磁珠法细菌DNA提取试剂盒
磁珠法ffpe组织基因组dna提取试剂盒
磁珠法FFPE组织基因组DNA提取试剂盒MagBeads FFPE DNA Extraction Kit【目录号】FFDE-5010、FFDE-5030、FFDE-5100；【运输条件】2~25℃；【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃，蛋白酶K -20℃，其它组分室温；【试剂盒组成】【本卷须知】1）磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心，以免磁珠受到损害，使用前务必充分混匀；2）使用前检查裂解液中是否出现沉淀，如有沉淀请置于37℃水浴温热至恢复澄清；3）蛋白酶K溶液长期不使用，请置于-20℃保存，融化后4℃保存，并尽快使用；4）本操作指南经公司反复验证，使用前请仔细阅读，并且按照操作指南的建议操作。
【产品简介】本试剂盒适用于从石蜡包埋组织切片、石蜡块、或福尔马林等固定液中的组织样本中别离纯化基因组DNA。
试剂盒首先使用二甲苯去除样本中的石蜡或者福尔马林，基因组DNA在裂解液环境下得以快速释放，并结合于磁珠外表，经清洗、洗脱等步骤之后，得到高质量的基因组DNA，~1.9之间，完好性好，可直接应用于PCR模板、杂交、STR、以及SNP等下游分子生物学实验。
操作过程简便、快速。
本试剂盒可手动法进展操作，也可以配合核酸提取仪实现自动化操作。
【试剂盒说明】本试剂盒提取结果和组织类型、样本固定效果以及储存条件等因素亲密相关。
一般来讲，固定时间越久、保存时间越长的样本，基因组DNA受损程度越高。
制作FFPE样本时应注意：1〕组织在福尔马林中固定时间不宜过长，否那么DNA易交联和断裂；也不可以太短，否那么组织固定不充分，核酸易降解。
一般来讲，以固定时间在8~24h为宜；2〕确保样本在石蜡包埋以前脱水完全，并尽量去除残留的福尔马林。
【自备试剂】异丙醇、80%乙醇、二甲苯、PBS溶液〔pH值7.4〕、RNase A溶液(100mg/mL，分散液10mM Tris-HCl, 1mM EDTA, pH值8.0)。
【自备仪器和耗材】手动版：EP管、EP管用磁力架、金属浴、涡旋震荡仪。
磁珠法质粒DNA小量抽提试剂盒说明书
磁珠法质粒DNA小量抽提试剂盒MagBeads Plasmid DNA Mini Extraction Kit【目录号】PDE-5005、PDE-5010、PDE-5030、PDE-5100【运输条件】2~25℃；【保存条件】组分①、③、④于2~8℃保存；组分⑦于-20℃保存；其它组分室温保存；【试剂盒组成】1. 使用前将RNase A溶液（组分⑦）全部加入菌体悬浮液（组分①）中，4℃保存备用；2. 使用前检查菌体裂解液（组分②）是否出现浑浊，如有请置于37℃水浴中温浴至澄清；3. 实验前质粒复性液（组分③）需提前置于4℃冷却充分；4. 菌体裂解液（组分②）和质粒复性液（组分③）使用后应请立即盖紧盖子；5. 磁珠悬浮液（组分④）严禁冻融和离心，以免磁珠受到损害，使用前务必充分混匀；6. 所有离心步骤均为室温下进行，其中加入质粒复性液（组分③）后低温离心效果更佳；7. RNase A溶液（组分⑦）长期不使用于-20℃保存，融化后4℃保存，并尽快使用；8. 质粒DNA抽提得量与细菌的培养浓度、宿主菌、质粒拷贝数等因素有关；9. 本操作指南经公司反复验证，使用前请仔细阅读并按指南建议操作。
磁珠法·自动化：为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本试剂盒可应用于对小量菌液进行质粒DNA抽提。
试剂盒采用高性能纳米磁珠和特殊缓冲液系统。
磁珠表面修饰有特殊化学基团，在一定条件下对质粒DNA具有极强的亲和力，当条件改变时可以可逆的释放质粒DNA，从而达到分离纯化质粒DNA的效果。
整个操作过程简便、快速。
本产品可最大限度的去除蛋白质等杂质，保证提取所得质粒DNA的纯度，所得质粒DNA产物可直接应用于酶切、测序、文库筛选、连接和转化等各种下游分子生物学实验。
本试剂盒可在EP管中进行手动法操作、在96孔圆孔板中实现手动法高通量操作（单人同时操作1~6块96孔板，可同步实现96~576份样本抽提工作）、或者与各种自动化核酸提取仪配合使用实现自动化高通量操作。
磁珠法核酸提取试剂盒说明书
磁珠法核酸提取试剂盒说明书磁珠法核酸提取试剂盒说明书在科学研究和临床诊断中，核酸提取是至关重要的一步。
随着技术的不断发展，磁珠法核酸提取试剂盒逐渐成为了研究人员和临床医生们的首选。
那么，什么是磁珠法核酸提取试剂盒？它的工作原理是什么？在使用过程中需要注意哪些事项？本文将从广度和深度两方面进行全面评估，带你深入了解磁珠法核酸提取试剂盒。
一、磁珠法核酸提取试剂盒的工作原理磁珠法核酸提取试剂盒是利用磁珠的磁性特性，结合核酸和其他杂质的不同特性，通过磁场的作用将目标核酸分离提取出来的一种试剂盒。
具体步骤包括细胞裂解、磁珠与核酸结合、洗涤和最终洗脱等过程。
通过这一系列步骤，能够快速、高效地从样本中提取出纯度较高的核酸，为后续的分子生物学实验和临床检测打下基础。
磁珠法核酸提取试剂盒本质上是一种高度精密的技术产品，涉及到多方面的知识和技术。
