全国艾滋病检测技术规范(试行)
疾病预防控制中心艾滋病检测技术规范
疾病预防控制中心艾滋病检测技术规范为了加强对我县艾滋病检测工作的管理，规范检测技术，提高检测工作质量，根据《全国艾滋病检测技术规范》，特别制定本单位的艾滋病检测技术规范。
一、检测机构及人员由检验科承担检测任务，检测人员有：赵卫华（专职）李德顺.张力争.田雅莉均为兼职，主要承担HIV抗体检测初筛工作。
二.样品的采集和处理1血清样品的采集和处理用一次性注射器（或真空采血管）抽取约3ml静脉血，室温下放置1—2h，待血液凝固.血块收缩后，再用3000r/min离心15min,吸取血清备用。
2.抗凝血样品的采集和处理用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
3.采集样品注意事项采集样品时应注意安全，以避免直接接触血液；直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作，应戴双层手套。
4样品的保存用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下，短期（一周）内进行检测的样品可存放于2-8℃5样品的接收核对样品与送样单，检查样品管有无破损和遗漏。
如发现遗漏应立即将存留的样品移出，对样品管和盛器进行消毒。
同时报告有关领导和专家。
检查样品的状况，记录有无溶血，微生物污染，血脂过多以及黄疸等情况，如果污染过重或者认为样品不能接收，则应将样品完全废弃。
并将样品情况立即通知送样人。
打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。
样品处理时若内容物可能溅出，则应在安全柜中戴手套进行。
同时应戴口罩，防护眼镜，以防皮肤或黏膜污染。
6.接收样品时应填写样品接收单。
三.抗—HIV检测的方法和程序1.常用筛查方法是:酶联免疫吸附试验(ELISA)；原理:双抗原夹心法(略)实验准备: 实验开始前将试剂盒和样品放置在室温(18—23℃),按实验室SOP 做好试剂准备。
2.实验操作程序:1)设空白对照1孔,阴性对照3孔,阳性对照2孔。
2)加阴.阳性对照.待检血清，加样量均为50ul,混匀，封板，置37℃温育30分钟后，洗板5次，拍干板孔内洗涤液。
全国艾滋病检测技术规范(2009修订版)
全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS（2009年修订版）中国疾病预防控制中心二○○九年九月全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS（2009年修订版）中国疾病预防控制中心二○○九年九月前言艾滋病在我国的流行已有二十余年，随着感染者不断增加、感染人群的变化和临II床病人的日益增多，艾滋病检测工作量逐渐加大，新的监测和检测需求也不断增加，艾滋病检测实验室已遍及全国各级医疗、疾病预防控制、采供血、妇幼保健机构，出入境检验检疫、军队等各个系统。
近几年，为了适应基层艾滋病检测的需要，一些没有条件建立规范的艾滋病检测实验室的乡镇卫生院，也陆续建起了艾滋病检测点。
遍布全国的实验室网络为艾滋病防治工作提供了重要而坚实的基础。
在新的形势下，为了更加有效地支持艾滋病监测、咨询检测（包括VCT和PITC）、新生儿感染早期诊断和抗病毒治疗工作，根据《关于艾滋病抗病毒治疗管理工作的意见》、《中国预防与控制艾滋病中长期规划（1998—2010年）》和“四免一关怀”等重要方针政策，在向各省、市征求意见基础上，在“全国艾滋病检测实验室审评和技术指导专家组”的参与下，中国疾病预防控制中心性艾滋病预防控制中心对《全国艾滋病检测技术规范（2004年版）》进行修改、增补和完善后，制定出《全国艾滋病检测技术规范（2009年版）》，使其既能满足目前艾滋病检测工作的实际需要，又能体现检测技术的发展。
本次主要对以下几个方面内容进行了修改、增补和完善：（1）在样品的采集和处理中，增加了滤纸干血斑样品、快速检测样品的采集和处理，用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品、尿液和唾液样品的采集和处理；（2）在HIV抗体检测中，增加了免疫荧光法和化学发光法，进一步明确了不同情况下的检测策略；（3）在HIV核酸检测中，增加了HIV感染产妇所生婴儿HIV感染早期诊断检测流程和适用于窗口期的集合核酸检测方法；（4）根据临床治疗需求，增加了HIV-1的耐药检测；（5）进一步完善了艾滋病检测实验室安全防护和艾滋病检测实验室的质量管理，使其更加符合目前艾滋病防治工作的需求，更加具有可操作性；（6）考虑到技术发展和新的需求，增加了HIV-1新近感染检测和HIV-1的分离培养技术。
