如何做好术中快速冰冻病理切片
术中快速冷冻病理诊断工作制度与程序
术中快速冷冻病理诊断工作制度与程序（一）术中快速冷冻病理诊断工作制度手术中快速冷冻切片病理诊断（以下简称“冷冻”）是将手术切下的病变组织在冷冻切片机中迅速冷冻后制成切片，进行病理诊断。
一般在30分钟左右得出诊断意见，为临床手术提供参考。
冷冻是一种高技术、高难度、高风险的病理项目。
其主要作用：（1）确定送检标本组织是否有病变存在；⑵确定病变或肿瘤的性质；⑶确定手术切缘有否肿瘤；⑷确定送检组织有否癌浸润或转移等。
但由于取材局限、标本冰晶及时间短等问题，冷冻切片质量不能达到常规石蜡切片的精确度，诊断准确率受到影响。
可以出现以下情况：（1）只能做良、恶性鉴别，为临床提供一个参考性意见；（2）诊断困难，允许发延迟报告或等待石蜡切片诊断，发出最终报告；（3）冷冻诊断与常规石蜡诊断不符时，以石蜡切片报告为准。
“三甲”医院要求冷冻诊断的准确率≥96%。
为减少和防止医疗差错和纠纷，有利于此项工作的规范化开展，特制定该制度。
1. “冷冻”预约规定：需做术中快速冷冻病理诊断时，各手术科室提前1～2天详细填写冷冻申请单（可用普通病理申请单代替）送病理科。
要求尽可能填全各项内容，注明做冷冻的具体年、月、日、时，以便病理科做好准备；除填临床诊断外，请提出要解决的问题，如确定“病变性质”、“切缘有否浸润”、”淋巴结有否转移“等等。
送冷冻标本时应同时送交“术中病人情况所见通知单”。
一般不提倡急诊“冷冻”申请。
如确需急诊冷冻时，要及时与病理科主任联系，说明情况。
病理科尽量创造条件，满足临床需要。
2. 病理科实行“冷冻查房“制度：病理各级医师在手术前1日应下病房查病人、看病历或请病人来病理科接受查体，与主管医师交换意见，全面了解有关冷冻方面的病人情况。
3. 实行“手术中快速冷冻病理诊断知情同意书”（样本附后）签字制度。
术前由病理及临床医师，在病理科共同向病人和其家属谈话，交代冷冻有关事项，征得其理解、同意并签字。
“知情同意书”一式两份，一份留为临床原始资料，放入病历中；另一份存于病理科。
病理冰冻切片的制片流程
病理冰冻切片的制片流程：
①取材，未能固定的组织取材，不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完整，好为24×24×2mm。
②取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。
小组织的应先取一支承器，滴上包埋剂让其冷冻，形成一个小台后，再放上细小组织，滴上包埋剂。
③将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。
④调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10um间。
⑤调好防卷板。
制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。
切片时，切出的切片能在时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。
这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。
⑥应视不同的组织选择不同的冷冻度。
冷冻箱中冷冻度的高低，主要根据不同的组织而定，不能一概而论。
如：切未经固定的脑组织，肝组织和**结时，冷冻箱中的温度不能调太低，在-10--15℃左右，切甲状腺、脾、肾、肌肉等组织时，可调在-15～20℃左右，切带脂肪的组织时，应调至-25℃左右，切含大量的脂肪时，应调至-30℃。
妇幼保健院术中快速冷冻切片病理诊断制度
妇幼保健院术中快速冷冻切片病理诊断制度一、目的为了提高妇幼保健院在手术过程中对病变组织的快速诊断能力，确保手术治疗的准确性和安全性，降低手术风险，提高患者满意度，特制定本制度。
本制度旨在规范妇幼保健院术中快速冷冻切片病理诊断的流程、要求及注意事项，确保病理诊断的准确性和及时性。
二、适用范围本制度适用于妇幼保健院在手术过程中对病变组织进行术中快速冷冻切片病理诊断的所有相关人员，包括病理科、手术室、临床科室等。
三、术中快速冷冻切片病理诊断流程1. 术前准备（1）临床医师在手术前应向患者或患者授权人说明术中快速冷冻切片病理诊断的意义和局限性，并取得其知情同意。
（2）临床医师在手术前一天向病理科递交快速冷冻切片病理诊断申请单，填写患者的病史、影像学、实验室检查等相关信息，并注明需要病理医师特别关注的问题。
（3）病理科收到申请单后，准备好相应的设备和材料，确保术中快速冷冻切片病理诊断的顺利进行。
2. 术中操作（1）手术过程中，当临床医师需要进行术中快速冷冻切片病理诊断时，应与病理科联系，通知病理科准备接收标本。
（2）手术室护士将切下的病变组织放入标记好的容器中，并尽快送至病理科。
（3）病理科收到标本后，立即进行标本登记、取材、制片、染色，并在规定时间内（一般为30分钟）出具诊断报告。
（4）病理科医师在显微镜下观察切片，确定病变性质、肿瘤性质、手术切缘情况等，并出具病理诊断意见。
（5）病理科将诊断报告及时反馈给手术室和临床科室，以便临床医师根据病理诊断结果决定下一步的治疗方案。
3. 术后处理（1）对于术中快速冷冻切片病理诊断困难的病例，病理科应主动与临床医师沟通，说明困难所在，并商讨进一步的诊断方案。
（2）对于术中快速冷冻切片病理诊断结果与术后石蜡切片结果不一致的病例，病理科应进行详细的记录和分析，找出原因，并提出改进措施。
（3）病理科应定期对术中快速冷冻切片病理诊断的准确性、及时性等进行评估，不断优化诊断流程，提高诊断质量。
术中冰冻病理,您知多少?
