海洋食品中的组胺成分测定
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组胺含量超标是由于处置及温度控制不当引起的,而 且海洋环境中组胺过量会孳生细菌。这些细菌大都存在于 鱼类的腮部与消化系统。这些鱼类器官防止鱼类被细菌感 染,但鱼死后不再起作用。因此,组胺浓度测试时,大部 分采样采用鱼类内脏。
组胺超标后果相当严重。组胺中毒会引起身体一系列 反应,对海洋食品过敏,有微痛感,嘴灼痛或出疹子。一 旦摄取了大量组胺,会使胃的分泌物增加,气道狭窄,血 管系统膨胀。所以对于渔业、罐头工厂和鱼加工,需要严 格控制其产品的组胺含量。
美 国 FDA 规 定 了 组 胺 的 最 高 限 度 为 50ppm。 用 Quantech ™数字荧光光度计使用 OPT 进行荧光分析,可 以检测出 0.1ppm 的组胺,低于通常海洋食品中的 10ppm 组胺含量。根据 Ambrose 公布的荧光分析结果与氨基酸 分析相当。
AOAC 关 于 海 洋 食 品 中 组 胺 分 析 方 法 ( 方 法 号 977.13) 需 要 汞 灯 激 发, 并 在 350nm 处 使 用 窄 的 带 通 滤波器。OPT 在 444nm 处荧光强度最强。我们推荐使 用 备 有 NB360 和 SC415 发 射 滤 波 片 的 Wide Band 型 Quantech ™ 数字荧光光度计。
1.2 试剂 (a) 离子交换树脂 ----Bio-Rad AG/-X8 50----100 目。或
Dowex 1-X8 50—100 目,以 约 15ml 2M NaOH/g 树 脂 加 入烧杯,使其转变为 ----OH 形式,旋摇混合,静置 30min。 倒出液体并加碱重复操作。用水洗透树脂,糊状物倒进折 叠滤纸,再用水洗。每周制备新树脂并浸在水中保存。
在管 (a) 底塞上玻璃棉,填入足以形成 8cm 树脂床层 的糊状物,无论何时,都须使树脂层上保留水层。再生树脂, 不在填充柱内进行,需要时,可在烧杯里分批再生,每次 提取前,用约 10ml 水洗柱。
(b) 磷酸 ----1.19M。稀释 121.8ml、85% 的 H3PO4 至 1L。如用其他浓度磷酸,配 1L 1.19M 的 H3PO4 所需体 积 V=17493/( 密度 H3PO4×%H3PO4)。标定 ;吸取 5ml H3PO4,以酚酞为指示剂用 1.00M NaOH 滴定至终点。如 需要,可调整浓度。
2 试验过程 ( 使用前,以 HCl(1+3) 和水洗涤全部塑料及玻璃容器 )
2.1 标准曲线的绘制 吸取平行的各标准工作液 5ml 于 50ml 的玻璃或聚丙
烯锥形瓶中,各瓶加 10ml 0.1M 的 HCl 并混匀。加入 3ml 1M NaOH 并混匀 ;在 5min 内,加入 1ml OPT 溶液并立 即混合 ;准确于 4min 后,加入 3ml 1.19M H3PO4 并立即 混匀。每次加液后,至少在 OPT 反应期间 ( 顺序加入试 剂到一组锥型瓶里,可同时进行 6~10 个 OPT 反应 ),充
实验非常简单,需要使用已知浓度的组胺做标准曲 线,将待测样品通过离子交换树脂,混和物中的待测部分 与 OPT 在强酸中混合,生成成荧光产物。组胺含量通过 已知线性标准曲线确定。
海味中的组胺测定方法 来源 AOAC 官方方法 977.13(第 17 版)
1 仪器和试剂 1.1 仪器
(a) 色 谱 管 ----200×7mm( 内 径 ) 聚 丙 烯 管, 配 有 Kontes No.K-422,372Kel-F 卡套和约 45cm 聚四氟乙烯 管,以调节与柱相连的出口管高度,控制流速大于 3ml/ min。或用二通阀 ( 生物实验室产品 ) 代替管子。
新
应
海洋食品Biblioteka Baidu的组胺成分测定
用
New Application
