药物分析第四章 药物定量分析与分析方法验证
第四章 药物定量分析与分析方法验证
1、含卤素有机药物
含卤素有机药物是指分子结构中所含卤素直接与芳环
如果测得理论板数低于规定的最小理论板数， 应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色 谱柱填充的优劣等），使理论板数达到要求。
(2)分离度(R)
在定量分析时，要求定量峰与其他峰 或内标峰之间有较好的分离度。除另有规定 外，分离度应大于1.5。
分离度（R）的计算公式见下式：
R 2 t R2 t R1
含量（CX）= f
AX AS / CS
式中，AX为供试品峰面积或峰高；CX为供
试品的浓度 。
丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品 对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成 每lmL中约含1mg的溶液。精密量取该溶液 和内标溶液（1．6mg/ml苯丙酸诺龙甲醇溶 液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录
例
取盐酸麻黄碱0.1532g，精密称定， 加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液 2ml与结晶紫指示液1滴，用HClO4滴 定至绿色，用去0.1022mol/L的高氯 酸滴定液7.50m1，空白试验消耗高氯 酸滴定液0.08ml。已知每1ml高氯酸 滴定液（0.1mol/L）当于20.17mg的 C10H15ON·HCl。试计算盐酸麻黄碱 的百分含量？（99.80％）
1.分离原理
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
吸附色谱
根据填充剂吸附活性 对样品的吸收系数不 同而分离
充填剂：硅胶
分配色谱
根据固定相与流动相的极性不同而分为 正相分配色谱和反相分配色谱 两者的区别如下图所示：
固定相
流动相
正相分配
极性
药物分析课件第4章药物定量分析与分析方法验证
[B型题]
HPLC。
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；
（一）HPLC法
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2
2. 系统性试验 于1.5
分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大
拖尾因子：T = W /2d 应在0.9 ～
1. 原料药 可用已知纯度对照品或样品进行测定；或与已建准 确
度的另一方法测定的结果进行比较。 2. 制剂 要考察辅料对回收率的影响。采用在空白辅料中加入 原
料对照品的方法作回收率试验，然后计算RSD。 具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3, 共9个数据来评价
回收率的RSD＜2%；用UV和HPLC发时，一般
三．含量测定 常用的方法对照品比较
法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) ×Cr
Ch.P收载地高辛片、利血平片、洋地黄毒苷片。
二．荧光分析仪 有二个单
色光器—激发单色光器与
发射单色光
器；且激发光源、样品池和检测器成直 角。
三、色谱分析法
按分离原理分为：吸附；分配；离子交换；排阻色 谱
方法分类
2. 用硫酸水解后测定法 例如：硬脂酸镁的含量测定
Mg(C17H35COO)2 + H2SO4
H2SO4 + 2NaOH
MgSO4 + 2C17H35COOH Na2SO4 + 2H2O
（三）经氧化还原后测定法
COOH
I
I
药物分析课件 第四章 药物定量分析与分析方法验证_OK
③要有防爆措施 ④氧气要充足，确保燃烧完全，产物不能有黑色
炭化物 ⑤燃烧产生的烟雾要被完全吸收
充分振摇和放置都是为了保证吸收完全 例：碘产生紫色烟雾；氯、氟产生白色烟雾，烟
雾颜色完全消失后，即表示吸收完全 ⑥测定含氟有机化合物时要用石英燃烧瓶
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4、应用
含卤素、硫、磷、氟及硒等有机药物的鉴别、杂 质的检查及含量测定
100%
注射剂：标示量％＝
V0
V T 标示量
100%
V VO
T F 标示量
100%
VO : 量取注射剂的体积， ml
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(2)间接滴定法 1）生成物滴定法
供试品＋试剂 A 化合物 B
化合物 B＋滴定液 C 化合物 D
计量滴定液消耗的量，计算供试品的含量 计算同直接滴定法
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2）回滴定法（剩余滴定法） 原理：先在待测样品溶液中加定量、过量的滴定
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（一）湿法破坏
（1） 硝酸-高氯酸法 适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有
机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一 般呈高价态。
本法不能用于含氮杂环药物的破坏
干法灼烧法 11
（2） 硝酸-硫酸法 适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的
无机金属离子均为高价态。 不能用于含碱土金属有机药物的破坏
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氧瓶燃烧
药物分析-药物定量分析与方法验证
特点：
仪器简单－滴定管、锥形瓶等玻璃仪器。 操作方便－通过观察溶液颜色变化确定滴
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测 定 方 法 ： 取 本 品 约 0.1g ， 精 密 称 定 ， 加 乙 醇 5ml溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流 15min，放冷至室温，加水20ml与硝酸5ml，精 密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加邻苯二 甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁 胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银 滴 定 液 (0.1mol/L) 相 当 于 6.216mg 的 三 氯 叔 丁 醇 （C4H7Cl3O·1/2H2O）。
