杀菌剂毒力测定
5种杀菌剂对黄瓜白粉病室内毒力测定及田间药效
黄瓜白粉病（Erysiphe cichoracearum）又称白毛病、白霉病，具有分布广、潜伏期短、流行性强、传播快的特点，在全国各地都有发生，是保护地黄瓜的重要病害之一，主要阻碍叶片的光合作用，对黄瓜后期造成严重的影响。
苗期至成株期均可发生，主要侵害叶片，亦为害茎部和叶柄，一般不为害果实。
温室大棚内一旦发病，发展迅速，严重时可造成叶片干枯甚至提早拉秧，严重影响黄瓜产量和品质。
除为害黄瓜外，还能为害西葫芦、甜瓜、南瓜、西瓜、冬瓜、丝瓜等。
近年来，白粉病有加重趋势，而且一年四季均可发病，尤其在感病品种上为害程度甚至超过霜霉病，加之一定抗药性的产生，给防治带来一定难度。
目前化学防治起着非常重要的作用，在保护地栽培条件下占有不可替代的地位。
为解决上述问题，有效控制黄瓜白粉病发生和发展的速度，2018年进行室内毒力和田间药效试验，筛选防治黄瓜白粉病的有效药剂，本研究为有效防治黄瓜白粉病提供试验数据。
材料与法供试作物供试作物为黄瓜，品种为新泰密刺。
试验病原菌：黄瓜白粉病病菌[Sphaerotheca fuliginea(Schlecht)Poll.]。
大棚宽度10 m，黄瓜株距10 cm，行距100 cm，试验地肥力中等。
供试药剂25%乙嘧酚SC，深圳诺普信农化股份有限公司；4%四氟醚唑EW，陕西韦尔奇作物保护有限公司；10%醚菌酯EW，天津汉邦植物保护剂有限责任公司；40%苯醚甲环唑·嘧菌酯SC、20%四氟醚唑·醚菌酯SE，青岛瀚生生物科技股份有限公司。
室内毒力测定采用盆栽测定法进行室内毒力测定。
（1）育苗塑料营养钵育苗，基质为营养土（花卉土∶蛭石为2∶1），钵体上层覆盖约2 mm的营养土，每钵留2株苗，黄瓜2片真叶展开时开始试验。
（2）接种方法采集新鲜白粉病叶，配制孢子悬浮液，将新鲜孢子悬浮液喷施于接种叶片上，人工接种24 h后喷药，施药器械容量1 L、喷口直径1.0 mm的小型喷雾器。
09第二章 第三节 杀菌剂的生物测定方法
水溶性药剂、乳油稀释液或稳定的悬浮液（胶悬剂的稀释液）可用此
法，而WP由于是悬浮性差，不宜采用。 优点：操作简单迅速，无需特殊设备
缺点：药剂和孢子始终充分接触，与病害防治的实际相差很大，测得
的毒力往往偏高。
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
二、杀菌剂温室植株测定方法
针刺法测定农药对番茄灰霉病防治效果的活体试验
二、杀菌剂温室植株测定方法
对照（3d）
40%多菌灵WP1500×（3d）
一种植物精油1000×
针刺法测定农药对番茄灰霉病防治效果的活体试验
二、杀菌剂温室植株测定方法
盆栽法测定农药对小麦白粉病的防治效果
二、杀菌剂温室植株测定方法
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
一、杀菌剂皿内生物测定 （一）孢子萌发法
3、孢子悬浮液的准备
菌种
无菌水，搅匀
菌种悬浮液
二层纱布过滤 除去菌丝体及破碎培养基
离心 无菌水洗
洗净的孢子
调至浓度5000个/mL（10×10倍，35个孢子）
Байду номын сангаас
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
第二章 杀菌剂生物测定
第三节 杀菌剂的生物测定方法
一、杀菌剂皿内生物测定 （一）孢子萌发法
3、孢子悬浮液的准备
菌种应是标准菌种，供试菌种应符合以下条件： ①菌种纯粹，在一般培养基上易大量产生孢子； ②多代繁殖不易产生变异； ③孢子个体较大，易于在显微镜下观察萌发情况；
④在分类上有一定的代表性，而且是重要的植物病害病原菌。
2、生长速率法
杀菌剂咯菌腈对根腐病的室内毒力测定和田间防治效果
试验 大豆试验于 ２０２０年 ５月中旬至 ７月底在江 苏省徐州市睢宁县双沟镇陈王村进行。露天种植， 土壤为沙壤土，肥力水平中等。试验共设 ６个处理， 其中 ２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂设置 ３个用量处理， 分别为 ２００、４００、６００ｇ／１００ｋｇ种子；３５０ｇ／Ｌ精甲霜 灵种子处理乳剂和 ３０ｇ／Ｌ苯醚甲环唑悬浮种衣剂 按照 常 规 使 用 剂 量 各 设 １个 处 理，分 别 为 ８０、 ５００ｇ／１００ｋｇ种子。另设 １个空白对照。于 ２０２０年 ５月 １８日大豆播种前拌种包衣，晾干后进行播种。 随机区组排列，每个小区面积为 ２５ｍ２，重复 ４次， 共计 ２４个小区。按照 ６７．５ｋｇ／ｈｍ２ 的播种量进行 人工点播，行距为 ５０ｃｍ，株距为 １０ｃｍ。各小区大 豆长势较好且均匀一致，肥水管理及病虫害防治按 常规进行，试验期间不再施用其他防治大豆根腐病 的药剂。
菌丝生长平均抑制率 ＝（对照菌落直径 －处理 菌饼直径）／（对照菌落直径 －５ｍｍ）×１００％。
将菌丝生长抑制率转换成几率值，将药剂浓度 换算成对数值，以几率值为毒力回归方程应变量 ｙ， 药剂浓度对数值为毒力回归方程自变量 ｘ，计算毒 力回归方程和各药剂的 ＥＣ５０。 １．２．３ 咯菌腈对大豆根腐病和花生根腐病的防治
娄天成１，左 杨２，张心宁３，余文杰１，２，孙 凯２，刘永锋２，刘邮洲１，２
（１．南京农业大学植物保护学院，江苏南京 ２１００９５；２．江苏省农业科学院植物保护研究所，江苏南京 ２１００１４； ３．江苏省徐州市睢宁县农业农村局，江苏睢宁 ２２１２００）
