐、肾上腺素溶液等。

2. 实验仪器:心灌流装置、心跳记录仪、药物注射器等。

3. 实验步骤:首先,将蛙心取出并放入灌流装置中。

接着,连接好药物注射器和心跳记录仪。

然后,通过灌流装置注入生理盐水,以模拟蛙心的血液循环。

最后,分别注入不同浓度的药物,观察心率和心脏收缩力的变化。

结果与讨论:经过一系列实验观察与记录,我们得出了以下几个重要结果。

1. 药物对心率的影响:在实验中,我们注入了不同浓度的肾上腺素溶液。

结果显示,随着肾上腺素浓度的增加,蛙心的心率明显上升。

这说明肾上腺素可以刺激心脏神经活动,增加心率。

这一发现对于心脏病患者的治疗中,选择适当的心率调节药物具有重要意义。

2. 药物对心脏收缩力的影响:除了观察心率的变化,我们还研究了不同药物对心脏收缩力的影响。

在实验中,我们分别注入了维生素溶液和草酸盐溶液。

实验结果显示,注入维生素溶液后,心脏的收缩力明显增加;而注入草酸盐后,心脏收缩力明显下降。

这表明维生素能够增强心肌收缩力,而草酸盐则具有抑制心肌收缩的作用。

这些结论对于研究心脏疾病发生与发展的机制具有重要意义。

3. 心灌流实验的局限性:虽然心灌流实验在研究心脏功能和药物反应方面提供了重要的数据,但它也存在一定的局限性。

首先,蛙心与人类心脏在结构和功能上存在差异,因此不能直接推广到人类。

其次,实验过程中的操作技术和环境等因素都可能对实验结果产生影响。

因此,在进行心灌流实验时,需要综合考虑多方面因素,确保实验结果的可靠性。

结论:通过蛙心灌流实验,我们得出了有关心率和心脏收缩力的一些重要结论,为心脏病的治疗和预防提供了一定的科学依据。

生理学实验报告-蛙心灌流

生理学实验报告-蛙心灌流

蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。

2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。

二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。

心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。

外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。

三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。

套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。

四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。

仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。

在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。

再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。

左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。

选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。

当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。

此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。

用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告蛙心灌流实验报告引言:蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将溶液注入蛙心,观察其对心脏功能的影响,以研究心血管系统的生理和病理变化。