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（1） 碱性还原后测定
例 泛影酸的测定 ChP (2000)
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶 液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷 凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗 涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋 酸 5ml 与 曙 红 钠 指 示 液 5 滴 ， 用 硝 酸 银 滴 定 液 (0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L) 相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
富马酸亚铁 C4H2FeO4的含量测定
原理
d H2SO4
O
HC C O
C CH Oˉ
+
Fe2+
富马酸亚铁
Oˉ
富马酸
Fe2+ + Ce4+
滴定 Ce3+ + Fe3+
邻二氮菲指示剂
N
N
红色
Fe2+ + Ce4+
《药物分析》复习题带答案
药物分析试题及答案第四章药物定量分析与分析方法验证一、选择题1．氧瓶燃烧法测定盐酸胺碘酮含量，其吸收液应选( B )(A)H2O2+水的混合液(B)NaOH+水的混合液 (C)NaOH+ H2O2混合液(D)NaOH+HCl混合液 (E)水2．用氧瓶燃烧法破坏有机药物，燃烧瓶的塞底部熔封的是( D )(A)铁丝 (B)铜丝 (C)银丝 (D)铂丝 (E)以上均不对3．测定血样时，首先应去除蛋白质，其中不正确的是去除蛋白质的方法是( B )(A)加入与水相互溶的有机溶剂 (B)加入与水不相互溶的有机溶剂(C)加入中性盐 (D)加入强酸 (E)加入含锌盐及铜盐的沉淀剂4．氧瓶燃烧法破坏有机含溴/碘化物时，吸收液中加入( A )可将Br2或I2还原成离子。
(A)硫酸肼 (B)过氧化氢 (C)硫代硫酸钠 (D)硫酸氢钠5．准确度表示测量值与真值的差异，常用( B )反映。
(A)RSD (B)回收率 (C)标准对照液 (D)空白实验6．常用的蛋白沉淀剂为( A )(A)三氯醋酸 (B)β-萘酚 (C)HCl (D)HClO4二、填空题1．破坏有机药物进行成分分析，可采用_干_法、_温_法和_氧瓶燃烧_法。
三、是非题(√)1．准确度通常也可采用回收率来表示。
(√)2．在测定血样中的药物时，首先应去除蛋白，去除蛋白的方法之一是加入与水相混溶的有机溶剂。
(√)3．提取生物样品，pH的影响在溶剂提取中较重要，生物样品一般在碱性条件下提取。
(×)4．用氧瓶燃烧法测定盐酸胺碘酮含量吸收液应选水四、简答题1．在测定血样时，首先应去除蛋白质，去除蛋白有哪几种方法？答：(1)加入与水相混溶的有机溶剂；(2)加入中性盐；(3)加入强酸；(4)加入含锌盐及铜盐的沉淀剂；(5)酶解法。
2． 在测定血样时，首先应去除蛋白质，加入水相混溶的有机溶剂可以将蛋白去除，此法的机理是什么？答：加入与水相混溶的有机溶剂，可使蛋白质的分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚，使与蛋白质结合的药物释放出来。
药物分析第四章定量分析与分析方法验证
标准偏差
三、专属性 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等） 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在 采用的方法能准确测定出被物的特性。 下，采用的方法能准确测定出被物的特性。 四、检测限（LOD） 检测限（ ） 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 五、定量限（LOQ） 定量限（ ） 指样品中被测物能被定量测定的最低量， 指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果具有 一定的准确度和精密度。 一定的准确度和精密度。 六、线性 系指在设计的范围内， 系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接 呈正比关系的程度，相关系数R-->1 ,用软件可得回归方程 用软件可得回归方程. 呈正比关系的程度，相关系数 用软件可得回归方程
VT 含量% = × 100% W
T—滴定度 滴定度;V—消耗滴定液体积 消耗滴定液体积;W—供试品取量 滴定度 消耗滴定液体积 供试品取量 校正因子F: 校正因子 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时,要校正 要校正: 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时 要校正 实际摩尔浓度 F= 规定摩尔浓度 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度,而是 值 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度 而是F值. 而是 实际滴定度:T’=TF 实际滴定度
二、光谱分析法 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射， 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射，利用 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 1、紫外-可见分光光度法（200nm—760nm) 、紫外 可见分光光度法 可见分光光度法（ (1)朗伯 比耳定律 朗伯-比耳定律 朗伯 A=ELC A-吸光度；L-液层厚度；C-溶液浓度；E-吸收系数 吸光度； 液层厚度 液层厚度； 溶液浓度 溶液浓度； 吸收系数 吸光度 （2）百分吸收系数 ）百分吸收系数E 1% 溶液浓度为1%（ 溶液浓度为 （W/V）厚度为 ）厚度为1cm的吸收度 E1cm 的吸收度 A （3）吸收系数法测含量 ） ×D 1% E1cm 含量%= ×100% W × l ×100 A-供试品吸光度；D-供试品稀释倍数； 供试品吸光度； 供试品稀释倍数 供试品稀释倍数； 供试品吸光度 W-供试品取量（标示量）（ ）； 液层厚度（cm） 供试品取量（ ）（g）； 液层厚度（ ） 供试品取量 标示量）（ ）；L-液层厚度