摘要：根腐病是生产中的一种重要的土传真菌病害，为明确药剂咯菌腈对根腐病的防效，给生产上提供合理有效 的用药方案。采用室内离体试验和田间小区试验相结合的方式，进行 ２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂对根腐病的室内毒力 测定和田间防效试验。结果表明，咯菌腈对病原菌立枯丝核菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ）和高粱镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ａｎｄｉｙａｚｉ） 菌丝生长的抑制作用较强，对禾谷镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）和尖孢镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｐｏｒｕｍ）菌丝生长的抑制 作用次之，对层出镰孢菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ）菌丝生长无抑制作用。在 ２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂按照使用剂量 ２００、 ４００、６００ｇ／１００ｋｇ种子进行大豆根腐病的防治试验中，出苗后 １０ｄ，对大豆根腐病的防效为 ７５６０％ ～９０．５８％；出苗 后 ３０ｄ，对大豆根腐病的防效为 ６９．６１％ ～８４．４３％；出苗后 ６０ｄ，对大豆根腐病的防效为 ５８３７％ ～７５．３１％。随着用 量的增加防效显著提高，在 ０．０５水平上，３个剂量的处理防效具有显著差异。在 ２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂进行花生 根腐病防治试验中，出苗后 １０ｄ，咯菌腈低、中、高 ３个使用剂量对花生根腐病的防效为 ６１．２６％ ～８３．７９％；出苗后 ３０ｄ， 对花生根腐病的防效为 ５６．１８％ ～７９．３０％；出苗后 ６０ｄ，对花生根腐病的防效为 ４９．７６％ ～６９７８％，在 ０．０５水平上，３ 个剂量的处理防效具有显著差异。此外，对照药剂 ３５０ｇ／Ｌ精甲霜灵种子处理乳剂的平均防效与咯菌腈低剂量防效 相当，３０ｇ／Ｌ苯醚甲环唑悬浮种衣剂的防效与咯菌腈中剂量防效相当。结果表明，２５ｇ／Ｌ咯菌腈悬浮种衣剂能有效防 治大豆根腐病和花生根腐病，随着时间的推移，其防效呈逐渐下降趋势。 关键词：根腐病；咯菌腈；抑制作用；田间防效；悬浮种衣剂；毒力测定 中图分类号：Ｓ４８２．２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２１）１１－００８０－０５
杀菌剂毒力测定
时，每重复了随机观察3个以上视野， 调查孢子总数不少于200个，分别记 录萌发数和孢子总数。
29
Determining fungicide inhibition of pathogen spore germination on concave slides
40
一、杀菌剂毒力测定方法
4 扩散法 管碟法： 在试验平面上放4个牛津杯（外径8mm，
内径6mm，高10mm）。用移液管将已 知浓度的标准液和不同浓度的待测液 移圆筒内，在适温下培养，让其形成 抑菌圈。测其直径。
41
一、杀菌剂毒力测定方法
4 扩散法：农用抗菌素效价测定
抗菌素效价的衡量单位分两类：
一般规定孢子的浓度最好是5万/ml。 15 10*10观察时，每个视野约有35个。
一、杀菌剂毒力测定方法 孢子浓度可用计数器测定 纽鲍尔（Neubauer）血球计数器。 边长为0.05mm的小方格，深度为
0.1mm
16
一、杀菌剂毒力测定方法
1.4 孢子萌发条件 A、温度：各种真菌孢子萌发的最适
6. 数据处理 计算校正的孢子萌发率，求出毒力回
归线，EC50，EC90及95%置信限。
30
一、杀菌剂毒力测定方法
2 生长速率法(mycelium growth rate test)
将不同浓度的药液与融化的培养基混 合，制成带毒培养基平面，在平面上 接种病原菌，以病原菌生长速度快慢 来判定药剂毒力大小。
玉米小斑病菌孢子，适当加入一点玉 米苗的新鲜汁液，在26℃下2h，孢子 萌发率高，整齐。
22
一、杀菌剂毒力测定方法
1.5 调查方法 一般病菌培养20~24小时即可镜检。
29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定
29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定摘要：在实验室内，采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果，采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。
结果表明，有10种杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力较强（Ec50值相对抑制率计算公式如下：抑菌率=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落直径-菌饼直径×100%。
1.2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定方法菌液的制备：将番茄青枯病菌在LB斜面上活化，移入50mLLB培养液中，在28℃下振荡（150r/min）培养过夜。
用无菌水将番茄青枯病菌菌液稀释至浓度约为106cFU/mL，备用。
纸碟测定方法参照文献[12-15]：将29种杀菌剂分别制成浓度为1000、100、10、1mg/L，吸取20μL在LB平板中央，每处理重复3皿。
设清水对照。
用上述番茄青枯病菌稀释液（106cFU/mL）喷雾后，28℃培养过夜，调查抑菌圈直径，计算相对抑制率。
应用Excel软件处理系统求出各单剂毒力回归方程、Ec50值及相关系数。
2结果与分析2.1杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力测定采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果。
2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。
结果表明，有3种杀菌剂对番茄青枯病菌有较强的毒力，其Ec50值均小于10mg/L（表3、图2），其中3%中生菌素的毒力最强，Ec50值为3.3742mg/L。