在使用过程中需要严格按照说明书上的操作步骤进行，以确保提取的核酸具有良好的质量。
二、磁珠法核酸提取试剂盒的使用注意事项在使用磁珠法核酸提取试剂盒时，有一些注意事项是需要特别关注的。
首先是样本的处理和裂解步骤，不同样本的裂解条件可能会有所不同，需要根据具体情况进行调整。
其次是磁珠的使用，需要注意磁珠的悬浮情况和使用量，以确保能够有效地结合目标核酸。
在洗涤和洗脱步骤中，也需要注意洗涤缓冲液的温度和使用次数，以及洗脱缓冲液的使用量和温度等细节。
只有严格按照说明书上的要求进行操作，才能够得到高质量的核酸提取物。
三、磁珠法核酸提取试剂盒的个人观点和理解从个人角度来看，磁珠法核酸提取试剂盒无疑是一种高效、便捷的核酸提取工具。
相比传统的有机溶剂提取法和硅基膜法，磁珠法核酸提取试剂盒具有操作简便、提取效率高、纯度好等优点。
在日常的科研工作或临床诊断中，使用磁珠法核酸提取试剂盒能够大大提高工作效率，节约时间和成本。
总结回顾通过本文对磁珠法核酸提取试剂盒的深度评估，相信读者已经对这一产品有了更全面、深刻的理解。
PCR产物回收纯化试剂盒（磁珠法）
PCR产物回收纯化试剂盒（磁珠法）储存条件：PCR 产物回收纯化试剂盒（磁珠法）保存于2-8℃。
产品描述：PCR产物回收纯化试剂盒（磁珠法）采用超顺磁性磁珠，配合优化的缓冲液体系，可方便、快速回收PCR产物中的DNA，并有效去除引物二聚体、dNTP、无机盐及蛋白质等杂质，整个过程操作简单快速。
本产品可用于纯化回收150bp~50kb的DNA片段，回收率可达 90%以上，且 DNA 纯度高。
纯化后的DNA可用于酶切、测序、PCR等后续操作。
实验方案1. 取出100 μL Binding Buffer至合适的反应管(1.5 mL EP管或PCR管)中。
2. 将MagBeads Preservation Solution漩涡震荡30s，使磁珠充分震荡重悬，取出20 μL ，加入Binding Buffer中，用移液器缓慢吹打10次或漩涡震荡30s。
使磁珠分散均匀。
注意：用移液器吹打重悬磁珠时需缓慢操作，避免产生气泡。
吹打后应将吸头内残留的磁珠吹打干净，避免磁珠损失。
如果需要同时进行多个样品的纯化，请先在同一个容器中进行磁珠预处理，再将磁珠分装到各个反应管中。
1. 向预处理后的磁珠悬液中加入50 μL PCR产物，用移液器缓慢吹打10次或漩涡震荡30s使两者充分混匀。
2. 将反应管在室温下静置5min，让DNA和磁珠充分结合。
3. 将反应管置于磁力架上，等待2分钟，目测磁珠全部吸附于管壁上(后续该操作简称为“磁性分离”)，移去上清液，从磁力架上取下反应管。
主要成分：结合DNA磁珠预处理1 Binding buffer为异丙醇，客户自行准备。
2Wash Buffer： 首次使用前请添加无水乙醇。
接下一页磁力架使用说明磁条：可抽出2卡口：对准此处按下EP 1常见问题指南：Q1: 纯化PCR产物的得率低？A1: 1. 确保磁珠混匀，并与产物充分结合 2. 确保使用Wash Buffer前，乙醇已加入3. 如果使用其他洗脱液进行洗脱，请确保合适的洗脱液pH和盐浓度Q2: 为什么所得PCR产物的A260/A230比值偏低？A2: 可能残留有有机试剂，可尝试用乙醇沉淀法再进行一次洗涤。
磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒
磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒概述本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，从样品中分离纯化高质量基因组DNA，特殊包被的磁珠，在一定条件下对目的DNA 具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA的目的。
整个过程不涉及有毒试剂，安全、便捷、提取的DNA纯度高。
使用本试剂盒纯化的基因组DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7～2.0之间，可以应用到各类下游分子生物学实验。
适用范围适用于从各种革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌等中提取基因组DNA，适用于自动化核酸提取平台。
试剂盒包装及组成试剂盒组成数量Buffer A20 ml×1瓶Buffer B 1 ml×1瓶Buffer C 1 ml×1瓶磁珠结合液25 ml×1瓶洗涤液Ⅰ50 ml×1瓶洗涤液Ⅱ30 ml×1瓶，使用前加入80 ml无水乙醇，混匀洗脱液10 ml×1瓶使用说明书1份注意事项1. Buffer A在使用前在温浴设备中温育至白色沉淀完全溶解后使用。
2.如果下游实验对RNA污染比较敏感，可在裂解中第⑶步加1µl RNaseA（10mg/ml）。
3. Buffer B 4℃保存，可能会析出白色粉末状沉淀，使用前混合均匀，不影响使用效果。
4.磁珠结合液用前一定要充分混匀。
5.溶菌酶用缓冲液稀释，缓冲液为（20mMTris，pH8.0；2mMNa2-EDTA；1.2%TritonX-100 ）。