术中冰冻病理,您知多少?术中冰冻病理全称为术中快速冰冻切片病理检查，此项技术是现今手术中病理诊断最快的一种方法。
其最大的价值在于对术中性质不明的病变予以确诊，通常可以在30分钟内给出诊断报告，使临床能立即确定手术治疗方案。
如果诊断为恶性肿瘤，就可以直接根据结果选择手术方式及手术范围，优化手术方案，从而有效避免了二次手术及损伤，缩短诊疗过程，减轻患者痛苦，减少医疗费用。
那么术中冰冻病理是如何进行的呢？都适用于哪些疾病呢？下面我们一起看看吧。
一、术中冰冻病理检查对于确诊的肿瘤，临床医生通常选择手术进行切除治疗，但是肿瘤分为恶性和良性，针对于良性的肿瘤只需要完整的切除肿瘤就可以达到治疗的目的，周围组织正常处理就可以关闭切口了。
如果是恶性肿瘤，那就需要扩大切除并且对周围淋巴结进行清扫等其它处理方式。
如何知道肿瘤的性质，就需要进行病理检查了。
此时肿瘤被主治医生装进一个干燥无菌的病理标本袋中，送去病理科进行术中冰冻病理检查，这个检查通常在半个小时内就会出结果。
术中冰冻病理诊断报告是主治医生决定下一步手术方式最重要的依据。
并且术中冰冻病理也可以了解恶性肿瘤扩散情况，如肿瘤是否浸润邻近组织、有无淋巴结转移情况；确定手术切缘有无肿瘤组织残留，比如乳腺癌进行保乳手术时，需要在手术中判断切除后组织边缘有无肿瘤残留，从而判断手术是否达到目的。
二、术中冰冻病理检查的流程首先病理科工作人员对对手术室送来的标本和申请单进行核对交接验收，然后病理医生对标本进行仔细的观察、拍照、描述、记录并切取典型病变组织进行切片。
将切下的病变组织放在冰冻头上，加入冷冻包埋剂OCT，OCT是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，长得有点像胶水，特点就是好冻，好切，溶于水。
使其完全覆盖组织并将冰冻头放入冰冻机中，迅速冷却到-15℃至-20℃，以便于技术人员利用冰冻切片机将组织切成4-5微米的薄片，随后将组织薄片贴在载玻片上并放入固定液内固定约1分钟。
术中冰冻病理工作制度
冰冻切片检查工作制度
1.由于取材、技术固有缺陷等因素，应在术前向病人或家属介
绍冰冻切片有一定局限性，签署冰冻快速诊断知情同意书。
2.应在手术前一天通知病理科并送病理申请单。
送标本时，应
电话详细介绍手术所见、取材部位及手术诊断情况，骨科患者应送软组织并提供X光照片参阅。
3.冰冻标本必须新鲜立即送检，避免过度湿润，切忌以盐水等
浸泡,严禁放入福尔马林固定液中，最好用干纱布包裹组织送检。
4.单件标本的冰冻切片制片应在15分钟内完成，诊断应在30
分钟内完成。
保留所剩组织，固定后作常规石蜡切片。
5.对于难以明确诊断、交界性病变、送检组织不适宜等状况，
病理医师可以不作出明确诊断，等待石蜡切片报告。
6.术中快速诊断仅作为手术中治疗的参考，不是最终诊断。
7.冰冻切片诊断报告必须采用书面形式（可传真），为防止误听
和误传，严禁采用口头或电话报告的形式。
8.从标本接收到发出报告的时间，应在病理申请单上注明。
9.冰冻病理诊断医师应具有副高级以上病理学专业技术任职资
格，并有5年以上病理阅片诊断经历。
10.冰冻切片诊断报告书应由病理医师签署全名。
11.冰冻切片标本验收、核对、编号、登记、报告及切片管理同
常规病理检查。
术中快速冰冻切片技术及应用
术中快速冰冻切片技术及应用
术中快速冰冻切片技术是一种在手术过程中对组织进行快速诊断的方法。
这种技术通常用于需要即时诊断的情况，例如判断肿瘤的性质（良性或恶性）或者确定手术切除的边缘是否清晰。
过程如下：
1. 取样: 在手术过程中，医生会选择一个代表性的组织样本。
2. 冷冻: 这个样本会被迅速冷冻，通常使用液氮或者特殊的冷冻剂。
3. 切片: 冷冻后的组织会被切成非常薄的切片，通常厚度在5-10微米之间。
4. 染色: 这些切片会被迅速染色，以便在显微镜下观察。
5. 诊断: 病理医生会在显微镜下观察这些切片，并给出初步诊断。