药物的含量测定方法与验证
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(1) 直接滴定法
解：精密称取供试品Ws=0.4018g
NaOH实际浓度0.1002mol/L，则F=0.1002/0.1=1.002
消耗的NaOH滴定液体积：V样=22.20ml
V样 F T 100% 阿司匹林含量= WS
22.20 1.002 18.20 103 100% 0.4018
三 色谱分析法
1.特点与适用范围
特点： 高灵敏度：10-15～ 10-12g/ml， 高专属性： 高效能与高速度： 适用范围：广泛应用于药物制剂的含量测定，尤其 是复方制剂含量测定的首选方法。
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（二）荧光分析法
2.干扰及排除
(1)溶剂——空白试验 (2)溶液： 药物浓度不宜过高， 悬浮物——过滤， 溶氧——通惰性气体除去 溶液pH。 (3)玻璃仪器及测定池——高度洁净 (4) 温度：控制测定温度
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（二）荧光分析法
3.测定方法与含量计算
在一定实验条件时，在较稀浓度范围内药物的荧 光强度与溶液中该物质的浓度成正比。
1% 1cm
品相当于标示量的百分含量
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A D V 1% C X D V E1cm L 100 标示量% = 100% V B V B 0.521 200 100 2 1000 5 4211100 100% 99.0% 50 2
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（二）荧光分析法
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二、光谱分析法
（2）吸光度的准确度校正 60mg重铬酸钾用0.005mol/L的硫酸溶液稀释至 1000ml，在规定波长处测定并计算吸收系数，与 规定值比较。 规定值：235nm 123.0～126.0
257nm
313nm
142.8～146.2
chp4-药物的含量测定分析方法与验证
例3：用异烟肼比色法测定复方己酸孕酮注射液的含量。 当己酸孕酮对照品的浓度为50g/ml，按中国药典规定显 色后在380nm波长处测得吸收度为0.160。取标示量为
250mg/ml(己酸孕酮)的供试品2ml配成100ml溶液，再稀
释100倍后，按对照品显色法同样显色，测得吸收度为 0.154。求供试品中己酸孕酮的含量为标示量的多少？
C4H2FeO4
原理
HC O C C O CH Oˉ
+
Fe2+
Oˉ
Fe2+ + Ce4+
Ce3+ +
Fe3+
Fe2+ + e
N N 3 N N 3
Fe3+
红色
浅蓝色
例
硬脂酸镁的测定
ChP
取本品约0.1g，精密称定，精密加硫酸滴 定液(0.05mol/L) 50ml，煮沸至油滴澄清，继续 加热10min，放冷至室温，加甲基橙指示液1~2 滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml 硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于2.016mg的MgO。
例 泛影酸的测定
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶液30ml 与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷凝管用少量水 洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次15ml，洗 液与滤液合并，加冰醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用 硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液 (0.1mol/L)相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
(K=138 )
Fe (SCN) 2+ （淡棕红色）
反应摩尔比为1∶3
T
a b
b a
药物的含量测定方法与验证
医学ppt
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三、色谱分析法
（一）高效液相色谱法（HPLC） 4.一般要求 固定相：硅胶；化学键合硅胶；ODS C18、C8、氨基、
氰基； 流动相：甲醇；水；乙腈…（不同配比） 进样量：数ml； 室温：柱温； 检测器：紫外； 色谱图：20min； 系统适用性试验；
医学ppt
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三、色谱分析法
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例题：对乙酰氨基酚的含量测定方法为：
取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶
中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加
水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml
量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10m1，加水
至刻度，摇匀，照分光光度法，在257nm
的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收 系数( E11c%m )为715计算，即得。若样品称样 量为m(g)，测得的吸收度为A，则含量百分
1.9 7 2 2.0 0 0 0 .1010 非那 % 西丁 0 .1 1% 0 0 9.7 9% 2
0 .36 1 30 000
医学ppt
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例：精密称取青霉素钾供试品0.4021g，
按药典规定用剩余碱量法测定含量。先
加入氢氧化钠液(0.1mol/L)25.00ml，回
滴时消耗0.1015mol/l的盐酸液14.20ml，
率的计算式为： 医学ppt
25
A. A 250110% 0 715 5 m
B. A715250110% 0 5m
C. A715100250110% 0
5
m
D.