全国艾滋病检测工作规范
全国艾滋病检测工作规范前言为了加强全国艾滋病（AIDS）检测工作的管理，提高检测工作质量，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《关于加强预防和控制艾滋病工作的意见》、《采供血机构和血液管理办法》及《血液制品管理条例》的精神，对《全国HIV检测管理规范（试行）》进行了修改，制定《全国艾滋病检测工作规范》（下称"规范"）。
艾滋病检测系指对人体血液、组织液、排泄物、组织、器官、精液以及有关血液制品、生物组织或其他物品等进行艾滋病病毒（HIV）或其相应标志物的实验室测定，包括分离HIV、检测HIV抗原、测定核酸和检测HIV抗体。
鉴于目前常规检测方法为血液中HIV抗体检测，本规范着重对这项检测工作作出相应的规定。
各级卫生行政部门负责辖区内HIV抗体检测实验室的管理，统筹规划辖区内各类HIV抗体检测实验室的设置，并经常进行监督和检查，以保证各类实验室的正常运转和检测质量。
本规范适用于全国所有HIV抗体检测实验室。
一.实验室的设置（一）种类和分级1、种类：HIV抗体检测实验室分为确认与初筛（或称筛查）实验室两类。
每省可以设立一个以上确认实验室，初筛实验室可以设立在卫生防疫防治机构、检疫机构、医疗机构、采供血机构、生物制品生产单位、医学科研教学等单位内。
2、分级：国家在中国预防医学科学院设立一个国家HIV抗体检测参比中心，各省、自治区、直辖市分别在省卫生防疫站设立省级HIV抗体确认中心，并可根据需要在地、市级卫生防疫站或有关系统中设立HIV抗体确认、初筛中心和初筛实验室。
（二）任务1、HIV抗体初筛实验室（1）对本地按规定和要求检测的对象作HIV抗体初筛检测，并提供检测前、后的咨询服务；（2）及时将初检呈阳性反应的标本送HIV抗体初筛中心实验室，再转送确认实验室确认；（3）做好初检标本登记、实验记录，定期向当地的HIV抗体初筛中心实验室或省级HIV 抗体确认中心报告HIV抗体检测情况。
2、HIV抗体初筛中心实验室（1）对本地按规定和要求检测的对象作HIV抗体初筛检测和咨询服务；（2）负责对本地区或本系统内其他HIV抗体初筛实验室发现的初检呈阳性标本的复检工作，以及技术培训、咨询服务、质量管理和质量控制等工作；（3）收集、汇总本地区或本系统内其他HIV抗体初筛实验室的检测工作情况，上报省级HIV抗体确认中心。
全国艾滋病检测技术规范(2009修订版).docx
2
规范性引用文件,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
31
3
HIV-1
耐药检测的意义,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
31
3.1
耐药监测,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
31
3.2
耐药检测,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
19
2
规范性引用文件,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
19
3
HIV－
1P24抗原检测的意义,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
19
4
实验室要求,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
19
5
检测方法及程序,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
9.1
9.2
抗体检测的统计学室内质量控制,,Байду номын сангаас,,,,,,,,,,,,,,,,
快速检测质控,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
15
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第三章
HIV-1
抗原检测
19
1
范围,,
1J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J J
19
5.4
定量检测,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
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5.5