本实验旨在探究不同溶液对蛙心的影响,并从中得出相关结论。

实验材料和方法:1. 实验材料:蛙心、生理盐水、咖啡因溶液、酒精溶液、糖水溶液、酸性溶液。

2. 实验方法:将蛙心取出,用生理盐水清洗后,分别将不同溶液注入蛙心,并记录下观察到的变化。

实验结果与讨论:1. 生理盐水组:将生理盐水注入蛙心后,观察到心脏跳动平稳,无明显变化。

这表明生理盐水对蛙心的影响较小,不会引起明显的生理变化。

2. 咖啡因溶液组:将咖啡因溶液注入蛙心后,观察到心脏跳动加快,并出现明显的兴奋状态。

咖啡因具有兴奋中枢神经系统和心血管系统的作用,因此可以加快心脏跳动。

3. 酒精溶液组:将酒精溶液注入蛙心后,观察到心脏跳动减慢,并出现明显的抑制状态。

酒精具有抑制中枢神经系统和心血管系统的作用,因此可以减慢心脏跳动。

4. 糖水溶液组:将糖水溶液注入蛙心后,观察到心脏跳动加快,并出现明显的兴奋状态。

糖水中的葡萄糖可以提供能量,激活心脏细胞,从而加快心脏跳动。

5. 酸性溶液组:将酸性溶液注入蛙心后,观察到心脏跳动减慢,并出现明显的抑制状态。

酸性溶液会改变细胞内外的酸碱平衡,影响心脏细胞的正常功能,从而减慢心脏跳动。

结论:通过以上实验结果可以得出以下结论:1. 咖啡因具有兴奋心脏的作用,可以加快心脏跳动。

2. 酒精具有抑制心脏的作用,可以减慢心脏跳动。

3. 糖水中的葡萄糖可以提供能量,激活心脏细胞,从而加快心脏跳动。

4. 酸性溶液会改变细胞内外的酸碱平衡,影响心脏细胞的正常功能,从而减慢心脏跳动。

5. 生理盐水对蛙心的影响较小,不会引起明显的生理变化。

实验的局限性:1. 本实验仅使用了蛙心作为研究对象,结果可能不具有普遍性。

2. 实验中只考虑了溶液对心脏跳动的影响,未涉及其他心血管系统的参数。

生理学实验报告_蛙心灌流_(2)

生理学实验报告_蛙心灌流_(2)

蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。

2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。

二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。

心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。

外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。

三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。

套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。

四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。

仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。

在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。

再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。

左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。

选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。

当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。

此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。

用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验报告实验报告:蛙心灌流实验实验目的:1. 了解蛙的心脏解剖结构及其生理特性;2. 掌握蛙心脏灌流的技术操作方法;3. 通过观察和记录实验结果,研究蛙心脏的生理功能。

实验原理:蛙心脏是一种三心室的心脏,左、右心房和右心室之间没有明显的分隔。

在正常情况下,蛙的心脏是按照一定的顺序进行收缩和舒张,完成心脏循环。

通过将生理盐水灌入蛙的心腔,可以模拟蛙的心脏循环过程,使心脏继续收缩和舒张。

实验材料:蛙、生理盐水、手术刀、缝合线、生理盐水注射器。

实验步骤:1. 用手术刀在蛙的腹部切开一小块皮肤,暴露心脏;2. 用手术刀小心地在蛙的心脏下切开一个小孔,用生理盐水注射器将生理盐水注入腔内;3. 观察心脏的收缩和舒张过程,并通过观察流入和流出的生理盐水量来评估心脏的功能;4. 实验结束后,用缝合线将心脏切开的部位缝合,然后将蛙恢复到原来的容器中。

实验结果:在实验过程中,我们观察到蛙心脏在收缩和舒张过程中有规律地推动生理盐水的流动。

正常情况下,心脏的收缩和舒张过程应该是有序的,流入和流出的生理盐水量应该是相等的。

实验结果显示,蛙心脏收缩和舒张过程正常,流入和流出的生理盐水量基本相等。

实验讨论:蛙心灌流实验是一种常用的生理实验方法,通过观察和记录心脏的生理功能,可以研究心脏的结构和功能。

实验中,我们灌流生理盐水来模拟心脏循环过程,这是比较接近真实情况的实验方法之一。

实验结果显示,蛙心脏有较好的收缩和舒张功能,流入和流出的生理盐水量相等,说明心脏的功能正常。

这与虽然虫是体型很小的生物,但它们的心脏结构和功能已经与人的心脏非常相似。

因此,蛙心灌流实验可以作为心脏生理学研究的重要工具之一。

总结:通过蛙心灌流实验,我们可以更深入地了解和研究心脏的结构和功能。

实验过程需要小心谨慎地操作,以确保实验的可靠性和准确性。

通过观察和记录实验结果,我们可以评估和分析心脏的生理功能,为进一步研究心脏疾病提供参考。

娃心灌流实验报告

娃心灌流实验报告

一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。

2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。

3. 掌握心脏生理学基本知识,提高实验操作技能。

二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将蛙心取离体后,采用人工灌流的方法,模拟心脏在体内的血液供应,观察灌流液中理化因素对心脏活动的影响。