6. 反馈: 病理医生的诊断结果会迅速反馈给手术医生，以指导后续的手术步骤。
这个技术的优点是可以在短时间内得到诊断结果，有助于医生做出即时的决策。
但也有一些局限性，比如可能会有假阴性或假阳性的结果，或者在某些情况下，冰冻切片的质量不足以做出确切的诊断。
总的来说，术中快速冰冻切片技术是一个非常有用的工具，可以在手术过程中提供即时的诊断信息。
但是，它通常只被视为一个初步的诊断方法，最终的诊断还需要通过常规的病理检查来确认。
冰冻切片快速病理你了解多少
冰冻切片快速病理你了解多少冰冻切片快速病理是一种病理学诊断技术，是在手术中通过快速冰冻组织样本，然后在病理学家的监视下迅速切成组织切片，主要用于快速判断手术切除的组织是否患上疾病或肿瘤。
该技术能够在手术期间及时确定病变的性质及范围，早期明确诊断和采取病理学治疗，降低病人的手术风险，促进治疗的成功率，同时也能为接下来的治疗提供了参考。
下面我们深入了解一下冰冻切片快速病理。
1、什么是冰冻切片快速病理？冰冻切片是一种低温条件下使得组织快速冷却到一定的硬度，之后进行切片的方法。
因其制作过程比石蜡切片快捷、简便，且大多应用在手术中的快速病理诊断。
此种病理的时间比较长，需要3至5天左右。
因为这涉及到了诸多前期的组织处理，就比如脱水，组织的脱水、包埋、染色以及分片等。
为了应对手术过程中病理诊断的需求，冰冻切片就是最有效、最快的病理诊断方法。
冰冻就是临床医生将需要检查的组织送过来后，在大概零下20度左右的地方冷冻后，就能形成一个较硬的块，然后再将它切成薄薄的片，通过染色就能看到组织的结构，但速度是非常快。
冰冻通常是在30分钟之内就能得到病人的病例报告。
2、冰冻切片快速病理的操作步骤（1）采集组织样本并快速冰冻组织样本在切除后迅速取样，送至实验室迅速缓冲剂液中冻结保存，通常在-35℃的低温环境下冰冻20到30分钟，而进行快速冷冻的目的就是尽可能减少对组织的破坏，提高切片的质量。
（2）制备组织切片冰冻的组织样本在冰箱内恢复温度后，一方面可以通过炭气组织杖和毛刷表面清理组织，另一方面则使用超微切片机将组织薄片进一步加工制备，每个薄片厚度为5-15微米。
（3）组织切片染色通过特定的染色方法（如苏木精-伊红染色）、染色剂选择（如光泽剂、酸性染色和免疫组化染色等）来染色切片，以便医生识别细胞类型、炎症、肿瘤等等。
（4）组织学诊断通过光学显微镜观察和分析经过染色的组织切片，通过形态学及组织应学方面的一些标志来判断该组织是否有病变。
病理快速冰冻技术
快速冰冻病理技术一、概述二、快速冰冻的目的三、准备工作四、快速冰冻切片制备五、快速冰冻的注意事项一、概述●冰冻病理是通过手术切取一小块活组织，通过特制的包埋剂，将组织冻结于-20度左右，切成薄片并染色，进行镜下观察、诊断，以帮助临床医生确定手术方案的一项技术。
●是临床手术科室与病理科的一种紧急会诊。
快速冰冻病理技术发展1.1818年由Pieter 首先创造发明的。
2.1891年Halsted和Accarty将冰冻切片技 术列为正式诊断方法。
3.1960年Cryostat冰冻切片机正式应用于临床后，冰冻切片质量有了很大提高。
目前, 此项技术已普遍应用于临床，解决手术中的病理诊断问题。
随着冰冻切片技术和临床外科手术的发展，要求做冰冻的病例逐年增多。
如：乳腺、甲状腺、卵巢等等。
二、快速冰冻的目的主要：1.确定病变的性质（炎症、肿瘤及其良恶性）；2.确定切除肿瘤的边缘有无癌组织残留以 明确手术范围。
3.确认切除的组织例如甲状旁腺、输卵管及异位组织等。
4.确定切除的淋巴结有无转移及转移程度。
乳 腺 纤 维 腺 瘤乳 腺 浸 润 癌淋巴结转移癌（交界性）卵巢粘液性囊腺瘤三、准备工作1．快速活检患方知情同意书相关临床医师应向患者和（或）患者授权人说明快速活检的意义和局限性，取得患者和（或）患方的同意，并在《手术中快速活检患方知情同意书》上签字。