6.如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数（洗脱次数最好不要超过3次）。
操作方法1.裂解⑴取1ml过夜培养的菌液至1.5ml EP管中，12000 rpm离心1min，尽量吸净上清。
⑵如果样品为革兰氏阳性菌（葡萄球菌除外，葡萄球菌可直接按照阴性菌步骤操作，加入适量溶葡萄球菌酶裂解效果更好）可加入25µl20mg/ml的溶菌酶（客户自备）反复吹打使菌体充分悬浮，37℃消化30～60min（注：消化时间取决于所用的菌种），如果样品为革兰氏阴性菌可直接进行步骤⑶。
游离DNA提取试剂盒（磁珠法）说明书
游离DNA提取试剂盒（磁珠法）说明书【产品名称】通用名称：核酸提取或纯化试剂商品名称：游离DNA 提取试剂盒（磁珠法）英文名称：Magbind CFDNA Kit 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的游离DNA (Free circulating / Cell-free DNA)提取方法，适用于从血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA 。
纯化得到的离DNA 质量稳定、可靠，可用于下游常规实验。
该试剂盒可与转移液体法的核酸提取仪配套使用，简单、快速地进行大规模提取，大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。
【预期用途】 样品裂解后，在高盐存在时，DNA 结合于硅基包被的磁珠表面，漂洗后，高纯度DNA 被洗脱于洗脱缓冲液或去离子水中。
DNA 得率与样品的类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。
【检验原理】50次/盒；400次/盒【包装规格】版本号：11/2020【样本要求】1．适用标本类型：新鲜或冷冻的全血（用柠檬酸盐、EDTA 或肝素等抗凝剂处理过的血液样品）、血浆、血清、淋巴细胞、无细胞体液等样本。
2．标本处理与保存：血清及血浆样本按常规方法制备，新鲜样本应尽快处理或分装后于-70℃冻存，避免反复冻融。
3．样本运输：应采用冰壶或者泡沫箱加冰或干冰密封运输。
【检验方法】实验前准备：向蛋白酶K 中加入指定用量的蛋白酶K 保存液使其溶解，终浓度为20 mg/ml ，-20℃保存。
1．向1.5 ml 离心管中加入20 μl 蛋白酶K 溶液。
2．向上一步的离心管中加入200 μl 血清/血浆样品。
注意：冻存样品需提前在4℃冰箱中放置使其溶化。
溶化过程中反复颠倒样品储存管使其混匀。
3．向上一步的离心管中加入200 μl 裂解缓冲液，涡旋振荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃、1300 rpm 的Thermomixer 上振荡裂解10分钟。
注意：1）如无Thermomixer ，需将离心管放于56℃水浴锅或金属浴中孵育10分钟，期间每隔2分钟涡旋振荡5秒钟。
磁珠法核酸提取试剂盒说明书
磁珠法核酸提取试剂盒说明书
一、磁珠法核酸提取概述
磁珠法核酸提取是一种快速、高效、便捷的核酸提取方法。
通过采用磁珠作为吸附介质，可实现对样品中核酸的高效提取，减少实验操作步骤，提高实验效率。
二、核酸提取试剂盒的组成及作用
核酸提取试剂盒主要包括以下组件：磁珠、核酸酶抑制剂、缓冲液等。
其中，磁珠用于吸附样品中的核酸，核酸酶抑制剂可有效抑制核酸降解，缓冲液则用于调节实验体系的酸碱度，保证核酸提取效果。
三、核酸提取流程
1.准备样品：收集待检测样本，如血液、唾液、组织等。
2.裂解细胞：将样品进行充分裂解，释放核酸。
3.磁珠吸附：将磁珠与裂解液混合，磁珠吸附核酸。
4.洗涤磁珠：加入洗涤液，去除磁珠上非核酸物质。
5.核酸释放：加入核酸释放液，使吸附在磁珠上的核酸溶解。
6.检测核酸：将释放后的核酸进行实时荧光定量PCR等检测。
四、产品优势与特点
1.高效：磁珠法核酸提取具有较高的提取效率，可节省实验时间。
2.便捷：试剂盒内成分齐全，实验操作简单，易于上手。
3.稳定：核酸酶抑制剂有效保护核酸完整性，确保实验结果可靠。
4.安全：避免液氮、酒精等危险物质的使用，降低实验风险。
五、注意事项与储存方法
1.实验过程中需严格遵循操作步骤，避免实验误差。
2.试剂盒应在-20℃储存，避免反复冻融。
3.核酸提取过程中避免剧烈振荡，以免破坏磁珠结构。
4.使用时应注意个人防护，避免核酸污染。
综上，磁珠法核酸提取试剂盒为实验人员提供了一种高效、便捷、可靠的核酸提取方法。
Tiangen产品DP329磁珠法基因组DNA提取试剂盒
Tiangen产品DP329磁珠法基因组DNA提取试剂盒产品简介本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统，从血液、动物组织和干血点中分离纯化高质量基因组DNA。
独特包埋的磁珠，在一定条件下对核酸具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够达到快速分离纯化核酸的目的。