A 1 100% 715 m
A 100 1
E. 250 10% 0
7155
m 医学ppt
第四章 药物定量分析与分析方法验证(药物分析)学习参考资料
案例的实施和实验操作
案例选择：选择具有代表性的药物品种和相应的分析方法 实验设计：根据药物品种和分析方法，设计合理的实验方案 实验操作：按照实验设计进行实验，注意实验操作的规范性和准确性 数据分析：对实验数据进行处理和分析，评估方法的可行性和可靠性
案例的总结和经验教训
案例分析：介绍具体的药物定量分析与分 析方法验证案例，包括实验设计、操作过 程、结果分析和结论。
生产控制：药物定量分 析可确保生产过程中的 药物成分一致，提高产 品质量和生产效率。
药品质量控制：通过药 物定量分析，可对药品 进行质量控制，确保药 品的安全性和有效性。
临床应用：药物定量 分析有助于医生根据 患者的病情制定合理 的用药方案，提高治 疗效果。
药物分析方法验证的定义和目的
定义：药物分析方法验证 是通过一系列实验，证明 所建立的分析方法是否符 合药品质量控制的要求和 标准的过程。
解释
实验设计的目的和原则
目的：确保药物分析方法的准确性和可靠性 原则：对照原则、重复原则、随机原则、均衡原则
实验操作的流程和注意事项
实验前准备：确保实验室环境、 仪器和试剂符合要求，制定详 细的实验计划和操作步骤。
样品处理：根据实验需要，对 药物样品进行适当的处理，如 溶解、稀释、离心等。
仪器操作：按照仪器说明书进 行操作，确保仪器处于正常状 态，并记录仪器使用情况。
注意事项：确保 实验操作规范， 避免误差，保证 实验结果的准确 性和可靠性
实验数据分析和处理的方法
实验数据的收 集和整理：确 保数据的准确
性和完整性
数据分析方法 的选择：根据 实验目的和数 据类型选择合
适的方法
数据处理流程： 对数据进行预 处理、统计分 析和可视化处
(整理)药分习题4,18,5
第四章药物定量分析与分析方法验证一、最佳选择题（从A、B、C、D、E五个备选答案中选择一个最佳答案）1．用于原料药或成药中主药含量测定的分析方法认证不需要考虑（）A．定量限和检测限B．精密度C．选择性D．耐用性E．线性与范围2．回收率属于药物分析方法效能指标中的（）A．精密度B．准确度C．检测限D．定量限E．线性与范围3．用于原料药中杂质或成药中降解产物的定量测定的分析方法认证不需要考虑（）A．精密度B．准确度C．检测限D．选择性E．线性与范围4．欲确定两个分析方法测定结果的均值有无显著性差异，应选用下列哪一方法？（）A．F检验B．方差分析C．均匀设计D．t 检验E．正交试验5．选择性是指（）A．有其他组分共存时，该法对供试物准确而专属的测定能力B．表示工作环境对分析方法的影响C．有其他组分共存时，该法对供试物能准确测定的最低量D．不用空白试验可准确测得被测物的含量的能力E．不用标准对照可准确测得被测物含量的能力6．精密度是指（）A．测得的测量值与真值接近的程度B．测得的一组测量值彼此符合的程度C．表示该法测量的正确性D．在各种正常试验条件下，对同一样品分析所得结果的准确程度E．对供试物准确而专属的测定能力7．用分析天平称得某物0.2541 g，加水溶解并转移至25 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，该溶液每mL含溶质为（）A．0.010 g B．10.164 mg C．10.20 mg D．1.0164×10-2 g E．10.16 mg 8．检测限与定量限的区别在于（）A．定量限的最低测得浓度应符合精密度要求B．定量限的最低测得量应符合准确度要求C．检测限是以信噪比（2:1）来确定最低水平，而定量限是以信噪比（3:1）来确定最低水平D．定量限的最低测得浓度应符合一定的精密度和准确度要求E．检测限以ppm、ppb 表示，定量限以%表9．分子中的氮不能被凯氏定氮法完全转变为氨的化合物是（）A．脂肪族胺类B．芳香族胺类C．硝基化合物D．氨基酸类E．酰胺类10．氧瓶燃烧法破坏下列哪一药物时，应采用石英燃烧瓶（）A．含硫药物B．含氟药物C．含碘药物D．含溴药物E．含氯药物11．测定卤素原子与脂肪碳链相连的含卤素有机药物（如三氯叔丁醇）的含量时，通常选用的方法是（）A．碱性氧化后测定法B．直接溶解后测定法C．碱性还原后测定法D．直接回流后测定法E．原子吸收分光光度法12．在用H2SO4－K2SO4湿法破坏中，K2SO4的作用是（）A．催化剂B．氧化剂C．防止样品挥发D．还原剂E．提高H2SO4沸点，防止H2SO4分解13．凯氏定氮法的测定方法有三种，其中甲醛法的特点是（）A．直接用标准硫酸液滴定B．用硼酸作吸收液C．省去蒸馏D．样品用量少E．用硫酸作吸收液14．取含巴比妥的血浆样品5 mL，酸化后，精密加入25 mL氯仿萃取，过滤，取滤液4.0 mL，用0.45 mol/L NaOH 4.0 mL振摇提取，取此碱性水层于260 nm处测得吸收度A1为0.606，另取滤液 4.0mL，加1 mol/L硼酸-KCl缓冲液（pH约为10）4.0 mL振摇提取，取水层于260 nm处测得A2为0.229。
第四章 药物定量分析与分析方法验证