冰冻快速病理诊断知情同意书●术中冰冻快速病理学检查是实施手术过程中与手术方案相关的病理诊断手段，如确定病变的性质、病变扩散情况、 确定边缘或切端有无病变残留等，但因技术方法的限制，如时间短促、取材有限等，存在一定的局限性和误诊的可能性（通常是5%的误诊率）。
某些病例难以快速做出明确诊断，需待常规石蜡切片进一步完成诊断，故向病人及家属说明。
2.向病理科递交快速活检申请单临床手术医师应提前向病理科递交快速活检申请单（须手术前一天完成）申请单需填写：患者的病史；重要的影像学；实验室检查结果和提请病理医师特别关注的问题等。
冰冻切片步骤很全面
冰冻切片步骤很全面冰冻切片是一种常用的实验技术，在生物学、医学研究、组织学观察等领域有着广泛应用。
以下是一份详细的冰冻切片步骤，旨在提供全面的指导。
注意，不同的实验目的可能会有一些差异，因此请根据实际需求调整步骤。
1.準备1.1获取你所需的样本。
这个样本可以是活体动物的组织，也可以是固定处理后的组织。
1.2准备冷冻介质。
通常使用的冷冻介质包括液氮、干冰和冷冻套。
液氮是一种非常冷的液体，可以迅速冻结样本。
干冰是固态二氧化碳，可以提供较低的温度。
冷冻套是一种装置，可以通过循环冷却剂来维持全套工具的较低温度。
1.3准备工具和设备。
这些工具和设备通常包括切片机、切片模具、刀片、显微镜片和刷子。
1.4调整工作环境。
确保实验室温度适宜、空气流通，并消毒工作台和其他工具。
2.样本取样和固定2.1根据实验目的，选择合适的样本区域。
例如，在动物研究中，你可能需要选择大脑的特定区域。
2.2切下样本。
使用手术器械，例如手术剪刀和手术刀，在样本区域周围切下足够大小的组织块。
2.3快速固定样本。
使用适当的固定液将样本固定。
常用的固定液包括10%缓冲福尔马林和4%聚乙二醇。
将样本完全浸没在固定液中，确保完全固定，避免其损伤。
3.冷冻3.1冷冻样本。
将固定的样本迅速置于冷冻介质中。
如果使用液氮，直接将样本放入液氮中。
如果使用干冰，将样本放入常温下事先准备好的干冰盒中，并立即放入冷冻套中。
3.2冷冻条件。
根据样本的性质和实验要求，选择适当的冷冻条件。
通常情况下，液氮的温度低于-150°C，而干冰的温度大约为-78°C。
3.3冷冻时间。
样本的冷冻时间取决于其大小和固定液的穿透性。
通常情况下，较小的样本需要较短的冷冻时间，而较大的组织块需要较长的冷冻时间。
一般而言，冷冻时间为几个小时到几天。
4.切片4.1为切片做准备。
在切片之前，将切片模具放在切片机上，并冷却至所需的温度。
同时，将刀片插入切片机。
4.2取出样本。
病理冰冻切片工作制度
病理冰冻切片工作制度一、目的病理冰冻切片是病理科对临床送检组织进行快速诊断的重要技术之一。
本制度的建立旨在规范病理冰冻切片工作的操作流程，确保切片质量，提高诊断准确率，保证医疗安全。
二、适用范围本制度适用于病理科所有从事病理冰冻切片工作的医护人员。
三、工作流程1. 接收标本：病理科收到临床送检的组织标本后，应及时登记，并对标本进行核对，确保标本的完整性和准确性。
2. 取材：病理科医生根据临床申请单上的要求，选取适当的组织块进行切片。
组织块应尽量选取有代表性的部位，避免坏死、出血等影响诊断的因素。
3. 固定：将选取的组织块放入适当的固定液中，固定时间为1-2小时。
固定液的选择应根据组织类型和切片要求进行调整。
4. 切片：将固定后的组织块放入切片机中，调整切片厚度，进行切片。
切片过程中应保持切片机清洁，避免切片的污染。
5. 染色：将切好的切片放入染色剂中，根据染色剂的要求进行染色。
染色时间为1-2小时。
6. 脱水：将染色后的切片进行脱水处理，脱水时间为1-2小时。
7. 透明化：将脱水后的切片进行透明化处理，透明化时间为1-2小时。
8. 封片：将透明化后的切片放入封片机中，进行封片。
封片时应避免气泡的产生。
9. 诊断：病理科医生对切片进行镜下观察，并根据诊断结果填写病理报告。
10. 质控：病理科应定期进行质量控制，确保切片质量和诊断准确率。
