光合细菌的培养及应用
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光合细菌的培养及应用
摘要 S 综述了光合细菌的培养方法及其在水产养殖、废水处理、种植业、畜牧业、新能源和医药保健中的应用,并讨论了光合细菌的应用前景。
关键词光合细菌;培养;应用;
1 引言
光合细菌(photosynthetic bacteria,简称PSB)
是一群能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用有机物
作供氧体兼碳源,进行不放氧光合作用的细菌,广
泛分布于水田、湖沼、江河、海洋、活性污泥和土
壤中,依据《伯杰细菌鉴定手册》(第九版)可分
为 6 个类群,27 个属。不产氧光合作用的红螺菌目
分为紫细菌(purple bacteria)、绿细菌(Green
bacteria)和日光杆菌属(Heliobacteria)、红色杆菌
属(Erybrobacter)。其中紫细菌中包含有红螺菌科
(Rhodolspirillaceae)、着色菌科(Chromatiaceae)、
外硫红螺菌科(Eceothiorhodospiraceae),包含16属
49种。其中在生产上有意义的红螺菌科包括红螺菌
属、红假单胞菌属和红微菌属
[1]
。PSB 均为革兰氏
阴性细菌,一般为球型、卵形、杆形、弧形、螺旋
形、环形、半环形丝形,也可随培养条件和生长阶
段而改变,大部分单个存在。
PSB的一般菌体组成及营养成分见表1
[2]
.
表1 光合细菌菌体的组成与小球藻等比较
Tab. 1 Components comparison between
photosynthetic bacteria and Chlorella
P S B 含有较高的优良蛋白质,粗蛋白含量为
65.45%,含有17种氨基酸而且消化率较高;粗脂肪
约 7%;可溶性糖类约 20%;粗纤维约 3%
[1]
;维生
素 B12 含量是酵母的 200 倍、小球藻的 4 倍
[2]
,生
物素含量也比较丰富;菌体的脂类成份含有大量的
叶绿素、类胡萝卜素和辅酶Q(泛醌),迄今已从PSB中
分离出80种以上的类胡萝卜素。叶绿素和类胡萝卜
素对养殖生物的健康生长,增强对疾病的抵抗力有
很大的益处。辅酶Q
4
是与生命活动有重大关系的生
理活性物质,PSB 中的含量特高,是酵母的 13 倍。
以上特点决定了 PSB 可做为畜禽、鱼虾的饲料。但PSB中缺乏ω
3
系列20碳以上的高度不饱和脂肪酸,
单独作为仔鱼的初期饵料时,需与其它富含高度不
饱和脂肪酸的饵料同时使用。
2 光合细菌的培养
水产养殖市场对 P S B 活体菌种的需求缺口很
大,为了满足水产养殖对PSB活体菌种的需求,PSB
的生产方法有很多,但是到目前为止,还没有进行产
业化生产PSB的报道。冯云等
[3]
用50L的塑料桶来厌
氧培养 PSB,使培养密度达到 2.1× 10
9
个 /ml;杨
绍斌
[4]
在塑料大棚内建大小 2000~5000L 的水池使
其厌氧发酵富集扩大培养,培养液中含 PSB 活菌数
可达5×10
6
个/毫升;鄂春宇
[5]
用塑料薄膜袋培养
PSB,培养密度达到2.5~3×10
5
个/ml,12个月生产
50多吨,但是在PSB的密度检测时,很容易染菌。由
中科院开发的 PSB 大规模生产工艺,产品含菌量达
到5 × 10
10
个/毫升,保质期 3 个月以上,并可根
据客户要求,设计和建设不同规模的生产线
[6]
。
2.1 菌种
菌种可从采集的池塘底泥或海水中重复富集、分
离纯化获得.若用保存下来的菌种,在培养前必须提纯复
壮,才能有效地进行扩大培养。光合细菌的生产需要采
用优良菌种,要求菌种活性高,菌液中菌体分布均匀、
无下沉现象,目前养殖中使用的PSB多为红螺菌科和一
部分着色菌科的复合菌株
[7]
。
种类ω % ω/(μg.g-1)
粗蛋白粗脂肪可溶性糖粗纤维灰分 VB1 VB2 VB6 VB12 烟酸叶酸维生素光合细菌 65.15 7.18 20.31 2.78 4.28 12 50 5 21 125 30 65
小球藻 53.76 6.31 19.28 10.22 1.52 2.4 196 15 5.2 140 18 18-25
大豆 30.99 19.33 30.33 7.11 5.68 14.5 2.3 6.4 - 22 2.3 0.6
研究报告28
生命科学仪器 2007 第5卷/ 3月刊
研究报告
2.2 培养基及培养条件
PSB 培养中除碳、氮、磷等主要营养元素外,还
需要一定量的镁、钙、钠和有关的微量元素,将所需的
营养元素按一定的比例配成适于菌体生长繁殖的培养
基。本实验室采用酵母膏、蛋白胨培养基,基本配方为:
CaCL
2
0.3g,MgSO
4
·7H
2
O0.5g,酵母膏3g,蛋白胨
3g,蒸馏水1000ml,pH: 6.8. 如需制固体培养基再加2%
琼脂。培养温度:25℃~30℃最佳,光照强度:2000LX~
5000LX,PH:7.5~8.5最佳。
2.3 光合细菌的培养
把菌种接种到灭好菌的培养基中,在三角瓶中
进行二级培养,每天摇晃几次。把 40L 的反应器中
加满自来水,放入通气管,盖上保鲜膜一起用次氯
酸杀菌消毒24小时,用硫代硫酸钠(1L次氯酸需要
150g硫代硫酸钠)来中和。以15%的接种量接入反
应器中,用泵通气培养,用分光光度计跟踪测量菌
液的密度,得到菌液的密度较高,而且反应器还可
以进一步放大。
3 光合细菌的应用
3.1 光合细菌在水产养殖中的应用
测定了池塘水中溶氧、pH、氨氮、亚硝酸盐氮
和COD 的变化情况,池水中的pH、溶氧不受光合细
菌的影响;对水中氨氮、亚硝态氮有降低作用,降
级率分别为 45%-52%、33%-43%,对有机物(COD)