【CN109880786A】一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910196065.0

(22)申请日 2019.03.15

(71)申请人 河南科技大学

地址 471000 河南省洛阳市涧西区西苑路

48号

(72)发明人 吴影　田晶晶　古绍彬　孙建瑞　

李长福　周艳林　周子吕　

(74)专利代理机构 洛阳公信知识产权事务所

(普通合伙) 41120

代理人 时亚娟

(51)Int.Cl.

C12N 1/38(2006.01)

C12N 1/20(2006.01)

C12R 1/07(2006.01)

(54)发明名称

一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法

(57)摘要

本发明涉及一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形

成的方法，属于生物发酵技术领域，所述方法是

在凝结芽孢杆菌发酵培养的对数生长初期向培

养基中依次间隔流加葡萄糖溶液和碳酸钙，促进

芽孢的形成。与现有技术相比，所述方法碳源的

补充能够促进活菌数的增加，提高菌体密度，加

快芽孢的形成，而碳酸钙的添加能够有效地缩短

芽孢形成时间，提高芽孢数量的同时增加了芽孢

的耐受性。权利要求书1页 说明书6页CN 109880786 A 2019.06.14

C N 109880786

A

1.一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于：在凝结芽孢杆菌发酵培养的对数生长初期向培养基中依次间隔流加碳源和碳酸钙。

2.如权利要求1所述的一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于：所述碳源为葡萄糖。

3.如权利要求2所述的一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：将凝结芽孢杆菌原始菌种按照体积比为1:15

~25的接种量接种于一级培养基

中进行活化培养，培养条件为：摇床转速200～220rpm、温度35～38℃、时间20～22h，培养结束得一级菌种；所述一级培养基按质量百分比，由以下组分组成：葡萄糖 1.6～1.8%、蛋白胨 1.0～1.4%、酵母粉 0.6～1.0%、硫酸镁 0.4～0.6%，余量为水；pH 7.8～8.2；

步骤二、将步骤一所得一级菌种按照体积比为1:30的接种量接种于二级培养基中进行发酵培养，培养条件为：摇床转速200～240rpm、温度35～38℃，时间为40-50h；当培养至第8～10h时一次性补入葡萄糖溶液，所述葡萄糖溶液的补入量为二级培养基总体积的1.2～1.6%，所述葡萄糖溶液的浓度为1.0g/mL；继续培养发酵至第14～18h时一次性补入终浓度为40～80g/L的碳酸钙固体；

所述二级培养基按质量百分比，由以下组分组成：葡萄糖 1.2～1.6%、蛋白胨 1.2～1.6%、酵母粉 0.8～1.2%、硫酸镁 0.4～0.6%，余量为水；pH 7.8～8.2。

4.如权利要求3所述的一种促进凝结芽孢杆菌芽孢形成的方法，其特征在于：将经步骤一活化的一级菌种接种于二级培养基中经至少一次扩大培养后再进行步骤二所述发酵培养；所述扩大培养的培养条件为：接种量体积比为1:30、摇床转速200～240rpm、温度35～38℃、时间16～20h。

权　利　要　求　书1/1页

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CN 109880786 A