丹皮酚含量测定综述

丹皮酚含量测定综述

罗永富（学号：0906503201）

广东药学院09中药分析与鉴定2班

摘要：就各种丹皮酚测定方法研究进展进行了综述。牡丹皮中含有的丹皮酚具有镇痛、消炎、抗菌等作用，对现代医药研究与应用有着重大意义。随着中药现代化的进展,对中药有效成分的分离提取、含量测定已成为新的热点课题。

关键词：牡丹丹皮酚含量测定

牡丹皮为毛茛科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr1)的干燥根皮, 有清热凉血、活血化瘀的作用。用于湿热发斑、吐血衄血、夜热早凉,经闭痛经、痈肿疮毒、跌打伤痛等。,其主要有效成分为丹皮酚。

丹皮酚(Paeonal)又名牡丹酚、芍药酚,化学名为“22羟基42甲氧基苯乙酮”

[1]，为白色或微黄色有光泽的针状结晶，无色针状结晶（乙醇），熔点49℃-51℃，气味特殊，味微辣，易溶于乙醇和甲醇中，溶于乙醚、丙酮、苯、氯仿及二硫化碳中，稍溶于水，在热水中溶解，不溶于冷水，能随水蒸汽挥发。丹皮酚可随水蒸气蒸馏，且在紫外光区有强烈吸收，在274nm波长处E（1% 1cm）为862，利用此性质可用紫外分光光度计进行测定。

现代药理研究证明丹皮酚具有抗炎、镇静、降压、抗氧化、保护心肌细胞及抑制血小板凝集等作用。丹皮酚的含量高低是作为衡量牡丹皮品质优劣的一种重要指标，其含量的高低直接影响药品的疗效。

目前，丹皮酚的含量测定有高效液相色谱法（HPLC）、分光光度法、气相色谱法（GC）、薄层扫描法、胶束毛细管电泳法、化学发光法等。以下是对上述方法的简要介绍。

1. 高效液相色谱法（HPLC）

高效液相色谱法具有分离能力高、灵敏度高、应用广泛的特点。杨洁等[2]

采用HPLC法,结果显示丹皮酚在0. 01～0. 55μg/ml范围内线性关系良好( r = 0. 999 6) ,平均回收率99. 87% , RSD 为1. 46%。该法简便、快速,重现性好,精度高,适用于牡丹皮中丹皮酚的定量分析。实验中试用不同体系和比例的流动相,如甲醇- 磷酸,甲醇2醋酸2水,结果以甲醇2醋酸2水溶液为流动相时丹皮酚的分离效果最好。

而反相高效液相色谱（RP-HPLC）法对于含有多组分混合物的中药及其制剂的分析测定更具特色。梁贵键[3]等采用反相高效液相色潽法，测 510～50μg/ ml 范围内,峰面积(A) 与浓度(C) 呈良好的线性关系,相关系数r = 019997 ,平均回收率为97.86%，RSD为0.64%。

2.分光光度法

2.1紫外分光光度法（GV）

应用分光光度法测定丹皮酚含量的技术较为成熟，按具体不同原理又可分为紫外分光光度法、双波长示差光谱法、一阶导数分光光度法、正交函数分光光度法等。

其中紫外分光光度法具有操作简单、费用较低等优点。但由于该法基本上没有分离能力，样品处理要求严格，故常被用于要求不很严格的一般测定、中药材炮制方法与处理条件比较、制剂工艺选择等方面[4]。

2.2双波长示差光谱法

该法可消除干扰组分的影响，方法便捷，结果准确，但丹皮酚在碱性溶液中稳定性较差，应在加碱后30min内完成测定，以免造成误差。

2.3一阶导数分光光度法

此法可不经分离对丹皮酚进行含量测定，且结果准确。董善士[5]等以此法分析肺露,由于其他药材蒸提液在紫外区对丹皮酚有干扰,在一阶导数光谱图上,碱性介质中选择测定波长为328 、368 、372 ,可完全消除干扰。