四、工作规范1. 病理冰冻切片工作应由具有相关专业背景和经验的医护人员负责。
2. 病理科医生在进行切片前，应仔细阅读临床申请单，了解患者的病史和临床表现，以便更好地进行切片选择和诊断。
3. 病理冰冻切片应按照标准化操作流程进行，确保切片质量和诊断准确率。
4. 病理科医生在镜下观察切片时，应仔细观察组织的形态、结构、细胞学特征等，并根据诊断标准进行诊断。
5. 病理科医生在填写病理报告时，应准确、清晰地描述诊断结果，并提供相应的临床建议。
6. 病理科应定期对病理冰冻切片工作进行质量控制，包括切片质量检查、诊断准确率评估等，并对存在的问题进行及时改进。
冰冻切片制作方法与注意事项
冰冻切片制作方法与注意事项冰冻切片是一种常见的制备生物组织切片的方法，其原理是将生物组织迅速冷冻并切割成极薄的切片，用于研究组织的形态结构和组织学变化。
下面是冰冻切片的制作方法和注意事项。
一、冰冻切片的制作方法：1.组织采集：选择需要研究的组织，如动物器官或植物部位，通常用组织固定剂进行固定处理，以保持组织的形态结构。
2.组织预处理：将固定的组织转移到含有蔗糖或蔗糖与聚乙二醇的冰冻液中，浸泡一定的时间使组织与冷冻液充分均匀接触，便于组织快速冷冻。
3.冰冻：使用液氮或刀片冷冻架等快速冷冻设备，将组织迅速冷冻至-20℃以下，使组织中的水分迅速形成冰晶，避免组织的形态结构变化。
4.切割：将冷冻的组织置于切片机或切片微波机上，用冷冻刀片将组织切割成薄片，通常厚度为10-30μm。
5.将切割好的切片用刷子或微型镊子移至载玻片上，通常用蛋白质固定剂或聚甲醛进行固定处理，以保持切片的形态结构。
6.干燥：将固定好的切片置于干燥器中，用适当的温度和时间干燥切片，使其充分固定在玻片上。
7.染色：根据需要可对切片进行染色处理，常见的染色方法有HE染色、银染色、免疫组化染色等。
二、冰冻切片的注意事项：1.快速冷冻：为了保持组织的形态结构和避免变形，必须采用快速冷冻的方法，将组织迅速冷冻至-20℃以下。
液氮和刀片冷冻架是常用的设备。
2.切片设备：选择适合的切片设备，如切片机或切片微波机。
刀片的选择也十分重要，常见的冰冻刀片有钢刀、玻璃刀和蜡刀，选择合适的刀片可以提高切片质量。
3.切片厚度：切割时要控制好切片的厚度，通常为10-30μm。
切片太薄容易导致组织切面不完整，切片太厚则不能得到清晰的显微镜图像。
4.切片技巧：切片技巧也很重要，需要稳定的手部技巧和耐心。
在切割时要保持刀片的稳定，避免划伤或碎裂组织。
5.切片保存：切好的切片需要妥善保存，可以用普通干燥器或冷冻干燥器进行干燥，避免切片变形和水分损失。
6.染色方法：根据需要选择合适的染色方法。
术中快速冰冻切片的规范及程序
术中快速冰冻切片的规范及程序１.冰冻切片的制备１.１打开照明开关，打开冰冻切片机的玻璃箱盖。
１.2选择冻头，在冻头滴上冰冻切片机包埋剂适当。
１.3 待组织完全冷冻后，将冻头移到切片刀口的冻口内，扭紧冻头，进行切片，切片时有节奏的来回推动摇手柄，切得完整且较薄的切片（厚度8-9um），即可贴在玻璃片上。
１.4 将切好的片子用95%的乙醇固定，然后进行染色、封片、镜检（同石蜡切片H-E染色步骤）。
１.5工作完毕后将冻头上组织取出，放回送检的标本袋内，用10%的中性甲醛固定液固定。
１.6清扫切冰冻切片机箱，将冻头擦干后放回冰冻切片机内。
１.7关好冰冻切片机的玻璃箱盖，关闭照明电源。
２.冰冻切片机须24h开机，长假或节假日前检查切片机箱内的结冻情况，必要时关机，化霜，清洁冰冻切片机。
３.注意事项３.1 制作冷冻切片所需的试剂和设备等应处于随时可供使用状态。
３.2 切取的组织块大小适宜（厚度<2mm），并尽快置于冷冻组织切片机上制备切片。
３.3 调节冷冻程度，试切合合适时便迅速切片。
冷冻不足无法切片，冷冻过度切片易碎。
３.4 冷冻切片固定液95%乙醇50ml４.单体标本的冰冻制片应在１５min内完成。