结果报告和解释,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
20
6
质量保证和质量控制,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,
艾滋病检测规范
艾滋病检测工作规范为了加强全国艾滋病（AIDS）检测工作的管理，提高检测工作质量，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《关于加强预防和控制艾滋病工作的意见》、《采供血机构和血液管理办法》及《血液制品管理条例》的精神，对《全国HIV检测管理规范（试行）》进行了修改，制定《全国艾滋病检测工作规范》（下称"规范"）。
艾滋病检测系指对人体血液、组织液、排泄物、组织、器官、精液以及有关血液制品、生物组织或其他物品等进行艾滋病病毒（HIV）或其相应标志物的实验室测定，包括分离HIV、检测HIV抗原、测定核酸和检测HIV抗体。
鉴于目前常规检测方法为血液中HIV抗体检测，本规范着重对这项检测工作作出相应的规定。
各级卫生行政部门负责辖区内HIV抗体检测实验室的管理，统筹规划辖区内各类HIV 抗体检测实验室的设置，并经常进行监督和检查，以保证各类实验室的正常运转和检测质量。
本规范适用于全国所有HIV抗体检测实验室。
一.实验室的设置（一）种类和分级1、种类：HIV抗体检测实验室分为确认与初筛（或称筛查）实验室两类。
每省可以设立一个以上确认实验室，初筛实验室可以设立在卫生防疫防治机构、检疫机构、医疗机构、采供血机构、生物制品生产单位、医学科研教学等单位内。
2、分级：国家在中国预防医学科学院设立一个国家HIV抗体检测参比中心，各省、自治区、直辖市分别在省卫生防疫站设立省级HIV抗体确认中心，并可根据需要在地、市级卫生防疫站或有关系统中设立HIV抗体确认、初筛中心和初筛实验室。
（二）任务1、HIV抗体初筛实验室（1）对本地按规定和要求检测的对象作HIV抗体初筛检测，并提供检测前后的咨询服务；（2）及时将初检呈阳性反应的标本送HIV抗体初筛中心实验室，再转送确认实验室确认；（3）做好初检标本登记、实验记录，定期向当地的HIV抗体初筛中心实验室报告HIV 抗体检测情况。
（三）必备条件1、人员条件（1）初筛实验室：有2名以上的医技人员，从事病毒血清学检测技术工作2年以上，接受过国家或省级HIV抗体确认中心举办的HIV抗体检测学习班培训，并获得合格证书。
全国艾滋病检测技术规范
全国艾滋病检测技术规范第一章样品的采集和处理1 范围本章规定了用于艾滋病病毒（HIV）检测的血清、血浆和全血样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
2 规范性引用文件Guidelines for Using HIV Testing Technologies in Surveillance WHO/CDS/CSR/EDC/2001.16 UNAIDS/01.22E ISBN 9713-92-063-7.3 操作步骤3.1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液，包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
常用的血液样品的采集和处理方法如下：3.1.1 血清样品采集和处理3.1.1.1 用一次性注射器（或真空采血管）抽取一定量静脉血，室温下自然放置12h，待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min，吸出血清备用。
3.1.1.2 如用滤纸片采样，则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒，在刺破皮肤后，迅速把滤纸片沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
3.1.2 抗凝血样品采集和处理3.1.2.1 用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管），反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
3.1.2.2 应根据实验要求选用适当的抗凝剂，如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。
3.1.2.3 用于核酸定性检测时，采集的抗凝全血应在48h内分离PBMC和血浆，否则应在2448h内分离血浆和血细胞。