第四章药物定量分析与分析方法验证1、测定卤至少原子与脂肪碳链相连的含卤素有机药物（如二氯叔丁醇）的含量时，通常选用的方法是（A）A、直接回流后测定法B、直接溶解后测定法C、碱性还原后测定D、碱性氧化后测定法E、原子吸收分光光度法2、氧瓶燃烧法测定含氯有机药物时所用的吸收液多数为（C）A、H2O2溶液B、H2O2-NaOH溶液C、NaOH溶液D、硫酸肼饱和溶液E、NaOH—硫酸肼饱和溶液3、三氯叔丁醇的含量测定是含卤素药物测定卤素的代表性方法，这种方法是（B）A、酸水解法B、碱水解法C、碱氧化法D、碱熔法E、碱还原法4、氧瓶燃烧法测定，要求备有适用的（E）A、无灰滤纸，用以载样B、铂丝（钩或篮），固定样品或催化氧化C、硬质磨品具塞锥形瓶（用以贮氧、燃烧、吸收）及纯氧D、A+BE、A+B+C5、有机卤素药物中的卤原子为芳环的取化基时，为使其转变为无机卤素离子，应该采用的方法是（D）A、将药物溶于溶剂，加碱后，回流使其溶解B、将药物溶于碱溶液，加强还原剂，加热回流，使其裂解C、将药物溶于碱溶液，加强氧化剂，加热回流，使其裂解D、氧瓶燃烧法E、凯氏定氮法6、三氯叔丁醇采用银量法测定含量，其样品前处理方法为（A）A、碱性条件下回流B、碱性条件下还原C、酸性条件下还原D、酸性条件下水解E、以上都不是7、测定碘与苯相连的含卤素有机药物（如碘苯酯）含量时，通常选用方法是（C）A、直接回流后测定法B、直接溶解后测定法C、氧瓶燃烧后测定法D、碱性氧化后测定法E、原子吸收分光光度法8、测定氧与金属键相连的含金属有机药物（如富马酸亚铁）的含量时，通常选用方法是（A）A、直接测定法B、汞齐化测定法C、碱性、酸性还原后测定法D、碱性氧化后测定法E、原子吸收分光光度法9、在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度称为（D）A、精密度B、耐用性C、准确度D、线性E、范围10、用HPLC测物两组分的保留时间分别为8.0min和10.0min峰宽分别为2.8mm 和3.3mm，记录纸速为5.0mm/min，则两峰的分离度为（B）A、3.4B、3.3C、4.0D、1.7E、6.811、用直接滴定法测定阿司匹林原料药的含量，若供试品的称样质量为m(g)，氢氧化钠滴定液的浓度为c(mol/l)，消耗氢氧化钠滴定液体积为V(ml)，1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/l）相当于18.02mg的阿司匹林，则含量的计算公式（B）A、百分含量=318.0210100%0.1V Cm-⨯⨯⨯⨯⨯B、百分含量=318.0210100%V Cm-⨯⨯⨯⨯C、百分含量=18.02100%0.1V Cm⨯⨯⨯⨯D、百分含量=18.02100%0.1Vm⨯⨯⨯E、百分含量=18.02100% Vm⨯⨯12、准确率是指用某分析方法测定的结果与真实值或参与接近的程度，一般以（A）A、百分回收率表示B、偏差表示C、标准偏差表示D、相对标准偏差表示E、重现性表示13、回收率属于药物分析方法验证指标中的（B）A、精密度B、准确度C、检测限D、定量限E、线性与范围14、GC、HPLC法中的分离度（R）的计算公式为（E）A、R=2（t R1-t R2）/(W1-W2)B、R=2（t R1+t R2）/(W1-W2)C、R=2（t R1-t R2）/(W1+W2)D、R=（t R2+t R1）/2(W1-W2)E、R=2（t R2-t R1）/(W1+W2)15、用HPLC法测得某药保留时间为12.54min,半高峰宽3.0mm(纸速5mm/min)，计算理论板数为（E）A、116B、484C、2408D、2904E、2420二、配伍题A、NaIB、I2C、NaIOD、HIO3E、NaIO3+NaI1、采用氧瓶燃烧法测定含碘有机药物时，燃烧分解反应的主要产物是（B）2、采用氧瓶燃烧法测定含碘有机药物时，被氢氧化钠吸收液定量吸收的主要产物是（E）3、采用氧瓶燃烧法测定含碘有机药物时，滴定前处理中，加入溴—醋酸溶液的主要产生是（D）4、采用氧瓶燃烧法测定含碘有机药物时，滴定前加入碘化钾的主要产生是（B）5、采用氧瓶燃烧法测定含碘有机药物时，用硫代硫酸钠滴定的主要产生是（A）三、填空题1、在分析含金属与卤素药物的有机药物之前，需要进行适当的处理，这些药物的分析方法为(不经有机破坏的分析法)和(经有机破坏的分析法)两大类。
药物分析-第四章_药物的含量测定方法
W W 被测药物反应的质量 A
B 滴定液反应的质量
aM 被测药物的摩尔质量 A
bM B 滴定液的摩尔质量
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
• 滴定度的计算 用B滴定A
WA
滴定液
WB bMB
MA
a待测液
nB
a b
MA
浓度乘
mB
浓度
VB
b
M
A
体积=nB
mB
等于 1mL
计算有一个从质量到物质的量， 再到浓度再到滴定度的转变过程
供试液（X）： AX CX
—CCRA—XX ＝——CARR CX＝—C—RA·R——AX
要求：进样量准确、操作条件稳定
精品课件
3. HPLC测定法
• 示例一 炔诺酮的含量测定
• 照高效液相色谱法（附录VD测定）
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
T(mg/mL)maM b