术中快速冰冻诊断的规范及程序１.临床医师在术前向患者或近亲属告知术中快速病理诊断的局限性，签署术中快速病理诊断知情同意书。
２.从标本接收到发出报告的时间，应在病理申请单上注明。
３.有条件的由两位中／高级称职的病理医师共同签署快速活检的病理诊断意见。
对于病变疑难、手术切除范围广泛和会严重致残的手术中快速活检，应由两位高级称职的病理医师共同签署会诊意见。
主检病理医师签名的字迹应能辨认。
４.快速活检诊断意见一般在收到送检标本后３０min内发出；同一时间段内相继收到的多例患者标本或是同一例患者的多次标本，其发出报告的时间依次类推。
对于疑难病变，可酌情延时报告。
５.对于难以即时快速诊断的病变（例如病变不典型、交界性肿瘤病变或送检组织不足以明确诊断等），主检病理医师应向手术医师说明情况，恰如其分地签发病理诊断意见或告知需要等待常规石蜡切片进一步明确病理诊断。
冷冻切片方法及注意事项
冷冻切片方法及注意事项冷冻切片是一种常用的组织学研究方法，它能够帮助研究人员观察和分析生物组织的结构和功能。
下面将详细介绍冷冻切片的方法及注意事项。
1.组织采集：首先需要选择适当的生物组织样本，可通过手术切取、尸检或动物献体等方式获得。
2.组织处理：取出组织样本后，应立即进行处理，以防止样本脱水和坏死。
可将组织放入理化盐水或生理盐水中，避免干燥、坍塌或变形。
3.固定组织：使用适当的固定剂对组织进行固定，以保持组织结构的完整性。
常用的固定剂有福尔马林、戊二醛、乙醛等。
固定时间应根据组织大小和厚度进行调节，较小的组织可以固定2-4小时，而较大的组织可能需要24小时以上。
4.预冷冻：固定后的组织应在冷冻前进行预冷冻处理，以提高冷冻切片的质量。
预冷冻的方法包括放入冷冻剂中（如液氮、干冰等）或将其放入冰盒中进行冷藏，使组织完全冷却。
5.冷冻切片：使用冷冻切片机将预冷冻的组织切成薄片。
为了获得更好的切片结果，刀片的角度和厚度需要进行适当的调整。
同时，切制时需要快速而轻柔地移动切片机，以防止组织被拉伸或损坏。
6.切片收集：将切片收集在玻片上，通常使用细长形的切片夹或切片板来收集切片。
确保切片不受损并保持平整。
7.切片保存：将切片放入适当的保存溶液中，如PBS（磷酸盐缓冲液）或甘油等，以防止切片干燥和变形。
可以根据需要选择冷藏或冷冻保存。
冷冻切片需要注意以下事项：1.样本质量：选择新鲜、完整的组织样本，避免坏死、变性或损伤的组织。
2.固定剂选择：选择适当的固定剂进行组织固定，以保持组织结构的完整性。
3.冷冻速度：组织应尽快冷却，以避免组织脱水或破坏。
冷冻速度过慢可能会导致晶体形成，影响切片质量。
4.切片机状态：保持切片机的良好状态，定期检查刀片的锋利度和调整角度，以确保切片的质量。
5.切片技巧：需要轻柔、均匀地切片，避免组织被拉伸或扭曲。
同时，切片过程中需要快速操作，以减少冰晶对组织的破坏。
6.切片收集：收集切片时要避免切片叠加或悬浮，以免影响切片的观察和分析。
手术中病理检验的方法
手术中病理检验的方法
手术中病理检验的常用方法有以下几种：
1. 快速病理冰冻切片：在手术过程中，取得可疑病变组织标本，迅速冷冻并切片，然后立即染色，以便迅速获得初步诊断结果。
2. 标本固定和切片：手术结束后，将病变组织标本进行固定，一般是用甲醛进行固定。
然后将固定后的组织标本切片，使之适于显微镜观察。
切片后，可以进行不同染色方式（如血液常规染色、免疫组化染色等），以便进一步观察和诊断。
3. 组织病理学检查：通过显微镜观察病变组织标本的细胞结构、组织结构和细胞学特征等，根据这些特征来判断病变的性质和诊断。
4. 免疫组织化学检查：通过利用特定抗体与组织标本中相应的抗原结合的原理，来检测特定蛋白质或抗原的存在情况，以进一步帮助诊断。
5. 分子病理学检查：通过检测病变组织中的某些基因、蛋白质或核酸的表达情况和突变状态等，以提供更为精确的诊断和分析。
这些方法可以根据病情的需要，单独或结合使用，以便获取准确的病理诊断结果。
冰冻切片技术