病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章4.1中表2；CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。
3.1.3 采集样品注意事项3.1.3.1 采集样品原则上应按临床采血技术规范操作（试剂盒说明书有特殊要求除外）。
全国艾滋病检测技术规范(2015年修订版)印刷版(终版)
4
4.5.1样品包裹必须在具有处理感染性材料能力的实验室内、由经过培训的工作人员打开，打开包裹时应穿戴防护衣、戴口罩和防护眼镜，在生物安全柜中打开，用后的包裹应及时进行消毒。
2
《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》中华人民共和国卫生行业标准 WS -293有效版本。
《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量及保证指南》（中国疾病预防控制中心，2013年版）。
《HIV-1病毒载量测定及质量保证指南》（中国疾病预防控制中心，2013年版）。
《HIV-1基因型耐药检测及质量保证指南》，（中国疾病预防控制中心，2013年版）。
4.2.1.4 血清：根据需要，用不含抗凝剂的真空采血管抽取5～10ml静脉血，或一次性注射器抽取静脉血，转移至无抗凝剂的试管中，室温下自然放置1～2小时，待血液凝固、血块收缩后再用1500～3000r/min离心15分钟，吸出血清，置于合适的容器中，备用。
4.2.1.5 淋巴细胞富集液：将采集的抗凝全血1500～3000r/min离心15分钟，吸取血浆层下的淋巴细胞富集液，置于合适的容器中，备用。
本次《规范》修订工作立足于我国目前检测状况，结合发达国家使用的指南，主要对以下几个方面内容进行了修改、增补和完善：（1）完善了不同的检测策略，并将其整合为独立的一章；（2）增加了HIV-1新发感染检测一章；（3）新增了补充试验概念,其内容包括抗体确证试验（WB，RIBA/LIA等）和核酸试验（定性和定量试验）；（4）增加了第4代试剂（抗原抗体联合检测试剂）的检测流程；(5)增加了核酸检测流程；(6)完善了检测报告。将抗体筛查和复检报告整合为HIV抗体筛查检测报告，增加了HIV-1核酸检测报告和婴儿艾滋病病毒感染早期诊断检测报告，取消了流行病检测HIV抗体检测报告单、艾滋病病毒抗体检测数和阳性人数统计报表、艾滋病职业暴露个案登记表和艾滋病防治工作人员职业暴露事故汇总表；（7）取消了实验室生物安全一章和艾滋病检测实验室质量管理一章。
全国艾滋病检测技术规范(2009版)
全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS（2009年修订版）中国疾病预防控制中心二○○九年九月全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS（2009年修订版）中国疾病预防控制中心二○○九年九月前言艾滋病在我国的流行已有二十余年，随着感染者不断增加、感染人群的变化和临II床病人的日益增多，艾滋病检测工作量逐渐加大，新的监测和检测需求也不断增加，艾滋病检测实验室已遍及全国各级医疗、疾病预防控制、采供血、妇幼保健机构，出入境检验检疫、军队等各个系统。
近几年，为了适应基层艾滋病检测的需要，一些没有条件建立规范的艾滋病检测实验室的乡镇卫生院，也陆续建起了艾滋病检测点。
遍布全国的实验室网络为艾滋病防治工作提供了重要而坚实的基础。
在新的形势下，为了更加有效地支持艾滋病监测、咨询检测（包括VCT和PITC）、新生儿感染早期诊断和抗病毒治疗工作，根据《关于艾滋病抗病毒治疗管理工作的意见》、《中国预防与控制艾滋病中长期规划（1998—2010年）》和“四免一关怀”等重要方针政策，在向各省、市征求意见基础上，在“全国艾滋病检测实验室审评和技术指导专家组”的参与下，中国疾病预防控制中心性艾滋病预防控制中心对《全国艾滋病检测技术规范（2004年版）》进行修改、增补和完善后，制定出《全国艾滋病检测技术规范（2009年版）》，使其既能满足目前艾滋病检测工作的实际需要，又能体现检测技术的发展。
本次主要对以下几个方面内容进行了修改、增补和完善：（1）在样品的采集和处理中，增加了滤纸干血斑样品、快速检测样品的采集和处理，用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品、尿液和唾液样品的采集和处理；（2）在HIV抗体检测中，增加了免疫荧光法和化学发光法，进一步明确了不同情况下的检测策略；（3）在HIV核酸检测中，增加了HIV感染产妇所生婴儿HIV感染早期诊断检测流程和适用于窗口期的集合核酸检测方法；（4）根据临床治疗需求，增加了HIV-1的耐药检测；（5）进一步完善了艾滋病检测实验室安全防护和艾滋病检测实验室的质量管理，使其更加符合目前艾滋病防治工作的需求，更加具有可操作性；（6）考虑到技术发展和新的需求，增加了HIV-1新近感染检测和HIV-1的分离培养技术。