美国与欧盟的管理机构已经针对罐装的海洋食品制订 了严格的组胺含量限制。在罐头工厂的生产过程期间和最 终产品中,会例行进行组胺检测。在鲭鱼、金枪鱼、马 哈鱼、竹荚鱼、沙丁鱼、琥珀鱼、鲍鱼体内检测到的组 胺,是由于某些特定鱼种因时间 / 温度处理不当而形成的。 所以组胺含量是海洋食品质量安全的重要指标。Thermo Scientific 的 Quantech ™ 数字荧光光度计利用荧光检测组 胺含量,是理想的检测方法。
New Application
校正 ) 对 μg 组胺 /5ml 试样作图。
新
分混匀是很重要。用 5ml 0.1M HCl 代替组胺溶液作为空 范围 ( 如仪器有此装置 ) 来估计稀释倍数。利用这些近似值,
应
白,在 1.5h 内,以水为参比记录工作标准液的荧光强度 (I), 用 0.1M HCl 制备洗脱液的适当稀释试样。按 C 进行。
用
用 350nm 吸收波长,和 444nm 发射波长,以 (I)( 经空白 2.3. 计算
(c) 邻 苯 二 甲 酸 二 碳 基 乙 醛 (OPT) 溶 液 ----0.1%。 100mg OPT 溶于 100ml、经玻璃容器蒸馏过的甲醇中, 装在棕色瓶中,于冰箱内贮存,每周新配。
(d) 组胺标准溶液 ---- 冰箱里贮存。(1) 贮备液 ----1mg/ ml。无碱性。准确称取约 169.1mg 组胺 · 2HCl(98%) 于 100ml 容量瓶中,用 0.1M HCl 溶解并稀释到刻度,每周 新 配。(2) 中 间 溶 液 ----10μg/ml。 吸 取 1ml 贮 备 液 放 进 100ml 容量瓶,用 0.1M HCl 稀释到刻度,每周新配。(3) 工 作 溶 液 ----0.5,1.0 和 1.5μg/5m1。 吸 取 1,2 和 3ml 中间溶液,分别于 100ml 容量瓶中,各用 0.1M HCl 稀释 至刻度,每天新配。
(b) 荧光计 ---- 带有在 350nm 激发光和在 444nm 测 量发射光的仪器。( 使用 Quantech Wide Band 数字滤光 片荧光分光光度计,配有 NB 360 Emission Filter 和 SC 415 Emission Filter)
(c) 重换移液管 ----1 和 5ml。
组胺超标后果相当严重。组胺中毒会引起身体一系列 反应,对海洋食品过敏,有微痛感,嘴灼痛或出疹子。一 旦摄取了大量组胺,会使胃的分泌物增加,气道狭窄,血 管系统膨胀。所以对于渔业、罐头工厂和鱼加工,需要严 格控制其产品的组胺含量。
美 国 FDA 规 定 了 组 胺 的 最 高 限 度 为 50ppm。 用 Quantech ™数字荧光光度计使用 OPT 进行荧光分析,可 以检测出 0.1ppm 的组胺,低于通常海洋食品中的 10ppm 组胺含量。根据 Ambrose 公布的荧光分析结果与氨基酸 分析相当。
AOAC 关 于 海 洋 食 品 中 组 胺 分 析 方 法 ( 方 法 号 977.13) 需 要 汞 灯 激 发, 并 在 350nm 处 使 用 窄 的 带 通 滤波器。OPT 在 444nm 处荧光强度最强。我们推荐使 用 备 有 NB360 和 SC415 发 射 滤 波 片 的 Wide Band 型 Quantech ™ 数字荧光光度计。
1.2 试剂 (a) 离子交换树脂 ----Bio-Rad AG/-X8 50----100 目。或
Dowex 1-X8 50—100 目,以 约 15ml 2M NaOH/g 树 脂 加 入烧杯,使其转变为 ----OH 形式,旋摇混合,静置 30min。 倒出液体并加碱重复操作。用水洗透树脂,糊状物倒进折 叠滤纸,再用水洗。每周制备新树脂并浸在水中保存。
在管 (a) 底塞上玻璃棉,填入足以形成 8cm 树脂床层 的糊状物,无论何时,都须使树脂层上保留水层。再生树脂, 不在填充柱内进行,需要时,可在烧杯里分批再生,每次 提取前,用约 10ml 水洗柱。