冰冻切片技术1：实验原理：利用物理降温的方法将新鲜组织标本冷冻产生一定的硬度进行切片，与石蜡切片相比，冷冻切片不需要脱水处理。
因此制片速度快，是术中进行快速病理争端的良好方法。
2：实验步骤：①取材：从新鲜的小鼠中剖取肝、肺、心、胰腺、肾等组织器官至载玻片上②冷冻前将恒温冷冻切片机的速冻住头温度和箱内温度调至-20--15℃，将组织器官移到涂了一层耦合剂的组织支承器冻面上，用镊子压平，再挤上一层耦合剂覆盖标本。
放至冰冻机中降温处理③标本冷冻后将组织支承器固定在切片机的机头上，调整机头的位置使其正好位于切片刀的后方。
④以粗修的方式粗修到暴露标本的最大平面，用毛笔清除机头、组织支承器及刀片上的组织碎屑。
⑤确认切片的厚度，一般为4到5vm不等，根据组织的不同可适当调整切片的厚薄。
⑥放下放卷板使其位置恰好与刀片的刀刃完全平行并略突出刀刃⑦以转动大轮推进的方式进行切片，良好的切片将在放卷板的下方形成一张完整平坦无褶的薄片，若切片略有弯曲，可用毛笔轻轻展平。
⑧打开放卷板，将标记好的载玻片平稳的轻压组织，使其平整的吸附到载玻片上。
⑨将切好的标本薄片迅速放入95％的乙醇固定液中进行3min的固定，再经过1min的流水冲洗，进入染色程序⑩按照：苏木素（1min）→流水冲洗（3min）→伊红染液（30s）→流水冲洗（1s）→85％乙醇→95%乙醇（10s）→无水乙醇①（30s）→无水乙醇②（1min）→二甲苯①（1min）→二甲苯②（1min）①将染色完成的标本使用树胶与盖玻片进行封片操作②将标本放到显微镜下，观察拍照记录10×、40×的镜下观3：实验结果：在镜下可观察到小鼠的肝细胞，细胞核被染成蓝色，胞质及细胞间隙被染成淡红色，同时可见大多数细胞中脂肪将细胞核挤到细胞一侧。
4：结果分析及讨论：①切片前先预调好厚度，提前准备好要使用的工具。
②切片时，观察窗不可打开过大，预防温度升高影响切片③在每一次切片之后都应该要注意清理碎屑，以防污染④严格把握染色时间，避免因染色时间太短或太长而影响实验观察5：思考题：①什么时候做冰冻切片：1：在手术:进行中，突然发现病人的病变原及诊断，判断病变是否为肿瘤2：判断肿瘤的良恶性2：了解淋巴结是否有转移的肿瘤细胞，或者转移的程度，以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其他的治疗措施。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，早期诊断和治疗对患者的生存率具有重要影响。
在乳腺癌手术中，病理诊断是非常关键的一环。
传统的石蜡切片需要几天的时间才能出具结果，这对于术后治疗和患者的病情评估来说具有一定的不便。
而快速冰冻切片技术可以在手术过程中快速获取组织病理学信息，有利于术中决策和术后治疗计划的制定。
本研究旨在比较乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率，以期为乳腺癌术中病理诊断提供更为准确和高效的方法。
一、快速冰冻切片技术快速冰冻切片技术是指在手术过程中，将新鲜取得的组织标本迅速冷冻后切割成薄层，然后染色和镜检。
该技术可以在30分钟内获得组织病理学结果，对于术中判断切缘情况和淋巴结转移等具有重要意义。
快速冰冻切片技术主要适用于术中决策、病变边界不清晰、肿块与周围组织粘连等情况。
二、常规石蜡切片技术常规石蜡切片技术是指将新鲜取得的组织标本固定、脱水、浸入熔蜡后切割成薄层，然后染色和镜检。
这个过程需要数天的时间，对于术后治疗和预后评估来说不够及时。
三、研究方法本研究选取了连续行乳腺癌手术的患者为研究对象，根据术中取得组织标本的情况进行分组，一组进行快速冰冻切片病理诊断，另一组进行常规石蜡切片病理诊断。
比较两组病理诊断的准确率和一致性。
四、研究结果经过研究发现，在乳腺肿瘤术中，快速冰冻切片病理诊断与常规石蜡切片病理诊断的准确率存在一定差异。