整个过程不涉及有机试剂，安全、便捷，提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠，尤其适合高通量工作站的自动化提取。
使用本试剂盒纯化的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
产品特点简单快速：1 h内即可获得超纯的基因组DNA。
广泛：适用于血液、动物组织和干血点等。
超纯：获得的DNA纯度高，可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
注意事项请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1．本产品适用于手工提取或工作站提取。
2．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3．若缓冲液GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
操作步骤使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请按照瓶上的标签。
1. 在96深孔板中加入20 μl Proteinase K。
注意：当样本数目比较大时，可以按每200 μl GB加入20 μl Proteinase K的比例预先混合，混合后每个样本用量为220 μl。
2. 加入样本：a. 血液样本：转移100 μl全血（若为冻存的请待其完全解冻后再进行）至上一步骤深孔板中。
b. 干血点：三片3×3 mm2的样品。
c. 组织样本：10 mg动物组织。
3. 每孔加入200 μl缓冲液GB，抽打混匀或振荡混匀。
注意：对于核酸含量较低的样本，建议使用Carrier RNA （Carrier RNA自备，目录号RT416-02）。
4. 消化材料：a. 血液样本：将离心管置于56℃，孵育10 m i n。
MycoSHENTEK 支原体 DNA 提取纯化试剂盒（2G）（磁珠法）说明书
MycoSHENTEK®支原体DNA提取纯化试剂盒（2G）（磁珠法）说明书货号：1509840在实验前请完整阅读本说明书，务必重视注意点和常见问题！版本：A/2仅供研究用湖州申科生物技术股份有限公司⏹试剂盒简介MycoSHENTEK®支原体DNA提取纯化试剂盒（2G）（磁珠法）用于提取纯化生物样品中的微量支原体DNA，包括主细胞库、工作细胞库、病毒种子批等，同时对高浓度细胞（不大于107个）、高浓度质粒、5%人血白蛋白等复杂基质生物制品均适用，与MycoSHENTEK®支原体检测试剂盒（2G）（PCR-荧光探针法）配套使用，参照EP2.6.7和JP XVIII支原体检测相关要求进行验证，检测限可达10CFU/mL。
对于样品体积小于400μL的样品，可以直接使用本试剂盒进行提取；对于超过此体积的，可通过离心将样品浓缩至终体积为约400μL，再使用本试剂盒进行支原体DNA 提取纯化。
本试剂盒可以手动操作，也可以通过rHCDpurify®实现样品的自动化处理。
⏹试剂盒组分表1.试剂盒组分序号组分产品号装量储存条件I 洗涤液A NND01515mL×1瓶室温结合液NND01710mL×1瓶室温洗脱液NND0195mL×1瓶室温稀释液NND0225mL×1瓶室温裂解液NND0285mL×1瓶室温II 样品处理液NND002 1.25mL×4管2~8℃磁珠NND033750μL×2管2~8℃5M NaCl NND040500μL×1管2~8℃III助沉剂ⅠNND00325μL×1管-18℃及以下助沉剂ⅡNND004500μL×1管-18℃及以下蛋白酶K NND023500μL×2管-18℃及以下⏹规格50Extractions。
⏹有效期规定储存条件下24个月，具体详见试剂盒标签。
磁珠法DNA提取纯化试剂盒检测通则-编制说明
国家标准《磁珠法DNA提取试剂盒检测通则》编制说明（一）工作简况，包括任务来源、协作单位、主要工作过程、国家标准主要起草人及其所做的工作等；1、任务来源本标准根据国标委公布的2018 年第四批国家标准计划项目（国标委综合83 号），本项目计划编号为20184465-T-469 ，名称为磁珠法DNA提取试剂盒检测通则。
本标准由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC 387）提出并归口。
本标准由联合起草。
2、目的和意义为适应高灵敏度、自动化操作的发展需求，磁珠法核酸提取由此诞生。
磁珠为拥有超顺磁性，表面经过了功能化修饰，在磁场中能够迅速聚集，离开磁场后又能够快速分散，能实现磁分离的均匀分散的一种磁性纳米级或者微米级球状或无定形颗粒物，其表面修饰有丰富的活性基团，可以和核酸分子在一定的缓冲条件下进行可逆地结合。
与传统的分离方法相比，磁珠用于生化样品复杂组分的分离，能够实现分离和富集的同时，有效地提高了分离速度和富集效率，同时也使分析检测的灵敏度大大提升。
磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高，浓度大，样本需求量低，不需要苯酚和氯仿等毒性大的有机溶剂，提取步骤简单，不需离心，不仅可以满足大量规模提取的要求，还能实现自动化操作，具有传统核酸提取无法比拟的优势，是目前核酸制备的一个重要方向。