• 示例一 计算Vc的滴定度T
• 碘量法测定Vc含量[M（C6H6O6）=176.13]，C（I2） =0.05mol/L
C 6H 8O 6I2 C 6H 6O 62H I
Tm
精品课件
精品课件
（二）容量分析法的有关计算
• 习题二 非那西丁含量测定
精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝 酸钠液（0.1010mol/L)滴定，用去20.00mL。每1mL亚硝酸 钠液（0.1mol/L)相当于17.92mg的C10H13O2N，请计算非那 西丁的含量。
精品课件
二、光谱分析法
mg转化单位
• 溶液 • 片剂
标 示 量 （ % ） =E A 1 1c % mD 1 0 V 0 V 10 00 B100% 标 示 量 （ % ） =E A 1 1 c % mD 1 0 W 0 W 10 00 B100%
药物的含量测定方法和验证1
一、容量分析法（滴定分析法）
含量的计算： （2）制剂标示量百分含量的计算
VTF 平均片重 标示量% W 100% 标示量
例：取司可巴比妥钠胶囊（标示量为0.1g）20粒， 除去胶囊后测得内容物总重为3.0780g，称取 0.1536g，按药典规定用溴量法测定。加入溴液 （0.1 mol/L） 25ml，剩余的溴液用硫代硫酸钠液 （0.1025mol/L）滴定到终点时，用去17.94ml。 空白试验用去硫代硫酸钠液25.00ml。按每1ml 溴 液（0.1mol/L）相当13.01mg的司可巴比妥钠，计 算该胶囊中按标示量表示的百分含量。
二、光谱分析法
（二）荧光分析法 某些物质受到光照射时，除吸收某种波长的光 之外还会发射出比原来所吸收的光的波长更长 的光；当激发光停止照射后，这种光线也随之 消失，这种光称为荧光。 从样品池出来的荧光是各方向发射的，在与激 发光光源排成直角的方向测荧光强度可以避免 透射的激发光的干扰。
三、色谱分析法
一、容量分析法（滴定分析法）
例题：滴定分析中，一般利用指示剂的突变来判断化 学计量点的到达，在指示剂变色时停止滴定，这一点 为： A.化学计量点 B.滴定分析 C.滴定等当点 D.滴定终点 E.滴定误差 答案：D
一、容量分析法（滴定分析法）
酸碱滴定 氧化还原滴定 滴定分析法 配位滴定 沉淀滴定 非水滴定
三、色谱分析法
例题：HPLC法与GC法用于药物复方制剂的 分析时，其系统适用性试验系指 A.测定拖尾因子 B.测定回收率 C.测定保留体积 D.测定分离度 E.测定柱的理论板数
药物定量分析与分析方法验证
②称样用材料及称样 A. 固体样品 无灰滤纸 B. 液体样品 纸袋 C. 软膏类样品：将适量样品置不含被测成 分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤 纸包裹
02:44:02
③氧气 ④吸收液 A. 作用：吸收液的作用是将样品经燃烧分 解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒 等，定量地吸收并转变为一定的便于测定 的价态
02:44:02
第二节 样品分析的前处理方法
一、不经有机破坏的前处理方法
(一) 水解法; (二) 还原法
二、经有机破坏的前处理方法
02:44:02
(一) 干法破坏; (二) 湿法破坏
进行药物定量分析之前，一般都 需要对样品进行前处理。
根据待测元素在药物分子中结合 的牢固程度，前处理方法各异。
在分析含金属或含卤素、氮、硫、 磷等元素的有机药物前，需进行适当 的样品前处理。
(flame photometry)
02:44:02
三、色谱分析法
特点与应用
(1) 高灵敏度:ng-µg/ml (2) 高专属性:选择性检测 (3) 高效能与高速度
复方制剂含量测定 的首选方法
分类
依据分离原理：
吸附;分配;离子交换; 分子排阻色谱法
依据分离方式：
纸色谱;薄层色谱;柱色谱; 气相色谱;高效液相色谱法
I
O
O
I
胆影酸
02:44:02
COOH
I
I
CH3CONH
CONHCH3
I
碘他拉酸
02:44:02
I
I
CH2CHCOOH
H2N
C2H5 I
碘番酸
02:44:02
I
CH3
CH (CH2)8 COOCH2CH3
药物定量分析与分析方法验证
方法验证的内容与步骤
准确度
通过对比已知浓度的样品测量值 与真实值，评估方法的准确度。
精密度
通过多次测量同一样品，评估方 法的重复性和再现性。
专属性
验证方法是否能够区分目标成分 与其他物质的干扰。
耐用性
验证方法在不同条件下的稳定性 及变化程度。
范围
验证方法适用的浓度范围。
线性
验证方法在一定浓度范围内的响 应是否呈线性关系。
响应值应无明显交叉干扰，能够准确区分目标物质与杂质。
专属性验证结果
根据响应值判断分析方法的专属性是否符合要求。
检测限与定量限验证
检测限与定量限验证方法
逐渐降低样品浓度，观察信号响应值的变化。
检测限与定量限验证要求
检测限和定量限应满足预设的灵敏度要求。
检测限与定量限验证结果
根据信号响应值判断分析方法的检测限与定 量限是否符合要求。
分析方法验证的意义
分析方法验证是确保药物定量分析结果准确可靠的重要手段。通过验证，可以证明所选用 的分析方法适用于该药物的分析，并确保其在各种条件下的稳定性和可靠性。