全国艾滋病检测技术规范-2009
全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS（2009年修订版）中国疾病预防控制中心二○○九年九月全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS （2009年修订版）中国疾病预防控制中心二○○九年九月II前 言艾滋病在我国的流行已有二十余年，随着感染者不断增加、感染人群的变化和临床病人的日益增多，艾滋病检测工作量逐渐加大，新的监测和检测需求也不断增加，艾滋病检测实验室已遍及全国各级医疗、疾病预防控制、采供血、妇幼保健机构，出入境检验检疫、军队等各个系统。
近几年，为了适应基层艾滋病检测的需要，一些没有条件建立规范的艾滋病检测实验室的乡镇卫生院，也陆续建起了艾滋病检测点。
遍布全国的实验室网络为艾滋病防治工作提供了重要而坚实的基础。
在新的形势下，为了更加有效地支持艾滋病监测、咨询检测（包括VCT和PITC）、新生儿感染早期诊断和抗病毒治疗工作，根据《关于艾滋病抗病毒治疗管理工作的意见》、《中国预防与控制艾滋病中长期规划（1998—2010年）》和“四免一关怀”等重要方针政策，在向各省、市征求意见基础上，在“全国艾滋病检测实验室审评和技术指导专家组”的参与下，中国疾病预防控制中心性艾滋病预防控制中心对《全国艾滋病检测技术规范（2004年版）》进行修改、增补和完善后，制定出《全国艾滋病检测技术规范（2009年版）》，使其既能满足目前艾滋病检测工作的实际需要，又能体现检测技术的发展。
本次主要对以下几个方面内容进行了修改、增补和完善：（1）在样品的采集和处理中，增加了滤纸干血斑样品、快速检测样品的采集和处理，用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品、尿液和唾液样品的采集和处理；（2）在HIV抗体检测中，增加了免疫荧光法和化学发光法，进一步明确了不同情况下的检测策略；（3）在HIV核酸检测中，增加了HIV感染产妇所生婴儿HIV感染早期诊断检测流程和适用于窗口期的集合核酸检测方法；（4）根据临床治疗需求，增加了HIV-1的耐药检测；（5）进一步完善了艾滋病检测实验室安全防护和艾滋病检测实验室的质量管理，使其更加符合目前艾滋病防治工作的需求，更加具有可操作性；（6）考虑到技术发展和新的需求，增加了HIV-1新近感染检测和HIV-1的分离培养技术。
全国艾滋病检测技术规范(2009年修改版)
4.1.1 样品的编码和记录
4.1.2 应制定样品编码的标准操作程序（SOP），规定样品编码的原则和方法，为样品制定唯一性编码（编号），保证其唯一性。
4.5.2核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。
4.5.3检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受，应将样品安全废弃。并将样品情况立即通知送样人。
4.4.2.1 第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
4.4.2.2 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。
本《规范》编写工作联系人：肖瑶
本《规范》自发布之日起实施，同时终止《全国艾滋病检测技术规范(2004年版)》。
本《规范》适用于全国所有的艾滋病检测实验室。
本《规范》解释权属于中国疾病预防控制中心。
第一章样品的采集和处理……………………………………………………………………………1
5.5 结果报告和解释………………………………………………………………………20
4.2.1.9 采血完成后的穿刺针头必须丢弃于尖锐危险品容器里，妥善处理，防止发生职业暴露。
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样品的采集和处理—样品的接受
样品由经过培训的工作人员接受。 核对样品与送检单，检查有无破损和溢漏，
记录有无严重溶血、污染等情况。 自发荧光的样品不可用荧光测试。 消毒处理被污染的盛器和物品。
HIV抗体检测—试剂