蛙心灌流实验中,常用的灌流液为任氏液,其中含有与心脏内环境相似的离子成分,如Na+、K+、Ca2+等。

改变灌流液中这些离子的浓度,可以观察到心脏活动的变化。

三、实验材料与方法1. 实验材料:蟾蜍、任氏液、生理盐水、CaCl2、KCl、注射器、灌流管、蛙心夹、显微镜等。

2. 实验方法:(1)将蟾蜍处死,剥皮,暴露心脏,用蛙心夹固定心脏。

(2)将心脏的动脉插管,连接灌流管,并调整灌流速度。

(3)用生理盐水冲洗灌流管,使灌流液充满管内。

(4)观察心脏在任氏液中的正常活动,记录心率、振幅等指标。

(5)分别改变灌流液中Na+、K+、Ca2+的浓度,观察心脏活动的变化,记录心率、振幅等指标。

(6)对实验结果进行分析和讨论。

四、实验结果与分析1. 正常蛙心在任氏液中的活动:心率适中,振幅适中,处于与内环境相似的任氏液中,蛙心以正常节律收缩和舒张。

2. 改变灌流液中Na+浓度:当灌流液中Na+浓度降低时,心率减慢,振幅减小;当灌流液中Na+浓度升高时,心率加快,振幅增大。

3. 改变灌流液中K+浓度:当灌流液中K+浓度升高时,心率加快,振幅增大;当灌流液中K+浓度降低时,心率减慢,振幅减小。

4. 改变灌流液中Ca2+浓度:当灌流液中Ca2+浓度升高时,心率加快,振幅增大;当灌流液中Ca2+浓度降低时,心率减慢,振幅减小。

五、结论与展望1. 结论:通过本实验,我们掌握了离体蛙心灌流的方法,观察到理化因素对蛙心活动的影响,进一步了解了心脏生理学的基本知识。

2. 展望:本实验为后续心脏生理学实验奠定了基础。

在今后的实验中,我们可以进一步研究其他因素对心脏活动的影响,如pH值、温度等,以深入了解心脏生理学的基本原理。

生理实验报告2(蛙心离体灌泳)

生理实验报告2(蛙心离体灌泳)

广州大学动物生理学实验报告开课学院及实验室:生科院生化楼6032019年3月18日学院生命科学学院年级、专业、班生技171姓名GDZ学号实验课程名称动物生理学实验成绩实验项目名称实验2:1.缺乏钙、钾等离子对青蛙离体心脏活动的影响2.离子对青蛙离体心脏活动的影响3.递质对青蛙离体心脏活动的影响指导老师[实验目的]1.学习制备离体蛙心脏及离体心脏灌流的方法2.观察Na+、K+、Ca2+种离子,肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品对心脏活动的影响3.理解内环境理化因素相对恒定对维持心脏正常活动的重要性,对递质、受体、受体兴奋剂与阻断剂的概念有感性的认识[实验原理]1.两栖类正常起搏点是静脉窦。

正常节律性活动需要一个适宜的理化环境。

如果将离体蛙心用接近其血浆理化特性的任氏液灌流,保持心脏适宜的理化环境,在一定时间内心脏仍能产生节律性兴奋和收缩活动。

2.当改变灌流液的组成成分,这种节律性舒缩活动也随之发生改变,说明内环境理化因素的相对稳定是维持心脏正常节律性活动的必要条件。

因此,可以通过改变心脏灌流液的理化成分,观察心肌的生理特性。

3.心脏受自主神经的双重支配,交感神经兴奋时,其末梢释放去甲肾上腺素(结合β受体),使心肌收缩力加强,传导速度增快,心率加快;而迷走神经兴奋时,其末梢释放乙酰胆碱(结合M 受体),使心肌收缩力减弱,传导速度减慢,心率减慢。

4.阿托品是一种抗胆碱药,为M-受体阻断剂。

肾上腺素与去甲肾上腺素作用效果一致。

[实验对象]蛙任氏液、0.4%肝素-任氏液,0.65%NaCl、5%NaCl、2%CaCl、1%KCl、1:5000肾上腺素(NA)、21:30000乙酰胆碱(ACh)、阿托品[仪器与器械]器材:毁髓针、手术镊、直尖剪、金冠剪、眼科剪、玻璃分针、铁支架、蛙心夹、双凹夹、试管夹、滑轮仪器:生物信号采集系统(含电脑)、张力换能器(10g)其他:细线、蛙板、烧杯(大中小3个)、滴管、蛙心插管[实验方法与步骤]1离体蛙心标本制备1.1取蛙,破坏脑和脊髓,暴露心脏1.2穿线结扎1.3斯氏蛙心插管,剪除多余,离体心脏2连接实验装置3进行实验项目3.0记录心脏在仅有任氏液时的收缩曲线,观察心率及收缩幅度,作为正常对照。