当前发展状况
随着科学技术的发展，药物定量分析的方法和技术也在不断进步。目前，高效液相色谱法 、气相色谱法和质谱法等先进技术已被广泛应用于药物定量分析中，大大提高了准物质进行多次测定，计算相对标准偏 差（RSD）。
精密度验证要求
RSD应符合预设的接受范围，通常不超过±5%。
精密度验证结果
根据RSD大小判断分析方法的精密度是否符 合要求。
专属性验证
专属性验证方法
采用具有相似结构或相同成分的物质进行测定，比较其响应值。
专属性验证要求
中药有效成分的定量分析
中药是我国传统医学的重要组成部分， 中药有效成分的定量分析对于确保中 药质量和临床疗效具有重要意义。
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一、概述
含金属与卤素药物须处理后方可进行测定。
处理方法视结合牢固程度而异。
卤素与芳环相环相连牢固；与脂肪族碳相连 结合不牢固。
含金属药物：金属不直接与碳相连为含金属 的有机药物，不牢固，一般直接测定；金属与碳 原子以共价键相连，结合比较牢固---为有机金 属药物，须适当处理。
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3
含卤素有机药物的分析
含卤素有机药物系指药物分子结构中 所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而 不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐。
结构特点：C—X
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（一）卤原子的活泼性
1.卤原子与碳原子直接相连 卤原子的活泼性和它直接
相连的烃基的结构有很大关系
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（1）乙烯型卤和芳卤 不活泼
CH2 CH X
冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水
洗涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰
醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液
(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)
相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
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（2）酸性还原后测定法
方法原理：在醋酸和锌粉存在的 条件下，有机药物（多用于含碘有机药 物），发生还原裂解反应，使有机结合 的卤素（碘）转变为无机卤素离子（碘 离子），采用银量法测定卤素离子的含 量。
I
I
COOH
I
I
NH C (CH2)4 C NH
I
O
O
I
胆影酸
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11
I
I
CH2CHCOOH
H2N
C2H5 I
碘番酸
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12
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I
CO
OCH2CH2N(C2H5)2 HCl
I O CH2CH2CH2CH3
盐酸胺碘酮
13
O
F
COOH
N HN
N C2H5
诺氟沙星
2、水解后测定法--- 有机卤素药物中卤 素与C结合不牢固药物。本类药物的分析 特点是通过测定含卤素的量来计算药物 的含量 。
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(1)卤素有机药物是指药物结构中所含卤素直 接与芳环或脂肪链相连者，而不包括某些药物 的卤酸盐或氢卤酸盐。
(2)共性：卤素原子与碳原子相连。
特性：卤素原子与药物结合的位置不同， 结合的牢固程度不同（卤素与芳环直接相连结 合牢固；卤素与脂肪链的碳原子直接相连结合 不牢固。）故在样品预处理时根据卤素与药物 结合状态的不同，采取不同的样品处理方法将 有机结合的卤素转变为无机的卤离子，再选用 适宜的分析方法。
碘结合较牢固，需在碱性溶液中加还原剂(锌 粉)回流，发生还原裂解反应，使有机结合的 卤素（碘）转变为无机卤素离子（碘离子）， 继而采用间接银量法或其他方法进行测定。 如泛影酸的测定。 适用范围：碘原子与苯环直接相连的药物。
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泛影酸测定原理：
I CH3COHN COOH
COOH I
原理 三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中加热