其余26种杀菌剂对番茄青枯病菌不表现毒力。
表33种杀菌剂对番茄青枯病菌的室内毒力测定结果药剂名称毒力回归方程相关系数（r）Ec50（mg/L）3%中生菌素y=7.10x+1.250.96823.374280%代森锰锌y=5.58x+0.830.97565.58872%春雷霉素y=4.11x+1.210.94198.35873结论与讨论番茄具有较高的营养价值，深受广大消费者的喜爱。
6种杀菌剂及其混配剂对香栓孔菌的室内毒力测定
Ｔｏｘ ｃｔ ｓ ｆＳｉ ｎ ｃｄ ｓ ａ ｅ ｒＭ ｉ ｔ ｒ ｓ ｔ ａ ｔ ｓｓ ａ ｅ ｌ ｎ ｎ Ｌａ ｏ ａ ｏ ｙ ｉｉｙ Ｔｅ ｔｏ ｘ Ｆｕ ｇｉｉ ｅ ｎｄ Ｔｈ ｉ ｘ ｕ ｅ ｏ Ｔｒ ｍｅ ｅ ｕ ｖ ｏ ｅ ｓ ｉ ｂ ｒ ｔ ｒ
ＣＨＥＮ Ｊ ｎ ，ＧＡＯ ｏｐ ｎ 孙 ，ＺＨＡＮＧ Ｗ ｅ ｕ Ｇｕ — ｉｇ ｉ～，ＱＩ ｉ— ｕ ，ＷＡＮＧ Ｙｕ 。 ｎｙ 。 Ｊ ｅ，
Ｗ Ｕ Ｂａ －ｕ 。 ｏｊ ｎ 。ＷＥＩＸｉｎ －Ｉ 。 ａ ｇｊｌ ，ＺＨＡＮ Ｈｕ ｉｌ ｎ ａ—ｉ 。
（ ．Ｆｅ ｇ ｈｅ ｇ Ｆｏ ｅｔＰｅｔＣｏ ｔｏ ｎ ａ ａ ｔｎ ｒａ １ ｎ ｃ ｎ ｒｓ ｓ ｎｒ ｌａ ｄ Ｑｕ ｒ ｎ ｉｅ Ｂｕ ｅ ｕ，Ｆｅ ｇｃ ｅ ｇ，Ｌｉｏ ｉ ｇ １ １ ０，Ｃｈ ｎ ｎ ｈｎ ａ ｎ ｎ ８ ０ １ ｉａ
退菌特 、 石硫合 剂、 可杀 得 、 多菌 灵和 百 菌 清 的 Ｅ 分别 为 １． １ ２ ． ３ １８ ４ 、６ ． ８ ４ ２ ２ 和 ６ ９ 、６ ８ 、 １． ９ ３ ５ ３ 、 １ ． ９
１５ ６ ７ ｇ・ ； 菌特和代 森锰 锌按 １： 、 ３和 ３： ５ ． ６ｍ Ｉ 退 ｌ１： １比例 混配都表现 出一 定的增效作 用， 中 其 按 １： ３比例 混配增效作 用非常 明显 ， 共毒 系数 高达 ４ ５ ９ ， Ｃ。 为 ４ ４ １． ０ Ｅ ５ 仅 ． ８ｍｇ・ 。 Ｉ 。 ＿ 关 键词 ： 木腐 朽病 害； 栓孔 茵 ； 菌剂 ； 力 测定 林 香 杀 毒
五种杀菌剂对草坪弯孢霉菌毒力测定
五种杀菌剂对草坪弯孢霉菌毒力测定摘要：通过室内毒力测定，研究了5种杀菌剂对草坪弯孢霉菌菌丝的抑制作用，结果为25%三唑酮wp毒力回归方程为y=8.7589-0.0372x，50%福美双wp 毒力回归方程为y=8.9247-0.028x，25%敌力脱ec毒力回归方程为y=9.3337-0.0380x，70%代森锰锌wp毒力回归方程为y=9.6948-0.0361x，5%速保利wp毒力回归方程为y=10.1063-0.0331x。
表明5种杀菌剂浓度与菌丝生长抵制率间具有高度的相关性；5%速保利wp抑制效果高于25%敌力脱ec、70%代森锰锌wp抑制效果；在防治草坪弯孢霉叶枯病时首先选用的药剂为5%速保利wp，其次为25%敌力脱ec、70%代森锰锌wp。
关键词：草坪弯孢霉菌；不同杀菌剂；抑制率；回归方程中图分类号：s481 文献标识码：a草坪弯孢霉叶枯病是由弯孢霉属（curvularia spp.）引起的真菌性病害[1-5]，是大连市绿化草坪上发生较严重的草坪病害之一，该病降低了草坪的实用价值及观赏价值等，致使禾草早衰和草坪毁坏，该病发生于高温高湿季节，病菌随风雨传播，容易流行[6-9]，为筛选高效的杀菌剂应用于生产中，笔者在室内进行了毒力测定，现将结果整理如下。
1 材料与方法1.1供试药剂25%三唑酮wp （河南省中原农药化工有限责任公司），50%福美双wp（山东利邦农化有限公司），25%敌力脱ec（先正达（中国）投资有限公司），70%代森锰锌wp（鹤壁陶英陶生物科技有限公司），5%速保利wp（日本住友化学工业株式会社）1.2试验方法在无菌条件下，扩繁草坪弯孢霉叶枯病病菌5盘，培养7d备用。
本试验设置26个处理，重复3次，以无菌水为对照。
在无菌条件下用无菌水将25%三唑酮wp稀释成100，400，800，1600，3200倍液；50%福美双wp、25%敌力脱ec、5%速保利wp分别释成250，500，1000，2000，4000倍液； 70%代森锰锌wp释成500，1000，2000，4000，8000倍液，待用。
杀菌剂的毒力测定和
但近代随着新型内吸杀菌剂的发展，对杀菌剂的生物筛选
逐渐由经典的离体筛选趋向活体筛选。 因为它不仅模拟田间实际，同时可以防止那些在离体平板 上无效，而必须在植物活体上方显示活性的化合物漏筛。 但活体筛选涉及的因素较多，对寄主植物、试验条件要求
较高，如光照、湿度、温度，为控制病原菌与寄主相互作用的
条件，必须有适合的温室，费工耗资都较大。 离体测定能反映化合物毒力的本质和程度，方法简便，为 研制新农药不可缺少，但它存在有一点缺点，应该和温室活体 的盆栽试验结合起来。
过试验确定其药效的好坏，经济效益的高低，
也就是说，田间试验是确定一种药剂在生产 上有无实用价值的主要方法。 田间实验的具体方法可参考《农药药效 试验的设计与分析》一书，防治效果可用以 下公式计算。
一，活性效应显现较快，缺点是有时与活体测
定结果不一致，有时会漏筛或误筛，如用粉锈
宁处理大麦白粉病菌，离体测定不仅分生孢子
能萌发且能形成吸器，但此药在活体上却表现
高效。所以初筛手段不采用平板法，采用盆栽
法，即病原---寄主植物组合法。
2．盆栽方法
在温室内进行的，具体方法随各种不同病害
而异，例：小麦赤霉病采用分生孢子 --- 幼苗
抑制百分率=50%，机率值=5
将 5 代入回归方程，然后求其反对数，即
LD-P-Line（剂量对数---机率值直线）。
ED50 可以作为多种药剂对同一病菌等效剂 量的毒力比较，在一定的范围内可以用它来 衡量一种药剂对病原菌毒力的大小，但不能 做为田间防治的实际指标。
三、田间试验
室内筛选的药剂必须进行田间试验，通
（3）生长速率测定法
即在琼脂培养基中加入药液，冷凝后接
菌的方法，用木塞钻孔器切取正常培养基上
杀菌剂的毒力测定方法
生长速率测定法注意事项：
1）带毒培养基的制作
应先加药液再加培养基（1：9）； 对一些受热易分解的药剂则要待培养基 冷却到50度左右时再加入。