1、筛查试剂要求 国家食品药品监督管理局注册批准 批批检合格 临床评估质量优良 在有效期内 2、确认试剂要求 国家食品药品监督管理局注册批准 种类：免疫印迹、条带免疫、免疫荧光 常用试剂：免疫印迹
HIV抗体检测确认试验流程图
免疫印迹法（HIV1/2混合型）
阴性反应 HIV-1阳性反应 不确定反应
出现HIV-2指示条带
阴性报告 HIV-1阳性报告
免疫印迹法（HIV-2）
阳性反应
阴性反应
报告HIV-2血清学阳性 不确定反应 必要时测核酸
阴性反应
每3个月随访一次，共2次，仍属可疑，则作阴性报告；如随访期间出现阳性反应则报告阳性
《全国艾滋病检测工作规范》 卫生部1997年9月颁布
《全国艾滋病检测工作管理规范》 卫生部待颁布
《全国艾滋病检测技术规范》（试行） 中国CDC2003年5月颁布
全国艾滋病检测技术规范（试行）
包括： 1、样品的采集和处理 2、HIV抗体、抗原检测 3、HIV核酸检测 4、艾滋病检测实验室安全防护 5、艾滋病实验室质量管理 6、艾滋病确认实验室质量考评办法 7、HIV诊断试剂临床评估方案
3、操作：严格按照试剂盒说明书 4、结果报告和解释：
＊P24抗原阳性必须经过中和试验确认 ＊P24抗原阳性仅作HIV感染的辅助诊
断依据，不能确诊 ＊P24抗原阴性只表示本试验无反应，不能
排除HIV感染
HIV核酸检测—实验室条件
功能分区：在不同的房间分别设有试剂准 备区、样品处理区，扩增区和扩增产物分 析区四个功能不同的独立工作去
全国艾滋病检测技术规范
（试 行）
甘肃省疾病预防控制中心 性病艾滋病科 赵煜君
艾滋病检测工作具有严格的科学性和政 策性，为了加强我省艾滋病（AIDS）检测工 作的规范化管理，不断提高HIV抗体检测实 验室的检测工作质量，确保每一份检测的准 确性和可靠性，及时有效地发现感染者和上 报疫情，必须认真学习、贯彻执行《全国艾 滋病检测工作管理办法》和《全国艾滋病检 测技术规范》中各项规定。只有严格按要求 开展检测工作，才能使我省HIV抗体检测各 级实验室管理逐步规范化、制度化，更好地 发挥HIV检测在艾滋病防另外一种筛查试剂
样品 筛查检测 阳性反应
重复检测
筛查试剂 阴性反应
均阳性反应
一阴一阳
送确认实验室 进行确认
均阴性反应 阴性报告
HIV抗体检测确认试验
试剂：有免疫印迹试剂HIV1+2混合型和单一型 1.用HIV1+2混合型
阴性，报告HIV抗体阴性 阳性，报告HIV-1抗体阳性 如不满足阳性标准，判为HIV抗体不确定 2.如出现HIV-2型的特异性指标条带用HIV-2单一型 阴性，报告HIV-2抗体阴性 阳性，报告HIV-2抗体阳性 如需鉴别，应进行核酸序列分析
HIV确认实验室质量考评办法
考评内容和方式 - 内容：HIV抗体筛查和确认技术，结果报告和各 项职能工作的完成情况 - 方式：实验操作；问卷调查；现场抽查
考评工作程序 - 审评专家组确定考评的具体实施方案，问卷调查内容及有 关事宜 - 制备考评血清（6-10份样），随机编号发给参评实验室， 同时发给考评问卷调查表 - 参评实验室检测考评血清 - 按规定期限上报检测报告和问卷调查表 - 检测结果的评判 - 结果反馈
2、定量检测： ＊按照仪器读数报告结果，注明试验方法、 样品种类和样品量 ＊注明最低检测限水平，低于最低检测限的 结果不能排除HIV感染 ＊附上仪器打印的数据
HIV核酸检测—实验室管理
制定严格的实验室管理制度，并严格遵 照执行。 生物安全 严格执行分区制度 仪器和材料的专用制度 单向流向制度，不得逆向流动 废弃物处理制度 质量控制和评价
HIV核酸检测—结果的判定和报告
1、定性检测：根据扩增产物的电泳图像判定 阳性结果要进行核酸序列测定确定 阴性：报告本次实验结果阴性，不排除 HIV感染 阳性：作为诊断HIV感染的辅助指标，不 单独用于HIV感染的诊断 报告定性检测结果时注明反应条件和所使 用的引物序列
HIV核酸检测—结果的判定和报告
-必要时可做P24抗原或HIV核酸测定，结果只作辅 助诊断依据，确认报告要依据血清学随访结果
-做好检测后咨询
HIV抗体检测情况报告流程图
艾滋病筛查实验室
没有艾 滋病筛 查中心 实验室 的地区
每季首月5日前报告 上季检测情况
艾滋病筛查中心实验室
艾滋病确认实验室
每季首月5日前 报告上季检测情况
每季首月10日前 报告上季检测情况
全国艾滋病检测技术规范（试行）
附件： 1、HIV抗体筛查报告 2、HIV抗体筛查阳性送检率 3、HIV抗体检测确认报告 4、HIV抗体检测数及阳性人数统计报表 5、艾滋病职业暴露个案登记表 6、职业暴露后预防HIV感染的评价和处 理程序
附录： 1、HIV RNA测定
样品的采集和处理—样品的采集