2.4正交函数分光光度法

王焕云等[6]用水蒸气蒸馏法提取麦味地黄丸得供试品溶液，以水为空白，在220~350nm 波长范围内分别对丹皮酚对照品、供试品和阴性对照品溶液进行扫描，得吸收光谱。根据光谱信息，选用二次正交多项式系数(P2)作为定量参数，以消除阴性对照的干扰，在263.8~283.8nm 波长之间每间隔测定各个波长的吸收度值，计算结果P2与质量浓度C呈良好的线性关系，平均回收率为99.0%。

3. 气相色谱法（GC）

GC 自动化操作,灵敏度高,重现性好,但对前处理要求高,且设备昂贵,受经济水平制约,广泛应用受到一定限制。其中闪蒸-GC 不需前处理,分析速度快,避免成分破坏,受试样品用量少,对含易挥发成分的贵重药材分析可降低成本,有独特优势[7]。

4. 薄层扫描法

薄层扫描法测定丹皮中丹皮酚的含量，方法简便易行，测定结果稳定，重复性好，是一种准确可靠的含量铡定方法。尤其是在中药复方制剂中．此方法对丹皮酚的测定可较好地排除其他成分的干扰[8]。

5. 胶束毛细管电泳法

毛细管电泳电化学检测的装置简便、价廉、灵敏度高,其中非接触式检测（电极不与溶液直接接触)避免了分离电场对检测的干扰和电极中毒,可广泛用于荷电成分的检测[9]。

6. 化学发光法

选用鲁米诺一过氧化氢(H

2O

2

)一钻离子（Co

2

+）为空白发光体系, 利用H

2

O

2

对

丹皮酚结构中酚轻基的氧化, 而消耗发光体系中的H

2O

2

, 致使原空白发光体系发

光强度降低, 谓之淬灭, 这种淬灭程度的强弱在一定范围内与丹皮酚的浓度成线性关系, 进而实现对丹皮酚的高灵敏测定[10]。

结语

综合以上几种方法来看，毛细管电泳法具有分析速度快,分离效率高,流动相和进样量少,成本低、适用范围广的优势。从HPLC发展来看,国内今后将发展适用面广的高效毛细管电泳,尤其胶束电泳色谱方法的引入进一步拓展了HPLC应用范围。HPLC和全自动的TLC将是今后中药领域分析手段的主流。

参考文献

【1】龚明贵,张巧明,秦翠丽,原小秋.牡丹中丹皮酚含量及其提取检测方法研究.时珍国医国药.2007,18(3):709-711

【2】杨洁,贾国强,刘萍,等. HPLC法测定不同产地牡丹皮中丹皮酚的含量[ J ].科学技术与工程, 2006, 6 (3) : 299.

【3】梁贵键,朱莉,张华,张蔚君,等.RP-HPLC法测定牡丹皮和杞菊地黄丸中丹皮酚的含量.空军总医院学报.2005,21(4):206

【4】周宏兵.中药及其制剂中丹皮酚的含量测定.广东药学院学报，2000,16（2）;218-221

【5】董善士,李菁,王旌,等.一阶导数光谱测肺露中丹皮酚含量[J].中成

药,1991 ,13 (3) :101

【6】王焕云，温爱萍，乔俊缠，等.正交函数分光光度法测定麦味地黄丸中丹皮酚的含量[J].中国药业，1999,8(12):31-32

【7】吴美强.丹皮酚测定方法研究概述.海峡药学.2010.2(22):59-60

从丹皮中提取丹皮酚[J] 精细化工，【8】方岩雄，黄剑明，张昆.用超临界CO

2

2001,18（4）：201-205

【9】翟海云,谭学才,陈缵光，徐健君,蔡沛祥,莫金垣.毛细管电泳高频电导法快速测定牡丹皮中的丹皮酚.色谱2005,3.23(2)：212

【10】汪宝琪，庞志功，张清.用化学发光法测定丹皮酚的研究.中国药学杂志.1994,1.29(1):35-36