2）接种病原菌
如果是菌丝接种，打孔制作菌饼时 取材要从种菌皿的外缘开始，避免使用 中心区的菌丝。
如果是孢子液接种，用接种针蘸取 孢子液后，在带药培养基上划一直线。
6 扩散法
原理：在已接种的培养基上加少量的 抗菌物质，使其接触培养基和病原菌，经 一定时间培养后，接触部分的周围由于抗 菌物质的扩散，而产生抑菌圈（或抑菌 带），其大小与药剂浓度有关系，以此来 比较杀菌剂的毒力大小。
此法主要用于抗生素的效价测定。
农用抗生素的效价
效价是衡量抗生素有效成份和质量好坏的 一个指标。
药剂抗菌力也即药剂毒力。
5 气体效力测定
原理：有些杀菌剂具有挥发性，且有杀 菌特性，在测定这类杀菌剂毒力时，可将麦 芽汁-琼脂培养基置于皿底内，冷凝后接种病 原菌孢子，然后盖上皿盖并倒过来使底成 “盖”，使盖成“底”，并将杀剂菌剂置于 “底”内，放到适于病菌孢子发芽生长的环 境中培养一定时间后观察。
如：嘧啶胺类化合物在室内，以 100ug/ml对灰霉病菌孢子没有抑制作用； 300ug/ml对菌丝生长也不能抑制； 1ug/ml的浓度在田间使用时，却能很好 的防治灰霉病。
药剂与病菌的作用关系
传统的：以其“毒力”抑制或杀死病菌。一 般是一致的。
病菌
药剂
环境
新类型的杀菌剂：
影响病菌的致病过程； 影响寄主的抗病性；
即在各处理组的调查孢子总数中增加调查 孢子数量，增加的数量根据对照组孢子萌发 率换算出来。
如：CK孢子萌发率达98%时，在调查处理 组时，拟定调查数量为100时，此时就要调查 102个，并对其不萌发孢子数减去2，然后计 算孢子萌发率。
七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定
七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定方案，为番茄早疫病的防治提供科学依据，制定出切实可行的防治措施。
1 材料与方法1.1材料1.1.1供试菌株番茄早疫病病原菌株采集于豫北地区番茄种植大棚中的病果，经组织分离、纯化获得病原菌［10］。
1.1.2试验药剂50%异菌脲（病可丹）可湿性粉剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%氯溴异氰尿酸（比秀）可湿性粉剂为以色列海法作用保护有限公司生产，80%丙森锌（好锌泰）水分散粒剂为陕西美邦农药有限公司生产，10%苯醚甲环唑（病可丹）水分散粒剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%醚菌酯（信赖）可湿性粉剂为陕西美邦农药有限公司生产，32.8%烷基腈氧基醌（凯银）水分散粒剂、35%腐霉利悬浮剂为宜宾川安高科农药有限责任公司生产。
1.2方法1.2.1杀菌剂单剂毒力测定将7种杀菌剂单剂与PDA培养基充分混匀，配制成0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00mg/L系列浓度的平板。
采用菌丝生长速率法测定，用5mm打孔器在培养6d后的番茄早疫病菌平板上打孔，用镊子取菌丝面向下接种在含药PDA培养基上，每皿1个菌碟，28℃倒置培养，以去离子水作为对照组，每个处理设3次重复，于接种后第3天检查菌丝生长情况并用十字交叉法测量菌落生长直径，通过菌丝生长抑制率值和各药剂浓度对数值间的线性回归性进行分析，求出各菌株EC50并计算相对抑菌率。
抑菌率计算方法为每个菌落使用十字交叉法测量2次，取其平均数作为菌落的大小。
计算7种杀菌剂对菌丝生长的抑制百分率，公式如下：菌落增长直径=菌落测量直径-菌盘直径抑菌率=（对照菌落增长直径-含药培养基上菌落增长直径）/对照增长菌落直径x100%[11]以浓度对数为横坐标（x）,相对抑制率几率值为纵坐标（丫），求出各药剂对供试菌株的毒力回归曲线方程y=a+bx、相关系数r与有效抑制浓度（EC50）。
根据EC50分析比较不同杀菌剂对供试病菌菌丝生长的影响[12]。
5种杀菌剂对桃炭疽病菌的毒力测定
中国园艺文摘 2018年第3期5种杀菌剂对桃炭疽病菌的毒力测定胡晓颖，赵 杰（上海市浦东新区农业技术推广中心，上海 201201）摘 要：以桃炭疽病菌为试验菌，采用生长速率法，测定5种杀菌剂对病菌的毒力，结果表明：咪鲜胺锰盐、氟啶胺、多菌灵、苯醚甲环唑和吡唑醚菌酯5种杀菌剂都具有较高的毒力。
咪鲜胺锰盐与氟啶胺的联合毒力测定结果表明：咪鲜胺锰盐和氟啶胺按3∶1和6∶1复配表现为增效作用，咪鲜胺锰盐和氟啶胺按1∶6、1∶3和1∶1复配表现为相加作用。
关键词：杀菌剂；桃炭疽病菌；毒力测定水蜜桃是我国的主要果品之一，也是上海市浦东新区的主要果树，常年种植面积0.2…万余hm2。
桃炭疽病是水蜜桃的主要病害，能侵染桃树枝梢、叶片和果实[1]，在上海市浦东新区以秋季叶片受害最重，造成叶片穿孔或枯焦，严重时导致大量叶片枯死和早落，影响花芽和结果枝充实，从而影响翌年结果产量。
科技工作者在桃树炭疽病菌生物学特性和防治方面开展大量工作[2-5]，但不同地区和寄主存在差异。
本文以当地桃炭疽病菌为试验材料，通过开展杀菌剂的毒力测定，筛选出高效低毒药剂，为防治该病害提供技术参考。
1 材料与方法1.1 供试病菌从浦东新区盛果期桃树病叶上分离获得桃炭疽病菌[Colletotrichum gloeosporioides…(Penz.)…Sacc.]，病菌于PDA培养基上25℃培养5…d后用于毒力测定。
1.2 供试药剂50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂(江苏辉丰农化股份有限公司)、50…g/L氟啶胺悬浮剂(浙江石原金牛农药有限公司)、50%多菌灵悬浮剂（江苏龙灯化学有限公司）、30%吡唑醚菌酯悬浮剂(深圳诺普信农化股份有限公司)、10%苯醚甲环唑水分散粒剂(江苏丰登农药有限公司)。
1.3 试验方法1.3.1 毒力测定方法…采用生长速率法[6]：将以上第一作者简介：胡晓颖(1979-)，女，农艺师；从事作物栽培研究。
通讯作者：赵 杰，硕士，高级农艺师。
杀菌剂联合毒力测定
.