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蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。

2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。

二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。

心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。

外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。

三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。

套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。

四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。

仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。

在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。

再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。

左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。

选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。

当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。

此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。

用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。

稳定住套管后,轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液),再将结线固定在套管的小玻璃钩上,然后剪断结扎线上方的血管。

轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置,于静脉窦下方剪断有牵连的组织,仅保留静脉窦与心脏的联系,使心脏离体(切勿损伤静脉窦)。

用任氏液反复冲洗心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液。

保持套管内液面高度一致(1.5~2 cm),即可进行实验。

(2)将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不可夹得过多,以免因夹破心室而漏液)。

再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连(如右图)。

注意:勿使灌流液滴到传感器上。

调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。

2、实验观察(1)记录正常心搏曲线(2)改用0.65%NaCI溶液灌流,并作好加药标记,观察心搏变化。

待曲线氏插管装置出现明显变化时,立即吸去套管中的灌流液,同时做好冲洗标记,并用新鲜任氏液清洗2—3次,待心搏恢复正常。

注意:换液时切勿碰套管,以免影响描记曲线的基线,同时保持灌流液面一致(以下同)。

观察可得,NaCI溶液会阻遏心脏搏动。

(3) 迅速用新鲜任氏液清洗2~3次,待心搏恢复正常。

向套管内加入1~3滴2%CaCI:溶液,观察并记录心搏曲线的变化。

当出现明显变化时,立即更换任氏液,待心搏恢复正常(如果恢复迟缓,可多次冲洗)。

(4)同法向套管中加1—2滴1%KCl溶液,记录心搏曲线的变化。

当心搏曲线变化时,同法更换灌流液,待心搏恢复正常。

(5)同法记录套管中加入l~2滴的肾上腺素溶液(1:10 000)后心搏曲线的变化。

(6)同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液(1:10 000)后心搏曲线的变化。

(7)同法记录套管中加入l~2滴的3%乳酸后心搏曲线的变化。

五、【实验结果与原因分析】曲线的幅度————收缩的程度曲线的密度————心率曲线的基线————舒张的程度1、正常收缩曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分析:滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,由于灌注液中缺乏Ca2+(),以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。

3、滴加2%CaCl溶液分析:细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。

[Ca2+]增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。

[Ca2 0+] 0增高使Ca2+内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速。

Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强。

[Ca2+]降低时,所引起的变化与高钙时相反。

因此加入CaCl2后,心率减少、振幅减少,基线上0移。

4、滴加1%KCl溶液分析:滴加1%KCl后的心搏曲线发现,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度逐渐下降,最后停止在基线处,即心脏停博于舒张状态。

因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+减少,心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱,心肌收缩力降低。

所以心搏曲线振幅减小。

5、滴加1:10000肾上腺素溶液分析:滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲线幅度明显增大。

其作用机理是,肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,导致肌浆中Ca2+浓度增高,使心肌收缩增强。

另外,肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力,促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度,刺激Na+与Ca2+交换,使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速,这样,将使心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显增强。

6、滴加1:10000乙酰胆碱溶液分析:上图可示,蛙心收缩减弱,心率减慢,最后出现蛙心停止舒张阶段。

其机理为:乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合,一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性,促使K+外流,将引起:1)窦房强细胞复极时K+外流增多,最大复极电位绝对值增大;Ik衰减过程减弱,自动除极速度减慢。

这两方面因素导致窦房自律性降低,心率减慢。

2)复极过程中K+外流增加,动作电位2、3期缩短,Ca2+进入细胞内减少,使心肌收缩减弱;另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道,减少Ca2+内流,进而使心肌收缩减弱。

7、滴加3%乳酸溶液分析:H+与Ca2+的竞争机制,导致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。