磁珠法核酸提取是一项将生物分子技术与纳米材料科学相结合的新型技术，是DNA提取纯化领域的一项重大突破，能从血液，动、植物组织，食品，土壤，粪便，唾液等样本中分离纯化DNA，已广泛应用于食品，法医，医疗等领域。
现国内磁珠法核酸提取产品厂家层出不穷，如海狸医学、英芮诚、惠尔纳米、新百基等，产品五花八门，质量参差不齐，市场较混乱。
且随着二代测序的兴起对自动化的需求越来越高，磁珠法核酸提取领域并没有相应的标准，加上，如动植物核酸提取、回收和小量血液基因组提取试剂盒的要求也都差异很大。
为规范磁珠法核酸提取试剂盒的质量，迫切需要建立其质量表征指标，规范其技术要求和测试方法。
磁珠法试剂盒
产品名称
广州华峰生物科技有限公 司
RNA病毒核酸提取试剂盒（磁珠法）
磁珠法产品说明 广州华峰生物科技有限公
司病毒基因组RNA磁珠提取试剂 盒是利用超顺磁性核心与经表 面大量硅烷醇基团修饰的无机 氧化硅外壳组成的超顺磁性氧 化硅纳米微粒磁珠在两种不同 的溶液环境中特异吸附和解吸 附核酸的特性，针对性地选择
Dynabeads® mRNA Purification Kit
ห้องสมุดไป่ตู้
The Dynabeads® mRNA Purification Kit rapidly isolates the mRNA
This product is designed for rapid
Magnetic Bead-Based High Throughput Viral RNA Isolation for Molecular Diagnosis
Principle of Isolation
试剂盒组成 DP438-01 96 次(自动化)/ 48 次(手工) 缓冲液GB 30 ml
Magnetic mRNA Isolation Kit
The New England Biolabs Magnetic mRNA Isolation Kit is designed to isolate
Agilent life technology
mRNA Isolation with Dynabeads® in 15 minutes
Dynabeads® mRNA Purification Kit for mRNA Purification from Total RNA Preps Dynabeads® mRNA DIRECT™试剂盒 Dynabeads® mRNA DIRECT™试剂盒 Dynabeads® mRNA DIRECT™ Micro Kit
磁珠法dna提取纯化试剂盒检测通则
磁珠法dna提取纯化试剂盒检测通则
磁珠法DNA提取纯化试剂盒是一种常用的分子生物学实验试剂盒，用于从生物样本中提取和纯化DNA。
下面是该试剂盒的检测通则：
一、试剂盒概述
磁珠法DNA提取纯化试剂盒是一种高效、快速、简便的DNA提取和纯化试剂盒，适用于多种生物样本的DNA提取和纯化。
二、实验步骤
1. 样本裂解：将生物样本加入裂解缓冲液中，经过高温或化学处理使细胞壁破裂，释放DNA。
2. DNA结合：将磁珠加入裂解液中，磁珠表面的DNA结合试剂与DNA结合形成复合物。
3. 磁珠分离：将磁珠复合物通过磁场分离，将未结合的杂质分离出去。
4. 洗涤：用洗涤缓冲液洗涤磁珠复合物，去除杂质。
5. DNA洗脱：用低盐缓冲液或水洗脱DNA。
三、注意事项
1. 样本应该新鲜，保存在-80℃以下。
2. 样本裂解应该充分，避免DNA断裂。
3. 磁珠复合物分离时应该注意磁珠的数量和磁力的强度，避免DNA的损失。
4. 洗涤缓冲液的pH值应该控制在7.5-8.5之间，避免DNA的损失。
5. 洗脱液的温度应该控制在60℃以下，避免DNA的降解。
以上是磁珠法DNA提取纯化试剂盒的检测通则，实验者在使用该试剂盒时应该严格按照实验步骤和注意事项进行操作，以保证实验结果的准确性。
磁珠法病毒DNARNA提取试剂盒使用说明书原理及用途
磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒使用说明书原理及用途本试剂盒利用磁珠的特殊分离作用，采用独特的缓冲液系统，从组织研磨液、血清、血浆、淋巴液、无细胞体液、细胞培养上清液、尿液或各种病毒保存液中分离纯化高质量病毒DNA或RNA。
特殊包埋的磁珠，在一定条件下对核酸具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够达到快速分离纯化核酸的目的。
提取的病毒DNA/RNA得率高、纯度高、质量稳定可靠。
使用本试剂盒纯化的核酸可适用于各种常规操作，包括反转录、PCR、RT-PCR、荧光定量PCR、荧光定量RT-PCR等各种下游实验。
试剂盒组成储存条件1. 所有缓冲液在室在温条件下（15–25℃）保存。
2. 在原始状态下，Carrier RNA冻干粉可在室温条件下储存至有效期；已配好的工作液时必须按照“Carrier RNA工作液的配制”要求进行配制、储存、使用。
