溶液配方

LB 液体培养基：
Bacto-蛋白胨2g；酵母提取物1g；NaCl 2g；加ddH2O 定容至200mL。

SOB 培养基：
Bacto-蛋白胨4g；酵母粉1g；NaCl 0.117g；KCl 0.373g；MgCl2•6H2O 0.406g；
MgSO4•7H2O 0.493g；加ddH2O 定容至200mL。

MS 微量（1000×）：
MnSO4•4H2O 22.3g；ZnSO4•7H2O 8.6g；H3BO3 6.2g；KI 0.83g；NaMoO4•2H2O
0.25g；CuSO4•5H2O 0.025g；CoCl2•6H2O 0.025g；用ddH2O 定容至1L。

DNA 提取buffer：
1M Tris-HCl pH 8.0 200ml/L；0.5 EDTA pH 8.0 50ml/L；10% SDS 50ml/L；5M
NaCl 50ml/L；ddH2O 650ml/L。

MS 维生素（100×）：
甘氨酸100mg；盐酸硫胺素B1 20mg；盐酸吡哆素B6 25mg；烟酸25mg；肌醇5g；
用ddH2O 定容500mL。

B5 大量（10×）：
KNO3 25g ；NH4NO3 16.5g ；NaH2PO4•H2O 1.50g ；(NH4)2SO4 1.34g ；
CaCl2•2H2O 1.5g；用ddH2O 定容至1L。

B5 微量（1000×）：
MnSO4•H2O 10g；ZnSO4•7H2O 2g；H3BO3 3g；KI 0.75g；NaMoO4•2H2O
0.25g；CuSO4•5H2O 0.025g；CoCl2•6H2O 0.025g；用ddH2O 定容至1L。

B5 维生素（100×）：
盐酸硫胺素B1 400mg；盐酸吡哆素B6 50mg；烟酸500mg；肌醇5g；用ddH2O
定容至500mL。

营养液配方：
20×B5 大量50mL；1000×B5 微量1mL；200×铁盐5mL；浓盐酸1mL；用ddH2O定容至3L。

50×TAE 缓冲液：
Tris 242g；冰醋酸57.1mL；0.5M EDTA 100mL；用ddH2O定容至1L。

TE 缓冲液：
Tris-HCl（pH 8.0）10mM；EDTA（pH 8.0）1mM。

GM 培养基：
20×MS 大量15mL；1000×MS 微量150μL；200×铁盐750μL；500×VB5 600μL；蔗糖3g；用ddH2O 定容至300mL 后调节pH 值至5.7；琼脂粉2.4g。

IPTG：50mg/mL，用0.22μm 滤器过滤除菌，-20℃保存。

X-Gal：20mg/mL（用二甲基甲酰胺溶解，-20℃保存）。

6×Loading Buffer：
1%溴酚蓝0.5mL；1%二甲苯青FF 0.5mL；甘油3.6mL；0.5M EDTA 0.6mL；用
ddH2O 定容至10mL。

亚历山大染色液：
乙醇10mL；1%孔雀绿（95%乙醇溶解）1mL；甘油25mL；苯酚5g；水合三氯
乙醛5g；1%酸性品红（水溶）5mL；1%橘黄G（水溶）0.5mL；冰醋酸1-4mL；ddH2O 50mL；总体积100mL。

FAA 固定液：
60%乙醇；30%氯仿；10%冰醋酸。

苯胺蓝：
1M 磷酸钾100mL，加1g 苯胺蓝，放置2-3 天后使用；注意遮光保存。

花粉体外萌发培养基：
MES（Tris 调pH 5.8）5mM；KCl 1mM；CaCl2 10mM；MgSO4•7H2O 0.8mM；
硼酸 1.5mM；琼脂1%；蔗糖16.6%；山梨醇 3.65%；肌醇10μg/mL。

STE 缓冲液：
NaCl 0.1M；Tris-HCl（pH 8.0）10mM；EDTA（pH 8.0）1mM；高温灭菌，4
℃保存。

Solution I：
Glucose 50mM；Tris-HCl（pH 8.0）25mM；EDTA（pH 8.0）10mM；高温灭菌，
4℃保存。

Solution II：
NaOH 0.2M；SDS 1%；需现用现配。

Solution III：
KAC 3M；冰乙酸11.5%；不可高温灭菌，4℃保存。

0.5M PIPES pH 6.7：
称取1.51g PIPES 溶于8mL 的ddH2O 中，调节pH 值至6.7，定容至10mL，通过
0.45μm 孔径滤膜过滤除菌后，分装于EP 管中，-20℃保存。

Inoue T buffer（TB 缓冲液）：
MnCl2•4H2O 0.544g；CaCl2•2H2O 0.11g；KCl 0.932g；0.5M PIPES（pH 6.7）
0.5mL；ddH2O 调整总体积到50mL；过滤除菌，用前冷却至0℃。

YPDA 固体培养基：
Bacto yeast extract 10g；Bacto peptone 20g；Glucose monohydrate 20g；Adenine hemisulfate 40mg；Bacto Agar 20g；ddH2O 定容至1L。

4×SDS 缓冲液：
Tris-HCl（pH 6.8）0.25M；SDS 8%；Glycerol 20%；溴酚蓝10-20%；
ddH2O 补足100ml；分装，-20℃保存。

β-巯基乙醇（1ml 加5μL，现用现加）。

Semi-dry buffer：
Glycine 14.65g；Tris 29.1g；SDS 2g；甲醇1L；ddH2O 补足5L。

10% SDS：
SDS 10g；H2O 100mL。

YEP 液体培养基：
Bacto-蛋白胨2g；酵母粉2g；NaCl 1g；加ddH2O 定容至200mL。

MS 大量元素（20×）：
KNO3 38.0g；NH4NO3 33g；KH2PO4 3.4g；MgSO4•7H2O 7.4g；CaCl2•2H2O 8.8g；用ddH2O 定容至1L。