示例：联合毒力的计算
同一组试验数据，大家采用上述两种不同 的联合毒力测定方法，结果有差异吗？
算一算！！
•.
示例：杀菌剂及其混剂对西洋参种 苗上寄藏真菌的联合毒力测定
材料与方法 供试药剂
95%福美双、95%恶霉灵、 97%多菌灵、 97%咪鲜胺、95%甲基立枯磷原粉 SCF 1#、SCF4#、SCF5#（西洋参专用） SCF1#（3%甲霜灵、6%甲基立枯磷、6%代森锰锌混配制成） SCF4#（2%咪鲜胺、9%多菌灵、7%福美双混配制成） SCF5#（3%恶霉灵、2%甲霜灵、10%福美双混配制成）
.
混合协同增效作用
根据杀菌剂混合后的生物活性，可表现为： 加和作用；颉抗作用；协同增效作用 两种药剂各混配中力争增效，避免颉抗；同时能够 要求可延缓抗药性发展和扩大防治谱， 甲霜灵＋代森锰锌（加和） 噁唑烷酮＋代森锰锌（增效）＋霜脲氰（增效） EC50，并经过温室和田间试验验证。
.
Wadley 方法
•.
示例：SCF1#对4种供试菌株的毒力测定
•.
SCF5#对4种供试菌株的毒力测定
•.
抑制几率值
福美双对4号菌毒力曲线
y = 1.3151x + 4.3449 R2 = 0.9694
6.0000
5.0000
4.0000
3.0000
2.0000 -1.000 0.000 1.000 浓度对数
2.000
•.
返回
试验方法（采用孙云沛的共毒系数计算方法）
理论毒力指数A=Σ（某药剂的毒力指数×在种衣 剂中该药剂有效成分的百分率）
杀菌剂生物测定
管碟法
E26细菌素粗提物抑菌活性测定 E26细菌素粗提物抑菌活性测定
2.滤纸片法
操作步骤是：与管碟法不同处在于将药液定 操作步骤是：与管碟法不同处在于将药液定 量地滴加在小滤纸片上(直径1 量地滴加在小滤纸片上(直径1一8mm) 。晾 干，放于带菌的培养基上,,测定抑菌圈直径。 干，放于带菌的培养基上,,测定抑菌圈直径。 特 点：精确度较高,用药量少,操作较简便, 点：精确度较高,用药量少,操作较简便, 应用面广
二、毒力测定方法（离体实验）
菌体生长率测定方法及步骤（续） 菌体生长率测定方法及步骤（续）
②打菌饼：用直径0.4-0.5厘米打孔器在培养好 打菌饼：用直径0.4-0.5厘米打孔器在培养好 的菌落外缘切下菌饼。 ③移植菌饼：用消毒接种针或镊子将切好的菌饼 反转移植到含药的培基上, 反转移植到含药的培基上,置于菌的适宜生长条 件下培养 ④测量 测量菌饼扩展的直径,与不混药对照菌盘 测量菌饼扩展的直径, 扩展的直径相比, 扩展的直径相比,求出药剂的抑制生长率。结果 表示方法有：一是一定时间内菌落直径的大小； 二是菌落达到一定直径所需时间。常用前者表示。
• 优点：易于控制、操作简便迅速、精确度
较高。 • 缺点：测定结果与生产实际距离较大，而 有些化合物必须在寄主植物体内活化后才 起杀菌作用
二、毒力测定方法（离体实验）
•孢子萌发法(spore germination methods) 孢子萌发法(spore
通过药剂与病菌孢子接触后, 通过药剂与病菌孢子接触后,根所抑制病菌 孢子萌发率来判定药剂效力。此法可用於筛 选杀菌剂、药剂毒力及作用方式的测定。
生 长 速 率 测 定 法
生 长 7
生 长 3
HX HX HX HX 2
5种杀菌剂对苹果斑点落叶病菌室内毒力测定
2结果与分析
2.1梨果晶质 与农户常规相比，土壤改良水肥管理 方式下梨果商品性状均表现较好，果实均匀，单果质
量大，果面干净，色泽鲜艳，香味浓郁，口感甜美。通
过调查发现，土壤改良施肥管理方式对梨果"木栓症”
有显著的防治效果，梨果“木栓症”发生率明显低于农
户常规管理。
2.2梨果产量 釆用5点法进行田间测产，检测单果
17 -
河北果树 HEBEI FRUITS 2021(3) 溉方式交替灌水。
上一年结合树形修剪，去除田间杂草。第2年果 园内自然生长本地野生杂草，去除木质化程度高、串 根性、缠绕性的杂草，梨果生育期内刈割3次,留茬高 度在15 cm左右。
综上所述,全年施入的化肥折纯后667 irf施纯氮 (224 kg、纯磷(P2O,) 13 kg、纯钾(KzO)21 kg,总养分 58 kg/667 m20全年生育期灌水5次，每次每667 n? 灌水40 m3o
表2 5种药剂对苹果斑点落叶病病菌菌丝生长影响
药剂名称 45%R森镀 3%苦参碱 10%苯離甲环
3%多抗霉素 80%ft森猛锌 空白对照(CK)