(b) 磷酸 ----1.19M。稀释 121.8ml、85% 的 H3PO4 至 1L。如用其他浓度磷酸,配 1L 1.19M 的 H3PO4 所需体 积 V=17493/( 密度 H3PO4×%H3PO4)。标定 ;吸取 5ml H3PO4,以酚酞为指示剂用 1.00M NaOH 滴定至终点。如 需要,可调整浓度。
2 试验过程 ( 使用前,以 HCl(1+3) 和水洗涤全部塑料及玻璃容器 )
2.1 标准曲线的绘制 吸取平行的各标准工作液 5ml 于 50ml 的玻璃或聚丙
烯锥形瓶中,各瓶加 10ml 0.1M 的 HCl 并混匀。加入 3ml 1M NaOH 并混匀 ;在 5min 内,加入 1ml OPT 溶液并立 即混合 ;准确于 4min 后,加入 3ml 1.19M H3PO4 并立即 混匀。每次加液后,至少在 OPT 反应期间 ( 顺序加入试 剂到一组锥型瓶里,可同时进行 6~10 个 OPT 反应 ),充
实验非常简单,需要使用已知浓度的组胺做标准曲 线,将待测样品通过离子交换树脂,混和物中的待测部分 与 OPT 在强酸中混合,生成成荧光产物。组胺含量通过 已知线性标准曲线确定。
海味中的组胺测定方法 来源 AOAC 官方方法 977.13(第 17 版)
1 仪器和试剂 1.1 仪器
(a) 色 谱 管 ----200×7mm( 内 径 ) 聚 丙 烯 管, 配 有 Kontes No.K-422,372Kel-F 卡套和约 45cm 聚四氟乙烯 管,以调节与柱相连的出口管高度,控制流速大于 3ml/ min。或用二通阀 ( 生物实验室产品 ) 代替管子。
新
应
海洋食品Biblioteka Baidu的组胺成分测定
用
New Application
美国与欧盟的管理机构已经针对罐装的海洋食品制订 了严格的组胺含量限制。在罐头工厂的生产过程期间和最 终产品中,会例行进行组胺检测。在鲭鱼、金枪鱼、马 哈鱼、竹荚鱼、沙丁鱼、琥珀鱼、鲍鱼体内检测到的组 胺,是由于某些特定鱼种因时间 / 温度处理不当而形成的。 所以组胺含量是海洋食品质量安全的重要指标。Thermo Scientific 的 Quantech ™ 数字荧光光度计利用荧光检测组 胺含量,是理想的检测方法。
New Application
校正 ) 对 μg 组胺 /5ml 试样作图。
新
分混匀是很重要。用 5ml 0.1M HCl 代替组胺溶液作为空 范围 ( 如仪器有此装置 ) 来估计稀释倍数。利用这些近似值,
应
白,在 1.5h 内,以水为参比记录工作标准液的荧光强度 (I), 用 0.1M HCl 制备洗脱液的适当稀释试样。按 C 进行。
用
用 350nm 吸收波长,和 444nm 发射波长,以 (I)( 经空白 2.3. 计算
(c) 邻 苯 二 甲 酸 二 碳 基 乙 醛 (OPT) 溶 液 ----0.1%。 100mg OPT 溶于 100ml、经玻璃容器蒸馏过的甲醇中, 装在棕色瓶中,于冰箱内贮存,每周新配。
(d) 组胺标准溶液 ---- 冰箱里贮存。(1) 贮备液 ----1mg/ ml。无碱性。准确称取约 169.1mg 组胺 · 2HCl(98%) 于 100ml 容量瓶中,用 0.1M HCl 溶解并稀释到刻度,每周 新 配。(2) 中 间 溶 液 ----10μg/ml。 吸 取 1ml 贮 备 液 放 进 100ml 容量瓶,用 0.1M HCl 稀释到刻度,每周新配。(3) 工 作 溶 液 ----0.5,1.0 和 1.5μg/5m1。 吸 取 1,2 和 3ml 中间溶液,分别于 100ml 容量瓶中,各用 0.1M HCl 稀释 至刻度,每天新配。
(b) 荧光计 ---- 带有在 350nm 激发光和在 444nm 测 量发射光的仪器。( 使用 Quantech Wide Band 数字滤光 片荧光分光光度计,配有 NB 360 Emission Filter 和 SC 415 Emission Filter)
(c) 重换移液管 ----1 和 5ml。