快速冰冻切片的诊断结果在术中具有较高的准确性，能够更加直观地观察组织形态和肿瘤边界，对淋巴结转移的判断也更为准确。
而常规石蜡切片的诊断结果需要数天的时间，对于术后治疗和预后评估来说时间较长，但在组织形态和亚细胞结构的观察上具有优势。
六、研究展望本研究在乳腺癌术中病理诊断方面取得了一定的成果，但仍然存在一些不足之处。
在样本选择和数据分析上尚有待进一步完善。
未来可以结合更多的临床实例进行研究，以验证研究结果的稳定性和可靠性。
冰冻切片制作流程
冰冻切片制作流程
冰冻切片制作是一种用于组织学研究的常见技术，它需要将组织样本快速冷冻并使用超薄切片机进行切割。
以下是冰冻切片制作的基本流程：
1. 组织样本准备：选择需要研究的组织样本，并将其用生理盐水或缓冲液清洗干净。
2. 快速冷冻：将样本迅速放入液氮中，使其迅速冷冻，以保留细胞和分子结构的完整性。
3. 超薄切片：使用超薄切片机将冷冻的样本切成厚度为几微米的切片。
4. 制片和染色：将切片转移到载玻片上，并进行染色处理，以便进一步观察和研究样本。
5. 显微镜观察：将载玻片放入显微镜中观察，并使用数字成像设备拍摄图像。
冰冻切片制作需要严谨的操作和高超的技术，以获得高质量的切片和可靠的实验结果。
在制作过程中需要注意保持样本的完整性和避免切割过程中的变形和损伤。
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如何做好术中快速冰冻病理切片
发表时间：2011-12-27T11:18:24.860Z 来源：《中外健康文摘》2011年第37期供稿作者：阮顺爱蔡爱英唐雅[导读] 术中快速冰冻染片用的苏木素须是新鲜配制的。
阮顺爱蔡爱英唐雅（福建省莆田市第一医院病理科福建莆田 351100）
【中图分类号】R472【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）37-0275-02 病理术中快速冷冻切片的优劣，直接关系到疾病的取舍，对病人至关重要。
如何做好术中快速病理冷冻切片，笔者通过较长时间的实践与探索认为除了送检标本要新鲜外还有“三”个直接处理；不同的组织调整不同的冷冻时间；更新冰冻切片机设备及配备切片技术熟练的技术员进行冰冻切片操作等方法，有效提高了冰冻切片质量和诊疗工作质量，从而得到临床医生的充分认可和信任。
1.“三”个直接处理
1.1样本直接放置在冷冻头上，把包埋剂围绕在样本周围。
1.2直接在冷冻台上修整蜡块。
1.3冷冻切片组织平铺贴在玻片上后直接进行文火烘烤，然后再进入固定环节，这样就避免了脱片的危险。
2.有时同一部位有多块小组织须同时进行术中快速病理检查，如电切的前列腺组织，为节约时间，可将多块组织放在同一个冷冻头上，但要注意所有组织要在同一水平面上。
3.根据不同的组织调整不同的冷冻时间。
（冰冻机恒温在负22—25度）。
如甲状腺、前列腺组织则速冻时间稍短，一般3—5分钟即可，当然若组织块较大，速冻时间相对延长一些。
但这些组织若速冻时间过长则切出的片会形成诸多大小不等的空洞而严重影响诊断，当出现空洞时可用拇指按压在组织块上2—3秒，使组织温度回升，再行切片。
又如含脂肪较多的乳腺组织、淋巴结组织等则应相对延长速冻时间。
一般8—15分钟，尤其是纯脂肪组织和畸胎瘤组织则冰冻时间相对更长。
4.为防止冷冻切片中出现“冰晶”，一般采取急速降温，并进行“快冻”“快切”。
5.冰冻机设备要现代化。
俗话说“巧妇难为无米之炊”。
若术中快速冷冻切片机设备简陋加上技术操作不过关，将明显影响冰冻切片质量而影响诊断结果。
6.术中快速冰冻染片用的苏木素须是新鲜配制的。
总之，病理学对疾病的确诊与鉴别具有极其重要的价值，但病理形态学本身同样存在着明显的局限性、相似性和模糊性。
若切片质量差，势必增加术中快速诊断的风险，所以必须认真做好术中快速冷冻病理切片。
参考文献
[1]郭凤英，秦景.《影响冷冻切片技术的常规问题及处理》，宁夏医学院学报，2001、23.。