质量浓度/(mg/L) 1000 500 250 125 67.5 1000 500 250 125 67.5 1000 500 250 125 67.5 1000 500 250 125 67.5 1000 500 250 125 67.5 -
-
试验研究
2.2不同药剂对苹果斑点落叶病菌丝的室内毒力测 定药剂EC,。的数值是衡量药剂抑制病原菌强度大 小的重要指标吧EC,。的数值越小也就表示药剂的毒 力越强。室内毒力测定得出5种药剂对苹果斑点落 叶病原菌抑制的EC,。数值如表3所示,每种药剂对苹 果斑点落叶病菌都有明显的抑制效果，其中10%苯離 甲环哇的抑制作用最好,EC,。为197.02；其次为3%多 抗霉素，EC,。为204.479；抑制效果最差的杀菌剂是 45%代森钱,EC,。为650.670» 5种杀菌剂的相关系数 在0.907 4-0.993 5,说明杀菌剂对菌丝生长量的抑制 作用与药剂的浓度呈正相关。
9种杀菌剂对樟子松枯梢病的室内毒力测定
9种杀菌剂对樟子松枯梢病的室内毒力测定摘要：利用菌丝生长速率法和孢子萌发抑制法，测定了9种杀菌剂对松球壳孢菌的毒力，筛选出有效控制松枯梢病的高效杀菌剂。
主要结果：抑制菌丝生长试验，25%苯醚甲环唑效果最好，对病原菌抑制的ec50值为0.0797mg·l-1，32.5%苯甲+醚菌酯次之；在抑制孢子萌发方面，32.5%苯甲+醚菌酯效果最好，对分生孢子萌发抑制的ec50值为0.0481mg·l-1，25%苯醚甲环唑次之。
综合分析，32.5%苯甲+醚菌酯和25%苯醚甲环唑不但可以抑菌菌丝生长，还可以有效抑制孢子萌发，同传统杀菌剂多菌灵、代森锰锌比较，苯醚甲环唑和醚菌酯等新型杀菌剂更具优势，可以作为防治樟子松枯稍病的备选药剂。
关键词：樟子松枯梢病；无公害杀菌剂；毒力测定中图分类号：s482.2 文献标识码：a 文章编号：1674-0432（2012）-12-0038-2樟子松（pinus sylvestris var mongolica）因具有耐干旱、耐瘠薄、抗寒、速生等生物学特性，而且材质优良，用途广泛，成为用材林、防护林以及绿化的优良树种。
樟子松现已成为三北防护林工程和治沙工程建设的主要造林树种之一[1]。
樟子松枯梢病是由由松球壳孢菌（sphaeropsis sapinea（fr）dyko et sutton）引起的樟子松人工林主要病害[2-5]，在北方地区包括黑龙江、吉林、辽宁以及内蒙古均有发生，随着樟子松人工林面积的逐年扩大，樟子松枯梢病害日趋严重，造成了巨大的经济损失。
对樟子松枯梢病的有效持续控制是当前研究的重点，目前樟子松枯梢病主要以化学防治结合营林措施为主[6-7]，经过多年的研究，形成了有效的防控方法和技术，但是也存在一定的问题，农药品种老旧，病原产生抗药性，以及防治过程中造成的环境污染等一系列问题亟待解决。
本文的主要工作是对高效无公害农药品种进行筛选，以期筛选得到好的农药品种，为樟子松枯梢病的防治提供理论基础。
杀菌剂毒力测定
17
一、杀菌剂毒力测定方法
孢子萌发条件 B、湿度：真菌孢子一般要求在水滴 中才能萌发，但也有少数真菌孢子， 如白粉病菌的分生孢子，在相对湿度 很低的情况下也能萌发。
1.4
18
一、杀菌剂毒力测定方法
孢子萌发条件 C：光照：光照对多数真菌孢子萌发 的影响不大，但对某些真菌孢子有刺 激或抑制作用，如光照可刺激水稻黑 粉病菌厚垣孢子的萌发，抑制小麦秆 锈病菌夏孢子的萌发。
2.
26
Determining fungicide inhibition of pathogen spore germination on concave slides
药剂的配制 水溶性药剂直接用水溶解，其它药剂 选用合适的有机溶剂（甲醇、丙酮、 二甲基亚砜等）溶解，再用0.1%的吐 温80水溶液稀释，设置5~7个浓度， 有机溶剂最终含量不超过2%
4.
28
Determining fungicide inhibition of pathogen spore germination on concave slides
调查 当空白对照孢子萌发率达到90%以上 时，每重复了随机观察3个以上视野， 调查孢子总数不少于200个，分别记 录萌发数和孢子总数。
4
一、杀菌剂毒力测定方法
1、孢子萌发法
(spore germination method) 快速。广泛用于保护剂的测 定 此法适用于抑制病菌能量合 成系统，而使孢子不能萌发 的杀菌剂。
5
一、杀菌剂毒力测定方法
玻璃器皿的处理 清洁：以洗液浸泡数十分钟,用自来水 冲洗, 用蒸馏水清洗,防尘干燥. 载玻片保存于70%的酒精溶液内.
