磁珠法细菌DNA提取试剂盒

MagDNA TM 磁珠细菌DNA提取试剂盒

( 磁珠型)

适合：G+,G-细菌，酵母，真菌，乳酸菌，霉菌等

Cat. # 504001（50 preps）

504002（100 preps）

504003（200 preps）

Note: for laboratory research use only.

MagDNA TM 磁珠细菌DNA提取试剂盒( 磁珠型)

适用范围：

适用于手动快速提取各种细菌基因组DNA，无需蛋白酶消化，也适用于SPRI-TE；雅培m2000；MagNA Pure LC 2.0 System；BioRobot MDx Workstation；King Fisher（ml)；King Fisher 96 process，ABIgen Magstation等系列核酸提取仪，适合大规模提取！

试剂盒组成、储存、稳定性：

试剂盒组成保存50次100次200次

Lysis Buffer A 室温25ml 50ml 100 ml Solution AB 室温12ml 22ml 44 ml Binding Buffer PQ 室温25ml 50ml 100 ml

Wash Buffer B 室温15ml 30ml 60ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇

Wash Buffer C 室温10 ml 20ml 30ml

第一次使用前按说明加指定量乙醇（3倍）

Wash Buffer D 室温10 ml 20ml 30ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇（3倍）

Elution Buffer E 室温10ml 15ml 25ml MagDNA磁珠室温 1.2ml 1.2ml X 2 1.2ml X 4

本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项:

1.Lysis Buffer A或者W ash Buffer B低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水

浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

2.避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时

盖紧盖子。

3.加入MagDNA磁珠前，请漩涡混匀，以免影响浓度的均一性。

产品介绍：

本试剂盒采用国内领先的专利技术合成的高度分散均一的纳米磁珠颗粒，表面修饰高效核酸结合基团，能最大限度的吸附DNA和RNA，博凌科为经过多次实验优化缓冲液体系，开发出一系列高效核酸纯化试剂盒。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于MagDNA® D-Beads DNA磁珠，再通过一系列快速的漂洗除杂的步骤，将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐高pH值的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从磁珠上洗脱。适合多种核酸纯化仪器，可以实现核酸的自动化快速分离。为您的科研工作带来方便！

产品特点：

1.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。

3.多次漂洗确保高纯度，典型的产量200µl全血可提取出5-15µg，OD260/OD280典型

的比值达1.7～1.9，长度可达30 kb -50kb，可直接用于PCR、Southern-blot和各种酶切反应。

4.一般加入结合液和磁珠，由于DNA浓度较大会析出，会和磁珠缠绕在一起，形

成一团黑色螺旋装物质，请缓慢颠倒，团状即是DNA和磁珠的复合体。

5.洗脱液Elution Buffer E不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也

可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于8.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在－20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（30mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.5），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

注意事项：

1.需要自备异丙醇和无水乙醇。

2.开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）

提示：第一次使用前请先在W ash Buffer B/C/D中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

1.收集1毫升过夜培养细菌加入1.5毫升离心管。

可以观察菌液浓度，自行调整菌体多少！

2.9,000rpm离心30秒，使细胞沉淀下来，弃上清，涡旋或轻弹打散细胞沉淀。涡

旋振荡直到细胞团充分重悬、分散。

细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，细胞未打散就加入裂解液，会导致细胞不能充分裂解，形成肉眼可见团块。

3.加入350μl Lysis Buffer A重悬的细胞，上下吹打裂解细胞，或者剧烈涡旋10

秒帮助裂解细胞，70℃水浴10min。

4.可选步骤: 在裂解物中加入RNase A（10mg/ml）至终浓度10μg/ml，颠倒25次混

匀，37℃温育15分钟去除残留RNA，然后冷却回室温。

5.加入冰冷的150μl Solution AB后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀25秒。

混匀后可能见到一些小的蛋白团块。

6.12，000 rpm(可根据需要调整加大离心力)离心5分钟。这时候应该可以见到管底

暗褐色或是白色的块状沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。

7.小心吸取上清（大约400μl）到一个新的1.5ml离心管中。

吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2分钟后取上清。

8.加入等体积的室温Binding Buffer PQ 400μl和20μl MagDNA磁珠，立刻上下颠

倒20次充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，也可能会形成一团或是类似双螺旋的丝状物质，请不要吸走黑色团块。

上述步骤中充分混匀非常重要，混匀不充分严重降低产量，必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。

9.将离心管放到磁性分离架上静止1-2min，直到溶液变澄清，小心的吸掉液体，不