样品是血液（血清、血浆和全血）、唾 液和尿液 血清样品采集：抽取的静脉血，室温自然 放置1-2小时，待血液凝固后，3000rpm/min 离心15分钟，吸出血清备用。 抗凝血样品的采集：用加有抗凝剂的真空采 血管或注射器抽取静脉血，移至加抗凝剂的 试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
HIV抗体检测—试剂
严格按照试剂说明书操作 防止交叉感染 严格遵守实验室操作规程
HIV抗体检测—筛查试验检测程序
筛查试验： （1）阴性反应，报告HIV抗体阴性 （2）阳性反应，须进行重复检测
重复检测： （1）采用原有试剂和另外一种不同原理或不同 厂家的试剂 （2）如两种试剂均阴性，报告HIV抗体阴性 （3）如均阳性或一阴一阳，送确认实验室确认， 新采标本和原标本一并送检
判断阴性
P24抗原检测
1、适用范围： HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断 HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助
鉴别诊断 第四代HIV-1抗原/抗体ELISA检测呈阳性
反应，但确认试剂阴性者的辅助诊断 监测病程进展和抗病毒治疗效果
P24抗原检测
2、试剂：经批准注册的ELISA双抗体夹心法 试剂
两种不同结构蛋白
Env Gag Pol
HIV-1
Gp160 Gp120 Gp41
P55 P24 P17 P66(65) P51 P31
HIV-2
Gp140 Gp105 Gp36
P56 P26 P16 P68 P53 P34
检测结果的报告和处理—HIV抗体筛查
1.筛查试验阴性出具HIV抗体阴性报告 2.筛查试验阳性可出具“HIV抗体待复查”报
册，批批检验合格，临床评估质量优良 ＊复检用两种不同原理或不同厂家的筛查试
剂（包括进口或国产第三代ELISA试剂）
HIV感染监测工作中实验室检测策略
3.HIV抗体阳性的判定条件 ＊两种试剂复检均为阳性，且第三代ELISA试
剂复检样品OD值与临界值（Cutoff）的比 值（S/CO）≥6.0 ＊两种试剂复检均为阳性，且第三代ELISA试 剂复检样品S/CO比值在1.0-6.0之间，或两 种试剂复检结果一阴一阳，应进一步确认
如结果均为阴性，在HIV抗体筛查报告上盖上 “HIV 抗体阴性”，及时将结果反馈送检单位，不必再 送 确认实验室
做好检测后咨询
检测结果的报告和处理—HIV抗体确认
1、HIV抗体阳性应出具阳性确认报告（附表 3），并做好咨询，保密和报告工作
2、HIV抗体阴性应出具阴性确认报告，如近 期有高危行为，为排除“窗口期”的可能， 可以进行P24抗原或HIV核酸检测或2-3个 月后再做抗体检测
样品的采集和处理—样品的保存
HIV抗体检测： 血清或血浆存放于-20℃以下，短期（一
周）内检测可存放于2-8℃。
抗原和核酸的检测： 血浆和血细胞存放于-20℃以下，如长期
保存应置于-80℃。
样品的采集和处理—样品的运送
血清或血浆（一般不运送全血）：置于带 盖的塑料管内，有明显的标记（编号或姓 名，采集时间）附送检单。
工作人员：必须具有艾滋病实验室的上岗 资格，一并接受过安全及操作技术培训
设施和设备：根据检测项目配备相应的设 施和设备 各区的设施和设备为区域性专用 各区备有专用工作服、帽子和鞋套，必要 时配备防紫外线眼镜或面罩
HIV核酸检测—方法和试剂
分类：定性和定量检测两类 定性：HIV感染的辅助诊断 定量：监测HIV感染者的病程进展和抗病毒治疗 效果
HIV抗体检测—确认试验结果和判定
1.HIV-1抗体阳性 至少有二条Env带出现或至少有一条Env带和P24 带同时出现
2.HIV-2抗体阳性：同时符合以下二条标准 符合WHO阳性判定标准，即出现至少二条Env带 符合试剂盒提供的阳性判定标准
3.HIV抗体阴性 无HIV抗体特异带出现
4.HIV抗体不确定 出现HIV抗体特异带，但不足以判阳性
HIV确认实验室质量考评办法
考评目的 - 评价HIV抗体检测和确认的水平，为各实验室提 供外部质控机制，为检查和重新认定资格提供 技术依据 - 促进实验室建设，逐步完善实验室功能 - 提高实验室技术和管理水平
考评对象及组织单位 - 所有经正式批准的实验室为受考评单位 - 中国CDC组织并委托性病艾滋病中心负责考评 工作 - 考评每年一次
HIV确认实验室质量考评办法
考评结果的判定 考评结果的处理
- 对考评合格实验室的资格认证和鼓励 - 对考核成绩较差的实验室进行以下整顿：
⑴考评不及格、核查确有质量问题的，上报组织单位转报卫 生部疾控司，由卫生部疾控司发撤销实验室资格的通知