多菌灵对镰刀菌及由镰刀菌引起的赤
08杀菌剂的毒力测定和田间药效试验
少氧而受影响。
（2）抑菌圈法
广泛地应用于真菌细菌的杀菌剂筛选，基本原理
是将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与琼脂培养基混匀
冷凝后，在培养基平面放上消毒的并蘸有不同浓度 药剂的圆形滤纸片（直径6mm）左右，或放特制的直 径8mm高10mm的不锈钢环，将配好的药液定量加 在 钢环内，经定温培养一定时间后，由于药剂的扩 散 作用，使病菌生长受到抑制，即形成“抑菌圈”。 测量抑菌圈的大小，以比较杀菌剂的毒力。
组合法，根据杀菌剂物不同作用机理，有测定 以下作用的方法。 （1）保护作用；（2）治疗作用； （3）内吸作用。
（1）保护作用：
一般经定量喷雾法处理供试植物，喷药后间隔 一定的时间再接种（方法很多，如多针接种，剪叶
法或将菌丝块贴在叶片上等），保持发病所需的温、
湿度条件，发病后再按病情分级标准进行统计，以 病叶率，病情指数增长等指标判断药效。
一，活性效应显现较快，缺点是有时与活体测
定结果不一致，有时会漏筛或误筛，如用粉锈
宁处理大麦白粉病菌，离体测定不仅分生孢子
能萌发且能形成吸器，但此药在活体上却表现
高效。所以初筛手段不采用平板法，采用盆栽
法，即病原---寄主植物组合法。
2．盆栽方法
在温室内进行的，具体方法随各种不同病害
而异，例：小麦赤霉病采用分生孢子---幼苗
过试验确定其药效的好坏，经济效益的高低，
也就是说，田间试验是确定一种药剂在生产 上有无实用价值的主要方法。 田间实验的具体方法可参考《农药药效 试验的设计与分析》一书，防治效果可用以 下公式计算。
（2）治疗作用：
测定方法是先在植株上接菌，保温，保 湿一定时间，待病菌菌丝侵入或始见发病， 再进行喷药处理，其他调查统计方法同上。
4.3-杀菌剂毒力测定
第一单元：农药生物测定与田间药效试验1.杀菌剂生物测定（Bioassay of fungicides）利用病原菌或感菌生物体对杀菌剂的反应，来确定杀菌剂效力（毒力，药效）的农药生物测定。
2.杀菌剂的毒力测定方法（1）基于离体平板培养的毒力测定方法（2）活体测定法（3）组织筛选测定法（1）基于离体平板培养的毒力测定方法①孢子萌发测定法原理：在载玻片或平板上，通过滴加、喷施等方法将药液施于其上，然后滴加一定浓度的孢子悬浮液，经过一定时间培育后在显微镜下观察孢子的萌发率。
一般在低倍镜下，每处理随机检查200个孢子。
毒力越大的药剂，孢子萌发抑制率也越大。
%100⨯=检查孢子数萌发孢子数孢子萌发率%100-⨯=对照萌发率处理萌发率对照萌发率孢子萌发抑制率（1）基于离体平板培养的毒力测定方法②抑菌圈法此法先将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与培养基混匀，待混合物冷却后，在培养基表面利用各种方法（管碟法、滤纸片法、孔碟法）使药液和培养基接触，培养一定时间后，由于药剂的渗透扩散作用，施药部位周围的病原菌被杀死或生长受到抑制，从而产生抑菌圈。
毒力越大的药剂，抑菌圈也越大。
该方法所用药剂需有较好的水溶性。
（1）基于离体平板培养的毒力测定方法③生长速率测定法此法的原理是趁热在培养基中加入药液，混合均匀后冷却，然后在无菌条件下将病原菌接入装有培养基的培养皿中央，经过一定时间培育后观察病原菌菌丝的生长情况。
毒力越大的药剂，菌丝的生长越缓慢。
此法多用于不产孢子或产孢子量少而菌丝较密的真菌。
病原菌生长速率的表示方法有2种：①菌落达到一定大小所需的时间；②单位时间内菌落的直径大小。
该方法的优点是操作简便，适用范围广，重复性好。
但对病原菌要求严格，病菌易于培养，生长较快且边缘整齐，产孢子缓慢；供试药剂遇热不易分解。
（1）基于离体平板培养的毒力测定方法④对峙培养法将天然提取物及病原菌同时放在同一个有培养基的培养皿的两边，经过一定时间培育后观察菌丝生长的情况。
核盘菌室内杀菌剂毒力测定
基板 。
１ ． ３ ． ２ 测 定方 法及毒 力 回归方程 建 立
将培养好 的菌落取直径为 ６ ｍ ｍ的菌丝块 ， 放人含药培养基平板中央 ， 每皿 １ 块， 每处理重复 ４ 次 。接种 后在 ２ ５ ￣ Ｃ 左右的恒温箱中培养 ７ ２ ｈ 后， 每隔 ２ ４ ｈ用十字交叉法测量一次菌落直径 ， 与不加药 的对照菌落相 比较计算药剂 的抑制生长率 。将筛选出的抑菌效果好的几种药剂利用上述方法制成一定浓度梯度的含药培 养基 ， 测量菌落直径， 以相应杀菌剂浓度对数值为 ｘ值 ， 抑制率的几率值作为 ｙ值 ， 并用最小二乘法得出毒
丝生长有好 的抑制作用 ， Ｅ Ｃ ５ ｏ 分别为 ２ ６ ． ７ ８ ９ 、 ４ １ ． ７ ４ ０ ｍｇ ／ Ｌ ， 世 高对病菌也有较好 的抑制 效果 ， 这３ 种 杀菌剂在 生产
中可用 于核盘茵引起 的茵核病 防治 。 关键词 ： 核盘 茵； 杀菌剂 ； 毒力
核盘菌［ Ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｔ ｉ ｎ ｉ ａ ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｔ ｉ ｏ ｒ ｕ ｍ（ Ｌ ｉ ｂ ． ） ｄ ｅ Ｂ ａ ｒ ｙ ］ 寄主范围广泛 ， 在生产 中侵染大豆、 向 日葵 、 油菜 、 白 菜、 芸豆 、 烟草等许多作物引起菌核病 ， 尤其对大豆、 向日 葵、 油菜等造成严重的经济损失 。在我国， 菌核病造 成 向 日葵 产量损 失 可 达 ３ ０ 左右（ 向 日葵 主产 区 ） ， 油 菜产 量 常年 损失 Ｉ ｏ ￣ ２ ｏ ％， 重病 年 可达 ５ ０ ％， 严 重
５ ２ ． ３ ， 与其 它 ３种药 剂差 异显 著 。因此 ， 选抑 制率
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黑星病菌等.在培养基上培养,或将病 组织保湿培养,待产生孢子后备用。
25
Determining fungicide inhibition of pathogen spore germination on concave slides