3. 有效期：1年样品处理1.组织样品处理：每份组织分别从三个不同的位置称取样品约1g，用手术剪剪碎混匀后取0.05 g于研磨器中研磨，加入1.5 mL生理盐水继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液用于检测。
2.排泄物样品处理：取约0.05g排泄物于1.5 mL灭菌离心管中，加入1mL生理盐水涡旋振荡，8000 rpm离心2 min，取上清液用于检测。
3.其它液体样品：直接取上清液用于检测注意事项（请务必在使用本试剂盒之前仔细阅读）1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的核酸片段较小且提取量降低。
2．若缓冲液RLCK中有沉淀，可于37℃水浴重新溶解，摇匀后使用。
3．需要用户自行准备的试剂：生理盐水、异丙醇、无水乙醇。
4．实验前应仔细阅读说明书，在提取核酸时提前配制缓冲液RLCK、Carrier RNA工作液、漂洗液PWI和漂洗液PWII工作液。
缓冲液的配制1．缓冲液RLCK使用前应加入5 mL异丙醇，并在瓶签上勾选已配制标识，以方便操作时确认。
磁珠法提取细菌质粒DNA的试剂盒及其提取方法[发明专利]
![磁珠法提取细菌质粒DNA的试剂盒及其提取方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/9a35772d640e52ea551810a6f524ccbff121caf8.png)
(10)申请公布号 CN 102242115 A(43)申请公布日 2011.11.16C N 102242115 A*CN102242115A*(21)申请号 201110204053.1(22)申请日 2011.07.21C12N 15/10(2006.01)(71)申请人河南惠尔纳米科技有限公司地址450001 河南省郑州市高新区长椿路11号国家大学科技(72)发明人王平康 杜德光 宋昕 孙荣青李祺 曹露聪(74)专利代理机构洛阳市凯旋专利事务所41112代理人陆君(54)发明名称磁珠法提取细菌质粒DNA 的试剂盒及其提取方法(57)摘要本发明公开一种磁珠法提取细菌质粒DNA 的试剂盒及其提取方法，该试剂盒包括菌体重悬液、裂解液、中和液、磁珠结合液、洗涤液和洗脱液六种组分，试剂盒提取方法包括以下步骤：菌体重悬、裂解、中和、磁珠结合、洗涤、洗脱。
本发明提取的质粒DNA 纯度高，片段完整，提取过程方便快捷，高效安全。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 4 页 附图 1 页1.一种磁珠法提取细菌质粒DNA的试剂盒，其特征是：其包括菌体重悬液、裂解液、中和液、磁珠结合液、洗涤液和洗脱液六种组分，各组分的内容如下：菌体重悬液：40～60mmol/L葡萄糖，PH7.6～8.4、20～30mmol/L Tris，PH7.6～8.4、5～15mmol/L EDTA，95～115℃灭菌10～30min，2～4℃保存；裂解液：0.15～0.3mol/L NaOH，质量浓度0.8～1.6% 的SDS；中和液：4～5mol/L乙酸钾，4.5～5.5mol/L冰乙酸；磁珠结合液：95～105ml异丙醇，3.5～4.5ml磁珠混悬液，二者混合配制成混悬液，其中磁珠混悬液由磁珠和水按照1:2体积比混合配置而成；洗涤液：由20～30mmol/L Tris，8～13mmol/L EDTA，140～160mmol/L Na盐和无水乙醇混合组成，其中Tris、EDTA、Na盐与无水乙醇的价体积比为30%：70%；洗脱液：6～10mmol/L Tris，PH8.0～8.5。
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MagDNA TM 磁珠细菌DNA提取试剂盒( 磁珠型)适合：G+,G-细菌，酵母，真菌，乳酸菌，霉菌等Cat. # 504001（50 preps）504002（100 preps）504003（200 preps）Note: for laboratory research use only.MagDNA TM 磁珠细菌DNA提取试剂盒( 磁珠型)适用范围：适用于手动快速提取各种细菌基因组DNA，无需蛋白酶消化，也适用于SPRI-TE；雅培m2000；MagNA Pure LC 2.0 System；BioRobot MDx Workstation；King Fisher（ml)；King Fisher 96 process，ABIgen Magstation等系列核酸提取仪，适合大规模提取！