回流水解，氯元素全部转变成氯化钠，然后 用剩余滴定法，即于水解液中加硝酸酸化， 再加入定量过量的硝酸银滴定液，使Cl-生成 AgCl沉淀，过量的硝酸银，以Fe3+为指示剂，
用硫氰酸铵液回滴定。
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间接银量法：定量加入过量的AgNO3 ，以硫 氰酸铵为滴定剂，以硫酸铁铵为指示剂滴定过 量的硝酸银。
+ 11 NaOH + 3 Zn
NHCOCH3 I
回流
H2N
+ 3 NaOH + 2 CH3COONa +3 Na2ZnO2 + 3 H2O NH2
NaI + AgNO3
AgI + NaNO3
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泛影酸的测定 ChP (2000)
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶
液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，
CCl3 C(CH3 )2 OH 4NaOH 回流(CH3 )2 CO 3NaCl HCOONa 2H2O NaCl AgNO3 AgCl NaNO3
AgNO3 NH4SCN AgSCN NH4 NO3
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2、硫酸水解后测定法
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1、直接回流后测定法
方法原理（卤素）：将含卤素的有 机药物溶于适当溶剂中，加氢氧化钠或 硝酸银溶液加热回流使其水解，将有机 结合的卤素，经水解作用转变为无机卤 素离子，然后采用间接银量法测定。如 三氯叔丁醇的测定。
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例三氯叔丁醇的测定 ChP（2005）
（2）烯丙型卤和苄卤
X
活泼
CH2 CH CH2 X
CH2X
（3）卤代烷型 介于两者之间
CH2 CH (CH2)n X
n≥2
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2. 分子中所含卤原子的个数 分子中所含卤原子的个数越多，
活泼性越强，特别是同一碳上含多 个卤原子或一个苯环上含多个卤原 子时，活泼性增强更加明显。
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硬脂酸镁加定量过量硫酸使药物水 解，过量硫酸用氢氧化钠滴定。
Mg(C17 H35COO)2 H2 SO4 MgSO4 2C17 H35COOH H2 SO4 2NaOH Na2 SO4 2H2O
Байду номын сангаас
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三、经氧化还原后测定法
1、碱性还原后测定 方法原理；卤素结合于芳环上时，由于分子中
7
3. 卤素的种类 I＞Br＞Cl＞F
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常见的含卤素有机药物
三氯叔丁醇
CH3 CH3 C CCl3
OH
Cl3C
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CCl3
六氯对二甲苯
9
COOH
I
I
COOH
I
I
CH3CONH
NHCOCH3
I
CH3CONH
CONHCH3
I
泛影酸
碘他拉酸
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10
COOH
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14
O
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HO CH3
CH2OCOCH3
C CH3
O
O
CH3 C
O CH3
H
FH
F
醋酸氟轻松
15
Br
Br
Br
Br
CO
CO
HO SO3Na
OH SO3Na
磺溴酞钠
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二、不经有机破坏的分析方法
1、直接测定法---键结合不牢固的有机 金属药物，如富马酸亚铁中铁的测定。
药物分析
• Pharmaceutical Analysis
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第四章 药物定论量分析与分析方法验证
主 要 内 容
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一、 定量分析样品的前处理方法 二、 定量分析方法特点 三、药品质量标准分析方法验证 四、 生物样品分析方法的基本要求
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第一节 定量分析样品前处理方法