的影响不大，但对某些真菌孢子有刺 激或抑制作用，如光照可刺激水稻黑 粉病菌厚垣孢子的萌发，抑制小麦秆 锈病菌夏孢子的萌发。
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一、杀菌剂毒力测定方法
1.4 孢子萌发条件 D：空气：孢子萌发多需要空气，所
以水滴表面的孢子比沉在水滴中的萌 发好。但玉米黑粉病菌孢子萌发需要 15%的CO2。
20
一、杀菌剂毒力测定方法
可），形成均匀的药膜，再滴加孢子 液。 许多有机溶剂（丙酮、乙醚）表面张 力小，不易形成均匀的药膜，因此， 应采用凹玻片。防尘条件下干燥。
8
一、杀菌剂毒力测定方法 C、装置喷雾 利用精确喷雾装置将药液喷于载玻片
上，干燥后滴加孢子悬浮液。
9
一、杀菌剂毒力测定方法 1.3孢子悬浮液的配制 孢子萌发法常用菌种 马铃薯晚疫病，水稻稻瘟病，小麦赤
6
一、杀菌剂毒力测定方法
1.2 液剂的附着 A、混合滴加 将供试药剂与孢子悬浮液混合滴加于
载玻片上。对水溶性药和稳定的悬浮 剂可得到正确的结果。对于非水溶性 药剂，因沉降快而不易获得正确结果。 简单迅速，适于大规模初筛。测得结 果一般偏高。
7
一、杀菌剂毒力测定方法
B、定量滴加药膜法 定量滴加药液（用水或有机溶剂均
霉病，甘薯黑疤病，水稻胡麻叶斑病， 玉米大斑病。
10
一、杀菌剂毒力测定方法
1.3孢子悬浮液的配制 真菌在一定条件下才产生孢子，一般
来说，生殖生长的条件比较严格。 A、改变培养基成分：先在高浓度养
分的培养基上培养，再移到营养成分 较低的培养基中，可促进孢子的产生。
11
一、杀菌剂毒力测定方法 1.3孢子悬浮液的配制 B、选用不同培养基： 植物质培养基或利用植物的组织或它
玉米小斑病菌孢子，适当加入一点玉 米苗的新鲜汁液，在26℃下2h，孢子 萌发率高，整齐。
22
一、杀菌剂毒力测定方法
1.5 调查方法 一般病菌培养20~24小时即可镜检。
一般在100~200倍下镜检，每处理随 机检查200个孢子。 孢子萌发标准：芽管大于孢子短半径 即算萌发。 或以孢子囊产生游动孢子为萌发标准， 如马铃薯晚疫病菌。
温度不同。适于低温的孢子，如小麦 黑穗病菌的厚垣孢子，温度超过 21~22℃ 就不能萌发。
17
一、杀菌剂毒力测定方法 1.4 孢子萌发条件 B、湿度：真菌孢子一般要求在水滴
中才能萌发，但也有少数真菌孢子， 如白粉病菌的分生孢子，在相对湿度 很低的情况下也能萌发。
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一、杀菌剂毒力测定方法
1.4 孢子萌发条件 C：光照：光照对多数真菌孢子萌发
1.4 孢子萌发条件 D：养分：有的不需外源养分，有的
则必须由外界提供养分。 植物组织煎汁常常是促进孢子萌发的
物质，其刺激作用是因为含有生长素 或挥发性物质。但有研究表明，萌发 促进物质可增加孢子对药剂的抵抗力。
21
一、杀菌剂毒力测定方法
有些病菌在蒸馏水中萌发不好，可加 入某些促进物质。许多病菌孢子，按 10毫升孢子液加入0.1%葡萄糖溶液 0.01毫升，可使孢子萌发整齐。
一般规定孢子的浓度最好是5万/ml。 15 10*10观察时，每个视野约有35个。
一、杀菌剂毒力测定方法 孢子浓度可用计数器测定 纽鲍尔（Neubauer）血球计数器。 边长为0.05mm的小方格，深度为
0.1mm
16
一、杀菌剂毒力测定方法
1.4 孢子萌发条件 A、温度：各种真菌孢子萌发的最适
4
一、杀菌剂毒力测定方法
1、孢子萌发法 (spore germination method)
快速。广泛用于保护剂的测 定
此法适用于抑制病菌能量合 成系统，而使孢子不能萌发 的杀菌剂。
5
一、杀菌剂毒力测定方法 1.1 玻璃器皿的处理 清洁：以洗液浸泡数十分钟,用自来水
冲洗, 用蒸馏水清洗,防尘干燥. 载玻片保存于70%的酒精溶液内.
3
第三章 杀菌剂毒力测定
三环唑（黑色素合成抑制剂）在室内测是 无效的。
嘧啶胺类杀菌剂（嘧菌胺）室内对灰霉病 孢子萌发没有抑制作用（300μL/ ml）， 但在植物上(1μL/ ml)，对灰霉病防效较好 。(该类药剂能抑制病菌甲硫氨酸的生物合 成和细胞壁降解酶的分泌，从而影响病菌 侵入寄主植物．)
杀菌剂毒力测 定
第三章 杀菌剂毒力测定 室内测定与田间试验有一定的差异 杀菌剂田间药效试验受寄主(作物)、
环境、以及发病阶段的影响较大。
2
第三章 杀菌剂毒力测定
多菌灵对镰刀菌及由镰刀菌引起的赤 霉病、恶苗病的室内毒力测定和田间 药效比较一致。
但多菌灵在室内测定对由镰刀菌引起 的棉花枯萎病效果较好，而田间多菌 灵对棉花枯萎病效果较差。
23
一、杀菌剂毒力测定方法 1.5 调查方法 对照萌发率至少大于80%，低于80%
应重பைடு நூலகம்。
抑制萌 对 发 照 对 率 萌 照 处发 萌 理率 发 萌 10 率 % 发 0
24
Determining fungicide inhibition of pathogen spore germination on concave slides
孢子的产生。一般半知菌在有光照的 条件下易产生孢子。但有的病菌在无 光下易产生孢子。
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一、杀菌剂毒力测定方法
1.3孢子悬浮液的配制
配制：一般将已培养好的菌种（斜面 或三角瓶培养）加入无菌水，用接种 环在表面轻轻摩擦，使孢子悬浮于水 中，然后用双层纱布过滤，除去菌丝 体和培养基碎块。最好在1000r/min 的离心机上用无菌水洗涤三次。
们的煎汁往往可促进真菌产生孢子。
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一、杀菌剂毒力测定方法 1.3孢子悬浮液的配制 C、培养基的理化性状 增加培养基的酸度，可促进某些真菌
产生孢子。固体培养基上比液体培养 基上容易产生孢子。
13
一、杀菌剂毒力测定方法
1.3孢子悬浮液的配制 D、病菌培养条件 高温、低温或高低温交替有时可促进