试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次100次200次Lysis Buffer A 室温25ml 50ml 100 ml Solution AB 室温12ml 22ml 44 ml Binding Buffer PQ 室温25ml 50ml 100 mlWash Buffer B 室温15ml 30ml 60ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇Wash Buffer C 室温10 ml 20ml 30ml第一次使用前按说明加指定量乙醇（3倍）Wash Buffer D 室温10 ml 20ml 30ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇（3倍）Elution Buffer E 室温10ml 15ml 25ml MagDNA磁珠室温 1.2ml 1.2ml X 2 1.2ml X 4本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.Lysis Buffer A或者W ash Buffer B低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3.加入MagDNA磁珠前，请漩涡混匀，以免影响浓度的均一性。
产品介绍：本试剂盒采用国内领先的专利技术合成的高度分散均一的纳米磁珠颗粒，表面修饰高效核酸结合基团，能最大限度的吸附DNA和RNA，博凌科为经过多次实验优化缓冲液体系，开发出一系列高效核酸纯化试剂盒。
独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于MagDNA® D-Beads DNA磁珠，再通过一系列快速的漂洗除杂的步骤，将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐高pH值的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从磁珠上洗脱。
适合多种核酸纯化仪器，可以实现核酸的自动化快速分离。
为您的科研工作带来方便！产品特点：1.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.多次漂洗确保高纯度，典型的产量200µl全血可提取出5-15µg，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达30 kb -50kb，可直接用于PCR、Southern-blot和各种酶切反应。
4.一般加入结合液和磁珠，由于DNA浓度较大会析出，会和磁珠缠绕在一起，形成一团黑色螺旋装物质，请缓慢颠倒，团状即是DNA和磁珠的复合体。
5.洗脱液Elution Buffer E不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。
也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于8.5，pH过低影响洗脱效率。
用水洗脱DNA应该保存在－20℃。
DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（30mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.5），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
注意事项：1.需要自备异丙醇和无水乙醇。
2.开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示：第一次使用前请先在W ash Buffer B/C/D中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!1.收集1毫升过夜培养细菌加入1.5毫升离心管。
可以观察菌液浓度，自行调整菌体多少！2.9,000rpm离心30秒，使细胞沉淀下来，弃上清，涡旋或轻弹打散细胞沉淀。
涡旋振荡直到细胞团充分重悬、分散。
细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，细胞未打散就加入裂解液，会导致细胞不能充分裂解，形成肉眼可见团块。
3.加入350μl Lysis Buffer A重悬的细胞，上下吹打裂解细胞，或者剧烈涡旋10秒帮助裂解细胞，70℃水浴10min。
4.可选步骤: 在裂解物中加入RNase A（10mg/ml）至终浓度10μg/ml，颠倒25次混匀，37℃温育15分钟去除残留RNA，然后冷却回室温。
5.加入冰冷的150μl Solution AB后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀25秒。
混匀后可能见到一些小的蛋白团块。
6.12，000 rpm(可根据需要调整加大离心力)离心5分钟。
这时候应该可以见到管底暗褐色或是白色的块状沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
7.小心吸取上清（大约400μl）到一个新的1.5ml离心管中。
吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。
如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2分钟后取上清。