六、【注意事项】1.制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦。

2.上述各实验项目,一旦出现作用应立即用正常任氏液换洗,以免心肌受损,而且必须待心搏恢复正常后方能进行下一步实验。

3.尽量选用健壮、体大的雄性蟾蜍,手术过程中注意保护心脏,避免损伤。

4.实验中及时用任氏液冲洗心脏,待曲线恢复平稳后再进行下一步操作。

5.每次更换任氏液都必须保持灌流液液面高度恒定,以免因灌流量变化而影响结果。

6.严格控制每次药品加入量,先加一滴,效果不明显再加一滴。

7.吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用,不可混淆使用,以免影响实验结果。

七、【讨论】1. 离体蛙心制备好后,有时候馆内的液面上下移动很不明显,是何原因?如何处理?答:离体蛙心制备好后,蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动。

其实质是:在心室收缩时,心室容积减少,室内压升高,将心室内的液体压入插管内,管内液面上升;在心室舒张的时候,心室容积增大,心室内压减少,将插管内液体吸入心室,管内液面下降。

但是有时候蛙心插管内液面波动不明显,其主要原因是:⑴插管内尖端出现血凝块。

⑵插管尖端不在心室腔内,而是在心房或者脉间结缔组织等地方。

⑶插管进入心室腔内过深,以致尖端抵住了心室壁。

⑷蛙心由于长期心肌失血,导致活力下降。

2. 实验过程中,为什么必须保持蛙心插管内液面高度的恒定?液面过高或过低会产生怎样的影响?答:在实验过程中,蛙心插管内液面高度发生变化,心脏收缩曲线会相应发生变化。

心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响。

插管液面高度所产生的压力,在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷,心室开始收缩的时候,此液体所产生的压力又成为心肌收缩时的后负荷。

故高度的改变,进而引起的前后负荷的改变将改变心肌收缩的幅度和频率。

当液面过高时。

心缩曲线幅度将降低。

因为过高的液面,将使心室前负荷超过了最适前负荷,将导致粗细肌丝过于疏远,而导致收缩的潜力减少,心肌收缩不再增加或下降。

而类似的,过高的后负荷,也使心肌收缩的幅度和速度大大下降。

而当液面过低时,心室收缩的幅度也会减少。

因为前负荷过小,将导致粗细肌丝过于接近,而导致收缩的潜力减少,实际上,此时由于前负荷的减少导致心室收缩的效力的减少比前负荷增加而导致的还有明显。

类似的,后负荷相应的减少也会导致心室收缩的减弱。

所以,在实验中保持最适的液面高度。

是取得较好实验结果的前提。

3.各种离子成分改变蛙心收缩的原理是什么?答:由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关,因此,细胞外液中离子浓度升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。

(1)钾离子的影响K+与静息电位的形成有关。

细胞外液K+浓度[K+]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。

高钾:[K+]0轻度或中度增高时,膜内、外K+浓度差减小,静息电位绝对值减小,与阈电位差距缩短,因此,兴奋性增高。

[K+]0显著升高时,由于静息电位绝对值减小过多(膜内达-55mV左右),Na+通道失活,因而兴奋性降低甚至消失。

另外,还使0期去极化速度和幅度减小,传导性降低,导致兴奋传导减慢,甚至传导阻滞。

此外,[K+]0增高还可提高膜对K+的通透性,加速K+外流,动作电位平台期缩短,因此,不应期缩短。

此外由于平台期缩短,减少了Ca2+的内流,加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用,导致心肌收缩功能减弱;(2)钙离子的影响细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。

[Ca2+] 0增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。

[Ca2+] 0增高使Ca2+内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速。

Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强。

[Ca2+] 0降低时,所引起的变化与高钙时相反。

(3)钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。

只有当[Na+] 0明显增高时,膜内外钠的浓度差梯度增大,因此,快反应细胞Na+内流加快,0期去极速度和幅度均增加,导致传导性和自律性增高。

同时,Na+内流的增多促进细胞内Ca2+的外运使细胞内Ca2+浓度降低,因此,心肌收缩能力减弱。

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