8.加入等体积的室温Binding Buffer PQ 400μl和20μl MagDNA磁珠，立刻上下颠倒20次充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，也可能会形成一团或是类似双螺旋的丝状物质，请不要吸走黑色团块。
上述步骤中充分混匀非常重要，混匀不充分严重降低产量，必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。
9.将离心管放到磁性分离架上静止1-2min，直到溶液变澄清，小心的吸掉液体，不要吸到磁珠。
10.取下离心管，加入500μl杂质去除缓冲液Wash Buffer B （请先检查是否已加入无水乙醇!），颠倒混匀，将离心管放到磁性分离架上静止1-2min，直到溶液变澄清，小心的吸掉液体。
11.加入600μl漂洗液Wash Buffer C （请先检查是否已加入无水乙醇!），颠倒混匀，将离心管放到磁性分离架上静止1-2min，直到溶液变澄清，小心的吸掉液体，弃掉废液。
12.加入500μl漂洗液Wash Buffer D （请先检查是否已加入无水乙醇!），颠倒混匀，将离心管放到磁性分离架上静止1-2min，直到溶液变澄清，小心的吸掉液体，弃掉废液。
（尽可能的吸掉残余液体，以免影响下游实验）13.取下离心管，将其放置在37-65℃的烘箱种晾干残余乙醇。
（也可用吹风机吹2-3min即可，不要太干，以免DNA难以溶解）14.加入50-100μl洗脱缓冲液Elution Buffer E，轻轻弹动管壁，将磁珠完全打散分散在洗脱缓冲液中，室温放置1-2min。
（洗脱缓冲液在65-70℃水浴中预热效果更好，如果要得到更高浓度的DNA可以减少洗脱体积，也可分两次洗脱）15.将离心管放到磁性分离架上静止1-2min，直到溶液变澄清，小心的转移溶液到一新的离心管，不要吸到磁珠，如果吸到磁珠可重新放置在磁力架上分离。
16.DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。
附：自动核酸提取仪操作：（以Thermo King Fisher 96 为例说明）1.用排枪小心吸取处理好的上清（步骤10中的大约400μl ）到King Fisher Plate A 板中，再加入等体积的Binding Buffer PQ （大约400μl ）和20μl MagDNA 磁珠，充分震动混匀。
也可直接处理，直接在核酸提取仪上消化。
2.并按表Table 96，用排枪添加其他试剂，启动King Fisher 96 ，完成设置，等待结果！Table96 （表96） A=King Fisher 96 DW Plate B=King Fisher 96 KF Plate3. 结束后取出板子，低温保存，检测纯度和浓度！4.如果要得到更多的产物，可再次洗脱！Plate Type Plate ContentReagent VolumeA 1 Sample ：步骤10中制备样品+Binding Buffer PQ 400-1000μlA 2 Wash BufferB 500μl A 3 Wash BufferC 600μl A 4 Elution BufferD 500μl B 5 Elution BufferE 50-100μl A6Tip Loading Plate--问题与解决方法问题评论与建议DNA产量低*使用了不恰当的裂解液，造成裂解不完全-建议：处理材料不要过量。
*加入蛋白沉淀液后没有充分混匀，DNA和蛋白质沉淀不能分离开，离心时丢失-建议：参见步骤5保证充分混匀。
* DNA沉淀在洗涤的时候丢失了-建议：异丙醇沉淀后用乙醇洗涤的过程中，倒弃上清的时候要格外小心，不要把DNA沉淀也倒掉了。
A260/A280>1.9 * RNA酶处理时间不够造成RNA污染-建议：可以加大RNA酶用量或者处理时间延长到1小时。
* DNA剪切断了-建议：严格按照操作步骤，动作不可以太剧烈。
A260/A280 <1.6 *蛋白质残留高-建议：保证重复的裂解液用量和时间；*测定吸光值时用水稀释DNA 会降低A260/A280-建议：使用TE 缓冲液来稀释DNA，保证pH值大于8.0。
* DNA没有完全溶解-建议：可在65℃温育帮助重新溶解（不要超过一小时）然后室温或者4℃放置过夜，期间可以颠倒轻弹帮助溶解。
问题评论与建议变色的DNA *如果异丙醇沉淀后没有迅速进行70％乙醇漂洗的步骤，有的组织如肝脏提取出的DNA可能会变色-建议：异丙醇沉淀离心后，马上进行70％乙醇清洗的步骤。
DNA长度小于20kb *样品太旧或者不正确的存放，反复冻融等，造成DNA降解-建议：选用新鲜的样品。
*操作不当，造成对基因组DNA的剪切-建议：混匀轻柔，不可以用手剧烈振荡离心管，选用大口径的枪头转移或者混匀DNA。
DNA沉淀难以重新溶解水化*晾干DNA沉淀时过度了-建议：晾干时密切观察，不要干燥过头，注意应该观察管底的DNA沉淀，有时候管壁上的残留乙醇已经挥发，但留下一些水分还没有干，只要管底DNA干了就可以加入DNA 溶解液。
可在65℃温育帮助重新溶解（不要超过一小时）然后室温或者4℃放置过夜，期间可以颠倒轻弹帮助溶解。
下游酶切切不开或者PCR反应受抑制* DNA未干燥完全，残留乙醇太多-建议：敞开离心管口，在65℃温育几分钟，让乙醇挥发。